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Tesis Pleurotus Ostreaus PDF
Tesis Pleurotus Ostreaus PDF
DIRIGIDO POR
MSc. MARTHA STELLA HOLGUN H
CODIRECTOR
MSc. NESTOR ARIEL ALGECIRA ENCISO
AGRADECIMIENTOS
A Julin Guevara, de Fungita por facilitar sus instalaciones, recursos y
empleados para la produccin de las setas empleadas en el estudio.
Al Instituto de Ciencia y Tecnologa de Alimentos (ICTA) de la Universidad
Nacional de Colombia, sede Bogot y a su director, Dr. Carlos Novoa por
permitirme realizar mi trabajo experimental y darme la oportunidad de
trabajar en el marco de otras investigaciones realizadas en el Laboratorio
de Control Microbiolgico del Instituto.
Nuevamente, a la profesora Martha Stella Holgun, por brindarme la
confianza de trabajar en el laboratorio y compartir conmigo conocimientos y
experiencias de vida.
Al profesor Nestor Algecira, por brindarme la oportunidad de ingresar al
programa de especializacin y confiar en m.
A Gregorio Medina, tcnico del Laboratorio de Control Microbiolgico del
ICTA, por compartir todo su conocimiento conmigo y brindarme apoyo en mi
trabajo experimental.
A la Dra Sci. Ivonne Nieto, profesora de la Facultad de Qumica de la
universidad por darle un nuevo empuje a mi carrera y por darme la
oportunidad de trabajar con ella.
Al MSc Luis Carlos Veloza, por su inmenso apoyo, confianza y amistad.
A Kelly y a Susana, por su impagable colaboracin en el laboratorio.
A lvaro Jimnez y a todos los ingenieros, estudiantes, tcnicos y dems
empleados del ICTA, por su colaboracin e inters en m.
mushroom,
mycelia
production,
synthetic
media,
spawn
CONTENIDO
INTRODUCCIN ............................................................................................ 14
2.
3.
4.
JUSTIFICACIN ............................................................................................. 36
5.
OBJETIVOS .................................................................................................... 38
5.1 OBJETIVO GENERAL.................................................................................. 38
5.2 OBJETIVOS ESPECFICOS ........................................................................ 38
6.
7. RESULTADOS................................................................................................... 42
7.1 EVALUACIN PRELIMINAR DE LAS METODOLOGAS ............................ 42
7.2 DESCRIPCIN DE LAS METODLOGAS EMPLEADAS PARA EL
AISLAMIENTO DEL MICELIO............................................................................ 43
7.3 EVALUACIN DE LOS MEDIOS DE CULTIVOS SINTTICOS PARA EL
AISLAMIENTO Y PRODUCCIN DE MICELIO ................................................. 50
7.4 DETERMINACIN DE LA CINTICA DE CRECIMIENTO DE Lentinula
edodes, Pleurotus ostreatus Y Pleurotus pulmonarius EN LOS DIFERENTES
MEDIOS DE CULTIVOS .................................................................................... 52
LISTA DE FIGURAS
pag.
Figura 1.
Figura 2.
22
Figura 3.
24
Figura 4.
25
Figura 5.
Figura 6.
Figura 7.
Figura 8.
29
Figura 9.
29
Figura 10.
31
Figura 11.
Estructura de la eritadenina
31
Figura 12.
32
Figura 13.
Figura 14.
Figura 15.
con
actividad 28
carpforo
Figura 16.
Figura 17.
Figura 18.
Figura 19.
Figura 20.
Figura 21.
Figura 22.
Figura 23.
Figura 24.
Figura 25.
Figura 26.
59
Figura 27.
59
Figura 28.
63
Figura 29.
Figura 30.
LISTA DE TABLAS
pg.
Tabla 1.
Tabla 2.
Tabla 3.
Tabla 4.
Tabla 5.
Tabla 6.
Tabla 7.
Tabla 8.
60
LISTA DE ANEXOS
pag.
Anexo 1.
Anexo 2.
Anexo 3.
Anexo 4.
1. INTRODUCCIN
14
15
2. MARCO TERICO
Las setas han sido parte de la dieta humana desde tiempos inmemoriales, siendo
usados como alimentos, an antes de que el hombre entendiera el manejo de
otros organismos. Para los antiguos romanos estos eran la comida de los dioses,
resultado de los rayos que chocaban contra la tierra empleados por Jpiter
durante las tormentas; los egipcios los consideraban un regalo del dios Osiris,
mientras que los chinos los vean como el elixir de la vida (Smith et al. 2002).
Son considerados tanto una solucin para la desnutricin como una cura para el
cncer y otras enfermedades (MushWorld. 2004). Algunas investigaciones
cientficas han concluido que hay aproximadamente 10000 especies que poseen
una estructura y tamao suficiente para ser consideradas como posible fuente de
alimento. Sin embargo, esto no quiere decir que estas 10000 especies sean
perfectamente digeribles por el cuerpo humano. Se calcula que aproximadamente
1000 de estas especies son venenosas y que el 5% de ellas son consideradas
mortales. Dentro de las 9000 restantes, no todas son consumibles directamente;
algunas slo son tiles para el ser humano de manera indirecta, requieren de
algn tipo de descomposicin qumica o de tratamiento. Es as como las setas
pueden ser medicinales, alimenticias, alucingenas y venenosas (Arias et al.
2008).
Seta
Protena
Carbohidratos
Grasa
Fibra
Valor
energtico
(Kcal/100 g)
Lentinula
edodes
13,4 17,5
66,5 78,0
4,9 8,0
7,3 8,0
387 392
Pleurotus
spp.
10,5 30,4
57,6 -81,8
1,6 2,2
7,5 8,7
345 367
Las setas tambin contienen todos los aminocidos esenciales as como las
amidas y los aminocidos no esenciales ms comunes; la lisina, cuyo contenido
es bajo en la mayora de los cereales, es el aminocido ms importante en estos
organismos, por lo cual la protena mictica se convierte en un importante aporte a
la dieta humana.
minerales como el calcio, potasio, sodio y fsforo, adems del cido flico, un
ingrediente que enriquece el torrente sanguneo y previene deficiencias como la
anemia. El hierro tambin est presente en los hongos en una cantidad apreciable
y junto con el fsforo, puede proporcionar una buena cantidad de las necesidades
dietticas diarias recomendadas. Los hongos son bajos en sodio, hacindolos
ideales para personas con ciertos tipos de dolencias del corazn y del rin
(MushWorld. 2004).
Seta
Tiamina
Niacina
Riboflavina
Ca
Fe
Na
Lentinula
edodes
7,8
54,9
4,9
98
476
Nd
8,5
8,5
Pleurotus spp
4,8
108,7
4,7
33
1348
3793
15,2
8,3
farmacuticas del lejano oriente que estn viendo en los hongos una rica fuente de
molculas biomdicas innovadoras (hongos medicinales).
Pleurotus
pulmonarius
19
Bronquitis crnica
Potenciador Sexual
Tnico Nervioso
Hepatoprotector
Tnico de riones
Inmunomodulador
Antidiabtico
Hipercolesterolemia, Hiperlipidemia
Antibacterial y Antiparastico
Desordenes cardiovasculares
Antiviral (anti-VIH)
Pleurotus
ostreatus
Antitumoral
Lentinula
edodes
Antiinflamatorio
Antifngico
Los hongos macromicetos estn formados por hifas ramificadas que se renen en
cordones y cuerpos de reproduccin visibles. Son saprfitos ya que crecen en
materia descompuesta absorbiendo materia orgnica, en simbiosis con plantas,
formando ectomicorrizas o como parsitos sobre los rboles (Pedreros. 2007).
2.1.1.2 Basidiomycetes. Las esporas que dan nombre al grupo son las
basidiosporas, producidas exgenamente en rganos especiales, los basidios. En
los Basidiomycetes superiores se producen cuatro basidiosporas tpicamente y los
basidios se encuentran en laminillas (lamelas) de los basidiocarpos carnosos. Los
Basidiomycetes inferiores tienen un ciclo vital ms complicado y su lugar en la
clasificacin no es muy seguro. Un buen grupo de especies de Agaricales (hongos
con laminillas) pueden desarrollarse en cultivos artificiales (Stamets. 2000).
22
2.1.1.4 Orden agaricales. Los hongos pertenecientes a este orden, son hongos
que se caracterizan por tener esporas de color caf chocolate, presentar anillos
diferentes a partir de un velo parcial y laminillas o agallas libres. Lo integran tanto
especies comestibles, como venenosas. Pueden ser saprfitos, parsitos o
ectomicorrizicos.
2.1.2 Orellanas. Los hongos ostra (como son conocidos en Estados Unidos,
Europa y Asia) u orellanas (como son conocidos en Colombia), forman parte del
grupo de hongos comestibles ms populares, pertenecen al phylum
Basidiomycetes, familia Pleurotaceae, orden Agaricales y al gnero Pleurotus. Al
igual que las orellanas, muchos de los Pleurotus son descomponedores primarios
de rboles de madera dura y se encuentran en todo el mundo. Su carpforo es
redondeado con la superficie lisa, abombada y convexa cuando es joven,
aplanndose en su proceso de maduracin, sus colores pueden variar desde azul
oscuro, hasta crema, blanco, caf, gris, amarillo y rosado, sin embargo, el color del
carpforo puede variar de acuerdo a las condiciones ambientales, puede ser
oscuro en condiciones fras y claro en condiciones de luz y calor. Su tamao
puede variar de 5 a 30 cm de dimetro. El cuerpo fructfero generalmente es
pequeo cuando crece en troncos y es ms grande cuando se cultiva en tubulares
sintticos con otros substratos. El pie es excntrico o lateral, sin embargo cuando
llega al sombrero, es central (Chang, Miles. 2004). Las esporas son pequeas,
ovoides, casi cilndricas, que en gran nmero forman masas de polvo de color
blanco con cierta tonalidad violcea (Guarn, Ramrez. 2004).
24
lamelas. Se ha sugerido que las setas del gnero puedan ser recomendadas como
disminuidores de colesterol naturales dentro de la dieta humana.
26
hongo puede ser a veces irregular. Otra caracterstica particular, son las manchas
blancas formadas en la cutcula pero que con el tiempo se pueden oscurecer a
medida que el hongo se va deteriorando; su pie es centrado cuando est unido al
sombrero, corto y con remanentes del velo. Sus esporas blancas en masa,
tetrapolares, formando cuatro esporas en el basidio (Stamets. 1983. Guarn et al.
2004).
29
Compuesto Activo
Tipo de Compuesto
Propiedad
Eritadenina
Derivado de adenosina
Hipolipidmico
C-1-2
Polisacrido
Inmunoactivo
Lectina
Protena
Inmunoactivo
Lentinan
Polisacrido
Inmunoactivo,
anticancergeno,
antiviral, antibacterial
Emitanina
Polisacrido
Inmunoactivo
EP3
Lignina
Antiviral, inmunoactivo
KS-2, KS-2-B
Pptido
------
Poliribonucletidos
Inmunoactivos
Ac2p
Polisacrido
Antiviral
FBP
Protena
Antiviral
Tioprolina (TCA)
Aminocidos
Eliminador de nitritos
Ergosterol
Esterol
Anticancergeno
31
33
Otro de los problemas para la produccin de este tipo de hongos es que son
cepas forneas, tradas del Asia, por lo cual la semilla es costosa y de difcil
adquisicin. Con esto, los costos de produccin se incrementan convirtindolos en
productos inviables para la economa de quienes desean incursionar en este
mercado y hace que la creacin de este tipo de empresas sea muy reducido, por
no decir nulo; adems, este tipo de empresas ayudan a la generacin de empleo y
pueden generar proyectos productivos para tipos de poblacin de bajos recursos y
con exclusin social (Arias et al. 2008).
35
4. JUSTIFICACIN
Con este proyecto, se busca desarrollar tecnologa para que la produccin de este
tipo de alimentos sea accesible a cualquier pblico y poder llegar a suministrar una
protena de bajo costo al tener semillas para la produccin de buena calidad y
viabilidad. Al desarrollar este tipo de cultivos, se genera un impacto en la
generacin de empleo y la calidad de vida de muchas personas debido a la
generacin de industria, un problema que aqueja a la poblacin colombiana.
Por otro lado, se podra incentivar el cultivo de ste tipo de hongos para usos
medicinales, el beneficio de los hongos no se da solamente por la ingesta directa
de ste, sino que poran ser procesados de maneras diferentes para aislar los
componentes, ya conocidos, que tienen actividades benficas para la salud. Esto
podra inquietar a compaas farmacuticas para la compra de los carpforos y de
esta manera hacer ms accesible estos componentes benficos a la poblacin.
stos productos alimenticios son muy bien pagos debido a las exenciones
arancelarias que gozan en la Unin Europea y Estados Unidos (Daz et al. 2001),
lo que permitira que las ganancias sean mayores en los productores y
exportadores, lo que repercutira en la economa y la calidad de vida de la
poblacin del pas.
37
5. OBJETIVOS
38
39
Los medios de cultivo especficos para evaluar el crecimiento del micelio fueron:
PDA (Agar Papa Dextrosa) Oxoid, OGY (Oxytetraciclina, Extracto de Levadura y
Glucosa) Oxoid y Sabouraud Difco. Se tomaron trozos de 4x4 mm de los
cultivos puros y se sembraron en la superficie de cada uno de los agares. Los
medios inoculados fueron incubados a 25C durante el tiempo que emple el
hongo en colonizar toda la caja de 9 cm (Villegas et al. 2007), se evalu el
crecimiento del hongo por su avance radial en la caja, con mediciones cada 48
horas con un calibrador (Mitutoyo).
H0: No hay diferencias significativas en el crecimiento del hongo, para los medios
de cultivo utilizados.
41
7. RESULTADOS
Para realizar los aislamientos, se emple slo un tipo de agar para que no
hubieran diferencias en los resultados debido a las diferencias del agar, el medio
de cultivo empleado fue PDA (Oxoid ).
destilada durante 24 horas para que las esporas liberadas sean atrapadas por el
agua y luego con diluciones, se sembraron en fondo y en superficie en el agar; y la
tercera el aislamiento de las esporas en agar-agar, poniendo el carpforo en una
cmara hmeda la cual en el fondo tiene placas microscpicas cubiertas con agaragar que capturen las esporas liberadas y luego de 24 horas de incubacin a 22C
+/- 2C el agar de las placas microscpicas es cortado en pequeos cuadros de
4x4mm y puestos por siembra central en las placas de agar. La tcnica de
aislamiento por agua result ser la menos indicada para el aislamiento, ya que el
ndice de contaminacin es de casi del 100% y obtener un micelio puro en estas
condiciones resulta muy engorrosos y se necesitara de muchos pases lo que
provoca un cambio gentico en la cepa y por consiguiente una posible disminucin
en la calidad en la cepa.
METODLOGAS
EMPLEADAS
PARA
EL
separacin tal que las hifas tuvieran suficiente espacio para crecer (figura 13). Las
placas fueron incubadas a 22C +/-2C, por 5 das o hasta que las placas fueran
cubiertas completamente por el micelio. El agar fue cortado con un escalpelo
estril en trozos de agar de 4mm de lado y trasferidos a placas de los agares
evaluados (PDA, OGY y Sabouraud), sembrados en forma central. Las cajas
fueron incubadas a 22C +/-2C hasta que las cajas fueran cubiertas
completamente por el micelio (aproximadamente una semana para los dos
primeros medios), para posteriormente usar este micelio para la produccin de
semilla o spawn. La figura 14 muestra el diagrama general de sta metodologa.
Figura 13. Crecimiento del micelio de los trozos de carpforos de Pleurotus ostreatus
desinfectados
44
CARPFORO
Cortar cuadros de
4mm de lado con
un escalpelo
estril en un
ambiente estril.
Desinfectar con un
lavado con alcohol al 70%
y otro enjuague con agua
estril
Sembrar en superficie en
placas de agar PDA cinco
trozos de carpforo. E incubar
a 22c por 5 das
45
Figura 15. Cmara hmeda para el aislamiento del micelio a partir del carpforo
46
De cada cultivo puro de cada gnero se realiz un cultivo madre (R1) para
desarrollar posteriores cultivos para la produccin de micelio y semilla y
lgicamente, la preservacin de la cepa.
48
CARPFORO
49
DIA 2
L. edodes
P.
pulmonarius
P. ostreatus
DIA 4
DIA 6
DIA 8
PDA
11,8
31
44,4
OGY
0,4
10,8
17,2
25,6
38,8
45
SABOURAUD
0,3
13,4
19,2
29,6
39,6
PDA
10,4
36,8
45
OGY
11,6
20,6
31,6
45
SABOURAUD
1,2
6,2
11,2
17,8
27,2
PDA
2,6
7,2
23,4
37,4
45
OGY
2,8
14,2
23,6
34,4
41,6
45
SABOURAUD
1,2
4,6
7,6
11,8
16,6
24,8
50
33,8
Para todas las cepas, se observa que el medio de cultivo que fue ms
rpidamente invadido fue PDA, Lentinula edodes y Pleurotus pulmonarius fueron
las cepas que tuvieron un crecimiento ms rpido en este medio, invadieron la
caja en 8 das, mientras que Pleurotus ostreatus tuvo un crecimiento ms lento en
este tipo de agar. El segundo medio de cultivo ms rpido fue OGY, mientras que
Sabouraud tuvo un pobre crecimiento, a tal punto que el crecimiento micelial se
detuvo en un momento determinado. Las figuras 19, 20 y 21 muestran el
crecimiento micelial de las cepas en los tres medios de cultivo a los 4 das.
Figura 19. Crecimiento de Lentinula edodes en los medios PDA, OGY y Sabouraud a los 4
das
Figura 20. Crecimiento de Pleurotus pulmonarius en los medios PDA, OGY y Sabouraud a
los 4 das
51
Figura 21. Crecimiento de Pleurotus ostreatus en los medios PDA, OGY y Sabouraud a los 4
das
52
Figura 22. Crecimiento Lentinula edodes segn los medios de cultivo evaluados
Figura 23. Crecimiento Pleurotus pulmonarius segn los medios de cultivo evaluados
53
Figura 24. Crecimiento de Pleurotus ostreatus segn los medios de cultivo evaluados
Las grficas nos muestran que el crecimiento en PDA fue ms rpido para todas
las cepas el segundo mejor medio fue OGY y por ltimo Sabouraud. El tipo de
crecimiento filamentoso o algodonoso indica cualitativamente la produccin de
biomasa de las cepas, sin embargo, para determinar cuantitativamente dicha
produccin se procedi a realizar diferentes clculos matemticos en base a la
ecuacin logstica de Velhurst-Pearl (1), originalmente desarrollada para el
crecimiento de una poblacin (Viniegra-Gonzlez et al. 2003).
dX =
1X
dt
(1)
XM
Donde X es la densidad de biomasa (g por l, por cm2 o por kg), M la rata mxima
de crecimiento especfico, (h-1, da-1) y XM, el nivel de equilibrio para X donde,
dX/dt=0 para X >0. La solucin de la ecuacin se da en la ecuacin 2.
54
X(t)=
XM
(2)
Tomando la ecuacin 2, se halla M para cada uno de los medios de cultivos y las
cepas para cada uno de los das de experimentacin (Anexo 3), luego, estos
especficos son graficados nuevamente contra el tiempo y se toma la lnea de
tendencia lineal para cada curva para poder obtener una linealizacin de los datos.
Con esta lnea de tendencia se calcularon nuevamente los radios (tericos) de
crecimiento y se graficaron. Se adicion una lnea de tendencia exponencial para
obtener la ecuacin tpica de crecimiento microbiano (3) (Anexo 4). La tabla 6
muestra las ecuaciones obtenidas con los datos experimentales y ajustadas a las
ecuaciones 1 y 2.
Y= Aekt
55
(3)
PDA
R2
OGY
R2
Sabouraud
R2
Lentinula
edodes
Y=
0,9879e0,8051x
0,9796
Y=
1,3985e0,5456x
0,918
Y=
1,2616e0,5332x
0,9607
Pleurotus
pulmonarius
Y=
0,9659e0,817x
0,9678
Y=
1,4258e0,6145x
0,9557
Y=
1,4339e0,4896x
0,9738
Y= 1,233e0,648x
0,9621
Y=
1,9369e0,5136x
0,8829
Y=
1,5982e0,3982x
0,9856
Medio
Hongo
Pleurotus
ostreatus
La tabla 7 muestra los especficos para cada una de las cepas y para cada uno
de los medios de cultivos evaluados.
56
Tabla 7. Rata de crecimiento especfico (, da-1) para cada una de los medios de cultivo y
cada uno de los hongos evaluados
Medio
PDA
OGY
Sabouraud
Lentinula edodes
0,8051
0,5456
0,5332
Pleurotus
pulmonarius
0,817
0,6145
0,4896
Pleurotus ostreatus
0,648
0,5136
0,3982
Hongo
Despus de que los frascos con los granos estn a temperatura ambiente, son
inoculados; se toman cuadrados de agar de 1 cm de lado y se distribuyen en el
frasco que contiene los granos, entre 3 y 4 cuadrados de agar son suficientes para
57
que haya una rpida y efectiva infeccin de los granos (figura 25). Se incubaron en
oscuridad a 22C +/-2C por el tiempo que fuera necesario hasta que se observara
una infeccin completa de los granos, a la semana de incubacin, los frascos
fueron agitados para que hubiera una distribucin homognea del micelio y de
humedad.
Figura 25. Frasco de granos de maz amarillo recin inoculado con el hongo
58
59
Segn los resultados obtenidos se puede concluir que el trigo es el mejor cereal
para la produccin de semilla (spawn) en todos los gneros de hongos. Se dio una
rpida y homognea infeccin de los granos. En dos semanas, los frascos fueron
completamente infectados y el micelio era denso. La cebada fue el segundo mejor
cereal, aunque el crecimiento fue mucho ms lento que para el trigo (3 semanas),
se dio de manera uniforme en los granos y para las tres cepas de hongos. Hubo
diferencias entre ciertos tipos de cereal, mientras que el trigo fue una excelente
semilla para la produccin de spawn para todas las cepas, el sorgo fue mejor para
Lentinula edodes, que para las dos cepas de Pleurotus. El millo y el maz amarillo
no tuvieron una buena infeccin por parte del micelio de los hongos, para que se
viera la infeccin de los granos se debi esperar ms de 4 semanas y para ver
una infeccin total del cereal se debi esperar ms de 6 semanas. La tabla 8,
describe el comportamiento de los diferentes granos de cereal, en cuanto a la
infeccin del micelio de los hongos.
Maz
amarillo
Trigo
Sorgo
Cebada
Millo
P. ostreatus
+++
++
P. pulmonarius
+++
++
L. edodes
+++
++
++
Escala:
+++ Alto porcentaje de infeccin, crecimiento rpido
++ Porcentaje de infeccin medio, crecimiento lento
+ Poco porcentaje de infeccin, crecimiento lento
Fuente: La autora. 2010
60
8. DISCUSIN DE RESULTADOS
Los ambientes en los que se realicen los procedimientos son muy importantes
para el xito del aislamiento, deben ser lo ms estriles y aislados posibles ya que
como se sabe, la contaminacin ambiental afecta el aislamiento de las cepas, ya
sea porque inhibe el crecimiento de la cepa en cuestin -como sera el caso de la
Trichoderma sp (Romero-Arenas et al. 2009)- y como es obvio, no se obtendra un
cultivo puro para seguir el siguiente paso en la produccin de las setas
comestibles, la preparacin de la semilla.
Estos ambientes deben ser
61
Otro de los objetivos del presente trabajo fue el de evaluar medios de cultivo
sintticos, usados comnmente en un laboratorio de microbiologa. Hubo
diferencias significativas (p=0,05) entre los medios de cultivos evaluados y entre
las cepas de hongo, lo que se ve reflejado en las figuras 22, 23 y 24. Ningn
medio de cultivo tuvo un comportamiento diferente para una cepa determinada, los
tres medios de cultivo tuvieron un comportamiento similar para los tres hongos
estudiados, lo que nos puede indicar que esto podra extrapolarse a la totalidad de
hongos de este tipo, es decir, los hongos de la pudricin blanca de la madera, ya
que se estudiaron dos gneros que comparten esta caracterstica (ligninolticos y
celulolticos) pero que no tienen la misma clasificacin taxonmica. El micelio
obtenido es caracterstico de cada especie, mientras que para Lentinula edodes
(shiitake) el micelio es poco denso, simtrico y podra llamarse dbil (figura 28),
para las orellanas (Pleurotus pulmonarius y Pleurotus ostreatus) se observa un
micelio denso, de crecimiento irregular, abundante y fuerte (figuras 29 y 30); sin
que los adjetivos dbil y fuerte tengan que ver con su ndice de infeccin en los
medios de cultivo o los granos de cereal. Si se observa la tabla 7, a pesar que el
shiitake tenga un crecimiento micelial poco denso, su velocidad de crecimiento es
prcticamente igual que para las otras dos especies.
63
embargo, es bueno aclarar que la cintica se debe hacer para cada experimento,
ya que las condiciones ambientales, especialmente, cambian de un laboratorio,
pero podran ser comparables en un momento determinado y los datos seran de
gran utilidad e importancia.
por la cantidad de agua que los granos pueden absorber y tambin al contenido de
almidones de fcil rompimiento, contenido de lignina, celulosa, etc. El millo y el
maz son granos muy duros que el hongo no puede penetrar. Para que puedan ser
ms fciles de penetrar, los granos deberan tener un menor grado de madurez,
pero esto implica que todos los almidones y azcares presentes en el grano no
estn en un 100% de concentracin y entonces el hongo no se desarrollara por
falta de nutrientes. Si es necesario usar este tipo de cereales se recomendara que
fueran sumergidos en agua por un periodo de tiempo ms largo, para que las
paredes del grano se ablanden ms y el hongo pueda penetrar las paredes.
67
9. CONCLUSIONES
El mejor grano de cereal para la produccin de semilla (spawn) para las tres
especies fue el trigo, seguido de la cebada y el sorgo.
68
10. RECOMENDACIONES
69
11. BIBLIOGRAFA
BRUHN J.N. MIHAIL J.D. Forest farming of shiitake mushrooms: aspects of forced
fruiting. Bioresource Technology. Vol 100. 2009. Pag 5973 5978.
70
CHIU S.W. WANG Z.M. CHIU W.T. LIN F.C. MOORE DAVID. An integrated study
of individualism in Lentinula edodes in nature and its implication for cultivation
strategy. Mycol Res. Vol 103. Nmero 6. 1999. Pag. 651 660.
JOB DANIEL. La utilizacin de la borra del caf como substrato de base para el
cultivo de Pleurotus ostreatus (JACQ.:FR) KUMMER. Revista Iberoamericana de
Mycologia. Vol 21. 2004. Pag. 195 197.
72
73
STAMETS PAUL. Growing gourmet and medicinal mushrooms. Ten Speed. Press.
Hong Kong. 1993.
STAMETS PAUL. Can mushrooms help save the world?. Explore. Vol 2. No 2. Pag
153 163.
SUN, Y. LIU, J. Purification, structure and immunobiological activity of a wtersoluble polysaccharide from the fruiting body of Pleurotus ostreatus. Bioresource
Techonology. 100. 2009.
75
12. CIBERGRAFA
76
ANEXOS
77
(1)
(2)
78
(3)
79
Origen de las
variaciones
Suma de
cuadrados
Grados de
libertad
Entre grupos
3947,88
591,11
12
Total
4538,99
18
80
F
13,36
Lentinula edodes
DIA
PDA
OGY
SABOURAUD
2,23
2,218
2,345
1,15
1,109
1,172
0,74
0,739
0,781
0,55
0,554
0,586
0,44
0,444
0,469
0,37
0,37
0,391
0,31
0,316
0,335
0,27
0,277
0,293
0,246
0,26
10
0,222
0,234
11
0,201
0,213
12
0,185
0,195
81
Pleurotus pulmonarius
DIA
PDA
OGY
SABOURAUD
2,218
2,218
2,48
1,109
1,109
1,24
0,734
0,739
0,827
0,554
0,554
0,62
0,443
0,444
0,496
0,37
0,37
0,413
0,317
0,317
0,354
0,277
0,277
0,31
0,246
0,275
10
0,222
0,248
11
0,225
12
0,207
Fuente: La autora. 2010
82
Pleurotus ostreatus
DIA
PDA
OGY
SABOURAUD
2,218
2,218
2,503
1,109
1,109
1,251
0,739
0,739
0,834
0,554
0,554
0,626
0,444
0,444
0,501
0,37
0,37
0,417
0,317
0,316
0,357
0,277
0,277
0,313
0,246
0,246
0,278
10
0,222
0,222
0,25
11
0,201
0,227
12
0,185
0,208
13
0,192
14
0,178
Fuente: La autora. 2010
83
Lentinula edodes
84
Pleurotus pulmonarius
85
Pleurotus ostreatus
86