BIOLOGÍA MOLECULAR Y CELULAR DE LA CAPACITACIÓN Y REACCIÓN ACROSÓMICA EN EL ESPERMATOZOIDE

REFLEXIONES FINALES 2 .ÍNDICE INTRODUCCIÓN - DESARROLLO o Capacitación o Capacitación “in vitro” o Reacción acrosómica o Los inductores de la reacción acrosómica    Ionóforos Zona pelúcida Unión de la zona pelúcida: unión primaria y unión secundaria        Penetración de la zona pelúcida y fusión de membranas Reacción cortical Líquido folicular. ovidutal y células del cúmulo oóforo Paso del espermatozoide a través del cúmulus Progesterona Moduladores metabólicos Efecto de la disminución térmica o Técnicas de detección de la reacción acrosómica - MIRAS A LA INVESTIGACIÓN.

La gametogenia prepara dichas células para la fecundación. que se reducen a la mitad por meiosis. hablamos de reproducción sexual o sexuada. propiciado principalmente por las contracciones musculares de las paredes de la 3 . El trasporte de los espermatozoides. o Transporte en el aparato reproductor femenino. por otro lado. donde se producirá la fecundación. Trasporte de gametos. El ovocito secundario lo hará a través de la ovulación. tenemos un periodo de vida limitado. en nuestra especie. al igual que todos los seres vivos.- BIBLIOGRAFÍA BIOLOGÍA MOLECULAR Y CELULAR DE LA CAPACITACIÓN Y LA REACCIÓN ACROSÓMICA EN EL ESPERMATOZOIDE INTRODUCCIÓN Los seres humanos. Los gametos deberán encontrarse en la ampolla de la trompa uterina. en la que el semen llega a la parte prostática de la uretra. se puede dividir en tres fases: o Emisión. o Eyaculación. Ese mecanismo es la reproducción. y el cambio morfológico de la célula. definida por la producción de descendencia mediante la fusión de una célula sexual femenina (oocito) y una célula sexual masculina (espermatozoide). seguida de la acción de barrido de las fimbrias y el peristaltismo de la pared de la trompa. En varones se denomina espermatogenia. por lo que debe de haber un mecanismo capaz de asegurar la perpetuación de la especie. Más concretamente. y en mujeres ovogenia. pasando por la reducción del número de cromosomas. que nos permita la creación de nuevas generaciones. proceso de formación y desarrollo de gametos (células germinativas especializadas). Para que esta fusión se pueda llevar a término es necesario que se den correctamente una serie de pasos: Gametogenia. en la que el semen es expulsado de la uretra y depositado en el cuello uterino.

Capacitación La capacitación comienza tras la eyaculación. 2005) y otros que aseguran las siete horas (Moore Persaud. Apuntar que solo un espermatozoide podrá entrar. Los espermatozoides recién eyaculados no reúnen las condiciones adecuadas para fecundar el ovocito. Es en esta fase en la que se da la capacitación del espermatozoide. El proceso de capacitación espermática es un proceso reversible que se debe a la habilidad de ciertas moléculas de disociarse y reasociarse con la membrana del 4 . siendo el resto inhibidos para tal efecto. cuando los espermatozoides entran en contacto con los elementos del tracto genital femenino. Podría hablarse de la maduración final del gameto masculino promovida por los elementos del tracto femenino. Engloba cuatro eventos principales: o Contacto y reconocimiento entre espermatozoide y ovocito. Es el momento concreto en el que se produce la fusión de las dos células sexuales. procederemos a explicarlas en profundidad. En cuanto a la duración del proceso. encontrándose los que defienden las dos horas (Finn Geneser. o Activación del metabolismo del ovocito para comenzar el desarrollo. Fertilización. 2004). la reacción acrosómica. DESARROLLO Una vez ubicados en su entorno la capacitación y la reacción acrosómica. En el proceso de fertilización es donde encontraríamos nuestra segunda materia de estudio. o Regulación de la entrada del espermatozoide al ovocito.vagina y útero. o Fusión del material genético de ambos gametos. vital para que entren en contacto espermatozoide y ovocito. no hay convenio entre los distintos autores. se han de someter a un periodo de acondicionamiento en el que van a sufrir una serie de cambios estructurales y fisiológicos que les habilitará para sufrir la reacción acrosómica.

acrosómica: la membrana que recubre la última porción de cabeza. siendo este compuesto 5 . siendo capaces de unir 2 o 3 más cantidad de colesterol que los aceptores presentes en el suero sanguíneo. Antes de sumergirnos en la serie de cambios que se dan a nivel de membrana espermática es conveniente señalar que los espermatozoides constan de una membrana continua que queda dividida en cabeza y cola. Nos encontramos en el líquido folicular una albúmina y HDL con cierto grado de especificad.espermatozoide. El descenso de colesterol en la membrana plasmática encuentra su razón en la presencia de proteínas captadoras de esteroles en el tracto femenino. Los agentes que estimulan su pérdida son los “factores capacitantes”. En este último se produce un aumento de la permeabilidad. Porción ecuatorial: donde las membranas acrosomal y plasmática se unen en la reacción acrosómica. Porción post. Se produce un aumento de la glucolisis y del consumo de O2. redistribución de proteínas dependientes de calmodulina así como de otras moléculas y cambios en la composición de lípidos de la membrana. y con él los factores decapacitantes. Diversos estudios han comprobado la relación existente entre la concentración de fosfolípidos y colesterol en la membrana con la concentración de albúmina en el medio. En cuanto a la membrana que recubre el flagelo. Están presentes en el plasma seminal actuando como vesículas donadoras de colesterol y por tanto inhibiendo la capacitación. Pieza terminal. Esta membrana está sometida a cambios tanto a su paso por el epidídimo. Durante el paso del semen a través del tracto femenino. La membrana de la porción cefálica a su vez consta de tres regiones: Porción acrosomal: parte de membrana que recubre el acrosoma. Entre los cambios a nivel fisiológico se encuentran los cambios en el metabolismo. Esta afinidad se acentúa en presencia de bicarbonato. distinguiremos dos dominios: Pieza intermedia. en el momento de la eyaculación y en el transcurso de la capacitación. Estas moléculas son conocidas bajo el término de “factores de decapacitación” o “factores decapacitantes”. produciéndose un descenso del colesterol con el consiguiente aumento de fosfolípidos. el plasma seminal se elimina.

A su vez. De hecho. La actividad de la enzima Na+. mientras que los que han permanecido previamente en el útero en condiciones capacitantes. A su vez. K+ . que los espermatozoides recién eyaculados son aglutinados por los anticuerpos. Las modificaciones en la composición y estructura de la membrana espermática inducen cambios en la permeabilidad de iones. la pérdida de los antígenos seminales de superficie ya que se ha observado. ya Loeb demostró en 1915 la necesidad del 6 . lo que hace que los espermatozoides presenten un gradiente negativo de colesterol hacia el exterior. no lo son. lo que propicia la transducción de señales y la futura interacción entre los dos gametos. que va a ser el principal estimulador de la capacitación. preparándose así para su fusión. tras producirse el desprendimiento de las mismas. Ha sido demostrada también. aumenta gradualmente la inestabilidad de la membrana. La capacitación también involucra la liberación de otras sustancias de superficie de la membrana del espermatozoide. K+ y Ca2+. Un componente activo en la desestabilización de la membrana es la fosfolipasa A2. que desestabiliza la membrana. En cuanto al Ca2+. La eliminación de las sustancias de la cubierta y la reorganización de elementos conduce a la activación de receptores específicos para ligandos sobre la zona pelúcida que antes estaban enmascarados. que ha sido descrita como uno de los mecanismos que dan comienzo a la capacitación y reación acrosómica ya que produce lisofosfatidilcolina. El incremento de la fluidez facilita el movimiento de proteínas y receptores. induciendo así la capacitación y un aumento de la fluidez de membrana. Las relaciones más importantes de iones en la capacitación se dan a nivel de Na+. marcando dichos antígenos con carbono.ATPasa disminuye durante la capacitación permitiendo el aumento de la concentración de Na+ intracelular. algunos investigadores afirman que la función de algunas de las sustancias que luego se desprenderán no es sino la de estabilizar la membrana hasta el momento que. el K+ extracelular permite la capacitación espermática de manera secuencial.esencial durante la capacitación. El desprendimiento de colesterol de la membrana se produce debido a la menor concentración de colesterol en las células del útero. En la capacitación. la migración de proteínas supone la formación de zonas precursoras de la fusión de la membrana plasmática con la membrana acrosomal externa. mediante inmunocitoquímica. Entre ellas se encuentra la pérdida gradual de la cubierta glucoproteica ubicada sobre la región cefálica que el espermatozoide recibió durante su paso por el epidídimo y del plasma espermático. empezará el proceso de reacción acrosómica.

En el ser humano. pero con una disminución del porcentaje de linealidad y velocidad lineal. y pH alcalino responsable de apartar las proteínas de la superficie de la membrana plasmática. activando los procesos de HA y RA. La utilización de Ca2+ ionóforo ó dibutiril AMP cíclico aceleran la capacitación y la aparición de la HA. Va precedido de las modificaciones ocurridas en la membrana y. el aumento de Ca2+ será necesario para que se dé la “hiperactivación”. y por lo tanto de los FD. incrementando el flujo de calcio hacia el interior de las células espermáticas y 7 . para reproducir con la mayor exactitud dicho proceso. pero no siempre que hay hipercinesis se da la capacitación ni la reacción acrosómica. Entre las distintas metodologías de capacitación “in vitro” mencionadas anteriormente se considera la técnica de “swim up” como el método más sencillo y barato. Es característico de este proceso un movimiento de gran curvatura y amplitud de flagelo. gradientes de percoll. así como de un aumento de la amplitud de desplazamiento lateral de la cabeza y velocidad curvilínea. La hiperactivación es un proceso fisiológico asociado a la ovulación ya que será necesario para que los espermatozoides atraviesen la zona pelúcida. Capacitación in vitro El estudio de la capacitación espermática de manera fisiológica en el tracto reproductor femenino (in vivo) es de gran dificultad. Esta técnica es la que denominamos capacitación “in vitro”. medios de cultivo y condiciones ambientales determinadas. El desarrollo de estas técnicas capaces de recuperar los espermatozoides móviles. filtración en columnas de Sephadex y el dextrano. Estas técnicas se basan en la inducción de la capacitación espermática debido a la eliminación del plasma seminal. Se puede decir que entre las técnicas de recuperación de espermatozoides móviles más utilizadas encontramos el “swim-up”.Ca2+ extracelular para aumentar la fertilidad en estrellas de mar. requiere de la presencia de Ca2+. nos permite seleccionar aquellas células espermáticas con mayor movilidad y capacidad fecundante para ser posteriormente aplicables en programas de inseminación intrauterina (IU) y FIV. Los medios de incubación utilizados en la inducción de la capacitación “in vitro” poseen una alta fuerza iónica con el objetivo de desplazar los FD. Un dato a resaltar es que siempre que hay capacitación se da la hiperactivación. por lo que se ha intentado extrapolar dicho proceso a un laboratorio mediante técnicas. como se ha puntualizado.

forma una envoltura acrosómica en cuyo interior existen una gran variedad de enzimas hidroliticas.produciendo una activación de las fosfolipasas. Las encimas liberadas del acrosoma durante la RA facilitan el paso del espermatozoide a través del cúmulo ooforo y zona pelúcida. procedente del aparato de Golgi. Durante la RA se produce la defenestración entre la membrana plasmática y acrosómica externa en la región apical y en el segmento principal del acrosoma por múltiples fusiones puntuales. La sincronía entre ambos eventos es imprescindible para que la fecundación tenga lugar. debido principalmente a la acción de la fosfolipasa A2. En el día de hoy. Debido a la posición del acrosoma en la cabeza espermática. siendo la liberación inicial de acrosina un estimulador de la RA el responsable de la fijación del espermatozoide al ovocito. desempeñan un papel esencial durante la RA. El acromosoma espermático. transcurriendo paralela por casi todo el territorio por el que se extiende. En los espermatozoides humanos es necesario que se produzca la RA. dando lugar a la penetración del ovocito. Así una RA prematura implica un descenso de la fertilidad debido a la adhesión de los espermatozoides que sufren la RA después de atravesar el cúmulo ooforo son capaces de unirse a la membrana pelúcida. De ello se encarga el test ARIC (Acrosomal Reaction Induction Challenger) que es utilizado actualmente con éxito como prueba diagnóstica de la capacidad fecundante de un eyaculado en semen humano. para que la fusión con la membrana pelúcida tega 8 . mientras que el segmento ecuatorial permanece intacto durante todo el proceso. Reacción acrosómica La reacción acrosómica (RA) es un proceso exocítico dependiente del calcio. la utilización de inductores de la reacción acrosómica junto con técnicas de capacitación “in vitro” nos permite obtener mayor información sobre posibles disfunciones de la capacidad fecundante del espermatozoide. Dichas encimas. como consecuencia de la capacitación. En la incubación de los espermatozoides con el fin de inducir “in vitro” se requiere durante la capacitación espermática condiciones ambientales definidas de humedad y dióxido de carbono. la membrana acrosómica se dobla.

siendo las concentraciones muy altas o bajas responsables de una mala respuesta acrosómica. en espermatozoides previamente capacitados. el influjo de calcio aumenta el pH. se dispara la fusión de la membrana plasmática con la membrana acrosomal externa. está implicado en reacciones de fosforilación de proteínas espermáticas. El acromosoma es un gránulo de gran tamaño que contiene enzimas en forma de zimógeno. Algunas células pueden sufrir la RA de manera espontánea. bajo su membrana plasmática. mientras que la fucosa.lugar. Se han encontrado concentraciones de K+ entre 20 y 30 mM en fluidos procedentes del tracto de la hembra. Esta elevación del AMPc precede a la RA. La presencia de iones K+ en el medio es necesaria para que la RA tenga lugar. produciéndose la pérdida del acrosoma. receptores de proteína G. dando lugar a un aumento en la concentración intracelular del AMPc. desempeñan un papel principal. La RA es inducida. y que se encuentra situado en la región apical de la cabeza del espermatozoide. fundamentalmente hialuronidasa. En los mamíferos. puede retardar la aparición de la reacción acrosómica. La ZP estimula el aumento en la actividad de la adenilato ciclasa del espermatozoide. proponiéndose una posible regulación “in vivo” de la RA en espermatozoides. lo que sugiere que el AMPc pueda estar involucrado en la ruta de señales que lleva a la exocitosis del contenido acrosomal. degradación de fosfoinositoles y formación de diacilglicerol (DAG) que actuaría como mensajero intracelular de la fusión entre la membrana acrosomal externa y la plasmática. Tras la interacción entre el receptor espermático y el estímulo procedente del ovocito. los espermatozoides deben experimentar la RA para atravesar la ZP del ovocito. por sustancias presentes en los fluidos próximos al ovocito tales como: líquido folecular cúmulo ooforo y células de la granulosa. y activación de segundos mensajeros junto con la proteína Kinasa C y la fosfolipasa. El AMPc. Como consecuencia de estos eventos se produce un incremento en la concentración de calcio intracelular. existiendo diversas experiencias que muestran la necesidad de moléculas especificas con el ovocito en la inducción de la RA. en las que se está investigando para desvelar su papel dentro de la funcionalidad espermática. Se ha comprobado que el cúmulo expandido y la ZP de los ovocitos humanos contienen algunos factores capaces de inducir la RA en los espermatozoides capacitados del macho. 9 . lactosa. La glucosa. L-glucosa y galactosa no ejercen esta acción sobre los espermatozoides.

y 2) ejercen una acción negativa sobre la movilidad y viabilidad espermáica. Dichas sustancias son utilizadas en pruebas diagnósticas de la capacidad fecundante de un eyaculado. Por lo tanto la concentración de ionóforo y el tiempo de exposición. El efecto. varía dependiendo de la especie y del medio utilizado. siendo la determinación de la RA en espermatozoides y el test de hámster las pruebas más correlacionadas con el FIV. ZP2 y ZP3. ionóforo A23187 y heparina. La reacción acrosómica inducida (fisiológica) y no la espontánea.La peroxidación lipídica y los radicales libres reducen la fluidez de la membrana plasmática. ZONA PELÚCIDA: La membrana pelúcida. Los indultos son utilizados “in vitro” con el fin de aumentar el porcentaje de espermatozoides potencialmente capaces de fecundar un ovocito. inhibiendo los procesos fusogéneticos de membrana y de la RA. 10 . si bien existen detractores de esta primera técnica como método de predicción de la fertilidad. (Zp2 y ZP3). Está compuesta por tres glicoproteínas (en algunas especies 4): ZP1. de ahí la importancia distinción entre RA inducida y espontánea. tal es el caso de la progesterona presente en las células del cúmulo y en el fluido molecular. por lo que no existe uniformidad en el método utilizado por los diversos autores. Los cambios de temperatura así como la congelación también inducen un aumento de la RA. requiriendo o no de una capacitación previa. Las técnicas de fecundación “in vitro” (FIV) analiza la capacidad fertilizante de un ayaculado. tiene función biológica esencial. El ionóforo A23187 el más utilizado en la inducción de la RA. son moléculas de aspecto filamentoso unidas por ZP1. IONÓFOROS: Moléculas capaces de estimular la RA en espermatozoides capacitados mediante la inducción de un flujo de calcio hacia el interior del espermatozoide 1) son moléculas potencialmente citotóxicas. ejercidos sobre los espermatozoides varía dependiendo de la concentración espermática y del nivel de proteínas presentes en el medio. Los inductores de la reacción acrosómica Existen fluidos y moléculas capaces de inducir la reacción acrosómatica “in vivo” y/o “in vitro”.

el espermatozoide se ha de unir a la ZP de ovocito. anterior a la RA (reacción acrosómica). Antes de atravesar la zona pelúcida. que agita la cola de lado a lado y la cabeza de delante a atrás. UNIÓN DE LA ZONA PELÚCIDA: UNIÓN PRIMARÍA Y SECUNDARÍA: La zona pelúcida presente en el momento de la fecundación. Por lo tanto hay que tener en cuenta que la membrana pelúcida es altamente específica. el espermatozoide atraviesa el espesor de la ZP para alcanzar el espacio perivitelino. que acontece tras la RA. mientras que en la unión secundaria. y por una enzima galactosil-transferasa localizada en la zona plasmática del espermatozoide. PENETRACIÓN DE LA ZONA PELÚCIDA Y FUSIÓN DE MEMBRANAS: Tras la RA y la unión a la ZP3. 11 . hasta la fecha.más globular. unión mediada por la interacción entre moléculas con gran afinidad presentes en la superficie de ambos gametos. En la unión primaria del espermatozoide a la ZP. la de la reacción acrosómica. el bloqueo de la poliespermia y la protección frente a fundaciones interespecíficas : además de desempeñar una función protectora del ovocito y del embrión temprano. Según la hipótesis propuesta por O´Rand et al. presente en la zona pelúcida del ovocito. ZP1 y ZP2 son glicoproteínas estructurales. tales como la unión del espermatozoide. El reconocimiento entre ambos gametos esta mediado por un carbohidrato de la glicoproteína ZP3. desempeña funciones básicas en dicho proceso. El papel que tiene la unión secundaria dentro del proceso de la fecundación es desconocido. Los espermatozoides que no son capaces de reconocer y unirse a las glicoproteínas de la ZP o responder a la ZP sufriendo la reacción acrosómatica no fecundarán al ovocito. La presentación de la ZP se conseguiría mediante la acción coordinada de las enzimas acrosomales liberadas en la RA y la potente fuerza de empuje desarrollada por el movimiento del espermatozoide. está involucrada la glicoproteína espermática ZP3. parece ser que el papel que desempeña le ZP1 es solamente estructural. mientras que la glicoproteína ZP3 es la encargada del reconocimiento e inducción de la reacción acrosomática del espermatozoide. intervienen la glicoproteína ZP2 y la proteína PH2. dando lugar a la formación de una retícula tridimensional.

situados al final del periodo de maduración en posición periférica bajo la membrana plasmática del ovocito. que permite el libre movimiento del espermatozoide una vez atraviesa la zona pelúcida. Las mitocondrias maternas pasarán a la siguiente generación. Este proceso se conoce como reacción cortical o de zona. que ha quedado liberada tras desprenderse el acrosoma y que se unirá a la membrana del ovocito creando un canal por donde pasará el espermatozoide al interior del ovocito.Una vez en el espacio perivitelino. la bindina. liberando su contenido al exterior impidiendo así que otro espermatozoide pueda penetrar en el ovocito. favoreciendo su fusión con la membrana del ovocito. algunos son liberados mientras el ovocito se encuentra en el folículo ovárico y una vez maduro antes de ser fecundado esta exocitosis prematura contribuye a la formación del espacio perivitelino. LÍQUIDO FOLICULAR. y se inicia en ese punto la fusión de ambas membranas. por tanto. estableciendo la reacción cortical en esta especie. la membrana plasmática de la cabeza del espermatozoide localizada sobre el segmento ecuatorial se une a la membrana plasmática del ovocito. La entrada de la cabeza del espermatozoide en el citoplasma del ovocito va acompañada de la incorporación gradual de su cola. OVIDUCTAL Y CELULAS DEL CÚMULO OOFORO: 12 . la poliespermia. de modo que solo un espermatozoide con un movimiento vigoroso pudiera penetrarlo. Aunque la exocitosis de la mayoría de los GC se produce de forma explosiva tras la fusión de membranas. Tras la fecundación los gránulos corticales desaparecen del ovocito. REACCIÓN CORTICAL: La activación del ovocito da lugar a la liberación hacia el espacio perivitelino del contenido de los gránulos corticales (GC). La exocitosis de los GC provoca la inactivación por hidrólisis de la glicoproteína ZP3 (responsable de la unión primaria a la ZP y de la inducción de la RA de espermatozoide). En el proceso de fusión está implicada una proteína presente en la membrana plasmática del espermatozoide. La fusión de membranas desencadena la activación del ovocito. y por otra a la modificación de las características fisicoquímicas de la zona pelúcida y de la membrana plasmática del ovocito. Las enzimas hidroliticas y glicoproteínas liberadas modifican las características fisicoquímicas de la ZP de manera que se impide la entrada de nuevos espermatozoides y.

Una proteína de superficie del espermatozoide denominada PH-20 es capaz de hidrolizar el ácido hialurónico y permitir al espermatozoide atravesar la densa capa de células del cúmulus. antithrombina III.Del fluido folicular ha mostrado la presencia de proteasas. Los espermatozoides deben estar capacitados y con el acrosoma intacto para atravesar el cúmulus. no pueden atravesarlo. El cúmulus. que el espermatozoide debe atravesar antes de penetrar al ovocito. cuyo principal componente es el ácido hialurónico que se inserta a la ZP por su región fenestrada exterior. pues se ha observado en varias especies que aquéllos no capacitados y los que ya han sufrido la reacción acrosómica. inhibidores de proteasas. Así los espermatozoides capacitados y con el acrosoma intacto son capaces de atravesar el cúmulus. aunque pueden unirse a la superficie de las células del cúmulus. siendo utilizado en casos de infertilidad masculina como potenciador de la capacidad fecundante. induciendo la RA. ayudado por su movimiento hiperactivo. Además. lo que resulta en un incremento de la RA. siendo su acción similar a la encontrada en el liquido folecular. péctido natriurético auricular (PNA). la zona pelúcida y el cúmulus. La progesterona estimula la exocitosis de manera dosis-dependiente. además de una amplia variedad de esteroides. El fluido oviductal desempeña un papel decisivo al final de la capacitación “in vivo”. liberadas tras la reacción acrosómica. está constituido por las células del cúmulus y por una matriz extracelular. Presentando unos buenos resultados de capacitación y RA. Parece existir un receptor no genómico en la superficie del espermatozoide. Este hecho es contradictorio con la creencia inicial que suponía que el espermatozoide utilizaría las enzimas hidroliticas de su acrosoma. para digerir el ácido hidráulico de la matriz extracelular del cúmulus. También es importante la acción del cumulo ooforo como potenciador de la RA. El flujo 13 . PROGESTERONA: La progesterona induce el influjo de calcio hacia el interior del espermatozoide. PASO DEL ESPERMATOZOIDE A TRAVÉS DEL CÚMULUS: Los ovocitos están rodeados por unas cubiertas. El fluido oviductal es mejor que el folicular para el mantenimiento de la movilidad “in vitro”. las células expandidas del cúmulus de ovocitos maduros mejoran la movilidad del espermatozoide.

El problema de esta metodología es el requerimiento de equipos costosos y un entrenamiento del personal técnico que imposibilita su uso rutinario y se restringe a determinados estudios. permitiendo un flujo de calcio e incrementando la RA. cafeína. La utilización de la microscopía de fluorescencia suele ir asociada a lectinas vegetales o anticuerpos unidos normalmente a marcadores fluorescentes que se pueden 14 . existiendo una posible acción sobre la fluidez de la membrana espermática mediante su interacción con receptores adenosínicos. incrementando el porcentaje de espermatozoides reaccionados. La cafeína muestra efectos negativos sobre la viabilidad espermática debido a su acción como inhibidor de los mecanismos de reparación del DNA y su potencial mutagénico. La utilización de xantina. Los análogos del AMP-c estimulan la actividad de la protein-kinasa. teofilina y pentoxifilina produce un aumento de la concentración de AMP-c debido a la inhibición de la fosfodiesterasa. correlacionado positivamente con el FIV. Técnicas de detección de la reacción acrosómica. EFECTO DE DISMINUCIÓN TÉRMICA: Estudios recientes muestran un aumento del porcentaje de RA. La mayoría de estos estudios se basan en la utilización de técnicas de microscopía electrónica y de fluorescencia.de iones NA+ y la acción de una tripsin-proteasa parecen estar implicados en el mecanismo de acción de la progesterona. requiere la utilización de diversos métodos de detección del estado del espermatozoide. La pentoxifilina incrementa el porcentaje de RA y la movilidad espermática siendo su uso recomendado en eyaculados de baja movilidad. hiperactivación como la reacción acrosómica son procesos dependientes de AMP cíclico (AMP-c). El análisis de los cambios ocurridos en el espermatozoide durante la reacción acrosómica bajo condiciones “in vivo” o “in vitro”. Como consecuencia probablemente las bajas temperaturas inactivan la bomba de calcio. encargada de mantener los niveles de calcio intracelular bajos. MODULADORES METABÓLICOS: La capacitación.

Con el tiempo se ha descrito una variante de esta tinción en la que se ha omitido el azul Tripán debido al tiempo que requiere su realización. Maclura pomífera(MPA). Esto se refleja en el desarrollo de técnicas 15 . estrés.dirigir contra el contenido acrosómico o contra la membrana del cromosoma. El uso de esta técnica permite la posibilidad de identificar el estado del acrosoma en presencia de glicoconjugados . La eminente crecida de este problema en la sociedad moderna propiciada a su vez por agentes externos (móviles. el uso de lectinas suele ir asociado a test vitales o a test de permeabilidad de membrana con el fin de diferenciar el estado del acrosoma en células viables y no viables. ha exigido una respuesta por parte del mundo científico. Como se ha dicho anteriormente también es frecuente el uso de anticuerpos monoclonales o policlonales. tabaco. marrón Bismark y rosa de Bengala es capaz de clasificar los espermatozoides en cuatro categorías: vivos con acrosoma intacto. es actualmente. una de las técnicas de mayor difusión entre los diversos equipos investigadores. Por lo tanto. Los anticuerpos tienen la capacidad de unirse a receptores específicos presentes en la superficie de la membrana determinando la presencia o no del acrosoma. Por lo tanto debido a la complejidad de las técnicas anteriormente citadas la evaluación de la presencia o ausencia del acrosoma mediante tinciones para microscopía óptica de campo claro. MIRAS A LA INVESTIGACIÓN. Glycine ax(SBA) y Tricitum vulgaris(WGA). REFLEXIONES FINALES La capacitación y la reacción acrosómica es una parte esencial en la fecundación. capacidad limitada con el uso de lectinas. Canavalia Ensiformis(ConA). descrita por primera vez por Talbot y Chacon en 1981 para semen humano.…). Cabe resaltar entre las tinciones más utilizadas la triple tinción. ropa ajustada. Entre las más utilizadas en la detección de los procesos de capacitación encontramos: Pisum Sativum(PSA). vivos reaccionados. un área cada vez más solicitada ante el crecimiento de la infertilidad. Las lectinas determinan la presencia y distribución de determinados azúcares en la membrana plasmática o en la membrana acrosomal interna. Dicha técnica mediante el empleo de azul Tripán. Arachis hypogaea(PNA). El estudio de estos dos procesos abre nuevas vías de investigación en el campo de la fecundación. muertos con acrosoma intacto y muertos reaccionados.

… Para llevar a la práctica dichas técnicas es necesario inducir la capacitación acrosómica en el laboratorio mediante técnicas de cultivo y en condiciones ambientales determinadas. debido a que los receptores específicos de esta última no reconocen a los espermatozoides ajenos. La quimiotaxis está documentada en numerosas especies marinas (moluscos. Dicho nombre proviene del hámster dorado dada la capacidad de su ovocito de. quinodermos. se ha conseguido aislar una 16 . Para que se produzca con éxito el macho y la hembra deben ser del mismo sexo. No obstante. Aunque la fecundación entre distintas especies aun no sea viable. implantación asistida. fish. en este caso para garantizar la perpetuación de la especie.como la fecundación in vitro (FIV). basada en la tendencia de los espermatozoides a moverse en una dirección determinada (ovocito) por la influencia de estímulos químicos. diagnóstico prenatal. microeyección citoplasmática ICSI. El espermatozoide recorre una larga distancia desde que es depositado en el trato cervical hasta que penetra en la zona pelúcida. Puntualizando. esto supone un desafío a la naturaleza. podemos decir que el estudio de la capacitación y de la reacción acrosómica ha supuesto el desarrollo de nuevas técnicas que facilitan actualmente la fecundación. La capacitación in vitro mejora la calidad de los estudios realizados y potencia la capacidad fecundante de un eyaculado. inseminación artificial.…) cuyo esperma es atraído por una sustancia química hasta los huevos. fusionarse con espermatozoides humanos después de ser capacitados “in vitro” y haber sufrido la reacción acrosómica. En resumen. La capacitación espermática se lleva a cabo en el tracto reproductor femenino. Arbacia punctulata. la reproducción de la capacitación en un laboratorio facilita a los investigadores información más rigurosa sobre las condiciones fisiológicas que se dan en el aparato reproductor femenino. ¿Cómo sabe el espermatozoide cuál es su destino? Una de las hipótesis es la quimiotaxis. tras eliminar su zona pelúcida. La fecundación in vitro heteróloga no implica que los espermatozoides puedan fecundar in vivo. En una especie marina. el ser humano tiende a romper las leyes de la naturaleza como en el experimento del “Test de Hámster” Test de Hámster En este estudio se puede determinar la capacidad fecundante de los espermatozoides “in vitro”. Este hecho nos muestra una vez más la sabiduría de la naturaleza.

http://www. se mostró un hecho sorprendente.ucm. 187. 30. 194. En 1991 Ralt y compañeros suyos intentaron simular el experimento antes expuesto con esperma humano.anatomohistologia.Scott F. Buenos Aires. 192.sustancia quimiotáctica. Sin embargo.Moore Persaud. La quimiotaxis en el ser humano se encuentra por el momento en el campo de la especulación. 664. Embriología clínica 7ª edición. 193. 663. solo era fecundante el óvulo del que provenía fluido que había causado una reacción quimiotáctica. Páginas 613. Cuando una gota de agua de mar junto al esperma es añadida al portaobjetos y le es inyectada el resact. y entre esto se encuentra la capacitación y la reacción acrosómica. BIBLIOGRAFÍA . 198. confirmando así su naturaleza quimiotáctica. hipotetizándo algunos autores que el ovocito secreta sustancias quimiotácticas en las últimas etapas de la migración del esperma ( Hunter 1989).uns. 191. en la mayoría de los casos. Histología 3ª edición. . Aun con todo lo avanzado en los últimos tiempos. y es que. “resact”.es/BUCM/tesis/19972000/X/3/X3050301. Elsevier. Sunderland. Panamericana.asp? zona=modrepro . 33. 204. pero no funcionó ya que solo la mitad de las microinyecciones del supuesto factor quimiotáctico derivó al desplazamiento del esperma a esa zona. Madrid 2004. El “resact” difunde rápidamente en agua marina y tiene un gran efecto a bajas concentraciones cuando es añadida a una suspensión de esperma de Arbacia.http://www. Sinauer Associates. 31.ar/plantilla. 665. 32.pdf 17 . .edu. 196. Developmental Biology 6th edition. se observa cómo el esperma migra hacia donde el resact ha sido inyectado. 29. 2005. 195. Páginas 185.Finn Geneser. 2000. todavía queda mucho campo por descubrir.Gilbert. 186. . Páginas 16.

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