Caractersticas fsicas

Por sus caractersticas fsicas se pueden agrupar en cuatro grupos:

A. Colorantes directos: Son los grupos de colorantes de antocianina, carotinoide derivados de calcona.
Los colorantes son obtenidos de una solucin acuosa y esta extraccin se usa directamente para teir
o pintar en fri o en caliente. A veces se usa sustancias auxiliares como cidos o sales. Ejemplo: la
flor de crtamo, crcuma, azafrn, cempoalxchitl, etc.
B. Mordentados: Este tipo de colorantes no tienen por si mismo el poder de entintar, solo con un
tratamiento especial de sales metlicas solubles que reaccionan sobre la fibra. Esta tcnica se aplica
a la mayora de las plantas que dan color como la gardenia, cempoalxchitl, rubia, cochinilla, palo de
Campeche y de Brasil, etc.
C. Tipo de reduccin: Derivados del Indol, estas materias colorantes se encuentran en el interior de los
cuerpos vegetales o animales, pero son insolubles, para darles solubilidad, se les aplica una sustancia
reductora, obtenindose una solucin incolora que se aplica a la fibra y despus, mediante una
oxidacin aparece el color, como ejemplo esta el ail.
D. Pigmentos: Polvos de materiales minerales, son insolubles que no tienen poder de entintar, por lo
cual solo pueden utilizarse mezclndose con otro cuerpo, como el engrudo, cola, resina, casena, clara
de huevo, etc., con los que se forma una pasta para pintar.

Ms importantes
Hematoxilina
Se extrae del palo de Campeche, planta leguminosa arborescente que procede de Amrica Central.
Es el colorante nuclear ms usado en histologa. Se presenta en forma de cristales incoloros o
ligeramente amarillentos, solubles en agua,alcohol y glicerina.
La hematoxilina por s misma no es una sustancia colorante, pero por oxidacin da lugar a la
hematena, que s ofrece propiedades tintoriales. El proceso por el cual se transforma la hematoxilina
en hematena y que constituye el proceso de maduracin es variable, y se acelera por la adicin de
sustancias oxidantes, tales como el agua oxigenada, el permanganato de potasio, el yodato potsico o
el xido de mercurio rojo, que actan en presencia del aire.
Puede adquirirse en el comercio la hematena pura. Pero la hematena tampoco colora el tejido si no
se le une con una base, como el alumbre u otra, que acta de mordiente, y con la que forma una sal
denominada laca. El mordiente puede unirse a la hematoxilina o puede aplicarse al tejido antes de la
coloracin.
Muchas son las frmulas empleadas en la preparacin de la hematoxilina; las ms importantes son
las siguientes:

Hematoxitina acida de Ehrlich

Frmula:
0,5 g de alumbre potsico
25 ce de agua destilada
25 ce de glicerina
0,5 g de hematoxilina
25 ce de alcohol etlico absoluto
2,5 ce de cido actico glacial.

Preparacin': Se disuelve el alumbre en el agua destilada; luego se le agrega la glicerina. Por otra
parte se disuelve la hematoxilina en el alcohol; se mezclan ambas soluciones, para luego poner
el cido actico.
El tiempo de maduracin es de dos semanas. Puede abreviarse sustituyendo la hematoxilina por
hematena, en cuyo caso se ponen 0,125 g de este producto, en lugar de los 0,5 g de hematoxilina. El
tiempo de coloracin es de unos 5'. La solucin colorante se conserva durante varios aos.

Hematoxilina de Harris
Frmula:
1g de hematoxilina
20g de alumbre potsico
10ce de alcohol etlico absoluto
0,5g de xido de mercurio rojo
200ce de agua destilada.

Preparacin: Se disuelve la hematoxilina en el alcohol con ayuda del calor, y el alumbre en el agua
destilada. Se unen ambas soluciones al siguiente da y se agrega luego el xido de mercurio rojo. Se
hierve durante unos minutos, se filtra despus de enfriar, y se lleva la solucin al volumen original con
alcohol etlico al 50%. No necesita perodo de maduracin, por lo que puede usarse inmediatamente.
Dura varios aos su poder de tincin, y la coloracin se obtiene en unos 5'.
Se le aade agua destilada a partes iguales antes de usarla.
Preparacin: Se disuelve la hematoxilina en el alcohol, y el alumbre en el agua destilada caliente. Se
mezclan ambas soluciones y se dejan al aire y a la luz, durante 3-5 das; para esto se ponen en un
beaker abierto. Luego se filtra y se aaden la glicerina y el alcohol metlico. Se deja otros 3-5 das en
reposo y se filtra nuevamente.
No necesita tiempo de maduracin, y conserva sus propiedades tintoriales durante mucho tiempo. El
tiempo de coloracin es de unos 15' aproximadamente.

Hematoxilina fosfotngstica de Mallory

Frmula:
80 cc de agua destilada
0,1 g de hematoxilina
20 cc de solucin de cido fosfotngstico al 10%
0,2 cc de agua oxigenada.

Hematoxilina de Hansen
Es similar a la anterior, pero se sustituye el xido de mercurio rojo por 3 cc de un solucin acuosa de
permanganato de potasio.

Hematoxilina de Unna
Se prepara en la misma forma que la de Harris y la de Hansen, pero se pone 0,2 cc de agua oxigenada,
en lugar del xido de mercurio rojo o del permanganato potsico, para acelerar la oxidacin.

Hematoxilina de Delafield
Frmula:
1 g de hematoxilina.

6,25 cc de alcohol etlico absoluto.

100 cc de agua destilada.
10 g de alumbre amoniacal.
25 cc de glicerina pura.
25 cc de alcohol metlico.

Preparacin: Se disuelve la hematoxilina en el agua destilada, con ayuda del calor. Se aade la
solucin de cido fosfotngstico, cuando enfre, y luego se agrega el agua oxigenada.
Este colorante ha sido usado para el tejido muscular; se utiliza como fijador el lquido de Zenker, que
como tiene bicromato potsico, le comunica color rosa al tejido conectivo, en tanto que las fibras
musculares quedan teidas de azul. Puede rebajarse la coloracin y pasar el tejido brevemente por
una solucin de bicromato potsico al 5%.
Hematoxilina frrica de Weigert Frmula:
1 g de hematoxilina
100 cc de alcohol etlico absoluto
4 cc de percloruro de hierro oficinal
1 cc de cido clorhdrico
95 cc de agua destilada.

Preparacin: Se disuelve la hematoxilina en el alcohol. El percloruro de hierro con el cido clorhdrico

se disuelven, a su vez, en el agua destilada. Se mezclan ambas soluciones, a partes iguales, al
momento de usarse.
El tiempo de coloracin es de 5'. No necesita diferenciacin, pues tie solamente los ncleos. Para
colorar el citoplasma puede ponerse el material en una solucin acuosa concentrada de cido pcrico
y fucsina acida, durante 1', despus de lo cual se lava en agua abundante.
La frmula de la solucin de cido pcrico es la siguiente:
100 cc de cido pcrico en solucin acuosa concentrada
10 cc de solucin acuosa de fucsina cida al 1%.

Hematoxilina frrica de Heidenhain

Frmula:
1 g de hematoxilina
10 cc de alcohol absoluto
90 cc de agua destilada.

Preparacin: Se disuelve la hematoxilina en el alcohol y luego se aade el agua destilada. Se deja

madurar un mes y antes de usarla se le diluye a partes iguales, en agua destilada.
La coloracin se hace en 1-36 horas, y los cortes toman color negro-pardo. El tejido conjuntivo puede
teirse de rojo con picrofucsina, despus del lavado correspondiente. Puede emplearse tambin el
verde luz o el orange G, como colorantes de contraste. La diferenciacin se realiza con alumbre de
hierro al 1-5%. Antes de poner el corte en el colorante debe tenerse en el alumbre de hierro, que acta
como mordiente. El calor acelera la coloracin.

Hemaln cido de Mayer, hemalumbre o laca alumnica de Mayer

Frmula:

1 g de hematoxilina cristalizada
1 000 cc de agua destilada
0,2 g de yodato sdico
50 g de alumbre potsico
50 g de hidrato de cloral
1 g de cido ctrico.

Preparacin: Se disuelve la hematoxilina, el yodato sdico y el alumbre potsico en el agua destilada,

a la temperatura ordinaria. Se deja en reposo la solucin durante 24 horas y entonces se aade el
hidrato de cloral y el cido ctrico. Agtese bien y fltrese. El tiempo de coloracin es de 5-15'.
Si no hay sobrecoloracin, la cromatina toma color rojizo. Este color se vira al azul, si se somete el
tejido a la accin de una solucin alcalina, por ejemplo: una solucin de bicarbonato sdico. Si hay
sobrecoloracin se corrige con una solucin de alcohol clorhdrico al 0,5%, o con una solucin de cido
actico al 1%. Si la coloracin es difusa, se someten las piezas a un lavado en una solucin de alumbre
al 1% y luego en agua.
Laca
Frmula:

alumnica

de

Carazzi

1 g de hematoxilina
100 ce de agua destilada
200 ce de glicerina
50 g de alumbre potsico
0,2 g de yodato potsico.

Esta frmula puede usarse inmediatamente y se aplica de modo similar al hemaln cido de Mayer;
da magnficos resultados.

Carmn
Es un colorante que se extrae de un insecto hemptero, de la familia Coccidae, el Coccus cacti,
conocido vulgarmente con el nombre de cochinilla, el cual es originario de Mxico; se halla
especialmente en la regin de Oaxaca, pero puede aparecer tambin en el sureste de Estados Unidos,
y ha sido aclimatado y cultivado, adems, en Espaa (Andaluca y Valencia).
La Coccicultura se ha practicado asimismo en la India y en Honduras. Fue descubierto el insecto
por Hernn Corts, pero ya los indgenas lo cultivaban por sus propiedades tintoriales. La hembra es
la portadora de la sustancia colorante, y se utiliza el animal completo.
El carmn natural hoy est siendo remplazado por el carmn sinttico. Es un excelente colorante
nuclear, aunque actualmente no se emplea tanto, a causa de la dificultad con que colora las secciones
de sustancias previamente incluidas y por ser perjudiciales a su accin colorante algunos fijadores
muy usados, tales como el formol y el cido smico.
Son recomendados los fijadores a base de bicloruro de mercurio y los que contienen bicromato
potsico. No es soluble en agua o alcohol, pero s en lcalis, como el hidrxido de amonio y el brax.
El carmn puede combinarse con la eosina y el cido pcrico, como colorantes de fondo.

Brax-carmn de Grenacher
Frmula:
2-3 g de carmn
4 g de brax

100 cc de agua destilada

100 cc de alcohol etlico de 70

Preparacin: Se mezcla el carmn con el brax en una cpsula de porcelana; adase el agua
destilada caliente a 100. Se deja enfriar y ms tarde se agrega el alcohol. Debe dejarse madurar de
24 horas a una semana antes de usarse, y debe agitarse frecuentemente. Luego se filtra y conserva
en un frasco de color mbar, bien cerrado.
El tiempo de coloracin es de uno a varios das. Las piezas se diferencian con alcohol clorhdrico al
0,5%, y el lavado se hace con alcohol de 70. El tiempo de coloracin se acelera con el calor.

Carmn dumnico de Grenacher

Frmula:
1 g de carmn
3-4 g de alumbre potsico o amoniacal
100 ce de agua destilada

1 ce de formol.
Preparacin: Se disuelve el carmn y el alumbre en el agua destilada. Se hierve la solucin durante
15', luego se enfra, se filtra, y se le aade el formol. El tiempo de tincin es de 1-24 horas, sin presentar
sobrecoloracin. El lavado se hace en agua hasta que no desprenda colorante.

Carmn Utico de Orth

Frmula:
3-5 g de carmn
1 g de carbonato de litio
100 cc de agua destilada.

Preparacin: Se prepara una solucin de carbonato de litio saturada, en fro (aproximadamente al

1 %); luego se disuelve el carmn, con ayuda del calor, hasta la ebullicin. Se deja enfriar y se filtra. El
tiempo de coloracin es de 2-5'. La diferenciacin se realiza con alcohol clorhdrico al 1%, y el lavado,
con agua.

Carmn lctico
Frmula:
0,3 g de carmn
100 cc de cido lctico

El tiempo de coloracin es de 30-60', segn el tamao del ejemplar; se controla el resultado con el
microscopio. Se emplea especialmente para teir cstodos.

Acetocarmn
Frmula:
1 g de carmn
100 cc de agua destilada
85 cc de cido actico glacial.

Preparacin: Se mezcla el cido actico con el agua y se le da calor hasta la ebullicin, ms tarde se
retira de la llama y se le aade rpidamente el carmn. Se enfra en caja de hielo o agua corriente y
se filtra. Debe conservarse en refrigeracin.

Este colorante tiene muchas aplicaciones prcticas en el estudio de cromosomas en glndulas

salivales de Drosophila; de las clulas del meristemo radicular de algunas plantas, etctera.

Clorocarmn de Hollande
Frmula:
14 g de carmn
5 cc de cido clorhdrico puro
25 cc de agua destilada.

Preparacin: Se pone el cido clorhdrico en una cpsula de porcelana grande y se le agrega

lentamente el carmn pulverizado. Se agita constantemente hasta formar una masa homognea y
compacta. Se deja en reposo durante 24 horas, y luego se agrega el agua destilada. Hirvase por 30'
y fltrese. Complete el volumen de 180 ce con alcohol de 70.
El tiempo de coloracin es de 2-24 horas. El lavado es con alcohol de 75 y luego con agua destilada.
Diferenciar con alumbre de hierro al 3%. Con el diferenciador los cortes se tornan negros al principio
y luego sobreviene la decoloracin lentamente. En el momento oportuno se lavan con agua destilada.
El colorante es neutro y tie de negro o en tonos que varan desde este hasta el rojo, cuando se
emplea el alumbre.

Orcena
Es un colorante de origen vegetal, que se extrae de la acedera. Se le utiliza para el estudio de
cromosomas por la tcnica del aplastado.

Acetorcena
Frmula:
2,2 g de orcena sinttica
100 cc de cido actico glacial.

Preparacin: Se hierve lentamente la solucin y se agita constantemente por unos minutos. Luego
se deja enfriar y se filtra. Se usa en el estudio de la mitosis en raz de cebolla, etctera.

Acetorcena de La Cour
Frmula:
20-50 cc de agua destilada
70-30 cc de cido actico glacial
1 g de orcena.

Para los vegetales se recomienda al cido actico al 50%; para la Drosophila es preferible el cido
actico al 70%.

Azafrn
Ha sido usado como colorante para sustancias colgenas.

Pimentn
Se ha empleado para colorar grasas; se separa el pigmento que contiene mediante el alcohol etlico.
El extracto alcohlico ofrece un aspecto rojizo transparente y se aplica directamente.

COLORANTE
HEMATOXILINA de MAYER
La hematoxilina (del griedo haimatus: sangre y xilon: madera) es un componente natural obtenido de
una planta leguminosa (Haematoxylum campechianum). La hematoxilina tiene que ser oxidada a
hematena antes de ser usada como colorante y combinada con un metal quel actuar como
mordiente. La oxidacin puede ser qumica o por el oxgeno mediane el envejecimiento de la solucin.
Es el producto oxidado de la hematoxilina, la hematena, la que realmente se adhiere a las sustancias
cidas del tejido. Fundamentalmente tie el ncleo. La hematoxilina, la hematena como colorante, es
un componente de la tincin hematoxilina y eosina, probablemente la tincin general ms usada en
tinciones histolgicas, pero tambin de otras tinciones como las tricrmicas donde se precisa teir
ncleos.
Procedimiento

Agua destilada

Sulfato alumnico potsico o sulfato alumnico de amonio

Hematoxilina cristalizada (C.I. 75290)

Yodato de sodio

cido ctrico

Hidrato de cloral

1000 ml

50 g

1g

0.2 g

1g

50 g

onsejos
Aadir el sulfato hasta que est completamente disuelto y posteriormente aadir la hematoxilina. Cuando la hematoxilina
est completamente disuelta se aade el cido ctrico, el hidrato de cloral y yodato de sodio. Hervir durante 5 minutos,
enfriar y filtrar. Puede ser usada de inmediato.