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Logros & Desafios de la Ganaderia Doble Propésito. 2014 Capitulo XIX Los beneficios del diagnéstico molecular en la Ganaderia Doble Propésito Maria Gabriela Portillo Las especies bovinas representan dentro de los animales domésticos, un recurso ‘genético de importancia vital no s6lo por su potencial de desarrollo, que conlleva a be- neficios econémicos, sino por su relaciGn directa con diversos aspecios de la vida del hombre. Por tal motivo, en el afio 2003 surge la iniciativa de Ia aplicacién de herra- ‘mientas moleculares para secuenciar y estructurar ¢] genoma bovino completo, con el fin de obtener informacién valiosa que de inmediato tendria una amplia utilidad. DETECCION DE INDIVIDUOS PORTADORES DE DEFECTOS HE- REDITARIOS Desde la década de los noventa, la genética molecular impact6 con fuerza, la ga- naderia bovina, permitiendo el anélisis de enfermedades hereditarias recesivas, que por su patrén de herencia enmascaran la presencia de individuos portadores de un de- fecto congénito, los cuales solo podian ser detectados mediante pruebas de progenie, retrocruces de prueba, aniisis elinicos o necropsias y mediciones enzimaticas. Entre las enfermedades hereditarias bovinas con mayor repercusi6n en la pro- dduccién y que poseen un abordajea través del diagnéstico molecular se encuentran: a deficiencia de adhesin de leucocitos bovinos alos antigenos (BLAD), el complejo de ‘malformaciéa vertebral (CMV), la deficiencia de Ia enzima uridina monofosfato sin- tetasa (DUMPS) y la Citrulinemia, exclusivas del ganado de la raza Holstein, La granulocitopatia bovina conocida como BLAD es debido a una deficiencia del complejo glicoprotefna Mac-1 (CD116/CD18) y es letal para el ganado de la raza Holstein (Shuster et l., 1992). Se han descrito dos mutaciones que através dela técni- cade la reaccién en cadena de la polimerasa (PCR) y la digestin con enzimas de res- triccién (RFLP) han permitido a identificacién eficaz del genotipo, tanto de os indi- vviduos enfermos como de los portadores (Shuster et aly 19925 Tammen etal, 1996). Igualmente, el complejo de malformacién vertebral (CMV) reconocido como malfor- ‘maciones de segmentos toricicos y cervicales de la columna vertebral en los bovinos 184 Logros & Desafios dela Ganaderta Doble Propésivo. 2014 ‘Los benefcios del diagnéstico molecular la Ganaderfa Doble Propésito 185 ¢s causada por una mutacién en el gen SLC3SA3 (Thomsen et al, 2006), y su detec- cin se ha realizado a través de diferentes técnicas moleculares (Kena et al. 2005). Para la deficiencia de la enzima uridina monofosfato sintetasa (DUMPS) que interfiere con la biosintesis de pirimidinas, se ha establecido una prueba que analiza uun fragmento de 108 pb mediante la digestiGn con la enzima de restricci6n Aval (Har- lizius etal, 1996), la cual detecta la mutacién puntual en el codén 405 del exén 5. Igualmente para el diagn6stico directo de la Citrulinemia, identificada como un de- sorden en el metabolismo de la urea, se emplea la PCR-RFLP (Padeeri etal, 1999). La ganaderia doble propésito venezolana, no deberfa escapar a esta realidad, de- bbido a que los cruces com la raza Holstein son empleados habitualmente en las précti- cas agropecuarias nacionales (Aranguren et al, 2007). Por tal motivo, el diagnéstico ‘molecular directo para la deteccién de estos defectos, ofreceria un valor agregado nuestra ganaderia, ya que a pesar de tener una baja frecuencia en rebatios tropicales, adquieren importancia real, cuando se trata de la deteccién de individuos portadores antes de que ingresen en programas de inseminacién artifical, Io cual ocasionara la ddesimanacién a gran escala de un gen mutado. He sido lo répida y certera de las evaluaciones moleculares, lo que las han con- vertido en una informacién necesaria en los catdlogos de toros lechero a nivel mun- dial, pues el paso inadvertido de estas enfermedades, ocasionaria un refuerzo en su prevalencia, aexpensas de la presiGn de seleccién ejercida en los rebafios bovinos para la produccién, IDENTIFICACION DE INDIVIDUOS CON GENOTIPOS DESEA- BLES PARA LA PRODUCCION Al entrar en el émbito productivo, las tecnologias del ADN son catalogadas, ‘como las herramientas més ities, sensibles y poderosas para la selecci6n de los ani- ‘ales mejoradores. Cuando, ademés de Ia seleccién por métodos convencionales, se ‘emplean los avances moleculares, se generan resultados verdaderamente prometedo- res en el mbito de la produccién animal, con impacto particular en caracteristicas de referencias en el mercado yen el progreso genético de los animales (Dekkers, 2004). Hasta estos momentos, la incorporacién de tecnologias moleculares ha tenido resultados excelentes, promoviendo el estudio y la eparicién de diversos genes de in- terés productivo que abordan principalmente la produccidn de carne, leche y aspectos dela reproduccién, que han ayudado & dilucidar Ia fsiologia de caracteres complejos ‘yu efecto sobre Ia expresién de ciertos genotipos (Dekkers, 2007) Funcionalmente, el genoma se divide en genes que codifican un producto tra- ducible y secuencias no codificantes que pueden ser utilizadas como puntos de marca (marcadores) que se encuentran ligadas 6 cercanas a las secuencias propias de un gen (Lépez-Zavala eal, 2007). Esta caracteristica presenta una variabilidad polimérfica, Ja cual ha generado que Ias investigaciones modernas en el campo de la genética ani- ‘mal se abocaran al andlisis de caracteres productivos mediante el uso de los marcado- res genéticos, con el fin de identificar regiones que alberguen genes vinculados con caracteristicas cuantitativas 6 QTL’s por sus siglas en inglés (Quantzatce Trait Lac). 186 | Marfa Gabriela Porillo (Cuando a informacién molecular es incorporada a planes de mejoramiento ge- nético, aporta informacién veraz sobre el genotipo de uno o varios caracteres en la po- blacién de estudio, De ahi nace la selecci6n asistida por marcadores conocida como ‘MAS, por sus siglas en inglés (Marker Assisted Selection), la cual usa informaci6n acer- ‘ca deestas regiones para identificar individuos con las mejores combinaciones de dis- tintos QTL, lo cual provee informacién sobre la probabilidad del mérico genético de las crfas (Dekkers, 2004). Enla actualidad, a pesar del desarrollo tecnol6gico y cientifico que ha construido la «rade la genémica, la incorporacién de informacién molecular de genes de interés econé- ‘ico en las evaluaciones genéticas no es una constante en el pais. Es posible que atin per- sistan miedos infundados, como el pensar que el genotipado de nuestros rebafos seré su- mamente costoso 6 que no traeré resultados tangibles, econémicamente hablando. Para los criadores pareve no tener significado alguno, el célculo de un valor de crfa mucho més preciso sobre la base de marcadores moleculares. Sin embargo, el saber que ‘en las hembras de su rebatio, reproductores con genotipo favorable para ca- racteristicas de imterés productivo, se incrementarn de forma efectiva las ganancias, 1o ‘que deberia ser mas atractivo y en tal sentido, deberia orientarse su promocién. Alltratarse de caracteristicas econémicas de indole cuantitativo, el resultado de «sta incorporacién podria no sélo arrojar un valor de cria més exacto, sino también la probabilidad de aumentar un genotipo favorable en el rebafio y seleccionar animales precozmente, sin metodologias invasivas y con una exactitud mayor, aumentando la respuesta a la selecci6n en un tiempo bastante inferior, que al usar las estrategias con- vencionales de seleccién. LLascleccién asistida por marcadores es principalmente beneficiosa para cl estu- dio de rasgos fenotfpicos complejos (Meuwissen & Goddard, 1996) que cumplan con las caracteristicas siguientes: * Con poca informacién para la prediccién del valor genético. * indice de herencia bajo, recesivo o baja penetrancia genética, * Con expresién limitada a un solo sexo. * Disponibilidad fenotipica después de la madurez. sexual. ‘+ Evaluacién posterior al sacrificio (Calidad de carne y caracteristicas de la canal). * Cuando 1a naturaleza poligénica de un carécter ha limitado la eficiencia de la evaluacién tradicional. * Costo elevado de las mediciones fenotfpicas. En el caso del ganado lechero, las condiciones desfavorables como: intervalos ‘generacionales largos, caracteristicas de interés limitadas a las hembras, pruebas de rogenie costosas, que ademas requieren mucho tiempo y le seleccién de madres de toros mediante la informacién del pedigri antes de su primera la lactancia, hacen que sea un rasgo propicio para Ia aplicacién de la MAS (Boichard etal, 2006). Logros & Desafios dela Ganaderta Doble Propésivo. 2014 ‘Los benefcios del diagnéstico molecular la Ganaderfa Doble Propésito 187 BENEFICIOS DEL DIAGNOSTICO MOLECULAR EN LAS EVA- LUACIONES GENETICAS ‘LaindustriaIéctea francesa mediante la incorporacién de QTL’s en sus evalua- ciones genéticas logr6 reducir el miimero de toros para las pruebas de progenie en un 15% (Boichard et al, 2006), mientras que la inclusién de marcadores moleculares de Jos genes de la hormona de crecimiento bovino (BGH) kappa caseina (KO) y prolacti- za (PRL) en las evaluaciones genética de rebaiios lecheros colombianos, arroj6 valo- res de hasta 90% de confiabilidad, siendo més altos que los obtenidos a través de los «estimados tradicionales (Echeverri etal, 2011). Enel caso de la ganaderfa de carne, se han desarrollado comercialmente paneles ‘con marcadores miltiples relacionados con la calidad de la carne (Barendse, 2002; ‘Van Eenennaam ¢t al. 2007). No obstante, su implementacién debido a los altos cos- tos del genotipado no se convirtié en una herramienta de rutina. Pese aesto, la valora- ‘cin econdmica para la seleccién de toros de carne resulté ser mucho mis elevada al incorporar informacién molecular a partir de pruebas de ADN, con un aumento en la respuesta de seleccién entre 29-158% (Van Eenennaam et al., 2011). (Otro factor adicional que favoreceria ala ganaderia doble propésito en laimple- mentacién de anilisis moleculares, es el hecho de que la mayorfa de las unidades de produccién no levan la informacién fenotipica organizada y pedigr{ completos; a ‘menudo sélo estén disponibles en unidades de cria intensiva, reduciendo en conse- ‘cuencia, el miimero de individuos a ser considerado como mejoradores. Por tal moti- vo, serfa muy {til el uso genotipificacién molecular, déndole un valor agregado 2 aquellos individuos con poca informacién geneal6gica. Por ser ésta una herramienta que permite el abordaje precoz de los individuos, se convierte en un instrumento particularmente iti en programas en los que se em- pleen téenicas de reproduccién, actuando de menera sinérgica y complementaria para ‘conducir a la seleccién temprana (Van der Werf & Marshall, 2003). Su aplicacién per- ‘ite aprovechar el incremento productivo via hembra, mediante la fecundacién in vi- tro y el acortamiento del intervalo generacional. ‘Asimismo, la ncorporacién molecular en programas de seleccén puede ser benefi-

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