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BIOLOGÍA MOLECULAR Y CELULAR DE LA CAPACITACIÓN Y REACCIÓN ACROSÓMICA

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BIOLOGÍA MOLECULAR Y CELULAR DE LA CAPACITACIÓN Y REACCIÓN ACROSÓMICA EN EL ESPERMATOZOIDE

REFLEXIONES FINALES 2 . ovidutal y células del cúmulo oóforo Paso del espermatozoide a través del cúmulus Progesterona Moduladores metabólicos Efecto de la disminución térmica o Técnicas de detección de la reacción acrosómica - MIRAS A LA INVESTIGACIÓN.ÍNDICE INTRODUCCIÓN - DESARROLLO o Capacitación o Capacitación “in vitro” o Reacción acrosómica o Los inductores de la reacción acrosómica    Ionóforos Zona pelúcida Unión de la zona pelúcida: unión primaria y unión secundaria        Penetración de la zona pelúcida y fusión de membranas Reacción cortical Líquido folicular.

Los gametos deberán encontrarse en la ampolla de la trompa uterina. Trasporte de gametos. Más concretamente. y el cambio morfológico de la célula. tenemos un periodo de vida limitado. por otro lado. El ovocito secundario lo hará a través de la ovulación. en nuestra especie. o Transporte en el aparato reproductor femenino.- BIBLIOGRAFÍA BIOLOGÍA MOLECULAR Y CELULAR DE LA CAPACITACIÓN Y LA REACCIÓN ACROSÓMICA EN EL ESPERMATOZOIDE INTRODUCCIÓN Los seres humanos. que nos permita la creación de nuevas generaciones. En varones se denomina espermatogenia. La gametogenia prepara dichas células para la fecundación. en la que el semen es expulsado de la uretra y depositado en el cuello uterino. definida por la producción de descendencia mediante la fusión de una célula sexual femenina (oocito) y una célula sexual masculina (espermatozoide). Ese mecanismo es la reproducción. que se reducen a la mitad por meiosis. al igual que todos los seres vivos. por lo que debe de haber un mecanismo capaz de asegurar la perpetuación de la especie. o Eyaculación. pasando por la reducción del número de cromosomas. propiciado principalmente por las contracciones musculares de las paredes de la 3 . El trasporte de los espermatozoides. hablamos de reproducción sexual o sexuada. y en mujeres ovogenia. en la que el semen llega a la parte prostática de la uretra. seguida de la acción de barrido de las fimbrias y el peristaltismo de la pared de la trompa. proceso de formación y desarrollo de gametos (células germinativas especializadas). donde se producirá la fecundación. Para que esta fusión se pueda llevar a término es necesario que se den correctamente una serie de pasos: Gametogenia. se puede dividir en tres fases: o Emisión.

Fertilización. DESARROLLO Una vez ubicados en su entorno la capacitación y la reacción acrosómica. cuando los espermatozoides entran en contacto con los elementos del tracto genital femenino. o Regulación de la entrada del espermatozoide al ovocito. Capacitación La capacitación comienza tras la eyaculación. encontrándose los que defienden las dos horas (Finn Geneser. procederemos a explicarlas en profundidad. Es el momento concreto en el que se produce la fusión de las dos células sexuales. o Activación del metabolismo del ovocito para comenzar el desarrollo. o Fusión del material genético de ambos gametos. En cuanto a la duración del proceso. 2004). 2005) y otros que aseguran las siete horas (Moore Persaud. vital para que entren en contacto espermatozoide y ovocito. Los espermatozoides recién eyaculados no reúnen las condiciones adecuadas para fecundar el ovocito. El proceso de capacitación espermática es un proceso reversible que se debe a la habilidad de ciertas moléculas de disociarse y reasociarse con la membrana del 4 . no hay convenio entre los distintos autores. Podría hablarse de la maduración final del gameto masculino promovida por los elementos del tracto femenino. Es en esta fase en la que se da la capacitación del espermatozoide. siendo el resto inhibidos para tal efecto. En el proceso de fertilización es donde encontraríamos nuestra segunda materia de estudio. Engloba cuatro eventos principales: o Contacto y reconocimiento entre espermatozoide y ovocito. Apuntar que solo un espermatozoide podrá entrar. la reacción acrosómica.vagina y útero. se han de someter a un periodo de acondicionamiento en el que van a sufrir una serie de cambios estructurales y fisiológicos que les habilitará para sufrir la reacción acrosómica.

Porción ecuatorial: donde las membranas acrosomal y plasmática se unen en la reacción acrosómica. Los agentes que estimulan su pérdida son los “factores capacitantes”.acrosómica: la membrana que recubre la última porción de cabeza. Diversos estudios han comprobado la relación existente entre la concentración de fosfolípidos y colesterol en la membrana con la concentración de albúmina en el medio. produciéndose un descenso del colesterol con el consiguiente aumento de fosfolípidos. siendo capaces de unir 2 o 3 más cantidad de colesterol que los aceptores presentes en el suero sanguíneo. Estas moléculas son conocidas bajo el término de “factores de decapacitación” o “factores decapacitantes”. Durante el paso del semen a través del tracto femenino. En cuanto a la membrana que recubre el flagelo. Entre los cambios a nivel fisiológico se encuentran los cambios en el metabolismo. Pieza terminal. Porción post. Nos encontramos en el líquido folicular una albúmina y HDL con cierto grado de especificad. distinguiremos dos dominios: Pieza intermedia. redistribución de proteínas dependientes de calmodulina así como de otras moléculas y cambios en la composición de lípidos de la membrana.espermatozoide. siendo este compuesto 5 . Antes de sumergirnos en la serie de cambios que se dan a nivel de membrana espermática es conveniente señalar que los espermatozoides constan de una membrana continua que queda dividida en cabeza y cola. La membrana de la porción cefálica a su vez consta de tres regiones: Porción acrosomal: parte de membrana que recubre el acrosoma. el plasma seminal se elimina. Están presentes en el plasma seminal actuando como vesículas donadoras de colesterol y por tanto inhibiendo la capacitación. y con él los factores decapacitantes. en el momento de la eyaculación y en el transcurso de la capacitación. Se produce un aumento de la glucolisis y del consumo de O2. En este último se produce un aumento de la permeabilidad. Esta membrana está sometida a cambios tanto a su paso por el epidídimo. El descenso de colesterol en la membrana plasmática encuentra su razón en la presencia de proteínas captadoras de esteroles en el tracto femenino. Esta afinidad se acentúa en presencia de bicarbonato.

induciendo así la capacitación y un aumento de la fluidez de membrana. Las modificaciones en la composición y estructura de la membrana espermática inducen cambios en la permeabilidad de iones. A su vez. la pérdida de los antígenos seminales de superficie ya que se ha observado. algunos investigadores afirman que la función de algunas de las sustancias que luego se desprenderán no es sino la de estabilizar la membrana hasta el momento que. que va a ser el principal estimulador de la capacitación. preparándose así para su fusión. La actividad de la enzima Na+. la migración de proteínas supone la formación de zonas precursoras de la fusión de la membrana plasmática con la membrana acrosomal externa. que ha sido descrita como uno de los mecanismos que dan comienzo a la capacitación y reación acrosómica ya que produce lisofosfatidilcolina. La eliminación de las sustancias de la cubierta y la reorganización de elementos conduce a la activación de receptores específicos para ligandos sobre la zona pelúcida que antes estaban enmascarados. mediante inmunocitoquímica. lo que propicia la transducción de señales y la futura interacción entre los dos gametos. El desprendimiento de colesterol de la membrana se produce debido a la menor concentración de colesterol en las células del útero. aumenta gradualmente la inestabilidad de la membrana. ya Loeb demostró en 1915 la necesidad del 6 . marcando dichos antígenos con carbono. En cuanto al Ca2+. Entre ellas se encuentra la pérdida gradual de la cubierta glucoproteica ubicada sobre la región cefálica que el espermatozoide recibió durante su paso por el epidídimo y del plasma espermático. el K+ extracelular permite la capacitación espermática de manera secuencial. no lo son. lo que hace que los espermatozoides presenten un gradiente negativo de colesterol hacia el exterior. Un componente activo en la desestabilización de la membrana es la fosfolipasa A2. tras producirse el desprendimiento de las mismas. empezará el proceso de reacción acrosómica. mientras que los que han permanecido previamente en el útero en condiciones capacitantes. que desestabiliza la membrana. La capacitación también involucra la liberación de otras sustancias de superficie de la membrana del espermatozoide. En la capacitación. Las relaciones más importantes de iones en la capacitación se dan a nivel de Na+. El incremento de la fluidez facilita el movimiento de proteínas y receptores. De hecho.ATPasa disminuye durante la capacitación permitiendo el aumento de la concentración de Na+ intracelular. A su vez.esencial durante la capacitación. K+ y Ca2+. K+ . Ha sido demostrada también. que los espermatozoides recién eyaculados son aglutinados por los anticuerpos.

Capacitación in vitro El estudio de la capacitación espermática de manera fisiológica en el tracto reproductor femenino (in vivo) es de gran dificultad. Va precedido de las modificaciones ocurridas en la membrana y. incrementando el flujo de calcio hacia el interior de las células espermáticas y 7 . La utilización de Ca2+ ionóforo ó dibutiril AMP cíclico aceleran la capacitación y la aparición de la HA. La hiperactivación es un proceso fisiológico asociado a la ovulación ya que será necesario para que los espermatozoides atraviesen la zona pelúcida. requiere de la presencia de Ca2+. y por lo tanto de los FD. activando los procesos de HA y RA. Estas técnicas se basan en la inducción de la capacitación espermática debido a la eliminación del plasma seminal. gradientes de percoll. el aumento de Ca2+ será necesario para que se dé la “hiperactivación”. Es característico de este proceso un movimiento de gran curvatura y amplitud de flagelo. nos permite seleccionar aquellas células espermáticas con mayor movilidad y capacidad fecundante para ser posteriormente aplicables en programas de inseminación intrauterina (IU) y FIV. pero no siempre que hay hipercinesis se da la capacitación ni la reacción acrosómica. El desarrollo de estas técnicas capaces de recuperar los espermatozoides móviles. Los medios de incubación utilizados en la inducción de la capacitación “in vitro” poseen una alta fuerza iónica con el objetivo de desplazar los FD. para reproducir con la mayor exactitud dicho proceso. Entre las distintas metodologías de capacitación “in vitro” mencionadas anteriormente se considera la técnica de “swim up” como el método más sencillo y barato. medios de cultivo y condiciones ambientales determinadas. como se ha puntualizado. así como de un aumento de la amplitud de desplazamiento lateral de la cabeza y velocidad curvilínea. pero con una disminución del porcentaje de linealidad y velocidad lineal.Ca2+ extracelular para aumentar la fertilidad en estrellas de mar. Esta técnica es la que denominamos capacitación “in vitro”. por lo que se ha intentado extrapolar dicho proceso a un laboratorio mediante técnicas. En el ser humano. Se puede decir que entre las técnicas de recuperación de espermatozoides móviles más utilizadas encontramos el “swim-up”. filtración en columnas de Sephadex y el dextrano. y pH alcalino responsable de apartar las proteínas de la superficie de la membrana plasmática. Un dato a resaltar es que siempre que hay capacitación se da la hiperactivación.

En el día de hoy. la utilización de inductores de la reacción acrosómica junto con técnicas de capacitación “in vitro” nos permite obtener mayor información sobre posibles disfunciones de la capacidad fecundante del espermatozoide. para que la fusión con la membrana pelúcida tega 8 . El acromosoma espermático. procedente del aparato de Golgi. En la incubación de los espermatozoides con el fin de inducir “in vitro” se requiere durante la capacitación espermática condiciones ambientales definidas de humedad y dióxido de carbono. desempeñan un papel esencial durante la RA. siendo la liberación inicial de acrosina un estimulador de la RA el responsable de la fijación del espermatozoide al ovocito. la membrana acrosómica se dobla. En los espermatozoides humanos es necesario que se produzca la RA.produciendo una activación de las fosfolipasas. Así una RA prematura implica un descenso de la fertilidad debido a la adhesión de los espermatozoides que sufren la RA después de atravesar el cúmulo ooforo son capaces de unirse a la membrana pelúcida. Durante la RA se produce la defenestración entre la membrana plasmática y acrosómica externa en la región apical y en el segmento principal del acrosoma por múltiples fusiones puntuales. mientras que el segmento ecuatorial permanece intacto durante todo el proceso. Dichas encimas. forma una envoltura acrosómica en cuyo interior existen una gran variedad de enzimas hidroliticas. De ello se encarga el test ARIC (Acrosomal Reaction Induction Challenger) que es utilizado actualmente con éxito como prueba diagnóstica de la capacidad fecundante de un eyaculado en semen humano. La sincronía entre ambos eventos es imprescindible para que la fecundación tenga lugar. Las encimas liberadas del acrosoma durante la RA facilitan el paso del espermatozoide a través del cúmulo ooforo y zona pelúcida. dando lugar a la penetración del ovocito. transcurriendo paralela por casi todo el territorio por el que se extiende. Debido a la posición del acrosoma en la cabeza espermática. debido principalmente a la acción de la fosfolipasa A2. como consecuencia de la capacitación. Reacción acrosómica La reacción acrosómica (RA) es un proceso exocítico dependiente del calcio.

siendo las concentraciones muy altas o bajas responsables de una mala respuesta acrosómica. los espermatozoides deben experimentar la RA para atravesar la ZP del ovocito. Se ha comprobado que el cúmulo expandido y la ZP de los ovocitos humanos contienen algunos factores capaces de inducir la RA en los espermatozoides capacitados del macho. Tras la interacción entre el receptor espermático y el estímulo procedente del ovocito. y activación de segundos mensajeros junto con la proteína Kinasa C y la fosfolipasa. El acromosoma es un gránulo de gran tamaño que contiene enzimas en forma de zimógeno. mientras que la fucosa. dando lugar a un aumento en la concentración intracelular del AMPc. L-glucosa y galactosa no ejercen esta acción sobre los espermatozoides. Algunas células pueden sufrir la RA de manera espontánea. lactosa. proponiéndose una posible regulación “in vivo” de la RA en espermatozoides. El AMPc. receptores de proteína G.lugar. y que se encuentra situado en la región apical de la cabeza del espermatozoide. puede retardar la aparición de la reacción acrosómica. produciéndose la pérdida del acrosoma. 9 . degradación de fosfoinositoles y formación de diacilglicerol (DAG) que actuaría como mensajero intracelular de la fusión entre la membrana acrosomal externa y la plasmática. La ZP estimula el aumento en la actividad de la adenilato ciclasa del espermatozoide. La glucosa. existiendo diversas experiencias que muestran la necesidad de moléculas especificas con el ovocito en la inducción de la RA. fundamentalmente hialuronidasa. bajo su membrana plasmática. En los mamíferos. el influjo de calcio aumenta el pH. La presencia de iones K+ en el medio es necesaria para que la RA tenga lugar. en las que se está investigando para desvelar su papel dentro de la funcionalidad espermática. desempeñan un papel principal. Esta elevación del AMPc precede a la RA. lo que sugiere que el AMPc pueda estar involucrado en la ruta de señales que lleva a la exocitosis del contenido acrosomal. está implicado en reacciones de fosforilación de proteínas espermáticas. se dispara la fusión de la membrana plasmática con la membrana acrosomal externa. por sustancias presentes en los fluidos próximos al ovocito tales como: líquido folecular cúmulo ooforo y células de la granulosa. Se han encontrado concentraciones de K+ entre 20 y 30 mM en fluidos procedentes del tracto de la hembra. La RA es inducida. en espermatozoides previamente capacitados. Como consecuencia de estos eventos se produce un incremento en la concentración de calcio intracelular.

ionóforo A23187 y heparina. requiriendo o no de una capacitación previa. tal es el caso de la progesterona presente en las células del cúmulo y en el fluido molecular. Por lo tanto la concentración de ionóforo y el tiempo de exposición. por lo que no existe uniformidad en el método utilizado por los diversos autores. de ahí la importancia distinción entre RA inducida y espontánea. 10 . siendo la determinación de la RA en espermatozoides y el test de hámster las pruebas más correlacionadas con el FIV. si bien existen detractores de esta primera técnica como método de predicción de la fertilidad. El efecto. (Zp2 y ZP3). inhibiendo los procesos fusogéneticos de membrana y de la RA.La peroxidación lipídica y los radicales libres reducen la fluidez de la membrana plasmática. Las técnicas de fecundación “in vitro” (FIV) analiza la capacidad fertilizante de un ayaculado. ZONA PELÚCIDA: La membrana pelúcida. El ionóforo A23187 el más utilizado en la inducción de la RA. Los indultos son utilizados “in vitro” con el fin de aumentar el porcentaje de espermatozoides potencialmente capaces de fecundar un ovocito. Dichas sustancias son utilizadas en pruebas diagnósticas de la capacidad fecundante de un eyaculado. tiene función biológica esencial. La reacción acrosómica inducida (fisiológica) y no la espontánea. Está compuesta por tres glicoproteínas (en algunas especies 4): ZP1. y 2) ejercen una acción negativa sobre la movilidad y viabilidad espermáica. IONÓFOROS: Moléculas capaces de estimular la RA en espermatozoides capacitados mediante la inducción de un flujo de calcio hacia el interior del espermatozoide 1) son moléculas potencialmente citotóxicas. ZP2 y ZP3. Los inductores de la reacción acrosómica Existen fluidos y moléculas capaces de inducir la reacción acrosómatica “in vivo” y/o “in vitro”. varía dependiendo de la especie y del medio utilizado. son moléculas de aspecto filamentoso unidas por ZP1. Los cambios de temperatura así como la congelación también inducen un aumento de la RA. ejercidos sobre los espermatozoides varía dependiendo de la concentración espermática y del nivel de proteínas presentes en el medio.

anterior a la RA (reacción acrosómica). presente en la zona pelúcida del ovocito. ZP1 y ZP2 son glicoproteínas estructurales. tales como la unión del espermatozoide. y por una enzima galactosil-transferasa localizada en la zona plasmática del espermatozoide. la de la reacción acrosómica. parece ser que el papel que desempeña le ZP1 es solamente estructural. 11 . Antes de atravesar la zona pelúcida. que acontece tras la RA. UNIÓN DE LA ZONA PELÚCIDA: UNIÓN PRIMARÍA Y SECUNDARÍA: La zona pelúcida presente en el momento de la fecundación. el bloqueo de la poliespermia y la protección frente a fundaciones interespecíficas : además de desempeñar una función protectora del ovocito y del embrión temprano. mientras que la glicoproteína ZP3 es la encargada del reconocimiento e inducción de la reacción acrosomática del espermatozoide. PENETRACIÓN DE LA ZONA PELÚCIDA Y FUSIÓN DE MEMBRANAS: Tras la RA y la unión a la ZP3. La presentación de la ZP se conseguiría mediante la acción coordinada de las enzimas acrosomales liberadas en la RA y la potente fuerza de empuje desarrollada por el movimiento del espermatozoide. Según la hipótesis propuesta por O´Rand et al. el espermatozoide atraviesa el espesor de la ZP para alcanzar el espacio perivitelino. intervienen la glicoproteína ZP2 y la proteína PH2. está involucrada la glicoproteína espermática ZP3. que agita la cola de lado a lado y la cabeza de delante a atrás. En la unión primaria del espermatozoide a la ZP. El papel que tiene la unión secundaria dentro del proceso de la fecundación es desconocido. unión mediada por la interacción entre moléculas con gran afinidad presentes en la superficie de ambos gametos. El reconocimiento entre ambos gametos esta mediado por un carbohidrato de la glicoproteína ZP3. el espermatozoide se ha de unir a la ZP de ovocito.más globular. desempeña funciones básicas en dicho proceso. mientras que en la unión secundaria. dando lugar a la formación de una retícula tridimensional. hasta la fecha. Por lo tanto hay que tener en cuenta que la membrana pelúcida es altamente específica. Los espermatozoides que no son capaces de reconocer y unirse a las glicoproteínas de la ZP o responder a la ZP sufriendo la reacción acrosómatica no fecundarán al ovocito.

LÍQUIDO FOLICULAR. Este proceso se conoce como reacción cortical o de zona. REACCIÓN CORTICAL: La activación del ovocito da lugar a la liberación hacia el espacio perivitelino del contenido de los gránulos corticales (GC). estableciendo la reacción cortical en esta especie. En el proceso de fusión está implicada una proteína presente en la membrana plasmática del espermatozoide. La entrada de la cabeza del espermatozoide en el citoplasma del ovocito va acompañada de la incorporación gradual de su cola. y se inicia en ese punto la fusión de ambas membranas. la bindina. Tras la fecundación los gránulos corticales desaparecen del ovocito. que permite el libre movimiento del espermatozoide una vez atraviesa la zona pelúcida. favoreciendo su fusión con la membrana del ovocito. La exocitosis de los GC provoca la inactivación por hidrólisis de la glicoproteína ZP3 (responsable de la unión primaria a la ZP y de la inducción de la RA de espermatozoide). y por otra a la modificación de las características fisicoquímicas de la zona pelúcida y de la membrana plasmática del ovocito. que ha quedado liberada tras desprenderse el acrosoma y que se unirá a la membrana del ovocito creando un canal por donde pasará el espermatozoide al interior del ovocito. la membrana plasmática de la cabeza del espermatozoide localizada sobre el segmento ecuatorial se une a la membrana plasmática del ovocito. por tanto. algunos son liberados mientras el ovocito se encuentra en el folículo ovárico y una vez maduro antes de ser fecundado esta exocitosis prematura contribuye a la formación del espacio perivitelino. Las enzimas hidroliticas y glicoproteínas liberadas modifican las características fisicoquímicas de la ZP de manera que se impide la entrada de nuevos espermatozoides y. Las mitocondrias maternas pasarán a la siguiente generación. la poliespermia. situados al final del periodo de maduración en posición periférica bajo la membrana plasmática del ovocito. liberando su contenido al exterior impidiendo así que otro espermatozoide pueda penetrar en el ovocito.Una vez en el espacio perivitelino. La fusión de membranas desencadena la activación del ovocito. OVIDUCTAL Y CELULAS DEL CÚMULO OOFORO: 12 . de modo que solo un espermatozoide con un movimiento vigoroso pudiera penetrarlo. Aunque la exocitosis de la mayoría de los GC se produce de forma explosiva tras la fusión de membranas.

La progesterona estimula la exocitosis de manera dosis-dependiente. antithrombina III. siendo utilizado en casos de infertilidad masculina como potenciador de la capacidad fecundante. Presentando unos buenos resultados de capacitación y RA. pues se ha observado en varias especies que aquéllos no capacitados y los que ya han sufrido la reacción acrosómica. Así los espermatozoides capacitados y con el acrosoma intacto son capaces de atravesar el cúmulus. Este hecho es contradictorio con la creencia inicial que suponía que el espermatozoide utilizaría las enzimas hidroliticas de su acrosoma. que el espermatozoide debe atravesar antes de penetrar al ovocito. El fluido oviductal es mejor que el folicular para el mantenimiento de la movilidad “in vitro”. PASO DEL ESPERMATOZOIDE A TRAVÉS DEL CÚMULUS: Los ovocitos están rodeados por unas cubiertas. Además. ayudado por su movimiento hiperactivo. siendo su acción similar a la encontrada en el liquido folecular. También es importante la acción del cumulo ooforo como potenciador de la RA. inhibidores de proteasas. El fluido oviductal desempeña un papel decisivo al final de la capacitación “in vivo”. liberadas tras la reacción acrosómica. Parece existir un receptor no genómico en la superficie del espermatozoide. lo que resulta en un incremento de la RA. PROGESTERONA: La progesterona induce el influjo de calcio hacia el interior del espermatozoide. la zona pelúcida y el cúmulus.Del fluido folicular ha mostrado la presencia de proteasas. para digerir el ácido hidráulico de la matriz extracelular del cúmulus. aunque pueden unirse a la superficie de las células del cúmulus. cuyo principal componente es el ácido hialurónico que se inserta a la ZP por su región fenestrada exterior. está constituido por las células del cúmulus y por una matriz extracelular. El flujo 13 . además de una amplia variedad de esteroides. Los espermatozoides deben estar capacitados y con el acrosoma intacto para atravesar el cúmulus. las células expandidas del cúmulus de ovocitos maduros mejoran la movilidad del espermatozoide. péctido natriurético auricular (PNA). no pueden atravesarlo. El cúmulus. Una proteína de superficie del espermatozoide denominada PH-20 es capaz de hidrolizar el ácido hialurónico y permitir al espermatozoide atravesar la densa capa de células del cúmulus. induciendo la RA.

incrementando el porcentaje de espermatozoides reaccionados. existiendo una posible acción sobre la fluidez de la membrana espermática mediante su interacción con receptores adenosínicos. El problema de esta metodología es el requerimiento de equipos costosos y un entrenamiento del personal técnico que imposibilita su uso rutinario y se restringe a determinados estudios. La pentoxifilina incrementa el porcentaje de RA y la movilidad espermática siendo su uso recomendado en eyaculados de baja movilidad. teofilina y pentoxifilina produce un aumento de la concentración de AMP-c debido a la inhibición de la fosfodiesterasa. cafeína. Los análogos del AMP-c estimulan la actividad de la protein-kinasa. EFECTO DE DISMINUCIÓN TÉRMICA: Estudios recientes muestran un aumento del porcentaje de RA. Técnicas de detección de la reacción acrosómica. Como consecuencia probablemente las bajas temperaturas inactivan la bomba de calcio. El análisis de los cambios ocurridos en el espermatozoide durante la reacción acrosómica bajo condiciones “in vivo” o “in vitro”. La utilización de xantina.de iones NA+ y la acción de una tripsin-proteasa parecen estar implicados en el mecanismo de acción de la progesterona. encargada de mantener los niveles de calcio intracelular bajos. La cafeína muestra efectos negativos sobre la viabilidad espermática debido a su acción como inhibidor de los mecanismos de reparación del DNA y su potencial mutagénico. requiere la utilización de diversos métodos de detección del estado del espermatozoide. La utilización de la microscopía de fluorescencia suele ir asociada a lectinas vegetales o anticuerpos unidos normalmente a marcadores fluorescentes que se pueden 14 . permitiendo un flujo de calcio e incrementando la RA. hiperactivación como la reacción acrosómica son procesos dependientes de AMP cíclico (AMP-c). La mayoría de estos estudios se basan en la utilización de técnicas de microscopía electrónica y de fluorescencia. correlacionado positivamente con el FIV. MODULADORES METABÓLICOS: La capacitación.

Por lo tanto. Canavalia Ensiformis(ConA). Con el tiempo se ha descrito una variante de esta tinción en la que se ha omitido el azul Tripán debido al tiempo que requiere su realización. Cabe resaltar entre las tinciones más utilizadas la triple tinción.…). una de las técnicas de mayor difusión entre los diversos equipos investigadores. estrés. Esto se refleja en el desarrollo de técnicas 15 . capacidad limitada con el uso de lectinas. un área cada vez más solicitada ante el crecimiento de la infertilidad. ropa ajustada. marrón Bismark y rosa de Bengala es capaz de clasificar los espermatozoides en cuatro categorías: vivos con acrosoma intacto. La eminente crecida de este problema en la sociedad moderna propiciada a su vez por agentes externos (móviles. Arachis hypogaea(PNA). tabaco. Los anticuerpos tienen la capacidad de unirse a receptores específicos presentes en la superficie de la membrana determinando la presencia o no del acrosoma. El estudio de estos dos procesos abre nuevas vías de investigación en el campo de la fecundación. Entre las más utilizadas en la detección de los procesos de capacitación encontramos: Pisum Sativum(PSA). Glycine ax(SBA) y Tricitum vulgaris(WGA). ha exigido una respuesta por parte del mundo científico. el uso de lectinas suele ir asociado a test vitales o a test de permeabilidad de membrana con el fin de diferenciar el estado del acrosoma en células viables y no viables. es actualmente. El uso de esta técnica permite la posibilidad de identificar el estado del acrosoma en presencia de glicoconjugados .dirigir contra el contenido acrosómico o contra la membrana del cromosoma. REFLEXIONES FINALES La capacitación y la reacción acrosómica es una parte esencial en la fecundación. Las lectinas determinan la presencia y distribución de determinados azúcares en la membrana plasmática o en la membrana acrosomal interna. Maclura pomífera(MPA). MIRAS A LA INVESTIGACIÓN. Como se ha dicho anteriormente también es frecuente el uso de anticuerpos monoclonales o policlonales. vivos reaccionados. descrita por primera vez por Talbot y Chacon en 1981 para semen humano. Por lo tanto debido a la complejidad de las técnicas anteriormente citadas la evaluación de la presencia o ausencia del acrosoma mediante tinciones para microscopía óptica de campo claro. muertos con acrosoma intacto y muertos reaccionados. Dicha técnica mediante el empleo de azul Tripán.

esto supone un desafío a la naturaleza. Dicho nombre proviene del hámster dorado dada la capacidad de su ovocito de. quinodermos. La fecundación in vitro heteróloga no implica que los espermatozoides puedan fecundar in vivo. Este hecho nos muestra una vez más la sabiduría de la naturaleza. diagnóstico prenatal. basada en la tendencia de los espermatozoides a moverse en una dirección determinada (ovocito) por la influencia de estímulos químicos. Aunque la fecundación entre distintas especies aun no sea viable. fusionarse con espermatozoides humanos después de ser capacitados “in vitro” y haber sufrido la reacción acrosómica. tras eliminar su zona pelúcida. podemos decir que el estudio de la capacitación y de la reacción acrosómica ha supuesto el desarrollo de nuevas técnicas que facilitan actualmente la fecundación. debido a que los receptores específicos de esta última no reconocen a los espermatozoides ajenos. el ser humano tiende a romper las leyes de la naturaleza como en el experimento del “Test de Hámster” Test de Hámster En este estudio se puede determinar la capacidad fecundante de los espermatozoides “in vitro”. En una especie marina. inseminación artificial. ¿Cómo sabe el espermatozoide cuál es su destino? Una de las hipótesis es la quimiotaxis.…) cuyo esperma es atraído por una sustancia química hasta los huevos. la reproducción de la capacitación en un laboratorio facilita a los investigadores información más rigurosa sobre las condiciones fisiológicas que se dan en el aparato reproductor femenino. Arbacia punctulata. Puntualizando. El espermatozoide recorre una larga distancia desde que es depositado en el trato cervical hasta que penetra en la zona pelúcida. La capacitación espermática se lleva a cabo en el tracto reproductor femenino.como la fecundación in vitro (FIV). No obstante. En resumen. implantación asistida. se ha conseguido aislar una 16 . La quimiotaxis está documentada en numerosas especies marinas (moluscos. La capacitación in vitro mejora la calidad de los estudios realizados y potencia la capacidad fecundante de un eyaculado. microeyección citoplasmática ICSI.… Para llevar a la práctica dichas técnicas es necesario inducir la capacitación acrosómica en el laboratorio mediante técnicas de cultivo y en condiciones ambientales determinadas. Para que se produzca con éxito el macho y la hembra deben ser del mismo sexo. en este caso para garantizar la perpetuación de la especie. fish.

Scott F.pdf 17 . confirmando así su naturaleza quimiotáctica.Moore Persaud.edu. . 33. pero no funcionó ya que solo la mitad de las microinyecciones del supuesto factor quimiotáctico derivó al desplazamiento del esperma a esa zona. 198.es/BUCM/tesis/19972000/X/3/X3050301. La quimiotaxis en el ser humano se encuentra por el momento en el campo de la especulación. 195. 204.uns. . “resact”.ar/plantilla. todavía queda mucho campo por descubrir. Elsevier. 32.Gilbert. 191. Sinauer Associates. 194. 665. BIBLIOGRAFÍA . 186. Developmental Biology 6th edition.asp? zona=modrepro .sustancia quimiotáctica. 2000. 187. Embriología clínica 7ª edición. Páginas 16. y es que. 31.http://www. 30. se mostró un hecho sorprendente. y entre esto se encuentra la capacitación y la reacción acrosómica. 192. . 664. 193. Panamericana.http://www. 2005. Sunderland. Cuando una gota de agua de mar junto al esperma es añadida al portaobjetos y le es inyectada el resact. se observa cómo el esperma migra hacia donde el resact ha sido inyectado. Aun con todo lo avanzado en los últimos tiempos. Páginas 613. En 1991 Ralt y compañeros suyos intentaron simular el experimento antes expuesto con esperma humano.ucm. en la mayoría de los casos. 29. 196. Páginas 185. Buenos Aires. Sin embargo. Madrid 2004. El “resact” difunde rápidamente en agua marina y tiene un gran efecto a bajas concentraciones cuando es añadida a una suspensión de esperma de Arbacia. Histología 3ª edición.anatomohistologia. hipotetizándo algunos autores que el ovocito secreta sustancias quimiotácticas en las últimas etapas de la migración del esperma ( Hunter 1989).Finn Geneser. 663. solo era fecundante el óvulo del que provenía fluido que había causado una reacción quimiotáctica.

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