C.B.T.i.s. No.

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Alumno: Eric Lpez Peralta

Materia: BIOQUIMICA
Profesor:
Gastn
graillet Jurez
Especialidad:
Clnico

Manuel

Laboratorio

Semestre: 6 Grupo: H

Practica nmero 6
El objetivo fundamental de esta prctica es utilizar unas
sencillas tcnicas para poder extraer el ADN de un tejido
animal y por el aspecto que presenta, confirmar su estructura
fibrilar
A partir de la longitud enorme de las fibras tambin se
confirma que en el ncleo del ADN se encuentra replegado

Materiales
Hgado de pollo
Varilla de vidrio
Mortero
Vasos de precipitado
Pipeta
Probeta
ALCOHOL AL 96%
Cloruro sdico 2M
SDS
Arena
Trocito de tela para filtrar

Tcnica

Triturar medio hgado de pollo en un mortero. Aadir arena

para que al triturar se pueda romper las membranas y queden
los ncleos sueltos

Aadir al triturados, 50 centmetros cbicos de agua. Remover

hasta hacer una especie de papilla o pur.

Filtrar varias veces sobre una tela para separar los restos de
tejidos que hayan quedado por romper

Medir el volumen del filtrado con una probeta

Aadir al filtrado un volumen igual de cloruro sdico 2M. Con

esto conseguiremos producir el estallido de los ncleos para
que queden libres las fibras de cromatina.

A continuacin se aade 1 centmetro cubico de SDS. La

accin de este detergente es formar un complejo con las
protenas y separarlas de DNA.

As nos quedara el ADN libre de las protenas que tienen

asociadas.

Aadir mediante una pipeta de 50 centmetros cbicos de

alcohol de 96. Hay que hacerlo de forma que el alcohol
resbale por las paredes del vaso y se formen dos capas. En la
interface, precipita el ADN

Introducir una varilla de vidrio e ir removiendo en la misma

direccin. Sobre la varilla se van adhiriendo unas fibras
blancas, visibles a simple vista, que son el resultado de la
agrupacin de muchas fibras de ADN.

Esta prctica se puede complementar con una tincin

especfica de ADN. Tenemos que tomar una muestra de las
fibras que se van depositando sobre la varilla de vidrio y
depositarlas sobre un porta.

Teir durante unos minutos con un colorante bsico.

Observar al microscopio