Qumica Analtica Instrumental

Leccin 1
-INTRODUCCIN AL ANLISIS INSTRUMENTAL.
Introduccin. Componentes de un instrumento de medida para el anlisis.
Clasificacin de las tcnicas analticas. Eleccin de un mtodo analtico. Medida de
la propiedad observable:curvas de calibrado, adicin estndar, patrn interno.
Validacin

Objetivos del curso

Fundamentos del anlisis Instrumental y
Discusin de la teora y fundamentos para :
(1) Medida de las propiedades Fsicas y Qumicas
(2) Origen de las propiedades Fsicas y Qumicas
(3) Diseo de Instrumentos y naturaleza de las respuestas
(4) Procesamiento de las seales y relacin entre la seal y
las propiedades

Introduccin
Los mtodos que utiliza la Qumica Analtica para la caracterizacin
de la materia suelen clasificarse en :

Qumicos e Instrumentales.
Los mtodos qumicos estn basados en interacciones materiamateria, esto es, en reacciones qumicas: El analto se determina
por medidas gravimtricas o volumtricas
Los mtodos instrumentales, basados en interacciones materiaenerga,: utilizan un instrumento ms o menos complejo para
evaluar una propiedad fsica o fsico-qumica del sistema objeto de
anlisis.

Un mtodo analtico se considera fsico cuando no incluye

reaccin qumica alguna y la operacin de medida no modifica
la composicin qumica del sistema

Clasificacin Mtodos de Anlisis

Cualitativos los que de la medida de una propiedad se

puede indicar la presencia de un analito en una matriz.
Cuantitativos la magnitud de la propiedad medida es
proporcional a la concentracin del analito en la matriz
Frecuentemente, el mismo mtodo instrumental es usado
para el anlisis cualitativo y cuantitativo

Esquema General Tcnica Instrumental

Fuente energa

M
U
E
S
T
R
a

Respuesta

D
A
T
O
S

Propiedad utilizada
Emisin de Radiacin

Tcnica
Espectroscopia de emisin - Luminiscencia:
Fluorescencia, Fosforescencia,

Absorcin de Radiacin

Espectroscopia de Absorcion Espectrofotometra, fotometra

Resonancia magntica nuclear
Resonancia de espin electrnico

Difraccin de la Radiacin

Difraccin de RayosX,
Difraccin de electrones

Rotacin de la Radiacin

Polarimetra,
Dicrosmo circular

Corriente Elctrica

Voltametra: amperometra, polarografa

Relacin masa/carga

Espectrometra de Masas

Radioactividad

Activacin neutrnica,
dilucin isotpica

Instrumento analtico es un dispositivo que convierte una seal, que

no suele ser detectable directamente por el ser humano, en una
forma que s lo es.

Eleccin mtodo analtico

Un primer paso que debe preceder al mtodo analtico, es una

definicin clara del problema analtico
El mtodo de trabajo seleccionado dependa de la respuesta a las
siguientes cuestiones:

Intervalo de concentracin de trabajo

Qu grado de exactitud se requiere
Que otros componentes hay en la muestra
Que propiedades fsico-qumicas tiene la muestra
Cuantas muestras se analizan

Clasificacin: Tamao de muestra

Mtodo

Peso de
muestra (mg)

Volumen de
muestra (ml)

Macroanlisis

> 100

> 10

Semimicroanlisis

10 - 100

1 - 10

Microanlisis

1 - 10

0,1 - 1

Ultramicroanlisis

<1

< 0,1

Medida propiedad observable

Cmo realizar una buena medida?
Es reproducible? : Precisin
Cmo conseguir el valor verdadero? :
Exactitud
Cual es la cantidad ms pequea que
puede ser medida? - Sensibilidad
En que rango de cantidad? - Rango
Dinmico o lineal
Existen interferencias?- Selectividad

PARAMETROS CARACTERISTICOS
Limites de deteccin y cuantificacin
El limite de deteccin de un analito se define como: aquella [ ] que
proporciona una seal instrumental significativamente diferente de la
seal de una muestra en blanco, o la seal de fondo.
Es la cantidad de analito que proporciona una seal igual a la del
blanco ms tres veces la desviacin estndar del blanco:
yLD = yB + 3 SB

limite de cuantificacin o determinacin considerado como el

limite de [ ] ms bajo para mediciones cuantitativamente precisas,

Se define como la cantidad de analito que proporciona una seal
igual a la del blanco ms diez veces la desviacin estandar del blanco
yLQ = yB + 10 SB

Rango lineal o Dinmico:

El intervalo de [ ] en que es aplicable un mtodo analtico

Rango dinmico =LOL /LOQ

Sensibilidad
La sensibilidad de un instrumento o mtodo se define
como, su capacidad para discriminar entre pequeas
diferencias en la [ ] de un analito.

La IUPAC, define la sensibilidad como la pendiente de la curva de

calibracin a la [ ] de inters
La sensibilidad viene limitada por la pendiente de la curva de
calibracin y la reproducibilidad o precisin del sistema de
medida,
Para dos mtodos que tengan igual precisin, el que presente
mayor pendiente en la curva de calibracin ser el ms sensible

Selectividad.

La selectividad de un mtodo analtico indica el grado de

ausencia de interferencias, debidas a otras especies
contenidas en la matriz de la muestra

Se define el coeficiente de selectividad de B con respecto de A, como:

mB
KB A= ------mA
Los coeficientes de selectividad son parmetros de calidad tiles
para describir la selectividad de los mtodos analticos

Eliminacin de Interferencias.

Quimicamente:

Usando agentes enmascarantes ( sustancia

que reacciona con el interferente para formar una especie que no
produce la misma seal del analito). Se consigue mediante un
ajuste de pH , un cambio en el estado de oxidacin, formacin de

complejos

Fisicamente: Separndolas previamente a la

determinacin. mediante precipitacin, extraccin ,
cromatografas o destilacin, volatilizacin.

Medida Analtica:
Los mtodos qumicos cuantitativos tienen carcter
absoluto.
La propiedad medida es funcin directa de la concentracin o de la
cantidad,

P=kC
P representa la magnitud de la propiedad medida,
C es la concentracin,
k es nica, tiene un valor perfectamente definido, deducible
de las leyes estequiomtricas

Los mtodos instrumentales tienen carcter relativo

P=KC.
La constante de proporcionalidad no es nica, al depender de las
condiciones experimentales.

Errores
La medida siempre debe estar guiada por los
principios de exactitud y precisin
Se debe realizar, cualquier experimento o
medida, de acuerdo con las directrices que
marca la estadstica.
En los anlisis cuantitativos, los errores que
aparezcan en ellos son de gran importancia.
No existen resultados cuantitativos vlidos, si
no van acompaados de una estimacin de
los errores inherentes a ellos

Tipos de errores
Errores Accidentales
Perdida de parte de muestra,contaminacion, o averia de
instrumento .Esto lleva a comenzar de nuevo

Errores Sistematicos o Determinados

Aquellos que pueden determinarse y probablemente evitarse o
corregirse

Errores aleatorios o indeterminados

Errores fortuitos cuya magnitud y signo no pueden predecirse
ni calcularse

Rechazo de Resultados

Al efectuar una serie de replicas de anlisis, uno de los

resultados obtenidos ser muy distinto de los otros
Para determinar si una observacin debe rechazarse :
Se ordenan los datos en orden decreciente de su valor, y se
calcula la relacin:

(valor sospechoso - valor mas prximo)

Q = ----------------------------------------------------------
(valor mas grande - valor mas pequeo)
La relacin Q experimental calculada se compara con
los valores tabulados de Q para un nivel de confianza
determinado.
Si la relacin calculada resulta mayor o igual que el valor
tabulado, se puede rechazar la observacin sospechosa.

Parametros estadisticos

Presentacin de los resultados

Los resultados experimentales
carecen de importancia y valor , si no
van acompaados de una estimacin
de los errores que han tenido lugar
durante la medida

CALIBRACIN EN ANLISIS INSTRUMENTAL

Segn la ISO (International Stndar

Office), la calibracin se define como
el conjunto de operaciones que
permiten establecer, en
determinadas condiciones
experimentales, la relacin existente
entre los valores indicados por el
aparato, con los valores obtenidos
en la medida de un valor conocido.

calibracin

El procedimiento operatorio en anlisis instrumental para la

calibracin es :
Se prepara una serie de muestras (9 10) con [ ]
conocidas de analito.
Se miden en el instrumento en iguales condiciones
seguidamente se medir las muestras problema.
A partir de la seal obtenida para cada patrn de [ ]
conocida, se construye la grfica de calibracin.
A partir de ella se obtiene la [ ] de analito en las muestras
problema por interpolacin.

Aspectos de las grficas de calibracin

Se realiza con una serie de soluciones estndar que

contienen [ ] conocidas del analito
Que cubran el intervalo de [ ] de inters
Tener una composicin de matriz tan parecida como
se pueda a la de las soluciones de las muestras
problema.
Tambin se analiza una solucin blanco o de fondo .
Las respuestas netas de cada solucin estndar menos la
de fondo se representan frente a las [ ] de las
soluciones estndar a fin de obtener la grfica de
calibracin.

preguntas estadsticas
Es lineal la grfica de calibracin?
Cul es la mejor recta que pasa por esos puntos?
Suponiendo que la calibracin es lineal, cules son los
errores estimados y los limites de confianza para la
pendiente y la ordenada en el origen?
Cundo la grfica se usa para el anlisis de una muestra
problema, cules son los errores y los limites de
confianza para una [ ] determinada?
Cul es l limite de deteccin del mtodo, es decir, la
menor [ ] de analito que se puede detectar con un nivel
de confianza predeterminado?

Preguntas estadsticas

Es lineal la grfica de calibracin?, y si es curva qu

grfica tiene

Para estimar si los puntos experimentales se ajustan a una

recta, calculamos el coeficiente de correlacin que viene
dado por r y tiene la siguiente expresin:

r es > 099,
los valores de r < 09 son poco comunes .

Clculo de la Recta de Regresin de Y sobre X

Supone obtener la mejor recta a

travs de los puntos de la grfica de
calibracin
Obtener mediante programa de calculo
y = 193 x + 152 ( pendiente y
ordenada en el origen)
Coeficiente correlacin

Errores en la pendiente y ordenada en el origen

Es importante determinar los errores aleatorios en el

clculo de la pendiente y la ordenada en el origen.

Modo de Calibraciones
Curva o grfica analtica
Mtodo de adiciones estndar
Patrn interno

Standard Externo
Concentracion, mM

Propiedad

0,15

10

0,31

15

0,44

20

0,6

25

0,76

desconocido

0,421

Ecuacin de regresion
pendiente=

0,0302

intersepcin=INTERSECCION.EJE(B3:B7;A3:A7)

-0,001

Concentracion, desconocido=(B8-B11)/B10

13,97350993

Analisis de errores
Error estndar en y=ERROR.TIPICO.XY(B3:B7;A3:A7)
N =CONTARA(B3:B7)
Sxx =B15*VARP(A3:A7)
y bar(media de la Propiedad) =SUMA(B3:B7)/5
M (n de replicaciones)=SUMA(B3:B7)/5
Desviacion estandar en C=B14/B10*RAIZ(1/B18+1/B15+((B8B17)^2)/((B10^2)*B16))

0,009486833
5
250
0,452
1
0,34471984

Calibracin externa

concent del Estndard

11,1

Volumen desconocido
usado

10

Volumen Estndar
aadido

Absorbancia medida

0,24

0,437

10

0,621

15

0,809

20

1,009

Ecuacion de Regresion
pendiente

0,0382

interseccin

0,2412

Volumen en la interseccion

-6,314136126

Concent del desconocido

-7,008691099

Analisis de errores
error standard en y
N
Sxx
Ymedia

0,004857983
5
250
0,6232

Desviacion estandar en
volumen

0,143011163

desviacion estandar en c

0,158742391

Adicin Standard

Patrn Interno

En este mtodo se aade a la muestra un cantidad conocida de una sustancia

patrn diferente a los analitos a determinar y se compara la respuesta del
instrumento con la respuesta de concentraciones conocidas del analito.
Se realiza una serie de medidas conjuntas de diferentes concentraciones de analito
y de patrn interno para obtener el factor de respuesta.

C= concentracin de la sustancia de Inters

A= Seal obtenida con la sustancia de inters

Cs= concentracin del Patrn interno

As= Seal obtenida del patrn interno

La respuesta relativa

Esto se calcula para cada analito de la muestra

Patrn interno

En una muestra desconocida se aade una cantidad del patrn interno obteniendo
Au = Seal del desconocido
Cs=concentacin del estndar aadido
As = Seal del estndar Interno
La relacin de respuesta es la obtenida anteriormente y por tanto:

Cu= Concentracin del desconocido