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Crecimiento y Muerte de Mo

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UMSNH

ESCUELA DE QUIMICOFARMACOBIOLOGÍA

MICROBIOLOGÍA I = CRECIMIENTO Y MUERTE DE
MICROORGANISMOS =
CABALLERO PRADO CINDY JOANNA
SECCIÓN 01 SEMESTRE 5TO

TEMARIO
Concepto y medida de crecimiento Crecimiento exponencial Curva de crecimiento Conservación de células en fase exponencial Crecimiento sincronizado Definición y medida de muerte Agentes antimicrobianos y mecanismos de acción

por ello es importante comprenderlas ya que nos ayudan a determinar su viabilidad y muerte. podrá diferenciar las múltiples etapas de vida que presentan los microorganismos. el alumno será capaz de comprender y distinguir los conceptos de crecimiento. las cuales varían en su tiempo de generación según el microorganismo estudiado. desarrollo y muerte de un microorganismo. .INTRODUCCIÓN • Durante el desarrollo del tema de crecimiento y muerte de microorganismos.

. de igual manera aprenderá métodos matemáticos para la interpretación del crecimiento y la muerte de poblaciones microbianas. donde se mantiene a los microorganismos en una misma fase de su desarrollo. así como la utilidad de los diferentes agentes antimicrobianos y su sitios de acción en los microorganismos. utilizado en las diversas áreas de producción industrial.• Podrá entender la importancia del crecimiento sincronizado de un microorganismo.

 Conocer los principios generales del crecimiento microbiano  Describir los ciclos de crecimiento de las poblaciones microbianas  Consideraremos los medios disponibles para medir el crecimiento  Conocer instrumentos especiales para la medición de los m. .o.

¿UÉ ES EL CRECIMIENTO ? QUÉ Q Se define como: El Incremento ordenado de todos los constituyentes celulares. El crecimiento ocasiona un aumento del número de células cuando los microorganismos se duplican. .

PROCESOS DE DUPLICACIÓN

•G E M A C I Ó N •F I S I Ó N B I N A R I A

GEMACIÓN
Es un sistema de duplicación de organismos unicelulares donde por evaginación se forma una yema que recibe uno de los núcleos mitóticos y una porción de citoplasma. Uno de los organismos formados es de menor tamaño que el otro.

FISIÓN BINARIA
Los organismos celulares más simples se reproducen por un proceso conocido como fisión o escisión.
La célula madre se fragmenta en dos o más células hijas, perdiendo su identidad original. • transversal (se produce a lo ancho del organismo) • longitudinal (a lo largo del organismo)

a) b) c) d) e) f) (CORTE TRANSVERSAL) ANTES DE QUE SE HAYA COPIADO SU DNA LA REPLICACIÒN COMIENZA Y SE REALIZA A LO LARGO DE LA MOLÉCULA DE DNA LA COPIA DE DNA SE UNE A UN PUNTO CERCANO AL PUNTO DE UNIÓN DE LA MOLÉCULA DE DNA EL CRECIMIENTO DE LA MEMBRANA CELULAR ENTRE LOS DOS PUNTOS DE UNIÓN Y SE SEPARAN LAS DOS MOLÉCULAS DE DNA EN LA ZONA CENTRAL DE LA CÉLULA COMIENZA A CRECER NUEVO MATERIAL DE MEMBRANA Y PARED LA MEMBRANA Y LA PARED DEPOSITADAS EN LA ZONA CENTRAL DIVIDEN EL CITOPLASMA EN DOS .

CRECIMIENTO INDIVIDUAL POBLACIONAL Es el incremento en el tamaño y peso incremento en el número de células como una consecuencia del crecimiento y división celular. a) Tasa de crecimiento b) Generación c) Tiempo de generación .

TIEMPO DE GENERACIÓN También llamado tiempo de duplicación. •Aproximadamente el mismo para las células de una determinada población. dividirse y dar lugar a dos nuevas células. . es el periodo que requieren las células para: duplicación •Crecer. •No cambia hasta que se agotan los nutrientes o se acumulan productos metabólicos tóxicos.

.EJEMPLO: TIEMPO DE DUPLICACIÓN DE E. pero la relación es inversa. COLI Alrededor de 18 min. en un medio de laboratorio rico. Tracto intestinal de los vertebrados (los nutrientes son menos abundantes) tiempo de duplicación es de 12 horas TD ELEVADO CRECIMIENTO LENTO TD BAJO CRECIMIENTO RAPIDO El valor del tiempo de duplicación nos indica la rapidez con que esta creciendo la población.

la tasa de crecimiento de un cultivo de E. coli Tiempo de Duplicación de 18 minutos Será de 3. Así.TASA DE CRECIMIENTO Tiempo de duplicación por hora • Elevada para las poblaciones de crecimiento rápido y baja para las de crecimiento lento. .3 (60/18) generaciones por hora.

FACTORES QUE INFLUYEN EN EL CRECIMIENTO O2 ES R O OS CT R N FA TE EX O2 C Aw Capacidad metabólica pH T° ES R O OS CT RN FA TE IN .

o c n c n s ó a e e io L my ríad la b c ria . é to p e e v rs a c d sp rc mio e la mie te o llo s s u d n e e fe ta o o a b s n c n e tra ió o mtic d l md . p re . . a a yh n o p s e u ap re c lu rríg a a a o e s a te s lg s o g s o e n n a d e la id .FACTORES EXTERNOS SOLUTOS Y Aw L mmra ap s á as le tiv mn p rma les p raalo m d s a e b n la mtic e c a e te e e b e a s oeu a b n .

Estos solutos son compatibles •Metabolismo •El crecimiento En concentraciones intracelulares elevadas .Solutos compatibles. Una molécula que se acumula en el citoplasma para ajustar la aw y que no inhibe los procesos bioquímicos.

betaína. mediante la síntesis o captación de colina. NO ALTERAN LA ESTRUCTURA Y FUNCIÓN DE LAS ENZIMAS . por ejemplo. Por los mismos motivos. las algas y los hongos utilizan sacarosa y alcoholes de azúcares. cantidades elevadas de ion K. Osmótica interna. ácido glutámico y otros aa. prolina. glicerol y manitol.EJEMPLO La mayoría de las bacterias eleva su conc. en cierto grado. también participan. arabitol.

arrugándose el citoplasma y desprendiéndose la membrana plasmática de la pared celular. La célula se inactiva metabólicamente y deja de CRECER. Consecuencia.**PLASMOLISIS** proceso por el cual una célula pierde su contenido de agua. . ¿QUE PASA? Deshidrata la célula y puede dañar la membrana plasmática.

Por tal motivo es de gran utilidad poder expresar cuantitativamente el º de disponibilidad del agua.La cantidad de agua disponible por los mo se puede reducir: Mediante interacciones con moléculas de soluto (Efecto osmótico). . O por la adsorción a las superficies de sólidos (Efecto matricial).

60 Cereales. dulces. frutos secos Chocolate Miel Leche deshidratada Xeromyces bisporus Sacchamyces rouxii (en azúcares) .70 0. verduras.80 0.85 0. Fusarium.90 pan Jamón La mayoría de los bacilos Basidiomycetes grampositivos La mayoría de los cocos. Mucor Bacillus Rhizopus Levaduras ascomicetales Staphylococcus Saccharomyces rouxii (en sal) Penicillum Halobacterium Actinospora Aspergillus Dunaliella La mayoría 0.LÍMITES INFERIORES APROXIMADOS DE aw PARA EL CRECIMIENTO MICROBIANO Actividad Del agua 1. carne.00-agua pura Ambiente Sangre Bacterias La mayoría de las gramnegativas no halófilas Hongos Algas Plantas marchitas. fruta Agua de mar 0.75 Salami Conservas Lagos salados Pescado salado 0.95 0.

.pH El pH es una medida de la actividad de los iones de hidrógeno de una solución. que se define como el logaritmo negativo de la + + pH= . Delog H = log (1/ H ) (expresada en moles).iones de hidrógeno conc.

Efecto de pH en el crecimiento mo Cada especie tiene un rango definido de pH para su crecimiento y un pH óptimo de ACIDÓFILOS entre 0-5. NEUTRÓFILOS entre 5.5-8 ALCALÓFILOS ENTRE 8.5 ALCALÓFILOS EXTREMOS ENTRE 10 O MÁS .5-11.5 crecimiento.

.

TEMPERATURA La temperatura ambiental afecta intensamente a los mo TEMPERATURAS CARDINALES mínima Óptima máxima FACTOR QUE MÁS INFLUYE “LA SENSIBILIDAD DE LAS REACCIONES CATALIZADAS POR ENZIMAS” Las temperaturas cardinales varían ampliamente entre .

como: • pH • nutrientes disponibles . Las tem. dependen de otros factores ambientales.Aunque la forma de la curva de dependencia de la temperatura puede variar. la óptima está siempre más próxima a la máxima que a la mínima. cardinales no son invariables.

EJEMPLO Crithidia fasciculata Protozoo flagelado Habita en el intestino de los mosquitos Crecerá en un medio simple entre 22 y 27ºC SIN EMBARGO No puede cultivarse a temperaturas de entre 33 y 34ºC. vitaminas y lípidos . aa. A no ser que se añadan metales.

Temp. La temperatura de crecimiento de un mo determinado abarca normalmente un margen de 30º. . óptimas se encuentran normalmente en un rango de 0ºC hasta un valor tan alto como 75ºC El crecimiento de mo se produce en un rango de -20ºC hasta más de 100ºC.

• EURITÉRMICOS crecen en un amplio rango de temperaturas • PSICRÓFILOS organismos con temperatura optima de crecimiento de 15ºC o inferior y una máxima inferior a 20ºC. La temperatura mínima es normalmente de 45ºC y la óptima de 55 a 65ºC.GLOSARIO • ESTENOTÉRMICOS especies que tienen un rango pequeño de temperaturas. . • HIPERTERMÓFILOS mo que tienen una temperatura óptima de crecimiento de 80ºC o mayor. aunque su temperatura óptima sea 20 a 30ºC. • MESÓFILOS organismos que crecen a temperaturas entre 20 y 45ºC • TERMÓFILOS pueden crecer a temperaturas de 55ºC o superiores. • PSICROTROFOS Crecen a 0ºC.

.

CONCENTRACIÓN DEL OXÍGENO Un organismo que puede crecer en presencia de O2 atmosférico es AEROBIO. OBLIGADOS . es ANAEROBIO. es decir. son AEROBIOS OBLIGADOS. AEROBIO mientras que otro que puede crecer en ausencia. ANAEROBIO La mayoría de los organismos superiores dependen totalmente de O2 atmosférico para su crecimiento.

. AEROTOLERANTES • Los ANAEROBIOS AEROTOLERANTES. pero lo hacen mejor en su presencia. como Enterococcus faecalis pueden crecer bien tanto en su presencia como en su ausencia.• Los ANAEROBIOS FACULTATIVOS no precisan O2 para crecer.

Bacteroides. Methanococcus) no toleran en absoluto el O2 y mueren en su presencia.. sus niveles de crecimiento son del 2 al 10%. . denominados MICROAERÓFILOS. que son dañados por el MICROAERÓFILOS nivel de oxígeno atmosférico (20%).Los ANAEROBIOS ESTRICTOS u OBLIGADOS ( p. como Campylobacter. Clostridium pasteurianum. Existen unos pocos mo aerobios. Fusobacterium. ej.

.

proteínas diferentes con el O2 se deben a varios factores: La inactivación de las El efecto de los derivados tóxicos de O2 .

de los orbitales externos no están apareados. otros constituyentes celulares y la radiación promueven la reducción del O2. .y se reduce fácilmente porque sus e.REDUCCIÓN DEL OXÍGENO El O2 acepta e. Las flavoproteínas.

El resultado suele ser una combinación de los productos de reacción del oxígeno: O2 + eO2-.+ 2H+ H2O2 + e. radical hidroxilo Son extremadamente tóxicos y tienen un gran poder de oxidación. radical superóxido H2O2 peróxido de hidrógeno H2O + OH.+ H+ O2-. + e. .

.¿CÓMO SE PROTEGEN LOS MO? Muchos mo poseen ENZIMAS que ofrecen protección frente a productos tóxicos del O2.

que catalizan la destrucción de los radicales superóxido y peróxido de hidrógeno. respectivamente. + 2H+ H2 dismutasa SuperóxidoO2 2H2O2 catalasa O2 + 2H2O + O2 . 2O2-.Los aerobios obligados y los anaerobios facultativos contienen normalmente las enzimas superóxido dismutasa y catalasa.

utiliza iones de Mn. para eliminar el radical superóxido. en lugar de superóxido dismutasa. aerotolerante. . EJEMPLO: Lactobacillus plantarum.• Los mo aerotolerantes pueden carecer de catalasa. pero casi siempre tienen superóxido dismutasa.

. por ello.• Todos los anaerobios estrictos carecen de ambas enzimas o las poseen en concentraciones muy bajas y. NO pueden tolerar el O2.

RELACIÓN DE LAS BACTERIAS CON EL OXÍGENO .

MEDIDA DEL CRECIMIENTO MICROBIANO RECUENTO DIRECTO Medida de la masa de células CONTEO DE CÉLULAS VIABLES Medida del número de partículas Medida de parámet ros bioquími cos Medida de activida d metaból ica .

RECUENTO DIRECTO -Consiste en la observación al microscopio de volúmenes muy pequeños de suspensiones de bacterias. -. LIMITACIONES: -Es muy tedioso. . . -No es muy sensible. no es práctico para un gran número de muestras.Se usan unos portaobjetos especiales graduado con 25 cuadrados cuyo volumen y área es conocido denominados cámaras de Petroff-Hausser. se necesitan al menos 106 bact/ml para que sean observadas al microscopio.No distinguen células vivas de muertas.

mostrando el cubreobjetos y el espacio entre ambos. que ocupa una suspensión bacteriana. •Vista superior de la cámara. •Vista aumentada de la . La rejilla se encuentra en el centro del portaobjetos.CAMARA DE RECUENTO DE PETROFF-HAUSSER • Imagen lateral de la cámara.

Base y soporte del filtro 4. Embudo 2. Filtro de membrana 3. Recipiente • Sistema completo de filtración.SISTEMA DE FILTRO DE MEMBRANA MILLIPORE • Partes del conjunto del filtro. . Algunos de los componentes más importantes son: 1.

a) b) c) d) Medio estándar de nutrientes para un recuento bacteriano total. . Medio para coliformes fecales que forman colonias azules. Un indicador colorea las colonias de rojo para facilitar el recuento. coli y otros coliformes que producen colonias de color verde brillante. Agar de extracto de malta para cultivar levaduras y mohos. Agar m-Endo para detectar E.

MEDIDA DE LA MASA DE CÉLULAS midiendo la turbidez se puede estimar la masa células en suspensión dispersan la luz causando la turbidez del cultivo MÁS FÁCIL DE USAR La turbidez depende de la masa en suspensión .

El peso seco es por lo general el 20-25 % del peso húmedo.PESO SECO Se determina el peso seco o peso húmedo de una alícuota de la población separada por centrifugación. . Debe prepararse curva estándar para cada organismo estudiado. TURBIDIMETRÍA A través de un colorímetro o espectrofotómetro midiendo la turbidez en unidades de absorbancia.

. la cantidad de luz que transmite un cultivo.Mide la turbidez. expresada en unidades de absorbancia. es decir.

CONTEO DE CÉLULAS VIABLES Una célula viable es definida como aquélla que es capaz de dividirse y formar una colonia en el medio de cultivo. Para que la medida sea correcta desde el punto de vista estadístico. ¿ en que consiste ? consiste en sembrar un volumen determinado de cultivo o muestra sobre el medio de cultivo sólido adecuado para estimar el número de viables contando el número de colonias que se forman. . es necesario contar más de 300 células.

• Diseminación en placa (siembra en placa por extensión) El conteo en placas •Método de vaciado en placa Siembra por extensión Siembra por vertido en placa .Se asume que cada colonia surgió de una simple célula. contando el número de colonias uno puede calcular el número de células viables en la muestra.

- .Método de vaciado en placa.

.

.

Estos sistemas no nos indican si las partículas corresponden a células vivas o .Medida del número de partículas usando contadores electrónicos de partículas.

DE IDA ROS ED ET M M OS RÁ ÍMIC PA QU IO B ADN ARN PROTEÍNAS PEPTIDOGLICANO .

Medida de actividad metabólica La actividad metabólica puede utilizarse. mediante varios procedimientos. para medir indirectamente la cantidad de células microbianas: •La tasa de formación de productos metabólicos •La tasa de utilización de un substrato •La tasa de reducción .

.

° CRECIMIENTO EXPONENCIAL ° .

nencia expo durante cada tiempo de duplicación. una p te ra onstan ncuent c e iana se microb imiento en crec l. el número de células de la población se INCREMENTA en un factor de ¿ Que significa ? .e riodo d pe nte un Dura licación p o de du oblación tiemp .

Tiempo (hr) 0 0.5 2 2. .5 1 1.5 3 3. 10 Número total de células 1 2 4 8 16 32 64 128 256 512 1024 2048 4096 . 1048576 .5 6 .5 5 5. .5 4 4.

el número de células se doblan cada cierto período de tiempo y se le conoce como CRECIMIENTO EXPONENCIAL. .En este ejemplo se incremento la población.

1000 Logarítmica Número de células (escala 500 aritmética) Número de células (escala logarítmica) Aritmética 100 0 1 2 3 4 5 6 TIEMPO (Hr) .

• La escala logarítmica (base 10) es un inmediato indicador de que las células están creciendo exponencialmente. exponencialmente .• No podemos obtener mucha información sobre la velocidad de crecimiento a partir de la curva aritmética.

. ocho células (23). y así sucesivamente. se incrementa a dos células (21).el número total de células es igual a dos elevado a un exponente. y dicho exponente es el número de generaciones que han transcurrido desde que la población comenzó a aumentar. luego a cuatro células (22). una población que comienza como una célula (20). Así. 16 células (24).

La fórmula general es: N = N0 2 Donde: • N número final de células • N0 número inicial de células • n número de generaciones • g tiempo de generación = t/n t= hrs. o min. n .

log N0 = Log N .Para expresar la ecuación N=N02n en términos de n son necesarias las siguientes transformaciones: N=N02n Log N= log N0 + n log 2 Log N .log N0 = n log 2 Log N .log N0 n= log 2 0.301 .

69 0.301 = 8 – 7. N0 = 5*10 y t=2 8 7 n= log 108 – log (5*107) 0.301 n= .EJEMPLO: N=10 .

el tiempo de generación g = t/n = 2/1 = 2 hrs. .301/g 6*10 4*10 7 t=2 n=1 g=t/n= 2hr 7 3*107 2*107 1*107 0 1 2 3 2 hr 4 5 Tiempo (hr) con el conocimiento de n y t. el tiempo de generación g puede calcularse también de la pendiente de una grafica semilogarítmica de crecimiento exponencial. como pendiente 0.Células/m l 1*108 por lo tanto. se puede calcular g para diferentes microorganismos exponencialmente bajo diferentes condiciones de crecimiento.

E D A V T R U EN I C IM C RE O C .

Fases de Crecimiento Fase de Latencia o Fase Lag Fase exponencial Fase estacionaria Fase log de muerte . éste describe una típica curva de crecimiento que puede ser dividida en fases.Si analizamos el crecimiento microbiano en el tiempo.

normalmente no se produce un aumento inmediato del número de células o de masa.A) FASE LAG O DE LATENCIA Cuando se introducen mo en un medio de cultivo fresco. La división celular no se produce inmediatamente No hay incremento neto en la masa La célula está sintetizando nuevos componentes .

.• La duración varía considerablemente según la condición de los mo y la naturaleza del medio. • Puede ser bastante larga si el inóculo procede de un inóculo viejo o de uno que haya sido refrigerado.

en función de su potencial genético. el tipo de medio y las condiciones en que crecen. Se utilizan normalmente en estudios bioquímicos y fisiológicos.B) FASE EXPONENCIAL O LOG mo crecen y se dividen hasta el nivel máximo posible. La población es más uniforme. la velocidad de crecimiento es constante c/célula se divide y duplica en número de intervalos regulares. química y fisiológicamente. .

composición del medio de cultivo. con un tiempo de generación de 20 – 30 min. tuberculosis crece muy lentamente. Por ejemplo: • Salmonella typhi • Mycobacterium crece muy rápidamente en cultivo.La velocidad de crecimiento exponencial varía mucho de un organismo a otro. Las condiciones ambientales. con sólo una o dos duplicaciones por día. T°. afectan a la velocidad de crecimiento exponencial así como las características del microorganismo. .

C) FASE ESTACIONARIA El crecimiento de la población cesa y la curva de crecimiento se vuelve horizontal. de la población depende: El tamaño final Disponibilidad de nutrientes y otros factores El tipo de mo que se cultive El número total de mo viables permanece constante El equilibrio entre la división y la muerte de las células .

•Acumulación de residuos tóxicos .POBLACIONES MICROBIANAS EN FASE ESTACIONARIA •Limitación de nutrientes EJEMPLO: Los mo AEROBIOS están limitados a menudo por la disponibilidad de O2.

Estreptococos puede producir tanto ácido láctico y otros ácidos orgánicos a partir de la fermentación de azúcares que acidifican su medio. .EJEMPLO: Los mo ANAEROBIOS son limitados en su crecimiento por este factor. Los cultivos de esté mo pueden también entrar en fase estacionaria debido a la reducción de suministro de azúcar.

MUERTE . como la privación de nutrientes y acumulación de residuos tóxicos. originan la disminución del número de células viables.D) FASE DE MUERTE Cambios ambientales perjudiciales. hecho que caracteriza la FASE DE MUERTE.

• La muerte de una población microbiana. una cantidad constante de células muere c/hora). . al igual que su crecimiento durante la fase exponencial. es normalmente logarítmica (es decir.

la muerte se acompaña por lisis celular. dando lugar a una disminución del conteo de viabilidad. .En algunos casos.

La cepa de Lactobacillus casei ha demostrado tener efecto sobre los problemas gastrointestinales de niños de corta edad, demostrando la disminución de la presencia y frecuencia de diarrea, además de parásitos intestinales patógenos como la Giardia lamblia sobre la flora intestinal. Esto se logró hallando una concentración celular mediante bioensayos de laboratorio, a determinados periodos de tiempo y con características semejantes, por duplicado para optimizar cada uno de los procesos.

Se realizó a nivel de laboratorio, mediante recuentos en cámara de Newbauer, realizando esto en tratamiento por duplicado de lo cual se obtuvieron los resultados de fermentar la bebida por 4 horas a una temperatura de 40 °C y sin agitación.( Propagación de células del Lactobacillus casei a escala de laboratorio para la elaboración de una bebida multifuncional probiótica, con el fin de evaluarla en el tratamiento y prevención de enfermedades gastrointestinales.)

Bioensayo para estudiar el comportamiento del inóculo de 3 y 2 horas de incubación, sin aplicar agitación.

BIOCONVERSIÓN ESCALA DE LABORATORIO (2 L)

Acidez inicial: Temperatura empleada: Recuento del inóculo: Volumen del inóculo: Volumen de trabajo: Tiempo de proceso: Tiempo de incubación del inóculo:

19 °D Inóculo: 3%, 40 °C. r.p.m. No se presenta 1,0 – 2,0 * 109 cell / ml 60 ml. 2000 ml. 6 horas 3 y 2 horas.

Resultados del crecimiento celular para el inóculo de 3 y 2 horas de incubación. sin aplicar agitación .

Resultados del crecimiento celular para el inóculo de 3 y 2 horas de incubación sin aplicar agitación .Gráfico .

• LA FASE EXPONENCIAL dura 2 horas. .•LA FASE LAG O DE LATENCIA es relativamente larga (1 hora) si se compara con organismos que se reproducen en sólo 20 o 30 minutos. por lo tanto cuando las bacterias tienen 2 horas de haber sido cultivadas es cuando se da el mayor consumo de nutrientes que les permite incrementar su velocidad de crecimiento para infectar al objetivo.

•EN LA FASE ESTACIONARIA ya no hay ni multiplicación ni infección. .

CONSERVACIÓ N DE CÉLULAS EN FASE EXPONENCIAL .

.SISTEMA DE CULTIVO CONTINUO Es posible cultivar mo en un sistema abierto • Se mantengan las condiciones ambientales constantes a través de un suministro continuo de nutrientes y de la retirada de los residuos.

Mayoritariamente se utilizan dos clases de cultivo continuo: .

.

• Bomba peristáltica •Un reservorio •Un recipiente de cultivo .

En estas condiciones: •El número de células en el vaso de cultivo no cambia. •El cultivo crece lo suficientemente rápido para reemplazar las células que se pierden a través del sistema de desagüe. .

.• • • D= velocidad de dilución f= velocidad de reflujo (mL/h) V= volumen del recipiente (mL) POR EJEMPLO si f es 30 mL/h y V 100 mL.30 h-1 . la velocidad de dilución será 0.

.

USOS TRADICIONALES DE LOS MO El término Biotecnología se aplica a todos los usos de los organismos con fines prácticos. aunque los mo son su centro de atención. .

• col fermentada BACTERIAS DEL ÁCIDO LÁCTICO Fermentan los azúcares. • Ensilados • Aceitunas de mesa • Quesos y otros derivados lácteos Con excepción de algunos estreptococos. . láctico son inocuas para la especie humana y sus productos metabólicos tienen un sabor agradable. las bacterias del a.

.LEVADURAS Fermentan los azúcares. produciendo CO2 y etanol Se utilizan cepas de Saccharomyces Los vinos de Sauternes y otros vinos dulces se obtienen: • a partir de uvas infectadas por el hongo Botrytis cinerea.

SACARIFICACIÓN AL N IDÓ M GLUCOSA GRANO DE CEREAL .LA CERVEZA Y EL WISKY Se elaboran por fermentación de cereal Saccharomyces carlsbergensis y Scerevisie son la levaduras más utilizadas.

VINAGRE: La levadura Saccharomyces cerevisiae. . cerevisiae fermentan el azúcar del zumo de frutas hasta etanol. un subproducto de la industria de obtención de la cerveza. Después utilizan Acetobacter spp para oxidar el etanol de forma incompleta hasta a. acético y agua PAN FERMENTADO: Se elaboró inicialmente utilizando la levadura de la cerveza. en la actualidad se utilizan cepas seleccionadas de la levadura Saccharomyces cerevisiae para la panificación.

. que son letales para los insectos. que matan los escarabajos. popilliae producen Bp.LOS MO COMO INSECTICIDAS 1. para controlar las orugas y otros insectos. Algunas especies de Bacillus son patógenas de insectos. Las endosporas de B. thuringiensis se producen de manera comercial como bioinsecticida denominado Bt. Las endosporas de B. forman cuerpos paraesporales (cristales de proteínas).

. El protozoo Nosema locustae se usa como cebo para matar saltamontes y langostas. Los baculovirus se están estudiando también como bioinsecticida.2. A diferencia de los insecticidas químicos. los bioinsecticidas son seguros desde un punto de vista ECOLÓGICO.

UN QUIMIOSTATO ANDANTE El rumen de la vaca funciona como un quimiostato .

CRECIMIENTO SINCRONIZADO .

Se pierde la sincronía debido a que las diferentes poblaciones no envejecen igual. .Crecimiento sincronizado Son poblaciones de células que están en la misma etapa de crecimiento. El crecimiento sincronizado puede ser obtenido mediante la alteración del ambiente (temperatura o nutrientes).

DEFINICIÓN Y MEDIDA DE MUERTE .

MUERTE • La pérdida irreversible de la capacidad para reproducirse (crecer y dividirse). .

MEDICIÓN DE LA MEDIDA DE MUERTE El número de células que mueren en cada periodo es una función del número de sobrevivientes que se encuentren presentes. de tal manera que la muerte de una población prosigue como un proceso exponencial de acuerdo con la fórmula general: .

número de sobrevivientes en cualquier tiempo posterior -k....es el número de sobrevivientes en el S.S = So e Donde: tiempo cero –kt So.representa la tasa de mortalidad exponencial cuando la fracciona In (S/So) se grafica como función del tiempo .

• Es suficiente un solo golpe del agente inactivante para matar a la célula. •Debe dañarse 5 4 3 2 1 0 10 20 30 40 50 60 MINUTOS .Log 10 número de células sobrevivientes/ml CURVA DE UN SOLO 6 GOLPE •Cinética de inactivación.

.º CURVA DE MULTIGOLP eº •Célula que contiene varias copias del blanco.

AGENTES ANTIMICROBIAN OS Y SITIOS DE ACCIÓN .

Para que el antibiótico ejerza su acción es necesario que llegue al foco infeccioso. para la célula eucariota o procariota. penetre en las bacterias (por difusión o transporte activo) y alcance intracelularmente la concentración necesaria. Su eficacia tóxica es la consecuencia de su capacidad de inhibir una reacción bioquímica específica y esencial. .MODO DE ACCION DE LOS ANTIBIOTICOS Los antibióticos deben su toxicidad selectiva a las diferencias entre las células eucariotas y procariotas.

o bactericida si tiene un efecto letal. cloranfenicol. aminoglicósidos. . Antibióticos bactericidas: betalactámicos. En general. polipeptídicos.Una vez dentro de la célula el antibiótico puede ser bacteriostático si inhibe la multiplicación de forma reversible. cada grupo de antibióticos actúa preferentemente de una forma u otra. Antibióticos bacteriostáticos: macrólidos. polienos. tetraciclinas.

.Inhibición de la síntesis de la pared celular..LOS ANTIBIÓTICOS DE USO EN CLÍNICA PUEDEN EJERCER SU ACCIÓN EN UNA DE LAS SIGUIENTES ESTRUCTURAS O FUNCIONES: 1.. 3..Bloqueo de la síntesis . 4. 2.Inhibición de la síntesis proteíca.Alteración sobre la membrana citoplásmica.

G-: 5 atmósferas). FUNCION • Protege a la célula de su destrucción por estallido en un medio normal.1. ..INHIBICIÓN DE LA SÍNTESIS DE LA PARED CELULAR La pared celular de las bacterias está compuesta por peptidoglicano. no hiperosmótico puesto que las bacterias tienen una gran presión osmótica interna (G+: 20 atmósferas.

Las células, debido a su crecimiento, están continuamente sintetizando nuevo peptidoglicano y transportándolo a su sitio adecuado en la pared celular.

Varios antibióticos reaccionan con una o varias de las enzimas que se requieren para completar este proceso originando que la célula desarrolle puntos frágiles en su pared celular debido a la síntesis de peptidoglicano deficiente, lo que origina que sea osmóticamente frágil.

Los antibióticos que producen este efecto se consideran bactericidas ya que la célula debilitada está sujeta a lisis. La mayor parte de estos antibióticos son activos frente a células en crecimiento ya que las células viejas no sintetizan peptidoglicano.

Antibióticos que bloquean la síntesis de la pared celular: Bacitracina. . •Algunas penicilinas son menos efectivas frente a bacterias G-excepto penicilinas sintéticas y cefalosporinas. Inhiben la síntesis de la pared celular en su última fase interfiriendo la transpeptidación. Betalactámicos. Bloquea el transporte de las subunidades de peptidoglicano a su posición en la pared celular.

. insufiencia metabólica lisis .Alteración sobre la membrana citoplásmica Una célula con la membrana dañada muere invariablemente.2.

la mayor parte de estos antibióticos son tóxicos para los humanos. DESAFORTUNADAMENTE. permiten la salida de iones K y macromoléculas como los ácidos nucleicos y causan un efecto lítico.PROPIEDAD PRINCIPAL Actuar como barrera de permeabilidad selectiva Las sustancias que alteran esta estructura modifican la permeabilidad. .

Los antibióticos poliénicos (nistatina.Antibióticos que alteran la membrana citoplásmica: POLIMIXINAS. . Las bacterias más susceptibles son las (G-). lo que modifica la permeabilidad de la membrana. POLIENOS. anfotericina B) son B activos frente a hongos formando complejos con los esteroles de las membranas de células fúngicas originando poros hidrofílicos. Interaccionan con los fosfolípidos de las membranas desorganizándolos y aumentando su permeabilidad originando pérdida de metabolitos esenciales y muerte bacteriana como resultado final.

Los ribosomas de los eucariotas son diferentes en tamaño y estructura de los ribosomas de los procariotas (80sy 70s) por lo que estos antimicrobianos tienen una acción selectiva frente a bacterias..INHIBICIÓN DE LA SÍNTESIS PROTEICA La mayor parte de los inhibidores de la síntesis proteica reaccionan con el complejo ribosoma-mRNA.3. .

Antibióticos que inhiben la síntesis proteica: •Aminoglicósidos (estreptomicina. gentamicina) •Tetraciclinas •Cloranfenicol •Macrólidos (eritromicina) .

AMINOGLICÓSIDOS (ESTREPTOMICINA. Esta unión causa. con lo que se detiene la síntesis proteica y. distorsiona el codon del locus A. la proteína P10). GENTAMICINA) Actúan uniéndose específicamente y de forma irreversible a un receptor proteico de la subunidad 30s de los ribosomas (en el caso de la estreptomicina. De esta manera se forman proteínas anómalas . el bloqueo de la actividad normal del complejo de iniciación. provocando la incorporación de un aminoácido distinto al codificado.

.TETRACICLINAS • Se unen a la subunidad 30s de los ribosomas bloqueando la fijación del aminoacil-tRNA al locus A parando la síntesis de proteínas.

.Cloranfenicol • Se une a la subunidad 50s de los ribosomas impidiendo la transpeptidación.

. impidiendo la translocación ( paso del peptidil-tRNA del locus A al locus P.Macrólidos (eritromicina) • Actúan sobre la subunidad 50s de los ribosomas. previa liberación del tRNA).

susceptible de romperse en diferentes puntos..Bloqueo de la síntesis de los ácidos nucléicos La biosíntesis de moléculas de RNA y DNA es una larga serie de reacciones catalizadas por enzimas.4. inhibiendo la replicación o parando la transcripción. Los antibióticos que interfieren en la síntesis de ácidos nucléicos actúan bloqueando la síntesis de sus componentes. .

Compuestos que bloquean la síntesis de ácidos nucléicos: • Sulfamidas (quimioterápicos sintéticos) .

.Se denominan antimetabolitos debido a que interfieren un proceso metabólico esencial en las bacterias. el PABA (ácido para-aminobenzoico) necesario para que las bacterias puedan sintetizar ácido fólico. Las sulfamidas son análogos estructurales de un compuesto metabólico natural.

. su metabolismo no puede ser inhibido por las sulfamidas. los humanos no pueden sintetizar ácido fólico. éste es un nutriente esencial (vitamina) que se obtiene exógenamente a través de la dieta. Ya que los humanos carecen de este sistema enzimático especial para incorporar el PABA al ácido fólico.Aunque los humanos requieren ácido fólico en la síntesis de ácidos nucléicos.

Arnycolatopsis orientalis Streptomyces griseus Modo de acción induce síntesis anormal de proteínas ““““ inhiben síntesis de pared celular ““““ interfiere con síntesis de proteínas ““““ inhiben síntesis de pared celular deterioro de membrana celular inhibe formación de pared celular interfiere con síntesis de proteínas ““““ ““““ ““““ .Productos metabólicos microbianos que actúan como antibióticos Antibacterianos •aminoglucósidos •estreptomicina •neomicina •cefalosporinas •cloranfenicol •eritromicina •lincomicina •penicilinas •polipéptidos •Polimixinas •bacitracina •rifamicinas •tetraciclinas •vancomicina •viomicina Antifúngicos •anfotericina B •Griseofulvina •lipopéptidos •iturina A •Surfactina •nistatina Streptomyces nodosus PeniciIIium griseofulvum BaciIIus subtilis BaciIIus subtilis Streptomyces noursei interfiere con función de membrana daña la membrana celular interfiere con función de membrana ““““ daña la membrana celular Producido por Streptomyces griseus Streptomyces fradiae Acremonium cephalosporium Streptomyces venezuelae Saccharopolyspora erythraea Streptomyces lincolnensis Penicillium chrysogenum BaciIIus polymyxa BaciIIus subtilis Amycolatopsis mediterranei Streptomyces spp.

Editorial Reverté. Editorial el manual moderno. John L. Lansing M. Interamericana • Introducción a la Microbiología. Ingraham. Prescott.BIBLIOGRAFIA • Microbiología médica de Jawetz. MacGraw-Hill. . Brock. Melnick y Adelber. • Biología de los Microorganismos. • Microbiología .

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