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TOMA DE MUESTRAS
No debe usarse antisptico previo a la toma de la muestra. Si se utiliza espculo,
lubricar con agua caliente. Es recomendable tomar dos escobillones. Se
introduce un escobilln estril en la vagina y se recoge la muestra de la zona de
mayor exudado, y en su defecto, del fondo del saco vaginal posterior. Se
introduce el escobilln en medio de transporte.
CONSERVACIN Y TRANSPORTE DE LA MUESTRA
El envo de la muestra al laboratorio debe ser inmediato siempre que sea posible.
Cuando no pueda procesarse en el momento se mantendr en frigorfico o a
temperatura ambiente. Nunca refrigerar si existe sospecha de infeccin
gonoccica. Tiempo mximo de procesamiento con medio de transporte: 24 h.
CRITERIOS DE RECHAZO
- Muestras recibidas a partir del da siguiente de su toma.
- Escobillones secos, sin medio de transporte.
- Muestras sin orientacin diagnstica.
PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA
Uno de los escobillones se emplear para el examen microscpico y el otro para
el cultivo.
- Examen microscpico: es el nico mtodo aceptado para el diagnstico
microbiolgico de la vaginosis bacteriana. Se har una extensin del escobilln
en portaobjetos y tincin de Gram.
- Cultivo: Pueden establecerse distintas combinaciones de medios en funcin de
la orientacin diagnstica:
- Agar sangre en atmsfera de CO2.
- Agar Chocolate en atmsfera de CO2.
- McConkey.
- Agar Granada ( 1/4 de placa) en anaerobiosis con cubreobjetos sobre
la siembra en aerobiosis Agar sangre nalidxico en atmsfera de CO2.
- Thayer Martin New York City en atmsfera de CO2.
- Medio para Gardnerella en atmsfera de CO2.
- Sabouraud con antibitico u otro medio para Candida.
- Caldo para cultivo de Trichomonas vaginalis.
EXAMEN DE LA MUESTRA
1. Examen microscpico: En el exudado vaginal normal se observar flora
regional con predominio de morfotipo Lactobacillus sp y clulas epiteliales.
Evaluar:
- La presencia de leucocitos.
- La presencia de levaduras o pseudohifas.
- La presencia nica o abundante de cualquier otro microorganismo.
- El exudado caracterstico de la VAGINOSIS BACTERIANA:
a) Presencia de Clulas clue (clulas epiteliales recubiertas de bacilos o
cocobacilos Gram variables.)
b) Ausencia o escasos Leucocitos.
c) Flora mixta alterada (Ver Criterios de Nugent en tabla 1).
Tabla 1. Interpretacin de VAGINOSIS BACTERIANA mediante tincin de Gram
Lactobacillus
CBGV2
BGNC3
0
>301
0
0
1
5-30
<1
1-4
Puntuacin
2
3
1-4
<1
1-4
5-30
5-30
-
4
0
>30
-
org/campo con objetivo 100X; Cocobacilos Gram variables (morfotipo Gardnerella/Bacteroides); Bacilos
Gram negativos curvados (morfotipo Mobiluncus)
Interpretacin Puntuacin:
De 0 a 3: No vaginosis bacteriana
De 4 a 6: flora vaginal alterada
De 7 a 10: VAGINOSIS BACTERIANA
2. Examen en medios de cultivo: Examinar todos los medios a las 18-24 horas.
Si no crecimiento de patgenos, incubar hasta las 48 h, a excepcin del
McConkey que se descarta a las 18 h. El Thayer Martin New York City y el
caldo de Tricomonas se incubarn, si son negativos, hasta 72 horas.
aerobiosis a 37C.
Mtodo C: Introducir el escobilln para enriquecimiento en BHI caldo selectivo
con antibiticos y subcultivar a las 18-24 horas de incubacin a Agar sangre
nalidxico que ser incubado en atmsfera de CO2 a 37C a placa de Granada
con las mismas condiciones de incubacin que en las contempladas en el
mtodo B.
EXAMEN DE LA MUESTRA
Mtodo A y B: Se examinan los tubos las placas a las 18 h y se observa la
formacin de pigmento naranja en el medio de cultivo indicativo de presencia de
SGB. Los tubos o placas negativos se reincuban hasta las 48 h.
Mtodo C: Se examinan las placas de Granada para presencia de colonias
naranjas o las de agar sangre nalidxico para presencia de colonias hemolticas catalasa negativa y se procede a identificacin de SGB por mtodos
establecidos.
RESULTADOS E INFORME MICROBIOLGICO
Se informar como: No se asla Streptococcus agalactiae
Streptococcus agalactiae.
o Se asla