1.

Determinaciones analíticas a realizar en una muestra de sangre

• Hematimétricas: Esta determinación comprende, por ejemplo
recuento de glóbulos rojos, blancos, fórmula leucocitaria,
recuento de plaquetas,
determinación de las cifras de
Hb, determinación de índices
corpusculares (VCM, HCM,
CHCM), estos índices se
combinan con el recuento de
glóbulos rojos, determinación
hematocrito, determinación
Hb y VSG.

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• Bioquímicas: Determinación de proteínas, proteínas totales,
determinación de las distintas
proteínas, determinación de glucemia,
determinación de urea, determinación
de creatinina, que es un resultante
del metabolismo de proteínas
musculares; ácido úrico, es resultante
del metabolismo de las bases púricas
y pirimidinicas. Colesterol, aparece
en nuestro organismo por dos vías,
una porque hay un colesterol
endógeno y otra que depende de las
grasas saturadas que tomamos en la
dieta, la estructura base del colesterol
es un compuesto químico que se llama
ciclopentanohidrofenantreno.
Triglicéridos, son gases absorbidos y
circulantes en sangre, un alto valor de
los triglicéridos junto a un colesterol
elevado aumenta el riesgo de
enfermedad cardiovascular.
Transaminasas, se determinan dos
GOT o AST y GPT o ALT, son interesantes en la clínica porque
dan idea de alguna patología hepática, pero sobre todo la GPT,
más específica del hígado y la GOT del corazón. Transferasa
(φGT) gammagrutaniltrasnferasa que también indica el estado del
hígado, y sobre todo aumenta cuando hay una gran absorción de
alcohol. Amilasa, actúa sobre todo sobre los hidratos de carbono,
y descompone los polisacáridos en monosacáridos, es segregada
sobre todo por el páncreas, una proporción también está en la
saliva. Bilirrubina, aparece como consecuencia del metabolismo
de la Hb, hay dos tipos de bilirrubina, directa e indirecta, la
bilirrubina que se forma a partir de la Hb puede ser tóxica para el
cerebro cuando adquiere tasas elevadas, la bilirrubina indirecta es
la que llega al hígado y se une con el ácido glucurónico, y es
transportado por este ácido glucurónico y esto sería ya la
bilirrubina directa. Se produce una ictericia cuando la bilirrubina
es alta. Pruebas hormonales, por ejemplo el páncreas segrega
dos hormonas importantes insulina y glucagón, entre las dos
controlan la glucosa. Determinaciones de iones, interesan en los
casos que se quieren conocer datos del equilibrio hidrosalino.
Determinaciones antigénicas, por ejemplo el antígeno
prostático. Inmunoglobulinas.

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 • Microbiología: Normalmente la sangre es estéril pero puede haber
algún germen por los siguientes motivos:
Bacteremia, la sangre no está infectada, contiene bacterias
pero que están de paso.
Septicemia, la sangre contiene gérmenes que la colonizan.
Se puede realizar entonces en estos casos estudios de bacterias
en sangre, para eso se hacen hemocultivos y sino se pueden
hacer estudios de serología microbiana para poder encontrar
antígenos en el organismo.
• Banco de sangre: Determinación del grupo sanguíneo,
determinación de VIH, determinación
de serología.
2. Recogida de muestras
Las técnicas son punción cutánea,
punción venosa, punción arterial, vista
anteriormente y la punción de médula
ósea.
La médula ósea es uno de los lugares donde se producen
células sanguíneas, hay dos tipos de MO, la MO roja y la MO
amarilla. La MO roja tiene propiedades hematopoyéticas. La MO roja
en los niño ocupa casi toda la proporción, pero según va creciendo esta
MO roja va cambiando a amarilla, de todas formas la MO roja sigue
persistiendo en los borde de los huesos (epífisis) sobre todo en la
epífisis del esternón y de la pelvis.
La MO amarilla no tiene propiedades hematopoyéticas y
tiene un gran contenido de grasa. Se encuentra sobre todo en la
metáfisis de los huesos, que es
el lugar donde crecen los
huesos.
En un adulto la punción
normalmente se realiza en la
cresta ilíaca o en el esternón, no
se suele realizar en las zonas de
la epífisis porque sería una
técnica de gran riesgo,
mediante la punción de la MO
nos permite estudiar las
características de células
hematológicas, que no se ven
en la sangre, pero no siempre se
puede hacer esta punción, hay
contraindicaciones, por ejemplo
cuando existen problemas de

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 coagulación. Esta prueba sirve para confirmar enfermedades como
anemias aplásicas, leucemias, trombopenia, mieloma múltiple o
enfermedades de macroglobulemias.
Esta técnica se realiza normalmente a nivel del esternón entre la
2º y la 3º costilla, otra
zona sería la cresta ilíaca
y en los niños muchas
veces se hace a nivel de
la cresta tibial. Una vez
localizado el sitio de
punción se limpia la zona
con alcohol de 70º, luego
se administra un
anestésico local y se
pincha a través del hueso con un trocar con movimientos circulares,
una vez en el interior del hueso se retira una parte que se llama el
fiador del trocar, el trocar entonces se conecta como una jeringa y se
aspira. El material aspirado se deposita entonces sobre un porta, se
deja secar y se tiñe.
Actualmente se realiza la biopsia de médula porque ofrece más
información que el aspirado, se utiliza una técnica parecida a la
anterior, pero el trocado lleva una pieza cortante con la que se toma el
trozo de tejido. El aspirado se hace también para estudios de
microbiología, por ejemplo cuando hay una infección de MO.
3. Fase preanalítica y preparación previa
Esta fase preanalítica incluye lo siguiente:
• Una consulta médica
• Una petición de análisis
• Obtención de la muestra
• Transporte de la muestra y de la solicitud
• Recepción en el laboratorio de la petición de la muestra
• Fase analítica, manipulación de la muestra
• Fase postanalítica, elaboración de los resultados
La fase preanalítica abarca en realidad todos los procesos desde el
momento en que se hace la petición hasta que se realiza el análisis, y es
una fase muy importante porque hay unos factores que van a influir de
forma muy significativa sobre los resultado, incluso pueden llegar a
anularlos. Estos factores se denominan variabilidad preanalítica, y a
su vez comprende variabilidad biológica individual, dentro de esta
variabilidad podemos distinguir una variación intradía (a cualquier hora
del día) o interdía (entre distintos días).

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 Hay una variabilidad por factores fisiológicos, podrían tener en
cuanta:
a) La ingesta de alimentos puede afectar a los
componentes bioquímicos del suero. Esta ingesta
afecta a los análisis de orina.
b) Variaciones horarias y clínicas, en condiciones
normales una hormona ACTH, el cortisol,
tiroides, todas ellas tienen un ritmo circadiano,
varía la secreción a lo largo del día, incluso el
ciclo menstrual dependiendo del día puede
provocar alteraciones sobre el colesterol,
albúminas.
c) Actividad física, el ejercicio moderado provoca
un descenso de la concentración de la glucosa,
este ejercicio también puede provocar una
variación de la enzima CPK o un aumento de la
creatinina.
d) Drogas

autorizadas, como la cafeina, su ingesta provoca

un aumento de las cifras de triglicéridos, un
aumento del cortisol plasmático, la ingesta de
alcohol que hace que suban los niveles de
glucosa, el tabaco debido al exceso de CO hace
que los G.R. aumenten.
Variabilidad por factores de extracción, por ejemplo la postura
en el momento de la extracción puede llevar a variaciones del 5% de los
resultados, sobre todo en aumento de
proteínas y colesterol pero también de
algún ión como Na+, K+ e incluso
algunas hormonas, renina y
angiotensina. Tiempo excesivo de
aplicación del torniquete, cuando el
torniquete está más de 1 minuto
aplicado puede variar un 6%, y así

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con más parámetros, lo que ocurre es que el H2O plasmática se escapa
de los vasos con la aplicación del torniquete y eso provoca alteración en
los tejidos de hipoxia.
Variabilidad debido al proceso de extracción, se basa en componentes
que pueden existir en los tubos de extracción como el uso de los
anticoagulantes, por ejemplo EDTA, actúan como quebrantes del Ca con
lo cual no deja Ca en circulación e impide la coagulación. Un exceso de
EDTA provoca alteraciones en los eritrocitos en los leucocitos y
destruye plaquetas. La heparina conserva mejor la morfología de los
glóbulos rojos.
Variabilidad debido a factores de la muestra o procesamiento, por
ejemplo la muestra está hemolizada, debido a la hemólisis pueden
aparecer alteraciones en los resultados, la hemólisis puede ser causa por
una mala extracción o debido a una enfermedad, otras veces hay sueros
lipémicos, cuando el
paciente no respeta la
hora de ayuno nos
encontramos con sueros
con mucha grasa,
lechosos, y ese suero va
a hacer que varíen las
técnicas fotométricas,
otras veces los sueros
pueden entrar ictéricos,
cuando esta muy
aumentada la
concentración de bilirrubina, que puede ser por una enfermedad o
porque hubo una hemólisis masiva de la muestra, nos podemos
encontrar con que aparecen interferencias y resultados muy alterados.
4. Manipulación y procesamiento de la muestra
Muestras de sangre, una vez que se tiene la muestra para
analizar esta se tiene que dirigir al laboratorio correspondiente, el
transporte de la muestra es un proceso delicado, debido a que las células
sanguíneas son frágiles. Las muestras tienen que llegar en perfecto
estado, etiquetadas y en el tubo adecuado. Para eso la muestra se tiene
que tratar con anticoagulantes
Anticoagulantes, son compuestos que evitan la coagulación
de la sangre que se utilizan para poder obtener el plasma o también para
poder mantener la sangre total. Tiene que cumplir algunas
características: No debe interferir en el estado fisiológico ni en el
morfológico de las células, y además tiene que permitir que se pueda
retrasar el análisis de la muestra. De forma general una muestra no debe
estar más de 24 horas en el refrigerador a 4ºC.

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 Tipos de anticoagulantes:

• Citrato sódico, este anticoagulante impide que el Ca se ionice, el Ca

es indispensable para la coagulación, el citrato se utiliza en
los tubos de hemostasia en la siguiente concentración 1V de
citrato para 9V de sangre, también se utiliza el citrato en la
VSG, se utiliza 1V de citrato para 4V de sangre
Tapón azul: Tubo estéril con anticoagulante citrato de sodio (1/9)

Tapón negro: Tubo estéril con anticoagulante citrato de sodio (1/4)

• EDTA, (Etilen diamino tetraacético), se encuentra en

forma de sal disódica o en forma de sal tripotásica, actúa como
quelante del Ca, es decir que se fija al calcio y así impide que el Ca
pueda intervenir en los procesos de coagulación, los tubos que
contienen EDTA se utilizan para recuentos celulares porque el EDTA
respeta la morfología de las células, es capaz de aguantar la sangre
durante 24 horas a 4ºC, un exceso de EDTA provoca
cambios degenerativos y destruye las plaquetas. Se
recomienda que la sangre recogida con EDTA se analice
antes de 2 horas porque sino las plaquetas se aglutinan, se
recomienda una concentración de EDTA 1,5 mg/ml de
sangre.
Tapón lila: Tubo estéril con anticoagulante EDTA

• Heparina, es un anticoagulante fisiológico, impide que la

protrombina se transforme en trombina, para que
exista la coagulación tiene que haber fibrina, y para
que esta se pueda formar se necesita fibrinógeno,
pero el fibrinógeno necesita la formación de la
trombina y esta a su vez necesita la presencia de
protrombina. La heparina se puede encontrar en
forma sódica o de litio, la heparina conserva muy bien la
morfología de las células, sin embargo no sirve para
realizar frotis sanguíneos porque las células cogen un
color azulado que dificulta después la observación. La
concentración utilizada es de 15-20 μl/ ml de sangre, se
utiliza en gasometrías.
Tapón verde: Tubo estéril con anticoagulante heparina sódica

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 • Fluoruro, se utiliza porque es muy buen conservante de la glucosa.
• ACD, se utiliza en bancos de sangre y también cuando se quiere
realizar un estudio metabólico de los hematíes. Está
formado por ácido cítrico, citrato sódico, dextrosa y
agua destilada y se utiliza 1 V de ACD por 4 V de
sangre.
Tapón amarillo:Tubo estéril con aditivo de ácido cítrico-dextrosa

Tubos de recogida de muestras

A temperatura ambiente las reacciones biológicas transcurren 4 veces

más rápido que como se haría en el interior del organismo, las muestras de
sangre se conservan bien si no transcurre más de una hora desde la
extracción, pero si el análisis se va a demorar tiene que ser refrigerada a
4ºC, no se puede refrigerar la sangre que se vaya a utilizar para obtener
luego suero o plasma, en esos casos hay que hacer primero la separación y
luego refrigerar.

• Tubos de hemograma, que se utilizan para

recuentos celulares, se identifican porque
tiene un tapón malva (EDTA K3).
• Tubos de hemostasia, son tubos que contienen
citrato en porción 1/9, las pruebas de
hemostasia se hacen en plasma y para eso hay
que centrifugar antes de que transcurra 1 hora
desde la extracción, una vez que se obtiene el
plasma se puede congelar (-20/-40 ºC), sino se congela las
determinaciones no deben superara las 6 horas de espera y se pondría
en un refrigerador.
• Tubos para V.S.G., tapón negro, citrato ¼
• Tubos para bioquímica, tapón amarillo, lleva un gel separador. Las
determinaciones se hacen en suero y sino
es posible en plasma. Se utilizan aquellos
tubos que tienen gel por su comodidad,
porque al centrifugar el gel se coloca entre
las células y el suero y no deja que se
mezcle, esos tubos con gel permiten
conservar la sangre hasta 48 horas.
5. Procesamiento de muestras de
hemostasia, hematimetria y
bioquimica
a) Para hemostasia, las muestras de
sangre para la determinación de

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 hemostasia deben llegar al laboratorio en el tubo con tapón azul, que
llevaría como anticoagulante citrato sódico, hay que asegurarse de
que no pase más de 1 hora desde la extracción para obtener suero,
entonces se somete a centrifugación a 1500 G durante 15 minutos.
Se puede obtener de estos tubos plasma pobre en plaquetas, una vez
que se realice la separación la analítica se tiene que hacer antes de 6
horas, sino se tiene que congelar.
b) Para hematimetria, las muestras deben estar en un tubo de tapón
malva con EDTA, las determinaciones deben realizarse en dos horas
después de la extracción. De este tubo se hacen los siguientes
parámetros: recuentos celulares, determinación hematocrito,
determinación Hb, índices corpusculares, recuentos de reticulocitos.
No se puede hacer la VSG.
c) Para bioquímica, las muestras van a pasar por 3 etapas,
precentrifugación, centrifugación y postcentrifugación.
• Precentrifugación: las determinaciones se hacen en
suero o plasma, pero no en sangre total. Las muestras
deben ser refrigeradas porque se podría alterar
algunos iones Na+ K+.
• Centrifugación: la sangre debe permanecer en su
recipiente hasta que comience su procesamiento, si
lo que queremos es obtener plasma entonces hay que
centrifugar la muestra antes de que pase 1 hora
después de la extracción. La velocidad debe ser entre
850 y 1000 G, siempre en el recipiente original. Si el
tubo no tiene gel hay que
dejar coagular la sangre y
luego centrifugar,
entonces se puede hacer a
menor velocidad, nunca
se puede centrifugar los
tubos abiertos y cada vez
se usan más los tubos con
gel.
• Postcentrifugación: hay
que estar seguros de que
el suero está libre de
células, si hemos
utilizado tubos con gel, el
gel va a impedir que haya
esa mezcla, sino se han
empleado tubos con gel

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 se tiene que separar y luego ya se pueden hacer las
determinaciones.
6. Volantes de petición

Un volante de petición es un documento que tiene

que acompañar a cada muestra y que contiene todos los
datos que son precisos para que su procesamiento sea
correcto y que sus resultados sean útiles.

1. Datos a conocer: Existen muchos modelos, pero

hay una serie de datos que son comunes
• Datos demográficos: nombre, sexo, edad...
• Datos peticionario: datos del clínico, nombre, apellido
y firma.
• Pruebas que se
solicitan: Existen
volantes de petición en
que los parámetros se
piden uno a uno. Perfil:
grupo de parámetros
que se engloban el una
patología.
• Hora de obtención de la
muestra y el carácter de
la obtención.
• Laboratorio al que va
dirigido.
2. Tipos de volantes:

• Autocopiables, así hay distintos volantes que son copia y

van dirigidos a distintos laboratorios, en ellos se van a
apuntar los resultados. Dentro de esas copias hay una que
se queda el laboratorio.
• Automatizados, tienen una estructura esquematizada y se
identifican por una pegatina con un código de barras.
• Volantes abiertos o blancos, son aquellos en los que hay un
espacio en blanco para escribir la prueba, debe ser escrita a
mano una a una.
• Preestablecidos, las pruebas ya están impresas, solo hay
que hacer una marca. A su vez esos preestablecidos pueden
ser:

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 1. Abiertos, en los que a parte de todas las
determinaciones escritas tienen un espacio para pedir
otras.
2. Cerrados, no disponen de ningún espacio para que
escriba el solicitante.
7. Etiquetado y envío de muestras
Es habitual el manejo de unas pegatinas con
código de barras para identificar las
muestras. Esas pegatinas solo tienen valor
para que puedan ser utilizadas el día o la
fecha que esta impresa en ellas, el código
de barras consta de 8 dígitos y están
dispuestos de la siguiente manera. Los dos
primeros corresponden al día de la
utilización, los dos siguientes son el mes, los 4 restantes se relacionan
con el número de identificación para el laboratorio. Este sistema sirve
para poder hacer una reclamación ante el laboratorio, y el numero de 8
dígitos se le denomina numero de fecha- registro,
esas pegatinas vienen impresas por ordenador en
un folio que cada una suele traer 10 pegatinas de
código e barras, pero en el folio hay otras 4
pegatinas mas que no llevan código de barras
pero si que llevan ese numero de fecha-registro,
estos se utilizan para identificar los distintos
volantes. Si sobrasen se le da una al paciente por
si tuviese que hacer alguna reclamación, de todas
formas debe llevar las iniciales del paciente.
Colocación, hay que colocar las pegatinas en
los tubos donde se realizo la extracción de sangre de la siguiente
manera, la pegatina se pondrá siempre
encima de la etiqueta original del tubo
de tal forma que el numero de fecha-
registro este orientado hacia el tapón de
forma vertical nunca de forma invertida
o transversal, y el laboratorio puede
rechazar la muestra. En los tubos para
VSG se realiza igual pero la pegatina no
puede superar el borde superior de la
pegatina original del tubo. Todos los
tubos tienen que llevar el número de
fecha-registro y el ordenador cambia el
número cuando cambia de folio.

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 Envío, una vez colocadas las pegatinas esos
tubos tienen que dirigirse al
laboratorio, pero previamente hay
que revisarlos y esto se hace en
gradillas, pero tampoco de cualquier
forma, la gradilla se va rellenando
respetado el siguiente orden de
colocación, se rellena de izquierda a
derecha, pero además de delante a
atrás.
8. Resultados e informes
Una vez realizados los análisis
se debe elaborar un informe por
escrito de los resultados obtenidos, a
veces en el mismo informe se
incluyen todos los resultados de
todas las sesiones, pero en otros
casos los laboratorios dan los
informes por separado, pero aun así
los informes peden ser de dos tipos:
• Urgentes, en cuanto se obtienen los resultados hay que realizar
el informe y transmitirlo
• Rutinarios, una vez conseguidos los resultados en algún
momento del día se emiten los resultados.
9. Resultados e informes
1. Función y localización.
Es un líquido que se forma porque transfunde líquido
de los capilares en la capa más interna, la parietal, y es un
líquido que esta en continua renovación. Se reabsorbe en la
capa mas externa, pasa entre las capas. En determinadas
circunstancias esa cantidad de líquido puede aumentar,
entonces se dice que se ha producido un derrame, llamado
derrame pericardico. Puede aumentar por dos motivos:
• Fallo en el mecanismo de reabsorción
• Fallo en el mecanismo de producción
Si ocurre alguno de estos dos fallos el líquido aumenta
de cantidad y el corazón queda mas oprimido.
2. Derrames.
• Trasudado, hay un líquido no inflamatorio, derrame
mecánico, se produce por distintos procesos que pueden
hacer que varíe la presión osmótica del plasma, o una
variación en la presión hidrostática que produce que se

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 altere las membranas secretoras, no es inflamatoria, en
este trasudado la concentración de proteínas es baja.
• Exudado, es un fluido inflamatorio y que se produce
porque hay un proceso patológico en el que hay una
inflamación o irritación de las membranas, con lo que se
aumenta la permeabilidad de las membranas, se produce
cuando hay una infección del pericardio o una neoplasia,
también cuando hay un traumatismo cardiaco en el que se
produce una irritación. Altera la permeabilidad de la
membrana de los capilares con lo cual esa membrana va a
dejar pasar mas moléculas que simplemente agua. El
exudado puede ser:
1. Mecánico, hay una inflamación pero no es
infeccioso
2. Purulento hay una inflamación porque hay
una infección.
3. Quiloso, se llama así debido a la presencia
de linfa en la cavidad pericardico porque el
conducto torácico linfático pasa muy cerca
del corazón y entonces puede ocurrir una
perdida que lleve linfa al pericardico, este
quiloso tiene unas características: aspecto
lechoso, pH muy alcalino y presenta unas
cifras de triglicéridos altas.

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