Niveles de Bioseguridad en el laboratorio

El centro para el control y prevencin de enfermedades de los Estados

Unidos, especfica cuatro niveles de bioseguridad para el manejo de agentes
biolgicos, los cuales son conocidos como Niveles de bioseguridad del 1 al
4, la clasificacin de cada laboratorio identifica el riesgo biolgico que
representan para la salud los agentes que ah se manejan:

Nivel de Bioseguridad 1 (BSL-1)

Este nivel es adecuado para trabajos que involucran agentes que no
producen enfermedad en humanos adultos sanos, y que imponen un riesgo
potencial mnimo para el personal del laboratorio y el medio ambiente. El
acceso al laboratorio no es restringido y el trabajo se realiza por lo regular
en mesas estndar de laboratorio. El personal de laboratorio cuenta con una
capacitacin especfica acerca de los procedimientos realizados en el
laboratorio y es supervisado por un cientfico con capacitacin general en
microbiologa.
Las siguientes prcticas estndar y especiales, equipos de seguridad e
instalaciones se aplican a los agentes asignados al Nivel de Bioseguridad 1:

A. Prcticas Microbiolgicas Estndar

1. El acceso al laboratorio es limitado a criterio del director cuando se estn
llevando a cabo experimentos o trabajos con cultivos y especmenes.
2. Las personas se lavan las manos luego de manipular materiales viables,
luego de quitarse los guantes y antes de retirarse del laboratorio.
3. No est permitido comer, beber, fumar, manipular lentes de contacto,
maquillarse o almacenar alimentos para uso humano en reas de trabajo.
4. Est prohibido pipetear con la boca; se utilizan dispositivos pipeteadores
mecnicos.
5. Se instituyen polticas para el manejo seguro de objetos cortantes o
punzantes.
6. Todos los procedimientos se llevan a cabo con precaucin a fin de
minimizar la creacin de salpicaduras o aerosoles.
7. Las superficies de trabajo se descontaminan como mnimo una vez por
da y luego de todo derrame de material viable.
8. Todos los cultivos, stocks y otros desechos reglamentados se
descontaminan antes de ser desechados mediante un mtodo de
descontaminacin aprobado, como por ejemplo, mediante autoclave. Los
materiales que se deben descontaminar fuera del laboratorio inmediato
se embalan de conformidad con las normas locales, estatales y federales
aplicables antes de retirarlos del establecimiento.
9. Se debe colocar una seal de advertencia de riesgo biolgico en la
entrada del laboratorio cuando se encuentren presentes agentes
infecciosos. La seal debe incluir el nombre del agente o agentes en uso
y el nombre y nmero de telfono del investigador.
10. Se encuentra en vigencia un programa de control de roedores e
insectos.

B. Prcticas Especiales:
Ninguna.

C. Equipos de Seguridad (Barreras Primarias)

1. En general, no se requieren dispositivos o equipos de contencin o

equipamientos especiales, como gabinetes de seguridad biolgica para
las manipulaciones de agentes asignados al Nivel de Bioseguridad 1.
2. Se recomienda el uso de ambos, delantales o uniformes de laboratorio a
fin de evitar que la ropa de calle se pueda contaminar o ensuciar.
3. Se deben usar guantes si existen lastimaduras en las manos o si la piel
presenta alguna erupcin. Deben existir alternativas disponibles al uso de
guantes de ltex empolvados.
4. Se debe utilizar proteccin ocular para los procedimientos en los que se
puedan producir salpicaduras de microorganismos u otros materiales
peligrosos.

D. Instalaciones del Laboratorio (Barreras Secundarias)

1.
2.
3.
4.

Los laboratorios deben tener puertas para el control de acceso.

Cada laboratorio contiene una pileta para el lavado de manos.
El laboratorio ha sido diseado para que su limpieza sea sencilla.
Las superficies de las mesas de trabajo son impermeables al agua y son
resistentes al calor moderado y a solventes orgnicos, cidos, lcalis y
productos qumicos utilizados para descontaminar la superficie de trabajo
y los equipos.
5. Los muebles de laboratorio deben tener la capacidad de soportar cargas y
usos previstos. Los espacios entre las mesas de trabajo, gabinetes y
equipos deben ser accesibles para su limpieza.
6. Si el laboratorio tiene ventanas que se abren hacia el exterior, estn
provistas de mosquiteros.

Nivel de Bioseguridad 2 (BSL-2)

Este nivel es similar al Nivel de Bioseguridad 1 y es adecuado para trabajos
que involucren agentes de riesgo potencial moderado para el personal y el
medio ambiente. Difiere del BSL-1 en que (1) el personal del laboratorio
cuenta con una capacitacin especfica en la manipulacin de agentes
patognicos y est dirigido por cientficos competentes; (2) el acceso al
laboratorio es limitado cuando se estn desarrollando actividades; (3) se
toman precauciones extremas con elementos cortantes contaminados y (4)
ciertos procedimientos que pueden generar aerosoles o gotitas infecciosas
se llevan a cabo en gabinetes de seguridad biolgica o en otros equipos de
contencin fsica.

Las siguientes prcticas especiales y estndar, los equipos de seguridad y

las instalaciones se aplican a los agentes asignados al Nivel de Bioseguridad
2:

A. Prcticas Microbiolgicas Estndar

Se aplican las normas establecidas para el NBS - 1.

B. Prcticas Especiales

1. El director del laboratorio limita el acceso al laboratorio cuando se estn

realizando trabajos con agentes infecciosos.
2. El director del laboratorio establece polticas y procedimientos mediante
los cuales las personas que han sido advertidas acerca de los riesgos
potenciales y cumplen con requisitos especficos de ingreso (por ejemplo,
inmunizacin) puedan entrar al laboratorio.
3. Se debe colocar una seal de advertencia de riesgo biolgico en la
entrada del laboratorio cuando se estn utilizando agentes etiolgicos. La
informacin adecuada que debe colocarse incluye el agente o agentes
que se estn utilizando, el nivel de bioseguridad, las inmunizaciones
requeridas, el nombre del investigador y su nmero de telfono, todo
equipo de proteccin que deba utilizarse en el laboratorio y todos los
procedimientos requeridos para retirarse del laboratorio.
4. El personal del laboratorio debe someterse a las inmunizaciones o a los
anlisis de los agentes manejados o potencialmente presentes (por
ejemplo, vacuna contra la Hepatitis B, evaluacin cutnea de
Tuberculosis).
5. Cuando corresponda, considerando los agentes manipulados, se recogen
y almacenan las muestras de suero de base para el personal del
laboratorio y otros equipos de trabajo en riesgo.
6. Se incorporan los procedimientos de seguridad de los procedimientos
operativos estndar o del manual de bioseguridad adoptado o preparado
especficamente para el laboratorio por el director del laboratorio.
7. El director del laboratorio debe garantizar que el personal de laboratorio y
de asistencia o soporte reciba la capacitacin adecuada sobre los posibles
riesgos asociados con el trabajo en cuestin, las precauciones necesarias
para evitar exposiciones y los procedimientos de evaluacin de
exposicin.
8. Se debe siempre tener un alto grado de precaucin con los artculos
punzantes o cortantes contaminados, incluyendo las agujas y jeringas,
portaobjetos para microscopio, pipetas, tubos capilares y escalpelos.
9. Los cultivos, tejidos, fluidos corporales, o desechos potencialmente
infecciosos se colocan en un recipiente con tapa que evita las filtraciones
durante la recoleccin, manejo, procesamiento, almacenamiento,
transporte o envo.
10. Se descontaminan los equipos y las superficies de trabajo regularmente
con un desinfectante efectivo despus de trabajar con el agente

infeccioso, y especialmente cuando se producen derrames evidentes,

salpicaduras u otra contaminacin por materiales infecciosos.
11. Se deben informar de inmediato al director de la institucin los derrames
y accidentes que deriven en exposiciones evidentes a los materiales
infecciosos.
12. No se permite la presencia en el laboratorio de animales que no se estn
utilizando en el trabajo que se est realizando.

C. Equipo de Seguridad (Barreras Primarias)

1. Se utilizan gabinetes biolgicos mantenidos de manera adecuada,
preferentemente de Clase II, u otros equipos de proteccin personal o
dispositivos de contencin fsica adecuados cuando:
a. Se realicen procedimientos que puedan generar aerosoles o salpicaduras
infecciosas.
b. Se utilicen altas concentraciones o grandes volmenes de agentes
infecciosos.
2. Se utiliza una proteccin facial (anteojos, mscaras, protecciones faciales
u otra proteccin) para las probables salpicaduras o aerosoles de
materiales infecciosos u otros materiales peligrosos para el rostro cuando
se deben manipular los microorganismos fuera del BSC.
3. Se deben usar ambos, delantales, batas cortas o uniformes de laboratorio
de proteccin adecuados para el laboratorio durante la permanencia en el
mismo.
4. Se deben usar guantes cuando es posible que las manos entren en
contacto con materiales infecciosos, superficies o equipos contaminados.
Puede ser apropiado el uso de dos pares de guantes. Los guantes
descartables no se lavan, no se vuelven a usar ni se utilizan para tocar
superficies limpias (teclados, telfonos, entre otras), y no se deben usar
fuera del laboratorio.

D. Instalaciones del Laboratorio (Barreras secundarias)

1. Proveer puertas con llave para las instalaciones que contengan agentes
restringidos.
2. Considerar la ubicacin de nuevos laboratorios lejos de las reas pblicas.
3. Cada laboratorio contiene un lavatorio para el lavado de manos.
4. El laboratorio est diseado para que pueda limpiarse fcilmente.
5. Las superficies de las mesas de trabajo deben ser impermeables al agua
y resistentes al calor moderado y a los solventes orgnicos, cidos, lcalis
y sustancias qumicas empleadas para descontaminar las superficies y
equipos de trabajo.
6. Los muebles del laboratorio pueden soportar las cargas y usos
anticipados. Los espacios entre las mesas de trabajo, gabinetes y los
equipos son accesibles para su limpieza. Las sillas y otros muebles
utilizados en el trabajo de laboratorio deben estn cubiertos por otro
material que no sea tela que se pueda limpiar fcilmente.
7. Instalar gabinetes de seguridad biolgica de tal manera que las
fluctuaciones del aire de entrada y escape de la sala no hagan funcionar
a los gabinetes de seguridad biolgica fuera de sus parmetros para
contencin.
8. Se debe disponer de una estacin para el lavado de ojos.
9. La iluminacin es adecuada para todas las actividades, evitando los
reflejos y el brillo que puedan molestar la visin.
10. No existen requisitos de ventilacin especficos. Sin embargo, la
planificacin de nuevas instalaciones debe considerar los sistemas de

ventilacin mecnica que ofrezcan flujo de aire hacia el interior sin la

recirculacin a espacios fuera del laboratorio.

Nivel de Bioseguridad 3 (BSL-3)

Este nivel es aplicable a las instalaciones clnicas, de diagnstico,
enseanza, investigacin o produccin en las que se llevan a cabo trabajos
con agentes indgenas o exticos que pueden producir una enfermedad
grave o potencialmente letal como resultado de la exposicin por va de
inhalacin. El personal de laboratorio recibe instruccin especfica en el
manejo de agentes patognicos y potencialmente letales, y es supervisado
por cientficos competentes con experiencia en el trabajo con estos agentes.
Todos los procedimientos que involucren la manipulacin de materiales
infecciosos se realizan dentro de gabinetes de bioseguridad u otros
dispositivos de contencin fsica o por personal que lleva ropa y equipo
protector adecuado. El laboratorio tiene caractersticas de diseo e
ingeniera especiales.
Se aplican las siguientes prcticas, equipos e instalaciones de seguridades
especiales y estndar a los agentes asignados al Nivel de Bioseguridad 3:

A. Prcticas Microbiolgicas Estndar

Se aplican las normas establecidas para el NBS - 1.

B. Prcticas Especiales
1. Las puertas del laboratorio se mantienen cerradas cuando se estn
practicando experimentos.
2. El director del laboratorio controla el acceso al laboratorio y restringe el
acceso a las personas que deben estar en laboratorio a los fines del
programa o asistencia. No se permite la presencia en el laboratorio de las
personas que corren riesgo mayor de contraer infecciones. Por ejemplo,
las personas con compromiso inmunolgico o depresin del sistema
inmunolgico pueden correr el riesgo de contraer infecciones.
3. El director del laboratorio establece polticas y procedimientos por medio
de los cuales slo las personas que han sido advertidas sobre los riesgos
biolgicos posibles, que cumplan con los requisitos de ingreso especficos
(por ejemplo, inmunizaciones) y que cumplan con los procedimientos de
entrada y salida podrn ingresar al laboratorio.
4. Se debe colocar un cartel de bioriesgo, incorporando el smbolo de
bioriesgo universal en la puerta de acceso a todos los laboratorios y salas
de animales cuando se encuentren presentes agentes infecciosos o
animales infectados en el laboratorio o mdulo de contencin. La seal de
advertencia de bioriesgo identifica al agente o agentes infecciosos en
uso, enumera el nombre y el nmero de telfono de la persona o
personas responsables e indica los requisitos especiales necesarios para
poder ingresar al laboratorio (por ejemplo, la necesidad de
inmunizaciones, respiradores u otras medidas de proteccin personal).
5. El personal del laboratorio debe someterse a las inmunizaciones o a los
anlisis de los agentes manejados o potencialmente presentes (por
ejemplo, vacuna contra la Hepatitis B, evaluacin cutnea de Tuberculosis
y a estudios peridicos segn las recomendaciones para el agente que se
est manipulando).

6. Se recogen muestras de suero base segn sea apropiado y se almacenan

para todo el personal del laboratorio y otras personas en riesgo.
7. El director del laboratorio prepara o adopta un manual de bioseguridad
especfico para el laboratorio e incorpora precauciones de bioseguridad
en los procedimientos de operacin estndar.
8. El personal del laboratorio y de asistencia o soporte recibe la capacitacin
apropiada sobre los posibles riesgos asociados con el trabajo en cuestin,
las precauciones necesarias para evitar exposiciones y los procedimientos
de evaluacin de la exposicin.
9. El director del laboratorio es responsable de garantizar que, antes de
trabajar con organismos en el Nivel de Bioseguridad 3, todo el personal
demuestre pericia en las prcticas y tcnicas microbiolgicas estndar, y
en las prcticas y operaciones especficas del laboratorio.
10. Se debe siempre tener un alto grado de precaucin con los artculos
punzantes o cortantes contaminados, incluyendo las agujas y jeringas,
portaobjetos, pipetas, tubos capilares y escalpelos.
11. Toda manipulacin abierta de materiales infecciosos se practica en
gabinetes de seguridad biolgica u otros dispositivos de contencin fsica
dentro del mdulo de contencin. No se realizan trabajos en recipientes
abiertos sobre la mesa de trabajo
12. Se deben descontaminar los equipos de laboratorio y las superficies de
trabajo de manera rutinaria con un desinfectante efectivo, despus de
finalizar el trabajo con materiales infecciosos, y especialmente despus
de derrames, salpicaduras u otra forma de contaminacin manifiesta con
materiales infecciosos.
13. Se colocan los cultivos, tejidos, especmenes de fluidos corporales o
desechos en un recipiente a prueba de filtraciones durante la recoleccin,
manejo, procesamiento, almacenamiento, transporte o envo.
14. Se descontaminan todos los materiales de desecho potencialmente
contaminados (por ejemplo, guantes, ambos de laboratorio, entre otros)
de los laboratorios antes de desecharlos o reutilizarlos.
15. Los derrames o accidentes que representen una exposicin manifiesta o
potencial a los materiales infecciosos deben informarse de inmediato al
director del laboratorio.
16. No se permite la presencia de animales o plantas no relacionadas con el
trabajo practicado en el laboratorio.

C. Equipos de Seguridad (Barreras Primarias)

1. El personal que ingresa al laboratorio debe usar delantales envolventes o

con la delantera lisa o trajes de limpieza o mamelucos. No se debe usar la
ropa de proteccin fuera del laboratorio. La ropa no descartable se
descontamina antes de lavarse.
2. Se deben usar guantes cuando se manipulen materiales infecciosos,
animales infectados y equipos contaminados.
3. Se recomienda el cambio frecuente de guantes acompaado del lavado
de las manos. No se deben volver a usar los guantes descartables.

4. Todas las manipulaciones de materiales infecciosos, necropsia de

animales infectados, recoleccin de tejidos o lquidos de los animales
infectados o cosecha de huevos embrionados, etc. se realizan en un
gabinete de seguridad biolgica Clase II o Clase III.
5. Cuando no se puede practicar un procedimiento o proceso dentro de un
gabinete de seguridad biolgica, se utilizan las combinaciones adecuadas
de equipos de proteccin personal (por ejemplo, respiradores, mscaras
faciales) y dispositivos de contencin fsica (por ejemplo, cubetas de
seguridad para centrfugas o rotores sellados).
6. Se utilizan protectores faciales y de respiracin dentro de las salas con
animales infectados.

D. Instalaciones de Laboratorio (Barreras Secundarias)

1. El laboratorio est separado de otras reas abiertas al flujo de trfico
irrestricto dentro del edificio, y el acceso al laboratorio est restringido.
Las puertas se pueden cerrar con llave. Se puede incluir un vestuario en
el camino.
2. Cada sala de laboratorio contiene un lavadero de manos.
3. Las superficies interiores de paredes, pisos y cielorrasos de las reas
donde se manipulan agentes de BSL-3 estn construidas para facilitar la
limpieza y descontaminacin.
4. Las superficies de las mesas de trabajo deben ser impermeables al agua
y resistentes al calor moderado y a los solventes orgnicos, cidos, lcalis
y sustancias qumicas empleadas para descontaminar las superficies y
equipos de trabajo.
5. Los muebles del laboratorio pueden soportar las cargas y usos
anticipados. Los espacios entre las mesas de trabajo, gabinetes y los
equipos son accesibles para su limpieza.
6. Se deben cerrar y sellar todas las ventanas en el laboratorio.
7. Se cuenta con un mtodo de descontaminacin de los desechos de
laboratorio en las instalaciones y se utiliza, preferentemente, dentro del
laboratorio (por ejemplo, autoclave, desinfeccin qumica, incineracin, u
otro mtodo de descontaminacin aprobado).
8. Es necesario que se coloquen los gabinetes de seguridad biolgica lejos
de las puertas, de las rejillas de ventilacin de la sala y de las reas de
laboratorio muy transitadas.
9. Se prev un sistema de ventilacin de aire escape por conductos. Este
sistema crea un flujo de aire direccional que toma el aire para el
laboratorio de reas limpias y lo elimina en reas contaminadas. El
aire de escape no se recircula a ninguna otra parte del edificio. El aire
viciado debe dispersarse lejos de las reas ocupadas y de las entradas de
aire o se debe filtrar con HEPA. Se debe considerar la instalacin de un
sistema de control HVAC para evitar la presurizacin positiva constante
del laboratorio.
10. El aire de escape viciado por HEPA desde un gabinete de seguridad
biolgica Clase II puede recircularse en el laboratorio si se controla y
certifica el gabinete por lo menos una vez por ao.
11. Las centrifugadoras de flujo continuo u otros equipos que pueden
producir aerosoles deben estar contenidos en dispositivos que liberen el
aire a travs de filtros HEPA, antes de descargarlo al laboratorio.
12. Se protegen las lneas de vaco con trampas de desinfectante lquido y
filtros HEPA o equivalentes.
13. Se dispone de una estacin para lavado de ojos dentro del laboratorio.

14. La iluminacin es adecuada para todas las actividades, evitando los

reflejos y el brillo que molestan la visin.
15. El diseo y los procedimientos operativos del establecimiento del Nivel
de Bioseguridad 3 deben estar documentados. Se debe hacer una prueba
para verificar si se ha cumplido con el diseo y con los parmetros
operativos del establecimiento antes de comenzar a operar. Luego se
deber hacer una reverificacin del establecimiento, por lo menos una
vez al ao.
16. Se deber considerar la inclusin de proteccin ambiental adicional (por
ejemplo: duchas para el personal, filtracin HEPA de aire de escape,
contencin de otros servicios entubados y la provisin de
descontaminacin de efluentes), si as lo recomienda el informe resumido
del agente, segn se determine por la evaluacin del riesgo, las
condiciones del lugar, u otras normas federales, estatales o locales
aplicables.

Nivel de Bioseguridad 4 (BSL-4)

Este nivel debe aplicarse para trabajar con agentes peligrosos y exticos
que poseen un riesgo individual alto de producir infecciones de laboratorio
transmitidas por aerosoles y enfermedades mortales. Los miembros del
personal de laboratorio poseen una capacitacin especfica y completa para
manipular agentes infecciosos extremadamente peligrosos y conocen las
funciones de contencin primaria y secundaria de las prcticas estndar y
especiales, los equipos de contencin y las caractersticas de diseo del
laboratorio. Este personal es supervisado por cientficos competentes que
poseen capacitacin y experiencia para trabajar con estos agentes. El
acceso al laboratorio es controlado estrictamente por el director del
laboratorio. El establecimiento se encuentra en un edificio separado o en un
rea controlada dentro de un edificio, la cual est totalmente aislada de
todas las dems reas del edificio.
El laboratorio de Nivel de Bioseguridad 4 tiene caractersticas especiales de
ingeniera y diseo para evitar la diseminacin de los microorganismos en el
medio ambiente.
Las prcticas de seguridad estndar y las instalaciones especiales para
agentes correspondientes al Nivel de Bioseguridad 4 son las siguientes:

A. Prcticas Microbiolgicas Estndar

Se aplican las normas establecidas para el NBS - 1.

B. Prcticas Especiales
1. Slo se autoriza el ingreso a las personas cuya presencia en el
establecimiento o salas individuales de laboratorio se requiere a los fines
del programa o por razones de mantenimiento. El supervisor tiene la
responsabilidad final de evaluar cada circunstancia en particular y de
determinar quin puede ingresar o trabajar en el laboratorio. El acceso al
establecimiento est limitado por medio de puertas seguras y cerradas. El
acceso lo administra el director del laboratorio, el funcionario de control
de bioriesgo u otra persona responsable de la seguridad fsica del
establecimiento. Un libro de bitcora firmado por todo el personal indica
la fecha y hora de cada ingreso y salida.
2. Cuando hay materiales infecciosos o animales infectados en el laboratorio
se colocan en todas las puertas de acceso carteles de advertencia de

riesgo, en los que se incluye el smbolo universal de bioriesgo. El cartel

identifica el agente, menciona el nombre del director del laboratorio o el
de la o las personas responsables, y seala los requisitos especiales para
ingresar en el rea (por ejemplo, el uso de inmunizaciones o
respiradores).
3. El director del laboratorio es responsable de asegurar que, antes de
trabajar con organismos en el Nivel de Bioseguridad 4, todo el personal
demuestre una gran habilidad para implementar las prcticas y tcnicas
microbiolgicas estndar y las prcticas y operaciones especiales
especficas del laboratorio.
4. El personal del laboratorio recibe inmunizaciones disponibles para los
agentes manipulados o que posiblemente puedan estar potencialmente
presentes en el laboratorio.
5. Se toman y almacenan muestras de suero de base para todo el personal
del laboratorio y dems personal de riesgo.
6. Se prepara o se adopta un manual de bioseguridad. Se notifica al
personal acerca de los riesgos especiales y se le ordena que lea y cumpla
las instrucciones sobre prcticas y procedimientos.
7. El personal de laboratorio y de mantenimiento recibe capacitacin
adecuada sobre los posibles riesgos asociados con el trabajo en cuestin,
las precauciones necesarias para evitar las exposiciones y la exposicin a
procedimientos de evaluacin.
8. El personal ingresa y sale del laboratorio slo despus de realizarse el
cambio de ropa o de pasar por las duchas.
9. El personal se quita la ropa en la sala externa de cambio de ropa y la deja
all. A todo el personal que ingresa al laboratorio se le suministra ropa
completa de laboratorio, incluyendo ropa interior, pantalones y camisas o
mamelucos, zapatos y guantes, y el personal debe usar esa ropa.
10. Los insumos y materiales necesarios son introducidos por medio de la
autoclave de doble puerta, cmara de fumigacin o esclusa de aire, la
cual es adecuadamente descontaminada entre un uso y otro. Despus de
cerrar las puertas externas, el personal dentro del establecimiento
recupera los materiales abriendo las puertas internas de la autoclave,
cmara de fumigacin o esclusa de aire. Estas puertas se cierran despus
de traer los materiales al laboratorio.
11. Siempre se debe tener mucha precaucin con los instrumentos filosos
contaminados, incluyendo las agujas y las jeringas, portaobjetos, pipetas,
tubos capilares y escalpelos.
12. Los materiales biolgicos que deben retirarse del gabinete Clase III o del
laboratorio de Nivel de Bioseguridad 4 en estado viable o intacto son
transferidos a un recipiente primario sellado e irrompible y luego
encerrados en un recipiente secundario sellado e irrompible.
13. No se retira ningn material del laboratorio de Nivel de Bioseguridad 4,
salvo los materiales biolgicos que deben permanecer en estado viable o
intacto, a menos que hayan sido pasados por la autoclave o
descontaminados antes de sacarlos del laboratorio.
14. Los equipos de laboratorio son descontaminados rutinariamente
despus de finalizado el trabajo con materiales infecciosos, y
especialmente despus de derrames o salpicaduras directas o de otra
contaminacin
con
materiales
infecciosos.
Los
equipos
son
descontaminados antes de ser enviados para su reparacin o
mantenimiento.
15. Miembros profesionales adecuados del personal u otras personas
debidamente capacitadas y equipadas para trabajar con material

infeccioso concentrado contienen y limpian los derrames de materiales

infecciosos.
Se desarrolla un procedimiento para derrames y se coloca un instructivo del
mismo en el laboratorio.
16. Se establece un sistema para informar accidentes y exposiciones de
laboratorio y ausentismo del personal, as como tambin para el control
mdico de enfermedades potenciales asociadas al laboratorio.
17. No se permite que haya en el establecimiento materiales no
relacionados con el experimento que se est realizando (por ejemplo,
plantas, animales y ropa).

C. Equipos de Seguridad (Barreras Primarias)

Todos los procedimientos realizados dentro del establecimiento se llevan a
cabo en el gabinete de seguridad biolgica Clase III o en gabinetes de
seguridad biolgica Clase II utilizados conjuntamente con trajes
presurizados de presin positiva de una pieza.

D. Laboratorio (Barreras Secundarias)

Hay dos modelos para los laboratorios de Nivel de Bioseguridad 4: (A) el
Laboratorio con Gabinete, donde toda manipulacin del agente es realizada
en un Gabinete de Seguridad Biolgica Clase III, y (B) el Laboratorio en el
que se requiere el uso de trajes especiales de seguridad, donde el personal
utiliza un traje de proteccin. Los laboratorios de Nivel de Bioseguridad 4
pueden estar basados en uno de estos modelos o en la combinacin de
ambos en el mismo establecimiento. Si se utiliza una combinacin, cada tipo
debe cumplir todos los requerimientos necesarios.

(A) Laboratorio con Gabinete.

1. El establecimiento de Nivel de Bioseguridad 4 consiste en un edificio
separado o en una zona claramente demarcada y aislada dentro de un
edificio. Las salas del establecimiento estn dispuestas para asegurar el
pasaje a travs de un mnimo de dos puertas antes de ingresar a las salas
donde se encuentra el gabinete de seguridad biolgica Clase III (sala de
gabinete). Hay una sala exterior y una interior de cambio de ropa,
separadas por duchas a disposicin del personal que ingresa y sale de la
sala de gabinete. En la barrera de contencin hay una autoclave con
doble puerta, un tanque de inmersin, una cmara de fumigacin o una
antesala ventilada para la descontaminacin que se debe realizar antes
del pasaje de los materiales, insumos o equipos que no ingresan a la sala
de gabinete a travs de la sala de cambio de ropa.
2. Antes de comenzar con el trabajo de laboratorio, se realizan inspecciones
diarias de todos los parmetros de contencin (por ejemplo, flujo de aire
direccional) y sistemas mantenedores de vida para asegurar que el
laboratorio est operando de acuerdo con sus parmetros operativos.

3. Las paredes, pisos y cielorrasos de la sala de gabinete y de la sala interior

de cambio de ropa son construidos de manera que forman un caparazn
interno sellado, que facilita la fumigacin y es resistente a la entrada y
salida de animales e insectos. Las ventilaciones de las cloacas y dems
lneas de servicios contienen filtros HEPA y proteccin contra vermes.
4. La parte superior de las mesas tienen superficies sin costura o superficies
selladas, que son impermeables al agua y resistentes al calor moderado y
a los solventes orgnicos, cidos, lcalis y qumicos, utilizados para
descontaminar las superficies de trabajo y los equipos.
5. Los muebles de laboratorio son de construccin abierta simple, capaces
de soportar cargas y usos anticipados.
6. Cerca de la puerta de la o las salas de gabinete y en las salas exterior e
interior de cambio de ropa hay un lavabo para manos operado
automticamente o de manos libres.
7. Si hay un sistema de vaco central, no se debe utilizar para reas fuera
del gabinete. Lo ms cerca posible de cada punto de uso o grifo de
servicio se colocan filtros HEPA en lnea. Los filtros se instalan para
permitir la descontaminacin y reemplazo en el lugar.
8. Si hay fuentes de agua, son operadas en forma automtica o con el pie y
estn ubicadas en los pasillos de los compartimentos fuera del laboratorio
9. Las puertas de acceso al laboratorio se cierran solas y tienen cerrojo.
10. Las ventanas son resistentes a las roturas y estn selladas.
11. Se dispone de autoclaves de doble puerta, para descontaminar los
materiales que salen tanto de los Gabinetes de Bioseguridad Clase III o de
la sala gabinete.
12. Se proporcionan tanques de inmersin de pase directo, cmaras de
fumigacin u otros mtodos equivalentes de descontaminacin de
manera que los materiales y equipos que no puedan ser
descontaminados en la autoclave puedan ser retirados en forma segura
del o de los Gabinetes de Seguridad Biolgica Clase III y de la o las salas
de gabinete.
13. Las emanaciones de lquidos provenientes del lado sucio de la sala
interna de cambio de ropa (incluyendo los baos) y los lavabos de la sala
de gabinete, drenajes del piso (en caso de utilizarse), cmaras de
autoclave y dems fuentes dentro de la sala de gabinete son
descontaminados por medio de un mtodo probado, preferentemente
tratamiento con calor, antes de ser descargados a los lquidos efluentes.
14. Hay un sistema de ventilacin no recirculante especial. Los
componentes de suministro y escape del sistema estn equilibrados para
asegurar un flujo de aire direccional desde el rea de menor riesgo al o a
las reas de mayor riesgo potencial
15. El aire de suministro y el aire de escape proveniente de la sala de
gabinete, de la sala interior de cambio de ropa y de la antesala pasa a
travs de filtros HEPA. El aire es descargado de los espacios ocupados y
de las tomas de aire. Los filtros HEPA estn ubicados lo ms cerca posible
de la fuente para minimizar la longitud de las tuberas potencialmente
contaminadas. Todos los filtros HEPA deben ser probados y certificados
todos los aos.
16. El diseo y procedimientos operativos del establecimiento de Nivel de
Bioseguridad 4 deben estar documentados. Se debe probar el
establecimiento para verificar que se ha cumplido con el diseo y los
parmetros operativos antes de la operacin. El establecimiento deber
ser verificado nuevamente todos los aos, basndose en estos

procedimientos con sus modificaciones hechas sobre la base de la

experiencia operativa.
17. Se proporcionan sistemas de comunicacin adecuados entre el
laboratorio y el exterior (por ejemplo, micrfonos, fax, computadora).

(B) Laboratorio en el que se requiere el uso de trajes especiales de

seguridad
1. Consiste en un edificio separado o en una zona claramente demarcada y
aislada dentro de un edificio. Las salas del establecimiento estn
dispuestas para asegurar el pasaje a travs de las reas de cambio de
ropa y descontaminacin antes de ingresar a la o las salas donde se
realiza el trabajo con agentes BSL-4 (rea con trajes). Hay una sala
exterior y una interior de cambio de ropa, separadas por duchas a
disposicin del personal que ingresa y sale de la sala de trajes especiales
de seguridad. El personal que ingresa en esta rea usa un traje de
presin positiva de una sola pieza que es ventilado por un sistema
mantenedor de vida protegido por filtracin HEPA. El sistema mantenedor
de vida incluye compresores de aire de respiracin redundante, alarmas y
tanques de aire de respiracin de respaldo para casos de emergencia. El
ingreso a esta rea es a travs de una esclusa de aire equipada con
puertas hermticas. Hay una ducha qumica para descontaminar la
superficie del traje antes de que el empleado del laboratorio salga del
rea. Para el sistema de escape, sistemas mantenedores de vida,
alarmas, iluminacin, controles de entrada y salida y BSCs hay un
generador de energa mnima de emergencia que se dispara en forma
automtica. La presin del aire dentro del traje es positiva respecto del
laboratorio circundante. La presin del aire dentro del rea de trajes es
menor que la de cualquier otra rea adyacente. Hay sistemas de
comunicacin e iluminacin de emergencia. Todas las penetraciones a la
carcaza interna del rea de trajes, ducha qumica y esclusas de aire estn
selladas.
2. Antes de comenzar el trabajo de laboratorio se realiza una inspeccin
diaria de todos los parmetros de contencin y de los sistemas
mantenedores de vida para asegurar que el laboratorio est operando de
acuerdo con sus parmetros operativos.
3. En la barrera de contencin hay una autoclave de doble puerta para la
descontaminacin de los materiales de desecho que deben ser retirados
del rea de trajes. La puerta de la autoclave, que se abre hacia el rea
externa del rea de trajes, est sellada hacia la pared externa del rea de
trajes y es controlada en forma automtica de manera que la puerta
exterior pueda ser abierta slo despus del ciclo de esterilizacin por
autoclave.
4. Las paredes, pisos y cielorrasos de la sala de trajes especiales de
seguridad estn construidos de manera que forman un caparazn interno
sellado que facilita la fumigacin e impide la entrada y salida de animales
e insectos. Las superficies internas de este caparazn son resistentes a
los lquidos y qumicos para facilitar la limpieza y descontaminacin del
rea.
5. Los accesorios internos del establecimiento en el rea de trajes, tal como
luces, tubos de aire y caeras de servicios, estn dispuestos de manera
tal de minimizar las superficies horizontales.
6. La parte superior de las mesas de trabajo tiene superficies sin costura
que son impermeables al agua y resistentes al calor moderado y a los

solventes orgnicos, cidos, lcalis y qumicos utilizados para

descontaminar las superficies de trabajo y los equipos.
7. Los muebles de laboratorio son de construccin abierta simple, capaces
de soportar cargas y usos anticipados.
8. En el rea de trajes hay un lavabo para manos operado automticamente
o con manos libres; tambin debera considerarse la inclusin de lavabos
en las salas interna y externa de cambio de ropa, basndose en la
evaluacin del riesgo.
9. Si hay un sistema de vaco central, no est destinado a las reas fuera de
la sala de trajes especiales de seguridad. Lo ms cerca posible de cada
punto de uso o grifo de servicio se colocan filtros HEPA en lnea. Los filtros
se instalan para permitir la descontaminacin y reemplazo en el lugar. Los
dems servicios de lquidos y gases a la sala de trajes son protegidos por
dispositivos que evitan el reflujo.
10. Las puertas de acceso al laboratorio se cierran solas y tienen cerrojo.
Las puertas internas y externas que dan a la ducha qumica y las puertas
internas y externas que dan a las esclusas de aire estn bloqueadas para
evitar que ambas puertas se abran al mismo tiempo.
11. Las ventanas son resistentes a las roturas y estn selladas.
12. Los efluentes lquidos provenientes de los lavabos, drenajes del piso (en
caso de utilizarse), cmaras de autoclave y dems fuentes dentro de la
barrera de contencin son descontaminados por medio de un mtodo
probado, preferentemente tratamiento con calor, antes de ser
descargados a los desages sanitarios.
13. Hay un sistema de ventilacin exclusivo. Los componentes de suministro
y escape del sistema estn equilibrados para asegurar al flujo de aire
direccional desde el rea de menor riesgo al o a las reas de mayor
riesgo potencial. Se exige el uso de ventiladores de escape redundante.
14. El aire de suministro y el aire de escape provenientes del rea de trajes,
de la ducha de descontaminacin y de la esclusa de aire de
descontaminacin estn protegidos por el pasaje a travs de filtros HEPA.
El aire de escape proveniente del rea de trajes, de la ducha de
descontaminacin y de la esclusa de aire de descontaminacin es
tratados por pasaje a travs de dos filtros HEPA en serie antes de la
descarga hacia el exterior. El aire se descarga de los espacios ocupados y
tomas de aire. Los filtros HEPA estn ubicados lo ms cerca posible de la
fuente para minimizar la longitud de las tuberas potencialmente
contaminadas. Todos los filtros HEPA deben ser probados y certificados
todos los aos. Las carcazas de los filtros HEPA estn diseadas para
permitir la descontaminacin in situ del filtro antes de retirarlo. Como
alternativa, el filtro puede ser removido en un recipiente primario,
estanco al gas, sellado para la posterior descontaminacin y/o
destruccin por incineracin. El diseo de la carcaza del filtro HEPA debe
facilitar la validacin de la instalacin del filtro. El uso de pre -filtros HEPA
certificados puede ser una ventaja. La vida til de los filtros HEPA de
escape puede extenderse a travs del prefiltrado adecuado del aire de
suministro.
15. La ubicacin de los puntos de suministro y escape debe ser tal que
minimice el espacio de aire muerto en la sala de trajes especiales de
seguridad.
16. El aire de escape tratado de los Gabinetes de Seguridad Biolgica Clase
III, ubicado en un establecimiento donde quienes trabajan en el
laboratorio usan un traje de presin positiva, puede ser descargado al

ambiente de la sala o al exterior a travs del sistema de escape de aire

del establecimiento.
17. El diseo y procedimientos operativos del establecimiento de Nivel de
Bioseguridad 4 deben estar documentados. Se debe probar el
establecimiento para verificar que se ha cumplido con el diseo y
parmetros operativos antes de la operacin.
18. Se deben proporcionar sistemas de comunicacin adecuados entre el
laboratorio y el exterior.

Bibliografa
http://www.ins.gob.pe/CBS/PDF/bmbl4_spanish.pdf
https://es.wikipedia.org/wiki/Niveles_de_bioseguridad
https://www.youtube.com/watch?v=Gya4glhTiOs
http://www.biocontencion.com/bioseguridad.php