RECUENTO MICROBIANO

La determinacin del crecimiento microbiano

y/o biomasa celular dentro de una muestra
clnica, de un bioproceso u otras, constituye
una etapa muy importante para la evaluacin de
su cintica de crecimiento, de all que el
conocimiento de las diferentes posibilidades de
cmo ejecutarlas es de sumo inters dentro de
la formacin en microbiologa

METODOS DE RECUENTO MICROBIANO

METODOS
DIRECTOS

METODOS
INDIRECTO
S

Cmara de
Neubauer

Turbidimetria

Recuento en
Placa
Filtracin
Numero mas
probable (NMP)

Nefelometria

RECUENTO
MICROSCPICO
EN CAMARA DE
NEUBAUER

El hemocitmetro o cmara de Neubauer

Se introduce la suspensin de clulas en el hemocitmetro

La regin de recuento del hemocitmetro

Si 10 clulas promedio por cuadrcula

En las 25 sern 250 clulas
Si estas 250 en 0.1 mm3 entonces en 1 mm3
habrn 2500 clulas
En con secuencia, en 1000 mm3 (= 1 mL) un
total de 2.5 x 106 clulas/mL
Desventajas:
El mtodo no sirve para cultivos
poco densos, celulas mviles.
Frecuentemente es necesario teir

RECUENTO EN PLACA
Se determina el nmero de
microorganismos en una muestra en
relacin a las colonias que forman, las
UFC (Unidades Formadoras de
Colonias). Se emplean soluciones
diluidas o diluciones de una muestra
concentrada para que cada colonia
formada provenga de un solo
microorganismo
aunque
algunas
agrupaciones no pueden ser separadas
por las diluciones. Se utilizan
principalmente para la cuantificacin de
bacterias,
levaduras
y
hongos
filamentosos. Se reporta como:
UFC ****/unidad de volumen o peso

RECUENTO EN PLACA

Antes de la siembra, el cultivo debe diluirse para obtener 30-300 UFC en

MTODOS DE SIEMBRA
Siembra en superficie o en camada

Siembra por incorporacin o placa vertida

FILTRACIN
La membrana de celulosa retiene a los microorganismos
en su malla con poros de 0.25-0.45mm. Esta membrana
se transfiere a un medio de cultivo para el desarrollo de
colonias.

METODO POR FILTRACION

Mtodo estadstico basado en series de diluciones y calculo estadstico del

numero de bacterias presentes en las diluciones mas altas

Tabla NUMERO MAS

PROBABLE

METODOS INDIRECTOS
TURBIDIMETRIA

Mediciones del crecimiento microbiano

Medicin de la densidad o masa celular:
- por turbidez, mediante un espectrofotmetro.

Este mtodo requiere la preparacin de un estndard que relacione el

nmero de clulas con la turbidez.
Es problemtico para muestras de organismos que forman agregaciones
o biofilms. Se suele realizar agitacin.

SISTEMA NEFELOMTRICO DE MAC FARLAND