Introduccin

Las endonucleasas o enzimas de restriccin cortan los enlaces fosfodiester del

material gentico a partir del reconocimiento de secuencias especficas
palindrmicas, es decir, que se leen igual en las dos direcciones. En los
procariontes actan como mecanismo de defensa degradando el material
gentico extrao, generalmente de bacterifagas, que ingresa a la clula,
cortan el DNA extrao pero no el bacterial (Recinto Universitario de Mayagez,
2002). Las enzimas no reconocen el DNA de la bacteria pues este se modifica,
se metila a partir de la accin de la metiltransferasa y, adems, degradan por
hidrlisis enzimtica el DNA viral que no se modific (GENEMOL, 2006).
Hay 3 tipos de enzimas de restriccin.
Tipo I. Una sola enzima poseedora de 3 subunidades que reonoce el
sitio del DNA. Metila y restringe. La restriccin no ocurre en el sitio de
reconocimineot sino que ocurre al azar en sitios distantes de
reconocimiento. Necesitan ATP para moverse desde el lugar de
reconocimiento hasta el sitio de corte (GENEMOL, 2006) y (Recinto
Universitario de Mayagez, 2002).
Tipo II. Dos enzimas diferentes que realizan modificacin y restriccin,
esta ocurre en el sitio de reconocimiento o lugares adyacentes a este.
Permiten romper el DNA en sitios especficos. No requieren ATP sino
Mg++ como cofactor (GENEMOL, 2006) y (Recinto Universitario de
Mayagez, 2002).
Tipo III. Similar al tipo I, usan una enzima oligomtrica que rompe el
DNA ms all del sitio de reconocimiento (5 a 8 bases antes o despus
del sitio) y realizan todas las actividades enzimticas. Requieren ATP
(GENEMOL, 2006) y (Recinto Universitario de Mayagez, 2002).
Si hay ms de un sitio de restriccin en el DNA, se producirn mltiples
fragmentos o bien, si una molcula lineal de DNA es cortada con una enzima
de restriccin cuya secuencia de reconocimiento est en 5 diferentes lugares,
resultarn 6 fragmentos de longitud variable. Cuando se cortan molculas
circulares de DNA, en este caso pGLO, el producto son fragmentos de
diferentes tamaos y se pueden analizar por medio de electroforesis (SegalKischinevsky, C., 2013).

Referencias

GENEMOL. 2006. Enzimas de restriccin. Disponible en lnea en:

[http://genemol.org/biomolespa/Enzimas/enzimas-de-restricc.html] Fecha de
consulta: 16 de mayo de 2015.
Recinto Universitario de Mayagez. 2002. Laboratorio 12: Enzimas de
Restriccin y Electroforesis de DNA. Disponible en lnea en:
[http://www.uprm.edu/biology/cursos/biologiageneral/EnzimasDNA.htm] Fecha
de consulta: 16 de mayo de 2015.
Segal-Kischinevzky, C, G. J. Ortega-Lule, B. Rodarte-Murga, R. GutierrezOrdoez. 2013. Manual de prcticas de biologa molecular de la clula 1. Las
prensas de ciencias, Distrito Federal.