Bioensayo agudo de barbos rosados

Delgado Gutirrez, Judith 1

Alumno de la asignatura de Calidad de Agua de la Facultad de Oceanografa,
Pesquera, Ciencias Alimentarias y Acuicultura.
Calidad de agua teora

Ao acadmico: 2015

Resumen
Se determin la concentracin letal media del plomo en la especie de los peces Bardos
Rosados, mediante una prueba de toxicidad aguda realizada en bioensayos estticos a 96
horas (CL50-96h). Se evaluaron los principales efectos del contaminante sobre la estructura
de estos organismos acuticos a corto plazo y en los parmetros hematolgicos. La
concentracin letal media de plomo para el Bardos Rosados fue de 0;0.01;0.1:1;10;20 en 96
h y se observaron los siguientes biomarcadores externos: Nado letrgico en la superficie,
opacidad de la crnea, cambios en la pigmentacin de la piel, asfixia. Todos los compuestos
de plomo son txicos en diferente grado, dependiendo de su naturaleza qumica y grado de
solubilidad de cada compuesto, los ms txicos son los compuestos orgnicos.
Desde hace mucho tiempo se sabe que el plomo es venenoso, tiene efectos txicos para las
plantas, el plancton y dems organismos acuticos. Los compuestos de plomo en los peces
les origina la formacin de una pelcula coagulante y les provoca alteraciones
hematolgicas.

El laboratorio cuenta con un rea para mantener cultivos de distintas especies y una para la
realizacin de los bioensayos de toxicidad con especies animales y vegetales. Se realizo
una limpieza del laboratorio as como la realizacin de un inventario el cual deber estar
pegado en dicho laboratorio. El objetivo de este bioensayo es observar sntomas o efectos
preliminares que causa el contaminante ms no la mortalidad y construir una curva de
porcentaje de mortalidad de los peces versus las diferentes concentraciones del
contaminante.

Palabras clave: Laboratorio, bioensayos, plomo

Abstract
Average lethal concentration of lead found in the species of fish Pink Bardos, through acute
toxicity test performed on static at 96 hours (CL50-96h) bioassays. The main effects of the
pollutant on the structure of these short-term aquatic organisms and hematologic
parameters were evaluated. The median lethal concentration lead to the Bardos Pink were
0, 0.01, 0.1 1, 10, 20 in 96 h the following external biomarkers were observed: Swim
lethargic surface, corneal opacity, changes in pigmentation skin suffocation. All lead
compounds are toxic to varying degrees, depending on their chemical nature and extent of
solubility of each compound, the organic compounds are toxic.
It has long been known that lead is poisonous, has toxic effects on plants, plankton and
other aquatic organisms. Lead compounds in fish originates them forming a coagulant film
and causes them haematological disorders.

The laboratory has an area to maintain crops of different species and to perform toxicity
bioassays animal and plant species. Cleaning the laboratory as well as an inventory which
must be stuck in the laboratory it was conducted. The purpose of this bioassay is to observe
symptoms or preliminary effects caused by pollution but not the mortality curve and build a
mortality rate of fish versus the different concentrations of the pollutant.

Keywords: Laboratory bioassays, lead

Bioensayos

Segn Rodrguez y Esclaps, (1995) Los bioensayos de toxicidad permiten evaluar el

grado de afectacin que una sustancia qumica tiene en organismos vivos y stos pueden ser
agudos o crnicos. Las pruebas agudas cuantifican las concentraciones letales de un
xenobitico a una especie en particular. El valor calculado se denomina concentracin letal
media (CL50) y corresponde a la concentracin de un xenobitico que causa la muerte al
50 % de la poblacin experimental al cabo de un tiempo determinado, generalmente en 48 o
96 horas. En contraste, las pruebas crnicas estiman la concentracin efecto media
(CE50) de la sustancia de prueba que causa un efecto al 50 % de la poblacin experimental,
al cabo de un tiempo determinado

Segn Villamar, (1996) Para regular las descargas de aguas residuales txicas hay que
utilizar datos de ensayos de toxicidad hechos con organismos vivos y confiar en estos
datos, adems de efectuar estudios detallados de las caractersticas fsicas y qumicas de los
contaminantes y de los cambios que ocurren despus de su descarga en el medio. Cuando se
puedan describir con precisin en trminos qumicos y fsicos los componentes txicos de
un contaminante y se disponga de tcnicas analticas pertinentes y de suficiente
informacin acerca de la toxicidad de esos componentes para los organismos acuticos, se
podrn establecer normas para tales contaminantes en valores numricos para los
componentes txicos (FAO, 1981). Los bioensayos de toxicidad con agentes contaminantes
en organismos vivos bajo condiciones de laboratorio, se han incrementado en estos ltimos

tiempos debido a la brevedad con que se obtiene la informacin sobre las dosis letales y
subletales (CL50) que afectan negativamente organismos vivos en los ambientes marinos,
estuarinos y dulceacucolas .

Segn Palacios y Pereira (1997) El uso de bioensayos para la evaluacin de toxicidad de

sustancias liberadas al medio a travs de efluentes, ha llevado a la utilizacin de
biomonitores propios de los ambientes evaluados, lo cual favorece indirectamente la
preservacin de la biodiversidad local. Sin embargo, la variabilidad en la aplicacin de las
tcnicas experimentales para el mantenimiento de organismos silvestres afecta la
interpretacin y comparacin de los resultados entre laboratorios, por lo que se hace
necesario desarrollar metodologas estandarizadas para establecer condiciones controladas.

Segn Lewontin, (1974) Utilizar organismos provenientes directamente del hbitat natural
puede distorsionar los resultados obtenidos por fuentes de variabilidad no previstas, como
nutricin, dinmica de la poblacin, estrs por depredacin, etc. Estas variables pueden ser
controladas o eliminadas con las poblaciones de laboratorio; adems, el entrecruzamiento
consanguneo que ocurre a lo largo del tiempo en esas poblaciones, resulta en una
considerable reduccin de la variabilidad gentica.

Segn Reish y Oshida, (1987) Los bioensayos, o pruebas de toxicidad son experimentos
que miden el efecto de uno o ms contaminantes en una o ms especies

Segn FAO, (1981). Se entiende por bioensayo un ensayo en que un tejido, organismo o
grupo de organismos vivos se usan como reactivo para determinar la potencia de cualquier
sustancia fisiolgicamente activa cuya actividad se desconoce

Segn Esclaps, (1999) permiten evaluar el grado de toxicidad de una sustancia qumica,
un efluente, un cuerpo de agua, etc., empleando organismos vivos

Segn Castillo (2004) En el campo de la toxicologa y la ecotoxicologia es necesario

determinar el efecto que produce uno o varios compuestos qumicos (presuntamente
txicos) a los individuos de una determinada especie; as como su capacidad de
acumulacin en los tejidos vivos y, en general, su comportamiento en el comportamiento
bitico del ecosistema. Los experimentos diseados para este fin son los denominados
bioensayos. La FAO define el termino bioensayo como: tests en los cuales un tejido
vivo, organismo o grupo de organismos, se usan como reactivos para la determinacin de la
potencia de alguna substancia activa fisiolgicamente.

Este tipo de experimentos se puede utilizar para determinar la toxicidad de contaminantes

para diferentes especies de organismo, registrando la mortalidad que producen, u otros
efectos no letales (subletales) que ponen en peligro la supervivencia de los individuos o de
las poblaciones en el medio natural, como por ejemplo efectos sobre el comportamiento, la
reproduccin o el metabolismo.

En un sentido ms amplio, los bioensayos incluyen tambin tests de acumulacin de los

txicos en los organismos, diferencindose entre las diferentes vas de entrada de los
xenobiticos. Mientras que los animales terrestres acumulan contaminantes principalmente
a travs del alimento, en el medio acutico se pueden distinguir tres procesos bien
diferenciados: bioconcentracin, bioacumulacin y biomagnificacin.

La bioconcentracin es el proceso por el cual los organismos, especialmente los acuticos,

pueden absorber y concentrar sustancias, como los plaguicidas, directamente del medio
(agua) que les rodea, a travs de su superficie respiratoria y de su piel. Cuando este proceso
considera, adems de la absorcin directa del medio, la absorcin de las sustancias en el
tracto digestivo a partir de los alimentos se conoce como bioacumulacin.
Estos procesos ocurren cuando un organismo absorbe una cantidad de sustancia mayor a la
que puede eliminar y por ello la sustancia se acumula dentro de su cuerpo.
El potencial de bioconcentracin o bioacumulacin de una sustancia se puede estimar a
partir de su coeficiente de particin octanol/agua (Kow), el cual nos indica la capacidad de
una sustancia de disolverse en la grasa y, por lo tanto, de almacenarse en el tejido adiposo
de los organismos. Tambin puede medirse directamente a travs del factor de
bioconcentracin (BCF o Bioconcentration Factor), el cual es la cifra que expresa la
relacin entre la concentracin de la sustancia en un organismo y la concentracin de la
misma en el ambiente. Se calcula dividiendo la concentracin en los tejidos entre la
concentracin de exposicin o en el medio circundante. De esta manera, un BCF de 1000

significa que el organismo concentra el producto hasta un valor mil veces superior al del
ambiente.
La bioacumulacin es importante porque nos indica las posibilidades de que las sustancias
se transfieran a lo largo de la cadena alimenticia (biomagnificacin).
Aunque la comida es la principal va de entrada de contaminantes en las especies terrestres,
en la mayora de los organismos acuticos predominan los procesos de bioconcentracin.
Los bioensayos utilizados en ecotoxicologia acutica se clasifican, en funcin de su
duracin y del mtodo que se emplea para aadir el toxico al agua, de la siguiente manera:
Test a corto plazo: El periodo de tiempo oscila entre 48 y 96 horas y normalmente
no se suministra comida a los organismos de experimentacin; la gran ventaja de
este tipo de bioensayos es la rapidez de los resultados.
Test a largo plazo: Su duracin oscila entre 7 y uno o varios meses; la ventaja que
presenta frente a los anteriores es su mayor fiabilidad.
Test esttico: Son bioensayos generalmente de corta duracin en los que los
organismos estn durante todo el periodo de experimentacin en el mismo medio.
Test de renovacin o esttico con renovacin: En este tipo de bioensayo el medio
se renueva peridicamente.
Test de flujo: Es el ms sofisticado, ya que el medio se va renovando
continuamente mediante sistemas de circulacin y dosificacin automtica.

Para valorar la concentracin de bioconcentracin que posee un compuesto se utiliza el

Factor de Bioconcentracin (BCF), que se define con el cociente entre la concentracin de

compuesto en un organismo determinado (C0) y su concentracin en el agua (C a), en

condiciones de equilibrio:

Este parmetro toxicolgico es de primera importancia en los estudios sobre la peligrosidad

de un determinado compuesto para la vida. Puede determinarse experimentalmente
mediante ensayos largos, caros y que asumen que la cintica de las reacciones de entrada y
depuracin del contaminante es de primer orden. Asimismo, se ha determinado
experimentalmente que las reacciones de depuracin de varios compuestos, para peces,
responden en las etapas iniciales a cinticas de segundo orden. Dicho factor tambin puede
deducirse a partir de algunas propiedades del compuesto qumico en cuestin, tales como su
coeficiente de particin octanol/agua (Kow) y su solubilidad en agua (Sw).

La capacidad para bioconcentrarse de un plaguicida se ve afectada tambin por los factores

que influyen en la calidad del agua (temperatura, pH, salinidad, dureza y oxigeno disuelto),
as como por las caractersticas biolgicas propias de la especie expuesta (sexo, talla,
contenido en lpidos, tasa de crecimiento, actividad fisiolgica y estado nutricional). Por lo
tanto, todos estos factores debern tenerse en cuenta a la hora de disear un bioensayo para
la determinacin del Factor de Bioconcentracin de un compuesto en un ser vivo.
Diferentes organismos internacionales tales como la PECD, la ASTM o la US EPA han
emitido una serie de recomendaciones para la realizacin de este tipo de ensayos con el fin
de conseguir que los resultados de estos sean comparables, es decir, una estandarizacin de
los parmetros que se obtengan. (burnison, 1998). Esta es una tarea ardua debido a la
complejidad de los ensayos como consecuencia de las variables que intervienen. En
general, las recomendaciones van encaminadas a la definicin inequvoca de los diferentes

parmetros toxicocinticos y a evitar determinaciones errneas de estos como consciencia

del amplio rango de diferentes propiedades fsico qumicas que presentan los
contaminantes (solubilidades, polaridades), y el uso de carriers o vehculos para la
disolucin en el medio acutico de compuestos poco solubles.

Las conclusiones de todos estos estudios se basan, finalmente, en datos analticos que
muchas veces son de difcil obtencin. En casos concretos de contaminantes de difcil
determinacin analtica, se requieren procedimientos de anlisis fiables y suficientemente
validados que permitan la determinacin exacta de la concentracin de los compuestos
objeto de estudio en la dieta, en el medio o en los organismos, dependiendo del objetivo del
bioensayo.

Figura.1 Ejemplo de bioensayo

Pruebas de toxicidad

Segn Ramrez (2005) Una prueba de toxicidad tpica involucra un agente o estimulo (por
ejemplo, un pesticida de, un metal pesado o una muestra ambiental con contaminantes
qumicos), el cual se aplica a un organismo o grupo de organismos (por ejemplo, un cultivo
bacterial o de un alga, animales, o plantas) al que denominaremos genricamente sujeto,
sobre el que se evala una cierta respuesta preseleccionada. La magnitud del estimulo o
dosis puede medirse como un peso, un volumen o una concentracin.
La respuesta del sujeto se valora mediante la cuantificacin final de alguna caracterstica
(peso del cuerpo, pero del hgado, ritmo cardiaco, etc.), el cambio de ella (aumento en el
peso corporal, disminucin en la presin sangunea) o por la ocurrencia o no de un
determinado fenmeno (muerte, inhibicin del crecimiento, una contraccin muscular, etc).
Partiendo de la base de que la magnitud o la frecuencia de la respuesta dependern de la
dosis aplicada, las pruebas de toxicidad suelen disearse utilizando distintas dosis. La
informacin obtenida de este tipo de ensayos permite la cuantificacin de la relacin entre
las dos variables (dosis y respuesta), caracterizando toxicolgica o ecotoxicolgicamente al
compuesto. Normalmente, las pruebas de toxicidad se disean para comparar o estimar la
potencia de un agente con relacin a una preparacin estndar o control.

Es importante destacar que la respuesta a una dosis en particular se ver afectada en mayor
o menos medida por factores no controlados durante el experimento.

Toxicidad Aguda

Segn Palacios, M. y Pereira (1997) La toxicidad aguda tiene por objeto determinar los
efectos de una dosis nica y muy elevada de una sustancia. Usualmente, el punto final del
estudio es la muerte del animal y la toxicidad aguda se expresa por la dosis letal 50, que
viene a representar ms o menos la dosis de la sustancia que produce la muerte en el 50%
de los animales.
La observacin de los animales se lleva a cabo despus de la administracin de la sustancia
y dura hasta 14 das, despus de los cuales los animales son sacrificados y autopsiados. En
general, el test se realiza con 5 grupos de 10 animales de cada sexo, aunque existen algunos
mtodos abreviados que intentan reducir el nmero de animales a sacrificar.
La determinacin de la DL50 se suele llevar a cabo en rata y ratn por al menos dos vas de
administracin entre las cinco posibles (i.v., i.m. ip. s.c. y oral). En el perro y otros
animales de tamao parecido, el punto final del estudio no suele ser la muerte del animal,
sino la determinacin de la dosis que produce unos severos efectos adversos

La experimentacin a concentraciones subletales se llevan a cabo con exposiciones

crnicas de duracin mucho ms prolongadas que las exposiciones agudas y las ms usadas
son las siguientes:

Pruebas de ciclo vital - En esta prueba todos los estadios del ciclo vital son expuestos al
agente txico. La prueba se inicia con los huevos o etapas embrionarias tempranas y se
exponen hasta la madurez, la ovodeposicin y se contina hasta que la progenie tiene 30
das de edad.
Pruebas de ciclo parcial - Son similares a la prueba crnica anterior, pero se inicia con
juveniles y se contina hasta que la progenie cumple 30 das de edad. Se usa con especies
que requieren perodos prolongados para madurar.
Pruebas de embrin-larvas - Se observa el efecto del txico sobre estos dos estadios de
desarrollo.
Prueba de velocidad de respiracin - Se mide el efecto del txico sobre la velocidad de
respiracin en un experimento de flujo continuo.
En base a experimentos a concentraciones subletales, se identifican los siguientes
parmetros:

La concentracin ms alta que no produce efectos sobre el crecimiento,

reproduccin, sobrevivencia del pez de prueba, xito de la eclosin y crecimiento de

la progenie
La concentracin ms baja que afecta cualquiera de las variables fisiolgicas
anteriores.

Al rango entre los dos valores se le conoce como la Concentracin Mxima Aceptable del
Txico o CMAT.
Toxicidad Crnica
Segn Esclaps, (1999) Estiman la concentracin efecto media (CE50), la cual es la
concentracin de la sustancia de prueba que causa un efecto al 50% de la poblacin
experimental, al cabo de un tiempo determinado; depende del estado de vida considerado o

del ciclo de vida del organismo empleado. Alternativamente, un ensayo definitivo puede
utilizarse para estimar el tiempo requerido para producir un efecto al 50% de los
organismos (TE50), a una concentracin especfica
Organismo de Prueba.
La eleccin de un organismo de prueba adecuado para un Bioensayo depende del efecto
que se desea evaluar y de las caractersticas del organismo, por ejemplo, un canario es un
organismo adecuado de un bioensayo para detectar gases txicos o falta de oxgeno en una
mina, porque se tiene el antecedente de su uso para estos fines, los mineros entraban con un
canario y si el canario mora, por ser ms sensible, ellos tenan la oportunidad de salir y no
correr la misma suerte. Otros ejemplos de organismos de prueba son, el uso de cerdos para
detectar y colectar trufas, perros para detectar explosivos y drogas, gametos de erizo de mar
para detectar eco toxicidad en agua de mar, Euglena gracilis para detectar niveles de
vitamina B12.

Lo anterior es til para asegurarse que la respuesta de una poblacin expuesta a cierto
agente txico se deba al efecto de ste y no a variaciones tanto de la sensibilidad de los
organismos como de fallas operacionales en la aplicacin del mtodo.

Los Organismos de prueba pueden ser:

Organismos criados en Laboratorio

Organismos colectados en campo.

Tabla.1 Principales ventajas y desventajas asociadas con las pruebas de toxicidad en el
laboratorio y los estudios de campo

Tipo

Ventajas

Desventajas

Disponibilidad de

Deficiencia de realismo

metodologas estandarizadas
Laboratorio

Comparacin de especies de

Incapacidad de predecir

diferentes niveles trficos

efectos bajo condiciones de

campo

Posibilidad de utilizar las

Aplicable solo en especies

especies ms sensibles

probadas

Los resultados pueden

Incapacidad de aislar los

correlacionarse con los datos

factores causantes

fsico-qumicos
Campo
Proporciona evidencia

No utilizable para pruebas de

incuestionable del deterioro

hiptesis

Indica los contaminantes

responsables de la afectacin

En general, es preferible utilizar organismos criados en el laboratorio en vez de los

recolectados en el campo porque los exmenes estandarizados requieren de un
abastecimiento siempre disponible de organismos en buena salud provenientes de cultivos
de condiciones conocidas y constantes. Los bioensayos hechos en el laboratorio usando
organismos recolectados en el campo han sido menos satisfactorios, con muy pocas
excepciones. Los organismos recolectados en el campo son ms satisfactorios cuando el
laboratorio est cerca al lugar de recoleccin y el abastecimiento de agua desde all est

siempre disponible, como es el caso de nuestro curso que cuenta con un laboratorio que
provee esas condiciones.

Seleccin de los Organismos para el Bioensayo

Segn Mason (1984) resume las caractersticas que debe poseer un organismo para que sea
adecuado en la ejecucin de bioensayos, en los siguientes puntos:
El organismo debe ser sensible a las sustancias analizadas.
Debe pertenecer al ecosistema acutico que se est evaluando.
Su distribucin debe ser amplia y su disponibilidad en cantidades suficientes tanto a
nivel local como nacional.
Debe poder cultivarse fcilmente en el laboratorio
Debe ser compatible con las tcnicas de bioensayos.
Los organismos pequeos y de corto ciclo de vida son preferibles. Los invertebrados son
ms utilizados, pero los peces se usan a menudo por su importancia.

Segn Esclaps, (1999)

Representativo de ambientes tropicales, de amplia distribucin en el pas o de
importancia comercial.
Disponibilidad, ser fciles de encontrar, en nmero suficiente y colectarse sin
dificultad. Se debe tomar en cuenta problemas con el transporte.
Con un tamao suficientemente pequeo para poseer los necesarios por experiencia
y que sean representativos para los estudios estadsticos.
De fcil cultivo, lo que garantiza un adecuado suministro de organismos en los
ensayos y el establecimiento con exactitud de la edad o estado de desarrollo. La

edad es de suma importancia en los bioensayos, ya que la sensibilidad puede variar

significativamente durante su desarrollo.
Especies con gran susceptibilidad a exposiciones con sustancias xenobiticas.
Garantizando cubrir el peor de los escenarios, y proporcionando resultados que
ofrecen una alta proteccin al resto de la cadena trfica.
Segn Henry (1988) la seleccin de organismos para bioensayos debe basarse en:

Los objetivos del programa toxicolgico

La informacin disponible sobre los posibles organismos

Las caractersticas de las especies

Las instalaciones y equipos de laboratorio

El nivel de capacitacin de los tcnicos

Tabla.2 Adaptabilidad de los organismos como especies para bioensayos

Organismos para
bioensayos

Adaptabilidad del organismo

Comnmente
utilizado como un
organismos para
bioensayos

Recoleccin de campo

1. Algas

Cultivo de
laboratorio
Excelente

Muy difcil de recolectar

cultivo puro

Si

2. Protozoos

Excelente

Muy difcil de recolectar

cultivo puro

Muy limitado

3. Invertebrados
a. Planctnicos

1. Rotferos

Bueno

Muy difcil de recolectar

cultivo puro

Limitado

2. Cladceros

Excelente

Si

3. Coppodos

Mediano

4. Camarones
b. Bnticos
1. Anlidos
2. Insectos
3. Moluscos
4. Crustceos
4. Peces

Bueno

Alta tasa de mortandad

despus de la recoleccin de
campo
Alta tasa de mortandad
despus de la recoleccin de
campo
Bueno
Mediano
Mediano
Mediano
Mediano
Alta tasa de mortandad
despus de la recoleccin de
campo

Limitado
Si
Si

Mediano
Bajo
Bueno
Bajo
Excelente

Limitado

Si

Si

Laboratorio de Bioensayos
Segn Gutirrez (2009) El Laboratorio de Bioensayos se crea con la finalidad de
desarrollar, estandarizar y aplicar bioensayos en evaluaciones eco toxicolgicas de
sustancias qumicas puras o complejas, de toxicidad en sedimentos marinos o continentales
y monitoreo de efectos txicos de efluentes de residuos lquidos industriales y domsticos,
que cubran las necesidades de evaluacin ambiental de la empresa privada y el sector
pblico a nivel regional y nacional.

Los Bioensayos de toxicidad son una herramienta intensamente utilizada en pases

desarrollados, con el objeto de evaluar en forma efectiva y eficiente los efectos txicos
agudos y crnicos de la contaminacin en los organismos vivos. En la prctica, esta tcnica
cuantifica la relacin concentracin-efecto de compuestos qumicos conocidos o mezclas
complejas, por medio de respuestas biolgicas medidas bajo condiciones controladas y
estandarizadas Las pruebas de toxicidad son una herramienta til para determinar el grado
de toxicidad de los contaminantes y evaluar el riesgo de los ecosistemas y la poblacin
expuestos a estas sustancias qumicas. Se utilizan organismos de prueba animales o
vegetales para evaluar la toxicidad en muestras ambientales (agua, aire, suelo y
sedimentos).
El laboratorio de Bioensayos se est fortaleciendo para dar respuesta a uno de los
principales retos ambientales mundiales: La reduccin de contaminantes prioritarios que
tienen efectos, a nivel global, en la salud de los ecosistemas y poblacin, y que contribuyen
al cambio climtico.
En los ecosistemas acuticos se ha incrementado drsticamente la contaminacin, debido a
que son utilizados como vertederos de todas las descargas de desechos industriales y
residuos resultantes de un sinnmero de actividades del hombre, lo que afecta en gran
medida a las comunidades que conforman dichos ecosistemas.
Por esa razn, es necesario cuantificar el dao causado a los ecosistemas empleando
tcnicas adecuadas y precisas que permitan evaluar las condiciones en las que se
encuentran: las pruebas de bioensayos son consideradas como una herramienta til en la
investigacin de este tipo de problemas.

Estas pruebas se traducen tanto en la descripcin y presencia de un organismo, como en la

determinacin de los lmites de tolerancia medios (TLM50), denominada tambin
concentracin letal media (CL50), con lo cual se puede establecer la peligrosidad de una
sustancia txica vertida al medio ambiente acutico.

En Mxico, se han establecido normas cuyos criterios permiten determinar los ndices de
toxicidad que se encuentren en el medio ambiente acutico y que ocasionan una afectacin
en la vida de los organismos a corto, largo y mediano plazo.
Los bioensayos son por definicin, pruebas en las que se usan organismos vivos para
detectar o medir la presencia y efectos de una o ms substancias txicas, as como
determinar el lmite de tolerancia de dichas substancias con respecto a los organismos.

Los ensayos biolgicos son herramientas de diagnstico adecuadas para determinar el

efecto de agentes fsicos y qumicos sobre organismos de prueba bajo condiciones
experimentales especficas y controladas. Los propsitos de la realizacin de los bioensayos
son:

Evaluar la toxicidad qumica de los desechos industriales que afecten la vida

acutica.
Determinar los efectos de los contaminantes en organismos acuticos dentro de su
medio natural o en condiciones controladas de laboratorio.

El laboratorio para ensayos biolgicos deber contar con equipamiento apropiado

para realizar este tipo de pruebas.

Figura 2
Dentro de los requerimientos bsicos y condiciones deseables para la realizacin de tareas,
se considera imprescindible contar con:

Abundante suministro de agua de calidad adecuada para cultivo, mantenimiento y

realizacin de pruebas.
Infraestructura de iluminacin adecuada para los organismos, con reas de trabajo y

de mantenimiento de cultivos con temperatura ambiente estable de 202C.

Cada bioensayo requiere materiales, reactivos y equipos propios, segn el tipo que
se trate, sin embargo existen algunos que son comunes como los que se mencionan a
continuacin.

Figura 3
Reactivos

Se recomienda utilizar reactivos que cumplan los requerimientos establecidos

por la American Chemical Society para reactivos analticos, grado ACS.

Los reactivos empleados como txicos de referencia debern ser de uso
exclusivo para la preparacin de una solucin patrn, tener un grado de pureza

del 99% y preferentemente contar con certificado.

La mayora de las pruebas de toxicidad y el mantenimiento de cultivos requiere

de agua Tipo I (APHA, 1998).

Equipos:
Se deber contar necesariamente con los siguientes equipos:

Balanza analtica.
Autoclave o sistema de esterilizacin
Medidor de pH (opcional, se puede reemplazar con tiras indicadoras).
Medidor de oxgeno disuelto.
Medidor de conductividad.
Microscopio ptico con aumento de 100x.
Material biolgico.
Organismos de prueba.
Bombas para acuario.
Controlador de temperatura ambiente (equipo de aire acondicionado u otro).
Potencimetro.
Tituladores para dureza y alcalinidad.

Figura.4 Balanza

analtica

Figura.7

Medidor

de pH

Figura.5 Medidor de conductividad

Figura.6 Bombas para acuario

Materiales bsicos

Metales:
Los

ms

utilizados

son

el

hierro y sus aleaciones, cobre, nquel, platino, plata y plomo. Con estos metales
se fabrican soportes, pinzas, anillos, trpodes, tringulos, rejillas, sacacorchos,

recipientes para agua, crisoles, esptulas, mecheros y electrodos, entre otros.

Porcelana: Se fabrican cpsulas, crisoles, navecillas, esptulas, embudos,

tringulos, mortero y piln.

Madera: Gradillas, soportes de pie para tubos y embudos.
Corcho: Se usa principalmente en la elaboracin de tapones.

Caucho: Para fabricar mangueras y tapones.

Asbesto: Se emplea en la fabricacin de mallas, guantes y como aislante

trmico.
Tefln: Utilizado en la fabricacin de mangueras, vlvulas, llaves para buretas,

recipientes, empaques entre otros.

Vidrio: Es uno de los materiales ms usados en el laboratorio. Aqul que se
destina a la fabricacin de equipo de laboratorio debe ser resistente a los cidos
y a los lcalis y responder a determinadas exigencias trmicas y mecnicas. Aqu
tenemos a los Beakers, tubo de ensayos, embudo de separacin, embudo
Buchner, baln de destilacin, baln volumtrico, probeta, erlenmeyer, pipetas,
buretas, probetas, luna de reloj, agitador.

Mtodos de colecta de los organismos de ensayo

Aspectos a considerar en la colecta de los organismos

El organismo de prueba puede ser de una fuente natural o provenir de un laboratorio

certificado.

No deben llevar plantas, desechos, mudas de otros organismos, arena o grava ya que

pueden daar a los organismos.

Al colectar el organismo, se debe transferir directamente a los depsitos

previamente preparados con agua del lugar de colecta, para ser transportados.
No se deben colectar muchas especies al mismo tiempo.

Se pueden emplear diferentes artes de captura (atarraya, chinchorro, red de

plancton, etc.), dependiendo de la regin de muestreo y del tipo de organismos que va a

ser capturado.

No se debe dejar mucho tiempo fuera del agua a los organismos.

La temperatura, el pH, oxgeno disuelto (OD), alcalinidad, dureza y salinidad, deben

ser determinados en el sitio de colecta para indicar la calidad del agua en la que los
organismos deben ser colocados en el laboratorio.

Si los organismos son cultivados en el laboratorio estos se manipularn de acuerdo a

lo establecido por la tcnica para su cultivo y eclosin.

Transporte de los organismos de prueba

Durante su transporte los organismos deben vigilarse cuidadosamente evitando que

se presionen unos contra otros, para que no se maltraten.

Si van a ser transportados a largas distancias por barco se les debe acomodar en

cajas donde puedan ser manejados.

Si su transporte es en camin se deben acomodar en depsitos grandes,

suministrndoles agua del rea donde fueron colectados, airendola y refrescndola en

verano y calentndola en invierno, con el propsito de mantenerla a la temperatura
adecuada.

Aclimatacin y alimentacin
El periodo de aclimatacin debe estar determinado por el tipo de organismo. La
adaptacin ser paulatina para evitar la muerte del organismo prueba. Durante este

perodo, deben hacerse inspecciones frecuentes de la calidad del agua y para determinar
alguna conducta anormal, enfermedades, cambios en color o dificultad para comer.

Tratamiento de enfermedades

Para reducir las enfermedades y, por consiguiente, la mortalidad, se deben

proporcionar condiciones favorables de oxgeno y mantener una temperatura adecuada.

Durante la aclimatacin de los organismos, se debe observar si la especie presenta

anomalas en su comportamiento, por lo que se proceder a realizar un anlisis

fisiolgico pos-mortem, sobre todo en especies capturadas en el medio natural, como lo
es en ostin, marn, peces etc.

Empacado de peces

Descartar los especmenes daados. Lavar individualmente cada espcimen en agua

de mar o agua dulce natural y limpia (segn sean especies marinas o de agua dulce).

Evitar usar agua del grifo, ya que pueden contener metales.

Pesar y medir los organismos.

Colocar cada espcimen en una bolsa de plstico o bien en un papel de aluminio y

extraer el aire. Cerciorarse de que las espinas de las aletas y las partes espinosas no
perforen la bolsa de plstico y/o papel de aluminio.

Colocar la bolsa de plstico y/o papel de aluminio que contiene el animal en otra

bolsa de plstico y marcarle con una etiqueta. Enrollarla para extraer el aire y poner

una banda elstica alrededor de la doble bolsa. De esta forma la etiqueta se

mantendr seca.
Colocar todas las bolsas que contienen especmenes de la misma muestra en una gran
bolsa de plstico o en una caja, con una etiqueta interna, trasladar en un congelador.

Figura.8 Empacado de un pez

Manual de laboratorio de Biotoxicologia

NORMAS DE SEGURIDAD PARA LA UTILIZACIN DEL ESPACIO EN
PRCTICAS DE LABORATORIO

Use bata de laboratorio para cada prctica y no utilice calzado destapado

Use guantes, tapaboca, lentes de proteccin, y mscara con filtros, cuando se

requieran.

No pipetee con la boca, use un pipeteado

No se lleve los dedos a la boca, ojos o nariz, ni respire directamente sobre ningn

reactivo pues sus vapores pueden ser txicos

No ingiera alimentos o bebidas en el laboratorio

No use durante las prcticas anillos, cadenas, prendedores, pulseras o collares

No deposite alimentos en las neveras, ni consuma el hielo que all se produce

No se admiten en el laboratorio personas que no estn capacitadas.

No ubique bolsos, tulas, maletines o paquetes, en los lugares de trabajo

Figura.9 Adecuada vestimenta para laboratorio

UTILIZACIN DE REACTIVOS

Todo reactivo preparado debe rotularse con el nombre del reactivo, la persona que lo

prepar y la fecha de preparacin

No arroje por los sumideros cidos, bases o algn otro reactivo, por favor

depostelos en los recipientes de desecho

Evite derrames de sustancias en las mesas de trabajo, as se previene que algn

compaero se queme la piel o se deteriore la ropa.

No arroje al piso ningn reactivo

No arroje al piso papeles u otros elementos. Por favor utilice el recipiente para la

basura.

Figura.10 Simbologa para reactivos qumicos

Especie para el bioensayo: Bardos Rosado (Puntius conchonius) (Hamilton, 1822)

Entre los Barbos, uno de los gneros por excelencia dentro de los acuarios de agua dulce, se
encuentra el Barbo rosado, un vistoso pez gregario y simptico (aunque de gran tamao)
muy mantenido por los acuarifilos sin experiencia debido a su gran resistencia y
adaptabilidad a todo tipo de condiciones acuticas y de mantenimiento, siendo, adems,
uno de los menos agresivos.

Presentan el cuerpo fuertemente comprimido lateralmente, una boca algo ms grande que
otros barbos, ojos de medio tamao, escamas bien visibles, grandes y brillantes y aletas
cortas, rgidas y fuertes. Disponen de msculos bastante desarrollados para nadar con
rapidez a la hora de alimentarse o huir de cualquier peligro, llegando a saltar hasta 40 cm
por encima del agua. Mediante cra selectiva se ha obtenido una variedad denominada velo
que dispone de aletas desproporcionadas, pudiendo ser la caudal ms larga que el propio
cuerpo del pez. Su coloracin fuera de la poca de cra es poco llamativa y bsicamente
consiste en un marrn levemente anaranjado o rosado por todo el cuerpo (aletas incluidas)
presentando un ocelo negro a cada lado del pednculo caudal y una mancha negra en la
punta superior de la aleta dorsal, algo que slo presentan los machos. El dimorfismo sexual
queda patente por el estilizado y menor cuerpo de los machos respecto a las hembras, que
suelen ser algo ms grandes y con la zona ventral levemente abultada. Como ocurre con el
resto de Barbos, durante la freza exhiben una vistosa lbrea que en los machos consiste en
un intenso color rojo rosado por todo el cuerpo, mientras que las hembras desarrollan un
color naranja rojizo muy vistoso. Fuera de la poca de freza ambos sexos presentan el
mismo color. Pueden llegar a medir 20 cm y sobrepasar los 10 aos de vida.
No son nada exigentes con las condiciones de mantenimiento ni la composicin del agua,
adaptndose sin ninguna dificultad a todo tipo de aguas y resistiendo muy bien los errores
comunes de cuidado de algunos principiantes y las infecciones parasitrias. El acuario debe
tener un volumen mnimo de 200 litros para albergar a unos 6 peces adultos. La decoracin
debe consistir en abundantes plantas sumergidas, troncos y piedras para facilitarles
escondites, as como un sustrato oscuro y una luz tnue que refuerza los colores de sus
lbreas. El movimiento intenso y la aireacin del agua son condiciones muy beneficiosas
para ellos. El pH puede estar entre 5,5 y 9,5, la dureza entre 0 y 40 dGH y la temperatura

puede variar entre 15 y 30 C, siendo muy aconsejable filtrar con turba para mantener el
agua cida y blanda, que adems estimula su reproduccin. Soportan hasta 200 ppm de
nitrato y hasta 5 de nitrito y amonio pero no es nada aconsejable mantenerlos bajo estas
concentraciones para evitar que, a la larga, puedan enfermar gravemente al debilitarse su
sietema immunitario.
Son de los Barbos menos agresivos siempre que se mantengan en amplios grupos y en
acuarios de gran tamao. Si se mantienen pocos ejemplares o en acuarios muy pequeos la
emprenden a mordiscos contra todos sus compaeros mostrando especial preferencia por
las aletas de velo y las filiformes. No es tampoco buena idea su asociacin con peces
demasiado lentos o tmidos ya que, aunque raramente los Barbos los atacan, la
hiperactividad de estos puede estresarlos mucho haciendo que dejen de alimentarse. Peces
demasiado pequeos como los Rasboras Pigmeos u otros que puedan entrar por su boca son
devorados. Pueden ser asociados con otros Barbos, Algunos tetras temperamentales, peces
de fondo activos y algun Cclido de medio tamao y no excesivamente timido que pueda
mantenerlos a Raya.

Figura11.Bardos Rosados
Ecologa
Viven en densos cardmenes en ros, arroyos y canales que atraviesan los corazones de las
selvas del Sureste Asitico, principalmente en aquellos que cuentan con abundante
vegetacin sumergida que les proporciona abundantes escondites de sus depredadores,
especialmente de las aves acuticas.
Alimentacin
No presentan ningun problema para alimentarse en el acuario,
aceptando escamas, grnulos, vivos, congelados y liofilizados, siendo
muy buscadas por estos peces las Artemia vivas y las larvas de
mosquito, tambien vivas. Tambin se comen la fruta, las verduras y el
pan llegando a aceptar incluso trocitos de chocolate. Una proporcin de
50/50 entre alimentos proteicos (escamas y grnulos genricos, presas
vivas, ...) y vegetales (Guisantes, escamas vegetales, pastillas de
Spirulina) los mantiene sanos y radiantes durante toda su vida.

PLOMO
Tabla 3. Normas y regulaciones para el plomo
Agencia

Medio

Nivel

Comentarios

CDC

Sangre

10 g/dL

Asesora; nivel para manejo individual

OSHA

Sangre

40 g/dL

Regulacin; causa para notificacin escrita y

60 g/dL

examen mdico
Regulacin; causa para la remocin de la fuente
de exposicin por razones mdicas

ACGIH

Sangre

30 g/dL

Asesora; indica la exposicin en el Valor

Umbral Lmite (TLV)

OSHA

Aire (lugar de

50 g/m

Regulacin; Lmite de Exposicin Permisible

trabajo)

30 g/m

(PEL) de 8 horas en promedio (Industria

general)
Nivel de accin

CDC/NIOSH

Aire (lugar de

100 g/m

Lmite de Exposicin Recomendado, REL (no-

trabajo)
ACGIH

ejecutable)

Aire (lugar de

150 g/m

Gua Valor Umbral Lmite, TLV/TWA Tiempo

trabajo)

50 g/m

Promedio Ponderado, para el arsenato de

plomo
Gua TLV/TWA para otras formas de plomo

EPA

Aire

0.15 g/m

(ambiente)

EPA

Regulacin; Estndar Nacional de Calidad de

Aire Ambiental, NAAQS; promedio de 3 meses

Suelo

400 ppm

Gua, anlisis de plomo en suelo; requerimiento

(residencial)

(reas de

aplicable solamente a los proyectos financiados

juego)

con fondos federales (40 CFR Parte 745, 2001)

1200 ppm
(no juego)
EPA

Agua (de

15 g/L

Nivel de accin para suministros pblicos

bebida)

0 g/L

Objetivo No-ejecutable; Objetivo de Nivel

FDA

Comida

Varios

Mximo Contaminante, MCLG

Niveles de accin para varios tipos de comida;
por ejemplo las latas de comida que tenan
soldadura con plomo y que ya estn prohibidas.

CPSC

Pintura

600 ppm

Regulacin; por peso seco. Hay un nuevo la

(0.06%)

norma de plomo para la joyera infantil.

Tabla.3

Mtodo

Para realizar la preparacin del laboratorio de Biotoxicologia, se requiri de los

siguientes pasos.
1. Se realiz

un inventario del Laboratorio de Biotoxicologia de la Facultad de

Oceanografa, Pesquera, Ciencias Alimentarias y Acuicultura.

acuarios de 30x30x60
3 pipetas de 5ml ,1ml, 0.1ml
1 pipeta roth de 0.1ml
1 bagueta
1bosa de alimento balanceado

Sal
Declorador
Verde de malaquita
Azul de metileno
Ch control
Leja poet

Probeta
Algodn
Lmpara de luz
Cilindro con tubos
Bolsa en fubus
2 termostatos de 30waireador
Aireador 220w_60hz
Boyu 60 l/min
2extenciones
2 aireadores de piedra 20L uno con
fusin y otro sin fusin
Bomba recirculante de agua

5 piedras de oxigenacin
Cinta
1termmetro de mano
3 filtros para airear

1 desarmador
5 baldes
Acuario de 30x30x30 con equipo
Acuario de 30x40x55con

separaciones
1 acuario de 60x30x30de vidrio

Figura.12 Equipo para bioensayo

2. Luego del realizar el inventario, se procedi a limpiar el laboratorio con escobas y

sacando el polvo de las mesas.
3. Se lav los acuarios con la ayuda de una esponja, seguidamente se sifone el
acuario, para la llegada de la especie a analizar.
Figura.13 Llegada de la especie a analizar

4.

Luego, se ech agua en

los

acuarios

ya

limpios,

seguidamente se hecho el declorador.

Figura.14 Llenado de los acuarios

5. Se limpio y ordeno los materiales del laboratorio para el inicio del bioensayo.

Figura.15 Llenado
e

implementacin

de

los acuarios

6. Preparacin de la muestra patrn

Para hacer el bioensayo agudo de 96h se va a trabajar con 6 acuarios de las siguientes
concentraciones (0, 0.01, 0.1, 1, 10,20) ppm de una solucin de plomo.

7. Realizar los clculos correspondientes para cada acuario considerando que la

solucin patrn
Clculos para cantidad de ml de cada concentracin
C1xV1=C2xV2
C1xV1=C2xV2

8.

Una vez concluido de haber agregado el reactivo del plomo se agregar una cierta
cantidad de peces por acuario.

Figura.16 Sacando peces del acuario inicial para transportarlos a cada acuario de diferente
concentracin de Arseniato de sodio

Figura.17 Peces colocadas en un recipiente

Figura.18 Ubicacin de 10 peces por acuario

9.

Anotar la hora de inicio y hacer el

control

de

importantes.

los

parmetros

ms

Figura.19 Medicin de pH

Figura.20 Medicin de la temperatura

Figura.21 verificando el grado de acidez

Figura.22 Sacando el pez muerto

Figura 23 Medicin de pH
en todos los acuarios

Interpretacin
Hubo una pequea cantidad de mortalidad debido a que eran unas concentracin
casi optimas.
Los peces estaban estresados debido al toxico diluido en el agua se noto por su
nado.

Conclusiones
Las cinco concentraciones (ppm) de nitrato de plomo, provocaron letalidad y anomalas a
nivel morfolgico si es que se utiliza en el desarrollo embrionario delos peces. Las
concentraciones de 0.5 ppm, 1 ppm y 3 ppm de nitrato de plomo son dosis letales (DL50),
mientras que las dosis de 0.1 ppm y 0.05 ppm son dosis subletales, demostrando que la
mortalidad est relacionada con las dosis aplicadas.. El mayor nmero de malformaciones
se presentaan en la dosis de 0,05 ppm(PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERIANA FACULTAD
DE ESTUDIOS AMBIENTALES Y RURALES CARRERA DE ECOLOGA Bogot D.C.),

explicando este comportamiento debido al tiempo de exposicin al compuesto, y porcentaje

de individuos vivos y muertos durante el desarrollo embrionario. Es probable que el nitrato
de plomo afecte rganos vitales. La mayora de las malformaciones producidas por las
concentraciones de nitrato de plomo.

Observaciones

Se vio que los acuarios estn en buenas condiciones, y aptas para la crianza de la

especie a investigar.
Se necesit abundante agua para llenar los acuarios.
Hubo mortalidad en la pescera despus del bioensayo.

Discusin

Los efectos txicos del nitrato de plomo se pueden evidenciar inicialmente en la mortalidad
de los peces en cada una de las concentraciones (ppm), siendo esta relacin directa, es
decir, que a mayor concentracin, mayor nmero de individuos muertos. Posiblemente, este
compuesto, afecte de manera irreversible algn rgano interno de los embriones, cuya
alteracin no se pueda observar macroscpicamente, y sea la causa de muerte. Las
malformaciones que presentan los embriones de trucha arcoris, son adquiridas durante la
embriognesis y repercuten en los estadios ms avanzados del desarrollo, causando
mortalidades variables en los alevines (Burgos, 1999), retardo del crecimiento parcial o
completo, o una alteracin funcional (Sadler, 1986). Los efectos teratognicos del nitrato de
plomo son innumerables, es tal su magnitud que debemos ver ms all de una alteracin a
nivel morfolgico, puesto que estn implicados procesos importantes a nivel molecular,
celular e histolgico que influyen en el desarrollo del embrin. Entre las principales
funciones biolgicas que posee el hierro, est el transporte y almacenamiento de oxgeno a
travs de la hemoglobina, la cual es inhibida por el plomo al interferir con varios pasos
enzimticos de la ruta del grupo hemo (Boccio, 2003). Especficamente, el plomo inhibe la
enzima ALAD (cido deltaminolevulnico deshidrasa), que debe convertir el ALA (cido
deltaminolevulnico) en porfobilingeno, y tambin inhibe la ferroquelatasa, la cual cataliza
la insercin del hierro en la protoporfirina IX, para formar la hemoglobina (Figura 21).

Como consecuencia de esto, se produce una disminucin de la produccin de glbulos rojos

(Bellot, SF) y por 46 tanto, la ruta del oxigeno se ve disminuida, razn que podra explicar
el retardo en el desarrollo enceflico (Microcefalia) de los embriones de Oncorhynchus
La alteracin del cido deltaminolevulnico (ALA) por accin del plomo en la sntesis de la
hemoglobina, explicara la hipoplasia enceflica, ya que esta enzima al estar localizada en
la membrana interna de la mitocondria (Medina et al., 2000) ocasionara daos en las
clulas del cerebro, interrumpindose as su desarrollo. 47 Las dosis elevadas de plomo
producen encefalopata.
Los encfalos presentan manifestaciones histopatolgicas semejantes a las descritas en la
encefalopata humana (OPS, 1979), y los efectos se pueden explicar atribuyndolos a
retardo del desarrollo enceflico (Michaelson, 1973 & Krigman et al., 1974 en OPS, 1979).
Se ha interpretado que estos resultados indican un retardo de la maduracin enceflica
(OPS, 1979). La microftalma identificada en los embriones de Salmon coho
(Oncorhynchus kisutch) y Salmon del atlntico (Salmo salar), al estar expuestos a los
antibiticos enrofloxacino y eritromicina, es causada por la induccin parcial del
mesnquima enceflico sobre la vescula ptica durante su desarrollo (Gonzlez, 2004). De
igual manera, la deficiencia de vitamina A provoca esta anomala en el ojo. (Lovell, 1998
en Gonzlez, 2004). El plomo al tener una accin toxica sobre la sntesis de hemoglobina,
afecta de manera directa los glbulos rojos, incrementando la fragilidad de la membrana
eritrocitaria y su posterior ruptura (Osorio et al., SF). Se sabe que el plomo altera las
paredes de los vasos sanguneos, de tal modo que se hacen ms permeables, y las fugas del
lquido causan edema (Chisolm, 1971en Child, 1985). Este sucedo, explicara las
hemorragias que presentaron algunos de los embriones de O. mykiss en la parte posterior
de la espina dorsal y saco vitelino. Se sabe que el calcio es un elemento esencial para la

formacin y funcionamiento de estructuras musculares y seas en desarrollo de los

organismos.
El plomo interfiere con el metabolismo del calcio, remplazndolo y comportndose como
un segundo mensajero intracelular, alterando la distribucin del mismo en los
compartimientos dentro de la clula (S.O.S, SF). Este comportamiento de competencia del
plomo con el calcio, puede explicar las alteraciones a nivel de columna que presentaron los
embriones 48 (escoliosis, cifosis y lordosis) al estar expuestos a las concentraciones de
nitrato de plomo. La vitamina C (cido ascrbico) es necesaria para el desarrollo del tejido
conectivo, hueso y cartlago, y en casos de deficiencia se produce una curvatura anormal de
la columna vertebral de los peces, caracterizada por escoliosis y lordosis en la trucha
arcoris (Gonzlez, 2004).
La deficiencia de magnesio en trucha arcoris provoca alteraciones que incluyen reduccin
de la tasa de crecimiento, curvatura de la columna vertebral y degeneracin de las fibras
musculares (Lovell, 1998 en Gonzlez, 2004). En cuanto a las anormalidades presentes en
las aletas caudales se pueden relacionar con las malformaciones de la espina dorsal, ya que
estos rganos estn conectados. Kassenar (1957 en Child, 1985) observ que el plomo
produce una interferencia a nivel de cadena alfa. Los disturbios a nivel cromosmico
podran explicar en parte la reabsorcin que ocurre en las clulas de las aletas caudales
mediante probables bloqueos enzimticos causados por los cambios genticos.
El plomo acta como mitgeno, estimula la proliferacin celular, activando la seal de
transduccin de la protena quinasa C (PCQ) (Repetto, et al., 2009), que es una enzima
dependiente del calcio vinculada con el crecimiento y la diferenciacin celular, y la
conservacin de la barrera hematoenceflica (Matte, 2003). Como consecuencia, se

produce aumento de la divisin celular e hiperplasia (Repetto, et al., 2009), con lo que se
explicara el aumento en el cristalino de los embriones.

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