PRCTICA # 2

CONTROL DE CALIDAD DE EQUIPOS, CENTRFUGA DE SEROLOGA, Y

DE MICROHEMATOCRITO.
CALIBRACIN DE CENTRFUGAS DE SEROLOGA
Como parte de un sistema de Control de Calidad,
se deber asegurar la ptima obtencin de
productos y/o resultados, garantizando un
adecuado funcionamiento de los equipos que se
utilizan para tal fin.
La
centrfuga
serolgica
utilizada
en
Inmunohematologa, deber tener como propiedad
poder alcanzar su mxima velocidad de 3500 rpm
a los 5 segundos de haber sido puesta en marcha
y a su vez, luego de mantenerse en esa velocidad
el tiempo pre fijado en el temporizador, deber
desacelerar (frenar) y detenerse completamente en
un lapso de 10 segundos.
A su vez, la intensidad de la centrifugacin deber
ser lo suficiente como para que siempre se forme
un botn de hemates que se mantenga como tal
en una reaccin dbil as como para no permitir que
haya falsos resultados positivos por aglomeracin
de los mismos.

Muestras

Suspensin de hemates de Muestra 1 al 5 %, considerarlos como control

POSITIVO.
Suspensin de hemates de Muestra 2 al 5%, considerarlos como control
NEGATIVO
Frasco gotero con Reactivo 2

MATERIALES

Tubos de vidrio, de 12 x 75
Pipetas Pasteur de vidrio, chupn de goma
Lpiz de cera.

EQUIPO

Centrfuga de serologa
Aglutinoscpio

PROCEDIMIENTO
1. Preparar dos series de tubos de vidrio 12 x 75 mm, de 5 tubos cada una, la
primera rotularla como POSITIVO, la segunda como NEGATIVO.
2. Agregar una gota de las clulas respectivas (muestra 1: positiva; muestra 2:
negativa), y dos gotas del frasco gotero Reactivo 2 a cada serie, justo
inmediatamente antes de centrifugar.
3. Se centrifugan los tubos por parejas, positivo y negativo.
4. El primer par comenzando por 10 Segundos, se lee, se anota y se descarta.
5. A continuacin se hace lo mismo con cada par aumentando en 5 segundos.
POSITIVO
Muestra 1 al 5%

NEGATIVO

1 gota

Muestra 2 al 5%

1 gota

Reactivo 2

2 gotas

2 gotas

Centrifugar por parejas a 3500 r.p.m. comenzando por 10 segundos

Anotar resultados segn tabla adjunta
Repetir los pasos anteriores, ir incrementando el tiempo cada vez.

Se evala por cada tiempo:

a. Delimitacin del botn
b. Facilidad de desprendimiento
c. Grado de aglutinacin resultante
d. Sobrenadante libre de hemates.

Los resultados que se vayan obteniendo se anotan en la hoja de trabajo

dispuesta para el efecto.
Criterios de Control

10

15

20

30

45

+ - + - + - + - + Liquido sobrenadante claro

Botn celular claramente definido
Clulas fcilmente resuspendidas
Reacciones negativas bien definidas
Grado de aglutinacin para positivos

INTERPRETACIN
El tiempo ptimo de centrifugacin es el tiempo ms corto necesario para cumplir
estos criterios:
1. La aglutinacin en los tubos positivos es tan fuerte como se determina al
preparar los reactivos.
2. No hay aglutinacin ni ambigedad en los tubos negativos.
3. El botn celular est claramente delineado y el borde se observa bien
definido, no velloso.
4. El lquido sobrenadante es claro.
5. El botn de clulas se resuspende fcilmente.
6. De acuerdo con los resultados obtenidos se escoge el tiempo mnimo en el
cual el tubo POSITIVO resulte un botn bien delimitado, fcil de desprender,
con una aglutinacin clara (1+) y el sobrenadante libre de hemates; y el
NEGATIVO presente un botn ntido, que se disgregue fcilmente.
CALIBRACIN DE CENTRFUGA DE MICROHEMATOCRITO
PRINCIPIO

Las centrfugas usadas para determinacin de microhematocrito, como todo

equipo de laboratorio, deber comprobarse su tiempo ptimo de trabajo: al
recibirlas, despus de repararlas y si no hay un programa calendarizado de
aseguramiento de la calidad por lo menos una vez por ao.

Su temporizador y la velocidad deben comprobarse cada 3 o 4 meses.

Un mtodo de calibracin que proporciona vigilancia de calidad y permite

seleccionar el tiempo ptimo de centrifugacin consiste en examinar muestras
idnticas de suspensin de hemates dentro, por debajo y por encima de la gama
aceptable de hematocrito.

El tiempo mnimo en que ocurre la mxima concentracin se selecciona entonces

para uso rutinario.

MATERIAL

Centrfuga de microhematocrito a estandarizar

Capilares de microhematocrito sin heparina
Plastilina
3 Muestras de sangre anticoagulada (EDTA) con hematocrito conocido: normal,
bajo y alto.
Tabla de lectura de microhematocrito.

PROCEDIMIENTO
1. Homogenizar cuidadosamente las muestras de sangre.
2. Para cada muestra, llenar dos capilares de hematocrito, hasta 1 cm del borde
del capilar y sellarlos con plastilina.
3. Colocarlos en la centrfuga de microhematocrito y centrifugar durante 2
minutos.
4. Al leer, observar el color de los hemates empacados y del plasma. La columna
de los hemates ha de ser uniforme, el plasma trasparente y la lnea de
delimitacin entre ambos, ntida.
5. Medir y registrar cada hematocrito.
6. Repetir los 5 pasos anteriores, incrementado los tiempos de centrifugacin de
minuto en minuto hasta llegar a 10 minutos. Comparar los valores del
hematocrito de cada muestra en los diferentes tiempos de centrifugacin.
Tiempos de centrifugacin
2

10

Hematocrito Bajo
Hematocrito Normal
Hematocrito Alto

INTERPRETACIN
Para uso rutinario, seleccionar el tiempo de centrifugacin ms corto que d la lectura
ms baja.