INFLAMACIN

Pierina A. Catelli

INFLAMACIN
Respuesta fisiolgica localizada y protectora de
los tejidos vascularizados frente a un dao.
Incluye reacciones de naturaleza nerviosa, vascular,
humoral y celular en el sitio lesionado, conformando
un proceso dinmico.

Factores causales
Factores endgenos: necrosis celular, etc.
Factores exgenos:
*Agentes qumicos
*Agentes fsicos
*Agentes biolgicos

Signos Clnicos de Inflamacin

Paracelso, (30 AC al 38 DC)

Calor
Rubor
Edema
Dolor
Galeno (130-200), aadi un quinto signo:

Prdida de funcin

Tipos de Inflamacin
Aguda: Duracin relativamente corta. Caracterizada por el
exudado de fluidos plasmticos y la migracin de leucocitos,
principalmente neutrfilos.

Crnica: Por resolucin incompleta del foco inflamatorio

inicial o episodios mltiples en mismo sitio.
Hay acumulacin de macrfagos y linfocitos, desarrollo de
fibroblastos y tejido vascular.
Formacin de granulomas, con clulas epitelodeas y clulas
multinucleadas.

Qu componentes involucra el
Proceso Inflamatorio?
1.Componentes Celulares
Fibroblastos
Mastocitos
Macrfagos
PMNs
Monocitos
Eosinfilos
Basfilos
Plaquetas

Clulas del Tej. Conectivo

Clulas
circulantes
(vasos sanguneos)

2. Mediadores Solubles

Familias del Molculas de

Adhesin

Selectinas
Integrinas
Sialomucinas
Cadherinas
Molculas
pertenecientes
a la superfamilia
de Igs.

Familia de las Selectinas

Estructura
*Regin extracelular Lecitina tipo-C (dependiente de Ca++ )

*Dominio EGF-like
*2-9 unidades de repeticiones cortas (SCR), homlogas a a
dominios hallados en Prot. reguladoreas de complemento.
*Regin trasmembrana y corto dominio intracitoplasmtico.
La Flia. incluye:

L-selectina
P-selectina
E-selectina

L-selectina
Expresada por leucocitos: N, monocitos y ES
Para una ptima funcin requiere cambio de
afinidad y el dominio citoplasmtico intacto.
N exhiben una perdida reversible de Lselectina, despus de la activacin celular,
resultado de una endoprotelisis. Se genera as
L-selectina soluble, activa y detectable en
plasma, que tambin cumpliria un rol importante
durante la adhesin leucocitaria.

P-selectina
Se acumula en grnulos de las plaquetasy cuerpos de
Weibel-Palade de las cel. Endoteliales.
Es movilizada a la superficie por: trombina, histamina,
fragmentos del complemento, radicales libres del oxigeno y
citokinas.
Presenta una forma soluble activa en suero, aunque en
menor concentracin que L-selectina.

E-selectina
Se expresa en forma constitutiva en la
cara luminal del endotelio de pequeos
vasos e inducible en clulas endoteliales
por estmulos inflamatorios(IL-1, TNF,
lipopolisacrido, etc.)
Una forma soluble de E-selectina se
encontrada elevada en suero en pacientes
con variados sindromes inflamatorios.

Ligando de las Selectinas

Ligando

Motivo sialil-Lewisx, tetrasacrido

(residuos de fucosa, n-acetil-glucosamina,
N-acetil-galactosamina y c. Silico).

Residuos tirosina N-terminales

sulfatados

Sialomucinas
Glicosilacin adecuada de Ligandos (ej: CD34 de los endotelios)

Ligandos de las Selectinas

PSLGPSLG-1(P-selectin Glycoprotien Ligand)

Ligand) has been characterized as a ligand for PP-selectin.
selectin. PSGLPSGL-1 is a glycoprotein expressed on blood
x
cells and contains the sialylsialyl-Lewis tetrasaccharide.
tetrasaccharide. Another PP-selectin ligand is CD24, which appears to be important for tumor cell
binding to PP-selectin.
selectin. For LL-selectin,
selectin, four possible ligands have been identified: GlyCAMGlyCAM-1 (GlycosylationGlycosylation-Dependent Cell Adhesion
Molecule), CD34,
CD34, and MAdCAMMAdCAM-1 (Mucosal Addressin Cell Adhesion Molecule), and PSGLPSGL-1. Evidence suggests that both sulfate and
sialic acid in an a(2,3) linkage are essential to LL-selectin ligand activity. Although specific ligands for EE-selectin are not yet known,
candidate molecules include fucosylated,
fucosylated, sialyated oligosaccharides found as components of glycoprotein and glycolipid molecules.

Deficiencia de Selectinas
LADII
mutacin gen trasportador de fucosa.
4 pacientes reportados a la fecha, todos de orgen Arbico.
No manifestaron demora en cada del cordn, pero s infecciones frecuentes
en la infancia.
nico sntoma crnico: severa periodontitis.
Contraste con LADI, mltiples rganos son afectados: raros grupos
sanguneos (Bombay)
severo retraso mental
y de crecimiento.

Estudio de comparacin hombre-ratn

Selectinas: aplicacin terapetica

The selectins play a key role in the body's defense
mechanism against inflammation. They form a class
of three cell adhesion molecules (E(E-, PP- and LLselectin),
selectin), which, in case of an inflammatory stimulus,
are responsible for the initial steps of the
inflammatory response.
On the other hand, excessive infiltration of leukocytes
into the adjacent tissue can lead to acute or chronic
reactions, as observed in reperfusion injuries, stroke
or rheumatoid arthritis. Therefore, the antagonism of
selectins is regarded as a valuable pharmaceutical
goal.
Since all physiological ligands of the selectins contain
the sialyl Lewisx motif, this tetrasaccharide,
tetrasaccharide, although
it exhibits only a moderate affinity (IC50 = 1 mM), was
chosen as lead structure in the search for EE-selectin
antagonists. We are investigating the solution and
bioactive conformation of the physiological lead
structure sLex and mimics thereof. Furthermore, we
design and synthesize by chemical and enzymatic
means selectin antagonists with drugdrug-like properties.
Their interactions with the selectin targets are
investigated by NMR, surface plasmon resonance and
competitive binding assays.

Integrinas
Protenas heterodimricas, con una cadena
y unidas de forma no covalente.
Clasificacin en subfamilias de acuerdo al tipo
de cadena que poseen.
2 integrina (CD 18)

12 ( CD11a/CD18, LFA-1)
M2
Presentan estados alta y baja afinidad,
regulado por estmulos celulares (IL-8, PAF).

Importante en
reconocimiento
del ligando

Ensamble del heterodmero

Reconocimiento del ligando

Ligandos de 2 integrinas
Familia de molec. de adhesin itercelular
(ICAM): presentan residuos c.asprtico o glutmico posicionados
en loops flexibles que permiten coordinacin con Mg2+ o Mn2+ y formacin
de un puente con los dominios I/I-like de la integrina
MIDAS
(metal- ion-dependent adhesion site).

Deficiencia de Integrinas
LAD I:
Ausencia o gran disminucin de la expresin de 2 integrina en la
superficie de leucocitos,con ausencia o reduccin considerable de
N y monocitos en sitios extravasculares.
Infecciones bacterianas graves y recurrentes.
In-vitro, las clulas de estos pacientes presentan defectos en la
adhesin y sealizacin.
El sindrome resulta de de una serie de mutaciones que evitan la
formacin expresin correctas del heterodmero en la superfie
celular.
Recientemente se han identificado variantes de LAD I, que
comportan diferentes mutaciones y manifestaciones clinicas.

Sialomucinas
CD34
MaDCAM-1
PSLG-1
GlyCAM-1
ESTRUCTURA:
regiones ricas en O-linked
monosacridos.
MadCAM-1 contiene adems
regiones Ig-like.

Mucinas y Cncer

Loss of normal topology and polarization of epithelial cells in cancer results in

secretion of mucins into the bloodstream. The tumor cells invading the tissues and
bloodstream also present such mucins on their cell surfaces.

Cadherinas
Mantienen la integridad estructural de los
tejidos.
Se expresan como dmeros, estableciendo
interacciones homoflicas con otros dmeros de
cadherina expresados en cel. vecinas.

Molculas Pertenecientes a la Flia.

de Igs
Caracterizadas por presentar dominio tipo Igs.
Incluye a
ICAM tipo I, II, III (molec. de adhesin itercelular)
VCAM-1 (molec. de adhesin vascular 1)
PCAM-1 (molec. de adhesin plaqueta-endotelio)
Expresin constitutiva o inducible.

Mediadores Qumicos de la
Inflamacin
Quimiocinas : citocinas pequeas,estructuralmente relacionadas

Funciones

*dirigen el trfico leucocitario

* participan en organognesis y angiognesis
* participan en diseminacin de tumores (metstasis)

Estructura
Residuos Cys conservados que forman puntes S-S

Receptores
Tipo Serpentina acoplados a Prot. G

Clasificacin en base estructura: 4 familias
*CXC
* C-C
poseen 4 Cys conservadas
* CX3 C
*C

Aminas Vasoactivas Mastocitos

Basfilos

Plaquetas

HISTAMINA

Proteasas Plasmticas
*Factores de la coagulacin

Factor XII de Hageman

* Kininas

Calicrena, Bradikinina

*Sist. del Complemento

C5a, C3a (Anafilotoxinas)

C3b, C3bi (Opsoninas)

Mediadores Lipdicos

*eicosanoides (prostaglandinas, leucotrienos)

*factor activador de plaquetas (PAF)

xido Ntrico
+

Sintetizado por :

NOs
-

Actividad

TNF, IL-1, INFg

PAF, IL-4

msculo liso: vasodilatacin

ltica microbiana
anti-inflamatoria

dhesin- agregracin
plaquetaria
reclutamiento WBC

Qu
Qu ocurre
ocurre durante
durante la
la
Inflamacin?
Inflamacin?

Inflamacin Aguda: Dinmica del Proceso

Cambios vasculares
Contraccin de cel. endolteliales
Permeabilidad vascular
Escape de lquido (del vaso a tej.subyacente)
Hemoconcentracin
Enlentecimiento del flujo sanguneo
Marginacin de leucocitos

Citoquinas proinflamatorias
generadas por tejido inflamado
(IL-1, TNF )

Bacteria
Pptidos
Formilados bacterianos

Leucotrienos
Histamina

C3a
C5a

Mastocito

PMN
Ante la invasin de un microorganismo y contacto con clulas epiteliales, stas
se activan y producen citocinas y quimiocinas; Los fagocitos neutrofilos responden a
las quimiocinas y migran de la sangre al tejido inflamado

IL-1
IL-6
TNF

Cascada de Adhesin y
Extravasacin Leucocitaria

Etapas:
1. Rodamiento o Rolling
2. Adherencia estable
3. Diapdesis
4. Migracin

Rolling
Mediado por Selectinas
P-selectina (endotelio)
L-selectina (N)
E-selectina (endotelio)
(Estimulado TNF,IL-1)

PSL-1 (N)
Ligando endotelial
glicosilado
ESL-1 (N)

Adherencia Estable
Mediado por Integrinas
LFA-1, Mac-1
(en el N)

Estmulos del Endotelio

sobre los N

ICAM-1,2 yVCAM-1
(Ligandos en el endotelio)

PAF
IL-8

Diapdesis y Migracin
Diapdesis involucra :
PECAM-1, CD-99 (endotelio y leucocito)
Quimioatractante: C5a, LTB4,
PAF, IL-8, Pptidos formilados

Migracin:

Migracin

Integrinas 1 y 2
Fibringeno y Fibronectina
(Prot. de la matriz extracelular)

Diapdesis

Resolucin del Proceso

Inflamatorio
Eliminacin del agente infeccioso por fagocitosis
Disminucin progresiva del reclutamiento de PMNs:
 Cambio del patrn de citocinas secretadas por los tejidos y
leucocitos infiltrantes: IL-Ra, IL-1Rs, TNF-
Rs, IL-4, IL-10, IL-13
 Retorno progresivo de las CE a su estado de reposo
 Inactivacin de quimioatractantes por enzimas especficas o
por va de endocitosis mediada por receptor

Apoptosis y fagocitosis de leucocitos apoptticos:

 Si fagocita el macrfago a travs de receptor

v 3 induce
disminucin de IL-1
, TNF- , IL-12
 Si fagocita la DC a travs de receptor v 6 induce aumento de
IL-1
, IL-12, IL-10

Resolucin del Proceso Inflamatorio Agudo

Apoptosis de clulas
senescentes

Mediadores
antiinflamatorios

IL-4
TGF-
IL-10
IL-13

Eje Hipotlamo-HipfisisSuprarrenal

glucorticoides

Inmunosupresores
Antiinflamatorios

ACTH

cortisol

Reparacin y
Angiognesis

*N y M remueven
restos cel.
*Fibroblastos, cel
epiteliales y
endoteliales
crean nuevo tejido
*Angiognesis y
Revascularizacin
*Factores de
Crecimiento: EGF,
TGF y , etc.

Evolucin del Proceso Inflamatorio

ATEROESCLEROSIS

Etapas de formacin de la placa

Ateromatosa

(1
1 y 2) Entrada de las lipoprote
lipoprotenas hacia el subendotelio y posterior modificaci
modificacin.
(3 y 4). Liberaci
Liberacin de factores de crecimiento y citoquinas que promueven la diap
diapdesis de
monocitos adicionales hacia la ntima y su diferenciaci
diferenciacin en macr
macrfagos.
(5 y 6) Formaci
Formacin de c
clulas espumosas debido a la internalizaci
internalizacin de lipoprote
lipoprotenas
modificadas y oxidadas.
(7.) Establecimiento de la Estr
Estra de grasa, debido a la acumulaci
acumulacin de c
clulas espumosas.
Modificado de Faxon y col. (173).

Rol del Sistema Inmune en la

Aterognesis
Disfunci
Disfuncin endotelial y formaci
formacin de la estr
estra de grasa. Las LDL
al entrar en la ntima arterial
establecen asociaciones con los proteoglicanos (PG) y sufren
modificaciones (LDLm
(LDLm)
LDLm) que promueven su fagocitosis por
macr
macrfagos (M
(M), quienes ingresan por diap
diapdesis, en
respuesta a estas lipoprote
lipoprotenas, gracias a la asociaci
asociacin de la
integrina de su superficie celular (VLA(VLA-4) y la
Mol
Molcula 1 de Adhesi
Adhesin Vascular (VCAM(VCAM-1). La internalizaci
internalizacin
de LDLm en M
M se realiza a trav
travs del receptor Scavenger clase
A (SR(SR-A) y clase B (CD36) en el caso de las LDL oxidadas
(LDLox),
LDLox), promoviendo la producci
produccin del Factor de Necrosis
Tumoral (TNF)(TNF)-e Interleuquina (IL)(IL)-1 que act
actan sin
sinrgicamente
en la secreci
secrecin de ILIL-6 y en la activaci
activacin de c
clulas musculares
lisas, quienes a su vez son capaces de producir el Factor
Estimulador de Colonias de Macr
Macrfagos (M(M-CSF) y promover la
diferenciaci
diferenciacin de monocitos dentro de la ntima vascular, estas
clulas tambi
tambin son activadas por la Lisofosfatidilcolina
(LysoPC)
LysoPC) en cuanto a la producci
produccin de la prote
protena 1
quimoatrayente para monocitos (MCP(MCP-1). Los M
M tambi
tambin
producen ILIL-12 e ILIL-18, inductores sin
sinrgicos del Interfer
Interfern
(INF)(INF)- _, el principal promotor de la activaci
activacin de los linfocitos T.
Por otro lado, las c
clulas presentadoras de ant
antgeno (CPA),
procesan y despliegan a las LDLox como autoant
autoantgenos en el
contexto del Complejo Mayor de Histocompatibilidad Clase II
(MHC(MHC-II), para su reconocimiento por los receptores de linfocitos
T (TCR) sobre la superficie de las c
clulas T cooperadores (Th
(Th)
Th) o
CD4+. Las citoquinas secretadas por M
M, adem
adems promueven el
aumento de mol
molculas de adhesi
adhesin celular (ICAM(ICAM-1) y vascular
(VCAM(VCAM-1) y de selectinas,
selectinas, en c
clulas endoteliales,
incrementando el reclutamiento de leucocitos y por ende la
amplificaci
amplificacin de la respuesta inflamatoria. La fagocitosis de
altas concentraciones de LDLm y LDLox por parte de M
M,
conlleva a su transformaci
transformacin en c
clulas espumosas,
caracter
caracterstica distintiva de las estr
estras de grasa, primera etapa
en el establecimiento de la aterosclerosis.

BIBLIOGRAFA

Fainboim L., Geffner J.5Edicin.Ed. Panamericana, 2005.

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bme.virginia.edu
www.pharma.unibas.ch
www.ncbi.nlm.nih.gov
www.pubmedcentral.nih.gov

CADHERINA
INTEGRINAS
IL-1
selectinas

GRACIAS!!