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Equipamiento:
Hay que utilizar una aguja o lanceta esterilizada para pinchar la piel y el vaso
sanguíneo subyacente. No es recomendable utilizar una hoja de escalpelo (bisturí)
ya que su uso es impreciso y puede ocasionar una mutilación accidental del
animal o de la persona, si el animal no está adecuadamente sujeto.
Lugar:
El corte de la cola tiene que realizarse una sola vez o dos como máximo. (En ratas
topo desnudas se puede hacer pequeñas extirpaciones al final de la cola, que
vuelve a crecer en 4-6 semanas y entonces puede realizarse de nuevo.)
En pequeños animales sin cola, como los cobayas y hámsteres, se puede utilizar
la vena yugular o la de la oreja, pero requiere gran habilidad; en estos mamíferos,
la punción cardiaca con anestesia general puede ser el método más adecuado.
En animales grandes es más probable que una pequeña muestra se tome
directamente de una vena superficial. En las aves, puede practicarse la punción en
las barbas, crestas y moco, en el caso del pavo.
Retirar el pelo a tirones puede realizarse fácilmente en los gatos y conejos sin
causar sufrimiento al animal. Las cremas depilatorias químicas pueden aplicarse
en zonas difíciles pero generalmente no se recomiendan ya que pueden provocar
reacciones en la piel y contaminar las muestras.
Algunos animales tales como los gatos, pueden incomodarse con el ruido
producido por las esquiladoras eléctricas.
Hay que tener en cuenta también, que las pieles de algunos animales, por ejemplo
la de los conejos, son finas y sensibles. No es recomendable afeitar con cuchilla,
jabón y agua ya que causa más daño a la piel que el esquilar.
Las excepciones dependerán de la experiencia del operador, de la soltura a la
hora de esquilar y el efecto que pueda causar en los animales y de la calidad de la
muestra requerida.
Para disminuir toda molestia asociada a la punción venosa, algunos científicos han
investigado recientemente el uso de cremas de anestesia local aplicadas sobre la
piel unos 30-60 minutos antes de tomar la muestra.
Después de haber sacado la sangre, se debe mantener una presión suave pero
firme sobre el lugar durante unos 30 segundos, lo que detendrá rápidamente
cualquier sangrado. También hay varios preparados hemostáticos de alginato de
calcio, fibrillas de colágeno y esponja gelatinosa que pueden servir de ayuda si
persiste el sangrado.
A. Ratón
B. Rata
C. hámster
D. Gerbo
E. Cobayo
F. Conejo
3. Describa La Técnica De Inyección intravenosa, intraperitoneal
Subcutánea, Intramuscular.
A. RATÓN :
Intravenosa.
La vena lateral de la cola del ratón es el sitio más común para esta técnica.
Mejores resultados se logran si la cola se introduce en agua caliente o el ratón es
calentado en la jaula con una lámpara. Las venas se observan cuando la cola es
levantada y girada lentamente en cualquier dirección. La punta de la aguja puede
verse como penetra en la vena. No obstante ser una técnica de fácil aplicación
práctica y entrenamiento es fundamental.
Intraperitoneal.
Subcutánea.
Intravenosa.
Intraperitoneal.
La restricción del animal puede realizarse con el apoyo de otra persona o el uso de
anestesia ligera.
Intramuscular.
La espalda y los músculos de las patas traseras son idóneos para esta técnica. Al
igual que en el ratón debe tenerse cuidado con dañar estructuras vitales. La
restricción del animal puede realizarse con el apoyo de otra persona o el uso de
anestesia ligera.
Subcutánea.
C. CONEJO:
Intravenosa.
Intramuscular.
El lugar más común es la parte trasera del músculo lateral. Si se requiere realizar
más de una punción el área debe de rotarse. El pelo debe ser rasurado y la piel
desinfectada. Debe tenerse en cuenta el apoyo de un asistente o de un equipo de
restricción adecuado.
Subcutánea.
D. COBAYO:
Intravenosa.
Varias venas son utilizadas pero entre individuos existe variación en el tamaño.
Entre las más usadas está la del metatarso lateral, cefálica, safena (27g) y la vena
marginal de la oreja para usar una aguja pequeña (30g. Catéteres deben ser
colocados en la vena yugular.
Intraperitoneal.
Intramuscular.
Subcutánea.
a. los lugares más utilizados para realizar esta práctica son el tercio medio del
antebrazo.
A. RATÓN:
Se cubre con la palma de la mano toda su espalda con los dedos rodeando su
cuerpo cerca del cuello, debajo de las axilas de sus patas delanteras. Las ratas
pueden ser también sujetadas por la cola de forma temporal. La sujeción de la
rata con una mano es lo más común y efectivo para ejercer el control adecuado
y debe estar acompañado de la sujeción de las patas y la cola con la otra mano
para un control total. En esta posición otra persona puede realizar el examen o
el tratamiento en el animal. Ratas jóvenes y más pequeñas pueden ser
manejadas de la misma forma que un ratón, cuando su tamaño no permita la
sujeción con la mano. Un hueso plano que se encuentra en la espalda de la rata
llamado Chassaignac, hace difícil la sujeción de la piel de la rata. Las ratas
pueden morder y determinadas cepas y líneas son más agresivas, por ejemplo,
la F-344 es más agresiva que la Sprague Dawley, por lo que el cuidado y la
experiencia son determinantes para un manejo correcto y sin heridas. Existen
dispositivos de restricción aplicables a ratas que ayudan a la sujeción y al
manejo correcto del animal.
C. HAMSTER:
D. GERBO:
E. COBAYO:
Los cobayos rara vez muerden. Son tímidos y la sujeción debe hacerse firme
pues tratan de escapar cuando se les manipula. Se sujetan muy bien colocando
el dedo pulgar e índice alrededor del cuello, con la palma de la mano sobre la
espalda y el resto de los dedos alrededor del cuerpo. Cuando se mantiene
colgado, la otra mano debe sujetar la parte inferior de su cuerpo. Ver figura 4.
F. CONEJO:
Los conejos no muerden con frecuencia pero pueden causar heridas con las
uñas de sus patas. Sujételo de forma tal que las patas traseras estén lejos del
cuerpo del operario. Sujetándolo por la piel sobre los hombros con la cabeza en
dirección al operario es el mejor método de sujeción para un conejo. Cuando
esté colgado, se debe sujetar la parte bajo del cuerpo con la otra mano. Ver
figura 5.
Los conejos nunca deben ser levantados por las orejas. Si el conejo comienza a
moverse violentamente y en rotación, debe colocarse rápidamente sobre una
superficie plana y esperar a que se tranquilice. Este movimiento violento y en
forma circular puede traer como consecuencia la fractura de una o más
vértebras lumbares y daño fatal en la espina dorsal.
Los conejos pueden ser llevados a un estado de hipnosis cuando se les acaricia
sobre su espalda y el abdomen. Durante la sujeción los conejos pueden intentar
escapar de forma violenta y pueden dañarse con la aguja o cualquier otro
instrumento pudiendo causar daños en el animal o el operario. Por lo tanto la
sujeción firme debe realizarse antes de iniciar el procedimiento experimental.
Las jaulas de restricción son muy eficientes para garantizar lo anterior, como la
que se muestra en la Figura 6
TÉCNICA.
Figura 8.- Método para la extracción de sangre del corazón en rata. El latido del corazón es
palpado con el dedo y la aguja es introducida pegada al dedo a través del pecho en la cámara
cardiaca como se muestra en la figura izquierda. Luego la sangre se extrae como se muestra en la
figura 9.
El mejor método para extraer mayores cantidades de sangre del conejo es el uso
de la arteria de la oreja y un vacutainer de 50 cc. Con esta técnica entre 30 a 40 cc
de sangre pueden ser colectadas. El conejo debe estar bien sujeto y evitarse los
hematomas. Puede consultar a los médicos veterinarios de la UPEAL- Cinvestav
para cualquier duda. En el ratón la toma de muestra de sangre de la cola es útil
para hematocrito, conteos celulares y hemoglobina.
La cola debe ser calentada en agua a 40 - 50°C. El animal debe ser anestesiado
antes. Después de la desinfección de la cola, 1 o 2 mm de la punta de la cola
pueden cortarse y la sangre recogida. Si la sangre no sale, se puede “ordeñar” la
cola.
Aunque es un método útil, tanto este como el corte de dedos en ratón deben ser
evitado lo más posible. La toma de muestra en vena de la cola del ratón y la rata
es posible. La vena se ve lateralmente cerca de la base de la cola, se requiere
buena iluminación y dilatación para observarse mejor.
Para inyectar a los animales la [ ] de bacterias, debe ser de 109 bacterias por ml.
Tubo # 3, del Nefelómetro de Mac-Farland.
Densidad Aproximado
TUBO. CLORURO DE BARIO 1%. H2S4 Al 1%.
De Bacterias Millón/ml.
3. 0,3. 9,7. 900.
PREPARACION DE ANTISUERO
Los antisueros contra antigenos bacterianos pueden ser producidos por inyección
parenteral, en animales, de una suspensión de bacterias intactas o una solución
de material antigénico purificado obtenido de la bacteria.
Antígenos celulares:
Antígenos Solubles:
Este tipo de antígeno debe estar preferiblemente liofilizado procediendo de la
siguiente forma:
Antígenos Celulares:
tomar el mismo volumen de la suspensión celular que el que se utilizará
como inóculo de inmunización, p.e. 0.2mL de la suspensión microbiana si
se requieren 0.2 mL de inóculo por cada animal de experimentación.
Antígenos solubles:
homogeneizar con cuidado colocando el tubo entre las manos sin hacer
Movimientos rotacionales.
Existen diversos tipos de adyuvantes entre los que podemos mencionar sustancias
biológicas (diferentes microorganismos), productos químicamente definidos en
hongos y bacterias, productos biológicos del sistema inmune, productos sintéticos
análogos a los biológicos, preparaciones químicas (compuestos del Aluminio tales
como Al(OH)3 y Al(SO4), Levamisol, Liposomas, Dextrasulfato, emulsiones
oleosas (AFI), productos naturales (polisacáridos)
INTRODUCCION
Uno de esos casos es la obtención de los antisueros que gracias a ellos es que
podernos contar hoy en día con las vacunas, gran avance que en tiempos pasados
no se tenia, lo cual era causante de muchas muertes por enfermedades que
podían ser tratadas o evitadas con solo una inyección de este antisuero, claro y
especifico para determinada enfermedad.
Incluso hoy en día estamos en continua lucha por seguir encontrando mas
opciones de cura para otras enfermedades que nos afligen.
LABORATORIO DE INMUNÓLOGIA.
PRESENTADO A:
Dra. MARIA LOURDES ÁLVAREZ G.
UNIVESITARIA DE SANTANDER.
BACTERIOLOGIA Y LABORATORIO CLINICO.
CÚCUTA.
2005 - A.
TÉCNICAS DE INOCULACIÓN, SANGRÍA DE ANIMALES,
OBTENCIÓN DE ANTIGENOS BACTERIANOS Y
PREPARACIÓN DE ANTISUEROS.
LABORATORIO DE INMUNÓLOGIA.
PRESENTADO A:
Dra. MARIA LOURDES ÁLVAREZ G.
PRESENTADO POR:
LEIDY YUDITH ANGARITA BAUTISTA
CODIGO: 02171043.
UNIVESITARIA DE SANTANDER.
BACTERIOLOGIA Y LABORATORIO CLINICO.
CÚCUTA.
2005 – A.
BIBLIOGRAFÍA.
http://www.secal.es/word-pdf/sangre.pdf.
http://cinvestav.mx/upeal/nom82.html
http://cinvestav.mx/upeal/PI-11-02.htmlhttp://cinvestav.mx/upeal/PI-
1102.html