LABORATORIO DE QUMICA ORGNICA

RECONOCOMIENTOS E IDENTIFICACIN DE PROTEINAS

PROGRAMA DE INGENIERA DE ALIMENTOS
UNIVERSIDAD DEL QUINDIO

OBJETIVO
Determinar cualitativamente la presencia de protena en la albumina de
huevo.

MARCO TEORICO
Las protenas desempean una amplia variedad de funciones en plantas
y animales. Estas funciones se pueden agrupar en dos clases: dinmicas
y estructurales. Entre las funciones dinmicas de las protenas se
encuentran el transporte de sustancias, el control metablico, la
contraccin, la comunicacin y la catlisis de transformaciones qumicas.
En cuanto a sus funciones estructurales, las protenas proporcionan la
matriz para los tejidos seo y conjuntivo que dan igualmente forma al
organismo.
Las protenas son polmeros de a-aminocidos. Es interesante anotar que
todos los tipos diferentes de protenas se sintetizan inicialmente como
polmeros de 20 aminocidos, conocidos como aminocidos comunes.
Adems de los aminocidos comunes, en las protenas se encuentran
aminocidos derivados, formados a partir de los comunes, normalmente
mediante una reaccin catalizada por una enzima. Los aminocidos
comunes tienen en comn un tomo de carbono central, denominado
carbono-a, al que estn unidos covalentemente un grupo cido
carboxlico (-COOH), un grupo amino (-NH2) y un tomo de hidrgeno (H). Adems de esto, al tomo de carbono se le une una cadena lateral,
designada como R, la cual es diferente para cada uno de los
aminocidos comunes (Cuero, et al 2010).

MATERIALES Y REACTIVOS

10 tubos de ensayo
1 gradilla
5 goteros de virio
Beaker de 250 ml
Estufa

Placa calefactora
3 pinzas para tubo de ensayo
Frasco lavador
Pera de succin
Pipeta de 5 mL

REACTIVOS

50 mL de cido ntrico concentrado

50 mL de reactivo de biuret
50 mL de etanol
Agua destilada

PROCEDIMIENTO
Solucin de albmina (clara de huevo): Al preparar la solucin de
clara de huevo hgalo de la siguiente manera: Se bate la clara de huevo
durante unos instantes y se mezcla despus con cinco veces su volumen
de agua. La mezcla se filtra a travs de una gasa y el filtrado se usa
para esta prctica.

REACCIN DE BIURET
En una gradilla Se toman 2 tubos de
ensayo de 16 x 150 y se rotulan como
PATRON y otro como CONTROL.

Se deposita en un tubo marcado como

patrn 20 gotas de solucin de
ovoalbmina preparada.

Se deposita en el tubo marcado como

control 20 gotas de agua destilada.

Tome cada tubo y agregue 10 GOTAS de

REACTIVO DE BIURET, mezclar suavemente
cada tubo. Hgalo de manera lenta,
segura.

Caliente suavemente de ser necesario en

el bao de Mara. Deje enfriar.

REACCIN XANTOPROTEICA

En una gradilla tomar 2 tubos de ensayo y

rotular como PATRON y otro como
CONTROL (con las mismas soluciones de la
prueba anterior).

Tomar cada tubo y agregar 10 GOTAS de

cido Ntrico concentrado, hacerlo de
manera lenta, segura por las paredes del
tubo. Colocarlos a bao de Mara. Deje
enfriar .

DESNATURALIZACIN DE PROTENAS - MTODO DEL CALOR

En una gradilla tomar 2 tubos de ensayo y
rotular como PATRON y otro como
CONTROL (con las mismas soluciones de la
prueba anterior).

Depositar en el tubo patrn 20 gotas de

solucin de ovoalbmina preparada y en el
tubo control 20 gotas de agua destilada.

Se introducen al bao de Mara que se

encuentre hirviendo. Deje enfriar.

DESNATURALIZACIN DE PROTENAS - MTODO POR

ALCOHOL

En una gradilla tomar 2 tubos de ensayo y

rotular como PATRON y otro como
CONTROL (con las mismas soluciones de la
prueba anterior).

A cada tubo y agregar 20 GOTAS de alcohol

etlico, mezclar suavemente cada tubo. Hgalo
de manera lenta, segura

Se introducen al bao de Mara que se

encuentre hirviendo. Deje enfriar.

RESULTADOS
REACCIN DE BIURET

El tubo 1 control, no presento ningn cambio ni antes ni despus de

llevarlo al bao mara mientras que el tubo al que se le adiciono biuret ,
ates de llevarlo al bao mara presento una tincin azul oscura ,
posteriormente al llevarlo al bao mara su tincin cambio a un color
violeta y esto se debe al rompimiento de enlaces en la molcula.
REACCIN XANTOPROTEICA

El tubo 1 control, no presento ningn cambio ni antes ni

despus de llevarlo al bao mara mientras que el tubo al
que se le adiciono cido ntrico , se desnaturalizo la protena y posteriormente
al someterlo al bao mara , su tincin cambio a un color amarillo presentando
una bifase en el fondo del tubo

DESNATURALIZACIN DE PROTENAS - MTODO POR ALCOHOL

El tubo 1 control, no presento ningn cambio ni antes ni despus de llevarlo al
bao mara mientras que el tubo al que se le adiciono alcohol etlico presento
una bifase blanca y al llevarlo al bao mara la muestra se coagulo debido a
que la protena se desnaturalizo .