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Cromatografa de lquidos.

La Cromatografa lquida, tambin conocida como


Cromatografa de lquidos, es una tcnica de separacin
y no debe confundirse con una tcnica cuantitativa o
cualitativa de anlisis.
En toda cromatografa existe un contacto entre dos
fases, una fija que suele llamarse fase estacionaria, y
una mvil (fase mvil) que fluye permanente durante el
anlisis, y que en este caso es un lquido o mezcla de
varios lquidos.

La fase estacionaria por su parte puede ser almina,


slice o resinas de intercambio inico que se encuentran
disponibles en el mercado. Los intercambiadores inicos
son matrices slidas que contienen sitios activos
(tambin llamados grupos ionognicos) con carga
electrosttica (positiva o negativa).

Dependiendo de la relacin carga/tamao unos


constituyentes de la mezcla sern retenidos con mayor
fuerza sobre el soporte slido que otros, es decir sern
adsorbidos, lo que provocar su separacin. Las
sustancias que permanecen ms tiempo libres en la
fase omega, avanzan ms rpidamente con el fluir de la
misma y las que quedan ms unidas a la fase
estacionaria o retenidas avanzan menos y por tanto
tardarn ms en salir o fluir.

Fundamento
La cromatografa lquida (HPLC), es una tcnica utilizada
para separar los componentes de una mezcla. Consiste
en una fase estacionaria no polar (columna) y una fase
mvil.

La fase estacionaria es slica que se ha tratado con


SiCl . La fase mvil acta de portador de la muestra. La
muestra en solucin es inyectada en la fase mvil.

Los componentes de la solucin emigran de acuerdo a


las interacciones no-covalentes de los compuestos con
la columna. Estas interacciones qumicas, determinan la
separacin de los contenidos en la muestra. La
utilizacin de los diferentes detectores depender de la
naturaleza de los compuestos a determinar.