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Ao de la Diversificacin Productiva y del Fortalecimiento

de la Educacin.
UNIVERSIDAD ALAS PERUANAS
FILIAL HUANCAYO
TEMA:
CURVA DE
CALIBRACION DE LA GLUCOSA

ALUMNO: GALLEGOS PALERMO, CHRISTIAN.


CARRERA: TECNOLOGIA MEDICA.
CICLO: III CICLO.
CURSO: BIOQUMICA CLNICA I.
DOCENTE: Lic. T M. Csar Manuel Snchez Alpaca.

PER - 2015

CURVA DE CALIBRACION DE LA GLUCOSA


Introduccin:
Es un mtodo de qumica analtica empleado para medir la concentracin de una
sustancia en una muestra por comparacin con una serie de elementos de concentracin
conocida. Se basa en la existencia de una relacin en principio lineal entre un carcter
medible (por ejemplo la absorbancia en los enfoques de espectrofotometra) y la
variable a determinar (concentracin). Para ello, se efectan diluciones de unas
muestras de contenido conocido y se produce su lectura y el consiguiente
establecimiento de una funcin matemtica que relacione ambas; despus, se lee el
mismo carcter en la muestra problema y, mediante la sustitucin de la variable
independiente de esa funcin, se obtiene la concentracin de esta. Se dice pues que la
respuesta de la muestra puede cuantificarse y, empleando la curva de calibracin, se
puede interpolar el dato de la muestra problema hasta encontrar la concentracin del
analito. Las curvas de calibracin suelen poseer al menos una fase de respuesta lineal
sobre la que se realiza un test estadstico de regresin para evaluar su fiabilidad.
La medida de la concentracin mediante un mtodo instrumental se basa en la
existencia de una relacin proporcional entre dicha concentracin y la seal analtica o
respuesta que genera un instrumento.
Generalmente esta relacin es lineal, de modo que puede expresarse como:
y =a+bCA
Donde CA es la concentracin del analito, y la seal medida, a la ordenada en el origen y
b la pendiente de la recta.
La ecuacin de la recta se obtiene mediante calibracin con disoluciones de
concentracin perfectamente conocida (disoluciones patrn) a partir de la medida de la
seal analtica proporcionada por stas. Los pares de valores concentracin-seal se
ajustan a una recta, a partir de la cual pueden obtenerse la concentracin del analito en
muestras desconocidas.

Preparacin de los patrones


Se preparan patrones del analito que cubran un intervalo adecuado de concentraciones,
y se mide la seal analtica proporcionada por los mismos.

Disoluciones del analito de concentracin conocida y creciente.


Obtencin de la relacin seal y concentracin
Se traza un grfico con las seales frente a la concentracin de analito y se calcula la
recta que "mejor" se ajusta a los datos mediante un ajuste por mnimos cuadrados. De
esta forma se obtiene la pendiente (b) y la ordenada (a) en el origen que definen la recta.

Grfico seal-concentracin y recta ajustada por mnimos cuadrados

Uso de la curva de calibrado


Se mide la seal analtica para las muestras desconocidas y se interpola en la recta de
calibrado para obtener valores de concentracin de analito.

Obtencin de la concentracin de analito en las muestras a partir de la grfica y la recta.


Finalmente, para obtener la concentracin de analito en la muestra hay que tener en
cuenta en los clculos las posibles diluciones a las que se ha sometido la muestra para
obtener las disoluciones M1, M2 y M3 de medida.
TUBOS
1
2
3
4
5
6

ESTNDAR
20 mg/dl
40 mg/dl
60 mg/dl
80 mg/dl
100 mg/dl
120 mg/dl

Llevar a bao maria por 37C X 5 min.


Leer a espectrofotmetro a 505 nm.

REACTIVO
1 ml
1 ml
1 ml
1 ml
1 ml
1 ml

ABSORBANCIA
0.100
0.150
0.200
0.250
0.300
0.350

TUBOS
1
2
3
4
5
6

CONCENTRACION

40
60
80
100
120
140

ABSORBANCIA
0.100
0.150
0.200
0.250
0.300
0.350

PACIENTE
0.322
0.225
0.265

CC

0.225

0.100

0.150

0.200

0.265

0.250

0.322

0.300

0.350