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Brazo
(forelimb)

Pierna
(hindlimb)

Stylopodo

Condylo: extremo (articular) del hueso

Trochanter: inserciones
musculares del fmur

Zeugopodo: Lado anterior (interno) Radio-Tibia

Lado posterior (externo) Ulna- Fbula

Aves

El mesopodo: nmero variable de elementos (muecatobillo) incluyendo 3 elementos proximales (que

articulan con el zeugopodo) Brazo: Radiale, Ulnare e
Intermedio , Pierna: Tibiale, Fibulare (tambien
conocidos como astrgalo y calcneo) e intermedio.
Hay un numero de elementos centrales (4 en el
ancestro de los tetrpodos modernos ), y elementos
distales tpicamente asociados a los dedos del
Metapodio.

El metapodio (mano: palma, pie: empeine) en

tetrpodos modernos consiste en 5 elementos o menos
(mano: metacarpos, pie: metatarsos) que constituyen
parte de los rayos digitales. Se numeran I a V desde
anterior (pulgar) a posterior (meique)
Los dgitos se encuentran distales al metapodio y estan
compuestos por falanges.
tetrapodos modernos (neotetrapoda): Todos los descendientes del
ancestro comn ms reciente compartido por los dos principales
grupos de tetrpodos vivientes (lisanfibios y amniotos)

El pulgar del panda es un hueso

neomrfico (nuevo) y sesamoide
Hueso sesamoide: osificacin
intratendinosa.
El hueso pisiforme tambin se
origina al interior de un tendn,
sin embargo hay quienes
afirman que corresponde al
elemento mesopodial C4

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AER permite el
crecimiento hacia
fuera

!JS)

El mesodermo
transplantado
mantiene la identidad
de la extremidad
(brazo o pierna)

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Identidad brazo o
pierna de primordios
Correlacin de la
identidad con la
expresin anterior de
Tbx5 y posterior de
Tbx4

Posible caso de thomesis epidrmica: Microraptor gui

ZPA: Zone of Polarizing Activity

Las identidad de las

condensaciones digitales
permanece indeterminada
hasta estadios tardios,
permitiendo la alteracion
experimental de la identidad
de una condensacin de
acuerdo al mesnquima
interdigital posterior a cada
condensacin (Dahn and
Fallon 2000).

Secuencia altamente conservada de formacin de cartlago; El eje primario de

formacion de cartlago
En una mano pentadctila tipica de tetrpodos modernos: El primer digito que inicia la
formacion de cartilago es el dedo 4, que est espacialmente en lnea con el calcneo/
ulnare y la ulna/fbula, definiendo un eje primario
Eje primario

Chelydra (tortuga) mano

Gallus (ave) pie

Burke and Feduccia 1997

Los genes HoxA y HoxD ms posteriores se expresan de manera

dinmica en la extremidad, con patrones de expresion tempranos y
tardos distintos (que afectan distintos segmentos proximo-distales)

En la fase tarda (III), los genes HoxD10, D11, D12, D13 y A13 se expresan en los dedos 2-5, en cambio slo
HoxD-13 y A-13 se expresan en el dedo 1

Origen de las extremidades pareadas

Hiptesis: Las extremidades son homlogas a aletas
longitudinales como la aleta media
Los primeros vertebrados slo posean la aleta media, que
incluye la regin caudal (de la cola). No posean aletas de las
extremidades (aletas pectorales y pelvicas). Las aletas
pareadas de las extremidades slo aparece en gnathostomos
troncales (stem gnathostomes)

Existen varias semejanzas embriolgicas

y de expresin gentica entre el primordio
de la cola y el de las extremidades,
incluyendo la presencia de un VER
(ventral ectodermal ridge) semejante al
AER

La expresin de genes Hox

posteriores podra deberse a que la
aleta original (la caudal) se encuentra
hacia la regin posterior del cuerpo.

Las aletas pareadas pectorales (brazos) surgen antes de las plvicas (piernas)

Aletas pectorales

Aletas plvicas

En todas las aletas se puede observar un eje central del cual se proyectan rayos (radiales) y que se
argumenta corresponde al eje principal de formacin de cartlago de las extremidades de tetrpodos

En sarcopterigios rhipidistianos (en la imagen, sauripteris en adelante) hay un patrn de

bifurcacin del eje metapterygio que se corresponde con el arreglo observado en tetrpodos
En tetrpodos troncales hacen su aparicin los dedos definitivos

Teora original sobre el origen de los dedos (basado en comparacin

de tetrpodos con zebrafish):
Los dedos se habran originado junto con fase tarda de expresin de
genes Hox
(Error en la imagen: La expresin de D-11 es la de D-13 y viceversa)

Correcin tras observar tiburones y actynoperygios basales: La fase 3 de expresin es mucho ms

antigua y perdida secundariamente en el linaje conducente a los telesteos. Los radiales parecen
corresponderse con el autopodo

Symphysis
Acetbulo

Hay polydactylia ancestral en tetrpodos troncales, luego prdida de dedos y pentadactilia en

el pie y la mano de los primeros tetrpodos modernos. En estos, el dedo ms anterior (dedo
1) es bifalangeal. Se denomina pollex en la mano y hallux en el pie

En Lepospndilos (Primeros
Batrachomorpha, ancestros de los anfibios
actuales) en la mano ha ocurrido una
reduccin a 4 dgitos. Estos pueden ser los
digitos 1,2, 3 y 4 pero en ranas, el eje
primario de formacin de cartlago sugiere
que son 2,3,4, y 5
Ntese la presencia de aparentes dedos
vestigiales prepollex, postminimus
Oster et al 1988

Presencia de prepollex y prehallux anterior al dedo 1 en manos (A) y pies

(B) de Xenopus.

Ojo: una sola costilla

sacral en anfibios

Los urodelos poseen extremidades de desarrollo anormal dentro de los

tetrapoda. La secuencia de formacion de cartilago es diferente (ocurre primero
hacia anterior, en el dedo 1). No hay AER morfologico y hay expresion
autopodial de HoxA-11

A partir de una diferencia en la

secuencia en que se forma el cartlago
en las extremidades de las salamandras
respecto a los dems tetrpodos,
Holmgren propuso una teora difiltica,
en que dos grupos de peces distintos
habran conquistado la tierra,
evolucionando las extremidades de
manera independiente.
En realidad, hay un slo origen de las
extremidades de los tetrpodos: es el
desarrollo el que ha cambiado en
salamandra.

Manus
Pes
En cambio, los tetrpodos mas cercanos a los amniotos que a los anfibios
modernos (anthracosaurios o reptiliomorphos) como Seymouria retuvieron la
pentadactilia ancestral en la mano y presentan un numero especifico de falanges
en cada dgito: 2-3-4-5-3 en la mano, y 2-3-4-5-4 en el pie

Manus

Pes

Captorhinus: amniote temprano ms cercano a el linaje reptiliano que al

linaje de los mamferos. Tambin presenta la frmula 2-3-4-5-3 en la mano
y 2-3-4-5-4 en el pie

Manus

Pes

Ophiacodon es un amnioto temprano ms cercano a los mamferos que a los

reptiles. Tambien presenta 2-3-4-5-3 en la mano y 2-3-4-5-4 en el pie. Por lo
tanbto toda la evidencia indica que esta formula estaba presente en el ancestro
comun mas reciente de los amniotos

Manus

Pes

La misma formula falangeal ha sido retenida por varias especies de lagaratijas

desd ele ACMR de los amniotos

Homeosis en la Evolucin del Ala de las Aves

Nueva Evidencia Comparativa y Experimental
Dr Alexander Vargas

Departamento de Biologa
Facultad de Ciencias Universidad de Chile

Origen del problema: Embriologa comparada vs. Morfologa comparada

El ala tridctila de las aves evolucion a partir de una mano reptiliana ancestral pentadctila; los dedos
del ala se desarrollan a partir de condensaciones cartilaginosas que en tetrpodos pentadctilos dan
origen a los dedos 2,3 y 4 (ndice, medio y anular)

2345

Ulnare

Ulna
Ulna

Alligator mississippiensis

Gallus gallus (chicken)

Burke and Feduccia 1998 Science 278: 666

El eje primario de formacin de cartlago en pentadctilos

siempre da origen al dedo 4 y est en lnea con la ulna y el
ulnare

Adems, es posible observar en el ala

la presencia de pequeas
condensaciones embrionarias que
aparentan ser un pulgar (dedo 1) y
meique (dedo 5) vestigializados

Embrin de avestruz (Struthio)

Nowicki & Feduccia 2002
Naturwissenschaften 89: 391

Sin embargo, la morfologa comparada (de taxa fsiles y vivientes)

identifica a los dedos del ala de las aves como 1, 2 y 3

Wagner y
Gauthier 1999
PNAS 96:5111
Solucin
propuesta:
1,2,3 = 2,3,4.
Inferencia de un
evento de
Desplazamiento
Hometico en
Serie (DHS)
(Homeotic Frameshift ) en la
evolucin del ala

A algunos puede tomarles un tiempo entusiasmarse con el DHS

Feduccia 1999 PNAS

(A) Alligator (B) The early ornithischian dinosaur Heterodontosaurus (C) The early theropod Herrerasaurus (D) The Neotheropod
Coelophysis (E) The tetanuran Allosaurus (F)The early maniraptoran Ornitholestes (G) the early bird Archaeopteryx (H) the
enanthiornithe Sinornis (I) nestling of the modern Opisthocomus (J) 12.5 day embryo of the duck Anas (K) the adult chicken Gallus
gallus (L) Adult Opisthocomus.

Cambios de identidad especificados por mesnquima interdigital posterior a cada dedo A)

Esquema de B) retirada de interdgito (ID) posterior a dedo 2 C) retirada de interdgito posterior a dedo
3 D) Control: injerto de condensacin 2 en ID 2 y E) condensacin 3 en ID 3. F) Condensacin 3 en ID
2 G) Condensacin 2 en ID 3
Dahn y Fallon 2000 Science 289: 438

En extremidades en que no hay controversia sobre la identidad de los dedos

(ratn, pie del pollo) la expresin de genes Hox se utiliza para identificar el
desarrollo del dedo 1. HoxD-10, HoxD-11 y HoxD-12 estn ausentes slo en el
dedo 1, pero se expresan en todos los dems dedos. HoxD-13 y HoxA-13, en
cambio, se expresan en todos los dedos, includo el dedo 1

HoxD-12

HoxD-13
1

Brazo

4
5

Pierna

11.5

12.5

11.5

Chiang et al 2001 Dev Biol 236: 421

12.5

EXPERIMENTOS FUNCIONALES

Expresin forzada de HoxD-12 en el dedo 1 de

ratn: transformacin a un dedo 2
Expresin forzada de
HoxD-11 en dedo 1 del
pie del pollo:
transformacin a un dedo
2

Expresin forzada de HoxD-12

en pie de pollo (colaboracin
con Fallon lab) sugiere
conservacin funcional de
HoxD-12 en ratn y pollo
(pese a 300 millones de aos
de divergencia evolutiva)

Pie pollo

HoxD-13

Mano ratn

HoxD-12

HoxD-13

HoxD-12

Mano de pollo (dias 7 y 8)

Vargas and Fallon 2005 JEZ B (MDE) 304:86

En el ala, HoxD-10, HoxD-11 y HoxD-12 estn ausentes slo en el dedo

bifalangeal anterior del ala.
La expresin gentica sugiere que este es un dedo 1, pese a
desarrollarse a partir de la posicin embriolgica del dedo 2.
Vargas & Fallon 2005 JEZB (MOL DEV EVOL) 304:86

Qu tal si la ausencia de expresin de HoxD-12 es slo cosa de ser el

dedo ms anterior?
Los mutantes de pollo talpid2 y Silkie presentan un pie con un eje anteroposterior alterado. talpid2 muestra un pie posteriorizado y polidctilo, sin
dedo 1. En Silkie, el dedo ms anterior no es el dedo 1 sino un dedo 2
ectpico

Vargas & Fallon 2005 JEZB 304:86

Talpid2

Silkie

En ratn, HoxA-13 se expresa en todos los dedos, pero slo el dedo 1 requiere
HoxA-13 para su formacin. Es el nico dedo que desaparece en ausencia de
funcin de HoxA-13

Image from Fromental-Ramain et al. 1996

Para observar la funcin de HoxA-13 en el ala, un alelo dominante negativo

(putativo) para HoxA-13 fue contruido que comprende una fusion of dominio
represor de la transcripcin del gen engrailed de drosphila y una regin de
HoxA-13 (EnHoxA-13) en un vector retroviral que fue electroporado en el
primordio del ala en estadio 17

Datos preliminares: Como resultado, el dedo anterior del ala dej de

formarse sugiriendo que slo este dedo requiere HoxA-13, tal como el
dedo 1 del ratn.

Ratn

Desplazamiento
Hometico
en Serie:
Identidad y
expresin de
HoxD10-12
hacia posterior

Pollo

Pero, el ratn es slo un

pariente lejano de las
aves. Los crocodylia son
los parientes vivos ms
cercanos a las aves.

Aproximacin
comparativa:
Si el dedo ms anterior
del ala es un dedo 2, es
posible que en los
crocodilia el dedo 2 no
exprese HoxD-10, HoxD-11
y HoxD-12

Si, de acuerdo al DHS, la

ausencia de HoxD-10,
HoxD-11 y HoxD-12 en el
en el ala de las aves
indica, como en el ratn,
el desarrollo del dedo 1, la
ausencia de expresin
debiera observarse slo
en el dedo 1 de parientes
ms cercanos de las aves

Clonamos un fragmento del exon 1 de HoxD-11 de Alligator

mississippiensis para observar su expresin en dedos embrionarios.

Vargas et al 2008 PLoS ONE 3(10): e3325

Como en el ratn, en Alligator, HoxD-11 est ausente slo en el dedo 1

bifalangeal; el dedo anterior del ala se parece exclusivamente al dedo 1 de
Alligator
Esto es consistente con el DHS, que mantiene que los dedos del ala son 1,2 y 3
pese a desarrollarse a partir de las condensaciones 2,3,y 4

Vargas et al 2008 PLoS ONE 3(10): e3325

La evidencia experimental: Es posible un DHS

en el lab?

La transformacin hometica de dedos se ha

documentado, pero slo para dedos
individuales
Dahn y Fallon 2000 Science 289:438

Sin embargo, nunca se ha demostrado el desplazamiento en serie,

simultneo de ms de un dgito. Podemos inducir un DHS de manera
experimental?
La aplicacin de cyclopamina en estadios 18-20 produce alas bidctilas
con dedos 1 y 2.

Scherz et al. 2007 Dev Biol 308:343

Dnde est el eje primario

de formacin de cartlago en
estas alas experimentales?

=2*>8&$#12?')2*')@'5,*$2*-,A2$'B2&'()*+,*C@@D*%)*?#3:(;,)#*.%,*-,*/32)-&3'5,*
,)*%)2*3,;'()*1#-/,3'#3D*+,-+,*+#)+,*-%*13#/,<)2*+'-?')%8,*-%*&#)&,)/32&'()*
,)*;32+',)/,*@2&'2*2)/,3'#3*

Cyclopamine

En 9/54 casos, las alas bidctilas presentaron un cartlago anterior al

dedo 1 que no se desarrolla en un dgito. Esta puede corresponder a
clulas con potencial condrognico que normalmente producen un
dgito pero que quedan vacantes (sin identidad especificada) tras el
DHS hacia posterior

Wildtype

Cyclopamine-Treated

La expresin de
HoxD-12 tambin
est desplazada, una
posicin digital ms
cerca del eje
primario de
formacion de
cartlago

La prdida del dedo

posterior, el
desplazamiento
de la morfologa y de
la expresin de
HoxD-12, y la
aparicin de un
cartlago anterior
vestigial, fueron
todas previamente
implicadas para el
DHS evolutivo. Esto
sugirie que el
mecanismo del DHS
se sobrepone con el
de la va de
sealizacin de Shh

Conclusiones

Como previamente no se haban

descrito desplazamientos
hometicos en serie experimentales,
la aplicacin de cyclopamina
confirma una posibilidad mecanstica
que previamente haba sido inferida
mediante comparaciones evolutivas.
(La naturaleza no hace distincin
entre ciencias experimentales y
comparativas; los mismos
mecanismos se ven reflejados en
ambas)

La ausencia de HoxD-12, HoxD-11 y HoxD-10 en dedo 1 es ancestral para

amniotos y conservada en ratn y pollo
El caso del ala de las aves ejemplifica cmo el origen embriolgico
puede no ser infalible como indicador de homologa (pese a que
generalmente funciona)