DETECCIN DEL CONSUMO CRNICO DE COCANA UTILIZANDO EL CABELLO

COMO MATRIZ BIOLGICA ALTERNATIVA.

TRABAJO DE INVESTIGACIN PRESENTADO POR:

DRA. ROSA MARA ORELLANA PINEDA.

LIC. MARCO AURELIO MIXCO DUKE.
PARA OPTAR AL TTULO DE MAESTRO EN CIENCIAS FORENSES.
AGOSTO DE 2007
SAN SALVADOR, EL SALVADOR, CENTRO AMRICA
Trabajo publicado en la Revista de AUPRIDES Vida Universitaria Edicin No. 6; 2008; 48-52

INTRODUCCIN:
El flagelo de las drogas ha pasado de ser un problema regional a representar un fenmeno global
que afecta tanto a pases desarrollados, como a aquellos en vas de desarrollo. Nuestro pas no est
exento de este fenmeno.
Lo creciente del fenmeno, as como lo diverso y complejo del mismo, obliga a las naciones a
intensificar esfuerzos de investigacin, vigilancia y control. Los esfuerzos comprenden iniciativas
de adaptacin de la legislacin correspondiente, as como regulaciones ms severas con serias
implicaciones para quien las infrinja. Sin embargo, para que la ley tenga aplicacin debe sustentarse
en datos analticos, concretos y confiables para responder a las necesidades y demandas de la
sociedad. Los laboratorios periciales deben ser capaces de detectar el mayor nmero de sustancias
con mtodos rpidos, sensibles y confiables. Sin embargo, las tcnicas actuales para la deteccin de
droga, en sangre y en orina, tienen limitaciones: informan nicamente sobre la exposicin a la
sustancia por un corto perodo. Para determinar la cronicidad del contacto, es decir, exposiciones
ms prolongadas (de varios meses) es necesario emplear matrices biolgicas alternativas, como el
pelo.
OBJETIVO GENERAL.
Establecer el consumo crnico de cocana mediante el mtodo de cromatografa de gases con
espectrometra de masas utilizando el cabello como matriz biolgica alternativa.

OBJETIVOS ESPECFICOS.
Establecer la presencia de cocana a travs de su metabolito benzoilecgonina en el cabello de
una muestra de sujetos.
Determinar retrospectivamente el consumo crnico de cocana a travs del estudio analtico de
segmentos de cabello (en un grupo de consumidores).

JUSTIFICACIN.
El anlisis de cocana en el cabello permite extender ms tiempo la deteccin de la droga (en
varios meses), a diferencia de los exmenes de sangre y la orina que poseen limitaciones
temporales. La deteccin de drogas en el pelo tiene numerosas posibilidades de aplicacin:
establecer la adiccin, la comisin de crmenes bajo la influencia de la droga, el abuso infantil,
causa de muertes sospechosas, abuso de drogas en las crceles, custodia de menores, entre otras.
Adems, puede ser aplicado para fines teraputicos como control en el cumplimiento del
tratamiento de drogodependientes sometidos a medidas de seguridad. Tambin, puede emplearse en
las empresas para determinar el posible uso crnico de la droga por personal contratado para ejercer
cargos de responsabilidad por ejemplo, personal que trabaja en las torres de control areas, personal
de vigilancia o seguridad, etc.
El presente estudio se realiz en el Laboratorio Forense del Instituto de Medicina Legal Dr.
Roberto Masferrer, Regin Metropolitana.
MARCO DE REFERENCIA EN LA SOCIEDAD.
La cocana es, en la actualidad, la droga ilcita de mayor expansin en el mundo y ocupa el segundo
lugar en utilizacin por los adictos de todas las clases sociales y edades, desplazando a la marihuana
y los psicofrmacos.
El consumo de cocana por la poblacin salvadorea sigue esta tendencia. Aumenta anualmente el
0.5% en la poblacin en trminos absolutos. Al respecto, la Oficina de las Naciones Unidas contra
las Drogas y el Delito (ONUDD), en su informe publicado el 1 de marzo de 2007, plante que El
Salvador se haba convertido en la tercera nacin con mayor incidencia en el consumo de cocana
(2.5% de la poblacin), slo superada por EE UU (2.8%) y Espaa (2.7%)1
Datos obtenidos del Laboratorio Forense Metropolitano del Instituto de Medicina Legal Dr.
Roberto Masferrer, muestran que del total de anlisis toxicolgicos realizados en el ao 2006, el
15.7% correspondi a pruebas presuntivas para cocana (Inmunoensayo) y el 1.7%, a pruebas
confirmatorias para cocana (Espectrofluorimetra).2
Conforme con la expansin del uso de la droga antes mencionado, se hace necesario tambin el
empleo de mtodos y tcnicas de identificacin del consumo y su cronicidad, para fines de
investigacin policial y legal.
Los mtodos analticos hasta ahora utilizados permiten determinar la presencia de cocana en las
matrices biolgicas de sangre y orina, denominadas muestras tradicionales, cuya caracterstica es
una limitada deteccin del tiempo de consumo. En la sangre, de 3 a 4 horas antes de la toma de la
muestra, mientras que en el caso de la orina, se puede conocer si alguien estuvo en contacto con la
droga en los ltimos cuatro das anteriores a la prueba3.
Es decir, con las tcnicas de anlisis que contbamos en nuestro pas no es posible establecer la
asiduidad en el uso de determinada droga y, particularmente, la cronicidad de su consumo. En este
sentido, el anlisis de cocana en el cabello adquiere una importancia relevante, ya que permitir
demostrar no slo el consumo, sino la constancia o cronicidad del mismo durante un perodo de
varios meses, dependiendo de la longitud del cabello del sujeto.

Enfoques. El Consumo Elude el Radar. La Prensa Grfica, Ao 9 No. 452. 18 de marzo de 2007, p. 3 y 4.
Informe de Actividades de enero a diciembre de 2006. Laboratorio Forense Metropolitano.
3
Value of hair analysis in post mortem toxicology. Pascal Kinttz. Elsevier Ireland Ltd., 15 April 2004. p.1.
2

MARCO DE REFERENCIA ESPECFICO DEL TEMA.

En general, se acepta que el pelo de las personas crece aproximadamente a una velocidad de un
centmetro por mes. As por ejemplo, si se analiza el primer centmetro del pelo cercano a la raz y
el resultado es positivo, esto indicar que la persona consumi droga durante el mes anterior con
una frecuencia, y en una dosis tal, que han hecho posible la acumulacin suficiente para ser
detectada.

Cabe sealar, por lo expuesto hasta aqu, que la deteccin de metabolitos de cocana en el cabello
es una alternativa a las opciones actuales de los mtodos en orina y sangre. O, si se quiere, es un
mtodo complementario que ofrece ventajas especficas:
1) El anlisis de cabello para detectar drogas va en relacin con el crecimiento de ste pudiendo
determinar el consumo en trminos de varios meses. Ampla, por tanto, la ventana de deteccin y
proporciona informacin sobre el tiempo de consumo.
2) Es prcticamente imposible de falsear ya sea por abstinencia temporal o adulteracin. Por otra
parte, el limpiado externo del cabello no afecta de ninguna manera las trazas de drogas ilcitas que
se encuentran en la mdula de ste que es donde se almacena la droga.
3) La estabilidad de la muestra que permite conservarla casi indefinidamente a temperatura
ambiente. El pelo no se afecta por la descomposicin como los fluidos biolgicos u otros tejidos
blandos. Slo se altera si se lo quema o trata con cidos fuertes. Su fortaleza est determinada por
la sntesis proteica dentro de las clulas de la matriz pilosa.
4) La toma de la muestra puede realizarse sin invadir la privacidad (intimidad) del individuo.
DESCRIPCIN DE ACTIVIDADES.
En el presente estudio se implement un mtodo analtico de cromatografa de gases con detector de
espectrometra de masas (GC-MS), de tipo cualitativo para la deteccin de cocana, a travs de su
metabolito benzoilecgonina, utilizando cabello de cadveres consumidores de cocana como matriz
biolgica.
Muestra de Cabello.
Se analizaron 64 muestras de cabello procedentes de 16 cadveres de la morgue del Instituto de
Medicina Legal Dr. Roberto Masferrer, Regin Metropolitana, recolectadas durante el perodo de
enero a junio de 2007. Mediante prueba confirmatoria en orina por espectrofluorimetra se
estableci previamente que eran consumidores de cocana al menos durante los cuatro ltimos das
antes de su fallecimiento.
Criterios de Inclusin.

Consumidor de cocana.

Largo mnimo de cabello de 4 cm.

Prueba presuntiva para cocana en orina positiva por inmunoensayo.

Prueba confirmatoria en orina positiva para benzoilecgonina (espectrofluorimetra).

Procedimiento Analtico.
Todos los reactivos y solventes utilizados fueron de grado cromatogrfico y analtico: HCl, buffer
fosfato, Diclorometano, acetato de etilo, HFIP.
Lavado.
Cada mechn de cabello fue previamente sometido a lavado para su descontaminacin externa, en
la siguiente forma:

Se adicion 2 ml. de Diclorometano a 35 C por 5 minutos (2 veces).

El cabello ya lavado se dejo secar a temperatura ambiente.

Corte Seriado del Cabello.
Para obtener el perfil retrospectivo del consumo de cocana, se procedi de la siguiente manera:

Cada mechn de cabello de cada uno de los cadveres fue medido en segmentos de 1 cm. de
longitud cada uno. El primer centmetro corresponde al ms prximo a la raz.

A su vez, cada segmento (cada centmetro) fue cortado con tijera en pequeos trozos de
aproximadamente 1 mm. y colocados en un tubo de ensayo con tapn de rosca.

En total, se obtuvieron 64 muestras segmentadas de cabello (4 segmentos por cada uno de los
16 sujetos).
Extraccin.
Las muestras fueron sometidas a un procedimiento de extraccin de la benzoilecgonina mediante
hidrlisis cida, de la siguiente manera:

Se adicion 1 ml. de HCl 0.1 N (tapar) a cada uno de los tubos.

Se calent en estufa a 50 C durante 24 horas.

Al contenido del tubo se le adicionaron 6 ml de buffer fosfato hasta alcanzar pH 9.0 (vortex).

Se adicion 6 ml del solvente de extraccin: Diclorometano.

Se coloc en mezcladora durante 12 horas.

Se procedi a separar la capa acuosa (capa superior) de la capa orgnica (capa inferior), que
es el solvente. Y, se llev a sequedad por evaporacin.
Derivacin.

Se adicionaron 100 l4 de 1, 1, 1, 3, 3, 3 hexa fluoro isopropanol (HFIP). Se calent en tubo

tapado a 80C durante 30 minutos.

Se enfri a Temperatura ambiente, destapando el tubo. Se evapor el derivado a una

temperatura de 65 C.
Reconstitucin.

El residuo se reconstituy con 150 l de Acetato de etilo.

La alcuota se coloc en un vial de 3 ml con columna interna de 200 l.

Mtodo Instrumental: Cromatografa de gases con detector de espectrometra de masas (GCMS).

Se enfri e inyect la alcuota en un cromatgrafo Agilent Technologies 6890 acoplado a un

detector selectivo de masas Agilent Technologies 5973 inert. La columna capilar utilizada Columna
cromatogrfica PE-17 entrelazada 50% fenil y 50% metil polisiloxano (30 metros x 0.32 mm.
Dimetro Interno, 0.25 m5 Grosor de Pelcula).

La temperatura del puerto de inyeccin 230 C, en la modalidad sin divisin de flujo

(splitless), 0.75 minutos la interfase a 280C.

El horno fue programado con una temperatura inicial de 100C con un incremento de 25C
por minuto hasta alcanzar 235 C, temperatura que se mantiene por 20 minutos.

El gas transportador Helio de extrema pureza se us a una velocidad de flujo de 50

ml/minuto.

4
5

l: microlitros.
m: micrmetro.


Se utiliz el modo SIM (monitoreo de masa de un solo in), con 4 iones para identificar la
benzoilecgonina.

Los iones utilizados en el monitoreo fueron: 77, 82, 124 y 168. Por ser estos los iones de la
benzoilecgonina que se encuentran en mayor abundancia.6

El tiempo de retencin de la sustancia fue de 16.999 minutos.

Anlisis de los Datos Obtenidos de la Deteccin del Consumo Cocana en el Cabello Mediante
Cromatografa de Gases con Espectrometra de Masas.
El procedimiento del cromatgrafo de gases con espectrometra de masas fue concluyente: detect
la presencia de cocana en el cabello a travs de su metabolito benzoilecgonina, aportando un dato
de naturaleza cualitativa: el espectro de masas que expresa la presencia de los iones monitoreados
de la sustancia en forma gaseosa.
La identificacin de la benzoilecgonina se estableci de acuerdo a los siguientes parmetros:

El tiempo de retencin de la sustancia en los distintos ensayos fue similar: 16.999 minutos.

Todos los iones utilizados en el monitoreo aparecieron en el mismo tiempo de retencin.

En el modo de exploracin de la relacin masa carga se obtuvo un espectro de la sustancia

problema similar al estndar de referencia.
Abundance
TIC
: M13.D
2200000
2000000
1800000
1600000
1400000
1200000
1000000
800000
600000
400000
200000

4.00

6.00

8.00

10.00

12.00

14.00

16.00

18.00

20.00

22.00

24.00

Time-->

Abundance
Scan 1973 (16.999 m
in): M13.D

15000

82

14000
13000
12000

77

11000
10000
9000
8000
7000
6000

124

5000
4000
3000
2000

168

1000
0
70

75

80

85

90

95 100105110115120125130135140145150155160165170175

m/z-->

Con el mtodo de cromatografa de gases con espectrometra de masas, utilizando el cabello como
matriz alternativa, es posible determinar en el tiempo el uso crnico de la droga dependiendo de la
longitud del cabello.

Pflager, K. Et. Al. Mass Spectral and GC Data. Part 3. Second, revised edition. VCH Germany, 1992 p.
1424.

CONCLUSIONES.
El estudio pretenda implementar en nuestro pas un mtodo confiable y eficaz, como la
cromatografa de gases con detector de espectrometra de masas, para detectar el consumo crnico
de cocana utilizando el cabello como matriz alternativa.
El mtodo permite individualizar con mayor precisin histrica el uso de la droga susceptible de
servir a varias aplicaciones prcticas:
i) Determinar el consumo retrospectivo en varios meses para casos de investigacin legal o mdico
forense;
ii) Servir de insumo para apoyar decisiones legales o mdico forenses;
iii) Encontrar elementos correspondientes a la prctica y conducta retro anterior de un sujeto;
iv) Aportar informacin para apoyar procesos de seleccin de personal, especialmente aquel
responsable de tareas de seguridad y vigilancia; y,
v) Complementar y ofrecer informacin longitudinal en los casos determinados por otras pruebas
tradicionales de deteccin del consumo de drogas.
RECOMENDACIONES.

Realizar un estudio pareado con una muestra de sujetos consumidores y no consumidores de

cocana.

Realizar estudios con sujetos vivos en donde se levante una historia de vida a fin de crear y
aportar mayor conocimiento sobre el fenmeno y mejorar as los procedimientos legales.
Finalmente, los resultados alcanzados en este estudio permiten proponer la propuesta siguiente:

Que el Instituto de Medicina Legal Dr. Roberto Masferrer implemente el mtodo de anlisis
para la deteccin del consumo crnico de cocana mediante cromatografa de gases con
espectrometra de masas utilizando el cabello como matriz biolgica alternativa a fin de contribuir
con la administracin de justicia en el pas en la determinacin de la drogodependencia en casos de
inters mdico legal.
BIBLIOGRAFIA.
ARNOLD, W. and Puschel, K. Experimental Studies on Hair as an Indicator of Past or Present Drug Use.
Journal Forensic Sci Soc. 1981.
BALABANOVA, S. and Homoki, J. Determination of Cocaine in Human Hair by Gas
Chromatography/Mass Spectrometry. Z. Rechtsmend 98, 1987.
BAUMGARTNER, A.M. y col. Radioimmunoassay of Hair Determining Opiate-Abuse Histories. Journal
of Nuclear Medicine, 1979.
BONILLA, Gildaberto. Estadstica II. Mtodos prcticos de inferencia estadstica. 4 edicin. UCA
Editores, San Salvador, 1997.
CALABUIG Gisbert. Medicina Legal y Toxicologa. 6 Edicin. Masson S.A., Barcelona, 2005.
CLARKE, EGC. Isolation and Identification of Drugs. Pharmaceutical Press, 1999.
CURCI, Osvaldo H. Toxicologa. 2 Edicin, Editores Lpez, 1994.
DE SOUZA Minayo, Mara Cecilia y otros. Investigacin Social. Teora, mtodo y creatividad. Lugar
Editorial, Buenos Aires, 2003.
El Consumo Elude el Radar. Enfoques. La Prensa Grfica, Ao 9, N 452, 18 de marzo de 2007.
Encyclopedia of Separation Science. Academic Press, Bangalore, India. 2000.
HENDERSON, Gary L. et al. Analysis of Hair for Cocaine. Originally published in (eds. Edward J. Cone,
Ph.D., Michael J. Welch, Ph.D., and M. Beth Grigson Babecki, M.A.) Hair Testing for Drugs of Abuse:
International Research on Standards and Technology, 1995. Publication N 95-3727.
HERNNDEZ Sampieri, Roberto y otros. Metodologa de la Investigacin. 4 edicin, McGraw-Hill
Interamericana, Mxico, 2006.
KINTTZ, Pascal. Value of Hair Analysis in Post Mortem Toxicology. Elsevier Ireland Ltd., 15 de April,
2004.
Laboratorio Forense Metropolitano. Informe de Actividades de enero a diciembre de 2006. San Salvador,
2007.
MEDINA Alegra, Sara Mnica. Examen Toxicolgico de Drogas de Abuso (Mal Llamado
Antidoping).Talleres de Diseo y Publicidad, 2003.

MENNDEZ, Repetto. Determinacin de Compuestos Opiceos y Cocanicos en muestras de pelo. Mtodos

de Extraccin. Instituto Nacional de Toxicologa. Sevilla, Espaa 1997.
PERKINS de Piacentino, Ana Mara; Locani O.A., Lorenzo J.L., Garca Fernndez J.C. Estudio Analtico y
Espectrodensimtrico de Drogas en Pelo. Buenos Aires, Argentina 2002.
PERKINS de Piacentino, Ana Mara y otros. Drogas en Pelo: Sus Alcances y Limitaciones. I. Cuadernos de
Medicina Forense. Cuerpo Mdico Forense, Corte Suprema de Justicia, Ao 3, N 1. Buenos Aires,
Argentina. 2000.
PREZ Franco, Juan M. Adicciones. Departamento de Psiquiatra y Salud Mental, Campus Sur, Universidad
de Chile. Apuntes exclusivos para docencia. 2007.
PFLAGER, K. et al. Mass Spectral and GC Data. Part 3, Second revised edition. VCH Germany, 1992.
SEGURA Abad, D. Luis. Avances en Medicina Forense: Toxicologa Forense. Revista de la Escuela de
Medicina Legal. Madrid, Mayo de 2007.
TORRECILLA Jimnez J.M., Delgado Bueno S. Medicina Legal en Drogodependencias. 1 Edicin, Editor
Forneiro, 1999.
URIBE Cualla, Guillermo. Medicina Legal, Toxicologa y Siquiatria Forense. 10 Edicin. Temis, Bogota,
1977.