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DETERMINACIN DE COLIFORMES TOTALES Y FECALES

COLIFORMES TOTALES: Son bacilos gramnegativos, aerobios y anaerobios


facultativos, no esporulados. Que fermentan la lactosa con produccin de gas en
un lapso mnimo de 48 horas a 35 C. Este grupo est conformado por 4 gneros
principalmente: Escherichia, Enterobacter, Klebsiella, Citrobacter. Los
coliformes fecales Son un subgrupo de las coliformes totales que fermentan la
lactosa con produccin de cido y gas en presencia de sales biliares a 44 y 45C.
METODOS UTILIZADOS PARA LA DETERMINACION DE COLIFORMES
1. METODO DEL NUMERO MAS PROBABLE: Se basa en establecer la
presencia o ausencia de un determinado microorganismo, el mtodo se realiza en
forma paralela por triplicado o quintuplicadas proporciones de la muestra cada vez
menores en un medio lquido. Los resultados obtenidos se expresar en NMP/g o
mL para alimentos y NMP/100 mL para agua.
2. MTODO DE LA FILTRACIN EN MEMBRANA: El nmero de coliformes
totales se determina mediante filtracin a travs de filtros de membrana con poros
de 0,45 mm de dimetro que retiene las bacterias presentes en la muestra;
posteriormente se incuba en un medio EMB, selectivo para coliformes .Cada
colonia representa una bacteria coliforme viable proveniente de la muestra
original.
PRUEBA PRESUNTIVA: para determinar la presencia de organismos
fermentadores de lactosa, se usan los siguientes medios: Caldo Lauril Triptosa
(CLT), Caldo Mc. Conkey, Caldo lactosa. Incubar los tubos 24-48 horas a 35-37
C.
PRUEBA CONFIRMATIVA:La prueba confirmativa se realiza si la prueba
presuntiva arroja resultado positivo. Se utilizan los siguientes medios: Medio EC,
Caldo lactosado bilis verde brillante. Incubacin para coliformes totales: 35-37c
durante 24 horas Incubacin para coliformes fecales: 44.5 45.5c por 24 horas.
COMO SE TRABAJA UNA MUESTRA SOLIDA Y UNA MUESTRA LIQUIDA
Los alimentos lquidos se muestrean con pipetas despus de mezclarse bien.
En los alimentos slidos se presentan diversas tcnicas: lavado con agitacin en
un medio de muestreo lquido, Mtodo de la torunda, Mtodo de agar de contacto,
Muestreo destructivo, Taladra corchos preesterilizados, Escalpelos y cuchillos
tambin son utilizados pero no se puede controlar la relacin rea
superficial/volumen.
BIBLIOGRAFA
CALDERON Y PASCUAL, Vicente y PASCUAL ANDERSON, M. a Del Rosario.
Microbiologa alimentaria: metodologa analtica para alimentos y bebidas. 2 ed.
Madrid: Daz De Santos, 1999. 441 P.

P.R. Hayes, microbiologa e higiene de los alimentos. Espaa, Editorial ACRIBIA,


S.A.2001.369 P.