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Preparaciones Cromosmicas

Juan Avils 4-734-911


Jos Gonzles 4-750-2003

RESUMEN
Se pueden usar distintos tejidos para obtener preparaciones de
cromosomas; por ejemplo, sangre perifrica, medula sea, fluido amnitico y
productos de la concepcin. Aunque las tcnicas especficas difieren segn el
tejido usado, el mtodo bsico para obtener preparaciones de cromosomas es
as:
* Recoleccin de la muestra y preparacin inicial.
* Cultivo celular.
* Adicin de un inhibidor de la mitosis para detener las clulas en metafase.
* Recogida de las clulas. Este paso es muy importante para obtener
preparaciones de alta calidad. Implica exponer las clulas a una disolucin
hipotnica, seguida de una serie de disoluciones fijadoras. Esto hace que las
clulas se expandan, de modo que los cromosomas se extiendan y puedan
examinarse individualmente.
* Tincin de las preparaciones cromosmicas para detectar los posibles
cambios numricos y estructurales.

INTRODUCCIN
El ADN es el material que controla la determinacin de las
caractersticas hereditarias y est constituido por largas cadenas de
nucletidos, que asociados a protenas, se organizan en los cromosomas.
Los cromosomas contienen la informacin gentica del organismo. Cada
tipo de organismo tiene un nmero de cromosomas determinado; en la especie
humana, por ejemplo, hay 23 pares de cromosomas organizados en 8 grupos
segn el tamao y la forma. La mitad de los cromosomas proceden del padre y
la otra mitad de la madre.
Cromosomas de la mosca de la fruta
Los cromosomas de la mosca de la fruta o del vinagre, Drosophila
melanogaster, se prestan a la experimentacin gentica. Son slo 4 pares
(frente a los 23 pares de la dotacin gentica humana), uno de ellos, marcado
aqu con las letras X e Y, determina el sexo de la mosca; adems, son muy
grandes. Thomas Hunt Morgan y sus colaboradores basaron su teora de la
herencia en estudios realizados con Drosophila. Observaron que los
cromosomas pasaban de los progenitores a los descendientes segn el
mecanismo atribuido por Gregor Mendel a los caracteres heredados.

Propusieron que los genes ocupan lugares especficos dentro de los


cromosomas.
Varios miles de genes (unidades de la herencia) se disponen en una
sencilla lnea sobre un cromosoma, una estructura filiforme de cidos nucledos
y protenas. Las bandas teidas de oscuro son visibles en los cromosomas
tomados de las glndulas salivares de Drosophila melanogaster, la mosca de la
fruta. Su significado no se conoce bien, pero el hecho de que los diseos
especficos de las bandas sean caractersticos de varios cromosomas,
constituye una valiosa herramienta de identificacin.
Las molculas de ADN de cualquier forma de vida tienen la misma
estructura y estn constituidas por las mismas cuatro bases nitrogenadas, por
lo que los cientficos han utilizado esas similitudes para introducir uno o ms
genes de un organismo en otro diferente. Estos nuevos genes llegan a ser
funcionales en el organismo receptor y a producir la protena deseada.

METODOLOGIA
Lo primero a realizar fue hacer un raspado suave de mejilla para
distribuir las clulas epidrmicas sobre un portaobjetos bien limpio. Lo que
hicimos, fue con un hisopo raspar la mejilla de un compaero y frotar el hisopo
sobre el portaobjetos.
Procedimos a teir la preparacin con orcena actica sobre el frotis, le
colocamos el cubreobjetos y se llevo al microscopio para observar los
corpsculos de bar.
El siguiente paso a realizar es observar cromosomas politnicos. Lo que
hicimos fue extraer una larva del tercer estadio de un cultivo maduro, se
selecciono la ms grande y ms madura. Con la ayuda de unas agujas de
disectar, colocamos una punta de la aguja sobre un extremo de la larva y la
otra aguja sobre el otro extremo y con un movimiento rpido separamos la
parte ceflica del resto del cuerpo. Luego nos deshicimos de lo que no se
utilizara. Luego transferimos las glndulas a un porta objetos limpio, y le
adicionamos una gota de acetorcena y sin dejar secar lo dejamos por 15
minutos aproximadamente para teir. Luego de esto le colocamos un
cubreobjetos y hacemos un squash sobre el tejido con cuidado de no romper el
cubreobjetos.

RESULTADOS
Clulas epidrmicas del raspado de la mejilla

Fig. 1 Clulas Epidrmicas

Fig. 2 Cuerpos de Barr


Cromosomas politnicos

Fig. 3 Cromosomas Politnicos

Fig. 3.1 En D. Melanogaster

Fig. 4 Bandas

Fig. 5 Cromosomas de una Drosophila melanogaster

Hembra

Fig. 6 Cromosomas del Macho y la Hembra de D. Melanogaster

DISCUSIN
Se sabe que los cromosomas son los que transportan la informacin
hereditaria. Entonces en el primer experimento pudimos observar con claridad
las clulas epidrmicas y los corpsculos de Barr. Esto se logro ver gracias al
raspado que le hicimos a una mejilla. Luego con la larva en su tercer estadio se
observaron los cromosomas politnicos y gracias a una placa de un
compaero, observamos las bandas de los cromosomas politnicos, esto
porque se logro teir con acetorcena.

CUESTIONARIO
1. Cuntos pares de cromosomas tiene la Drosophila melanogaster,
descrbalos y dibuje como se observan en metafase?
R: La Drosophila melanogaster tiene 4 pares de cromosomas.

Fig. 7 Cromosomas de Drosophila melanogaster en metafase.


2. A que se llama cromocentro?
R: Es la zona de fusin de las regiones heterocromatnicas situadas alrededor
de los centrmeros de los pares cromosmicos.
3. Qu nmero cromosmico tienen las clulas somticas en metafase y
las clulas de las glndulas salivales?
R: Un mosquito tiene seis cromosomas en cada clula somtica; el ciruelo,
cuarenta y ocho; el ser humano, cuarenta y seis; la papa, cuarenta y seis; el
gato, treinta y ocho. Sin embargo en cada una de estas especies las clulas
sexuales o gametos, tienen exactamente la mitad del nmero de cromosomas
que caracteriza a las clulas somticas del organismo.
4. Qu es endomitosis?
R: La endomitosis es la replicacin cromosmica que no va acompaada por
divisin nuclear o citoplsmica. La endomitosis es una variante de la mitosis sin
divisin nuclear o celular, lo que da lugar a clulas con muchas copias del
mismo cromosoma en el mismo ncleo. Este proceso tambin se denomina
endoreduplicacin, y las clulas resultantes endoploides. Un ejemplo de una
clula que sufre endomitosis es el megacariocito.
5. Qu representan las bandas y los puft de los cromosomas
politnicos?

R: En D. melanogaster el patrn de bandeo no se distingue en aquellas


regiones heterocromticas presentes en regin centromrica de todos sus
cromosomas (n=4). Las regiones heterocromticas estn asociadas formando
un cromocentro. Ya que dos miembros del complemento haploide de esta
especie son metacntricos (los cromosomas II y III) y dos son acrocntricos
(cromosoma sexual X o Y, y el cromosoma IV), los cromosomas politnicos en
esta especie aparecen como cinco brazos desiguales que irradian del
cromocentro: un brazo correspondiente al cromosoma X, los dos brazos del
cromosoma II y los dos brazos del cromosoma III (3L y 3R). En algunos casos
se puede visualizar un sexto brazo muy pequeo que representa el cromosoma
IV.
6. Qu es una aberracin cromosmica?
R: Aberracin cromosmica es un error durante la meiosis de los gametos o de
las primeras divisiones del huevo y que provoca una anomala de nmero o
estructura de los cromosomas.
7. Explique los trminos siguientes: duplicaciones, inversiones y
translocaciones cromosmicas.
R: Duplicaciones: Las duplicaciones pequeas para heterocigotos y
homocigotos suelen ser viables, aunque el llevar una duplicacin puede
provocar modificaciones fenotpicas y comportarse como una mutacin gnica.
El que una duplicacin sea viable implica un gran potencial evolutivo, pues
implica que cuando ese fragmento duplicado est presente, mientras que el
fragmento original puede seguir con las funciones bsicas, el fragmento
duplicado puede sufrir mutaciones gnicas, lo que permite diversidad de las
zonas duplicadas, lo que puede resultar ventajoso para la evolucin genmica,
aunque los segmentos tambin pueden mutar desfavorablemente, de forma
que obtendremos un pseudogen que se perder y no ejercer ningn tipo de
funcin (ser un gen que ha perdido su funcin).
Inversiones: Las inversiones son rotaciones de 180 de un segmento
cromosmico que se separa, volvindose a unir luego al mismo cromosoma.
Suelen ser mutaciones viables que no implican anormalidad fenotpica alguna.
Puede ocurrir que una de las roturas de la inversin, se produzca en un gen
esencial, de forma que el sitio de ruptura, actuar como una mutacin gnica
letal ligada a la inversin, ello provoca que no pueda darse en homocigosis;
pueden ser de dos tipos; pericntricas cuando implican la inversin del
centrmero, y paracntricas, que implican inversin de genes que no incluyen
el centrmero.
Translocaciones cromosmicas: Las translocaciones son el intercambio
de dos fragmentos de cromosomas no homlogos. Pueden ser recprocas, que
son las ms frecuentes. En estas, un segmento de un cromosoma se
intercambia con otro de un cromosoma no homlogo, de forma que se
producen simultneamente dos cromosomas portadores de translocacin. En
las no recprocas nicamente tenemos traspaso de un fragmento cromosmico
en una direccin, sin que recprocamente se traspase otro; este caso, se
denomina transposicin.
8. Investigue cuantos cromosomas tiene la vaca, el perro, el caballo y el
mono.

R: Cromosomas de la vaca: 60 cromosomas.


Cromosomas del perro: 78 cromosomas.
Cromosomas del caballo: 64 cromosomas.
Cromosomas del mono: 48 cromosomas.

BIBLIOGRAFA
Batista O. David, Agosto de 2006. Manual de laboratorio de Gentica.
Universidad Autnoma de Chiriqu. Facultad de Ciencias Naturales y Exactas.
Departamento de Gentica. Panam, p.p. 29, 30, 31, 32, 33.
http://www.analisisclinico.es/general/analisis-cromosomico

Mitosis
Juan Avils 4-734-911
Jos Gonzles 4-750-2003

RESUMEN
La mitosis es el tipo de divisin celular de las clulas somticas a partir
de una clula madre diploide se originan dos clulas con la misma cantidad de
cromosomas y material gentico. Utilizando tejidos vegetales o animales
respectivamente se pueden observar las distintas fases de la divisin mittica,
las diferencias en cada una de estas y se puede saber el porqu de estas
diferencias entre un tejido y otro.

INTRODUCCIN
La mitosis es el tipo de divisin celular por el cual se conservan los
orgnulos y la informacin gentica contenida en sus cromosomas, que pasa
de esta manera a las clulas hijas resultantes de la mitosis. La mitosis es
igualmente un verdadero proceso de multiplicacin celular que participa en el
desarrollo, el crecimiento y la regeneracin del organismo. Este proceso tiene
lugar por medio de una serie de operaciones sucesivas que se desarrollan de

una manera continua, y que para facilitar su estudio han sido separadas en
varias etapas.
El resultado esencial de la mitosis es la continuidad de la informacin
hereditaria de la clula madre en cada una de las dos clulas hijas. El genoma
se compone de una determinada cantidad de genes organizados en
cromosomas, hebras de ADN muy enrolladas que contienen la informacin
gentica vital para la clula y el organismo. Dado que cada clula debe
contener completa la informacin gentica propia de su especie, la clula
madre debe hacer una copia de cada cromosoma antes de la mitosis, de forma
que las dos clulas hijas reciban completa la informacin. Esto ocurre durante
la fase S de la interface, el perodo que alterna con la mitosis en el ciclo celular
y en el que la clula entre otras cosas se prepara para dividirse.
Tras la duplicacin del ADN, cada cromosoma consistir en dos copias
idnticas de la misma hebra de ADN, llamadas cromtidas hermanas, unidas
entre s por una regin del cromosoma llamada centrmero. Cada cromtida
hermana no se considera en esa situacin un cromosoma en s mismo, sino
parte de un cromosoma que provisionalmente consta de dos cromtidas.
En animales y plantas, pero no siempre en hongos o protistas, la
envoltura nuclear que separa el ADN del citoplasma se desintegra,
desapareciendo la frontera que separaba el contenido nuclear del citoplasma.
Los cromosomas se ordenan en el plano ecuatorial de la clula, perpendicular
a un eje definido por un huso acromtico. ste es una estructura
citoesqueltica compleja, de forma ahusada, constituido por fibras que son
filamentos de microtbulos. Las fibras del huso dirigen el reparto de las
cromtidas hermanas, una vez producida su separacin, hacia los extremos del
huso. Por convenio cientfico, a partir de este momento cada cromtida
hermana s se considera un cromosoma completo, y empezamos a hablar de
cromosomas hermanos para referirnos a las estructuras idnticas que hasta
ese momento llambamos cromtidas. Como la clula se alarga, las fibras del
huso tiran por el centrmero a los cromosomas hermanos dirigindolos cada
uno a uno de los polos de la clula. En las mitosis ms comunes, llamadas
abiertas, la envoltura nuclear se deshace al principio de la mitosis y se forman
dos envolturas nuevas sobre los dos grupos cromosmicos al acabar. En las
mitosis cerradas, que ocurren por ejemplo en levaduras, todo el reparto ocurre
dentro del ncleo, que finalmente se estrangula para formar dos ncleos
separados.
La mitosis se completa casi siempre con la llamada citocinesis o divisin
del citoplasma. En las clulas animales la citocinesis se realiza por
estrangulacin: la clula se va estrechando por el centro hasta que al final se
separa en dos. En las clulas de las plantas se realiza por tabicacin, es decir,
las clulas hijas construyen una nueva regin de pared celular que dividir la
una de la otra dejando puentes de citoplasma (plasmodesmos). Al final, la
clula madre se parte por la mitad, dando lugar a dos clulas hijas, cada una
con una copia equivalente y completa del genoma original.

Cabe sealar que las clulas procariotas experimentan un proceso


similar a la mitosis llamado fisin binaria. No se puede considerar que las
clulas procariotas experimenten mitosis, dado que carecen de ncleo y
nicamente tienen un cromosoma sin centrmero.

METODOLOGIA
Se coloc con anticipacin una cebolla y porotos en algodn con agua
para que emergieran las races con cuidado que el algodn no se secara. Esto
durante ocho das aproximadamente. A los ocho das de esto, se recortaron las
races ms nuevas y blancas, con bistur. Luego la fijamos en tres partes de
alcohol y una en cido actico. Esto se recomienda hacer entre 11 y 12 del da.
Una vez esto, en el laboratorio procedimos a tomar un meristemo y lo
colocamos en un portaobjetos limpio. Una vez colocado en el portaobjetos,
medimos 3 mm del extremo y cortamos. Se elimina el resto de la raz que
quedo. Adicionamos una gota de acido clorhdrico (HCl) y lo dejamos por 3
minutos, luego procedimos a lavar el meristemo 3 veces con agua. Se debe
lavar muy bien y que no quede nada de acido clorhdrico en el meristemo.
Una vez listo esto, se le adiciona una gota de colorante orcena actica.
Cuando se le adiciono la gota del colorante, con una varilla de vidrio,
presionamos firmemente y con cuidado sobre el meristemo, de tal manera que
este quede aplastado y que el material quede bien distribuido y se le coloca el
cubreobjetos en forma de squash. Realizado esto, se lleva la preparacin al
microscopio para observar las diferentes fases.

RESULTADOS

Fig. 1 Se observan las fases del ciclo celular: profase, metafase, anafase,
telofase

Fig. 2 Fases del ciclo celular de una cebolla

Fig. 3 Fases del ciclo celular de una cebolla

Fig. 4 Meristemo apical de una cebolla

Profase

Metafase

Anafase

Telofase

Fig. 5 Fases de la Mitosis


DISCUSIN
Gracias al meristemo de la cebolla, logramos el objetivo de observas las
distintas fases del ciclo celular, y poder comprender los pasos que se realizan
para poder dar orgenes a otros seres.
Mitosis o Cariocinesis, es el proceso de divisin del ncleo de las clulas
somticas (no sexuales) cuyo resultado es la divisin exacta de la informacin
gentica que previamente se haba duplicado durante la interface del ciclo
celular. La mitosis garantiza que el nmero de cromosomas de las clulas se
mantenga constante de generacin en generacin. La clula progenitora da
origen a dos clulas hijas, genticamente idnticas a la madre, que contienen
un nmero diploide de cromosomas caracterstico de la especie.
Los organismos pluricelulares necesitan la mitosis para desarrollarse,
crecer y reemplazar clulas de tejidos u rganos daados. Todos estos
organismos provienen de una clula nica. Esto incluye tanto animales como
las plantas.

BIBLIOGRAFA
Batista O. David, Agosto de 2006. Manual de laboratorio de Gentica.
Universidad Autnoma de Chiriqu. Facultad de Ciencias Naturales y Exactas.
Departamento de Gentica. Panam, p.p. 29, 30, 31, 32, 33.
http://es.wikipedia.org/wiki/Mitosis
http://www.biologia.arizona.edu/cell/tutor/mitosis/cells3.html

Meiosis
Juan Avils 4-734-911
Jos Gonzles 4-750-2003
RESUMEN
Es el proceso mediante el cual se obtienen clulas especializadas para
intervenir en la reproduccin sexual. Reduce a la mitad el nmero de
cromosomas, y as al unirse las dos clulas sexuales, vuelve a restablecerse el
nmero cromosmico de la especie. Se produce una recombinacin de la
informacin gentica. La meiosis origina una gran variacin de gametos, debido
al entrecruzamiento de segmentos de los cromosomas homlogos. Con la
experiencia a realizar pudimos diferenciar las fases y etapas de cada una de
estas. Debe destacarse que si bien en la espermatognesis las cuatro clulas
derivadas de la meiosis se diferencian en espermatozoide.
INTRODUCCIN
En biologa, meiosis (del griego , disminucin) es una de las
formas de reproduccin celular. Es un proceso divisional celular, en el cual una
clula diploide (2n) experimentar dos divisiones celulares sucesivas, con la
capacidad de generar cuatro clulas haploides (n).
Este proceso se lleva a cabo en dos divisiones nucleares y
citoplasmticas, llamadas primera y segunda divisin meitica o simplemente
Meiosis I y Meiosis II. Ambas comprenden Profase, Metafase, Anafase y
Telofase.
Durante la meiosis I, los miembros de cada par homlogo de
cromosomas se unen primero y luego se separan y se distribuyen en diferentes
ncleos. En la Meiosis II, las cromtidas hermanas que forman cada
cromosoma se separan y se distribuyen en los ncleos de las clulas hijas.
Entre estas dos etapas sucesivas no existe la etapa S (duplicacin del ADN).
La meiosis no siempre es un proceso preciso; a veces los errores en la
meiosis son responsables de las principales anomalas cromosmicas. La
meiosis consigue mantener constante el nmero de cromosomas de las clulas
de la especie para mantener la informacin gentica.
Meiosis I
Profase I
La profase I de la primera divisin meitica es la etapa ms compleja del
proceso y a su vez se divide en 5 subetapas, que son:

Leptoteno:

La primera etapa de Profase I es la etapa del leptoteno, durante la cual


los cromosomas individuales comienzan a condensar en filamentos largos
dentro del ncleo. Cada cromosoma tiene un elemento axial, un armazn
proteico que lo recorre a lo largo, y por el cual se ancla a la envuelta nuclear. A
lo largo de los cromosomas van apareciendo unos pequeos engrosamientos
denominados crommeros.

Zigoteno:

Los cromosomas homlogos comienzan a acercarse hasta quedar


apareados en toda su longitud. Esto se conoce como sinapsis (unin) y el
complejo resultante se conoce como bivalente o ttrada (nombre que prefieren
los citogenetistas), donde los cromosomas homlogos (paterno y materno) se
aparean, asocindose as cromtidas homlogas. Producto de la sinapsis, se
forma una estructura observable solo con el microscopio electrnico, llamada
complejo sinaptonmico, unas estructuras, generalmente esfricas, aunque en
algunas especies pueden ser alargadas.
La disposicin de los crommeros a lo largo del cromosoma parece estar
determinado genticamente. Tal es as que incluso se utiliza la disposicin de
estos crommeros para poder distinguir cada cromosoma durante la profase I
meitica.
Adems el eje proteico central pasa a formar los elementos laterales del
complejo sinaptonmico, una estructura proteica con forma de escalera
formada por dos elementos laterales y uno central que se van cerrando a modo
de cremallera y que garantiza el perfecto apareamiento entre homlogos. En el
apareamiento entre homlogos tambin est implicada la secuencia de genes
de cada cromosoma, lo cual evita el apareamiento entre cromosomas no
homlogos. Adems durante el zigoteno concluye la replicacin del ADN (2%
restante) que recibe el nombre de zig-ADN.

Paquiteno:

Una vez que los cromosomas homlogos estn perfectamente apareados


formando estructuras que se denominan bivalentes se produce el fenmeno de
entrecruzamiento (crossing-over) en el cual las cromtidas homlogas no
hermanas intercambian material gentico. La recombinacin gentica
resultante hace aumentar en gran medida la variacin gentica entre la
descendencia de progenitores que se reproducen por va sexual.
La recombinacin gentica est mediada por la aparicin entre los dos
homlogos de una estructura proteica de 90 nm de dimetro llamada ndulo de

recombinacin. En l se encuentran las enzimas que medan en el proceso de


recombinacin.
Durante esta fase se produce una pequea sntesis de ADN, que
probablemente est relacionada con fenmenos de reparacin de ADN ligados
al proceso de recombinacin.

Diploteno:

Los cromosomas continan condensndose hasta que se pueden


comenzar a observar las dos cromtidas de cada cromosoma. Adems en este
momento se pueden observar los lugares del cromosoma donde se ha
producido la recombinacin. Estas estructuras en forma de X reciben el nombre
quiasmas. Cada quiasma se origina en un sitio de entrecruzamiento, lugar en el
que anteriormente se rompieron dos cromtidas homlogas que intercambiaron
material gentico y se reunieron.
En este punto la meiosis puede sufrir una pausa, como ocurre en el caso
de la formacin de los vulos humanos. As, la lnea germinal de los vulos
humanos sufre esta pausa hacia el sptimo mes del desarrollo embrionario y su
proceso de meiosis no continuar hasta alcanzar la madurez sexual. A este
estado de latencia se le denomina dictiotena.

Diacinesis:

Esta etapa apenas se distingue del diploteno. Podemos observar los


cromosomas algo ms condensados y los quiasmas. El final de la diacinesis y
por tanto de la profase I meitica viene marcado por la rotura de la membrana
nuclear. Durante toda la profase I continu la sntesis de ARN en el ncleo. Al
final de la diacinesis cesa la sntesis de ARN y desaparece el nuclolo.
Prometafase I
La membrana nuclear desaparece. Un cinetocoro se forma por cada
cromosoma, no uno por cada cromtida, y los cromosomas adosados a fibras
del huso comienzan a moverse. Algunas veces las ttradas son visibles al
microscopio. Las cromtidas hermanas continan estrechamente alineadas en
toda su longitud, pero los cromosomas homlogos ya no lo estn y su
centrmeros y cinetocoros encuentran separados entre s.
Metafase I
Los cromosomas homlogos se alinean en el plano de ecuatorial. La
orientacin es al azar, con cada homologo paterno en un lado. Esto quiere decir
que hay un 50% de posibilidad de que las clulas hijas reciban el homlogo del
padre o de la madre por cada cromosoma. Los microtbulos del huso de cada
centriolo se unen a sus respectivos cinetocoros.
Anafase I

Los quiasmas se separan. Los microtbulos del huso se acortan en la


regin del cinetocoro, con lo que se consigue remolcar los cromosomas
homlogos a lados opuestos de la clula, junto con la ayuda de protenas
motoras. Ya que cada cromosoma homlogo tiene solo un cinetocoro, se forma
un juego haploide (n) en cada lado. En la reparticin de cromosomas
homlogos, para cada par, el cromosoma materno se dirige a un polo y el
paterno al contrario. Por tanto el nmero de cromosomas maternos y paternos
que haya a cada polo vara al azar en cada meiosis. Por ejemplo, para el caso
de una especie 2n = 4 puede ocurrir que un polo tenga dos cromosomas
maternos y el otro los dos paternos; o bien que cada polo tenga uno materno y
otro paterno.

Telofase I
Cada clula hija ahora tiene la mitad del nmero de cromosomas pero
cada cromosoma consiste en un par de cromtidas. Los microtbulos que
componen la red del huso mittico desaparece, y una membrana nuclear nueva
rodea cada sistema haploide. Los cromosomas se desenrollan nuevamente
dentro de la cromatina. Ocurre la citocinesis (proceso paralelo en el que se
separa la membrana celular en las clulas animales o la formacin de esta en
las clulas vegetales, finalizando con la creacin de dos clulas hijas). Despus
suele ocurrir la intersinesis, parecido a una segunda interface, pero no es una
interface verdadera, ya que no ocurre ninguna rplica del ADN. Este proceso es
breve en todos los organismos, pero en algunos generalmente no ocurre.
Meiosis II
Profase II

Profase Temprana II

Comienza a desaparecer la envoltura nuclear y el nucleolo. Se hacen


evidentes largos cuerpos filamentosos de cromatina, y comienzan a
condensarse como cromosomas visibles

Profase Tarda II

Los cromosomas continan acortndose y engrosndose. Se forma el


huso entre los centriolos, que se han desplazado a los polos de la clula
Metafase II
Las fibras del huso se unen a los cinetocoros de los cromosomas. stos
ltimos se alinean a lo largo del plano ecuatorial de la clula. La primera y
segunda metafase pueden distinguirse con facilidad, en la metafase I las
cromtidas se disponen en haces de cuatro (ttrada) y en la metafase II lo
hacen en grupos de dos (como en la metafase mittica). Esto no es siempre
tan evidente en las clulas vivas.

Anafase II
Las cromtidas se separan en sus centrmeros, y un juego de
cromosomas se desplaza hacia cada polo. Durante la Anafase II las
cromtidas, unidas a fibras del huso en sus cinetocoros, se separan y se
desplazan a polos opuestos, como lo hacen en la anafase mittica. Como en la
mitosis, cada cromtida se denomina ahora cromosoma.
Telofase II
En la telofase II hay un miembro de cada par homologo en cada polo.
Cada uno es un cromosoma no duplicado. Se re ensamblan las envolturas
nucleares, desaparece el huso acromtico, los cromosomas se alargan en
forma gradual para formar hilos de cromatina, y ocurre la citocinesis. Los
acontecimientos de la profase se invierten al formarse de nuevo los nucleolos,
y la divisin celular se completa cuando la citocinesis ha producidos dos clulas
hijas. Las dos divisiones sucesivas producen cuatro ncleos haploide, cada uno
con un cromosoma de cada tipo. Cada clula resultante haploide tiene una
combinacin de genes distinta. Esta variacin gentica tiene dos fuentes: 1
Durante la meiosis, los cromosomas maternos y paternos se barajan, de modo
que cada uno de cada par se distribuye al azar en los polos de la anafase I. 2 se intercambian segmentos de ADN entre los homlogos paternos y maternos
durante el entrecruzamiento.

METODOLOGIA
Para este laboratorio procedimos a observar placas fijadas. La cuales
contenan folculo primario, folculo secundario, folculo terciario,
espermatognesis de perro, espermatozoides, tbulos seminferos y ovario.

RESULTADOS

Fig. 1 Meiosis

Fig. 2 Meiosis II
DISCUSIN
La meiosis es aquella que se caracteriza por 2 divisiones nucleares y 2
divisiones citoplasmticas. En la placa del folculo secundario se observan las
zonas pelusidas, el ovulo y unas clulas foliculares de segundo orden. En la
placa de espermatozoides, se observan los espermatozoides teidos. Se
observan claramente la cola y la cabeza del mismo. El la placa de tbulos
seminferos se observa en la parte central. La cabeza de los espermatozoides y
as dentro la cola de los espermatozoides. En la placa de folculo secundario
maduro se observan el ovulo, el liquido folicular y el estroma ovrico. Una de
las diferencias entre el folculo primario, secundario y terciario es la cantidad de
clulas que rodean al folculo.

BIBLIOGRAFA
Batista O. 2006. Manual de laboratorio de Gentica. Universidad Autnoma de
Chiriqu. Facultad de Ciencias Naturales y Exactas. Departamento de Gentica.
Panam, p.p. 38, 39, 40.
http://www.altillo.com/examenes/uba/cbc/biologia/biologresumenmeiosis.asp
http://www.efn.uncor.edu/dep/biologia/intrbiol/meiosis.htm

EXTRACCIN DEL ADN


Juan Avils 4-734-911
Jos Gonzles 4-750-2003

RESUMEN
El proceso de extraccin del ADN geonmico sigue ciertas pautas para su
correcta purificacin que son muy diferentes a los empleados en la purificacin
de protenas, lo que refleja las diferencias bsicas en la estructura de estos dos
tipos de macromolculas. El primer paso en la purificacin del ADN por lo
general consiste en homogeneizar las clulas y asla los ncleos de los cuales
se extrae el ADN. El medio de extraccin ordinario contiene un detergente
(SDS); a continuaciones le agrega solucin de te para resuspender el ADN,
luego los cidos nucleicos se precipitan aadiendo etanol .Para concluir el
anlisis de la extraccin del ADN hay que resaltar que e n este proceso ocurre
una lisis celular lo cual significa que el ADN queda libre por consiguiente hay
que protegerlo de las enzimas porque estas podran degradarlo.
La electroforesis es el movimiento de partculas elctricamente cargadas a
travs de un gel de agarosa como resultado de un campo elctrico formado
entre unos electrodos sumergidos en el medio, este procedimiento permite la
separacin de molculas como consecuencia de su diferente movilidad en un
campo elctrico.
INTRODUCCIN
La molcula de ADN (que es la que se va a extraer en este laboratorio)
est constituida por dos largas cadenas de nucletidos unidas entre s
formando una doble hlice. Las dos cadenas de nucletidos que constituyen
una molcula de ADN, se mantienen unidas entre s porque se forman enlaces
entre las bases nitrogenadas de ambas cadenas que quedan enfrentadas.
La unin de las bases se realiza mediante puentes de hidrgeno, y
este apareamiento est condicionado qumicamente de forma que la adenina
(A) slo se puede unir con la Timina (T) y la Guanina (G) con la Citosina (C).
La estructura de un determinado ADN est definida por la "secuencia"
de las bases nitrogenadas en la cadena de nucletidos, residiendo
precisamente en esta secuencia de bases la informacin gentica del ADN. El
orden en el que aparecen las cuatro bases a lo largo de una cadena en el ADN
es, por tanto, crtico para la clula, ya que este orden es el que constituye las
instrucciones del programa gentico de los organismos.

Conocer esta secuencia de bases, es decir, secuenciar un ADN equivale a


descifrar su mensaje gentico.
La estructura en doble hlice del ADN, con el apareamiento de bases
limitado (A-T; G-C), implica que el orden o secuencia de bases de una de las
cadenas delimita automticamente el orden de la otra, por eso se dice que las
cadenas son complementarias. Una vez conocida la secuencia de las bases de
una cadena, se deduce inmediatamente la secuencia de bases de la
complementaria.
METODOLOGA
PROTOCOLO PARA EXTRACCIN DE ADN GENMICO A PARTIR DE
SANGRE
(KIT MASTER PURE DE EPICENTRE)
1. Obtenga 5 mL de sangre fresca en un tubo Vacutainer con EDTA con otra
alternativa se puede usar sangre que ha sido guardada a 4 C por cerca de tres
das o sangre congelada pero, la reaccin puede disminuir.
2. Mezcle la sangre invirtiendo el tubo y transfiera 325 l a un tubo de
microcentrifuga que contenga 1 mL de buffer de lisis 1, mezcle en tubo 3 veces
invirtiendo para mezclar las soluciones.
3. Incube a temperatura ambiente por 5 minutos y mezcle en un vortex
brevemente. Contine incubando a temperatura ambiente por otros 5 minutos y
nuevamente vuelva a vortecear brevemente.
4. Obtenga el pelet de clulas blancas por centrifugacin a 25 segundos en una
microcentrifuga.
5. Deseche la mayor cantidad de sobrenadante dejando aproximadamente 25 l
en el tubo, luego mezcle utilizando el vortex para suspender el pelet o
precipitar.
6. Resuspenda las clulas blancas aadiendo 500 l de buffer de lisis 2,
pipeteando las clulas de 5 a 7 veces.
7. Proceda entonces a aadir 200 l de la solucin de precipitacin. Y mezcle con
el vortex vigorosamente por al menos 30 segundos.
8. Obtenga un pelet de desecho centrifugando por 10 minutos a 10 000 rpm en un
a microcentrifuga.
9. Coloque el sobrenadante en un tubo limpio de microcentrifuga y aada 500 l
de isopropanol o 2 propanol. Luego invierta el tubo entre 30 y 40 veces para
mezclar, durante este procedimiento se debe observar un precipitado
filamentoso dentro del tubo (ADN).
10. Obtenga el pelet o precipitado de ADN centrifugando a 4 C por 10 minutos en
un a centrifuga.
11. Deseche con mucho cuidado el sobrenadante sin tocar el pelet, posteriormente
lave dos veces el pelet con alcohol al 70% siendo muy cuidadoso de no perder
el pelet, remueva todo el residuo de etanol con una pipeta.

12. Resuspenda el ADN en 50 l de buffer TE, e incube toda la noche a


temperatura ambiente resuspendiendo el ADN, pipeteando repetidas veces y
vorteceando para mezclar por 10 segundos.
13. Guarde el ADN purificado a 20 C.
14. Cuantifique el ADN usando electroforesis, espectrofotometra, o fluorimetria. La
concentracin debe ser aproximadamente 100 a 200 g/mL.
RESULTADOS

Fig.1 Se obtiene la muestra de sangre para realizar la extraccin del ADN.

Fig. 2 Aqu se extraen los 5 l de sangre fresca.

Fig. 3 Aqu se colocan las muestras de sangre en un tubo para ser


vorteceados.

Fig. 4 Se vortecea para suspender, mezclar y separar

Fig. 5 Microcentrifuga, dentro de ella estan los pocillos. Aqu se obtiene el pelet
de celulas blancas, centrifugando por 25 segundos.

Sobrenadante

Precipitado

Fig. 6 Obtencin del pelet, aqu se observa tambin el sobrenadante.

TBE 1x

Fig. 7 TBE (Buffer)

Para preparar agarosa

Fig. 8 AGAROSA

Fig. 9 Aqu se prepara para hacer el gel de agarosa.

fig.10 Aqu se coloca el peine que es lo se observa


de color morado, dentro de este se coloca el gel de agarosa, para luego
observar la extraccin del ADN con la exposicin a la luz ultravioleta.

Fig. 11 Resultado final de la extraccin del ADN. Aqu se observa claramente


las Bandas por exposicin a la luz ultravioleta.
DISCUSIN
La extraccin del ADN es una manera para aislar los glbulos rojos de
los blanco. En esta experiencia, lo que se prepar primero, fue el gel de
agarosa, ya que haba que dejarlo reposar o cuajar, porque queda como

especie de una gelatina para luego hacer la extraccin, hay que recordar que la
corriente elctrica se da del nodo al Ctodo. Para poder introducir el ADN al
gel, se necesitan unos pocillos, para esto se coloca un peine. Entonces, si hay
ms ADN se coloca la peinilla en la parte ms gruesa y si hay menos ADN se
coloca en la parte ms delgada. Lo colocamos en la parte ms gruesa para que
el pocillo fuera visible. La agarosa es un polvillo y para esto se debe utilizar
guantes porque utilizamos Bromuro de etidio ya que este es txico y cancerino,
por eso cuando estamos cerca del gel o de la cmara, no colocar nuestra piel
desnuda. Se prepara un gel de agarosa al 2 %, le aadimos TBE 1x que es un
buffer, con el cual se disuelve la agarosa. Luego se llev a la microonda porque
tiene que quedar traslucida. Se dej por 70 segundos. Luego de esto se
adiciona 3 l de Bromuro de etidio a la agarosa, el Bromuro de etidio es el que
permite que se observen las bandas de ADN por exposicin a la luz ultravioleta.
Luego de esto se extrajo la muestra de sangre para extraer el ADN
genmico a partir de la sangre. Lo primero que se procede a hacer, es rotular
los tubos de sangre. Y se utilizarn tubos de micro centrfugo. Tomamos una
muestra. Mezclamos la sangre. Se vortecea para mezclar la sangre con el
buffer de lisis. Estamos lisando los glbulos blancos. Porque en los glbulos
rojos no hay ncleo y por eso no hay ADN, en cambio en los glbulos blancos
si hay. Se obtiene un pelet que es un agregado de glbulos blancos. Una vez
se es extrado esto, se procede a colocar en el gel de agarosa para luego ser
observados. Se observaran bandas de ADN, bandas que se vern claramente
por la exposicin a la luz ultravioleta
BIBLIOGRAFA
Batista O. 2006. Manual de laboratorio de Gentica. Universidad Autnoma de
Chiriqu. Facultad de Ciencias Naturales y Exactas. Departamento de Gentica.
Panam, p.p.
http://learn.genetics.utah.edu/es/units/activities/extraction/
http://www.microbial-systems.com/web/docs/Newsletter_Microbial_03.pdf

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