MANEJO DE LAS CAJAS DE PETRI EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA

Integrantes: Irina Teherán Rubén Lara Cristian Mendoza Wendy Castro Rocío Gómez Yeris Imitola

Introducción

La gente más feliz, no necesariamente tiene lo mejor de todo; simplemente disfrutan al máximo de todo lo que está en su camino.

GENERALIDADES
Cápsula formada por dos discos de cristal que pueden adaptarse entre sí. En el disco que forma el fondo de la caja se deposita el agar y el conjunto puede ser fácilmente esterilizado, sembrado y colocado en la estufa. La caja de Pétri, se utiliza generalmente para la separación de los microbios cuyas colonias se desarrollan aisladamente y pueden ser estudiadas con facilidad.

HISTORIA
En 1881 Koch ideo un método para reproducir bacterias en un medio de cultivo sólido hecho con gelatina, e introdujo el método de la placa para asegurar cultivos puros. El uso de un medio sólido fue una idea nueva, ya que hasta esa época se habían empleado casi exclusivamente infusiones vegetales y otros líquidos, lo que facilito la obtención de cultivos puros de bacterias para su estudio individual. Para los cultivos en placa empleamos una cajita de vidrio llamada cápsula o caja de Petri introducida por Petri, uno de los ayudantes de Koch durante 1887.

UTILIDAD
Es utilizada para preparar cultivos de hongos, virus y bacterias, y también para seleccionar muestras de animales o alimentos. Existen de 2 tipos las plasticas y las de cristal  

Plásticas: son desechables y vienen estériles Cristal: son reutilizables pero nuevas y/o usadas deben pasar por un proceso desinfección y esterilización antes de ser usadas.

PYREX Y KIMAX Y de aluminosilicato.Material de Vidrio: Generalmente el vidrio es de borosolicato. vidrio COREX   .

lo cual significa un pequeño cambio de volumen al cambiar de temperaturas y le da mayor fuerza mecánica .  Bajo coeficiente de expansión lineal ( alrededor de 3 x 10 6 º Celsius).PYREX Y KIMAX    Resiste todas la temperaturas de trabajo en el laboratorio de rutina Altamente resistente a los ataques químicos Tiene un alto punto de tensión. y le impide daños por acción del calor.

el vidrio COREX presenta la ventaja de mayor resistencia mecánica: es más resistente al rayado . . la rotura y oscurecimiento causado por los álcalis.COREX Además de las propiedades del Pirex y Kimax.

LIMPIEZA Y DESINFECCION Material de Vidrio: .

enjuagarlo con abundante agua corriente y finalmente con agua destilada. que aún no ha sido utilizado.Limpieza del Material de Vidrio:  NO OLVIDE NUNCA QUE: El material nuevo de vidrio. El material de vidrio debe estar químicamente limpio y libre de contaminación y residuos de grasas o detergentes   . Todo material proveniente de procedimientos de laboratorio es potencialmente infectante. debe lavarse con solución detergente.

.Limpieza del Material de Vidrio:   Es importante que el material de vidrio se encuentre totalmente limpio antes de usarlo para análisis o para calibrarlo. Debe permitir cuando se encuentra limpio que la superficie se humedezca uniformemente. y que el agua se adhiera a la superficie del vidrio en capa continua.

el mas utilizado es la de ácido sulfúrico y dicromato de potasio sódico. También se pueden utilizar para lavado de material de vidrio: Ácido nítrico al 20% durante 12 horas ( material para mediciones de iones como sodio. potasio. calcio y hierro).   . alcohol y agua desionizada.Limpieza del Material de Vidrio: Hay varios métodos para limpiar el material de vidrio del laboratorio. La elección del agente limpiador depende de la naturaleza del contaminante. ácido sulfúrico.

si se necesita de urgencia debe dejarse por lo menos una hora. Enjuagar con agua del chorro y pasar por agua destilada.Limpieza del Material de Vidrio: Material que se va a usa por primera vez. grasoso o pipetas con coágulos de sangre se debe pasar por una mezcla Sulfocrómica. material manchado. de lo contrario 12 horas. .

Limpieza del Material de Vidrio:      Mezcla Sulfocrómica: Medir 500 ml de agua destilada en erlenmeyer de un litro Añadir lentamente con agitación constante 250 ml de ácido sulfúrico concentrado Sumergir el erlenmeyer en un recipiente que contenga agua corriente para enfriar el contenido Agregar 100 g de dicromato de potasio y mezclar hasta disolver Aforar a un litro con agua destilada .

. dejándolos seguros para su manipulación.Material de vidrio para análisis físicoquímico en el laboratorio: DESCONTAMINACIÓN: Es un procedimiento que remueve microorganismos patógenos de los objetos. Se realiza utilizando el hipoclorito de sodio o dicloroisocianurato de sodio según sea el caso. Se emplea jabón enzimático.

etc) de los objetos o las superficies. El detergente común se usa para superficies como paredes. Esta siempre debe proceder a los procesos de desinfección. materia orgánica. etc. . pisos.Material de vidrio para análisis físicoquímico en el laboratorio: LIMPIEZA: Es la remoción de toda materia extraña ( suciedad. usualmente es realizada con agua y detergente enzimático para los equipos. instrumental o elementos.

Detergente Enzimático: Detergente que contiene enzimas proteolíticas que disuelven la materia orgánica. Se utiliza para pre-remojo del instrumental.Material de vidrio para análisis físicoquímico en el laboratorio: LIMPIEZA: Detergente: Agente químico utilizado para la eliminación de suciedad . Biodegradable y no iónico al 2% ( extran. no producir daño en los equipos. evitando la manipulación del material contaminado por parte del operario. preferiblemente de pH neutro. Debe eliminar la suciedad orgánica e inorgánica. disminuyendo la posibilidad de corrosión y picado. no dejar residuos ( facilidad de enjuague) y no ser tóxico para el personal que lo manipula. tween ) .

finalmente debe lavarse con alcohol etílico.Material de vidrio para análisis físicoquímico en el laboratorio:     LIMPIEZA: Después de haber mantenido el material en la disolución limpiante lavar totalmente con agua del grifo lavar finalmente con agua destilada. si es material para contener como los vasos de precipitados. .

.Material de vidrio para análisis físicoquímico en el laboratorio: LAVADO DE RECIPIENTES:  Debe adicionarse suficiente solución limpiadora y girarlo varias veces. para que una capa de disolución cubra todo el interior. cualquier ruptura en la capa indica un lugar de contaminación.

PROTOCOLO DE DESINFECCION Y LAVADO DE MATERIAL CONTAMINADO EN EL LABORATORIO Material de Vidrio .

Protocolo de Desinfección y Lavado de Material Contaminado en el Laboratorio DESINFECCIÓN: Es un proceso que elimina todos los microorganismos de los objetos o superficies con excepción de las esporas bacterianas. alcoholes y peroxígenos . clorados. aldehídos. Los mas usados son yodóforos. Se realiza utilizando un agente desinfectante.

4-1.000 ppm 30-50 ppm yodo libre 2% NIVEL ACCION Intermed Alto Alto Intermed Bajo Intermed Bajo Intermd Intermed Alto BACT Si Si Si Si Si Si Si si VIRU LIPO Si Si Si Si Si Si Si si VIRU HIDRO No Si Si No Si Si Si Si TBC Si Si Si No No Si Si Si HON GOS Si Si Si Si Si Si Si Si ESPO RAS No Si Si No No No No Si .6% acuoso 0.Protocolo de Desinfección y Lavado de Material Contaminado en el Laboratorio GERMICIDA Alcohol etílico Peróxido de hidrogeno Formaldehído Amonios cuaternarios Fenólicos Cloro y derivados Yodóforos Glutaraldehído CONCEN TRACION 50-75% 3-25% 3-8% 0.4-5% acuoso 100-10.

porque es desactivada por acción de la luz directa. cuando a sido agregada a estos . para el lavado de material así: 5 cc de límpido comercial (hipoclorito de sodio 5%) 500 cc de agua del chorro Utilícela para descartar el material y para descontaminar el material biológico (muestras) Deje actuar hasta el día siguiente ( mínimo dos horas) Esta solución se debe renovar todos los días. Produce vapores tóxicos al incinerar los residuos infecciosos.Protocolo de Desinfección y Lavado de Material Contaminado en el Laboratorio     DESINFECCIÓN: Prepare diariamente una solución de hipoclorito de sodio a 500 PPM.

13% u otra simplemente cambie en la formula la concentración x= ( 1 litro) x 5.Protocolo de Desinfección y Lavado de Material Contaminado en el Laboratorio Ejemplo: Si deseamos preparar un litro de solución a una concentración de 5000 ppm y el hipoclorito viene en concentración del 5% sería: ( 1 litro) x 5000 ppm = 100 cc de hipoclorito 5 x 10 Si la concentración del cloro cambia sea 6%.46 cc de hipoclorito 13 x 10 .000 ppm = 38.

. El recipiente usado debe tener una capacidad superior a la que se va a preparar. Añadir agua hasta completar el volumen de solución a preparar.Protocolo de Desinfección y Lavado de Material Contaminado en el Laboratorio     Preparación: Medir con probeta plástica los 100 cc de hipoclorito Agregar el hipoclorito al recipiente en el cual se va a preparar.

Desinfectante de nivel intermedio. No tiene acción sobre esporas bacterianas. elementos no críticos. Desinfectar unidades y quirófanos. Los más usados son yodopovidona en solución o jabón al 2. hongos y bacterias con un tiempo de contacto de 30 minutos. .Protocolo de Desinfección y Lavado de Material Contaminado en el Laboratorio      Compuestos yodóforos: Son líquidos de acción contra virus.5% y yodo polietoxipolipropoxietanol.

. como en recipiente o instrumentos. todos los microorganismos.Protocolo de Desinfección y Lavado de Material Contaminado en el Laboratorio ESTERILIZACION: Se hace con el fin de destruir. tanto en medio de cultivo.

.Protocolo de Desinfección y Lavado de Material Contaminado en el Laboratorio ESTERILIZACIÓN: El material que amerite autoclavado por alta contaminación someterlo: a 121ºC. 15 libras de presión por 20 minutos.

Protocolo de Desinfección y Lavado de Material Contaminado en el Laboratorio ESTERILIZACIÓN: La central de Esterilización debe cumplir con:  Recepción del material  Lavado  Secado  Inspección  Lubricación  Empaque  Procesamiento  Almacenamiento materiales estériles  Almacenamiento materiales no estériles .

Saque el agua de jabón con abundante agua del chorro y finalmente deje en agua destilada para extraer los residuos de jabón. . Las láminas y laminillas sumergirlas en alcohol etílico y secar con tela que no deje escapar lanilla. lave con cepillo y asa de pipetas tubos o probetas. después debe descartarse).Protocolo de Desinfección y Lavado de Material Contaminado en el Laboratorio    Una vez descontaminado el material deje en agua con jabón líquido neutro . las láminas y laminillas deben ser enjuagadas con el cepillo respectivo o esponjilla ( este material no debe ser lavado más de 5 veces.

Al material biológico de descarte adicionar hipoclorito a 500 PPM y descartar al día siguiente en las bolsas rojas que serán enviadas a incineración. mientras es recogida por la ruta de recolección.Protocolo de Desinfección y Lavado de Material Contaminado en el Laboratorio   Los tubos y demás material de vidrio dejelos secar al aire. para evitar sean regadas por animales. luego clasificar y colocar en sus respectivos puestos . roedores o insectos en la central de aseo y residuos. mantener en canecas con tapa hermética. .

toxigénicos y saprofíticos. biodegradable y agua de buena calidad. .Protocolo de Desinfección y Lavado de Material Contaminado en el Laboratorio En el laboratorio clínico. para remover la suciedad o mugre y posteriormente una sanitización ( proceso de desinfección eficiente) para esto se utiliza un detergente eficaz. se hace diariamente una limpieza. de aguas y alimentos. La desinfección se hace con el objeto de destruir microorganismos patógenos.

Material del Laboratorio de Microbiología LIMPIEZA DE MATERIAL DE VIDRIO:   El material de vidrio que contenga cultivos o cualquier otro tipo de material contaminado por microorganismos. 200 ºC por 1 a 2 horas. . según el volumen de material. se sumerge en solución detergente neutra y utilizando una esponjilla o cepillo de cerdas suaves se lava nuevamente con agua corriente. es colocado en un recipiente de descarte para llevarlo a desinfección y posterior esterilización cuando así lo amerite. se deja escurrir y se seca al horno en calor seco. Luego se lava con agua corriente.

Luego se sumerge en solución detergente y posteriormente se lava normalmente con agua del chorro y una esponjilla.Material del Laboratorio de Microbiología El material de vidrio o cualquier otro material contaminado con microorganismos. se deja escurrir y se seca en calor seco (horno). Lavar con agua corriente.  . es colocado en un recipiente para llevarlo al autoclave para su esterilización 121 º C por 30 minutos.

se colocan en un recipiente con solución de hipoclorito de sodio. se enjuagan con agua destilada. se escurren.000 ppm). . se secan en un ambiente de calor seco.Material del Laboratorio de Microbiología  Las pipetas después de su uso. se lavan con abundante agua del chorro. 1 g/L de cloro libre( 1.

para esterilizar asas resistentes al fuego.  El horno de aire caliente.Material del Laboratorio de Microbiología ESTERILIZACION POR CALOR SECO:  Se utiliza el flameado por mechero. que se utiliza para esterilizar el material de vidrio y frascos para toma de muestras utiliza una temperatura de 170 º C por dos horas. .

subtilis ( oxido Etileno). Se usa para medios de cultivo y materiales  . B. Se coloca un Indicador ya sea Químico ( Cinta Indicadora para vapor. Integradores químicos. se sella con cinta de enmascarar para esterilización y se lleva al autoclave a 121·C por 15 a 20 minutos a 15 a 20 libras de presión. Cinta Indicadora para Oxido de Etileno) o Biológico ( tiras con esporas específicas: Bacillus stearothermophilus ( vapor).Material del Laboratorio de Microbiología ESTERILIZACION EN CALOR HÚMEDO Envolver el material en papel de esterilización (papel kraft).

a una concentración de 1. virus.000 ppm de cloro libre. . esporuladas. los mesones también son limpiados con fenol al 1 % o formol al 4%. para limpiar paredes y pisos y para sumergir el material sucio antes de esterilizar. antes y después de trabajar. hongos y parásitos. que es efectivo contra células bacterianas.Material del Laboratorio de Microbiología ESTERILIZACION POR MEDIOS QUIMICOS:   Se utiliza hipoclorito de sodio al 5 %. vegetativas. Se utiliza para limpieza de los mesones.

No líquidos y polvos. Elementos sensibles al calor. compresas. silicona. Qué no esterilizar? Materiales que contengan celulosa: papel. líquidos. Elementos sensibles al calor. instrumental delicado con bordes de corte. tela.Material del Laboratorio de Microbiología CARACTERÍSTIC VAPOR CALOR SECO PLASMA OXIDO DE ETILENO GAS DE FORMALDEHIDO Qué esterilizar? Líquidos hidrosolubles. Esterilización de canales largos y angostos como lúmenes. compresas. Material termosensible. Artículos de vidrio. madera. Elementos sensibles al calor. material de caucho y material textil. tela. . Telas y materiales de caucho. equipos metálicos e instrumental. material termosensible. Polvos. canales ciegos Telas y Siliconas Artículos porosos: papel.

polietileno. Tyvek/Mylar. polipropileno no tejido 8 horas a 65*C Tiempo y Temperatura 30 min a 180*C 1 hora a 170*C 2 horas a 160*C 2. Aireamiento 10 horas. polipropileno no tejido Proceso 6 horas. polipropileno no tejido 15 min a 121 *C 10 min a 126*C 3 min a 134 *C ( solo en caso de urgencia) aluminio Tyvek/Mylar y polipropilen no tejido Kraf blanco. Cinta Indicadora para Oxido de Etileno ( en el exterior del paquete) Kraf blanco. Temperatura entre 38*C y 55*C. Ciclo corto: cargas que no contienen endoscopios flexibles Cinta Indicadora para Plasma ( en el exterior del paquete) Indicador químico Cinta indicadora para Vapor ( en el exterior del paquete) Cinta indicadora para Calor Seco ( en el exterior del paquete) Cinta Indicadora para Formaldehído ( en el exterior del paquete) . Tyvek/Mylar.5 horas a 150*C 3 horas a 140*C 6 horas a 120*C 45 min a 50*C( 50Lt) 75 min (100 Lt) 54 min (100 Lt). polietileno.Material del Laboratorio de Microbiología CARACTERÍST VAPOR CALOR SECO PLASMA OXIDO DE ETILENO GAS DE FORMALDEHID Tipo de Empaque Algodón. kraf blanco.

Material del Laboratorio de Microbiología CARACTERÍST VAPOR CALOR SECO PLASMA OXIDO DE ETILENO GAS DE FORMALDEHID Indicador químico Integrador químico Vapor ( interior del paquete) Integrador Químico Plasma ( interior del paquete) Integrador químico Oxido de Etileno ( interior del paquete) Test de Esporas Bacillus subtilis variedad niger ( una vez al día en una carga aleatoria) Integrador químico Formaldehído ( interior del paquete) Indicador biológico Test de Esporas de Bacillus stearothermophilus ( una vez al día en una carga aleatoria) Test de Esporas de Bacillus subtilis variedad niger ( una vez al día en una carga aleatoria) Test de Esporas de Bacillus stearothermophilus ( una vez al día en una carga aleatoria) Test de Esporas de Bacillus stearothermopilus (una vez al día en una carga aleatoria) .

medios líquidos de cultivo Cuando? Que usa? Diariamente Hipoclorito de sodio 5000 ppm Recipientes para descartar el material Elementos de protección personal .Material del Laboratorio de Microbiología DESECHO DE MATERIAL DE CULTIVO Cajas de Petri. tubos con solución salina.

.Material del Laboratorio de Microbiología DESECHO DE MATERIAL DE CULTIVO      Esterilizar en el autoclave a 121*C por 1 hora Medios de cultivo de las cajas de petri: desechar en la bolsa roja marcada ³peligroso infeccioso´ Solución salina y tioglicolato: desecharlos en el sifón Depositar los tubos en solución de hipoclorito a 5000 ppm durante 30 minutos Lavar los tubos según las indicaciones del lavado de material de vidrio.

Calidad del material de vidrio  PRUEBAS DE LIMPIEZA PARA EL MATERIAL DE VIDRIO: .

Prueba de limpieza  Los vasos sucios generalmente tienen gotas de agua en la superficie interna. .

  La forma más simple es llenar el material de vidrio con agua destilada ± desionizada y vaciarla.Prueba de limpieza Observamos si el material de vidrio está cubierto por una capa continua de agua que no forma goticas en las paredes ni fluye de manera discontinua. .

que produce manchas blanquecinas en las paredes al secarse. . Estas manchas podrían originarse a partir del lavado inadecuado del material con agua dura.Prueba de limpieza   Otra forma de controlar la calidad del lavado del material de vidrio es la presencia de manchas de agua dentro y fuera del vaso o tubo de ensayo.

Prueba de limpieza  El auxiliar del laboratorio como parte integrante del sistema de garantía de calidad. por lo menos una vez a la semana para detectar restos de detergentes y debe registrar el resultado de esta supervisión. el cual debe ser avalado por el jefe directo o de la sección. debe analizar algunos materiales al azar. .

 . Revisar la calidad del detergente o del agua y prolongar el tiempo de enjuague con agua del chorro y destilada posterior al proceso de limpieza.Prueba de limpieza  Cuando se advierte restos de detergentes en cualquiera de los materiales de vidrio deben tomarse las precauciones y ejercer los procedimientos de corrección de inmediato.

Prueba de limpieza    La eliminación del detergente puede comprobarse con una solucion de: 2mg de sulfobromoftaleina sódica BSP en 10 ml de agua destilada O a 20 ml de agua desionizada agregar dos gotas de BSP  la disolución puede hacerse en un recipiente y ser usada para lavar las paredes internas y externas del material de vidrio seleccionado. La aparición de un color rosa ( púrpura) en cualquier momento indica la presencia de detergente residual. .

Que Dios los tenga en la palma de su mano Y que los Ángeles los cuiden siempre. .

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