BIOLOGIA GENERAL

HELBER FERNANDO ROJAS BARAJAS

PRESENTADO A: WILLIAM CORTES Y MARTHA MOLINA

INFORME

UNIVERSIDAD JORGE TADEO LOZANO

BOGOTÁ D.C
FEBRERO 29 DE 2010
 ENZIMAS

PREGUNTA PROBLEMA

¿Qué factores afectan la actividad enzimática?

INTRODUCCION
Wikipedía.
Uned.es

Las enzimas ayudan al cuerpo en todas sus funciones y sin ellas sería imposible vivir
en esta práctica se espera poder conocer sus funciones, sus comportamientos y sus
reacciones para poder emplearlas de una manera adecuada y manejarlas bien.
Las enzimas son moléculas de proteínas que tienen la capacidad de facilitar y acelerar
las reacciones químicas que tienen lugar en los tejidos vivos, disminuyendo el nivel de
la "energía de activación" propia de la reacción. Se entiende por "energía de activación"
al valor de la energía que es necesario aplicar (en forma de calor, electricidad o
radiación) para que dos moléculas determinadas colisionen y se produzca una reacción
química entre ellas. Generalmente, las enzimas se nombran añadiendo la terminación
"asa" a la raíz del nombre de la sustancia sobre la que actúan.

Son moléculas de naturaleza proteica que catalizan reacciones químicas, siempre que

sea termodinámicamente posible (si bien no pueden hacer que el proceso sea más
termodinámicamente favorable).

Las enzimas no alteran el balance energético de las reacciones en que intervienen, ni

modifican, por lo tanto, el equilibrio de la reacción, pero consiguen acelerar el proceso
incluso millones de veces. Una reacción que se produce bajo el control de una enzima,
o de un catalizador en general, alcanza el equilibrio mucho más deprisa que la
correspondiente reacción no catalizada.

Algunas enzimas son usadas comercialmente, por ejemplo, en la síntesis

de antibióticos y productos domésticos de limpieza. Además, son ampliamente
utilizadas en diversos procesos industriales, como son la fabricación de alimentos,
destinción de jeans o producción de biocombustibles.

Hay muchos tipos de enzimas:

 Pitalina: Los almidones proporcionan mono y disacáridos.

 Amilasa: Los almidones y los azucares proporcionan glucosa.
 Pepsina: Las proteínas proporcionan péptidos y aminoácidos.
  Lactasa: Las grasas ácidos grasos y glicerina.
 Lipasa: La lactosa de la leche proporciona glucosa y galactosa.

Se espera poder con esta práctica diseñar experimentos para verificar los
comportamientos de la enzima, y por ultimo compararla con los catalizadores orgánicos.

1. Consulta.

Conteste las siguientes preguntas y/o busque la información solicitada, luego a

partir de éstas redacte un texto de dos páginas.

- ¿En qué tipo de organismos se encuentra catalasa, en los aerobios o

anaerobios?
- ¿La catalasa tiene o no cofactores?, si los tiene mencione cuáles son.
- ¿La catalasa tiene estructura cuaternaria?
- ¿Cómo se puede clasificar a la catalasa, de acuerdo con la reacción que
cataliza?
- Haga una descripción sobre el efecto que tiene la temperatura en la actividad
de las enzimas.
- ¿Cómo influye en la actividad catalítica los cambios de pH.
- Consulte sobre los catalizadores inorgánicos y establezca dos diferencias con
respecto a las enzimas
- ¿Qué otros factores, además de la temperatura y el pH, influyen en la actividad
de una enzima?

SOLUCION

1. Se encuentra en casi todos los aerobios catalasa y los anaerobios carecen de ella.
2. El cofactor puede ser un ion metálico o bien una molécula orgánica, llamada
coenzima, aunque algunos enzimas necesitan de ambos. El cofactor puede estar
fuertemente unido a la proteína y recibe entonces el nombre de grupo prostético, o
débilmente unido, por lo que en realidad actúa como un sustrato específico de la
enzima (co-sustrato; suele ser una molécula orgánica, coenzima).

En las enzimas el cofactor puede actuar como centro catalítico primario, grupo puente
para reunir el sustrato y la enzima ó agente estabilizante de la actividad enzimática
(conformación).

3. Si, debido a que contiene dos proteínas algunas catalasas.

4. La catalasa es una oxireductora
La catalasa, es la enzima que cataliza la reacción:
2H2O2 <-------> 2H2O + O2
o sea la descomposición del peróxido en un proceso de óxido-reducción. La cual es una
reacción protectora del organismo humano.

5. La elevación de la temperatura incrementa la velocidad de una reacción catalizada

por enzimas. Al principio la velocidad de reacción aumenta cuando la temperatura se
eleva debido al incremento de la energía cinética de la energía de las moléculas
reactantes.
6. Es una enzima la cual el pH es alcalino.
7. Poder catalítico diferencia las enzimas de los catalizadores inorgánicos y los
catalizadores inorgánicos puedes acelerar una reacción química.
8. Los inhibidores y sustratos.

MATERIALES Y REACTIVOS

Materiales y Reactivos Muestras

equipos
Tubos de ensayo Peróxido de 3 ml Champiñones 100g
(20) hidrógeno (5%)
Gradilla (2) HCl (3M) 3 ml Papa criolla 100g
Pipeteador (1) NaOH (3M) 3 ml Hígado de res 100g
Baño maría a 37 y Buffer de 3 ml Leche de cabra cruda 100 ml
80oC fosfatos (0.02M
pH 7)

Goteros( 2) Agua destilada 3 ml Espinaca 100g

Termómetro HgCl3 (2%) 3 ml Leche destilada como 3 ml

-10 a 50oC (1) blanco
Pinzas para tubos (1) MnO2 0.01 g Papa 1 tr (trozo)
Pipetas de 5 ml (3) Extracto enzimatico 1 ml
Cronómetro ( 1)
Pipetas de 1 ml (2)
Probeta de 5 ml (1)
Placa de
calentamiento (1)
Plancha de
calentamiento
Aro con nuez (1)
Placa de
calentamiento (1)
Vasos de
precipitados de 250
ml (4)
Soporte universal (1)

Vasos de
precipitados de 100
ml (2)
RESULTADOS.

3.1. Verificación de la actividad de la catalasa

Hipótesis: Se notara el cambio del liquido de cada tuvo en donde la descomposición de
los homogenados muestran el cambio del liquido

Diagrama de flujo:

Seis tubos de ensayo

Añadir a 4 tubos de ensayo 3 ml de:

 Papa Añadir 3 ml de H202
 Higado
 Champiñones
 Espinaca
 Agua destilada como blanco.

Añadir y agitar.

Tabla de datos:

HOMOGENADO O LO ESPERADO LO OBSERVADO

MUESTRA
Papa Reacción positiva Hubo burbujas pero no
hubo reacción de
aumento de liquido.
Hígado Reacción positiva Hubo una reacción
instantánea y brusca.

Champiñones Reacción positiva Hubo una reacción muy

rápida e instantánea.

Espinaca Reacción positiva Hubo reacción se

crearon burbujas hasta
llenar el tubo.
 Leche de cabra Reacción positiva No se pudo hacer la
prueba

Agua destilada como Reacción Negativa No sucedió nada

blanco

3.2 Reconocimiento del carácter exotérmico de la reacción catalizada por la catalasa.

Hipótesis: Varia la temperatura cada 30 segundos y varia la temperatura al adicionarle

agua oxigenada.

Diagrama de flujo:

Añadir 2 ml de hígado

Tomar temperatura con el termómetro adentro del tubo

Adicionar 2 ml de agua oxigenada

Observar las variaciones de temperatura cada 30 segundos hasta 5

minutos

Tabla de datos:

TIEMPO TEMPERATURA TEMPERATURA

ESPERADA OBSERVADA
30 s 15 C 23 C
60 s 17 C 25 C
90 s 20 C 27 C
 120 s 22 C 28 C
150 s 23 C 28 C
180 s 24 C 28 C
210 s 25 C 28 C
240 s 26 C 29 C
270 s 27 C 29 C
300 s 28 C 29 C

3.3 Efecto de la temperatura sobre la actividad enzimática

Hipótesis: Comenzaran a producirse burbujas de acuerdo a la temperatura a la que se

ha expuesto el tubo, entre mayor sea la temperatura más rápido se producirán las
burbujas.

Diagrama de flujo:

4 tubos de ensayo

Añadir a cada uno 5 ml de hígado

Rotular e incubar

Tubo 1- 80 C por 7 minutos en incubación.

Tubo 2- 37 C por 5 minutos en incubación

Tubo 3- Temperatura ambiente

Tubo 4- Congelador 4 C (40 minutos)

 Tabla de datos:

TEMPERATURA LO ESPERADO LO OBSERVADO

80 C Ser el primero en No hubo reacción
producir burbujas Se desnaturalizo

37 C Ser el segundo en Hubo reacción

producirlas pasados unos
segundos

Ambiente Ser la tercera en Hubo una reacción

producirlas inmediata

4C Ser la última en Hubo una reacción

producir burbujas inmediata

3.4 Efecto del pH sobre la actividad enzimática

Hipótesis:

Diagrama de flujo:
Tres tubos de ensayo
Adicionar 3 ml de H202

A cada tubo de ensayo añadirle 1 ml de hígado

Agitar suavemente hasta mezclar

Rotular

Adicionar reactivos
Después
Tubo 1- 3 ml de HCL 3M
Tubo 2- 3 ml de NaOH 3M
Tubo 3- 3 ml de buffer fosfatos 0.02 M (PH 7)
 Tabla de datos:

REACTIVO LO ESPERADO LO OBSERVADO

ADICIONADO Y pH
HCL-PH:1 Negativa No hubo reacción
debido al bajo PH

NaOH-PH:10.5 Negativa No hubo reacción

Buffer de fosfatos Positiva Hubo reacción debido

PH:7 a lo óptimo del
reactivo.

3.5 Comparación entre la actividad de una enzima y la de un catalizador inorgánico, y

evaluación del efecto del cloruro de mercurio

Hipótesis: Mirar el comportamiento de cada reacción de estos reactivos

Diagrama de flujo:

Siete tubos de ensayo

Mida los reactivos

 Tubo 1- 1 trozo de papa + H2O2 10 gotas

 Tubo 2- 10 gotas de H202+ 1 ml de papa hervida
 Tubo 3- 10 gotas de H2O2+ 1 ml de cloruro de mercurio+ 1 ml de
extracto enzimático.
 Tubo 4- 10 gotas de H2O2 + 0.01 g de MnO2
 Tubo 5- Se calienta con MnO2 y después se enfría para adicionar
H2O2 10 gotas
 Tubo 6- 1 trozo+ H2O2 10 gotas+ 0.01 g de MnO2
 Tubo 7- H202 10 gotas+ extracto enzimático 1 ml
 Tabla de datos:

REACTIVOS LO ESPERADO LO OBSERVADO

ADICIONADOS AL
TUBO
H2O2 REACCIONA REACCIONO

H2O2 NO REACCIONA NO REACCIONO

H202- HgCl3 REACCIONA REACCIONO

Mn02-H2O2 REACCIONA REACCIONO

MnO2-H2O2 NO REACCIONA HUBO POCA

REACCION
MnO2-H2O2 REACCIONA REACCIONO

DISCUSIÓN DE RESULTADOS

Cuando se verifico la actividad de la catalasa con la cantidad indicada en la guía se

pudo conocer que al añadirle el peróxido de hidrogeno a los homogenados de hígado,
champiñones, espinaca, la catalasa reacciono descomponiendo el peróxido de
hidrogeno, aumentando el liquido en el tubo de ensayo, saliéndose el liquido del tubo,
con la papa hubo reacción, pero al no haber mucha catalasa, hubo solamente una
aparición de burbujas y por ultimo con el agua no hubo ninguna reacción debido a no
haber catalasa.

La temperatura ambiente en ese momento era de veintiún grados centígrados (21 C), al
agregarle los 2 ml del homogenado de hígado al peróxido de hidrogeno, Aumento la
temperatura en el tubo de ensayo cuatro grados centígrados (4C) en los primeros 30
segundos, después el aumento fue muy poco y cada 30 segundos variaba la
temperatura aumentando un grado aproximadamente, al pasar los 5 minutos la
temperatura a la cual estaba el tubo de ensayo era de 29 C, La temperatura ideal es
28 C.

Al verificar el comportamiento de la catalasa a diferentes temperaturas, agregando

primero el homogenado de hígado haciendo el procedimiento adecuado calentando o
enfriando el homogenado y añadiendo el agua oxigenada, podemos comprobar que a
menor temperatura mayor es la reacción, a 80 C se desnaturalizo no hubo reacción, a
37 grados ya hubo reacción, a temperatura ambiente y de 4 C hubo reacción inmediata.

Dependiendo del reactivo agregado al homogenado la reacción del pH será diferente

dependiendo de la acidez o de la alcalinidad del reactivo, la catalasa reacciona al haber
un pH óptimo como el del reactivo de buffer, si es muy alcalino o muy acido la catalasa
no reaccionara, El pH optimo de las catalasas es 7, este es el pH perfecto, siendo este
el pH del agua.

Al verificar las diferencias entre las enzimas y los catalizadores inorgánicos, Las
enzimas reaccionando creando un rápido aumento de liquido, por el contrario, los
catalizadores inorgánicos lo hacen cambiando el color de el homogenado, la papa al
hacerse la prueba reacciono demostrando ser una enzima, al hervirse la papa y
haciendo el mismo procedimiento esta se convierte en catalizador y sin dar ninguna
reacción, el HgCl2 reacciono al ser un catalizador inorgánico, El MnO2 reacciono al ser
un catalizador inorgánico al calentarse este mismo ya hubo una reacción muy minima,
con el otro tubo se puso un catalizador y una enzima reaccionando este cambiando su
color y aumentando el liquido.

En esta práctica de verificación de la actividad de la catalasa pudimos haber utilizado la

carne, el pollo, el pescado, la yuca, entre otros.

Se encontró mayor contenido de catalasa en el hígado reaccionando instantáneamente,

debido a que la catalasa es la enzima que se encuentra en el hígado y en la sangre, y
su función es evitar que el peróxido de hidrogeno se acumule en las células.

Es importante la enzima catalasa para la protección de la célula en las especies por eso
es tan importante y se produce tanto en las especies.

Si se pone peróxido de hidrogeno en una herida la sangre reaccionaria evitando que

esta pase a las células.

Cuando la catalasa deshidrogenasa ocurre la reacción catalizada.

Puede haber complicaciones con las enzimas si el cuerpo no retoma una temperatura
normal.
CONCLUCIONES

El homogenado con mas catalasa fue el hígado debido a que esta enzima se encuentra
presente en el hígado, Se pudo conocer la reacción de la catalasa al descomponer el
peróxido de hidrogeno, de los distintos comportamientos del homogenado de hígado
frente a todos los reactivos, cambios de temperatura, se puede concluir que entre
menos temperatura mayor es la reacción, que la catalasa únicamente reacciona con un
PH optimo, si es muy acido o muy alcalino no abra reacción.

BIBLIOGRAFIA

Wikipedía
Eco. Sur
Uned.es
Hojas guía enzima.