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EMBRIOLOGIA HUMANA Y GENETICA BASICA

SEMINARIO 3 2015 - I

CLONACIN
La clonacin puede definirse como el proceso por el que se consiguen copias idnticas de un organismo
ya desarrollado, de forma asexual. Estas dos caractersticas son importantes:
Se parte de un animal ya desarrollado, porque la clonacin responde a un inters por obtener copias de
un determinado animal que nos interesa, y slo cuando es adulto conocemos sus caractersticas.
Por otro lado, se trata de hacerlo de forma asexual. La reproduccin sexual no nos permite obtener copias
idnticas, ya que este tipo de reproduccin por su misma naturaleza genera diversidad.
Clonacin molecular
La clonacin molecular se utiliza en una amplia variedad de experimentos biolgicos y las aplicaciones
prcticas van desde la toma de huellas dactilares a produccin de protenas a gran escala.
En la prctica, con el fin de amplificar cualquier secuencia en un organismo vivo, la secuencia a clonar
tiene que estar vinculada a un origen de replicacin; que es una secuencia de ADN.
Transfeccin Se introduce la secuencia formada dentro de clulas.
Seleccin Finalmente se seleccionan las clulas que han sido transfectadas con xito con el nuevo ADN.
Inicialmente, el ADN de inters necesita ser aislado de un segmento de ADN de tamao adecuado.
Posteriormente, se da el proceso de ligacin cuando el fragmento amplificado se inserta en un vector de
clonacin: El vector se linealiza (ya que es circular), usando enzimas de restriccin y a continuacin se
incuban en condiciones adecuadas el fragmento de ADN de inters y el vector con la enzima ADN ligasa.
Tras la ligacin del vector con el inserto de inters, se produce la transfeccin dentro de las clulas, para
ello las clulas transfectadas son cultivadas; este proceso, es el proceso determinante, ya que es la parte
en la que vemos si las clulas han sido transfectadas exitosamente o no.
Tendremos que identificar por tanto las clulas transfectadas y las no transfectadas, existen vectores de
clonacin modernos que incluyen marcadores de resitencia a los antibiticos con los que slo las clulas
que han sido transfectadas pueden crecer. Hay otros vectores de clonacin que proporcionan color azul/
blanco cribado. De modo, que la investigacin de las colonias es necesaria para confirmar que la clonacin
se ha realizado correctamente.
Clonacin celular
Clonar una clula consiste en formar un grupo de ellas a partir de una sola. En el caso de organismos
unicelulares como bacterias y levaduras, este proceso es muy sencillo, y slo requiere la inoculacin de
los productos adecuados.
Sin embargo, en el caso de cultivos de clulas en organismos multicelulares, la clonacin de las clulas
es una tarea difcil, ya que estas clulas necesitan unas condiciones del medio muy especficas.
Una tcnica til de cultivo de tejidos utilizada para clonar distintos linajes de clulas es el uso de aros de
clonacin (cilindros).
De acuerdo con esta tcnica, una agrupacin de clulas unicelulares que han sido expuestas a un agente
mutagnico o a un medicamento utilizado para propiciar la seleccin se ponen en una alta dilucin para
crear colonias aisladas; cada una proviniendo de una sola clula potencialmente y clnicamente
diferenciada.
En una primera etapa de crecimiento, cuando las colonias tienen slo unas pocas clulas; se sumergen
aros estriles de poliestireno en grasa, y se ponen sobre una colonia individual junto con una pequea
cantidad de tripsina.
Las clulas que se clonan, se recolectan dentro del aro y se llevan a un nuevo contenedor para que
contine su crecimiento en forma natural.
Clonacin de organismos de forma natural
La clonacin de un organismo es crear un nuevo organismo con la misma informacin gentica proveniente
de una clula existente. Es un mtodo de reproduccin asexual, donde la fertilizacin no ocurre. En
trminos generales, slo hay un progenitor involucrado. Esta forma de reproduccin es muy comn en
organismos como las amebas y otros seres unicelulares, aunque la mayora de las plantas y hongos
tambin se reproducen asexualmente.
Tambin se incluye la obtencin de gemelos idnticos de manera natural. Se considera como una
alteracin espontnea durante el desarrollo embrionario, ignorndose su causa, aunque existe una
correlacin familiar estadsticamente significativa.
Por qu es posible la clonacin?
La posibilidad de clonar se plante con el descubrimiento del DNA y el conocimiento de cmo se transmite
y expresa la informacin gentica en los seres vivos.

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Para entender mejor esto hace falta recordar brevemente cmo est hecho un ser vivo. Un determinado
animal est compuesto por millones de clulas, que vienen a ser como los ladrillos que forman el edificio
que es el ser vivo. Esas clulas tienen aspectos y funciones muy diferentes. Sin embargo todas ellas tienen
algo en comn: en sus ncleos presentan unas largas cadenas que contienen la informacin precisa de
cmo es y cmo se organiza el organismo: el ADN. Cada clula contiene toda la informacin sobre cmo
es y cmo se desarrolla todo el organismo del que forma parte.

Esto es as por una razn muy sencilla: todas las clulas de un individuo derivan de una clula inicial, el
embrin unicelular o zigoto. Esta clula peculiar, que es ya una nueva vida, se obtiene de forma natural
por la fusin de las clulas reproductoras, vulo y espermatozoide, cada una de las cuales aporta la mitad
del material gentico (la mitad de los planos). En el zigoto tenemos ya la informacin de cmo va a ser el
nuevo organismo: su sexo, sus caractersticas fsicas, todo: los planos completos. A partir de ese momento
esa informacin se ir convirtiendo rpidamente en realidad por dos procesos: la divisin celular y la
especializacin de las clulas.
El zigoto empieza dividindose en clulas que a su vez vuelven a dividirse. As el embrin va creciendo:
primero consta una sola clula, que se divide en dos, y luego en 4, 8, 16, etc. En cada divisin se hace
una copia del ADN presente al inicio (fotocopias de los planos), para que cada clula tenga la informacin
de cmo es todo el individuo. Millones de divisiones despus, tendremos un organismo desarrollado
compuesto de millones de clulas que tienen todas ellas toda la informacin, la misma contenida en el
zigoto.
Conforme aumenta el nmero de clulas estas van especializndose y adquiriendo diferentes funciones.
En las primeras etapas de la vida del embrin las clulas que lo constituyen no tienen unas caractersticas
concretas, estn poco especializadas, pero por eso mismo tienen mucha potencialidad: son capaces de
transformarse en cualquier tipo celular, o incluso -en las primeras etapas- de dar lugar a un nuevo
organismo. En el organismo adulto, sin embargo, las clulas ya tienen funciones bien definidas y pierden
potencialidad. Esta especializacin o diferenciacin celular, viene determinada por el uso del ADN: cada
clula utiliza slo la parte del ADN que corresponde a su funcin. De modo que, aunque cada clula tenga
toda la informacin, no la utiliza toda, sino slo la parte que le corresponde.
Una precisin sobre las clulas reproductoras, vulos y espermatozoides. Son una excepcin a lo dicho
hasta ahora, porque su material gentico, su ADN, no es igual al del resto de las clulas del organismo:
tienen la mitad de molculas de ADN, para que al fusionarse con las aportadas por la otra clula
reproductora den lugar a una dotacin gentica completa; y, adems, cada clula reproductora de un
mismo organismo recibe una mitad diferente del ADN caracterstico de ese individuo. Ese es el origen de
la diversidad en la reproduccin sexual y la razn por la cual cualquier embrin producido por fecundacin
es una incgnita: hasta que crezca no conoceremos sus caractersticas.

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Teniendo todo esto en cuenta, cualquier clula del organismo adulto (clulas somticas, no reproductoras)
puede servir tericamente para obtener un nuevo ser vivo de las mismas caractersticas, ya que tiene en
su ADN la informacin de cmo es y cmo se desarrolla ese determinado organismo. Se tratara de tomar
una clula cualquiera, exceptuando las clulas reproductoras que tienen una dotacin incompleta, y
conseguir que esa informacin se exprese, se ponga en funcionamiento y nos produzca otro ser. Clonar
consistira por tanto en reprogramar una clula somtica para que empiece el programa embrionario. Una
vez comenzado su desarrollo se implantara en un tero, ya que de momento no es posible que los
embriones lleguen a trmino fuera de un tero.
Adems, disponemos de tecnologa adecuada, tanto para conseguir que las clulas vivan y crezcan fuera
del cuerpo, mediante las llamadas tcnicas de cultivo celular, como para implantar con xito embriones
generados in vitro, por las tcnicas de manipulacin de embriones.

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Qu dificultades presenta?
Sin embargo, pronto se comprob que no es en absoluto fcil conseguir un nuevo ser a partir de una clula
cualquiera del organismo adulto. La clonacin, por el contrario, presentaba dificultades aparentemente
insuperables. Las clulas de distintos tipos que constituyen el ser vivo pueden vivir y crecer en cultivo, pero
es muy difcil que den lugar a un nuevo individuo: se limitan a dividirse y producir ms clulas
especializadas como ellas. Aunque tienen la informacin de cmo hacer el ser vivo, la especializacin ha
hecho que pierdan memoria: slo recuerdan la parte de informacin que usan habitualmente, y no pueden
reprogramarse y empezar de cero a producir un nuevo ser. O al menos esto se pensaba hasta que se
public la existencia de Dolly.

2. Cmo se hizo Dolly

Dolly ha sido el primer animal clonado, es decir, generado a partir de una clula diferenciada o somtica,
sin que hubiese fecundacin. Esa clula proceda de un cultivo de clulas obtenidas a partir de la ubre de
la oveja que se quera clonar. Como hemos dicho antes, las clulas de un determinado tejido cuando se
mantienen vivas fuera del cuerpo -en cultivo-, no dan espontneamente embriones, sino ms clulas
diferenciadas como ellas: no recuerdan cmo se lleva a cabo el programa embrionario.
Para lograr que una de esas clulas recuperase la memoria y diera lugar a un nuevo ser, se recurri a
una tcnica denominada transferencia nuclear: se tom el ncleo de esa clula, que es la parte que
contiene el ADN y por tanto la informacin, y se fusion con el citoplasma de un vulo procedente de otra
oveja, al que previamente se haba eliminado el ncleo. Se utiliz un vulo porque es una clula equipada
para el desarrollo embrionario, y su citoplasma (el contenido que rodea al ncleo) vendra a ser de algn
modo el entorno adecuado para que el ncleo de la clula adulta se reprogramara. Y, en efecto, as fue:
esa clula se transform en un embrin unicelular y comenz el sofisticado programa embrionario, de
manera idntica al que se obtiene por la fusin de un vulo y un espermatozoide. Tras unos das de
crecimiento in vitro el embrin se implant en una madre de alquiler y 148 das despus naci Dolly, una
oveja genticamente idntica a la de partida.

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El proceso de obtencin de Dolly fue muy costoso, y en la actualidad no se ha mejorado mucho. Dolly fue
el nico resultado positivo de 277 intentos, a partir de los cuales se consiguieron 29 embriones, muchos
de estos no llegaron a desarrollarse y otros murieron al poco de nacer.
Con todo, Dolly fue un logro cientfico muy importante. Demostr que hay ms de un modo de obtener
nuevos animales. Por un lado tendramos la reproduccin natural, que es sexual y que produce diversidad;
y, por otro, la clonacin: una reproduccin artificial, asexual, y que da lugar a individuos idnticos.
Desde el punto de vista tcnico, los animales clonados tambin han presentado problemas: adems de
presentar un porcentaje mayor de malformaciones, padecen con frecuencia un sndrome que se manifiesta
en que su tamao es mayor de lo normal, y que tiene consecuencias negativas para su salud y desarrollo.
3. La clonacin animal: aplicaciones e implicaciones ticas
Cules son las posibles aplicaciones de la clonacin en animales?:
La clonacin nos permitira contar con muchas copias idnticas de animales que nos interesan por diversos
motivos: por sus caractersticas naturales (produccin de leche, salud, longevidad...) o por caractersticas
que hemos introducido nosotros gracias a las nuevas tecnologas de manipulacin gentica. En los ltimos
aos se ha presenciado un desarrollo espectacular de tcnicas que permiten manipular genticamente
animales y plantas. Son los organismos llamados "transgnicos": plantas y animales a los que se ha
alterado su informacin gentica, su ADN, sus planos, generalmente introduciendo determinados genes
que los hacen ms productivos. El caso de Dolly es un ejemplo. La oveja del Roslin Institute era parte de
un ambicioso programa de la empresa PPL Therapeutics que tena como objeto obtener a gran escala
animales modificados genticamente que produjeran en su leche protenas humanas de inters
teraputico. El proceso de obtencin de animales transgnicos es complejo y da lugar a pocos individuos,
al menos si se considera desde el punto de vista de la produccin a gran escala. La clonacin permitira
contar con un gran nmero de los animales ms adecuados. Otra aplicacin es la posibilidad de contar
con muchas copias de animales modificados genticamente para que sus rganos no produzcan rechazo
al ser trasplantados al hombre (xenotranplantes).
La clonacin permitira adems ampliar las posibilidades de manipulacin gentica. Las clulas en cultivo
de las que se parte en la clonacin son un material muy adecuado para introducir o eliminar determinados
genes y se ampliaran mucho las posibles modificaciones genticas que las tcnicas actuales no permiten.
El disponer de copias idnticas de determinados animales sera muy til para la investigacin.
Concretamente para conocer con ms precisin cmo afecta la variabilidad gentica entre individuos o la
presencia de determinadas mutaciones al desarrollo de ciertas enfermedades.
Junto con sus innegables ventajas, la clonacin animal presenta tambin para algunas objeciones ticas.
Las principales se refieren al impacto medioambiental que tendran los animales clonados y a la propia
supervivencia de la especie. La diversidad que proporciona la reproduccin sexual es una ventaja desde
el punto de vista biolgico, ya que supone para la especie en su conjunto el contar con individuos variados
que puedan adaptarse a las condiciones tambin diversas del entorno. De hecho, slo las especies ms
primitivas tienen modos de reproduccin que no dan lugar a individuos diversos sino a muchas copias
idnticas a los progenitores, son los llamados modos de reproduccin asexual: gemacin biparticin,
etc...Por eso existe el temor de que se empobrezca el patrimonio gentico de las especies por la
manipulacin del hombre y que eso tenga consecuencias irreversibles en el ecosistema. Sin embargo, ese
peligro no parece inevitable, si se ponen las medidas adecuadas para que se respete la biodiversidad y la
riqueza natural. La propia complejidad de la clonacin asegura que los animales clonados no se
produciran indiscriminadamente, sino que estaran limitados a fines de produccin ganadera o teraputica,
y seran necesariamente un nmero relativamente limitado (adems de que siempre seran capaces de
reproducirse a su vez sexualmente).
4. La clonacin humana y sus implicaciones ticas
La publicacin de la existencia de Dolly levant inmediatamente un debate sobre la posibilidad de clonar
personas. La proximidad biolgica hace pensar que la clonacin humana sera posible desde un punto de
vista tcnico, aunque haya factores limitantes (principalmente el nmero de vulos necesarios: hicieron
falta ms de 400 para conseguir a Dolly). El debate, por tanto, se sita en un contexto tico, no en si es
posible llevarla a cabo, sino en si es conveniente, si debe aprobarse
Son muchas las consideraciones ticas que pueden hacerse en torno a la clonacin humana. Una
aproximacin sera considerar el fin de la clonacin: si es obtener un nuevo ser desarrollado (clonacin
con fines reproductivos) o un embrin que ser destruido para proporcionar clulas o tejidos (clonacin
humana con fines teraputicos).

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a. La clonacin con fines reproductivos

Existe entre la comunidad cientfica una actitud bastante generalizada de rechazo hacia la clonacin
humana con fines reproductivos, aunque slo sea por consideraciones prcticas: bajo porcentaje de xitos,
alto nmero de vulos requerido, posibilidad de alteraciones o enfermedades en los clones... Estas
objeciones, que se centran en las consecuencias negativas, no parecen tener suficiente fundamento, y
con frecuencia se oye a investigadores afirmar que si hubiese un motivo realmente importante para clonar
seres humanos no veran inconvenientes en que se hiciera. Los argumentos con un fundamento de tipo
antropolgico, y por tanto ms slido, podran resumirse del siguiente modo:
La clonacin, incluso si no conllevara la muerte de embriones y tuviese un 100% de xito dando lugar a
un ser humano sin fallos, supone un atentado a la persona as generada, que sufrira una manipulacin
difcil de superar:
El clonado sera seleccionado positivamente por otros, que han decidido cul va a ser su dotacin gentica
y sus caractersticas biolgicas.
El clonado sera generado con un fin: emular a alguien cuyas caractersticas interesan por algn motivo:
un hijo fallecido al que se pretende sustituir, un genio cuyas habilidades interesa mantener, etc. Las
consecuencias psicolgicas de esa presin seran imprevisibles.
El clonado carecera de las relaciones elementales de familia: no tendra en absoluto padre, ni propiamente
hablando madre: tendra un hermano gemelo mayor, una madre ovular (citoplsmica?) y una madre de
alquiler.
Se puede formular positivamente lo expuesto diciendo que, cualquier ser humano tiene derecho a que:
Ningn tercero decida su componente gentico.
Ser querido por s mismo y no para conseguir un fin, como emular o reemplazar a alguien (planteamiento
que supone, adems, un desconocimiento total de cmo son los seres humanos).
Tener un padre y una madre de los que procede, tambin biolgicamente y que son responsables de l.
Dicho de otro modo: la clonacin reproductiva atenta a la libertad del clon, fija sus condiciones biolgicas
segn el criterio de otros, y en ese sentido es un ejemplo difcilmente superable de manipulacin del
hombre por la tcnica (manejada por terceros).
b. La clonacin humana con fines teraputicos: el descubrimiento de las clulas madre
embrionarias.
En el campo de la aplicacin teraputica de los embriones se encuentra el verdadero debate que zarandea
actualmente la opinin pblica y a la comunidad cientfica. Para describir con detalle en qu consistiran
esas posibles aplicaciones hay que hacer referencia a algunos descubrimientos o avances recientes, que
no estn directamente relacionados con la clonacin. Concretamente:
La posibilidad de curar enfermedades llevando a cabo trasplantes no con rganos completos, sino con
clulas, mediante la llamada terapia celular. Esto parece una buena alternativa para determinadas
enfermedades que son el resultado del mal funcionamiento de una poblacin bien definida de clulas.
Consistira en reemplazar las clulas enfermas por otras sanas, sin necesidad de trasplantar el rgano
entero.
La posibilidad de obtener clulas madre embrionarias. En el ao 1998 dos grupos de Estados Unidos
publicaron la obtencin de clulas madre embrionarias a partir de embriones humanos que procedan de
la fecundacin in vitro. Esos embriones estaban en la fase llamada de blastocisto. Los blatocistos son
embriones de 5-6 das y que tienen un aspecto esfrico con una cavidad interna. Se diferencian en ellos
lo que es propiamente el embrin (un grupo de clulas llamado masa celular interna), de las clulas que
darn lugar a la placenta (llamadas trofoblasto). Los logros de estos grupos fueron de tipo tcnico:
tomaron masas celulares internas de varios blastocistos (destruyndolos en el proceso) y las pusieron en
cultivo. Consiguieron por un lado que esas clulas, llamadas clulas madre embrionarias, viviesen y se
dividieran activamente en cultivo; y por otro lograron una especializacin dirigida de esas clulas:
tratndolas con diferentes factores consiguieron que dieran lugar a clulas tipo piel (ectodermo), tipo tubo
digestivo (endodermo) o tipo msculo (mesodermo).

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En qu consiste entonces la propuesta de clonacin humana con fines teraputicos? Consistira

en combinar la tcnica de clonacin con la de obtencin de clulas madre embrionarias, para curar a
adultos que tuviesen una enfermedad que pudiera resolverse mediante trasplante celular. Esto se hara
de la siguiente manera:
1. Mediante la tcnica empleada en Dolly se generara un embrin a partir de clulas diferenciadas de la
persona que se quiere curar.
2. El embrin obtenido por clonacin se destruira a los 6 das para obtener a partir de l clulas madre
embrionarias.
3. Esas clulas se especializaran hacia el tipo celular necesario para curar a la persona en cuestin.
4. Se implantaran esas clulas para curar a la persona.
Al proceder de un embrin idntico a la persona de partida, las clulas no provocaran rechazo al ser
implantadas y adems la posibilidad de mantener congelados los cultivos celulares proporcionara una
fuente casi ilimitada de tejidos. Hay que indicar que desde el punto de vista tcnico este proceso es an
una mera posibilidad y hara falta mucha investigacin para ponerlo en marcha: no se han conseguido
todava tipos celulares bien definidos a partir de clulas madre embrionarias y hay pocas evidencias de
que de hecho puedan curar enfermedades.

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Y las implicaciones ticas de este procedimiento? En este caso no hay manipulacin del nuevo ser
humano, como sucede en la clonacin con fines reproductivos, por la sencilla razn de que ese embrin
nunca llegar a trmino porque ser destruido para ser fuente de tejidos. Ese mismo embrin implantado
en el tero de una mujer dara lugar a un nio, porque el proceso de clonacin es idntico sean cuales
sean sus fines (reproductivos o teraputicos). Salta a la vista que el trmino teraputico aplicado a este
proceso es equvoco: es teraputico para un ser humano, pero a costa de la vida de otro. La ilicitud de
este tipo de clonacin se basa en el derecho a la vida que exige la dignidad de todo ser humano,
independientemente de su grado de desarrollo. Nadie tiene derecho a la salud a cualquier precio, y menos
si el precio es otra vida humana.
5. Algunas alternativas a la clonacin humana con fines teraputicos
Existen alternativas a la clonacin humana con fines teraputicos que no presentan objeciones ticas tan
serias. La ms interesante es la posibilidad de conseguir clulas madre de origen no embrionario.
En el cuerpo humano existen clulas madre de adulto que son precursoras de otros tipos celulares: clulas
menos especializadas que podran dar lugar a varios tipos de clulas. En los ltimos aos se ha
descubierto que estas clulas son mucho ms verstiles de lo que se pensaba. Si se ponen en cultivo y
se tratan con diversos factores puede hacerse que se diferencien hacia tipos celulares muy diferentes de
aquellos a los que habitualmente dan lugar en el cuerpo. Por ejemplo, a partir de clulas de mdula sea
se han conseguido clulas de msculo, hueso, clulas nerviosas, hepatocitos, etc... Las clulas madre se
encuentran en el adulto en la mdula sea, el sistema nervioso y rganos diversos.
Tambin pueden obtenerse clulas madre del cordn umbilical y de la placenta del recin nacido. Como
ya hemos indicado, placenta y cordn umbilical proceden del embrin y sus clulas tampoco provocaran
rechazo.

Utilizar esas clulas para auto-transplantes no presentara ningn inconveniente tico, ya que no habra
una nueva vida implicada. Otras posibilidades seran la modificacin gentica de clulas madre
procedentes de otras personas para que no provocaran rechazo, o la existencia de bancos de clulas a
los que se pudiera acudir para buscar clulas compatibles con la persona que las va a recibir.
En definitiva: hay muchas vas teraputicas que van hacindose posibles por el desarrollo de la ciencia y
que no vulneran el respeto debido a la vida humana en todas las fases de su desarrollo. Es deber de todos
defender la vida humana y fomentar que se canalicen los esfuerzos de la investigacin hacia lo que son
verdaderos avances.

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Los productos transgnicos

Son productos de origen animal o vegetal obtenidos a partir de individuos cuya informacin gentica ha
sido manipulada por el hombre a fin de modificar alguna de sus caractersticas gracias a que poseen
determinados genes introducidos por el hombre mediante ingeniera gentica; as por ejemplo existen
variedades de cereales que soportan plagas y sequas, frutos que tardan ms en madurar o en pudrirse,
animales con rganos de caractersticas parecidas a los humanos, etc.
Para sus defensores representan el final de algunos problemas de la humanidad, como son la carencia de
rganos para transplantes o la erradicacin del hambre en el mundo, para sus detractores suponen un
riesgo para la salud humana no calculado, por el hecho de que acumulan insecticidas, pierden sus
cualidades nutritivas, o pueden transmitir al hombre enfermedades de otros seres vivos.
ACTUALIZACIONES
Clonacin teraputica de clulas productoras de insulina a partir de una paciente de diabetes
La medicina regenerativa est de enhorabuena. Un ao despus de que el equipo de Shoukhrat Mitalipov
anunciara haber generado clulas madre embrionarias humanas mediante transferencia nuclear,
investigadores de Nueva York y Jerusaln publican la primera aplicacin clnica, obteniendo clulas
pancreticas que secretan insulina a partir de una paciente de diabetes.
El estudio, dirigido por Dieter Egil, ha conseguido sobrepasar algunas de las limitaciones tcnicas del
mtodo, basado en la transferencia del ncleo de una clula somtica a un vulo al que se ha extrado el
ncleo. Para ello, el primer paso de la investigacin consisti en el anlisis detallado de los parmetros
que afectan al desarrollo del blastocisto (estadio temprano del embrin en el que se obtienen las clulas
madre pluripotentes) o a la posterior derivacin de las clulas madre hacia el tipo celular de inters. A
continuacin, los investigadores llevaron a cabo una serie de modificaciones en el protocolo de activacin
de los ovocitos que resultaron crticas para el xito del experimento.
La transferencia nuclear de clulas somticas incluye tres pasos principales: la enucleacin del ovocito, la
transferencia del ncleo somtico y la posterior activacin del ovocito. En este proceso es crucial que el
ovocito se active en el momento adecuado, y adems que la activacin permita el desarrollo hacia estadios
posteriores en ausencia de su material gentico original. Los investigadores solventaron estos pasos de
dos formas. Para evitar la activacin prematura del ovocito durante la fusin celular con el ncleo de las
clulas de origen somtico, diluyeron el virus que se utiliza para favorecer la unin de las clulas (Virus
Sendai) en un medio carente de calcio, ya que estudios previos indicaban que la presencia de calcio en el
medio poda activar el ovocito antes de tiempo. En cuanto a la activacin tras la fusin, el equipo de Egil
consigui mejorar el desarrollo del blastocisto mediante la utilizacin combinada de inhibidores de kinasas
meiticas y puromicina, con inhibidores de deacetilasas de histonas. De este modo, partiendo de clulas
adultas somticas de una paciente con diabetes de tipo I obtuvieron lneas celulares que expresaban
marcadores de pluripotencia y que al ser expuestas a factores moleculares especficos se diferenciaron
en neuronas y clulas pancreticas productoras de insulina.
Tras el descubrimiento en 2006 de que clulas maduras pueden ser reprogramadas para convertirse en
pluripotentes con capacidad para diferenciarse en distintos tipos celulares, la clonacin teraputica haba
perdido parte de su inters en la comunidad cientfica y la opinin pblica. Las indudables ventajas de las
clulas madre pluripotentes inducidas, como la generacin de clulas madre a partir del propio paciente
sin utilizar embriones y la posibilidad de llevar a cabo trasplantes autlogos, desplazaron temporalmente
a la controvertida clonacin teraputica a un segundo plano. Sin embargo, en los ltimos aos la utilizacin
de clulas pluripotentes inducidas no ha avanzado tan deprisa como se esperaba y a pesar de haber
proporcionado valiosa informacin sobre los mecanismos de diferenciacin celular y procesos patolgicos
de enfermedades humanas, su aplicacin clnica se ha visto frenada por importantes limitaciones en
relacin con la seguridad de los pacientes, de modo que se hace necesaria una optimizacin para su uso
teraputico.
Con el trabajo sobre la generacin de clulas productoras de insulina a partir de clulas de una paciente
con diabetes, Dieter Egil y su equipo de investigadores vuelven a recuperar la clonacin teraputica como
una importante tcnica para generar clulas que pueden ser utilizadas con fines clnicos, no solo en el
caso de la diabetes, donde dan un paso adelante hacia el tratamiento de pacientes diabticos con sus
propias clulas productoras de insulina, sino tambin en otras enfermedades humanas como el Parkinson
o la esclerosis mltiple.
Referencia: Yamada M, Johannesson B, Sagi I, Burnett LC, Kort DH, Prosser RW, Paull D, Nestor MW,
Freeby M, Greenberg E, Goland RS, Leibel RL, Solomon SL, Benvenisty N, Sauer MV, Egli D. Human

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oocytes reprogram adult somatic nuclei of a type 1 diabetic to diploid pluripotent stem cells. Nature. 2014
Apr 28. doi: 2014 - Revista Gentica Mdica

Polmica y preocupacin ante la edicin del genoma en embriones humanos

Las nuevas tcnicas de edicin del genoma han abierto la posibilidad de modificar de forma precisa el
ADN humano. La tecnologa, segn un gran nmero de especialistas, ya est puesta a punto. Las
consecuencias de su aplicacin, sin embargo, todava se desconocen.
Un ao despus de que se obtuvieran con xito los primeros primates adultos con mutaciones especficas,
introducidas mediante tcnicas de edicin del genoma, los intensos rumores de que ya se ha modificado
el genoma en embriones humanos han levantado la voz de alarma en la comunidad cientfica. Dichos
rumores parecen tener fundamento, ya que el equipo de Nature News ha comunicado que varios
investigadores, que no desean hacer pblicos sus nombres, han informado de la existencia de diversos
trabajos, en los que se ha modificado el genoma en embriones humanos, que estn siendo considerados
para su publicacin. Ante esta posibilidad, la respuesta no se ha hecho esperar y cinco expertos en
tcnicas de edicin del genoma han publicado un comentario en el que solicitan una moratoria por parte
de la comunidad cientfica al completo, para retrasar la utilizacin de esta tecnologa en humanos y en el
que urgen a iniciar el dilogo sobre si deberan de llevarse a cabo investigaciones futuras que conlleven la
modificacin gentica de clulas germinales en la especie humana, y en qu circunstancias deberan
permitirse.
Editando directamente el genoma de un embrin en el estado de una clula se puede llegar a obtener un
individuo con todas sus clulas modificadas. No obstante, la tasa con la que esto se consigue es baja, y
existe la posibilidad de que se genere un mosaico, esto es, que el organismo obtenido, no tenga la misma
composicin gentica en todas sus clulas. Debido a esta razn, la aproximacin requiere la generacin
de un gran nmero de embriones para obtener uno completamente modificado. Otro planteamiento es la
obtencin de clulas germinales (vulos y espermatozoides) modificadas, con los que, posteriormente,
llevar a cabo la fecundacin. Mediante este mtodo se pueden generar multitud de clulas o embriones
modificados entre los que se podran seleccionar aquellos que incluyen el cambio. Una vez desarrollados
en adultos, los individuos modificados podran transmitir parte de su genoma editado a su descendencia.
Las aplicaciones mdicas de una modificacin precisa y dirigida del genoma humano en embriones son
inmediatas, ya que su utilizacin evitara la transmisin de enfermedades causadas por mutaciones
patognicas a la descendencia. Sin embargo, no se sabe si esta modificacin del genoma podra generar
problemas despus del nacimiento o a largo plazo, ni las consecuencias que podra haber a nivel de la
especie humana en su conjunto en las sucesivas generaciones. Sin olvidar, que aunque la intencin inicial
fuera exclusivamente teraputica, la tecnologa puede potencialmente introducir cambios relacionados con
otras caractersticas, lase color de ojos, de peloy la facilidad con la que se puede utilizar podra derivar
en el temido diseo de nios a la carta. En cualquier caso, en su comentario, titulado No editad la lnea
germinal humana, los investigadores sealan que, sean o no filosfica o ticamente justificables, estas
aplicaciones son irrelevantes hasta que sea posible demostrar que su utilizacin es segura y se obtengan
datos reproducibles a travs de mltiples generaciones.
Adems de la preocupacin por las implicaciones ticas y de seguridad que conlleva la utilizacin de
tcnicas de edicin del genoma en la lnea germinal humana, los cientficos temen que el impacto negativo
generado por la polmica pueda afectar a la utilizacin de las tcnicas de edicin en clulas de la lnea
somtica (clulas que no se transmiten a la descendencia), la cual est generando resultados muy
prometedores para el tratamiento de diversas enfermedades humanas.
En cuanto a las consideraciones legales, aunque muchos pases no tienen una legislacin que permita o
prohba la ingeniera gentica en humanos, por considerar esta rea como algo experimental, en los pases
donde s existen leyes relativas a la modificacin gentica, esta prctica est prohibida en humanos, al
igual que en muchos casos lo est la modificacin de la lnea germinal. No obstante, conviene tener en
cuenta que la mayor parte de las normativas fueron instauradas antes de que la avanzada tcnica de
CRISPR estuviera disponible, por lo que podran ser modificadas para aceptar la intervencin teraputica.
En cualquier caso, la polmica est servida. Algunos investigadores como David Sinclair, de la Universidad
de Harvard, indican que la pregunta no es si la obtencin de embriones humanos modificados tendr lugar
o no, sino bien cundo ser llevada a cabo.
Referencias:
Lanphier E, et al. Dont edit the human germ line. Nature. 2015. March 12. Doi: 10.1038/519410a

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USMP

EMBRIOLOGIA HUMANA Y GENETICA BASICA

SEMINARIO 3 2015 - I

Regalado, A. Engineering the Perfect Baby. MIT Tech Rev. 2015

http://www.technologyreview.com/featuredstory/535661/engineering-the-perfect-baby/
Cyranoski D. Scientists sound alarm over DNA editing of human embryos. Nature News. 2015. Doi:
10.1038/nature.2015.17110
2014 - Revista Gentica Mdica

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