BIOLOGÍA MOLECULAR Y CELULAR DE LA CAPACITACIÓN Y REACCIÓN ACROSÓMICA EN EL ESPERMATOZOIDE

REFLEXIONES FINALES 2 . ovidutal y células del cúmulo oóforo Paso del espermatozoide a través del cúmulus Progesterona Moduladores metabólicos Efecto de la disminución térmica o Técnicas de detección de la reacción acrosómica - MIRAS A LA INVESTIGACIÓN.ÍNDICE INTRODUCCIÓN - DESARROLLO o Capacitación o Capacitación “in vitro” o Reacción acrosómica o Los inductores de la reacción acrosómica    Ionóforos Zona pelúcida Unión de la zona pelúcida: unión primaria y unión secundaria        Penetración de la zona pelúcida y fusión de membranas Reacción cortical Líquido folicular.

que se reducen a la mitad por meiosis. hablamos de reproducción sexual o sexuada. y en mujeres ovogenia. Más concretamente. pasando por la reducción del número de cromosomas. Los gametos deberán encontrarse en la ampolla de la trompa uterina. donde se producirá la fecundación. y el cambio morfológico de la célula. seguida de la acción de barrido de las fimbrias y el peristaltismo de la pared de la trompa. por otro lado. en la que el semen llega a la parte prostática de la uretra. Trasporte de gametos. El ovocito secundario lo hará a través de la ovulación. que nos permita la creación de nuevas generaciones. El trasporte de los espermatozoides. En varones se denomina espermatogenia. o Eyaculación. por lo que debe de haber un mecanismo capaz de asegurar la perpetuación de la especie. definida por la producción de descendencia mediante la fusión de una célula sexual femenina (oocito) y una célula sexual masculina (espermatozoide). en nuestra especie. en la que el semen es expulsado de la uretra y depositado en el cuello uterino. al igual que todos los seres vivos. La gametogenia prepara dichas células para la fecundación. Para que esta fusión se pueda llevar a término es necesario que se den correctamente una serie de pasos: Gametogenia. tenemos un periodo de vida limitado. o Transporte en el aparato reproductor femenino. Ese mecanismo es la reproducción. propiciado principalmente por las contracciones musculares de las paredes de la 3 . se puede dividir en tres fases: o Emisión.- BIBLIOGRAFÍA BIOLOGÍA MOLECULAR Y CELULAR DE LA CAPACITACIÓN Y LA REACCIÓN ACROSÓMICA EN EL ESPERMATOZOIDE INTRODUCCIÓN Los seres humanos. proceso de formación y desarrollo de gametos (células germinativas especializadas).

En cuanto a la duración del proceso. En el proceso de fertilización es donde encontraríamos nuestra segunda materia de estudio. Los espermatozoides recién eyaculados no reúnen las condiciones adecuadas para fecundar el ovocito. Engloba cuatro eventos principales: o Contacto y reconocimiento entre espermatozoide y ovocito. cuando los espermatozoides entran en contacto con los elementos del tracto genital femenino. la reacción acrosómica.vagina y útero. no hay convenio entre los distintos autores. Es en esta fase en la que se da la capacitación del espermatozoide. se han de someter a un periodo de acondicionamiento en el que van a sufrir una serie de cambios estructurales y fisiológicos que les habilitará para sufrir la reacción acrosómica. Capacitación La capacitación comienza tras la eyaculación. 2004). Fertilización. El proceso de capacitación espermática es un proceso reversible que se debe a la habilidad de ciertas moléculas de disociarse y reasociarse con la membrana del 4 . 2005) y otros que aseguran las siete horas (Moore Persaud. siendo el resto inhibidos para tal efecto. procederemos a explicarlas en profundidad. DESARROLLO Una vez ubicados en su entorno la capacitación y la reacción acrosómica. o Activación del metabolismo del ovocito para comenzar el desarrollo. o Regulación de la entrada del espermatozoide al ovocito. Podría hablarse de la maduración final del gameto masculino promovida por los elementos del tracto femenino. encontrándose los que defienden las dos horas (Finn Geneser. Apuntar que solo un espermatozoide podrá entrar. Es el momento concreto en el que se produce la fusión de las dos células sexuales. vital para que entren en contacto espermatozoide y ovocito. o Fusión del material genético de ambos gametos.

Están presentes en el plasma seminal actuando como vesículas donadoras de colesterol y por tanto inhibiendo la capacitación. En cuanto a la membrana que recubre el flagelo. en el momento de la eyaculación y en el transcurso de la capacitación. el plasma seminal se elimina. siendo capaces de unir 2 o 3 más cantidad de colesterol que los aceptores presentes en el suero sanguíneo. y con él los factores decapacitantes. Estas moléculas son conocidas bajo el término de “factores de decapacitación” o “factores decapacitantes”. La membrana de la porción cefálica a su vez consta de tres regiones: Porción acrosomal: parte de membrana que recubre el acrosoma. Porción ecuatorial: donde las membranas acrosomal y plasmática se unen en la reacción acrosómica. redistribución de proteínas dependientes de calmodulina así como de otras moléculas y cambios en la composición de lípidos de la membrana. En este último se produce un aumento de la permeabilidad. Esta membrana está sometida a cambios tanto a su paso por el epidídimo.espermatozoide. siendo este compuesto 5 . Durante el paso del semen a través del tracto femenino. Entre los cambios a nivel fisiológico se encuentran los cambios en el metabolismo. Los agentes que estimulan su pérdida son los “factores capacitantes”. Esta afinidad se acentúa en presencia de bicarbonato. Porción post. produciéndose un descenso del colesterol con el consiguiente aumento de fosfolípidos. Pieza terminal.acrosómica: la membrana que recubre la última porción de cabeza. Antes de sumergirnos en la serie de cambios que se dan a nivel de membrana espermática es conveniente señalar que los espermatozoides constan de una membrana continua que queda dividida en cabeza y cola. Nos encontramos en el líquido folicular una albúmina y HDL con cierto grado de especificad. Se produce un aumento de la glucolisis y del consumo de O2. El descenso de colesterol en la membrana plasmática encuentra su razón en la presencia de proteínas captadoras de esteroles en el tracto femenino. distinguiremos dos dominios: Pieza intermedia. Diversos estudios han comprobado la relación existente entre la concentración de fosfolípidos y colesterol en la membrana con la concentración de albúmina en el medio.

que ha sido descrita como uno de los mecanismos que dan comienzo a la capacitación y reación acrosómica ya que produce lisofosfatidilcolina. tras producirse el desprendimiento de las mismas. lo que propicia la transducción de señales y la futura interacción entre los dos gametos. Ha sido demostrada también. la migración de proteínas supone la formación de zonas precursoras de la fusión de la membrana plasmática con la membrana acrosomal externa. De hecho. el K+ extracelular permite la capacitación espermática de manera secuencial. lo que hace que los espermatozoides presenten un gradiente negativo de colesterol hacia el exterior. La capacitación también involucra la liberación de otras sustancias de superficie de la membrana del espermatozoide. El incremento de la fluidez facilita el movimiento de proteínas y receptores. ya Loeb demostró en 1915 la necesidad del 6 .esencial durante la capacitación.ATPasa disminuye durante la capacitación permitiendo el aumento de la concentración de Na+ intracelular. En la capacitación. Un componente activo en la desestabilización de la membrana es la fosfolipasa A2. algunos investigadores afirman que la función de algunas de las sustancias que luego se desprenderán no es sino la de estabilizar la membrana hasta el momento que. A su vez. La eliminación de las sustancias de la cubierta y la reorganización de elementos conduce a la activación de receptores específicos para ligandos sobre la zona pelúcida que antes estaban enmascarados. aumenta gradualmente la inestabilidad de la membrana. la pérdida de los antígenos seminales de superficie ya que se ha observado. marcando dichos antígenos con carbono. que los espermatozoides recién eyaculados son aglutinados por los anticuerpos. A su vez. preparándose así para su fusión. mediante inmunocitoquímica. que va a ser el principal estimulador de la capacitación. La actividad de la enzima Na+. K+ y Ca2+. El desprendimiento de colesterol de la membrana se produce debido a la menor concentración de colesterol en las células del útero. En cuanto al Ca2+. Las modificaciones en la composición y estructura de la membrana espermática inducen cambios en la permeabilidad de iones. Entre ellas se encuentra la pérdida gradual de la cubierta glucoproteica ubicada sobre la región cefálica que el espermatozoide recibió durante su paso por el epidídimo y del plasma espermático. induciendo así la capacitación y un aumento de la fluidez de membrana. mientras que los que han permanecido previamente en el útero en condiciones capacitantes. que desestabiliza la membrana. empezará el proceso de reacción acrosómica. Las relaciones más importantes de iones en la capacitación se dan a nivel de Na+. K+ . no lo son.

y por lo tanto de los FD. gradientes de percoll. filtración en columnas de Sephadex y el dextrano. Se puede decir que entre las técnicas de recuperación de espermatozoides móviles más utilizadas encontramos el “swim-up”. medios de cultivo y condiciones ambientales determinadas. La hiperactivación es un proceso fisiológico asociado a la ovulación ya que será necesario para que los espermatozoides atraviesen la zona pelúcida. Entre las distintas metodologías de capacitación “in vitro” mencionadas anteriormente se considera la técnica de “swim up” como el método más sencillo y barato. Va precedido de las modificaciones ocurridas en la membrana y. En el ser humano. para reproducir con la mayor exactitud dicho proceso. Es característico de este proceso un movimiento de gran curvatura y amplitud de flagelo. pero no siempre que hay hipercinesis se da la capacitación ni la reacción acrosómica. Estas técnicas se basan en la inducción de la capacitación espermática debido a la eliminación del plasma seminal. Un dato a resaltar es que siempre que hay capacitación se da la hiperactivación. Los medios de incubación utilizados en la inducción de la capacitación “in vitro” poseen una alta fuerza iónica con el objetivo de desplazar los FD. por lo que se ha intentado extrapolar dicho proceso a un laboratorio mediante técnicas. el aumento de Ca2+ será necesario para que se dé la “hiperactivación”. Capacitación in vitro El estudio de la capacitación espermática de manera fisiológica en el tracto reproductor femenino (in vivo) es de gran dificultad. El desarrollo de estas técnicas capaces de recuperar los espermatozoides móviles. La utilización de Ca2+ ionóforo ó dibutiril AMP cíclico aceleran la capacitación y la aparición de la HA. incrementando el flujo de calcio hacia el interior de las células espermáticas y 7 . pero con una disminución del porcentaje de linealidad y velocidad lineal. requiere de la presencia de Ca2+. así como de un aumento de la amplitud de desplazamiento lateral de la cabeza y velocidad curvilínea. como se ha puntualizado. activando los procesos de HA y RA. Esta técnica es la que denominamos capacitación “in vitro”.Ca2+ extracelular para aumentar la fertilidad en estrellas de mar. y pH alcalino responsable de apartar las proteínas de la superficie de la membrana plasmática. nos permite seleccionar aquellas células espermáticas con mayor movilidad y capacidad fecundante para ser posteriormente aplicables en programas de inseminación intrauterina (IU) y FIV.

Así una RA prematura implica un descenso de la fertilidad debido a la adhesión de los espermatozoides que sufren la RA después de atravesar el cúmulo ooforo son capaces de unirse a la membrana pelúcida. En la incubación de los espermatozoides con el fin de inducir “in vitro” se requiere durante la capacitación espermática condiciones ambientales definidas de humedad y dióxido de carbono. procedente del aparato de Golgi. La sincronía entre ambos eventos es imprescindible para que la fecundación tenga lugar. Las encimas liberadas del acrosoma durante la RA facilitan el paso del espermatozoide a través del cúmulo ooforo y zona pelúcida. En los espermatozoides humanos es necesario que se produzca la RA. siendo la liberación inicial de acrosina un estimulador de la RA el responsable de la fijación del espermatozoide al ovocito. forma una envoltura acrosómica en cuyo interior existen una gran variedad de enzimas hidroliticas. la utilización de inductores de la reacción acrosómica junto con técnicas de capacitación “in vitro” nos permite obtener mayor información sobre posibles disfunciones de la capacidad fecundante del espermatozoide. dando lugar a la penetración del ovocito. Durante la RA se produce la defenestración entre la membrana plasmática y acrosómica externa en la región apical y en el segmento principal del acrosoma por múltiples fusiones puntuales. transcurriendo paralela por casi todo el territorio por el que se extiende. El acromosoma espermático. para que la fusión con la membrana pelúcida tega 8 . la membrana acrosómica se dobla. desempeñan un papel esencial durante la RA. como consecuencia de la capacitación. De ello se encarga el test ARIC (Acrosomal Reaction Induction Challenger) que es utilizado actualmente con éxito como prueba diagnóstica de la capacidad fecundante de un eyaculado en semen humano. debido principalmente a la acción de la fosfolipasa A2. En el día de hoy.produciendo una activación de las fosfolipasas. Reacción acrosómica La reacción acrosómica (RA) es un proceso exocítico dependiente del calcio. Dichas encimas. Debido a la posición del acrosoma en la cabeza espermática. mientras que el segmento ecuatorial permanece intacto durante todo el proceso.

La ZP estimula el aumento en la actividad de la adenilato ciclasa del espermatozoide. La glucosa. lo que sugiere que el AMPc pueda estar involucrado en la ruta de señales que lleva a la exocitosis del contenido acrosomal. desempeñan un papel principal. Algunas células pueden sufrir la RA de manera espontánea. Como consecuencia de estos eventos se produce un incremento en la concentración de calcio intracelular. por sustancias presentes en los fluidos próximos al ovocito tales como: líquido folecular cúmulo ooforo y células de la granulosa. En los mamíferos. existiendo diversas experiencias que muestran la necesidad de moléculas especificas con el ovocito en la inducción de la RA. degradación de fosfoinositoles y formación de diacilglicerol (DAG) que actuaría como mensajero intracelular de la fusión entre la membrana acrosomal externa y la plasmática. bajo su membrana plasmática. 9 . El AMPc.lugar. proponiéndose una posible regulación “in vivo” de la RA en espermatozoides. los espermatozoides deben experimentar la RA para atravesar la ZP del ovocito. La presencia de iones K+ en el medio es necesaria para que la RA tenga lugar. está implicado en reacciones de fosforilación de proteínas espermáticas. lactosa. El acromosoma es un gránulo de gran tamaño que contiene enzimas en forma de zimógeno. dando lugar a un aumento en la concentración intracelular del AMPc. mientras que la fucosa. receptores de proteína G. y activación de segundos mensajeros junto con la proteína Kinasa C y la fosfolipasa. fundamentalmente hialuronidasa. Se ha comprobado que el cúmulo expandido y la ZP de los ovocitos humanos contienen algunos factores capaces de inducir la RA en los espermatozoides capacitados del macho. La RA es inducida. Esta elevación del AMPc precede a la RA. Tras la interacción entre el receptor espermático y el estímulo procedente del ovocito. en las que se está investigando para desvelar su papel dentro de la funcionalidad espermática. y que se encuentra situado en la región apical de la cabeza del espermatozoide. L-glucosa y galactosa no ejercen esta acción sobre los espermatozoides. siendo las concentraciones muy altas o bajas responsables de una mala respuesta acrosómica. puede retardar la aparición de la reacción acrosómica. se dispara la fusión de la membrana plasmática con la membrana acrosomal externa. el influjo de calcio aumenta el pH. produciéndose la pérdida del acrosoma. en espermatozoides previamente capacitados. Se han encontrado concentraciones de K+ entre 20 y 30 mM en fluidos procedentes del tracto de la hembra.

tal es el caso de la progesterona presente en las células del cúmulo y en el fluido molecular. Los inductores de la reacción acrosómica Existen fluidos y moléculas capaces de inducir la reacción acrosómatica “in vivo” y/o “in vitro”. Dichas sustancias son utilizadas en pruebas diagnósticas de la capacidad fecundante de un eyaculado. La reacción acrosómica inducida (fisiológica) y no la espontánea. requiriendo o no de una capacitación previa. son moléculas de aspecto filamentoso unidas por ZP1. tiene función biológica esencial. siendo la determinación de la RA en espermatozoides y el test de hámster las pruebas más correlacionadas con el FIV. de ahí la importancia distinción entre RA inducida y espontánea. ZP2 y ZP3. si bien existen detractores de esta primera técnica como método de predicción de la fertilidad. 10 . ionóforo A23187 y heparina. ZONA PELÚCIDA: La membrana pelúcida. inhibiendo los procesos fusogéneticos de membrana y de la RA. varía dependiendo de la especie y del medio utilizado. El efecto. Los cambios de temperatura así como la congelación también inducen un aumento de la RA. (Zp2 y ZP3). por lo que no existe uniformidad en el método utilizado por los diversos autores. Por lo tanto la concentración de ionóforo y el tiempo de exposición. ejercidos sobre los espermatozoides varía dependiendo de la concentración espermática y del nivel de proteínas presentes en el medio. y 2) ejercen una acción negativa sobre la movilidad y viabilidad espermáica. El ionóforo A23187 el más utilizado en la inducción de la RA. Las técnicas de fecundación “in vitro” (FIV) analiza la capacidad fertilizante de un ayaculado. Los indultos son utilizados “in vitro” con el fin de aumentar el porcentaje de espermatozoides potencialmente capaces de fecundar un ovocito. IONÓFOROS: Moléculas capaces de estimular la RA en espermatozoides capacitados mediante la inducción de un flujo de calcio hacia el interior del espermatozoide 1) son moléculas potencialmente citotóxicas.La peroxidación lipídica y los radicales libres reducen la fluidez de la membrana plasmática. Está compuesta por tres glicoproteínas (en algunas especies 4): ZP1.

el espermatozoide se ha de unir a la ZP de ovocito. Antes de atravesar la zona pelúcida. El reconocimiento entre ambos gametos esta mediado por un carbohidrato de la glicoproteína ZP3. tales como la unión del espermatozoide. parece ser que el papel que desempeña le ZP1 es solamente estructural. el bloqueo de la poliespermia y la protección frente a fundaciones interespecíficas : además de desempeñar una función protectora del ovocito y del embrión temprano. presente en la zona pelúcida del ovocito. mientras que la glicoproteína ZP3 es la encargada del reconocimiento e inducción de la reacción acrosomática del espermatozoide. intervienen la glicoproteína ZP2 y la proteína PH2. el espermatozoide atraviesa el espesor de la ZP para alcanzar el espacio perivitelino. desempeña funciones básicas en dicho proceso. que agita la cola de lado a lado y la cabeza de delante a atrás. El papel que tiene la unión secundaria dentro del proceso de la fecundación es desconocido. UNIÓN DE LA ZONA PELÚCIDA: UNIÓN PRIMARÍA Y SECUNDARÍA: La zona pelúcida presente en el momento de la fecundación. Por lo tanto hay que tener en cuenta que la membrana pelúcida es altamente específica. ZP1 y ZP2 son glicoproteínas estructurales. En la unión primaria del espermatozoide a la ZP. unión mediada por la interacción entre moléculas con gran afinidad presentes en la superficie de ambos gametos. Los espermatozoides que no son capaces de reconocer y unirse a las glicoproteínas de la ZP o responder a la ZP sufriendo la reacción acrosómatica no fecundarán al ovocito.más globular. 11 . la de la reacción acrosómica. que acontece tras la RA. La presentación de la ZP se conseguiría mediante la acción coordinada de las enzimas acrosomales liberadas en la RA y la potente fuerza de empuje desarrollada por el movimiento del espermatozoide. anterior a la RA (reacción acrosómica). está involucrada la glicoproteína espermática ZP3. y por una enzima galactosil-transferasa localizada en la zona plasmática del espermatozoide. mientras que en la unión secundaria. PENETRACIÓN DE LA ZONA PELÚCIDA Y FUSIÓN DE MEMBRANAS: Tras la RA y la unión a la ZP3. dando lugar a la formación de una retícula tridimensional. hasta la fecha. Según la hipótesis propuesta por O´Rand et al.

liberando su contenido al exterior impidiendo así que otro espermatozoide pueda penetrar en el ovocito. Tras la fecundación los gránulos corticales desaparecen del ovocito. y se inicia en ese punto la fusión de ambas membranas. la membrana plasmática de la cabeza del espermatozoide localizada sobre el segmento ecuatorial se une a la membrana plasmática del ovocito. por tanto. Las enzimas hidroliticas y glicoproteínas liberadas modifican las características fisicoquímicas de la ZP de manera que se impide la entrada de nuevos espermatozoides y. En el proceso de fusión está implicada una proteína presente en la membrana plasmática del espermatozoide.Una vez en el espacio perivitelino. la poliespermia. favoreciendo su fusión con la membrana del ovocito. Las mitocondrias maternas pasarán a la siguiente generación. algunos son liberados mientras el ovocito se encuentra en el folículo ovárico y una vez maduro antes de ser fecundado esta exocitosis prematura contribuye a la formación del espacio perivitelino. La entrada de la cabeza del espermatozoide en el citoplasma del ovocito va acompañada de la incorporación gradual de su cola. La fusión de membranas desencadena la activación del ovocito. la bindina. estableciendo la reacción cortical en esta especie. que permite el libre movimiento del espermatozoide una vez atraviesa la zona pelúcida. situados al final del periodo de maduración en posición periférica bajo la membrana plasmática del ovocito. que ha quedado liberada tras desprenderse el acrosoma y que se unirá a la membrana del ovocito creando un canal por donde pasará el espermatozoide al interior del ovocito. La exocitosis de los GC provoca la inactivación por hidrólisis de la glicoproteína ZP3 (responsable de la unión primaria a la ZP y de la inducción de la RA de espermatozoide). Aunque la exocitosis de la mayoría de los GC se produce de forma explosiva tras la fusión de membranas. LÍQUIDO FOLICULAR. y por otra a la modificación de las características fisicoquímicas de la zona pelúcida y de la membrana plasmática del ovocito. Este proceso se conoce como reacción cortical o de zona. OVIDUCTAL Y CELULAS DEL CÚMULO OOFORO: 12 . de modo que solo un espermatozoide con un movimiento vigoroso pudiera penetrarlo. REACCIÓN CORTICAL: La activación del ovocito da lugar a la liberación hacia el espacio perivitelino del contenido de los gránulos corticales (GC).

Parece existir un receptor no genómico en la superficie del espermatozoide. El flujo 13 . Una proteína de superficie del espermatozoide denominada PH-20 es capaz de hidrolizar el ácido hialurónico y permitir al espermatozoide atravesar la densa capa de células del cúmulus. liberadas tras la reacción acrosómica. siendo su acción similar a la encontrada en el liquido folecular. que el espermatozoide debe atravesar antes de penetrar al ovocito. ayudado por su movimiento hiperactivo. inhibidores de proteasas. La progesterona estimula la exocitosis de manera dosis-dependiente. antithrombina III. para digerir el ácido hidráulico de la matriz extracelular del cúmulus. está constituido por las células del cúmulus y por una matriz extracelular. lo que resulta en un incremento de la RA. Presentando unos buenos resultados de capacitación y RA. siendo utilizado en casos de infertilidad masculina como potenciador de la capacidad fecundante. Los espermatozoides deben estar capacitados y con el acrosoma intacto para atravesar el cúmulus. péctido natriurético auricular (PNA). cuyo principal componente es el ácido hialurónico que se inserta a la ZP por su región fenestrada exterior. El fluido oviductal es mejor que el folicular para el mantenimiento de la movilidad “in vitro”. pues se ha observado en varias especies que aquéllos no capacitados y los que ya han sufrido la reacción acrosómica. induciendo la RA. PASO DEL ESPERMATOZOIDE A TRAVÉS DEL CÚMULUS: Los ovocitos están rodeados por unas cubiertas. Además. Así los espermatozoides capacitados y con el acrosoma intacto son capaces de atravesar el cúmulus. El cúmulus. aunque pueden unirse a la superficie de las células del cúmulus. además de una amplia variedad de esteroides. la zona pelúcida y el cúmulus. También es importante la acción del cumulo ooforo como potenciador de la RA.Del fluido folicular ha mostrado la presencia de proteasas. no pueden atravesarlo. Este hecho es contradictorio con la creencia inicial que suponía que el espermatozoide utilizaría las enzimas hidroliticas de su acrosoma. El fluido oviductal desempeña un papel decisivo al final de la capacitación “in vivo”. PROGESTERONA: La progesterona induce el influjo de calcio hacia el interior del espermatozoide. las células expandidas del cúmulus de ovocitos maduros mejoran la movilidad del espermatozoide.

incrementando el porcentaje de espermatozoides reaccionados. Como consecuencia probablemente las bajas temperaturas inactivan la bomba de calcio. existiendo una posible acción sobre la fluidez de la membrana espermática mediante su interacción con receptores adenosínicos. Los análogos del AMP-c estimulan la actividad de la protein-kinasa. Técnicas de detección de la reacción acrosómica. El análisis de los cambios ocurridos en el espermatozoide durante la reacción acrosómica bajo condiciones “in vivo” o “in vitro”. requiere la utilización de diversos métodos de detección del estado del espermatozoide. cafeína. EFECTO DE DISMINUCIÓN TÉRMICA: Estudios recientes muestran un aumento del porcentaje de RA. permitiendo un flujo de calcio e incrementando la RA. encargada de mantener los niveles de calcio intracelular bajos. hiperactivación como la reacción acrosómica son procesos dependientes de AMP cíclico (AMP-c). MODULADORES METABÓLICOS: La capacitación.de iones NA+ y la acción de una tripsin-proteasa parecen estar implicados en el mecanismo de acción de la progesterona. correlacionado positivamente con el FIV. teofilina y pentoxifilina produce un aumento de la concentración de AMP-c debido a la inhibición de la fosfodiesterasa. La utilización de la microscopía de fluorescencia suele ir asociada a lectinas vegetales o anticuerpos unidos normalmente a marcadores fluorescentes que se pueden 14 . El problema de esta metodología es el requerimiento de equipos costosos y un entrenamiento del personal técnico que imposibilita su uso rutinario y se restringe a determinados estudios. La pentoxifilina incrementa el porcentaje de RA y la movilidad espermática siendo su uso recomendado en eyaculados de baja movilidad. La cafeína muestra efectos negativos sobre la viabilidad espermática debido a su acción como inhibidor de los mecanismos de reparación del DNA y su potencial mutagénico. La mayoría de estos estudios se basan en la utilización de técnicas de microscopía electrónica y de fluorescencia. La utilización de xantina.

ropa ajustada. La eminente crecida de este problema en la sociedad moderna propiciada a su vez por agentes externos (móviles. vivos reaccionados.dirigir contra el contenido acrosómico o contra la membrana del cromosoma. Glycine ax(SBA) y Tricitum vulgaris(WGA). marrón Bismark y rosa de Bengala es capaz de clasificar los espermatozoides en cuatro categorías: vivos con acrosoma intacto. Canavalia Ensiformis(ConA). Los anticuerpos tienen la capacidad de unirse a receptores específicos presentes en la superficie de la membrana determinando la presencia o no del acrosoma. Cabe resaltar entre las tinciones más utilizadas la triple tinción. un área cada vez más solicitada ante el crecimiento de la infertilidad. Las lectinas determinan la presencia y distribución de determinados azúcares en la membrana plasmática o en la membrana acrosomal interna. MIRAS A LA INVESTIGACIÓN. estrés. una de las técnicas de mayor difusión entre los diversos equipos investigadores. el uso de lectinas suele ir asociado a test vitales o a test de permeabilidad de membrana con el fin de diferenciar el estado del acrosoma en células viables y no viables. es actualmente. Con el tiempo se ha descrito una variante de esta tinción en la que se ha omitido el azul Tripán debido al tiempo que requiere su realización. capacidad limitada con el uso de lectinas. Por lo tanto. Esto se refleja en el desarrollo de técnicas 15 . ha exigido una respuesta por parte del mundo científico. Como se ha dicho anteriormente también es frecuente el uso de anticuerpos monoclonales o policlonales. tabaco.…). El estudio de estos dos procesos abre nuevas vías de investigación en el campo de la fecundación. descrita por primera vez por Talbot y Chacon en 1981 para semen humano. Arachis hypogaea(PNA). Dicha técnica mediante el empleo de azul Tripán. El uso de esta técnica permite la posibilidad de identificar el estado del acrosoma en presencia de glicoconjugados . muertos con acrosoma intacto y muertos reaccionados. REFLEXIONES FINALES La capacitación y la reacción acrosómica es una parte esencial en la fecundación. Entre las más utilizadas en la detección de los procesos de capacitación encontramos: Pisum Sativum(PSA). Por lo tanto debido a la complejidad de las técnicas anteriormente citadas la evaluación de la presencia o ausencia del acrosoma mediante tinciones para microscopía óptica de campo claro. Maclura pomífera(MPA).

En resumen. inseminación artificial. basada en la tendencia de los espermatozoides a moverse en una dirección determinada (ovocito) por la influencia de estímulos químicos. En una especie marina. La capacitación in vitro mejora la calidad de los estudios realizados y potencia la capacidad fecundante de un eyaculado. Este hecho nos muestra una vez más la sabiduría de la naturaleza. Para que se produzca con éxito el macho y la hembra deben ser del mismo sexo. el ser humano tiende a romper las leyes de la naturaleza como en el experimento del “Test de Hámster” Test de Hámster En este estudio se puede determinar la capacidad fecundante de los espermatozoides “in vitro”. la reproducción de la capacitación en un laboratorio facilita a los investigadores información más rigurosa sobre las condiciones fisiológicas que se dan en el aparato reproductor femenino. podemos decir que el estudio de la capacitación y de la reacción acrosómica ha supuesto el desarrollo de nuevas técnicas que facilitan actualmente la fecundación. fusionarse con espermatozoides humanos después de ser capacitados “in vitro” y haber sufrido la reacción acrosómica. Puntualizando. se ha conseguido aislar una 16 . El espermatozoide recorre una larga distancia desde que es depositado en el trato cervical hasta que penetra en la zona pelúcida. La fecundación in vitro heteróloga no implica que los espermatozoides puedan fecundar in vivo. La capacitación espermática se lleva a cabo en el tracto reproductor femenino. esto supone un desafío a la naturaleza. tras eliminar su zona pelúcida.… Para llevar a la práctica dichas técnicas es necesario inducir la capacitación acrosómica en el laboratorio mediante técnicas de cultivo y en condiciones ambientales determinadas. ¿Cómo sabe el espermatozoide cuál es su destino? Una de las hipótesis es la quimiotaxis. Arbacia punctulata. diagnóstico prenatal. La quimiotaxis está documentada en numerosas especies marinas (moluscos. No obstante. Aunque la fecundación entre distintas especies aun no sea viable. implantación asistida.…) cuyo esperma es atraído por una sustancia química hasta los huevos. microeyección citoplasmática ICSI. debido a que los receptores específicos de esta última no reconocen a los espermatozoides ajenos. quinodermos. en este caso para garantizar la perpetuación de la especie.como la fecundación in vitro (FIV). Dicho nombre proviene del hámster dorado dada la capacidad de su ovocito de. fish.

ar/plantilla. 665. 198. todavía queda mucho campo por descubrir.es/BUCM/tesis/19972000/X/3/X3050301. 186. 33. Panamericana. Elsevier. hipotetizándo algunos autores que el ovocito secreta sustancias quimiotácticas en las últimas etapas de la migración del esperma ( Hunter 1989). Páginas 185. .sustancia quimiotáctica.http://www. 193.Scott F. 32. confirmando así su naturaleza quimiotáctica. .Moore Persaud. pero no funcionó ya que solo la mitad de las microinyecciones del supuesto factor quimiotáctico derivó al desplazamiento del esperma a esa zona. En 1991 Ralt y compañeros suyos intentaron simular el experimento antes expuesto con esperma humano. Embriología clínica 7ª edición. se mostró un hecho sorprendente. Sunderland. Histología 3ª edición. El “resact” difunde rápidamente en agua marina y tiene un gran efecto a bajas concentraciones cuando es añadida a una suspensión de esperma de Arbacia. Cuando una gota de agua de mar junto al esperma es añadida al portaobjetos y le es inyectada el resact. 195.edu. 196. 2000.ucm.Finn Geneser. Developmental Biology 6th edition.pdf 17 . en la mayoría de los casos.anatomohistologia. 204. y entre esto se encuentra la capacitación y la reacción acrosómica. Páginas 16.asp? zona=modrepro . 30.Gilbert. 31. solo era fecundante el óvulo del que provenía fluido que había causado una reacción quimiotáctica. “resact”. Buenos Aires. Páginas 613. 187. 29. BIBLIOGRAFÍA . Madrid 2004. 2005. y es que. Sinauer Associates. Aun con todo lo avanzado en los últimos tiempos. La quimiotaxis en el ser humano se encuentra por el momento en el campo de la especulación.http://www. 192. 663. 191. Sin embargo. 194.uns. . 664. se observa cómo el esperma migra hacia donde el resact ha sido inyectado.

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