VerdeBrillanteBilis2%Caldo.

Estemedioestrecomendadoparaelrecuentodecoliformestotalesyfecales,porlatcnicadelnmeroms
probable.

Fundamento
Enelmediodecultivo,lapeptonaaportalosnutrientesnecesariosparaeladecuadodesarrollobacteriano,labilisy
elverdebrillantesonlosagentesselectivosqueinhibeneldesarrollodebacteriasGrampositivasyGramnegativas
aexcepcindecoliformes,ylalactosaeselhidratodecarbonofermentable.
Esunapropiedaddelgrupocoliforme,lafermentacindelalactosaconproduccindecidoygas.
Instrucciones

Frmula(engramosporlitro)
Bilisdebueydeshidratada
Lactosa

20.0

Suspender40gdelpolvodeshidratadoporlitrode
aguadestilada.Disolverydistribuir10mlportubocon
campanitadeDurham.Prepararadems,elmedioa
10.0
dobleconcentracin.Esterilizarenautoclavea121C
0.0133
durante15minutos.
pHfinal:7.20.2
10.0

Peptona
Verdebrillante

Siembra
a.Paraelanlisisdecoliformestotalesenmuestrasfluidas,sembrarportriplicado:10mlencaldodoble
concentraciny1mly0,1mlencaldosimpleconcentracin.
Nmero
detubos
3
3
3

Volumendela
muestra
10ml
1ml
0.1ml

Volumende
medio
10ml
10ml
10ml

Concentracin
delmedio
Doble
Simple
Simple

b.Paraelanlisisdecoliformestotalesenmuestrasslidas(alimentos,cosmticos,frmacos),efectuar
dilucionesseriadas10 1,10 2y10 3ysembrarcadadilucinportriplicadoenmediodecultivosimple
concentracin.
Nmero
detubos

Dilucindela
muestra

Volumendela
muestra

Volumende
medio

Concentracin
delmedio

10 1

1ml

10ml

Simple

10 2

1ml

10ml

Simple

10 3

1ml

10ml

Simple

c.Paraanlisisdecoliformesfecales,apartirdecadatubopositivoeneltestpresuntivodecoliformestotales
(provenientedeVerdeBrillanteyBilis2%CaldoMacConkeyCaldoLaurilSulfato,utilizandolatcnicadelNMP),
oapartirdecoloniaspresentesendiferentesmedios,quesepresumeseancoliformes,transferirunaansadaaun
tuboconVerdeBrillanteyBilisal2%caldofresco,incubandoa45+/0.5CyotraenAguaTriptonacon
incubacina3537C,paradetectarlaproduccindeindol.

Incubacin
aParadecoliformestotales:a3537Cdurante24horas.
bParacoliformes(fecales):a44.545.5Cdurante24horas.

Resultados
Positivo:presenciadegas.
Conelnmerodetubospositivos,calcularelnmeromasprobable.Elresultadoseexpresaporgramos100ml
deproducto
Negativo:ausenciadegas.
Microorganismos
EscherichiacoliATCC25922
Enterobacterspp.
KlebsiellapneumoniaeATCC700603
SalmonellatyphimuriumATCC14028
Bacteriasnofermentadoresdelactosa
StaphylococcusaureusATCC25923

Crecimiento
+
+
+
+
+

+**1025%decepasnegativasopositivas
#apartirdeAguaTriptona

Caractersticasdelmedio
Mediopreparado:verdeesmeralda,transparente

Almacenamiento:
Mediodeshidratado:a1035C.
Mediopreparado:a28C.
Presentacin
x100g:Cdigo:B0210705
x500g:Cdigo:B0210706

Gas
+*
+
+*

Indol#
+*
*
*

Variable