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    ctosa, maltosa sds importante de nitrégeno en el medio s ‘a beneficiosa la suplementacién con sales am$nicas. Algunas especies de ofl régeno orgénico en forma de aminoacids, y la inclusion de ‘orgénico tiene frecuentemente un impacto ‘acién del cultivo, En Ja mayoria de as auxinas, s, que actiian como factores de regulacién del crecimiento en an frecuentemente combinadas para promover la divi- Mantenimiento del medio de cultivo ser disefiado de forma que se conserven las caracteristicas necesarias que per- titan el mantenimiento de un alto grado de viabilidad del eultivo y mini Ia variacién genética. Por encima de todo, es esencial que el medio conserve jeular por la cual la cepa se utiliza en fermenta- 3 toxicos por el org: la cepa, Las cepas que tiendan a ser ‘propiedades de produccién requeridas deberian ser i lar capacid cada copa, que sirven como buen punto de pé de conservacién, Los eatélogos de American Type Culture Ce excelente fuente de recetas para los medios de cultivo de mantenimiento, ' Capitulo 5 Procesado de la corriente de salida Introduecién Este capitu ivo al procesado posterior a la fermentacién trata de la nantes no deseados, la concentracién det pro tra 0 extracelutar), la eseala de oper estabilidad del producto y las especificaciones deseadas. as operaciones de fermentacidn y recuperacién forman parte del proceso global, de forma que la naturaleza del proceso de fermentacién puede influir de forma significativa en el proceso de recuperacién. Por ejemplo, ademas det ad waa soo:B9forq sofepayeur soundye & seyo¥}IOdUH SO°N s990u waruynboig upraeaygynd ap sossooxd sopeurunraact “sayjondso seoqsqieqoeseD Seu UOD oronposd un smiasuoo red sermsacotr uppeotttind ap sedey9 ap omamupu Jez -jururur anb fey ‘osooord yap eumndo eorurouoce peprEquia wun vzed ‘oye 10g “ie 06-08 PP teas wleya wpeo ap Soypatu SoquBFENPUAL Sof OpuEND OSM “EIDTEL -sqrs 135 spand edjannar souojseaytind sel wo PpeAlesqo oxgTERrUMNoT O}UaTEN “bao SOT p= wl 2 ont stoduco opipnpost) ego? 08 oz 388 z 2 x08 " § jo i 2 si pegs 08 oot 1 “(pa6t ‘s2Knq 9p oxuued woo opTnpoudat) ua 9p opaad 1s & upped op [oHateur yo 2 ofpmpald 2p upper wou Pf 19 UPPER TS HE (Gn) sum 6p ones got Oh Oh gO Ol yO Ob Ot Ol gOl 40g lorovorgtnd ap vdeyo uped woo sopupsose uprpexedo op 21800 ‘auedly “Teqo|s oTwopuUspUaL Jp UD sudejo op ars Fp & uot pp PPOUINIFUE Bf aA 35 7'¢ BINT wf Ue an oye) UO ‘0 seimigo sel 9p popryqease v| exed ooryo wuanceyy 0D $9 UO} soypnus uo & ‘opuanbar jepneo fap & ou -squviso fp oyeuR) pp apuddop upreeBnyEMUED ap odiibo (op upIsoaS ey 56 ‘VarTvs aa SINTINOO VT Ad OavSEDONs 8 Ls ema asegq esmasen ofny 9p UNE ‘Noro wm aueypour equ -ogpmoms wumyD 28 UPENE =P {ory peA sue! JOU BP ‘orimp any pp odin ofw opENSEaTE © openiy TE vogue 2p ony un ‘emu {3p 90000 P app MSU FHI YT ope w oMKOMIOT OMT QPEMIL snuoureapsad eoyd aun op sumone uo peN sopewweep om, sopamndas [Bp vfsp 9p wc, sopugs 2p sonata 10peredag “1. FO Sopp ap pHEEEMTY snurco “sugar v9 sop ap upasiag —_SopHES ep ZOpEsEdag —_UOERNETC, soy -eaqmur so}ayp204 20d sejnped ante sqsend ap uppeuoy 0 eA “das oon sequpy opty teases ap upon od sno Shed se oN 5 2p URDEEDY OPH" uppencou epaea say of ¥ opin sima}o31 poopy operons {Bp opugy va imneainpos seyago eT wplenammpes ap anu, ean ae eee ee enn upjonsado oy 3p sopouunpuny soanpo saan odin jap ‘moa sleet eee ee opmbyopgs uploexedas op sossooxd/soreqnpeo SOLOpENUDWIA "TS UIA, NOTOVINANQELL V1 aa VIDOTONDAIOTE +6 96 BIOTECNOLOGIA DE LA FERMENTACION cra ' Mig. 54, Centrfuga decantadora de tort poration, Sharples-Stokes Division, Pa). -produsida con permiso de Penvalt Cor- aster exe coe mesa alta dt ado rodeo con permiso de Blackie and Son PROCESADO DE LA CORRIENTE DE SALIDA 7 de finos 0 de susper tros puede hacer més lenta la que'es una prética com Ja porosidad de Ia torta de fltracién; filtro en forma de precapa o pues ares de fitracion que pueden incorporarse al lars com el caldo de cultivo, La filtra- jumen los procesos més importantes de disrupeién de ‘mayorfa de los casos se utilizan métodos mecénicos lg, 5.6. Fico de vacio rotatorio. Las secciones 1-4 son las iltrntes, las 5-12 son las se desaguado; la torta de filtracin se descarga en la secidn 13 (reproducido con permi- fo de Ametek, Ine), sarg[nypo sopeusTouroy ap { sopeay oanIn9 ap sopea ap apd w sajqnos taud re pared sou © sengD sue epee PIF 5019p Sooyyonne se SOP np ey» aonpuoe anb vegan e ouedoxdosy sp ones RBATEMT Pp UOIPEZLGNIOS “ORD ap OER “BUOHOY somanog sopypo wmydnr op soymeysoduy sossoo1g “f'S BANE, 66 VarT¥s a iNannico V1 ga CaYEEOOW (@ peuo1 swansea uppoenny 21 &(B) opeansn ofny m9 uPPEEIE BL ante wopaemEwAD “LS “BL ats IS 0= <0- NOIDA V1 Ha VIDoIONDaLOTE 86 100 Tabla 54, Rec ficados y de I Proceso [BIOTECNOLOGIA DE LA FERMENTACION .cién de los productos salubles 2 partir de los caldos clari- jas homogeneizadas ‘Noturaleza del equipo/aditivos Fundamentos de la operacién ‘Separaei6n por tamafioe Precipitacion Aésorciéa “Absorcign por inter Polimeros orgéinicos que Cambio reversible de jones entre asf contienen grupos reaciwos se lquida y sélida, por ejemplo into» biadorescaibnicosoanig-Resins-COO~Soluto* + NaOH ‘eambio ibnico Extracei6n qui- doriquide ConcentraciGn mediante Elson mosis inyersa ‘a tavés de una membr tamaiio de poro sufi “Unrafiteaci6n ‘Bmpleo de membranss ‘molecular bajo sean forzaos a atra- vesar la membrana Filtracién en gel ‘Separacién por tamafo mediante ge ‘es eomatogrificos con tamarios de poro contrladas con gran precisién. En una columna, el paso das mo- \éculas més pequetas, que penetran fen los poros en mayor grado se Ye retardado, mientras que las moléex- Jas mas grandes con excliidasy elu- das primero ‘Adicign de compuestos qul- Reaccién éel precipitante com el solu- Tmicos 0 solventes orgéni- to para producir productos insolu- 0s que reucen Inzolubl- _ bles, frecuentemente eisalinos Tidad del producto fon propiedades de cam- Resina-COO"Na* nleos atracelén con solventes 'PROCESADO DE LA CORRIENTE DE SALIDA, 101 La ésmosisinversa y la tefnas, enzimas y horm 5.8) y dializarlos y concen Itracién se uilizan extensamente para separar pro partir de solutos de peso molecular bajo (Fig. ; los. Los problemas de polarizacién por concen- {racién, por la que se produce tn incremento de la concentracién de soluto en Ia zona vencional ane Lok VT : ‘ Fi S8. Sparc (6), dilsis 6) y concentaciin (@) de proteinas mediante ‘oypout pp wo 0 padsyny upyer p tod ojonpoxd pp we sepronpo: snugnqog? 9p vpouasaxd w 20d wpeynorp esias apand upssuadans w9 seTIgO 9p 0 soonpse sopmyy ap smzed v seyeuopouou sodrononue ap uprowoygeind ey “wo “510% pepmayye e| 9p soquaurpuTY So] uo sepeseg pUPHOPA Lye v souoEredaS “wisldsa OHONLLVO sory "eppoypind euusos ua £ sopenay> ord ap ojusqumgisre p wed pap sjuauIOUA|Od “goynuur soo0d us o74q ovnpoxd ap souresTO| 18500 ord op sovedteo ‘eyvoso tns8 v refeqesy ered TAH 2p sodinbo ap ayuaumesorau i sO OpInzasu09 i ‘wey a uptquie, se{no9fow so 2p pupHvfod Wo syUD|SHA seIoUDIORP seyonbad i youredas W “YApul asey ouico sarejod ou aot ipod ayuouspensn sozod sejnoyued ap oajduua jp woydun 2 “eonyfewe voquD9) Eun owoD epe|fom -asop any ayMOUNTEIONN “oyUaFUPUDT |p Wo ¥pIpupd euNUT o wood wod zamnd ‘9p opei8 oye tun too squaurepydpy uesedos 2s soronpoud $0] TAH BI LOO sBoyeUsOH Bf £ stsax0}0 i 99 OTA) PENS IE ' -vyfoxzesop seangeredaid seoquoy sojupjod sey ap sordwafe soy aug smeguIOD ‘YOUNH Weald 30 OHONLLVO soansuau sarmosouoa {) ‘ured 0 s07ea one ap soronpoud ue Mepuon & wuss Bf B UpTUN ap sOx}LDS ap orDURL PE Jod sepeNUT “Zospr ap seating) Sey ‘o;anpOud [pp PEpHEANIOS wf weoypour anb uproexedas ‘sopeag yep samen Sopeusdowoy n oan jue soem ered £ soplupocsyfod £ seupajoxd sey urdu uezyFI 28 So=IU BLO. 3 ay ele op cunts ope ap 4 agro race et Seg oa a STE ce phen oop aan cor ‘VAIS aa BINARNOD VT Ha OavsEDONL NODVINEDRIEM V1. VIOOTONOALONE zor 104 BIGTECNOLOGIA DE LA FERMENTACION jementado con suero, Bl anticuerpo monoclonal puede purificar- ficaz mediante cromatografia de afinidad especifica con el antige- no, en Ia que el antigeno est inmovilizado a una fase estacionaria adecuada. Bjemplo de procesos de recuperacién METABOLITOS NO VOLATILES ‘Bn Ja Figura 5.10 se resumen los procesos de recuperacién de um cierto ni- ‘votes. Todos estos procesos implican Is separacion tos se recuperan en forma de polvo, habiendo pasado finales de cristalizacién y secado, precedidas a veces directamente por producto, Por ejemp jones de extracci6n. En Spade ennai liguido-ligui mas dcidas de la penicilinas Gy V en los smplo en los acetatos de amilo y butilo, A causa de su baja solublidad en los solvents acuosos, los exteroi asociados pre- idos de Ja célula liquide utilizando un. _ spués el extracto se concentra y extrae con un segundo sol- izar el esteroide, El intercambio iénico es la pr de estreptomicina, aminoaci- ida en el timo caso por una etapa de adsorcién partir de gluconato ‘de cultivo clarificados se puede emplear una etapa de precpitacién con un agente reductor y eal, respectivamente la naturaleza in- soluble de la riboflavina reducida y da y se disucve utitzando (eso), que se separa. La solubilidad de deido itacénico en agua, de aproxima- PROCESADO DE LA CORRIENTE DE SALIDA 10s Presets de te Es Serta "Feta ries tricks td portae eka fekio ‘pa de rocoso Sohbesibn el preaise | Sezaracttn ico caeeraa Uo 2 tt Sage ats [o | o q T Eraporalin exncin sti enncelin Telos Precip seco Dpettenin Sepuectén dogs ‘naraio ince Ty Seo Trt ttt ffenestr at A fn Alo Aldea 2 tenia Sse an eo tact te icc lta em as0% Mig, 5.10, Proceso seguido con diversos metabolites microbianos no voles, r iB pun jEUOIDUDALO so0oid fg ‘seapHtoputon sudeyo sy O Bun 9p epIn Fas d & sootoponu Soplay 2p UO|SeURLURO “UpHoeINKD ap sedeya se AND nyzH9 SO] UOC “BINS BL uodop soneqnypoent sophdgd & spujajoxd 9p uproeautnd ap sosooard soy ssouonaokd S081 1y810 soywanqos woo upyoRT|djoaud oyepour weradnoas oF S07] “opejnsdaun 0 opelnuei® “uonun 2p seyuaBe woo sop m9 optie|pzau uniedard as ofeuwan ns up oAfod erates spxquim sopUp sinbt © onod fou anb sopyigs seunzua ap souojeesedaxd sey ‘oxjod ua seumzue xouago ered soofpizo soquaa{os a7meqpaut wmjdppaud 2s 0 reuyy oronpord ovro sopesn 728 souoo 9p Buco} w9 wesadnoor 9$ Soze|N|BOENX SEU 1 sojnupu8 ‘osjod sionpoxd eysey 208) so 109 0 UO!EUEDep 2p SEEN oyu yeBnyjrjus0 0 UpfoP|NOOY Zod weadnsa1 3F eng { setianoeq Seq “sopeztinaxa} soyanpaxd ap pepsueA ued wun rep wed sayUeIp fu J9 nb 79A Bun OFDeA Uo UPPENTY S1UEIp 9s su 9 & (apron 9p ossoaxd tm v SOPROUOs 49s $000k 8 WeyIsODOU SOs pp appyredns of 9p som ota sarpynypoesnxa SeUNIZUA £ SOpLBDEST|Od 3p uptseradnaat ap Sosso0rd ap sojduiofa soundye wensom SBUYITTBOWLDG SYNIZNE A SOAIEVOWSIIOM VSVIHOIE ‘ononpoxd yop wzamnd 2 soundip we gepexodr09ur upiqurey “us NOTOLAEINREE V1 AIC VIDOTONOALONHE or 108 [BIOTECNOLOGIA DE LA FERMENTACION Se cosecHapo comes coscn Ano EXTRACCION EXTRACCION ae SEPARACION REPARTO FIETRACION CON SOLIDO/LIQUIDO —LIQUIDO/LIQUIDO.—_—FLUJO ENTRECRUZADO I I | PRECIPITACION __SERARACION PRECIPIEACION DELAPROTEINA, — LIQUIDO/LIQUIDO ELA PROTEINA | | | SEPARACION REPARTO UULTRAFILTRACION SOLIDO/LIQUIDO 1 1qUIDO/LIQUIDO | CROMATOGRAFIA. —_SEPARACION (CROMATOGRAFIA | HIQUIDO/LIQUIDO | . | conemeicon Neco cocmHRAGON PRobucto PRODUCTO PRODUCTO PROTEICO PROTEICO PROTEICO @ (b) © Rig. 5:2, Socuenctas de purificaciin alternativas para la reeuperacién de proteinas y ‘peptides intracelulares (feprodueido con permito de Fish y Lily, 1984). do (Fig. 5.12), Una via altemativaincluye etapas de extraccidn Iiguido-tiquido icnto de protefnas humans gura 5.14 se muestra el proct ‘moproteina utilizada como ces pluricotorescens MCRU« cid y del micelio. En los Capitulds 6 al 11 se mostrarén otros ejemplos de procesos de recuperacién. gn de largomicina FI, una cro- ico antitumoral, producido por Streptomy , @ partir del filtrado del caldo de fermenta- HOCESADO DE LA CORRIENTE De hLDA 109 time cerm | [PO ee Sera ad areas mena] | Rimage ra ei reas —— Rec aaa a, caeaths Dis dl precads cad (ads 6) — Cranston ‘eA ceklocs | Fiecin eed] | recgmaain wt anon ‘er a pH cade ig. 513. Proceso de recuperacién para el aslamient de proteinas ecombinantes hu mias a pattir de Escherichia coll (eproducido con permizo de MeCregor, 1983). [BOTRCNOLOGIA DE LA FERMENTACION 0 Capitulo 6 Produccion de biomasa trata de los procesos de fermentacién implicados en los que jbianas son el producto final més importante. Las oflulas mi- Introduecién sen en general un valor més elevado. En io de venta, Los indcalos mierobianos, utiliza- tividad, el rendimiento y el dos como a este caso, el rendimieato nas caracteris (Gapog jo -feato weary ‘56 IL ops sodas soy ono wong fo women =p ented uo9 OPENPHE Suasslojoinyd esdurdans ap sased s Tr SUpUOR ouTUHUE CONSTANT ep UPREsdRAT yp oor “HLS “ALL ths mein op uh eores sv penton worl | EE comsmmamamrmaranenmonnt fa tint eo xyes yo apy ep iss “ob atoiig rrr) panies oounistog saben ve sutuni 9 eres mone) fo sera oto | [0 Operaciones basicas al cpa me ae {=e ———————— m Pips de egesis de osbnposoe log fo Figura 03 Uitinsn del couyurni de aioe a neces un apt seperdo pra iraneo tela fltrade que retin peta. Las ios se doposin nel try medida el depstoo for fir yori de tos SBleates microbins on compres, es dec a pore= ade a toa csninaye conform suman caf de pe sins les Beech pede spear po ten coniciones no ap 1 presto cee et Jo suficfetemeat fice com pa evil una crfaan= Sion exo yl egadin dees roa: es. WALL Condyuvantes de fitraciou" también conoaldas come eee ido que pecmanece de las istomeas ts #4 mete. Los Jechos emoagueads de Keats poste ana (be deternoase expdinentalneat, Ades liste absorb go pr reas, Como se ues en la Fgura 103, el coadys- menos que elinine anes elma, lin viscosa det medio, como is propidades ea tone de ule oenida Holme, 10.12. Bquipo de filtracién “Los flrs de plac son obs pa sila de = gues cargas e alo de Fermenseién yu ge acumen Inds doa fernenage, B eos dpoltivar ee etre tn tambarhodaonta 0.5.3 m de mei eo tle fants ye hace garantztete aD)-2 ep. Lalas a. Banco y IL, Yak 1950, Un Operon, Yai) ‘eases fl ev ida Ame es boc ents en ra donde se despre ‘espa et en de itis 10.13 Teorfa dela fitracién “Lato dea ite lo paca ca ode fla, Pea ura determina ea jo ded tala lane psd co Is parculsnopeacan ex el mata, ero, weed ce lent econ: mages ms EP “sar qe ope wd open 2p pepo a. sronbaponsoa ie 0 sour 0 =/4 £0 =) ope map ome Ty (eon ae, ai ay gee TS TT 2 ae inp dager des bres js debida al medi tren despre, Soluce ‘Las propia de ino y ato de mise ped lanoaputrdelos resultados obenios xpesimentlnente nel aboatoco. Sr, pods eiminace ein ena I ie (sig) Sostuyendo para una ot compres del enién (102) ‘Seatnyendo vere: 2(3 ea?)*(6.5 min) Gra ™C0emy* xe valor d 0s tna por cau el ea nessa pr flan a ec plot, De): apace), yates = 0.2016m"*(es)aain Fy (9) Suattayesdo valores cand p= 10 pls An] Q2DL ens" pad ee xm a S115 x10'en= (©) Cuando dp = 10 pat (0.20 ea ye of ° 137 10'eat 2137 mt ‘Site ela de prsin oe reds ait olden neceera amen slo un 20% debi aque pila tora estf mene compli yes mts peta qv 10 ps =_— | | | | Spence soe El ejempl 101 pom de maifixo in imgortaa de os tsayarde boat enel dso de os sisters ce ln Lsexpermeatos son mesos pra alae des de ata les como la compre ya ester: ‘ixespcfea,yaqe ects padre ma pode clase de focmatsson. Las bervacloner expsimentales on ta bin ecanrn pra cleala ota portance ‘a dela at, eoe las que pueden ete el clive Bs eoaeial que cxalguer nyo de eborto ‘ss realeacon os iz one flat ctl ene napa (ad sifieatemens re Lasevadoey betes om ho ms diets de ts debi a pega ama. Bo ‘sto ean van edo fds eile sna ‘vse es quese ening tnt de Sl, Bn amietracén alana grandes veloiade oid en fj cad eve i crf i dee ‘seanmis cele esa ale ponden encore is referencias igri (3,4 10.2 Centritugacion als peuefas que Son files de ita La cent. ‘eck de eld de eenentaeié pedi odo dec Jag concen y espero que easiness que tone See. sextape nando tin fermen, o cuando debe proves Ie conine- hndel pot. Lascentiga inde geneen pan: gira 10S Sepa de etn eo ann cena de eas densa ene pats in s favor tba La cntigacin es as efectv cand las pctcuas gusse dean eprac sn grandes, avoided el ido as peal ‘hi de suspensifn, Ets inconve- ida, Sie emtarz, los paz a I centignin indstia ane ‘opefngmnu99 2p odiabyy POT stp nec vermin ‘epg op ano samp sp op OT omni map Dae op TE 1 Sw. PamPe ys ge waht pat 015) onde es Ia Yl tinal en una ceo, ofa ‘ocd angular de acai on una de ad! y rel ae lo del amb da contfga La lsc de velocidad en centage eloedad bajo graves denomia efc- 10 entfiug 0 nimeog, ys expe normale coo 2 Batonoa: zat s oan Lateon deol entscrtyaes reat select cetugs de abort pague- ‘as pueden alesnear valores de Z de 00000 (6, Bh una cet Yells. ogy (60 iinayend cosa fo dees, x Sinenbargo, equ sparen ston Is predes de ncesta también depene cel arpo de expose ‘acentuga. nla xrctupa dicot, soto es th nad ene lator elspa decease a ‘ment maneniendo durante ds emo el peat cachet to. 3 oe tga i Be cos) Piacigon engi deo oprocse méico de aliments y 1 las pals en un camo ri gas comple coo a misma efi. aT 1029) oles Ly 2 erpresan es dos cenigs. La ued tlizase para e cambio xala in Laseemsooes mczstras el defo de Ie cents, Para un ecttiga de dec 7 gos de cepa x devin en Ait grado dea open ea, esecn (10.19) m0 ued ulicarse grneralente para compara irene cone Fusions do coo, El enfiniesto do cialquieceatiage puede desviese ensyosexpecimanales debe reise teen en cata todos estos fae, peraone be Pa ‘jemplo 10.2 Recuperacin de eflulas en una centrifuga de dscas| ran de levadura de pede. Con uaa void Un cent de discos opera en contin 000 pa A velocidad de ceaiugaié conn secupernin de alent 060 min ereenpe el DR de sds es inversameneproporioal al xl se neces parn lear una capaci del 90% dens fun sa veo decent se | (0) i Qué vlacéed de opacn se acetate een slerae ona eee del 90% con uncaual de 6 nn!? Solin (@) Sila erupts de sos es invests popesonl lca do licen el adel neces x: 50%, 28 (01 wir) =283 ia Sg, Umi) =. (9) La ecxcn (10.19) clans tas eaters dels cess prs seaman sepa, De (ana ‘weaperecia del 90% se lean con Q,=3.3 Lay = 5000 sp. 60 ma De a ean 2% M3 tmie 2,73," imine “8 “Taseod co ceca gue se adam; iva mim centage y todos os paietosgeoméuone son gals, de a ecusin 3 z Porta tata =H -as8 = 2 _ 6000p 446x107 pat ase" os6 sno mesicos como el chou eam, a congeaisn reside yas lessons. Tamia pueden pica x Sy wor ‘emndac en Goreme eezimicy mun md goo Ms ON 6 sauder se aivaxteaep operons eGR a8 HONE EE, wept wen ap odoouey yor ofan Kary Sop see Sopra S08 an an soon ep ape “Sal soppn ae we ezine 2 pnb pS sesone sty Sop wo epinby WHERE. S OE ‘SeaaaA aap aa op OSI we oe renipea de a fs en le gue opeiciones bin oma lec te. 2 Hoops sea seta eo fs eee (Pet ida 195 Ligation oct Bs Moos £4, Compre Bsechcagy tal op 47, Perper Ps, Oo Shee ponent Paoegt Redoxsropidnano KGa VG Fotvininaldons aor aa26) bain ete ses depend de sistema. El coficene de eprie a we vay {pede G8 copra desi et componue Reni, te es cone uno vafen ls propia lnc eve eta, 02m) seca ss serpin da den soli, So sa mea slucGo se rear on dos fe El cosficentedemeaiens ar mia rege. ee eat 842 Calcul a mia rege rece ke rec de volume de ses spe 30:9 cin de volun de ls ens spe eit eat cs aod, henna peta apn Headers cata rie: Dit ua cl nen eons aoe a px100= 68% aa ‘Bn umeto en el vale elatv ds fede extrac Svar a espera del puto desead, —ee, SI ei favre eager del prt esendo, 9, lento wea mela de plies gue inczeie a5. (te paréeto ulead parecer stibcign dos fee el factor de concontrac6n ofr de pu zz, 8, deinid cio la elacn ete inconcetacda prod ea a fae pein a concent nial de rahct: G, 4 GE (ono el pohcoseinsbape ona fez ined) 029) 6, qa ke Ei (enaoel padoan adie elated edo on op opm anu un taupe} ap 209 a ez ne wed see a wrap BOI! 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