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V. DETECCION, IDENTIFICACION Y CUANTIFICACION DE PROTOZOARIOS Y HELMINTOS

1. INTRODUCCION

La parasitologia es la eiencia que comprende aquellos seres vivos que de manera permanente 0 temporal viven a expensas de otras organismos. El termino parasito es aplieado en este manual a los Protozoos, Platelmintos y Nematelmintos que se eneuentran normalmente en las heces.

Debido a que estos son excretados en las heces pueden ser trasmitidos al hombre a traves del agua y suelo, eausando ingestion directa 0 indirecta par media de un agente interrnediario.

En los sistemas de tratamiento de aguas residuales es aconsejab1e rea1izar un muestreo continuo, e1 eual nos permita estimar la eficiencia en cuanto a la remocion de parasitos, y la evolucion del potencial de peligro para la salud.

Para el investigador inexperto e1 problema mas grande esta en 1a identificacion de huevos, quistes y parasitos. La eorrecta diferenciacion de la larva rhabditoide de Necator amerieanus y Strongyloides stercaralis de las especies de Rhabditis de vida libre y otras larvas de vida libre que estan presentes en la naturaleza tambien es un problema.

Existen varios metodos complicados y tediosos para rutina. Por tal motivo, el presente manual tiene por finalidad dar a conocer una metodologia y procedimientos practicos para la identificacion y cuantificacion de Protozoarios y Helmintos.

2. DEFINICION

Protozoarios

El phylum protozoarios incluye mas de 30 especies que pueden atacar al hombre.

De estos, doce son patogenos verdaderos, diez son trasmitidos por insectos y el resto (Giardia lamblia y Entamoeba histolitica) pueden ser trasmitidos par moscas 0 par el agua.

Son animales unicelulares, constituidos de una pequena masa de protoplasma conteniendo uno a mas nucleos. En su mayoria son micro6copieos. Se encuentran en

_ 117_

todos los ambientes; unos de vida libre, otros parasitos y soprofitas. No se les reconoce celulas 0 tejidos diferenciados; algunos poseen estructura relativamente compleja.

Ciertos ciliados toman sus alimentos a traves del citostoma 0 boca, continuando a un pequeno tubo 0 citofaringe, que termina en el interior de 1a masa citop1asmatica, as! mismo, poseen orificio anal 0 citoplgeo.

Otros protozoarios tienen una organizacion mas homogenea y la entrada de los alimentos la hacen por absorcion a traves de cualquier punta ce la membrana celu1ar.

En ambos casos, una vez ingerido e1 alimento,dentro de la celula se forma

un vacuolo que contiene las part1culas alimentarias, las cuales son transformadas en sustancias asimilables por lo~ enzimas que contienen los jugos digestivos.

Estas sustancias asimilables atraviesan 1a pared del vacuo10 y son absorbidas por el protoplasma.

De acuerdo a las caracteristicas estructurales de locomocion, los protozoarios se pueden clasificar en: Amebas, flagelados no pigrnentaclos y ciliados.

De los protozoos 1a especie que tiene mayor significado sanitario es la Entamoeba histolytica, conocida como la causante dela disenterla amebiana, bajo condiciones favor abIes puede producir disenterla 0 invadir otros organos como el higado y cerebro, causando serios danos.

Otro protozoario de gran interes en el aspecto de salud es Giardia lamblia, protozoario flagelado. Su d i.s t r Lbuc i.Sn es mundial y La inf'eccian es mas frecuente en los ninos que en los adultos. Es la causante de la diarrea, calicos abdominales, frecuente eliminacion de heces llquidas y palidas, fatiga y perdida de peso.

Otro protozoario de menos importancia es: Balantidium coli.

Helmintos

Elgrupo de los platelmintos se caracteriza por ser gusanos aplanados en sentido dorsoventral, euyo grupo originario esta eonstituido por los turbelarios. Los gusanos chup~dores (trematodes) y los acintados (cestodes) viven exelusivamente de modo parasitario. La base estructural de su cuerpo es un parenquima muscular que consta de tejido conectivo y que esta cruzado par fasclculos de fibras musculares, eirculares, longitudinales, diagonales y dorsoventrales. En este

- 118 -

parenquima estan incluidos intestinos, sistema nerviosQ, sistema de excretas y organos sexuales. Son primariamente hermafroditas, solo en pocas especies hay separacion de sexos (por ejemplo, Schistosoma).

Los 6rganos excretores consistent par 10 general, en dos pequenos canales principales que corren lateralmente Ilevando en el extrema organos termina1es espeeiales llamados eelulas flemlgeras y que desembocan a1 exterior por uno ados orificios.

El parasito intestinal plano de mayor importancia es: el Diphyllobothrium latum, el Hymenolepis ~~, e1 Taenia solium y el I. saginata.

El hombre es el huesped intermediario de la forma larval de los gusanos intestinales planas. Los gusanos eillndricos 0 nematelmintos incluyen muchas espeeies parasitas y tambien de vida libre. Los gusanos que son redondeados tienen par 10 general abertura bucal, intestino terminal y ano.

La superfieie de la mayorla de los nematodos esta formada par una cuticula recta, lisa 0 finamente anillada.

Las especies medicas de mayor importancia incluyen la clase nematoda que son:

Trichinella spiralis, Trichuris trichiura, Strongyloides _stercolaris, Ancylostoma duodenalis, Necator americanus, Ascaris lumbricoides y Enterobius vermicu1aris.

3. METODa DE CONCENTRACION Y LAVADO - CUALITATIVO

E1 examen para 1a identificacion de parasitos y protozoos se realiza por e1 metoda de concentracion par centrifugacion y lavado, e1 que consta de dos procedimientos, e1 de flotacion {sulfato de zinc} y e1 de sedimentacion (formol-ether).

3.1 Resumen del metodo

El metodo de concentracion y 1avado consiste en tomar volumenes adecuados de muestras de agua y centrifugar1as a 2,300 rpm durante dos minutos, decantando e1 sobrenadante. Este proceso de centrifugacion se realiza como minima tres veces, hasta obtener un sobrenadante casi libre de materia en suspension.

- 119 _

El sedimento obtenido por este procedimiento de centrifugacion y lavado se divide en dos partes iguales, una 5e emplea para la tecnica de flotacion y la otra para la de sedimentacion.

La tecnica de flotacion consi5te en usar una solucion de gravedad especifica mas alta que la mayoria de los protozoos, quistes y huevos de helmintos, pero de graved ad espec!fica mas baja que los desechos fecales.

En el procedimiento de la tecnica de flotacion se toma exactamente la mitad del sedimento (20-30 mt, producto de la concentracion y lavados sucesivos), se adiciona su1fato de zinc hasta llenar el tubo y se pro cede a centrifugar a 2,300 rpm durante dos minutos. Se extrae una gota de 1a superficie de 1a pelicula y 5e co1oca en una lamina portaobjeto~ con una gota de solucion yodada de D'Antoni's, cubriendo con una lamina cubreobjeto e inmediatamente se observa a1 microscopio.

Para 1a tecnica de sedimentacion se toma los 20-30 mt del sedimento que queda y s~ transfiere a un tube de centrifuga de 50 mt, se agrega 10 mt de formol al 10%

y 5 mt de ether, procediendo a agitar vigorosamente por 20 segundos. Se centrifuga a 2,000 rpm durante un minuto, luego se elimina e1 tap on de detritus Con un aplicador y se decanta to do e1 sobrenadante excepto e1 sedimento. Se mezc1a e1 sedimento y una gota del mismo se transfiere con una pipeta Pasteur a una lamina portaobjeto, con una gota de solucion yodada de D'Antoni's, cubriendo con una lamina cubreobjeto e inmediatamente se observa a1 microscopio.

3.2 Ap1icacion

La tecnica de flotacion es recomendada generalmente para Oocystis de coccidios, quistes de protozoarios, huevos de nematode y algunos huevos de gusanos pIanos acintados. No es satisfactoria para Tremotodes, Acantacefalo y algunos huevos de gusanos pIanos acintados.

La tecnica de sedimentacion consiste en concentrar quistes de protozoarios, Trematode, Acantacefalo y algunos huevos de gusanos ap1anados que no pueden ser aislados por el metoda de flotacion. Esta tecnica de forma1ina ether es la mejor y

mas efectiva para detectar Schistosoma, gusanos con ganchos (Hook worm) y huevos de Ascaris.

- 120-

La deteccion e ideutificacion de Protozoarios y Helmintos es recomendable para evaluar los sistemas de tratamiento de aguas residuales, can un muestreo continuo, el cual nos permita estirnar la eficiencia en cuanto a su remocion y la evolucian del potencial de peligro para 1a salud.

3.3 Equipos, material y reactivos

3.3.1 Equipos y material Centrlfuga

Con capacidad para centrifugar volumenes grandes tales como It y como minima que de 2,000 rpm.

Microscopio

Este debe ser mono 0 binocular qe acuerdo a la~ exigencias de cada laboratorios. Teniendo como m!nimo oculares de lOx y objetivos de 4x, lOx y 40x.

Balanza

Debe tener capacidad de 200-300 g.

Frascos de muestreo

De preferencia pHisticos con gran capacidad y de boca aricha ,

Frascos de centrlfuga

De vidrio a plastico y con gran capacidad.

Tubos de centrifuga

De vidria 0 plastico, graduadas y con capacidad de 50 m£.

Pipetas

De tamano canveniente para tamar e1 volumen requerido rapidamente, permitiendo un error maximo de 2.5%.

- 121-

Laminas portaobjeto y cubreobjeto /Asas de inoculacion De platino 0 n1quel-cromo.

3.3.2 Reactivos

Solucion de sulfato de zinc

Formula

ZnS04 • 7 H20 Agua destilada

331 g 1 £,

Preparacion

Disolver 331 g de sulfato de zinc en un litro de agua destilada. Se debe verificar la gravedad espec1fica y poner a 1.180. 5e puede almacenar por per1odos largos en frascos blancos.

Solucion yo dada de D'Antoni's
Formula
Yoduro de potasio 1.0 g
Crista1es de yodo 1.5 g
Agua desti1ada 100 mi Preparacion

Disolver 1 g de yodura de potasia y 1.5 g de crista1es de yodo en 100 mt

de agua destilada. Colocar en frasco ambar y usar1a despues de cuatro dras de a1- macenamiento. Es estab1e por per10dos largos. ,

So1ucion de forma1ina

Formula

Formaldehido (40%) Agua desti1ada

10 mt 90 mj,

- 122-

Preparaci6n

A 90 mt de agua destilada agregar 10 mi de Formaldehido 40%. Neutrali~ar agregando tetraborato de sodio hasta 11evar a un pH 7.0 a 7.3.

Eter etllico

De grado analrtico.

3.4 Muestreo

Parala toma de muestras parasitologicas se deben usar frascos de polietileno con capacidad de cuatro litros. No es necesario que esten esteriles, pero deben ser lavadas con abundante agua y enjuagadas con agua destilada. Las muestras deben ser tomadas del mismo punta que las muestras bacteriologicas y siguiendo las mismas recomendaciones para el muestreo (ver pagina 11). Para las muestras de des echo crudo

se tama un litro, para efluentes de lagunas primarias dos litros, y para efluentes de lagunas secundarias y terciarias cuatro litros. Las muestras se deben examinar

en vivo y de preferencia no almacenarlas mas de dos dias despues de su colecci6n.

Si las muestras no se pueden observar en el lapso de dos dras puede preservarselas can formaldehido a1 10%.

3.5 Procedimiento

- LLegada la muestra al laboratorio se procede a colocar en los frascos de centrrfuga.

Centrifugar la muestra a 2,300 rpm durante dos minutos. - Decantar el sobrenadante.

- Concentrar a un volumen de 250 mi.

- A partir de este volumen se procede a lavar la muestras centrifugando y decan-

tando el sobrenadante (evitando agitar el sedimento) y agregando agua de cano hasta abtener el volumen anterior.

- Este lavada se realiza como minimo tres veces hasta obtener un sobrenadante bastante claro.

- El sedimento obtenido par este procedimiento de centrifugacion y lavado se divide en dos partes iguales, una se emplea para la tecnica de flotacion y la otra para la de sedimentacion (ver Figura N° 16).

- 123 -

Tecnica de flotacion

- Tomar 20-30 mR. del sedimento (producto de la concentracion y lavados sucesivos) y calocar en tubas de centrifugade 50 mt, graduados.

- Adicionar sulfato de zinc hasta llenar el tubo de centrifuga.

- Centrifugar a 2,300 rpm durante dos minutos.

Tomar una gota de la superficie de 1a pe1icula con ayuda de una asa de Kolle y colocar en una lamina portaobjeto con una gata de solucion yodada de D'Antoni's. - Cubrir con una lamina cubreobjeto.

- Observar a1 microscopio (ver Figura Ne 16).

Tecnica de sedimentacion

- Tomar 20-30 mt restante del sedimento (producto de 1a concentracion y 1avados sucesivos) y colocar en tubos de centrifuga de 50 mt, graduados.

- Adicionar 10 mt de formalina 10% y 5 mt de et.er , tapar e1 tubo y proceder a agitar vigarosamente par 20 segundos.

Centrifugar a 2,000 rpm durante un minuto.

- Eliminar e1 tapon de detritus que se forma en 1a superficie. con un ap1icador.

Decantar todo el sobreriadante excepto e1 sedimento.

- Mezclar e1 sedimento y transferir con una pipeta Pasteur a una lamina portaobjeto.

- Cubrir con una lamina cubreobjeto.

- Observar a1 microscopio (ver Figura N° 16).

3.6 Resultado

Este metodo se 1imita a expresar cua1itativamente la presencia de Protozoarios y He1mintos.

- 124 -

METODa CUALITATIVO DE PROTOZOOS Y HELMINTOS

I Muestra

Cenr r Lf ugacd Sn

y concentracion a 250 m~

,...._-,----------:a. .~

~,

; Centrifugaci6n

I y lavados

Centrifugaeion y concentr~ cion entre 50-60 mR- -_:

Tee. sedimentacion

Tee. flotaci6n

Agregar

_11[_ sulfato de zinc

r-------._----~~

Agregar I formol-ether-- • ~----~~-----,

Centrifugaci6n,

~ecantaci6n y t oma de sedimento

Identificaci6n

microscopica

Figura N° 16

Centrifugaci6n, Toma de sobrenadante

Identificaci6n microscopica

DIAGRAMA PARA IDENTIFICACION DE PROTOZOOS Y HELMINTOS

- 125 -

DETERMINACION DE PARASITOS

Cuadra No. 29 METODO CUALITATIVO

HOJA ND DE _

PROYECTO __

ANALISTA _

PUNTO DE MUESTREO:

N· DE MUESTRA:

FECHA DE HUESTREO:

FECHA DE ANALISIS:

VOLUHEN UTILIZADO:

VOLUMEN FINAL:

PROTOZOOS/HELMINTOS Sed. lavado Flot. lavado
formol ether sulf. de zinc
Quistes de protozoos








Helmintos huevos/larvas





. - 126 -

3.7. Registro de datos

Cuadro N° 29

- En el

se registra los microorganismos encontrados en cada muestra.

- Tecnica empleada y frecuencia de los organismost desde el punto de vista cualitativo.

4.

rlliTODO DE CONCENTRACION Y LAVADO.

CUANTITATIVO

La cuantificacion puede estar relacionada con el area 0 con el volumen de

agua.

La determinacion por area es cuando los organismos no se encuentran uniformemente distribuidos.

La determinacion por volumen es para la mayor1a de microorganismos y para densidades menores de poblacion.

El metodo de cuantificacion tiende a emplear mayor tiempot pero se hace necesario cuando se quiere conocer el nGmero de quistes y huevos de Protozoos y Helmintos en aguas de recreacion. en procesos de tratamiento de aguas servidas. lodos y aguas destinadas a cultivo de peces.

El volumen a analizar depende de la calidad del agua.

E1 resultado se expresa en numero de organismos por volumen de agua.

4.1 Resumen del metodo

El metoda de concentracion y lavado cuantitativo es similar al metodo anterior. en que volumenes adecuados de muestra son centrifugadosa 2t300 rpm durante dos minutost decantando el sobrenadante. Este proceso de centrifugacion se realiza como minimo tres veces. hasta obtener un sobrenadante casi libre de materia en suspension. E1 sedimento obtenido por este procedimiento de centrifugacion y 1avado se divide

en dos partes igua1est una se emp1ea para 1a tecnica de flotacion y 1a otra para 1a sedimentacion.

La tecnica de f1otacion es 1a misma y se reporta cua1itativamente.

El sedimento resultante de 1a tecnica de sedimentacion es el que se lleva a cuantificar.

- 127 -

- Se toma 20-30 m~ del sedimento y se transfiere a un tubo de centr{fuga de 50 mt graduado, se agrega 10 m~ de formol al 10% y 5 mt de eter, procediendo a agitar vigorosamente por 20 segundos •.

- Se centrifuga a 2,000 rpm durante un minuto, luego con mucho cui dado se elimina el tapon de detritus con un aplicado y se decanta todo el sobrenadante, excepto el sedimento.

- Se mezcla el sedimento, llevando a un volumen uniforme de 2-3 mt agregando formol al 10%, para preservarlo.

- Se coloca un mililitro de este sedimento en una celda de Sedgwick-Rafter (S-R). Esta celda es de facil manipulacion y proporciona datos razonables cuando se utiliza con un microscopic calibrado y equip ado con un micrometro ocular de Whipple (ver Figura 17). La celda S-R mide 50 mm de longitud; 20 rom de ancho y

1 rom de profundidad. El area total es de 1,000 mm2 y el volumen es de 1,000 mm3 o 1 mt. El mictometro ocular de Whipple es un disco de vidrio que contiene un reticulograbado que divide el campo en cien partes 0 cuadraditos iguales (ver Figura N° 17).

El valor en micras del area de cad a uno de los cuadraditos varia segun el ocular y objetivo utilizados. Estevalor debe ser medido para cada objetivo del microscopio con un micrometro de objetivo que es una lamina de vidrio que contiene en el centro una linea de 1 mm de longitud, dividida en 100 partes iguales (10 micras).

Se coloca el micrometro sobre la platina del micros~opio y la cuadricula

de Whipple en el ocular; se hace la superposicion de ambos y de esta manera se puede medir el lado de uno de los cuadraditos.

- El area del cuadradito se obtiene multiplicando este va1orpor 100 y por 10 tanto el nGmero de campos comprendidos en toda la camara de Sedgwick-Rafter.

- Para el recuento en bandas se tiene en cuenta 10 siguiente:

° La longitud de la camara S-R tiene 50 rom; est a representa la longitud de labanda

° La profundidad de la camara S-R es de 1 rom

o El ancho del total del micrometro de Whipple

_~ 128 -

CAMARA DE SEDGWICK - RAFTER






1m MICROMETRO DE WHIPPLE

EN FOQUE DE MICROMETRO DE OCULAR Y MICROMETRO DE OBJETIVO

Figura N° _ _l}_

CANARA PARA RECUENTO Y ACCESORIOS

- 129-

- AI uti1izar un ocular de lOX y un objetivo de 20X ca1ibramos el microscopio y tenemos que e1 ancho total del micrometro de Whipple es 0.5 rom (500 ~).

- E1 vo1umen de una banda es 25 mm3 0 1/40 (2.5 %) del vo1umen total de 1a camara de S-R.

- Para muestras concentradas e1 total de organismos en una camara de S-R se obtiene multiplicando e1 nGmero de ce1u1as contadas por e1 vo1umen final, por e1 factor de enumeracion, entre e1 numero de bandas contadas a1 azar por vo1umen original de muestra par un mililitro. Generalmente se cuenta 2 0 4 bandas; esto depende de 1a densidad de organismos presentes.

4.2 Ap1icacion

E1 contaje par e1 metodo de Sedgwick-Rafter presenta 1a ventaja de ser el mas preciso; el cuidado que debe tenerse es en e1 procesa de concentrar 1a muestra y en los,calculos para la obtencion de un buen factor de calibracion.

La desventaja de este metoda es que al concentrar la muestra se concentra las part!cu1as en suspension y si no se tiene el cuidado debido se dificulta e1 recanocimiento adecuado de los organismos.

4.3 Equipos, material y reactivos

4.3.1 Equipos y material

Los mismos que para e1 ana1isis cua1itativo. Ademas:

Camara de Sedgwick-Rafter

Micrometro de Whipple

Micrometro de objetivo

4.3.2 Reactivas

Los ~is~os que para el analisis cualitativo.

4.4 Muestreo

El muestreo es el mismo que el del metoda .cua LLt.at Lvo .

- 130 -

4.5 Procedimiento

El procedimiento es el mismo que para el analisis cualitativo, teniendo

en cuenta el mismo volumen de muestra a analizar (ver pagina 131), (ver Figura 13).

La tecnica de flotacion es la misma, reportando los datos cualitativos (ver pagina 132).

Para la tecnica de sedimentacion se procede igualmente que para el analisis cualitativo y el sedimento final es llevado a un volumen de 2-3 rot (ver pagina 132). - Homogenizar la muestra.

- Un mililitro de este sedimento se coloca en la celda de Sedgwick-Rafter,

colocando diagonalmente el cubreobjeto a traves de la celda, la cual rotara suavemente; esta cubierta no debe flotar sobre la celda (ver Figura 17).

- Se espera de 15 a 20 minutos de manera que los organismos permanezcan fijos.

- Se procede a realizar el recuento con la ayuda de un microscopio debidamente

calibrado y equipado con un micrometro ocular de Whipple.

- El recuento se realiza por bandas longitudinales seleccionadas al azar; se cuenta to do el area de la banda y como m!nimo 2 a 4 bandas.

- Se puede informar por separado el numero de cada genero e especie.

- La expresion de los resultados es N°/m~.

Ej emplo

Una muestra cuyo volumen inicial fue de 500 rot se concentra a 2.5 mt. Al calibrar el microscopio se obtuvo que el volumen de banda fue de 25 mm3• El nGmero de bandas contadas al azar fue de 2. El total de organismos contados por banda par genera fue de 900. Reemplazando tendremos.

factor de enumeracion:

1,000 mm3 25 mm3

= 40

numero organismos/rot= 900 x 2.5 40 =

2 x sob x 1 x

nGmero organismos/mt 90

- 131 -

Muestra

Contrifugacion y concentracion

a 250 mt

..

Centrifugacion y lavados

•

Centrifugacion y concentracion entre 51 -60 mt

Tecnica de sedimentacion

Adicionar Sulfato de zinc

Tecnica de flotacion

•

,r

Centrifugacion Toma de sobrenadante

Ident;ifieacion Microscopiea

Figura N° 18

METODO CUANTITATIVO DE PROTOZOOS Y HELMINTOS

Adi.cionar _ Formol-eter

,

Centrifugaeion Decantacion y Toma de sedimento

Cuantificacion Microscopica Camara Sedgwick Rafter

- 132 -

4.6 Resultado

La expresion de los resultados es N°/mt.

Los calculos son los siguientes:

La camara de Sedgwick-Rafter tiene una lQngitud de 50 mm, ancho 20 mm, y

1 mm de profundidad. El area total es de 1000 mm2 r el volumen es 1000 mm3 0 sea 1 mR..

Factor de enumeracion

= Volwnen de banda encontrrado en mm3

1.000 mm3

Para muestras concentradas:

factor

Total celulas cont. x vol. final concentrado de enu

N° organismos/mt= N° bandas contadas al aaar x vol. original muestra x Imi ~ mera--

£ioo

Se debe tener en cuenta: - Volumen de la muestra.

- Volumen final del concentrado.

4.7 Registro de datos

Cuadro aD 30

Se registra los organismos encontrados.en cada muestra; e~clusivo para la tecnica de flotacien.

Cuadro ND 31

- Se registra los organismos contados par banda.

El total de los organismos contados en todas las bandas. - Se calcu1a e1 numero de organismos/mt.

- 133 -

Cuadra N° 30

.

DETERMINACION DE PROTOZOOS/HELMINTOS METODO CUALITATIVO

PROYECTO _

PUNTO DE HUESTREQ

FECNA DE MUESTREO

VOLUHEN UTILlZADO _

HOJA N° DE _

ANALISTA _

N°DE MUESTRA

---_-------

FECHA DE ANALISIS _

VOLUMEN FINAL _

I FLOTACION-LAVADO OBSERVACIONES -1
PROTOZOOS/HELMINTOS (SULFATO DE ZINC)
.
I
!
! ~ ]
I I
,
, 1
!

I
,
I
I
.---
i
r--




~
I
I
!
---1
I •
! I
i
1

, L:lb-MB2

~ 134 _

DETERMINACION DE PROTOZOOS/RELMINTOS, CUANTITATIVO

PROYECTO ---------------------

ROJA NO.

ANALISTA _

DE _

Para muestra concentrada

Factor de enume r ac i.Sn .. Vol. de bandas encontrado en 300

1000 mm3

aumentos (mrn3)

No , par ml '" Total organismos contados \ x· vol. final concentradQ x factor de e nume r ac i dn

No. bandas contadas al azar x vol. orig. de muestra x 1m9

Fecha de muestreo

-----

Volumen colectado

Punta de muestreo

No. de muestra __

Volumen analizado _

Vo lumen final cone en t r ado _

I Sedimen tad on: Lavado (formal-ether) !
Protozoos/helmintos (larvas) Total I No ./ml
contado I
Total de band as contadas al az ar
1 2 3 4


!

I
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I I
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, - 135 -

5. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

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water and wastewater. 15 ed. New York, APHA, 1981

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