CARIOTIPO

El cariotipo humano y su utilización.

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INTRODUCCIÓN
A mediados del siglo pasado gracias al avance de la
tecnología y la citología surgió la:

CITOGENÉTICA

Con el objetivo de estudiar a los cromosomas y sus

alteraciones.

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Un poquito de historia
Desde mediados del S. XIX hasta el siglo XX no se
supo el número total de cromosomas que conforman
el cariotipo humano…

¿Por qué?

Pues por que los estudios se comenzaron a realizar en

células madre extraídas de embriones que fueron
abortados espontáneamente, se creía que no eran
fuente fidedigna de investigación.
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Y además era muy díficil…
Observar la placa metafásica de los cromosomas pues
en esta fase se encuentran muy juntos, los primeros
resultados eran completamente distintos unos de otros.

Una vez la cuenta fue de 20, otra de 80 y así por un

largo tiempo de investigación continua…

Hoy en día se sabe que el cariotipo humano cuenta con

23 pares de cromosomas y un par SEXUAL, mejor
llamado “gonosoma”
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Levan y Tjio en 1956…
Fueron los descubridores del cariotipo humano.

 ¿Cómo le hicieron?

 Entre los años 1930 y 1940 cultivaron células vivas in

vitro…

 Primero de Pollo

 Después de mamífero
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Técnica del shock hipotónico
Se sumerge una célula viva en una solución hipotónica
Esta se hincha y los cromosomas se separan
Se utilizo colchicina para evitar la polimerización es
decir…DESTRUIR EL HUSO MITÓTICO.

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Ford y Hamerton (1956)
A partir de biopsias testiculares realizaron un trabajo
en el que se explicaba que las espermatogonias tienen
46 cromosomas, mientras que los espermatocitos
tienen 23 cromosomas bivalentes
Por lo tanto:

Se concluye que el cariotipo humano consta de 23 pares

de cromosomas distinguiéndose un par (Gonosoma)
que puede ser X o Y.
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Leujene
En 1959 descubrió la Trisomía 21
Los pequeños con Síndrome de Down presentaban 3
cromosomas en lugar de 2 en el “par 21”…Además de
ser este mas pequeño.

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Moorhead
Descubrió que los linfocitos se reproducen en la
sangre periférica

Y que también lo hacen In vitro…

QUE VENTAJAS OBTUVO:

Los linfocitos son fáciles de obtener
Se pueden obtener muchas metafáses

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También se pueden obtener muestras de:

Cél. Testiculares
Líquido amniótico (vellosidades del corión)
Piel

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MÉTODO:
Se extrae sangre
+ Heparina (para evitar que se coagule)
Se introduce a un medio de cultivo RPMI y se añade
suero bovino fetal
+ Antibióticos
+Fitohemaglutinina  Diferenciación de linfoblastos
______________________________________________
24 horas
+ IL 2División celular (Mitosis)
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Sacrificio:
72 hrs después se procede a realizar un “sacrificio”
Se añade colchicina, lo cual desaparece el huso
acromático…

ES DECIR:
No habrá ANAFASE

Shock Hopotónico (KCl)

Fijador de Carnoy
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¿…Y el cariotipo…?
Pues tras obtener muchas metafases con el proceso
recién explicado se CUENTAN Y CLÁSIFICAN LOS
CROMOSOMAS POR TAMAÑO Y FORMA

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Idiograma
Un idiograma es la representación esquemática del tamaño, forma y patrón de
bandas de todo el complemento cromosómico, los cromosomas se sitúan alineados
por el centrómero, y con el brazo largo siempre hacia abajo.
Los grupos que comprende el cariotipo humano son los siguientes:
- Cromosomas grandes
            Grupo A, (cromosomas 1, 2 y 3), meta y submetacéntricos
            Grupo B, (cromosomas 4 y 5), submetacéntricos
- Cromosomas medianos
    Grupo C, (cromosomas 7, 8, 9, 10, 11, 12 y además los cromosomas  X),     
submetacéntricos
             Grupo D, (cromosomas 13, 14 y 15) acrocéntricos
- Cromosomas pequeños
            Grupo E, (cromosomas 16, 17 y 18) submetacéntricos
            Grupo F, (cromosomas 19 y 20) metacéntricos
            Grupo G, (cromosomas 21 y 22) acrocéntricos
Por acuerdo los cromosomas sexuales X e Y se separan de sus grupos
correspondientes y se ponen juntos aparte al final del cariotipo
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Técnicas de Bandeo:
La llegada de las técnicas de bandeo cromosómico,
dotan hoy a la citogenética de una nueva herramienta
otorgándole una mayor precisión en la
individualización de los cromosomas, facilitando su
agrupamiento y clasificación de genes.
 EN POCAS PALABRAS:

El Mapeo Genético

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QFQ:Bandas Q por fluorecencia usando quinacrina.
Nomeclatura de bandeos morfológicos.

GTG:Bandas G por tratamiento enzimático con tripsina utilizando

Giemsa.
RFA:Bandas R por fluorecencia usando naranja de acridina.
RHG:Bandas R mediante desnaturalización térmica utilizando
Giemesa.
THG:Bandas T por desnaturalización térmica empleando
Giemesa.
CBG:Bandas C por hidróxido de bario utilizando Giemesa.

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Nomeclatura de bandeos dinámicos.
GBG:Bandas G por incorporación de BrdU utilizando
Giemesa.
RBA:Bandas R por incorporación de BrdU empleando
naranja de acridina.
RBG:Bandas R por incorporación de BrdU utilizando
Giemesa.
GB-AAu:Bandas G por incorporación de BrdU empleando
anticuerpos específicos unidos a partículas deoro coloidal.
RB-AAu:Bandas R por incorporación de BrdU usando
anticuerpos específicos unidos a partículas deoro coloidal.
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Bandas Q: la ventaja de las bandas Q es la rapidez de su
obtención
La desventaja: Pierde su brillo en un segundo.

Banda G: las zonas obscuras muestran las zonas de replicación

tardía

Bandas R: Muy fluorescentes, las bandas están invertidas, se

tiñen mas las bandas de C-G de replicación temprana

Bandas C: Tiñen centrómeros y Heterocromatina

Bandas NOR: Tiñe Satélites

Bandas T: Marca telomeros ( Por si falta uno=

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Actualmente se utiliza la técnica

FISH: Se utiliza para la localización de genes específicos.

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Nomenclatura:
La nomenclatura debe ser igual en todos los
laboratorios.
 Entonces: ¿Cómo se nombra el cariotipo?

Número total de cromosomas+ “,”+ genotipo sexual

=
46 ,XY
46, XX

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