BIOLOGÍA MOLECULAR Y CELULAR DE LA CAPACITACIÓN Y REACCIÓN ACROSÓMICA EN EL ESPERMATOZOIDE

ovidutal y células del cúmulo oóforo Paso del espermatozoide a través del cúmulus Progesterona Moduladores metabólicos Efecto de la disminución térmica o Técnicas de detección de la reacción acrosómica - MIRAS A LA INVESTIGACIÓN. REFLEXIONES FINALES 2 .ÍNDICE INTRODUCCIÓN - DESARROLLO o Capacitación o Capacitación “in vitro” o Reacción acrosómica o Los inductores de la reacción acrosómica    Ionóforos Zona pelúcida Unión de la zona pelúcida: unión primaria y unión secundaria        Penetración de la zona pelúcida y fusión de membranas Reacción cortical Líquido folicular.

definida por la producción de descendencia mediante la fusión de una célula sexual femenina (oocito) y una célula sexual masculina (espermatozoide). y en mujeres ovogenia. pasando por la reducción del número de cromosomas.- BIBLIOGRAFÍA BIOLOGÍA MOLECULAR Y CELULAR DE LA CAPACITACIÓN Y LA REACCIÓN ACROSÓMICA EN EL ESPERMATOZOIDE INTRODUCCIÓN Los seres humanos. El trasporte de los espermatozoides. propiciado principalmente por las contracciones musculares de las paredes de la 3 . En varones se denomina espermatogenia. que se reducen a la mitad por meiosis. El ovocito secundario lo hará a través de la ovulación. en nuestra especie. Más concretamente. La gametogenia prepara dichas células para la fecundación. o Transporte en el aparato reproductor femenino. y el cambio morfológico de la célula. proceso de formación y desarrollo de gametos (células germinativas especializadas). por lo que debe de haber un mecanismo capaz de asegurar la perpetuación de la especie. al igual que todos los seres vivos. por otro lado. seguida de la acción de barrido de las fimbrias y el peristaltismo de la pared de la trompa. Ese mecanismo es la reproducción. donde se producirá la fecundación. tenemos un periodo de vida limitado. o Eyaculación. Para que esta fusión se pueda llevar a término es necesario que se den correctamente una serie de pasos: Gametogenia. Trasporte de gametos. en la que el semen llega a la parte prostática de la uretra. en la que el semen es expulsado de la uretra y depositado en el cuello uterino. hablamos de reproducción sexual o sexuada. Los gametos deberán encontrarse en la ampolla de la trompa uterina. que nos permita la creación de nuevas generaciones. se puede dividir en tres fases: o Emisión.

la reacción acrosómica. Es el momento concreto en el que se produce la fusión de las dos células sexuales. En el proceso de fertilización es donde encontraríamos nuestra segunda materia de estudio.vagina y útero. Es en esta fase en la que se da la capacitación del espermatozoide. o Regulación de la entrada del espermatozoide al ovocito. Fertilización. El proceso de capacitación espermática es un proceso reversible que se debe a la habilidad de ciertas moléculas de disociarse y reasociarse con la membrana del 4 . se han de someter a un periodo de acondicionamiento en el que van a sufrir una serie de cambios estructurales y fisiológicos que les habilitará para sufrir la reacción acrosómica. o Fusión del material genético de ambos gametos. siendo el resto inhibidos para tal efecto. cuando los espermatozoides entran en contacto con los elementos del tracto genital femenino. vital para que entren en contacto espermatozoide y ovocito. 2005) y otros que aseguran las siete horas (Moore Persaud. Podría hablarse de la maduración final del gameto masculino promovida por los elementos del tracto femenino. o Activación del metabolismo del ovocito para comenzar el desarrollo. no hay convenio entre los distintos autores. Los espermatozoides recién eyaculados no reúnen las condiciones adecuadas para fecundar el ovocito. procederemos a explicarlas en profundidad. En cuanto a la duración del proceso. DESARROLLO Una vez ubicados en su entorno la capacitación y la reacción acrosómica. 2004). Capacitación La capacitación comienza tras la eyaculación. Engloba cuatro eventos principales: o Contacto y reconocimiento entre espermatozoide y ovocito. encontrándose los que defienden las dos horas (Finn Geneser. Apuntar que solo un espermatozoide podrá entrar.

Antes de sumergirnos en la serie de cambios que se dan a nivel de membrana espermática es conveniente señalar que los espermatozoides constan de una membrana continua que queda dividida en cabeza y cola. en el momento de la eyaculación y en el transcurso de la capacitación. Entre los cambios a nivel fisiológico se encuentran los cambios en el metabolismo. Los agentes que estimulan su pérdida son los “factores capacitantes”.acrosómica: la membrana que recubre la última porción de cabeza. En este último se produce un aumento de la permeabilidad. Se produce un aumento de la glucolisis y del consumo de O2.espermatozoide. Estas moléculas son conocidas bajo el término de “factores de decapacitación” o “factores decapacitantes”. distinguiremos dos dominios: Pieza intermedia. siendo capaces de unir 2 o 3 más cantidad de colesterol que los aceptores presentes en el suero sanguíneo. Están presentes en el plasma seminal actuando como vesículas donadoras de colesterol y por tanto inhibiendo la capacitación. redistribución de proteínas dependientes de calmodulina así como de otras moléculas y cambios en la composición de lípidos de la membrana. Esta membrana está sometida a cambios tanto a su paso por el epidídimo. Pieza terminal. En cuanto a la membrana que recubre el flagelo. y con él los factores decapacitantes. produciéndose un descenso del colesterol con el consiguiente aumento de fosfolípidos. Esta afinidad se acentúa en presencia de bicarbonato. siendo este compuesto 5 . Diversos estudios han comprobado la relación existente entre la concentración de fosfolípidos y colesterol en la membrana con la concentración de albúmina en el medio. La membrana de la porción cefálica a su vez consta de tres regiones: Porción acrosomal: parte de membrana que recubre el acrosoma. Porción post. el plasma seminal se elimina. Porción ecuatorial: donde las membranas acrosomal y plasmática se unen en la reacción acrosómica. El descenso de colesterol en la membrana plasmática encuentra su razón en la presencia de proteínas captadoras de esteroles en el tracto femenino. Durante el paso del semen a través del tracto femenino. Nos encontramos en el líquido folicular una albúmina y HDL con cierto grado de especificad.

la migración de proteínas supone la formación de zonas precursoras de la fusión de la membrana plasmática con la membrana acrosomal externa.esencial durante la capacitación. ya Loeb demostró en 1915 la necesidad del 6 . Entre ellas se encuentra la pérdida gradual de la cubierta glucoproteica ubicada sobre la región cefálica que el espermatozoide recibió durante su paso por el epidídimo y del plasma espermático. La capacitación también involucra la liberación de otras sustancias de superficie de la membrana del espermatozoide. no lo son. A su vez. que los espermatozoides recién eyaculados son aglutinados por los anticuerpos. K+ . En la capacitación. empezará el proceso de reacción acrosómica. algunos investigadores afirman que la función de algunas de las sustancias que luego se desprenderán no es sino la de estabilizar la membrana hasta el momento que. Las relaciones más importantes de iones en la capacitación se dan a nivel de Na+. la pérdida de los antígenos seminales de superficie ya que se ha observado. La actividad de la enzima Na+. El incremento de la fluidez facilita el movimiento de proteínas y receptores. induciendo así la capacitación y un aumento de la fluidez de membrana. lo que hace que los espermatozoides presenten un gradiente negativo de colesterol hacia el exterior. lo que propicia la transducción de señales y la futura interacción entre los dos gametos. En cuanto al Ca2+. preparándose así para su fusión. mediante inmunocitoquímica. marcando dichos antígenos con carbono. A su vez. El desprendimiento de colesterol de la membrana se produce debido a la menor concentración de colesterol en las células del útero. que va a ser el principal estimulador de la capacitación. De hecho. Un componente activo en la desestabilización de la membrana es la fosfolipasa A2. el K+ extracelular permite la capacitación espermática de manera secuencial. Ha sido demostrada también. aumenta gradualmente la inestabilidad de la membrana. que desestabiliza la membrana. Las modificaciones en la composición y estructura de la membrana espermática inducen cambios en la permeabilidad de iones. La eliminación de las sustancias de la cubierta y la reorganización de elementos conduce a la activación de receptores específicos para ligandos sobre la zona pelúcida que antes estaban enmascarados.ATPasa disminuye durante la capacitación permitiendo el aumento de la concentración de Na+ intracelular. que ha sido descrita como uno de los mecanismos que dan comienzo a la capacitación y reación acrosómica ya que produce lisofosfatidilcolina. K+ y Ca2+. tras producirse el desprendimiento de las mismas. mientras que los que han permanecido previamente en el útero en condiciones capacitantes.

y por lo tanto de los FD.Ca2+ extracelular para aumentar la fertilidad en estrellas de mar. y pH alcalino responsable de apartar las proteínas de la superficie de la membrana plasmática. el aumento de Ca2+ será necesario para que se dé la “hiperactivación”. Estas técnicas se basan en la inducción de la capacitación espermática debido a la eliminación del plasma seminal. Un dato a resaltar es que siempre que hay capacitación se da la hiperactivación. para reproducir con la mayor exactitud dicho proceso. La utilización de Ca2+ ionóforo ó dibutiril AMP cíclico aceleran la capacitación y la aparición de la HA. medios de cultivo y condiciones ambientales determinadas. como se ha puntualizado. pero con una disminución del porcentaje de linealidad y velocidad lineal. Los medios de incubación utilizados en la inducción de la capacitación “in vitro” poseen una alta fuerza iónica con el objetivo de desplazar los FD. Se puede decir que entre las técnicas de recuperación de espermatozoides móviles más utilizadas encontramos el “swim-up”. filtración en columnas de Sephadex y el dextrano. En el ser humano. Entre las distintas metodologías de capacitación “in vitro” mencionadas anteriormente se considera la técnica de “swim up” como el método más sencillo y barato. pero no siempre que hay hipercinesis se da la capacitación ni la reacción acrosómica. gradientes de percoll. Capacitación in vitro El estudio de la capacitación espermática de manera fisiológica en el tracto reproductor femenino (in vivo) es de gran dificultad. incrementando el flujo de calcio hacia el interior de las células espermáticas y 7 . Va precedido de las modificaciones ocurridas en la membrana y. así como de un aumento de la amplitud de desplazamiento lateral de la cabeza y velocidad curvilínea. activando los procesos de HA y RA. El desarrollo de estas técnicas capaces de recuperar los espermatozoides móviles. Esta técnica es la que denominamos capacitación “in vitro”. Es característico de este proceso un movimiento de gran curvatura y amplitud de flagelo. requiere de la presencia de Ca2+. La hiperactivación es un proceso fisiológico asociado a la ovulación ya que será necesario para que los espermatozoides atraviesen la zona pelúcida. por lo que se ha intentado extrapolar dicho proceso a un laboratorio mediante técnicas. nos permite seleccionar aquellas células espermáticas con mayor movilidad y capacidad fecundante para ser posteriormente aplicables en programas de inseminación intrauterina (IU) y FIV.

la membrana acrosómica se dobla. siendo la liberación inicial de acrosina un estimulador de la RA el responsable de la fijación del espermatozoide al ovocito. debido principalmente a la acción de la fosfolipasa A2. En la incubación de los espermatozoides con el fin de inducir “in vitro” se requiere durante la capacitación espermática condiciones ambientales definidas de humedad y dióxido de carbono. Las encimas liberadas del acrosoma durante la RA facilitan el paso del espermatozoide a través del cúmulo ooforo y zona pelúcida. desempeñan un papel esencial durante la RA. procedente del aparato de Golgi. Así una RA prematura implica un descenso de la fertilidad debido a la adhesión de los espermatozoides que sufren la RA después de atravesar el cúmulo ooforo son capaces de unirse a la membrana pelúcida. Durante la RA se produce la defenestración entre la membrana plasmática y acrosómica externa en la región apical y en el segmento principal del acrosoma por múltiples fusiones puntuales. Dichas encimas. forma una envoltura acrosómica en cuyo interior existen una gran variedad de enzimas hidroliticas. como consecuencia de la capacitación. la utilización de inductores de la reacción acrosómica junto con técnicas de capacitación “in vitro” nos permite obtener mayor información sobre posibles disfunciones de la capacidad fecundante del espermatozoide. En los espermatozoides humanos es necesario que se produzca la RA. El acromosoma espermático. Reacción acrosómica La reacción acrosómica (RA) es un proceso exocítico dependiente del calcio. La sincronía entre ambos eventos es imprescindible para que la fecundación tenga lugar. De ello se encarga el test ARIC (Acrosomal Reaction Induction Challenger) que es utilizado actualmente con éxito como prueba diagnóstica de la capacidad fecundante de un eyaculado en semen humano. Debido a la posición del acrosoma en la cabeza espermática. dando lugar a la penetración del ovocito. transcurriendo paralela por casi todo el territorio por el que se extiende. para que la fusión con la membrana pelúcida tega 8 . En el día de hoy. mientras que el segmento ecuatorial permanece intacto durante todo el proceso.produciendo una activación de las fosfolipasas.

La RA es inducida. La ZP estimula el aumento en la actividad de la adenilato ciclasa del espermatozoide. el influjo de calcio aumenta el pH. Tras la interacción entre el receptor espermático y el estímulo procedente del ovocito. bajo su membrana plasmática. los espermatozoides deben experimentar la RA para atravesar la ZP del ovocito. lo que sugiere que el AMPc pueda estar involucrado en la ruta de señales que lleva a la exocitosis del contenido acrosomal. La presencia de iones K+ en el medio es necesaria para que la RA tenga lugar. El AMPc. Algunas células pueden sufrir la RA de manera espontánea. 9 . existiendo diversas experiencias que muestran la necesidad de moléculas especificas con el ovocito en la inducción de la RA. El acromosoma es un gránulo de gran tamaño que contiene enzimas en forma de zimógeno. y que se encuentra situado en la región apical de la cabeza del espermatozoide. Se han encontrado concentraciones de K+ entre 20 y 30 mM en fluidos procedentes del tracto de la hembra. degradación de fosfoinositoles y formación de diacilglicerol (DAG) que actuaría como mensajero intracelular de la fusión entre la membrana acrosomal externa y la plasmática. proponiéndose una posible regulación “in vivo” de la RA en espermatozoides. produciéndose la pérdida del acrosoma. puede retardar la aparición de la reacción acrosómica. En los mamíferos. lactosa. está implicado en reacciones de fosforilación de proteínas espermáticas. La glucosa. receptores de proteína G. fundamentalmente hialuronidasa. Esta elevación del AMPc precede a la RA. se dispara la fusión de la membrana plasmática con la membrana acrosomal externa. por sustancias presentes en los fluidos próximos al ovocito tales como: líquido folecular cúmulo ooforo y células de la granulosa. mientras que la fucosa. en las que se está investigando para desvelar su papel dentro de la funcionalidad espermática. Se ha comprobado que el cúmulo expandido y la ZP de los ovocitos humanos contienen algunos factores capaces de inducir la RA en los espermatozoides capacitados del macho. desempeñan un papel principal. y activación de segundos mensajeros junto con la proteína Kinasa C y la fosfolipasa. Como consecuencia de estos eventos se produce un incremento en la concentración de calcio intracelular. siendo las concentraciones muy altas o bajas responsables de una mala respuesta acrosómica.lugar. L-glucosa y galactosa no ejercen esta acción sobre los espermatozoides. en espermatozoides previamente capacitados. dando lugar a un aumento en la concentración intracelular del AMPc.

Está compuesta por tres glicoproteínas (en algunas especies 4): ZP1. siendo la determinación de la RA en espermatozoides y el test de hámster las pruebas más correlacionadas con el FIV. El efecto. ejercidos sobre los espermatozoides varía dependiendo de la concentración espermática y del nivel de proteínas presentes en el medio. de ahí la importancia distinción entre RA inducida y espontánea. requiriendo o no de una capacitación previa. y 2) ejercen una acción negativa sobre la movilidad y viabilidad espermáica.La peroxidación lipídica y los radicales libres reducen la fluidez de la membrana plasmática. tiene función biológica esencial. inhibiendo los procesos fusogéneticos de membrana y de la RA. si bien existen detractores de esta primera técnica como método de predicción de la fertilidad. tal es el caso de la progesterona presente en las células del cúmulo y en el fluido molecular. por lo que no existe uniformidad en el método utilizado por los diversos autores. (Zp2 y ZP3). El ionóforo A23187 el más utilizado en la inducción de la RA. ZONA PELÚCIDA: La membrana pelúcida. Las técnicas de fecundación “in vitro” (FIV) analiza la capacidad fertilizante de un ayaculado. Los inductores de la reacción acrosómica Existen fluidos y moléculas capaces de inducir la reacción acrosómatica “in vivo” y/o “in vitro”. IONÓFOROS: Moléculas capaces de estimular la RA en espermatozoides capacitados mediante la inducción de un flujo de calcio hacia el interior del espermatozoide 1) son moléculas potencialmente citotóxicas. Dichas sustancias son utilizadas en pruebas diagnósticas de la capacidad fecundante de un eyaculado. son moléculas de aspecto filamentoso unidas por ZP1. Los indultos son utilizados “in vitro” con el fin de aumentar el porcentaje de espermatozoides potencialmente capaces de fecundar un ovocito. varía dependiendo de la especie y del medio utilizado. Por lo tanto la concentración de ionóforo y el tiempo de exposición. Los cambios de temperatura así como la congelación también inducen un aumento de la RA. La reacción acrosómica inducida (fisiológica) y no la espontánea. ZP2 y ZP3. 10 . ionóforo A23187 y heparina.

y por una enzima galactosil-transferasa localizada en la zona plasmática del espermatozoide. La presentación de la ZP se conseguiría mediante la acción coordinada de las enzimas acrosomales liberadas en la RA y la potente fuerza de empuje desarrollada por el movimiento del espermatozoide. UNIÓN DE LA ZONA PELÚCIDA: UNIÓN PRIMARÍA Y SECUNDARÍA: La zona pelúcida presente en el momento de la fecundación. Antes de atravesar la zona pelúcida. ZP1 y ZP2 son glicoproteínas estructurales. Según la hipótesis propuesta por O´Rand et al. Por lo tanto hay que tener en cuenta que la membrana pelúcida es altamente específica. El papel que tiene la unión secundaria dentro del proceso de la fecundación es desconocido. mientras que la glicoproteína ZP3 es la encargada del reconocimiento e inducción de la reacción acrosomática del espermatozoide. intervienen la glicoproteína ZP2 y la proteína PH2. mientras que en la unión secundaria. la de la reacción acrosómica. dando lugar a la formación de una retícula tridimensional. parece ser que el papel que desempeña le ZP1 es solamente estructural. está involucrada la glicoproteína espermática ZP3. que agita la cola de lado a lado y la cabeza de delante a atrás. El reconocimiento entre ambos gametos esta mediado por un carbohidrato de la glicoproteína ZP3. tales como la unión del espermatozoide.más globular. el espermatozoide atraviesa el espesor de la ZP para alcanzar el espacio perivitelino. PENETRACIÓN DE LA ZONA PELÚCIDA Y FUSIÓN DE MEMBRANAS: Tras la RA y la unión a la ZP3. En la unión primaria del espermatozoide a la ZP. Los espermatozoides que no son capaces de reconocer y unirse a las glicoproteínas de la ZP o responder a la ZP sufriendo la reacción acrosómatica no fecundarán al ovocito. hasta la fecha. que acontece tras la RA. desempeña funciones básicas en dicho proceso. el bloqueo de la poliespermia y la protección frente a fundaciones interespecíficas : además de desempeñar una función protectora del ovocito y del embrión temprano. 11 . unión mediada por la interacción entre moléculas con gran afinidad presentes en la superficie de ambos gametos. el espermatozoide se ha de unir a la ZP de ovocito. presente en la zona pelúcida del ovocito. anterior a la RA (reacción acrosómica).

Las mitocondrias maternas pasarán a la siguiente generación. por tanto. la membrana plasmática de la cabeza del espermatozoide localizada sobre el segmento ecuatorial se une a la membrana plasmática del ovocito. la bindina. La fusión de membranas desencadena la activación del ovocito. y se inicia en ese punto la fusión de ambas membranas. y por otra a la modificación de las características fisicoquímicas de la zona pelúcida y de la membrana plasmática del ovocito. REACCIÓN CORTICAL: La activación del ovocito da lugar a la liberación hacia el espacio perivitelino del contenido de los gránulos corticales (GC). La entrada de la cabeza del espermatozoide en el citoplasma del ovocito va acompañada de la incorporación gradual de su cola. OVIDUCTAL Y CELULAS DEL CÚMULO OOFORO: 12 . la poliespermia. Este proceso se conoce como reacción cortical o de zona. de modo que solo un espermatozoide con un movimiento vigoroso pudiera penetrarlo. Tras la fecundación los gránulos corticales desaparecen del ovocito. situados al final del periodo de maduración en posición periférica bajo la membrana plasmática del ovocito. En el proceso de fusión está implicada una proteína presente en la membrana plasmática del espermatozoide. favoreciendo su fusión con la membrana del ovocito. La exocitosis de los GC provoca la inactivación por hidrólisis de la glicoproteína ZP3 (responsable de la unión primaria a la ZP y de la inducción de la RA de espermatozoide). algunos son liberados mientras el ovocito se encuentra en el folículo ovárico y una vez maduro antes de ser fecundado esta exocitosis prematura contribuye a la formación del espacio perivitelino. Aunque la exocitosis de la mayoría de los GC se produce de forma explosiva tras la fusión de membranas. que ha quedado liberada tras desprenderse el acrosoma y que se unirá a la membrana del ovocito creando un canal por donde pasará el espermatozoide al interior del ovocito.Una vez en el espacio perivitelino. Las enzimas hidroliticas y glicoproteínas liberadas modifican las características fisicoquímicas de la ZP de manera que se impide la entrada de nuevos espermatozoides y. LÍQUIDO FOLICULAR. liberando su contenido al exterior impidiendo así que otro espermatozoide pueda penetrar en el ovocito. estableciendo la reacción cortical en esta especie. que permite el libre movimiento del espermatozoide una vez atraviesa la zona pelúcida.

También es importante la acción del cumulo ooforo como potenciador de la RA. inhibidores de proteasas. lo que resulta en un incremento de la RA. PASO DEL ESPERMATOZOIDE A TRAVÉS DEL CÚMULUS: Los ovocitos están rodeados por unas cubiertas. cuyo principal componente es el ácido hialurónico que se inserta a la ZP por su región fenestrada exterior. El flujo 13 . PROGESTERONA: La progesterona induce el influjo de calcio hacia el interior del espermatozoide. El fluido oviductal desempeña un papel decisivo al final de la capacitación “in vivo”. induciendo la RA. Una proteína de superficie del espermatozoide denominada PH-20 es capaz de hidrolizar el ácido hialurónico y permitir al espermatozoide atravesar la densa capa de células del cúmulus.Del fluido folicular ha mostrado la presencia de proteasas. Así los espermatozoides capacitados y con el acrosoma intacto son capaces de atravesar el cúmulus. está constituido por las células del cúmulus y por una matriz extracelular. siendo utilizado en casos de infertilidad masculina como potenciador de la capacidad fecundante. Los espermatozoides deben estar capacitados y con el acrosoma intacto para atravesar el cúmulus. liberadas tras la reacción acrosómica. siendo su acción similar a la encontrada en el liquido folecular. para digerir el ácido hidráulico de la matriz extracelular del cúmulus. La progesterona estimula la exocitosis de manera dosis-dependiente. péctido natriurético auricular (PNA). además de una amplia variedad de esteroides. las células expandidas del cúmulus de ovocitos maduros mejoran la movilidad del espermatozoide. Presentando unos buenos resultados de capacitación y RA. que el espermatozoide debe atravesar antes de penetrar al ovocito. Este hecho es contradictorio con la creencia inicial que suponía que el espermatozoide utilizaría las enzimas hidroliticas de su acrosoma. El fluido oviductal es mejor que el folicular para el mantenimiento de la movilidad “in vitro”. la zona pelúcida y el cúmulus. ayudado por su movimiento hiperactivo. aunque pueden unirse a la superficie de las células del cúmulus. pues se ha observado en varias especies que aquéllos no capacitados y los que ya han sufrido la reacción acrosómica. El cúmulus. antithrombina III. Parece existir un receptor no genómico en la superficie del espermatozoide. Además. no pueden atravesarlo.

Técnicas de detección de la reacción acrosómica. La mayoría de estos estudios se basan en la utilización de técnicas de microscopía electrónica y de fluorescencia. incrementando el porcentaje de espermatozoides reaccionados. cafeína.de iones NA+ y la acción de una tripsin-proteasa parecen estar implicados en el mecanismo de acción de la progesterona. EFECTO DE DISMINUCIÓN TÉRMICA: Estudios recientes muestran un aumento del porcentaje de RA. La utilización de xantina. permitiendo un flujo de calcio e incrementando la RA. hiperactivación como la reacción acrosómica son procesos dependientes de AMP cíclico (AMP-c). Como consecuencia probablemente las bajas temperaturas inactivan la bomba de calcio. requiere la utilización de diversos métodos de detección del estado del espermatozoide. MODULADORES METABÓLICOS: La capacitación. existiendo una posible acción sobre la fluidez de la membrana espermática mediante su interacción con receptores adenosínicos. Los análogos del AMP-c estimulan la actividad de la protein-kinasa. El problema de esta metodología es el requerimiento de equipos costosos y un entrenamiento del personal técnico que imposibilita su uso rutinario y se restringe a determinados estudios. La cafeína muestra efectos negativos sobre la viabilidad espermática debido a su acción como inhibidor de los mecanismos de reparación del DNA y su potencial mutagénico. El análisis de los cambios ocurridos en el espermatozoide durante la reacción acrosómica bajo condiciones “in vivo” o “in vitro”. correlacionado positivamente con el FIV. encargada de mantener los niveles de calcio intracelular bajos. La utilización de la microscopía de fluorescencia suele ir asociada a lectinas vegetales o anticuerpos unidos normalmente a marcadores fluorescentes que se pueden 14 . teofilina y pentoxifilina produce un aumento de la concentración de AMP-c debido a la inhibición de la fosfodiesterasa. La pentoxifilina incrementa el porcentaje de RA y la movilidad espermática siendo su uso recomendado en eyaculados de baja movilidad.

El estudio de estos dos procesos abre nuevas vías de investigación en el campo de la fecundación. Los anticuerpos tienen la capacidad de unirse a receptores específicos presentes en la superficie de la membrana determinando la presencia o no del acrosoma. una de las técnicas de mayor difusión entre los diversos equipos investigadores. capacidad limitada con el uso de lectinas. El uso de esta técnica permite la posibilidad de identificar el estado del acrosoma en presencia de glicoconjugados . un área cada vez más solicitada ante el crecimiento de la infertilidad. marrón Bismark y rosa de Bengala es capaz de clasificar los espermatozoides en cuatro categorías: vivos con acrosoma intacto. muertos con acrosoma intacto y muertos reaccionados. Esto se refleja en el desarrollo de técnicas 15 . Maclura pomífera(MPA). Entre las más utilizadas en la detección de los procesos de capacitación encontramos: Pisum Sativum(PSA). es actualmente. tabaco. Cabe resaltar entre las tinciones más utilizadas la triple tinción. La eminente crecida de este problema en la sociedad moderna propiciada a su vez por agentes externos (móviles. descrita por primera vez por Talbot y Chacon en 1981 para semen humano. ropa ajustada. Glycine ax(SBA) y Tricitum vulgaris(WGA).…).dirigir contra el contenido acrosómico o contra la membrana del cromosoma. vivos reaccionados. el uso de lectinas suele ir asociado a test vitales o a test de permeabilidad de membrana con el fin de diferenciar el estado del acrosoma en células viables y no viables. Como se ha dicho anteriormente también es frecuente el uso de anticuerpos monoclonales o policlonales. Por lo tanto debido a la complejidad de las técnicas anteriormente citadas la evaluación de la presencia o ausencia del acrosoma mediante tinciones para microscopía óptica de campo claro. estrés. Dicha técnica mediante el empleo de azul Tripán. ha exigido una respuesta por parte del mundo científico. REFLEXIONES FINALES La capacitación y la reacción acrosómica es una parte esencial en la fecundación. Canavalia Ensiformis(ConA). Las lectinas determinan la presencia y distribución de determinados azúcares en la membrana plasmática o en la membrana acrosomal interna. Con el tiempo se ha descrito una variante de esta tinción en la que se ha omitido el azul Tripán debido al tiempo que requiere su realización. MIRAS A LA INVESTIGACIÓN. Por lo tanto. Arachis hypogaea(PNA).

¿Cómo sabe el espermatozoide cuál es su destino? Una de las hipótesis es la quimiotaxis. Puntualizando. En resumen. La capacitación espermática se lleva a cabo en el tracto reproductor femenino. Este hecho nos muestra una vez más la sabiduría de la naturaleza. Arbacia punctulata. quinodermos. fish. microeyección citoplasmática ICSI. Aunque la fecundación entre distintas especies aun no sea viable. El espermatozoide recorre una larga distancia desde que es depositado en el trato cervical hasta que penetra en la zona pelúcida. La quimiotaxis está documentada en numerosas especies marinas (moluscos. el ser humano tiende a romper las leyes de la naturaleza como en el experimento del “Test de Hámster” Test de Hámster En este estudio se puede determinar la capacidad fecundante de los espermatozoides “in vitro”. diagnóstico prenatal. fusionarse con espermatozoides humanos después de ser capacitados “in vitro” y haber sufrido la reacción acrosómica. basada en la tendencia de los espermatozoides a moverse en una dirección determinada (ovocito) por la influencia de estímulos químicos. Dicho nombre proviene del hámster dorado dada la capacidad de su ovocito de. inseminación artificial.…) cuyo esperma es atraído por una sustancia química hasta los huevos. en este caso para garantizar la perpetuación de la especie. podemos decir que el estudio de la capacitación y de la reacción acrosómica ha supuesto el desarrollo de nuevas técnicas que facilitan actualmente la fecundación.como la fecundación in vitro (FIV). debido a que los receptores específicos de esta última no reconocen a los espermatozoides ajenos.… Para llevar a la práctica dichas técnicas es necesario inducir la capacitación acrosómica en el laboratorio mediante técnicas de cultivo y en condiciones ambientales determinadas. se ha conseguido aislar una 16 . tras eliminar su zona pelúcida. En una especie marina. implantación asistida. La capacitación in vitro mejora la calidad de los estudios realizados y potencia la capacidad fecundante de un eyaculado. No obstante. La fecundación in vitro heteróloga no implica que los espermatozoides puedan fecundar in vivo. la reproducción de la capacitación en un laboratorio facilita a los investigadores información más rigurosa sobre las condiciones fisiológicas que se dan en el aparato reproductor femenino. esto supone un desafío a la naturaleza. Para que se produzca con éxito el macho y la hembra deben ser del mismo sexo.

confirmando así su naturaleza quimiotáctica. .http://www. en la mayoría de los casos. “resact”. Páginas 613. pero no funcionó ya que solo la mitad de las microinyecciones del supuesto factor quimiotáctico derivó al desplazamiento del esperma a esa zona. 29. Aun con todo lo avanzado en los últimos tiempos. todavía queda mucho campo por descubrir.anatomohistologia.ucm. 2000. Sunderland.Finn Geneser. 187.es/BUCM/tesis/19972000/X/3/X3050301. En 1991 Ralt y compañeros suyos intentaron simular el experimento antes expuesto con esperma humano. Sinauer Associates. 193. Páginas 16.pdf 17 .http://www. 194. 204. Developmental Biology 6th edition. 198. .Gilbert. 186. Embriología clínica 7ª edición. Panamericana. 31. hipotetizándo algunos autores que el ovocito secreta sustancias quimiotácticas en las últimas etapas de la migración del esperma ( Hunter 1989). Buenos Aires.sustancia quimiotáctica. . se observa cómo el esperma migra hacia donde el resact ha sido inyectado. Sin embargo. 196. La quimiotaxis en el ser humano se encuentra por el momento en el campo de la especulación. Páginas 185. 195. Elsevier. BIBLIOGRAFÍA . 192. se mostró un hecho sorprendente. 665. Madrid 2004. 191. 2005. El “resact” difunde rápidamente en agua marina y tiene un gran efecto a bajas concentraciones cuando es añadida a una suspensión de esperma de Arbacia. Cuando una gota de agua de mar junto al esperma es añadida al portaobjetos y le es inyectada el resact. 30. 663. 664. solo era fecundante el óvulo del que provenía fluido que había causado una reacción quimiotáctica. Histología 3ª edición. y es que.edu. 32.asp? zona=modrepro .uns. y entre esto se encuentra la capacitación y la reacción acrosómica.ar/plantilla. 33.Moore Persaud.Scott F.

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