Examen coproparasitologico

‡ Características generales de las Enteroparasitosis ‡ Principales protozoosis y helmintiasis intestinales ‡ Ciclos biológicos tipo: a) Entamoeba histolytica b) Taenia saginata c) Enterobius vermicularis d) Anquilostómidos ‡ Principios y utilidad de las técnicas de estudio parasitológico de heces. El examen coproparasitario ‡ Elementos no parasitarios de las heces ‡ El método de Graham

ENTEROPARASITOSIS. Características generales
‡ Tracto digest humano p Numerosos parásitos: ‡ Protozoos ‡ Helmintos ‡ Infestación ‡ Vía digestiva (mayoría de casos) ‡ Vía cutánea ‡ Formas infestantes ‡ QUISTES / OOQUISTES p Protozoos ‡ HUEVOS ‡ LARVAS
p Helmintos p Tenias, Triquina

COMENSALES PATOGENOS

ENTEROPARASITOSIS. Características generales

Mecanismos transmisión ‡ Infestación por FECALISMO ‡ Infestación por CARNIVORISMO ‡ Infestación s/ ciclo ANO-MANO-BOCA ‡ Infestación CUTANEA Mecanismos transmisión
p Relación con ciclo biológico

HELMINTOS ‡ Asacaris lumbricoides ‡ Trichuris trichiura ‡ Hymenolepis nana . ‡ Balantidium coli b) COMENSALES ‡ Entamoeba coli ‡ Endolimax nana ‡ Iodamoeba butschlii ‡ Chilomastix mesnili ‡ Blsatocystis hominis ‡ Entamoeba polecki ‡ Enterocytozoon spp.INFESTACION POR FECALISMO ‡ Característico de parásitos de ciclo biológico MONOXENO PROTOZOOS a) PARASITOS ‡ Entamoeba histolytica ‡ Giardia lamblia ‡ Isospora belli ‡ Cryptosporidium spp.

INFESTACION POR FECALISMO Medio Externo Contam suelo Formas infestantes Ingestión Quistes Ooquistes Huevos Larvas Hosp Infestado (=) Hosp Susceptible .

cdc./dpd.gov/dpdx .www.

INFESTACION POR CARNIVORISMO ‡ En parásitos con ciclos biológicos complejos. Intermediarios ( Ciclos HETEROXENOS) ‡ Entre los hospedadores existe una relación PREDADOR PRESA ‡ El PREDADOR soporta al parásito en su intest. a partir de las formas que elimina el H D con las heces (hosp intermediario) ‡ En el caso del hombre la infestación se adquiere por ingestión de carnes y pescados crudos. o insuficientemente cocinados . con uno o varios Hosp. donde se realiza la f sexuada (Se comporta como Hosp DEFINITIVO) ‡ La Presa se infesta por fecalismo.

INFESTACION por la piel Contacto con H. Definitivo ‡ Algunas especies de helmintos intestinales (s/t nematodos) ‡ Eliminación de: ‡ larvas ‡ huevos muy desarrollados ‡ Se transforman en LARVAS INFESTANTES (larvas filariformes) Penetración piel Migr viscerales ‡ Ancylostoma duodenale ‡ Necator americanus ‡ Strongyloides stercoralis Local definitiva en intestino .

Diagnóstico de laboratorio de las Enteroparasitosis Consideraciones generales: ‡ Numerosas técnicas de examen coproparasitario ‡ Finalidad diferente ‡ Aplicación ‡ General ‡ s Selectiva o específica ‡ Utilidad en función de su capacidad para: ‡ Concentrar elementos parasitarios ‡ Cuantificar la carga parasitaria ‡ Evidenciar difs estadíos evolutivos ‡ Preparar extensiones permanentes .

Diagnóstico de laboratorio de las Enteroparasitosis (2) ‡ IMPORTANTE: ‡ 1) Selección técnica(s) s/ casos ‡ Grupo o especies de parásitos ‡ Fase evolutiva ‡ 2) Examen de varias muestras (3) por paciente .

ESTUDIO PARASITOLOGICO DE HECES ‡ Evidenciación de parásitos que: ‡ Viven en el tracto digestivo ‡ Realizan su tránsito al m ext a través del mismo ‡ I) No todas las técnicas son adecuadas para todos los parásitos: ‡ Importante conocer ciertos datos: ‡ Procedencia geográfica del enfermo ‡ Resumen HC ‡ Resultados otras pruebas/análisis ‡ Información relativa a trattos recientes ‡ II) Un ex aislado con result negativo no tiene ningún valor eliminatorio ‡ III) La muestra debe ser examinada rápidamente .

ESTUDIO PARASITOLOGICO DE HECES Para descartar una parasitosis intestinal: ‡ Realizar al menos 3 exámenes coproparasitarios seriados (a dias alternos) ‡ Tras una adecuada preparación del paciente ‡ Remitiendo las muestras lo mas rápidamente posible al lab .

.. céls epiteliales ... hematíes. mucus ... mas general. ‡ Color (calidad/cantidad flujo biliar) ‡ Presencia de sangre.... que informa sobre: ‡ Aspecto macroscópico de las heces ‡ Consistencia / agua / Veloc tránsito. su relación o proporción con bacterias ..ESTUDIO PARASITOLOGICO DE HECES El examen PARASITOLOGICO DE HECES forma parte del ESTUDIO COPROLOGICO.) ‡ Elementos micóticos. larvas.. huevos.. ‡ Presencia de parásitos (trofoz. leucos. quistes..... ‡ Aspecto microscópico restos alimenticios ‡ Presencia mucus..

y no dan lugar a formas de diseminación ‡ Parasitismo por un único individuo (esp dioicas) ‡ Parasitismo reciente (fase adulta no desarrollada) .ESTUDIO PARASITOLOGICO DE HECES El examen COPROPARASITARIO no resulta de utilidad cuando: ‡ La eliminación de los parásitos no se realiza por el intestino ‡ La puesta de huevos no se lleva a cabo en el intestino ‡ Los parásitos son inmaduros o estériles.

Preparación paciente Régimen alimenticio estricto desde 72 h antes a la recogida de la muestra ( UTOPIA ??) Condiciones mínimas: ‡ Evitar medicamentos opacos no absorbibles ‡ Carbón vegetal ‡ Contrastes radiológicos (papilla baritada) ‡ Sustancias grasas (s/t supositorios) ‡ Evitar alimentos con muchos residuos ‡ Legumbres ‡ Frutas de cutícula resistente ‡ Vegetales con céls duras ‡ Frutos con semillas duras y pequeñas (p ej higos) .ESTUDIO PARASITOLOGICO DE HECES.

ESTUDIO PARASITOLOGICO DE HECES. Muestras Considerar adecuadamente las condiciones de : ‡ Toma de muestra ‡ Asepsia? ‡ Momento? / lugar? ‡ Recipiente ? ‡ Envío de muestra ‡ En hospital ‡ Por correo ‡ Conservación de las muestras ‡ Provisional por frio (att trofozoítos amebas) ‡ Definitiva (soluciones fijadoras) .

TECNICAS DEL EXAMEN COPROPARASITARIO ‡ 1) Examen directo de una pequeña porción de heces frescas ‡ 2) Examen después de aplicar un método de concentración ‡ 3) Examen de extensiones o preparaciones permanentes Examen directo Observación microscópica minuciosa de toda la preparación ‡ Objetivo seco débil (10 x) ‡ Objetivo seco fuerte (25-40 x) ‡ Habitualmente no se emplea obj de inmersión ‡ Importante: No diluir demasiado las muestras .

TECNICAS DEL EXAMEN COPROPARASITARIO Examen directo SF Lugol Movilidad Tinción (Trofozoítos) Vacuolas Núcleos .

TECNICAS DEL EXAMEN COPROPARASITARIO 2) Examen post-concentración ‡ Reunión en un pequeño vol los elementos parasitarios inicialmente dispersos en una gran masa de heces ‡ Numerosos métodos ‡ Ninguno evidencia todos los tipos de parásitos. (cada uno tiene sus indicaciones precisas) Métodos físicos ‡ Por sedimentación ‡ Por flotación ‡ Empleo de 2 fases no miscibles Agua // Eter o Acetato etilo Métodos difásicos .

METODOS DE CONCENTRACION Métodos físicos ‡ Dilución minuciosa heces en líquido o solución de densidad: ‡ Inferior a la de los parásitos (Técnicas de sedimentación) ‡ Superior (Técnicas de flotación) ‡ Ventajas: ‡ Realización muy simple ‡ Precisan poco material ‡ Inconvenientes: ‡ Procesos largos ‡ Exigen mucha manipulación ‡ No aplicables a series grandes de muestras En ciertos casos se puede acelerar x centrifugación suave .

TECNICAS DE CONCENTRACION. Mét de sedimentación simple ‡ Triturar las heces (10-20 g) en agua de grifo ‡ Poner la dil en una probeta de 250-500 cc y rellenar (agua grifo) ‡ Dejar reposar aprox 1 h ‡ Deshechar sobrenadante ‡ Resuspender en agua de grifo ‡ Dejar sedimentar 45 min ‡ Deshechar sobrenadante ‡ Repetir esta op varias veces. Hacer tres tomas: ‡ Superficie ‡ Media altura ‡ Fondo . hasta que el sobrenadante quede transparente ‡ Recoger y examinar el mat sedimentado.

Mét de flotación Características a considerar: Densidad sol empleada > Dens parásitos   Concentración en superficie Película superficial Importante: ‡ Manipular rápidamente ‡ Impreg huevos operculados   Sediment ‡ Alteración morfol huevos (Identificación) Sulfato de cinz Sedimento .TECNICAS DE CONCENTRACION.

Ejemplos Técnicas de sedimentación ‡ Método de sedimentación simple ‡ Método de Faust e Ingalls ‡ Sedimentación en columna alta Técnicas de flotación ‡ Método de Fulleborn ‡ Método de Willis (flotación en salmuera) ‡ Método de Faust (flotación en sulfato de zinc) .METODOS DE CONCENTRACION Métodos físicos.

908) ‡ Empleo de dos fases no-miscibles ‡ Fase acuosa (sol.METODOS DE CONCENTRACION Métodos difásicos ‡ Derivados todos del mét de Telemann (1. el balance hidrófilo-lipófilo . formaldehido) ‡ Fase éter o disolv de lípidos (Acetato de etilo) ‡ Los elementos fecales y los parásitos se localizan en la fase acuosa o en la interfase agua-éter. en función de una característica.

Mansoer y Khalaf Sedimento Parásitos Eter Restos Líp disueltos Formalina .METODOS DE CONCENTRACION Métodos difásicos ‡ Realización : ‡ Dilución de las heces en agua (o el la fase acuosa) ‡ Adición y emulsión con el éter ( o acet de etilo) ‡ Centrifugación suave ‡ Algunos ejemplos: ‡ Método de Telemann ‡ Método de Rivas ‡ Método de Ritchie ‡ Método de Blagg. Schloegel.

Acetato de etilo Restos fecales y grasa Formalina Sedimento (Parásitos) 12 .

% d e t e c t a d o Examen directo. conc por flotación y tinción de hematoxilina-férrica Examen directo y conc por flotación Examen directo Número de exámenes Incremento de la detección de Entamoeba histolytica en relación al número de muestras fecales examinadas y a las técnicas empleadas .

.. que permiten la conservación y la observación cuidadosa y detallada de los parásitos .1.Observación microscópica de preparaciones teñidas..Observación microscópica 2.2.Observación macroscópica 2. Resumen 1. permanentes o no.Observación microscópica de preparaciones ´en frescoµ (entre porta y cubre) ‡ Muestras de heces directamente en SF o Lugol ‡ Muestras de técnicas de concentración 2.OTROS EXAMENES DIRECTOS PARA DIAGNOSTICO DE ENTEROPARASITOSIS Técnicas del Examen Coproparasitario..

pero s/t de trofozoítos de protozoos. ‡ Aplicables a frotis de heces (tb ciertos concentrados) ‡ Técnicas: Las mas empleadas son la de KINYOUN y una modificación de la ZIEHL-NEELSEN TINCION DE HEMATOXILINA-FERRICA ‡ Utilidad: Observación detallada de quistes. . Evidenciación de Cyclospora spp. buena colección permanente Exige una realización cuidadosa. Si se realiza montaje.OTROS EXAMENES DIRECTOS PARA DIAGNOSTICO DE ENTEROPARASITOSIS TINCIONES ACIDO-ALCOHOL RESISTENTES ‡ Utilidad: Demostración de ooquistes de Cryptosporidium spp.

COLORACIÓN DE KINYOUN (Cryptosporidium // Cyclospora) ‡ Fijación frotis: Metanol 30 seg ‡Tinción : 5 min (frio) con sol de Fuscina básica ‡ Fusc básica ‡ Fenol ‡ Etanol (95%) ‡ A dest 4g 8g 90 ml 100 ml ‡ Lavado ‡ a) Etanol 50%: 3-5 min ‡ b) Agua corriente ‡ Decoloración: Acido sulfúrico 1%: 2 min ‡ Contracoloración: Azul metileno Loeffler: 1-2 min ‡ Azul de metileno ‡ Alcohol 95% ‡ KOH 0.01% 0.3 g 30 ml 100 ml .

ESTUDIO PARASITOLOGICO DE HECES. Elementos no parasitarios de las heces ‡ Restos alimenticios semi-digeridos ‡ Células epiteliales (mucosa intestinal) ‡ Células sanguíneas ‡ Leucocitos (úlceras intestinales) ‡ Macrófagos } amebas patógenas ‡ Hematíes ‡ Bacterias ‡ Hongos .

Charcott-Leyden) ‡ Medicamentos . polen etc CRISTALES ‡ Origen alimentario (oxalato de calcio) ‡ Endógeno (Ox calcio. fosfato amónico-magnésico.Elementos no parasitarios de las heces (2) RESTOS ALIMENTICIOS ‡ Tejido conjuntivo ‡ Fibras musculares estríadas (carne) Att tamaño / ángulos ‡ Grasas neutras p Glóbulos refringentes tamaño variable ‡ Acidos grasos p Agujas finas ‡ Almidón ‡ Crudo: Granos en capas concéntricas ‡ Céls reserva amilácea (s/ procedencia) ‡ Celulosa ‡ Digerible: Masas celulósicas (céls reserva) ‡ No digerible: Traqueídas. pelos vegetales.

.OTROS EXAMENES DIRECTOS PARA DIAGNOSTICO DE ENTEROPARASITOSIS 1.Examen directo de líquido duodenal ‡ Se obtiene por sondaje duodenal o con càpsula entérica o test del cordón"´Enterotestµ ‡ Observación ‡ Fresco (directo o tras centrifugación) ‡ Extensiones (frotis) coloreados (tinc AAR) ‡ Utilidad / Rendimiento ‡ Trofozoítos de Giardia lamblia ‡ Ooquistes de Isospora y Cryptosporidium ‡ Huevos de Fasciola hepatica ‡ Larvas de Strongyliodes stercoralis .

Técnica de Graham (Mét de la cinta adhesiva o espátula adhesiva) ‡ Método mas empleado para el diagnóstico de la oxiuriasis o enterobiasis (Enterobius vermicularis) ‡ Observación microscópica del material recogido de la zona perianal..2. antes de salir de la cama . en los márgenes anales ‡ Se envia al laboratorio y se observa a microscopio (10X) IMPORTANTE ‡ Realizar al menos 3-5 tomas antes de informar un resultado negativo ‡ Realizar la toma de muestra a 1ª hora por la mañana. con la sup adhesiva hacia el exterior ‡ Se aplica varias veces sobre la piel. por aplicación de una sup adhesiva (celofán o similar) ‡ La cinta se dispone sobre un soporte rígido (depresor lengua).

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