MANEJO DE LAS CAJAS DE PETRI EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA

Integrantes: Irina Teherán Rubén Lara Cristian Mendoza Wendy Castro Rocío Gómez Yeris Imitola

Introducción

La gente más feliz, no necesariamente tiene lo mejor de todo; simplemente disfrutan al máximo de todo lo que está en su camino.

GENERALIDADES
Cápsula formada por dos discos de cristal que pueden adaptarse entre sí. En el disco que forma el fondo de la caja se deposita el agar y el conjunto puede ser fácilmente esterilizado, sembrado y colocado en la estufa. La caja de Pétri, se utiliza generalmente para la separación de los microbios cuyas colonias se desarrollan aisladamente y pueden ser estudiadas con facilidad.

HISTORIA
En 1881 Koch ideo un método para reproducir bacterias en un medio de cultivo sólido hecho con gelatina, e introdujo el método de la placa para asegurar cultivos puros. El uso de un medio sólido fue una idea nueva, ya que hasta esa época se habían empleado casi exclusivamente infusiones vegetales y otros líquidos, lo que facilito la obtención de cultivos puros de bacterias para su estudio individual. Para los cultivos en placa empleamos una cajita de vidrio llamada cápsula o caja de Petri introducida por Petri, uno de los ayudantes de Koch durante 1887.

UTILIDAD
Es utilizada para preparar cultivos de hongos, virus y bacterias, y también para seleccionar muestras de animales o alimentos. Existen de 2 tipos las plasticas y las de cristal  

Plásticas: son desechables y vienen estériles Cristal: son reutilizables pero nuevas y/o usadas deben pasar por un proceso desinfección y esterilización antes de ser usadas.

PYREX Y KIMAX Y de aluminosilicato. vidrio COREX   .Material de Vidrio: Generalmente el vidrio es de borosolicato.

PYREX Y KIMAX    Resiste todas la temperaturas de trabajo en el laboratorio de rutina Altamente resistente a los ataques químicos Tiene un alto punto de tensión. lo cual significa un pequeño cambio de volumen al cambiar de temperaturas y le da mayor fuerza mecánica .  Bajo coeficiente de expansión lineal ( alrededor de 3 x 10 6 º Celsius). y le impide daños por acción del calor.

el vidrio COREX presenta la ventaja de mayor resistencia mecánica: es más resistente al rayado . la rotura y oscurecimiento causado por los álcalis.COREX Además de las propiedades del Pirex y Kimax. .

LIMPIEZA Y DESINFECCION Material de Vidrio: .

enjuagarlo con abundante agua corriente y finalmente con agua destilada. El material de vidrio debe estar químicamente limpio y libre de contaminación y residuos de grasas o detergentes   . debe lavarse con solución detergente. Todo material proveniente de procedimientos de laboratorio es potencialmente infectante. que aún no ha sido utilizado.Limpieza del Material de Vidrio:  NO OLVIDE NUNCA QUE: El material nuevo de vidrio.

.Limpieza del Material de Vidrio:   Es importante que el material de vidrio se encuentre totalmente limpio antes de usarlo para análisis o para calibrarlo. y que el agua se adhiera a la superficie del vidrio en capa continua. Debe permitir cuando se encuentra limpio que la superficie se humedezca uniformemente.

el mas utilizado es la de ácido sulfúrico y dicromato de potasio sódico. calcio y hierro). potasio.Limpieza del Material de Vidrio: Hay varios métodos para limpiar el material de vidrio del laboratorio. La elección del agente limpiador depende de la naturaleza del contaminante.   . ácido sulfúrico. alcohol y agua desionizada. También se pueden utilizar para lavado de material de vidrio: Ácido nítrico al 20% durante 12 horas ( material para mediciones de iones como sodio.

grasoso o pipetas con coágulos de sangre se debe pasar por una mezcla Sulfocrómica. de lo contrario 12 horas. Enjuagar con agua del chorro y pasar por agua destilada. material manchado. si se necesita de urgencia debe dejarse por lo menos una hora.Limpieza del Material de Vidrio: Material que se va a usa por primera vez. .

Limpieza del Material de Vidrio:      Mezcla Sulfocrómica: Medir 500 ml de agua destilada en erlenmeyer de un litro Añadir lentamente con agitación constante 250 ml de ácido sulfúrico concentrado Sumergir el erlenmeyer en un recipiente que contenga agua corriente para enfriar el contenido Agregar 100 g de dicromato de potasio y mezclar hasta disolver Aforar a un litro con agua destilada .

Se emplea jabón enzimático. Se realiza utilizando el hipoclorito de sodio o dicloroisocianurato de sodio según sea el caso. . dejándolos seguros para su manipulación.Material de vidrio para análisis físicoquímico en el laboratorio: DESCONTAMINACIÓN: Es un procedimiento que remueve microorganismos patógenos de los objetos.

pisos. materia orgánica. usualmente es realizada con agua y detergente enzimático para los equipos. instrumental o elementos. etc) de los objetos o las superficies. etc. . Esta siempre debe proceder a los procesos de desinfección. El detergente común se usa para superficies como paredes.Material de vidrio para análisis físicoquímico en el laboratorio: LIMPIEZA: Es la remoción de toda materia extraña ( suciedad.

no producir daño en los equipos. Debe eliminar la suciedad orgánica e inorgánica. tween ) . Biodegradable y no iónico al 2% ( extran. preferiblemente de pH neutro.Material de vidrio para análisis físicoquímico en el laboratorio: LIMPIEZA: Detergente: Agente químico utilizado para la eliminación de suciedad . disminuyendo la posibilidad de corrosión y picado. no dejar residuos ( facilidad de enjuague) y no ser tóxico para el personal que lo manipula. Se utiliza para pre-remojo del instrumental. Detergente Enzimático: Detergente que contiene enzimas proteolíticas que disuelven la materia orgánica. evitando la manipulación del material contaminado por parte del operario.

si es material para contener como los vasos de precipitados. finalmente debe lavarse con alcohol etílico.Material de vidrio para análisis físicoquímico en el laboratorio:     LIMPIEZA: Después de haber mantenido el material en la disolución limpiante lavar totalmente con agua del grifo lavar finalmente con agua destilada. .

cualquier ruptura en la capa indica un lugar de contaminación. . para que una capa de disolución cubra todo el interior.Material de vidrio para análisis físicoquímico en el laboratorio: LAVADO DE RECIPIENTES:  Debe adicionarse suficiente solución limpiadora y girarlo varias veces.

PROTOCOLO DE DESINFECCION Y LAVADO DE MATERIAL CONTAMINADO EN EL LABORATORIO Material de Vidrio .

Protocolo de Desinfección y Lavado de Material Contaminado en el Laboratorio DESINFECCIÓN: Es un proceso que elimina todos los microorganismos de los objetos o superficies con excepción de las esporas bacterianas. aldehídos. Los mas usados son yodóforos. clorados. alcoholes y peroxígenos . Se realiza utilizando un agente desinfectante.

6% acuoso 0.4-1.4-5% acuoso 100-10.Protocolo de Desinfección y Lavado de Material Contaminado en el Laboratorio GERMICIDA Alcohol etílico Peróxido de hidrogeno Formaldehído Amonios cuaternarios Fenólicos Cloro y derivados Yodóforos Glutaraldehído CONCEN TRACION 50-75% 3-25% 3-8% 0.000 ppm 30-50 ppm yodo libre 2% NIVEL ACCION Intermed Alto Alto Intermed Bajo Intermed Bajo Intermd Intermed Alto BACT Si Si Si Si Si Si Si si VIRU LIPO Si Si Si Si Si Si Si si VIRU HIDRO No Si Si No Si Si Si Si TBC Si Si Si No No Si Si Si HON GOS Si Si Si Si Si Si Si Si ESPO RAS No Si Si No No No No Si .

Protocolo de Desinfección y Lavado de Material Contaminado en el Laboratorio     DESINFECCIÓN: Prepare diariamente una solución de hipoclorito de sodio a 500 PPM. porque es desactivada por acción de la luz directa. para el lavado de material así: 5 cc de límpido comercial (hipoclorito de sodio 5%) 500 cc de agua del chorro Utilícela para descartar el material y para descontaminar el material biológico (muestras) Deje actuar hasta el día siguiente ( mínimo dos horas) Esta solución se debe renovar todos los días. cuando a sido agregada a estos . Produce vapores tóxicos al incinerar los residuos infecciosos.

000 ppm = 38. 13% u otra simplemente cambie en la formula la concentración x= ( 1 litro) x 5.Protocolo de Desinfección y Lavado de Material Contaminado en el Laboratorio Ejemplo: Si deseamos preparar un litro de solución a una concentración de 5000 ppm y el hipoclorito viene en concentración del 5% sería: ( 1 litro) x 5000 ppm = 100 cc de hipoclorito 5 x 10 Si la concentración del cloro cambia sea 6%.46 cc de hipoclorito 13 x 10 .

Añadir agua hasta completar el volumen de solución a preparar. . El recipiente usado debe tener una capacidad superior a la que se va a preparar.Protocolo de Desinfección y Lavado de Material Contaminado en el Laboratorio     Preparación: Medir con probeta plástica los 100 cc de hipoclorito Agregar el hipoclorito al recipiente en el cual se va a preparar.

elementos no críticos.5% y yodo polietoxipolipropoxietanol. Los más usados son yodopovidona en solución o jabón al 2. Desinfectante de nivel intermedio.Protocolo de Desinfección y Lavado de Material Contaminado en el Laboratorio      Compuestos yodóforos: Son líquidos de acción contra virus. No tiene acción sobre esporas bacterianas. hongos y bacterias con un tiempo de contacto de 30 minutos. Desinfectar unidades y quirófanos. .

todos los microorganismos. . tanto en medio de cultivo. como en recipiente o instrumentos.Protocolo de Desinfección y Lavado de Material Contaminado en el Laboratorio ESTERILIZACION: Se hace con el fin de destruir.

15 libras de presión por 20 minutos. .Protocolo de Desinfección y Lavado de Material Contaminado en el Laboratorio ESTERILIZACIÓN: El material que amerite autoclavado por alta contaminación someterlo: a 121ºC.

Protocolo de Desinfección y Lavado de Material Contaminado en el Laboratorio ESTERILIZACIÓN: La central de Esterilización debe cumplir con:  Recepción del material  Lavado  Secado  Inspección  Lubricación  Empaque  Procesamiento  Almacenamiento materiales estériles  Almacenamiento materiales no estériles .

lave con cepillo y asa de pipetas tubos o probetas. . las láminas y laminillas deben ser enjuagadas con el cepillo respectivo o esponjilla ( este material no debe ser lavado más de 5 veces. Las láminas y laminillas sumergirlas en alcohol etílico y secar con tela que no deje escapar lanilla.Protocolo de Desinfección y Lavado de Material Contaminado en el Laboratorio    Una vez descontaminado el material deje en agua con jabón líquido neutro . Saque el agua de jabón con abundante agua del chorro y finalmente deje en agua destilada para extraer los residuos de jabón. después debe descartarse).

mantener en canecas con tapa hermética. luego clasificar y colocar en sus respectivos puestos . Al material biológico de descarte adicionar hipoclorito a 500 PPM y descartar al día siguiente en las bolsas rojas que serán enviadas a incineración.Protocolo de Desinfección y Lavado de Material Contaminado en el Laboratorio   Los tubos y demás material de vidrio dejelos secar al aire. roedores o insectos en la central de aseo y residuos. mientras es recogida por la ruta de recolección. para evitar sean regadas por animales. .

.Protocolo de Desinfección y Lavado de Material Contaminado en el Laboratorio En el laboratorio clínico. biodegradable y agua de buena calidad. de aguas y alimentos. se hace diariamente una limpieza. para remover la suciedad o mugre y posteriormente una sanitización ( proceso de desinfección eficiente) para esto se utiliza un detergente eficaz. La desinfección se hace con el objeto de destruir microorganismos patógenos. toxigénicos y saprofíticos.

Luego se lava con agua corriente. según el volumen de material. . se sumerge en solución detergente neutra y utilizando una esponjilla o cepillo de cerdas suaves se lava nuevamente con agua corriente. 200 ºC por 1 a 2 horas. es colocado en un recipiente de descarte para llevarlo a desinfección y posterior esterilización cuando así lo amerite.Material del Laboratorio de Microbiología LIMPIEZA DE MATERIAL DE VIDRIO:   El material de vidrio que contenga cultivos o cualquier otro tipo de material contaminado por microorganismos. se deja escurrir y se seca al horno en calor seco.

 . se deja escurrir y se seca en calor seco (horno). es colocado en un recipiente para llevarlo al autoclave para su esterilización 121 º C por 30 minutos. Lavar con agua corriente.Material del Laboratorio de Microbiología El material de vidrio o cualquier otro material contaminado con microorganismos. Luego se sumerge en solución detergente y posteriormente se lava normalmente con agua del chorro y una esponjilla.

000 ppm). se escurren. se lavan con abundante agua del chorro. 1 g/L de cloro libre( 1. .Material del Laboratorio de Microbiología  Las pipetas después de su uso. se secan en un ambiente de calor seco. se enjuagan con agua destilada. se colocan en un recipiente con solución de hipoclorito de sodio.

.  El horno de aire caliente. para esterilizar asas resistentes al fuego.Material del Laboratorio de Microbiología ESTERILIZACION POR CALOR SECO:  Se utiliza el flameado por mechero. que se utiliza para esterilizar el material de vidrio y frascos para toma de muestras utiliza una temperatura de 170 º C por dos horas.

subtilis ( oxido Etileno). Se coloca un Indicador ya sea Químico ( Cinta Indicadora para vapor. Integradores químicos. B. Se usa para medios de cultivo y materiales  . se sella con cinta de enmascarar para esterilización y se lleva al autoclave a 121·C por 15 a 20 minutos a 15 a 20 libras de presión. Cinta Indicadora para Oxido de Etileno) o Biológico ( tiras con esporas específicas: Bacillus stearothermophilus ( vapor).Material del Laboratorio de Microbiología ESTERILIZACION EN CALOR HÚMEDO Envolver el material en papel de esterilización (papel kraft).

antes y después de trabajar. virus. hongos y parásitos.Material del Laboratorio de Microbiología ESTERILIZACION POR MEDIOS QUIMICOS:   Se utiliza hipoclorito de sodio al 5 %.000 ppm de cloro libre. que es efectivo contra células bacterianas. para limpiar paredes y pisos y para sumergir el material sucio antes de esterilizar. vegetativas. a una concentración de 1. Se utiliza para limpieza de los mesones. los mesones también son limpiados con fenol al 1 % o formol al 4%. . esporuladas.

tela. Telas y materiales de caucho. Elementos sensibles al calor. madera. compresas.Material del Laboratorio de Microbiología CARACTERÍSTIC VAPOR CALOR SECO PLASMA OXIDO DE ETILENO GAS DE FORMALDEHIDO Qué esterilizar? Líquidos hidrosolubles. Qué no esterilizar? Materiales que contengan celulosa: papel. . silicona. Material termosensible. instrumental delicado con bordes de corte. compresas. líquidos. Elementos sensibles al calor. equipos metálicos e instrumental. Artículos de vidrio. tela. Esterilización de canales largos y angostos como lúmenes. canales ciegos Telas y Siliconas Artículos porosos: papel. material de caucho y material textil. No líquidos y polvos. Elementos sensibles al calor. Polvos. material termosensible.

Tyvek/Mylar.5 horas a 150*C 3 horas a 140*C 6 horas a 120*C 45 min a 50*C( 50Lt) 75 min (100 Lt) 54 min (100 Lt). Ciclo corto: cargas que no contienen endoscopios flexibles Cinta Indicadora para Plasma ( en el exterior del paquete) Indicador químico Cinta indicadora para Vapor ( en el exterior del paquete) Cinta indicadora para Calor Seco ( en el exterior del paquete) Cinta Indicadora para Formaldehído ( en el exterior del paquete) . polipropileno no tejido 8 horas a 65*C Tiempo y Temperatura 30 min a 180*C 1 hora a 170*C 2 horas a 160*C 2. polipropileno no tejido 15 min a 121 *C 10 min a 126*C 3 min a 134 *C ( solo en caso de urgencia) aluminio Tyvek/Mylar y polipropilen no tejido Kraf blanco. polietileno. Temperatura entre 38*C y 55*C.Material del Laboratorio de Microbiología CARACTERÍST VAPOR CALOR SECO PLASMA OXIDO DE ETILENO GAS DE FORMALDEHID Tipo de Empaque Algodón. kraf blanco. polietileno. Cinta Indicadora para Oxido de Etileno ( en el exterior del paquete) Kraf blanco. Tyvek/Mylar. Aireamiento 10 horas. polipropileno no tejido Proceso 6 horas.

Material del Laboratorio de Microbiología CARACTERÍST VAPOR CALOR SECO PLASMA OXIDO DE ETILENO GAS DE FORMALDEHID Indicador químico Integrador químico Vapor ( interior del paquete) Integrador Químico Plasma ( interior del paquete) Integrador químico Oxido de Etileno ( interior del paquete) Test de Esporas Bacillus subtilis variedad niger ( una vez al día en una carga aleatoria) Integrador químico Formaldehído ( interior del paquete) Indicador biológico Test de Esporas de Bacillus stearothermophilus ( una vez al día en una carga aleatoria) Test de Esporas de Bacillus subtilis variedad niger ( una vez al día en una carga aleatoria) Test de Esporas de Bacillus stearothermophilus ( una vez al día en una carga aleatoria) Test de Esporas de Bacillus stearothermopilus (una vez al día en una carga aleatoria) .

Material del Laboratorio de Microbiología DESECHO DE MATERIAL DE CULTIVO Cajas de Petri. medios líquidos de cultivo Cuando? Que usa? Diariamente Hipoclorito de sodio 5000 ppm Recipientes para descartar el material Elementos de protección personal . tubos con solución salina.

.Material del Laboratorio de Microbiología DESECHO DE MATERIAL DE CULTIVO      Esterilizar en el autoclave a 121*C por 1 hora Medios de cultivo de las cajas de petri: desechar en la bolsa roja marcada ³peligroso infeccioso´ Solución salina y tioglicolato: desecharlos en el sifón Depositar los tubos en solución de hipoclorito a 5000 ppm durante 30 minutos Lavar los tubos según las indicaciones del lavado de material de vidrio.

Calidad del material de vidrio  PRUEBAS DE LIMPIEZA PARA EL MATERIAL DE VIDRIO: .

.Prueba de limpieza  Los vasos sucios generalmente tienen gotas de agua en la superficie interna.

.   La forma más simple es llenar el material de vidrio con agua destilada ± desionizada y vaciarla.Prueba de limpieza Observamos si el material de vidrio está cubierto por una capa continua de agua que no forma goticas en las paredes ni fluye de manera discontinua.

que produce manchas blanquecinas en las paredes al secarse. Estas manchas podrían originarse a partir del lavado inadecuado del material con agua dura. .Prueba de limpieza   Otra forma de controlar la calidad del lavado del material de vidrio es la presencia de manchas de agua dentro y fuera del vaso o tubo de ensayo.

por lo menos una vez a la semana para detectar restos de detergentes y debe registrar el resultado de esta supervisión. debe analizar algunos materiales al azar.Prueba de limpieza  El auxiliar del laboratorio como parte integrante del sistema de garantía de calidad. el cual debe ser avalado por el jefe directo o de la sección. .

Revisar la calidad del detergente o del agua y prolongar el tiempo de enjuague con agua del chorro y destilada posterior al proceso de limpieza.  .Prueba de limpieza  Cuando se advierte restos de detergentes en cualquiera de los materiales de vidrio deben tomarse las precauciones y ejercer los procedimientos de corrección de inmediato.

. La aparición de un color rosa ( púrpura) en cualquier momento indica la presencia de detergente residual.Prueba de limpieza    La eliminación del detergente puede comprobarse con una solucion de: 2mg de sulfobromoftaleina sódica BSP en 10 ml de agua destilada O a 20 ml de agua desionizada agregar dos gotas de BSP  la disolución puede hacerse en un recipiente y ser usada para lavar las paredes internas y externas del material de vidrio seleccionado.

.Que Dios los tenga en la palma de su mano Y que los Ángeles los cuiden siempre.

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