Determinaci

Determinacin del n
n de
microorganismos

Evaluaci
Evaluacin del
crecimiento microbiano

Mtodos directos: recuento total

Recuento microscpico directo
(cmara de Neubauer)

Mtodos indirectos: recuento de

viables
Recuento en placa
Nmero ms probable (NMP)

Curso Microbiologa 2010 Facultad de Agronoma

Prctico 6

Recuento en c
cmara de
Neubauer
Mtodo para contar clulas de una muestra de
cultivo diluida en cmara de volumen pequeo y
conocido. Se cuentan clulas en varios cuadrados
de la cmara y se realiza promedio

Ventajas

Es rpido
Las exigencias del equipo
son mnimas
Se pueden observar las
diferencias morfolgicas
de los microorganismos

Desventajas

No se distinguen clulas vivas

de muertas
Se analiza poca cantidad de
muestra
Provoca cansancio del
operador
Slo sirve para muestras con
cargas superiores a 10.000
por ml
Dficil distinguir los m.o de
las partculas de la muestra
Una inadecuada distribucin
de la muestra sobre la
superficie del portaobjetos
ocasiona errores

Consta de un cuadrado central

de 1 mm de lado, dividido en
25 cuadrados. Cada uno de
ellos a su vez, dividido en 16
cuadraditos.

El espacio entre el
portaobjetos y el cubreobjetos
es de 0.02 mm. La rejilla
tiene un rea total de 1 mm2
y un volumen total de 0.02
mm3

Promedio de clulas
contenidas en dicho volumen
se expresa por ml de muestra

Recuento en placa

Para obtener colonias

contables se deben
hacer diluciones
seriadas de la muestra

El contaje de viables
se expresa en UFC/ml

Siembra en placa

Ejemplo:

50 colonias

Clculo del n de ufc/ml

Ufc/ml= n de colonias contadas (30300) x 1/dilucin

x 1/ vol. Sembrado (ml)
Ej. 50 x 1/10-6 x 1/0.1 ml = 5.0 x 108ufc/ml

Ventajas

Esta tcnica es la ms
utilizada ya que permite
contar clulas viables

De alta sensibilidad

Se pueden utilizar medios

muy selectivos para m.o
muy exigentes

Desventajas

Nmero m
ms probable (NMP)

El conteo depende del

medio de cultivo y las
condiciones y tiempo de
incubacin empleadas
Las clulas en el medio de
cultivo no se desarrollan
al mismo tiempo (cultivos
mixtos)

menor

Ventajas

Determina cargas microbianas bajas (menores

de 10 por gramo).

Indicado para microorganismos de lento

crecimiento o cuando han sido sometidos a
condiciones adversas (temperaturas altas,
desecacin, etc.)

Tambin se aplica a microorganismos

anaerobios utilizando en los tubos medio
prerreducido sellados con un tapn de
vaselina-parafina