BIOLOGÍA MOLECULAR Y CELULAR DE LA CAPACITACIÓN Y REACCIÓN ACROSÓMICA EN EL ESPERMATOZOIDE

REFLEXIONES FINALES 2 . ovidutal y células del cúmulo oóforo Paso del espermatozoide a través del cúmulus Progesterona Moduladores metabólicos Efecto de la disminución térmica o Técnicas de detección de la reacción acrosómica - MIRAS A LA INVESTIGACIÓN.ÍNDICE INTRODUCCIÓN - DESARROLLO o Capacitación o Capacitación “in vitro” o Reacción acrosómica o Los inductores de la reacción acrosómica    Ionóforos Zona pelúcida Unión de la zona pelúcida: unión primaria y unión secundaria        Penetración de la zona pelúcida y fusión de membranas Reacción cortical Líquido folicular.

seguida de la acción de barrido de las fimbrias y el peristaltismo de la pared de la trompa. En varones se denomina espermatogenia. al igual que todos los seres vivos. o Transporte en el aparato reproductor femenino. en la que el semen llega a la parte prostática de la uretra. que nos permita la creación de nuevas generaciones. propiciado principalmente por las contracciones musculares de las paredes de la 3 . en nuestra especie. definida por la producción de descendencia mediante la fusión de una célula sexual femenina (oocito) y una célula sexual masculina (espermatozoide). El ovocito secundario lo hará a través de la ovulación. por otro lado. Para que esta fusión se pueda llevar a término es necesario que se den correctamente una serie de pasos: Gametogenia. que se reducen a la mitad por meiosis.- BIBLIOGRAFÍA BIOLOGÍA MOLECULAR Y CELULAR DE LA CAPACITACIÓN Y LA REACCIÓN ACROSÓMICA EN EL ESPERMATOZOIDE INTRODUCCIÓN Los seres humanos. se puede dividir en tres fases: o Emisión. tenemos un periodo de vida limitado. Ese mecanismo es la reproducción. Los gametos deberán encontrarse en la ampolla de la trompa uterina. donde se producirá la fecundación. proceso de formación y desarrollo de gametos (células germinativas especializadas). La gametogenia prepara dichas células para la fecundación. y en mujeres ovogenia. y el cambio morfológico de la célula. por lo que debe de haber un mecanismo capaz de asegurar la perpetuación de la especie. Trasporte de gametos. hablamos de reproducción sexual o sexuada. o Eyaculación. en la que el semen es expulsado de la uretra y depositado en el cuello uterino. El trasporte de los espermatozoides. pasando por la reducción del número de cromosomas. Más concretamente.

o Activación del metabolismo del ovocito para comenzar el desarrollo. Los espermatozoides recién eyaculados no reúnen las condiciones adecuadas para fecundar el ovocito. Podría hablarse de la maduración final del gameto masculino promovida por los elementos del tracto femenino. Es en esta fase en la que se da la capacitación del espermatozoide. DESARROLLO Una vez ubicados en su entorno la capacitación y la reacción acrosómica. En el proceso de fertilización es donde encontraríamos nuestra segunda materia de estudio. o Fusión del material genético de ambos gametos. o Regulación de la entrada del espermatozoide al ovocito. procederemos a explicarlas en profundidad. El proceso de capacitación espermática es un proceso reversible que se debe a la habilidad de ciertas moléculas de disociarse y reasociarse con la membrana del 4 . Apuntar que solo un espermatozoide podrá entrar.vagina y útero. vital para que entren en contacto espermatozoide y ovocito. no hay convenio entre los distintos autores. cuando los espermatozoides entran en contacto con los elementos del tracto genital femenino. siendo el resto inhibidos para tal efecto. 2004). Fertilización. Engloba cuatro eventos principales: o Contacto y reconocimiento entre espermatozoide y ovocito. Es el momento concreto en el que se produce la fusión de las dos células sexuales. la reacción acrosómica. 2005) y otros que aseguran las siete horas (Moore Persaud. En cuanto a la duración del proceso. se han de someter a un periodo de acondicionamiento en el que van a sufrir una serie de cambios estructurales y fisiológicos que les habilitará para sufrir la reacción acrosómica. Capacitación La capacitación comienza tras la eyaculación. encontrándose los que defienden las dos horas (Finn Geneser.

Se produce un aumento de la glucolisis y del consumo de O2. Nos encontramos en el líquido folicular una albúmina y HDL con cierto grado de especificad. produciéndose un descenso del colesterol con el consiguiente aumento de fosfolípidos. y con él los factores decapacitantes. Durante el paso del semen a través del tracto femenino. Antes de sumergirnos en la serie de cambios que se dan a nivel de membrana espermática es conveniente señalar que los espermatozoides constan de una membrana continua que queda dividida en cabeza y cola. Esta membrana está sometida a cambios tanto a su paso por el epidídimo. el plasma seminal se elimina. En cuanto a la membrana que recubre el flagelo.acrosómica: la membrana que recubre la última porción de cabeza. Entre los cambios a nivel fisiológico se encuentran los cambios en el metabolismo. En este último se produce un aumento de la permeabilidad. Los agentes que estimulan su pérdida son los “factores capacitantes”. Esta afinidad se acentúa en presencia de bicarbonato.espermatozoide. Porción post. siendo capaces de unir 2 o 3 más cantidad de colesterol que los aceptores presentes en el suero sanguíneo. El descenso de colesterol en la membrana plasmática encuentra su razón en la presencia de proteínas captadoras de esteroles en el tracto femenino. Estas moléculas son conocidas bajo el término de “factores de decapacitación” o “factores decapacitantes”. redistribución de proteínas dependientes de calmodulina así como de otras moléculas y cambios en la composición de lípidos de la membrana. distinguiremos dos dominios: Pieza intermedia. Pieza terminal. La membrana de la porción cefálica a su vez consta de tres regiones: Porción acrosomal: parte de membrana que recubre el acrosoma. en el momento de la eyaculación y en el transcurso de la capacitación. Están presentes en el plasma seminal actuando como vesículas donadoras de colesterol y por tanto inhibiendo la capacitación. Diversos estudios han comprobado la relación existente entre la concentración de fosfolípidos y colesterol en la membrana con la concentración de albúmina en el medio. Porción ecuatorial: donde las membranas acrosomal y plasmática se unen en la reacción acrosómica. siendo este compuesto 5 .

la pérdida de los antígenos seminales de superficie ya que se ha observado. Las modificaciones en la composición y estructura de la membrana espermática inducen cambios en la permeabilidad de iones. que va a ser el principal estimulador de la capacitación. no lo son. lo que hace que los espermatozoides presenten un gradiente negativo de colesterol hacia el exterior. la migración de proteínas supone la formación de zonas precursoras de la fusión de la membrana plasmática con la membrana acrosomal externa.ATPasa disminuye durante la capacitación permitiendo el aumento de la concentración de Na+ intracelular. Un componente activo en la desestabilización de la membrana es la fosfolipasa A2. La actividad de la enzima Na+. preparándose así para su fusión. En la capacitación. induciendo así la capacitación y un aumento de la fluidez de membrana. el K+ extracelular permite la capacitación espermática de manera secuencial. A su vez. Las relaciones más importantes de iones en la capacitación se dan a nivel de Na+. ya Loeb demostró en 1915 la necesidad del 6 . lo que propicia la transducción de señales y la futura interacción entre los dos gametos. mientras que los que han permanecido previamente en el útero en condiciones capacitantes. K+ . La capacitación también involucra la liberación de otras sustancias de superficie de la membrana del espermatozoide. A su vez. empezará el proceso de reacción acrosómica. marcando dichos antígenos con carbono. Entre ellas se encuentra la pérdida gradual de la cubierta glucoproteica ubicada sobre la región cefálica que el espermatozoide recibió durante su paso por el epidídimo y del plasma espermático. que desestabiliza la membrana. que los espermatozoides recién eyaculados son aglutinados por los anticuerpos. algunos investigadores afirman que la función de algunas de las sustancias que luego se desprenderán no es sino la de estabilizar la membrana hasta el momento que. El desprendimiento de colesterol de la membrana se produce debido a la menor concentración de colesterol en las células del útero.esencial durante la capacitación. K+ y Ca2+. aumenta gradualmente la inestabilidad de la membrana. De hecho. Ha sido demostrada también. que ha sido descrita como uno de los mecanismos que dan comienzo a la capacitación y reación acrosómica ya que produce lisofosfatidilcolina. En cuanto al Ca2+. tras producirse el desprendimiento de las mismas. La eliminación de las sustancias de la cubierta y la reorganización de elementos conduce a la activación de receptores específicos para ligandos sobre la zona pelúcida que antes estaban enmascarados. El incremento de la fluidez facilita el movimiento de proteínas y receptores. mediante inmunocitoquímica.

Los medios de incubación utilizados en la inducción de la capacitación “in vitro” poseen una alta fuerza iónica con el objetivo de desplazar los FD. por lo que se ha intentado extrapolar dicho proceso a un laboratorio mediante técnicas. El desarrollo de estas técnicas capaces de recuperar los espermatozoides móviles. y pH alcalino responsable de apartar las proteínas de la superficie de la membrana plasmática. En el ser humano. Es característico de este proceso un movimiento de gran curvatura y amplitud de flagelo. filtración en columnas de Sephadex y el dextrano. Capacitación in vitro El estudio de la capacitación espermática de manera fisiológica en el tracto reproductor femenino (in vivo) es de gran dificultad. Esta técnica es la que denominamos capacitación “in vitro”. Entre las distintas metodologías de capacitación “in vitro” mencionadas anteriormente se considera la técnica de “swim up” como el método más sencillo y barato. La utilización de Ca2+ ionóforo ó dibutiril AMP cíclico aceleran la capacitación y la aparición de la HA. Un dato a resaltar es que siempre que hay capacitación se da la hiperactivación. Se puede decir que entre las técnicas de recuperación de espermatozoides móviles más utilizadas encontramos el “swim-up”. La hiperactivación es un proceso fisiológico asociado a la ovulación ya que será necesario para que los espermatozoides atraviesen la zona pelúcida. así como de un aumento de la amplitud de desplazamiento lateral de la cabeza y velocidad curvilínea. Estas técnicas se basan en la inducción de la capacitación espermática debido a la eliminación del plasma seminal. medios de cultivo y condiciones ambientales determinadas. incrementando el flujo de calcio hacia el interior de las células espermáticas y 7 . pero con una disminución del porcentaje de linealidad y velocidad lineal. para reproducir con la mayor exactitud dicho proceso. como se ha puntualizado. activando los procesos de HA y RA. Va precedido de las modificaciones ocurridas en la membrana y.Ca2+ extracelular para aumentar la fertilidad en estrellas de mar. gradientes de percoll. nos permite seleccionar aquellas células espermáticas con mayor movilidad y capacidad fecundante para ser posteriormente aplicables en programas de inseminación intrauterina (IU) y FIV. pero no siempre que hay hipercinesis se da la capacitación ni la reacción acrosómica. requiere de la presencia de Ca2+. el aumento de Ca2+ será necesario para que se dé la “hiperactivación”. y por lo tanto de los FD.

forma una envoltura acrosómica en cuyo interior existen una gran variedad de enzimas hidroliticas. mientras que el segmento ecuatorial permanece intacto durante todo el proceso. Durante la RA se produce la defenestración entre la membrana plasmática y acrosómica externa en la región apical y en el segmento principal del acrosoma por múltiples fusiones puntuales. Dichas encimas. transcurriendo paralela por casi todo el territorio por el que se extiende. para que la fusión con la membrana pelúcida tega 8 . como consecuencia de la capacitación. El acromosoma espermático. Así una RA prematura implica un descenso de la fertilidad debido a la adhesión de los espermatozoides que sufren la RA después de atravesar el cúmulo ooforo son capaces de unirse a la membrana pelúcida. Reacción acrosómica La reacción acrosómica (RA) es un proceso exocítico dependiente del calcio. En los espermatozoides humanos es necesario que se produzca la RA. procedente del aparato de Golgi. De ello se encarga el test ARIC (Acrosomal Reaction Induction Challenger) que es utilizado actualmente con éxito como prueba diagnóstica de la capacidad fecundante de un eyaculado en semen humano. debido principalmente a la acción de la fosfolipasa A2. siendo la liberación inicial de acrosina un estimulador de la RA el responsable de la fijación del espermatozoide al ovocito. desempeñan un papel esencial durante la RA. Las encimas liberadas del acrosoma durante la RA facilitan el paso del espermatozoide a través del cúmulo ooforo y zona pelúcida. En el día de hoy.produciendo una activación de las fosfolipasas. La sincronía entre ambos eventos es imprescindible para que la fecundación tenga lugar. la utilización de inductores de la reacción acrosómica junto con técnicas de capacitación “in vitro” nos permite obtener mayor información sobre posibles disfunciones de la capacidad fecundante del espermatozoide. En la incubación de los espermatozoides con el fin de inducir “in vitro” se requiere durante la capacitación espermática condiciones ambientales definidas de humedad y dióxido de carbono. la membrana acrosómica se dobla. dando lugar a la penetración del ovocito. Debido a la posición del acrosoma en la cabeza espermática.

9 . degradación de fosfoinositoles y formación de diacilglicerol (DAG) que actuaría como mensajero intracelular de la fusión entre la membrana acrosomal externa y la plasmática. Algunas células pueden sufrir la RA de manera espontánea. lo que sugiere que el AMPc pueda estar involucrado en la ruta de señales que lleva a la exocitosis del contenido acrosomal. existiendo diversas experiencias que muestran la necesidad de moléculas especificas con el ovocito en la inducción de la RA. proponiéndose una posible regulación “in vivo” de la RA en espermatozoides. mientras que la fucosa. Se ha comprobado que el cúmulo expandido y la ZP de los ovocitos humanos contienen algunos factores capaces de inducir la RA en los espermatozoides capacitados del macho. L-glucosa y galactosa no ejercen esta acción sobre los espermatozoides. se dispara la fusión de la membrana plasmática con la membrana acrosomal externa. los espermatozoides deben experimentar la RA para atravesar la ZP del ovocito. Tras la interacción entre el receptor espermático y el estímulo procedente del ovocito. está implicado en reacciones de fosforilación de proteínas espermáticas. puede retardar la aparición de la reacción acrosómica. receptores de proteína G. fundamentalmente hialuronidasa. Esta elevación del AMPc precede a la RA. La glucosa. La ZP estimula el aumento en la actividad de la adenilato ciclasa del espermatozoide. La RA es inducida. en las que se está investigando para desvelar su papel dentro de la funcionalidad espermática. y que se encuentra situado en la región apical de la cabeza del espermatozoide. lactosa. El acromosoma es un gránulo de gran tamaño que contiene enzimas en forma de zimógeno. y activación de segundos mensajeros junto con la proteína Kinasa C y la fosfolipasa. bajo su membrana plasmática. siendo las concentraciones muy altas o bajas responsables de una mala respuesta acrosómica. Se han encontrado concentraciones de K+ entre 20 y 30 mM en fluidos procedentes del tracto de la hembra. desempeñan un papel principal. El AMPc. En los mamíferos. La presencia de iones K+ en el medio es necesaria para que la RA tenga lugar.lugar. Como consecuencia de estos eventos se produce un incremento en la concentración de calcio intracelular. por sustancias presentes en los fluidos próximos al ovocito tales como: líquido folecular cúmulo ooforo y células de la granulosa. produciéndose la pérdida del acrosoma. en espermatozoides previamente capacitados. dando lugar a un aumento en la concentración intracelular del AMPc. el influjo de calcio aumenta el pH.

Los inductores de la reacción acrosómica Existen fluidos y moléculas capaces de inducir la reacción acrosómatica “in vivo” y/o “in vitro”. inhibiendo los procesos fusogéneticos de membrana y de la RA. y 2) ejercen una acción negativa sobre la movilidad y viabilidad espermáica. 10 . Dichas sustancias son utilizadas en pruebas diagnósticas de la capacidad fecundante de un eyaculado. por lo que no existe uniformidad en el método utilizado por los diversos autores. tal es el caso de la progesterona presente en las células del cúmulo y en el fluido molecular. tiene función biológica esencial. El ionóforo A23187 el más utilizado en la inducción de la RA. Los indultos son utilizados “in vitro” con el fin de aumentar el porcentaje de espermatozoides potencialmente capaces de fecundar un ovocito. (Zp2 y ZP3). siendo la determinación de la RA en espermatozoides y el test de hámster las pruebas más correlacionadas con el FIV. requiriendo o no de una capacitación previa. La reacción acrosómica inducida (fisiológica) y no la espontánea. varía dependiendo de la especie y del medio utilizado. ejercidos sobre los espermatozoides varía dependiendo de la concentración espermática y del nivel de proteínas presentes en el medio. Los cambios de temperatura así como la congelación también inducen un aumento de la RA.La peroxidación lipídica y los radicales libres reducen la fluidez de la membrana plasmática. ionóforo A23187 y heparina. ZP2 y ZP3. son moléculas de aspecto filamentoso unidas por ZP1. Está compuesta por tres glicoproteínas (en algunas especies 4): ZP1. ZONA PELÚCIDA: La membrana pelúcida. de ahí la importancia distinción entre RA inducida y espontánea. El efecto. Las técnicas de fecundación “in vitro” (FIV) analiza la capacidad fertilizante de un ayaculado. IONÓFOROS: Moléculas capaces de estimular la RA en espermatozoides capacitados mediante la inducción de un flujo de calcio hacia el interior del espermatozoide 1) son moléculas potencialmente citotóxicas. si bien existen detractores de esta primera técnica como método de predicción de la fertilidad. Por lo tanto la concentración de ionóforo y el tiempo de exposición.

el bloqueo de la poliespermia y la protección frente a fundaciones interespecíficas : además de desempeñar una función protectora del ovocito y del embrión temprano. intervienen la glicoproteína ZP2 y la proteína PH2. unión mediada por la interacción entre moléculas con gran afinidad presentes en la superficie de ambos gametos. parece ser que el papel que desempeña le ZP1 es solamente estructural. Por lo tanto hay que tener en cuenta que la membrana pelúcida es altamente específica. el espermatozoide atraviesa el espesor de la ZP para alcanzar el espacio perivitelino. 11 . Según la hipótesis propuesta por O´Rand et al. desempeña funciones básicas en dicho proceso. UNIÓN DE LA ZONA PELÚCIDA: UNIÓN PRIMARÍA Y SECUNDARÍA: La zona pelúcida presente en el momento de la fecundación.más globular. Los espermatozoides que no son capaces de reconocer y unirse a las glicoproteínas de la ZP o responder a la ZP sufriendo la reacción acrosómatica no fecundarán al ovocito. el espermatozoide se ha de unir a la ZP de ovocito. mientras que en la unión secundaria. que acontece tras la RA. Antes de atravesar la zona pelúcida. ZP1 y ZP2 son glicoproteínas estructurales. que agita la cola de lado a lado y la cabeza de delante a atrás. PENETRACIÓN DE LA ZONA PELÚCIDA Y FUSIÓN DE MEMBRANAS: Tras la RA y la unión a la ZP3. anterior a la RA (reacción acrosómica). El papel que tiene la unión secundaria dentro del proceso de la fecundación es desconocido. mientras que la glicoproteína ZP3 es la encargada del reconocimiento e inducción de la reacción acrosomática del espermatozoide. La presentación de la ZP se conseguiría mediante la acción coordinada de las enzimas acrosomales liberadas en la RA y la potente fuerza de empuje desarrollada por el movimiento del espermatozoide. presente en la zona pelúcida del ovocito. está involucrada la glicoproteína espermática ZP3. tales como la unión del espermatozoide. dando lugar a la formación de una retícula tridimensional. y por una enzima galactosil-transferasa localizada en la zona plasmática del espermatozoide. En la unión primaria del espermatozoide a la ZP. hasta la fecha. la de la reacción acrosómica. El reconocimiento entre ambos gametos esta mediado por un carbohidrato de la glicoproteína ZP3.

Tras la fecundación los gránulos corticales desaparecen del ovocito. La entrada de la cabeza del espermatozoide en el citoplasma del ovocito va acompañada de la incorporación gradual de su cola. algunos son liberados mientras el ovocito se encuentra en el folículo ovárico y una vez maduro antes de ser fecundado esta exocitosis prematura contribuye a la formación del espacio perivitelino. En el proceso de fusión está implicada una proteína presente en la membrana plasmática del espermatozoide. Aunque la exocitosis de la mayoría de los GC se produce de forma explosiva tras la fusión de membranas.Una vez en el espacio perivitelino. por tanto. La exocitosis de los GC provoca la inactivación por hidrólisis de la glicoproteína ZP3 (responsable de la unión primaria a la ZP y de la inducción de la RA de espermatozoide). que ha quedado liberada tras desprenderse el acrosoma y que se unirá a la membrana del ovocito creando un canal por donde pasará el espermatozoide al interior del ovocito. Este proceso se conoce como reacción cortical o de zona. situados al final del periodo de maduración en posición periférica bajo la membrana plasmática del ovocito. favoreciendo su fusión con la membrana del ovocito. de modo que solo un espermatozoide con un movimiento vigoroso pudiera penetrarlo. y se inicia en ese punto la fusión de ambas membranas. Las mitocondrias maternas pasarán a la siguiente generación. que permite el libre movimiento del espermatozoide una vez atraviesa la zona pelúcida. OVIDUCTAL Y CELULAS DEL CÚMULO OOFORO: 12 . REACCIÓN CORTICAL: La activación del ovocito da lugar a la liberación hacia el espacio perivitelino del contenido de los gránulos corticales (GC). la membrana plasmática de la cabeza del espermatozoide localizada sobre el segmento ecuatorial se une a la membrana plasmática del ovocito. Las enzimas hidroliticas y glicoproteínas liberadas modifican las características fisicoquímicas de la ZP de manera que se impide la entrada de nuevos espermatozoides y. liberando su contenido al exterior impidiendo así que otro espermatozoide pueda penetrar en el ovocito. estableciendo la reacción cortical en esta especie. La fusión de membranas desencadena la activación del ovocito. LÍQUIDO FOLICULAR. la poliespermia. la bindina. y por otra a la modificación de las características fisicoquímicas de la zona pelúcida y de la membrana plasmática del ovocito.

no pueden atravesarlo. cuyo principal componente es el ácido hialurónico que se inserta a la ZP por su región fenestrada exterior.Del fluido folicular ha mostrado la presencia de proteasas. pues se ha observado en varias especies que aquéllos no capacitados y los que ya han sufrido la reacción acrosómica. inhibidores de proteasas. También es importante la acción del cumulo ooforo como potenciador de la RA. Este hecho es contradictorio con la creencia inicial que suponía que el espermatozoide utilizaría las enzimas hidroliticas de su acrosoma. La progesterona estimula la exocitosis de manera dosis-dependiente. El flujo 13 . las células expandidas del cúmulus de ovocitos maduros mejoran la movilidad del espermatozoide. siendo utilizado en casos de infertilidad masculina como potenciador de la capacidad fecundante. Una proteína de superficie del espermatozoide denominada PH-20 es capaz de hidrolizar el ácido hialurónico y permitir al espermatozoide atravesar la densa capa de células del cúmulus. induciendo la RA. El fluido oviductal es mejor que el folicular para el mantenimiento de la movilidad “in vitro”. aunque pueden unirse a la superficie de las células del cúmulus. El cúmulus. PROGESTERONA: La progesterona induce el influjo de calcio hacia el interior del espermatozoide. El fluido oviductal desempeña un papel decisivo al final de la capacitación “in vivo”. Presentando unos buenos resultados de capacitación y RA. Los espermatozoides deben estar capacitados y con el acrosoma intacto para atravesar el cúmulus. la zona pelúcida y el cúmulus. Parece existir un receptor no genómico en la superficie del espermatozoide. Además. que el espermatozoide debe atravesar antes de penetrar al ovocito. PASO DEL ESPERMATOZOIDE A TRAVÉS DEL CÚMULUS: Los ovocitos están rodeados por unas cubiertas. está constituido por las células del cúmulus y por una matriz extracelular. péctido natriurético auricular (PNA). además de una amplia variedad de esteroides. siendo su acción similar a la encontrada en el liquido folecular. antithrombina III. liberadas tras la reacción acrosómica. para digerir el ácido hidráulico de la matriz extracelular del cúmulus. ayudado por su movimiento hiperactivo. Así los espermatozoides capacitados y con el acrosoma intacto son capaces de atravesar el cúmulus. lo que resulta en un incremento de la RA.

permitiendo un flujo de calcio e incrementando la RA. La utilización de xantina. existiendo una posible acción sobre la fluidez de la membrana espermática mediante su interacción con receptores adenosínicos. incrementando el porcentaje de espermatozoides reaccionados. encargada de mantener los niveles de calcio intracelular bajos. MODULADORES METABÓLICOS: La capacitación. teofilina y pentoxifilina produce un aumento de la concentración de AMP-c debido a la inhibición de la fosfodiesterasa. Como consecuencia probablemente las bajas temperaturas inactivan la bomba de calcio. El análisis de los cambios ocurridos en el espermatozoide durante la reacción acrosómica bajo condiciones “in vivo” o “in vitro”. EFECTO DE DISMINUCIÓN TÉRMICA: Estudios recientes muestran un aumento del porcentaje de RA. requiere la utilización de diversos métodos de detección del estado del espermatozoide. La mayoría de estos estudios se basan en la utilización de técnicas de microscopía electrónica y de fluorescencia. cafeína. El problema de esta metodología es el requerimiento de equipos costosos y un entrenamiento del personal técnico que imposibilita su uso rutinario y se restringe a determinados estudios. Técnicas de detección de la reacción acrosómica.de iones NA+ y la acción de una tripsin-proteasa parecen estar implicados en el mecanismo de acción de la progesterona. hiperactivación como la reacción acrosómica son procesos dependientes de AMP cíclico (AMP-c). La pentoxifilina incrementa el porcentaje de RA y la movilidad espermática siendo su uso recomendado en eyaculados de baja movilidad. La utilización de la microscopía de fluorescencia suele ir asociada a lectinas vegetales o anticuerpos unidos normalmente a marcadores fluorescentes que se pueden 14 . La cafeína muestra efectos negativos sobre la viabilidad espermática debido a su acción como inhibidor de los mecanismos de reparación del DNA y su potencial mutagénico. correlacionado positivamente con el FIV. Los análogos del AMP-c estimulan la actividad de la protein-kinasa.

Glycine ax(SBA) y Tricitum vulgaris(WGA). marrón Bismark y rosa de Bengala es capaz de clasificar los espermatozoides en cuatro categorías: vivos con acrosoma intacto. el uso de lectinas suele ir asociado a test vitales o a test de permeabilidad de membrana con el fin de diferenciar el estado del acrosoma en células viables y no viables. muertos con acrosoma intacto y muertos reaccionados. La eminente crecida de este problema en la sociedad moderna propiciada a su vez por agentes externos (móviles. Cabe resaltar entre las tinciones más utilizadas la triple tinción. un área cada vez más solicitada ante el crecimiento de la infertilidad. Por lo tanto debido a la complejidad de las técnicas anteriormente citadas la evaluación de la presencia o ausencia del acrosoma mediante tinciones para microscopía óptica de campo claro. Dicha técnica mediante el empleo de azul Tripán. estrés. Por lo tanto. El estudio de estos dos procesos abre nuevas vías de investigación en el campo de la fecundación. Arachis hypogaea(PNA). capacidad limitada con el uso de lectinas.dirigir contra el contenido acrosómico o contra la membrana del cromosoma. Las lectinas determinan la presencia y distribución de determinados azúcares en la membrana plasmática o en la membrana acrosomal interna. ropa ajustada. Los anticuerpos tienen la capacidad de unirse a receptores específicos presentes en la superficie de la membrana determinando la presencia o no del acrosoma. descrita por primera vez por Talbot y Chacon en 1981 para semen humano. Entre las más utilizadas en la detección de los procesos de capacitación encontramos: Pisum Sativum(PSA). Canavalia Ensiformis(ConA). El uso de esta técnica permite la posibilidad de identificar el estado del acrosoma en presencia de glicoconjugados . Con el tiempo se ha descrito una variante de esta tinción en la que se ha omitido el azul Tripán debido al tiempo que requiere su realización. Esto se refleja en el desarrollo de técnicas 15 . una de las técnicas de mayor difusión entre los diversos equipos investigadores. Como se ha dicho anteriormente también es frecuente el uso de anticuerpos monoclonales o policlonales. Maclura pomífera(MPA). ha exigido una respuesta por parte del mundo científico.…). vivos reaccionados. es actualmente. REFLEXIONES FINALES La capacitación y la reacción acrosómica es una parte esencial en la fecundación. tabaco. MIRAS A LA INVESTIGACIÓN.

diagnóstico prenatal. esto supone un desafío a la naturaleza. fish. basada en la tendencia de los espermatozoides a moverse en una dirección determinada (ovocito) por la influencia de estímulos químicos. Dicho nombre proviene del hámster dorado dada la capacidad de su ovocito de.… Para llevar a la práctica dichas técnicas es necesario inducir la capacitación acrosómica en el laboratorio mediante técnicas de cultivo y en condiciones ambientales determinadas. quinodermos. La quimiotaxis está documentada en numerosas especies marinas (moluscos.como la fecundación in vitro (FIV). microeyección citoplasmática ICSI. La capacitación espermática se lleva a cabo en el tracto reproductor femenino. La fecundación in vitro heteróloga no implica que los espermatozoides puedan fecundar in vivo. en este caso para garantizar la perpetuación de la especie. En resumen. fusionarse con espermatozoides humanos después de ser capacitados “in vitro” y haber sufrido la reacción acrosómica. el ser humano tiende a romper las leyes de la naturaleza como en el experimento del “Test de Hámster” Test de Hámster En este estudio se puede determinar la capacidad fecundante de los espermatozoides “in vitro”. podemos decir que el estudio de la capacitación y de la reacción acrosómica ha supuesto el desarrollo de nuevas técnicas que facilitan actualmente la fecundación. se ha conseguido aislar una 16 . tras eliminar su zona pelúcida. debido a que los receptores específicos de esta última no reconocen a los espermatozoides ajenos. Este hecho nos muestra una vez más la sabiduría de la naturaleza. Arbacia punctulata. Puntualizando. La capacitación in vitro mejora la calidad de los estudios realizados y potencia la capacidad fecundante de un eyaculado.…) cuyo esperma es atraído por una sustancia química hasta los huevos. inseminación artificial. No obstante. En una especie marina. Aunque la fecundación entre distintas especies aun no sea viable. la reproducción de la capacitación en un laboratorio facilita a los investigadores información más rigurosa sobre las condiciones fisiológicas que se dan en el aparato reproductor femenino. El espermatozoide recorre una larga distancia desde que es depositado en el trato cervical hasta que penetra en la zona pelúcida. Para que se produzca con éxito el macho y la hembra deben ser del mismo sexo. implantación asistida. ¿Cómo sabe el espermatozoide cuál es su destino? Una de las hipótesis es la quimiotaxis.

204. Sin embargo. hipotetizándo algunos autores que el ovocito secreta sustancias quimiotácticas en las últimas etapas de la migración del esperma ( Hunter 1989). 194. y es que. Histología 3ª edición. se mostró un hecho sorprendente. se observa cómo el esperma migra hacia donde el resact ha sido inyectado. . 32. en la mayoría de los casos. La quimiotaxis en el ser humano se encuentra por el momento en el campo de la especulación. 187. Páginas 613. BIBLIOGRAFÍA . y entre esto se encuentra la capacitación y la reacción acrosómica.http://www.es/BUCM/tesis/19972000/X/3/X3050301. 2000. . Aun con todo lo avanzado en los últimos tiempos. Cuando una gota de agua de mar junto al esperma es añadida al portaobjetos y le es inyectada el resact. 33.anatomohistologia. Páginas 185. 664. 191. . Madrid 2004. 196.Moore Persaud. Sinauer Associates.ucm. 192. pero no funcionó ya que solo la mitad de las microinyecciones del supuesto factor quimiotáctico derivó al desplazamiento del esperma a esa zona. Panamericana. solo era fecundante el óvulo del que provenía fluido que había causado una reacción quimiotáctica.asp? zona=modrepro .uns. 30. 665.sustancia quimiotáctica. Embriología clínica 7ª edición.pdf 17 . Buenos Aires. 186. El “resact” difunde rápidamente en agua marina y tiene un gran efecto a bajas concentraciones cuando es añadida a una suspensión de esperma de Arbacia. En 1991 Ralt y compañeros suyos intentaron simular el experimento antes expuesto con esperma humano.http://www. 193. 198.Scott F. Sunderland.ar/plantilla. 31. Elsevier. “resact”. 29. 663.edu. Developmental Biology 6th edition. 2005. Páginas 16. todavía queda mucho campo por descubrir.Gilbert. confirmando así su naturaleza quimiotáctica. 195.Finn Geneser.

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