PRCTICA N3:

AISALMIENTO DE BACTERIOFAGOS
OBJETIVO
Conocer el esquema de trabajo para aislar colifagos de agua de albaal (aguas estancadas
contaminadas).
Aislar bacterifagos (colifagos) y observacin de colifagos en la placa.
METODOLOGIA
1. Recoger la muestra en un depsito estril.
2. Procesamiento de la muestra.
a) Reposar por 15 minutos la muestra. En este tiempo se formara en la parte de superior el
sobre nadante y en la parte inferior se formara el sedimento.
b) Separacin del sobre nadante.
c) Filtrar con papel filtro de 45 m de dimetro.

RESULTADOS
El filtrado se realiza para retener cualquier partcula o bacteria que tengan un dimetro de 45
m a ms y por lo tanto pasaran las partculas o bacterias menores de 45 m de dimetro
y debido a esto solo pasaran los virus.

3. Siembra de Escherichia Coli e incubacin del colifago.

a) En un cultivo puro de Escherichia coli de 0.1 ml en el tubo N1 neferometro de Mac
farland.
b) Se hace la siembra por superficie en agar nutritivo.
c) Secar el excedente del lquido de cultivo en 35 C por cinco minutos y las bacterias se
quedan en el medio.
d) Inocular la muestra de 10 L .
e) Sacamos la muestra y sometemos a 35 C por cinco minutos.
f) Incubamos a 37 C por veinticuatro horas.
g) Realizamos la lectura correspondiente.

RESULTADOS
Prueba en positiva:
Hay presencia de placa ltica, por lo tanto hay una lisis bacteriana y es ah donde se ha
distribuido la bacteria de Escherichia coli.
El crecimiento es en toda la superficie, en los colifagos se observa una pelcula media cremosa
blanquecina.
Prueba negativa:
No hay presencia de colifagos por lo tanto no hay lisis bacteriana, no ha formado la placa ltica.
Se puede decir que en la muestra no ha sido la adecuada o tambin que no hay presencia de
colifagos.