DETECCIN DE COLIFORMES

Valentina Espinosa Barbas

27 de octubre de 2015
PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERIANA DPTO. ING CUVIL

INTRODUCCIN:

Las diversas opciones de composicin de las aguas residuales se basan en las

fuentes de descargas de distintos usos, tales como municipales, industriales,
comerciales, domsticos, entre otros, estas aguas contienen distintos tipos de
microorganismos contaminantes y en diferentes concentraciones. Debido a la
inmensa diversidad de los microorganismos se conoce que existen varios que
sobreviven al tratamiento y por ende ser opcin para reutilizar pone en peligro la
salud pblica.

Un grave problema de inters es la contaminacin de ros, lagos, y dems fuentes

de agua dado que se utilizan como depsito de desechos generados por la
actividad tanto humana como agrcola.

Existen distintos mtodos de cuantificacin de dichos microorganismos, dentro de

las tcnicas ms utilizadas est el conteo directo por microscopa de
fluorescencia, y los mtodos basados en el aumento del crecimiento de
microorganismos en medios de cultivos sintticos, como el clculo en placa de
Unidades Formadoras de Colonias (UFC) o la estimacin por el mtodo del
Nmero Ms Probable (NMP).

MARCO TERICO:

Coliformes es el nombre mediante el cual se denomina a un grupo heterogneo de

especies bacterianas que tienen ciertas caractersticas bioqumicas en comn,
tales como ser aerobias o anaerobias facultativas, entre otras, son indicadores
relevantes de contaminacin tanto de agua como de alimentos.

El grupo coliforme est formado por los siguientes gneros:

1. Escherichia.
2. Klebsiella.
3. Enterobacter.
4. Citrobacter.

Las especies que componen los coliformes provienen de un hbitat principalmente

intestinal esto implica, que es constante, abundante y prcticamente exclusivo de
la materia fecal, su capacidad de sobrevivencia y multiplicacin fuera del intestino
se observa tanto en aguas potables como residuales, debido su capacidad de
superar el tratamiento como fue mencionado con anterioridad, por ende, este
grupo se utiliza como indicador de contaminacin fecal en agua, es de esperarse
que en cuanto sea mayor el nmero de coliformes encontrados en el agua, mayor
ser la probabilidad de estar frente a una contaminacin reciente.

El mtodo del nmero ms probable (NMP) para saber los coliformes totales en
una muestra de agua, se basa en la capacidad de este grupo microbiano de
fermentar la lactosa con produccin de cido y gas al incubarlos a 35C 1C
durante 48 h., usando un medio de cultivo que contenga sales biliares. Esta
determinacin se realiza en dos partes, la presuntiva y la confirmativa.

En la presuntiva el medio de cultivo que se utiliza es el caldo lauril sulfato de sodio

este permite la recuperacin de los microorganismos daados que se encuentren
presentes en la muestra de agua y que tengan la capacidad de utilizar a la lactosa
como una fuente de carbono. Durante la parte confirmativa se emplea como medio
de cultivo caldo lactosado bilis verde brillante este es selectivo y solo permite el
desarrollo de aquellos microorganismos capaces de tolerar tanto las sales biliares
como el verde brillante.

El mtodo del (NMP) se realiza con base en los tubos positivos de la prueba
presuntiva y con base en la capacidad de las bacterias para fermentar la lactosa y
producir gas cuando son incubados a una temperatura de 44.5C 0.1C por un
periodo de 24 a 48 h.

Finalmente, la bsqueda de Escherichia coli se realiza a partir de los tubos

positivos de caldo EC, los cuales se siembran por agotamiento en medios

selectivos y diferenciales y posteriormente realizando las pruebas bioqumicas

bsicas a las colonias tpicas.

MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS:

Sellador Quanti-tray modelo 2X

Lmpara de luz ultravioleta
Colilert
Muestra de agua residual

PROCEDIMIENTO:

RESULTADOS:

137-09

TOTALES
FECALES
Grande Pequeo Grande Pequeo
s
s
s
s

10-4

49

48

14

10-5

49

48

10-6
10-8

49
46

48
5

1
0

0
0

TOTALES

FECALES

>
2419,6X10^ 25,7x10^
4
4
>
2419,6X10^
5
9,8x10^5
>
2419,6X10^
6
1,0x10^6
125X10^8 < 1x10^8

Para la muestra 1 el Nmero Ms Probable de coliformes totales es de

1.25x10^10 y de coliformes totales es de 9.9x10^5.

137-11

TOTALES
FECALES
Grande Pequeo Grande Pequeo
s
s
s
s

10-4

49

48

41

18

10-5

49

48

31

10-6
10-8

49
49

48
20

3
0

0
0

TOTALES

FECALES

>
2419,6X10^ 128,7X10
4
^4
>
2419,6X10^ 54,6X10^
5
5
>
2419,6X10^
6
3,1X10^6
344,8X10^8 < 1X10^8

Para la muestra 2 el Nmero Ms Probable de coliformes totales es de

3.448x10^10 y de coliformes totales es de 3.28x10^6.

ANLISIS DE RESULTADOS:

Con el fin de interpretar los resultados obtenidos, lo ideal es realizar una

comparacin entre los resultados y los valores esperados segn la calidad de las
fuentes de agua, para lograr esto es de gran ayuda la base que brinda la
corporacin autnoma regional de Cundinamarca (CAR) mediante el acuerdo
nmero 43 del 17 de octubre de 2006.
En este se construyen los objetivos de calidad del agua para la cuenca del ro
Bogot a lograr en el ao 2020, en este documento se acuerda la clasificacin de
usos del agua para la cuenca mencionada as como tambin los parmetros de
calidad a aplicar, la CAR divide por clases.
Clase I:
Esta corresponde a los valores de los usos del agua para consumo humano
y domstico con tratamiento convencional, preservacin de la flora y fauna, uso
agrcola y uso pecuario. Dentro de los mltiples valores consignados se muestra el
valor mximo que se puede obtener de los coliformes totales, este esta expresado
como NMP/100ml y es igual a 5000.
Clase II:
Corresponde a los valores de los usos del agua para consumo humano y
domstico con tratamiento convencional, uso agrcola con restricciones y uso
pecuario. El valor mximo que se puede obtener de los coliformes totales,
expresado como NMP/100ml y es igual a 20000.
Las restricciones mencionadas hacen referencia a que el NMP de coliformes
totales no deber exceder de 5000 cuando se use el recurso para riego de frutas
que se consuman sin quitar la cscara y para hortalizas de tallo corto. El NMP de
coliformes fecales no deber exceder de 1000 cuando se use el recurso para el
mismo fin citado anteriormente.

Clase III:
La tercera clase mostrada en este artculo muestra los valores asignados a
la calidad de los embalses, lagunas, humedales y dems cuerpos lnticos de
aguas ubicados dentro de la cuenca del ro Bogot.
El mximo nmero de coliformes totales que se puede encontrar en esta clase
expresado en NMP/100ml es de 5000.
Clase IV:
Esta corresponde a los valores de los usos agrcola con restricciones y
pecuario. El valor mximo que se puede obtener de los coliformes totales,

expresado como NMP/100ml y es igual a 20000. Las restricciones son las mismas
mostradas para la Clase II.
Clase V:
La ltima clase mostrada en el documento mencionado corresponde a los
valores de los usos del agua para la generacin de energa y para el uso
industrial. Para esta clase el valor de los coliformes totales no se encuentra
reglamentado.

Al comparar los valores de calidad del agua con los resultados obtenidos en el
laboratorio se evidencia que el agua residual manejada no podra ser clasificada
dentro de estas cinco clases sin tratamiento alguno.

En el RAS 2000 en el Ttulo C, se menciona el nivel tecnolgico apropiado este

Debe ser el ms conveniente de acuerdo con las caractersticas de la comunidad, el nivel
de desarrollo y la capacidad tcnico - administrativa de la entidad responsable de la
operacin y mantenimiento de los sistemas; adems, debe tenerse en cuenta que sea de
simple construccin, fcil manejo y bajo costo de operacin.

Para el agua residual utilizada en el ensayo es recomendable un tratamiento

agresivo con las partculas coliformes tanto fecales como totales, una muy buena
opcin son la cloracin y la desinfeccin debido a que estos tratamientos son
utilizados con el fin de remover los contaminantes del agua de manera definitiva,
claro est con sus debidas precauciones y con base en los valores recomendados
por las entidades de produccin de estos qumicos.

BIBLIOGRAFA:

http://www.cepal.org/ilpes/noticias/paginas/6/40506/colombia_car_acuerdo4
3_2006.pdf
http://www.disanejercito.mil.co/recursos_user/documentos/editores/4284/SA
LUD%20OCUPACIONAL%20DISAN
%20EJC/NORMATIVIDAD/NORMATIVIDAD%20SALUD
%20AMBIENTAL/RAS%202000%20Titulo%20C%20REGLAMENTO
%20TECNICO%20SECTOR%20AGUA%20POTABLE.pdf
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/Analisis_Agua_NMP_22309.pdf
http://www.upemor.edu.mx/labo/tarchivos/archivos/HEAL/practica_7.pdf
https://www.idexx.com/water/products/quanti-tray.html

https://www.idexx.com/resource-library/water/quanti-tray-sealer-2xprocedure-en.pdf
http://www.idexx.es/water/products/colilert.html
https://www.idexx.com/resource-library/water/colilert-procedureen.pdf
http://www.standardmethods.org