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GUIA DE ESTUDIO BIOTECNOLOGIA VEGETAL

QU ES ASEPSIA?
R: LA ASOCIACIN EXPLANTE-MEDIO Y LAS CONDICIONES FSICAS EN QUE
NORMALMENTE SE INCUBAN LOS CULTIVOS CONFORMAN UN AMBIENTE
PROPICIO PARA LA PROLIFERACIN DE MICROORGANISMOS (BACTERIAS,
HONGOS), LOS CUALES PUEDEN DESTRUIR TALES CULTIVOS, COMPETIR CON EL
EXPLANTE POR EL MEDIO DE CULTIVO O MODIFICARLO.
POR QU SE DEBE EVITAR LAS CONTAMINACIONES CON MICROORGANISMOS?
R: EL ESTABLECIMIENTO DE LOS CULTIVOS
MANIPULACIN.

ASI MISMO SU INCUBACIN Y

QU ES NECESARIO TOMAR EN UENTA PARA PARA ESTABLECER CULTIVOS


ASPTICOS?
R: TRABAJAR EN AMBIENTES ADECUADOS, ESTERILIZAR LOS MEDIOS DE
CULTIVOS, DESINFECTAR SUPERFICIALMENTE LOS EXPLANTES, LIBERNDOLOS
DE BACTERIAS Y HONGOS EXGENOS Y REALIZAR LOS CULTIVOS RESPETANDO
CIERTAS NORMAS DE ASEPSIA.
CULES SON LOS COMPUESTOS QUMICOS QUE SE PUEDEN UTILIZAR COMO
DESINFECTANTES PARA LOS EXPLANTES?
R: ETANOL (70% V/V) Y DE HIPOCLORITO DE SODIO (NAOCL) DEL 1% AL 3%
CONTENIDO EN PRODUCTOS DE USO DOMSTICO (AGUA DE LAVANDINA).
QU IMPLICA HACER USO DE ANTIBIOTICOS?
R: QUE NO PREVIENEN LA PROLIFERACIN DE TODOS LOS MICROORGANISMOS;
ADEMS, TALES PRODUCTOS MODIFICAN LA COMPOSICIN DE LOS MEDIOS DE
CULTIVO Y PUEDEN SER METABOLIZADOS POR LOS EXPLANTES.
POR ASEPSIA EN EL ESTABLECIMIENTO Y ULTERIOR MANIPULACIN DE LOS
CULTIVOS ES PRECISO ADOPTAR ALGUNAS PRECAUCIONES DURANTE LAS
TAREAS QUE SE LLEVAN A CABO EN LA CMARA DE TRANSFERENCIA CULES
SON?
R: DESINFECTAR LA MESA Y LAS PAREDES DE LA CMARA CON ETANOL 70%,
DESINFECTAR LA PARTE EXTERNA DE LOS RECIPIENTES QUE CONTIENEN LOS
MEDIOS DE CULTIVO O EL AGUA ESTRIL, ANTES DE INTRODUCIRLOS A LA
CMARA, LOS INSTRUMENTOS METLICOS EMPLEADOS SE DEBEN FLAMEAR
PREVIAMENTE CON ETANOL 95%. EL MATERIAL DE VIDRIO UTILIZADO COMO
SOPORTE PARA LAS DISECCIONES (GENERALMENTE CAJAS PETRI) DEBE ESTAR
ESTERILIZADO AL IGUAL QUE LAS PIPETAS QUE COMNMENTE SE USAN EN
TRABAJOS CON SUSPENSIONES CELULARES Y PROTOPLASTOS.
MUY POCOS CULTIVOS IN VITRO SON AUTTROFOS, Y POR LO TANTO ES
NECESARIO AGREGAR.
R: UNA FUENTE DE CARBONO

LA SACAROSA (2% A 5%) ES EL AZCAR QUE MS SE UTILIZA SIN EMBARGO LA


PODEMOS SUSTITUIR POR
R: POR GLUCOSA Y EN MENOR MEDIDA POR FRUCTUOSA; EN GENERAL, LA
MATOSA Y LA GALACTOSA SON MENOS EFECTIVAS.
QU CONTIENEN LOS MEDIOS DE CULTIVO?
R: CONTIENEN FOSFORO, CALCIO, MAGNESIO Y AZUFRE EN CONCENTRACIONES
DE 1 A 3 MM
SI BIEN LOS MEDIOS DE CULTIVO CONTIENEN COMNMENTE VARIAS
VITAMINAS, ES PROBABLE QUE EN FORMA GENERAL SOLO SEA ESENCIAL LA
INCORPORACIN DE
R: TIAMINA
POR QU SE DEBE CONSIDERAR ESPECIALMENTE LA PUREZA DEL AGAR?
R: PORQUE ES FRECUENTEMENTE
NATURALEZA VARIADA.

LA

PRESENCIA

DE

IMPUREZAS

DE

CULES SON LAS AUXINAS QUE MS SE UTILIZAN EN EL ESTABLECIMIENTO DE


LOS CULTIVOS?
R: 2,4-D, ANA, AIA Y AIB
CULES SON LAS CITOCININAS QUE MS SE EMPLEAN?
R: KIN, BAP Y ZEA.
PARA QUE SON NECESARIAS LAS GIBERELINAS?
R: PARA EL CULTIVO DE PICES O MERISTEMOS CAULINARES DE VARIAS
ESPECIES VEGETALES COMO PHASEOLUS VULGARIS, SOLANUM TUBEROSUM,
FRAGARIA X ANANASSA, MANIHOT ESCULENTA Y OTRAS.
EN ALGUNOS MEDIOS SE ADICIONAN CIDOS ORGNICOS, CULES SON?
R: EL CTRICO, EL MLICO, EL SUCCNICO Y EL PIRVICO, COMO PRECURSORES
DE AMINOCIDOS; TAMBIN ES FRECUENTE LA ADICIN DE L-GLUTAMINA Y DE
CASENA HIDROLIZADA (0.1% A 1%).
POR QU EL EMPLEO DE SUSTANCIAS ANTIOXIDANTES PUEDE SER DE GRAN
UTILIDAD?
R: PARA EL CULTIVO DE EXPLANTES CON ALTO CONTENIDO DE POLIFENOLES,
CUYA OXIDACIN PRODUCE OSCURECIMIENTO Y EVENTUAL MUERTE DE LOS
EXPLANTES. EN ESTOS CASOS TAMBIN ES TIL USAR LAS SOLUCIONES
ANTIOXIDANTES DURANTE LA PREPARACIN DEL EXPLANTE, COMO TAMBIN
INCUBAR LOS CULTIVOS EN LA OSCURIDAD O A BAJAS INTENSIDADES DE LUZ.
INDICACIONES NECESARIOAS PARA LA PREPARACION DEL MEDIO DE CULTIVO

R: ES NECESARIO PREPARAR EL MEDIO DE CULTIVO UTILIZANDO AGUA


DESTILADA O AGUA DESMINERALIZADA-DESTILADA (H2O, DD).SE DEBE EVITAR
EL ALMACENAMIENTO PROLONGADO DEL MEDIO PARA EVITAR LA
ACUMULACIN DE CONTAMINANTES; TODAS LAS SUSTANCIAS QUMICAS
USADAS PARA SU PREPARACIN DEBEN SER DE UN ALTO GRADO DE PUREZA.
CULES CON LOS PASOS PARA LA PREPRACION DE MEDIOS SEMISLIDOS SIN
SUSTANCIAS TERMOLBILES?
R: INCORPORACIN DEL MEDIO BASAL (MB), DE LOS REGULADORES DE
CRECIMIENTO O DE OTROS COMPUESTOS. AJUSTE DEL PH. ADICIN Y
DISOLUCIN DEL AGAR. DISTRIBUCIN EN LOS RECIPIENTES DE CULTIVO
(TUBOS DE ENSAYO, CAJAS PETRI, ETC.). ESTERILIZACIN EN LA AUTOCLAVE.
MEDIOS LQUIDOS CON O SIN SUSTANCIAS TERMOLBILES. PARA SU
PREPARACIN SE SIGUE EL MISMO PROCEDIMIENTO DE A., PERO SIN
ADICIONAR AGAR, Y HACIENDO LA ESTERILIZACIN POR FILTRACIN EN EL
CASO DE MEDIOS QUE CONTENGAN SUSTANCIAS TERMOLBILES.
CULES SON LOS PASOS PARA LA PREPRACION DE MEDIOS SEMISLIDOS CON
UNA O MS SUSTANCIAS TERMOLBILES?
R: INCORPORACIN DE LOS COMPUESTOS QUE PUEDEN SER ESTERILIZADOS EN
EL AUTOCLAVE (TANTO LOS DEL MB COMO LOS REGULADORES DE
CRECIMIENTO U OTROS COMPUESTOS). AJUSTE DEL PH. ADICIN Y DISOLUCIN
DEL AGAR.ESTERILIZACIN EN EL AUTOCLAVE. INCORPORACIN (OPERANDO
EN LA CMARA DE TRANSFERENCIA) DE LA(S) SUSTANCIA(S) TERMOLBIL(ES),
PREVIAMENTE ESTERILIZADAS
POR FILTRACIN.
LOS COMPONENTES
ESTERILIZADOS (PASO3) SE DEBEN MANTENER A UNA TEMPERATURA ENTRE 40
Y 50 C. DISTRIBUCIN (OPERANDO EN LA CMARA DE TRANSFERENCIA) DEL
MEDIO EN LOS RECIPIENTES DE CULTIVO (TUBOS DE ENSAYO, CAJAS PETRI,
ETC.) PREVIAMENTE ESTERILIZADOS EN EL AUTOCLAVE.

CULES SON LOS PASOS PARA LA PREPARACIN DEL MEDIO BASAL (MB).?
R: PESAR, TENIENDO PRESENTE QUE SE PREPARARA MS X 10, 2.- ADICIONAR 10
ML DE UNA SOLUCIN DE CACL, ADICIONAR 10 ML DE UNA SOLUCIN QUE
CONTENGA 3.73 G DE N, ADICIONAR 10 ML DE UNA SOLUCIN DE KI (83 MG/
100 ML DE H O, DD). ESTA SOLUCIN SE DEBE DE CONSERVAR EN EL
REFRIGERADOR, EN FRASCOS A PRUEBA DE LUZ Y ADICIONAR 10 ML DE UNA
SOLUCIN (CONSERVADA EN REFRIGERADOR) QUE CONTENGA, ADICIONAR 10
ML DE UNA SOLUCIN (CONSERVADA EN EL REFRIGERADOR), ADICIONAR 300 G
DE SACAROSA, REPARTIR EL MEDIO ASI PREPARADO EN RECIPIENTES DE
DIFERENTECAPACIDAD (10, 50, 100 CC, DE ACUERDO CON LAS NECESIDADES
DEL LABORATORIO). ROTULAR MS X 10 Y ALMACENAR EN CONGELADOR (-5 A
20 C) HASTA CUANDO SE UTILICE. ES ACONSEJABLE PREPARAR EL MB
NECESARIO TENIENDO EN CUENTA EL CONSUMO DEL LABORATORIO EN UN
LAPSO DETERMINADO.
CULES SON LAS CONDICIONES AMBIENTALES PARA UNA INCUACN?

R: ES CONVENIENETE QUE LOS CULTIVOS SEAN INCUBADOS EN AMBIENTES


CONTROLADOS, POR LO MENOS EN LO QUE SE REFIERE A LA LUZ Y A LA
TEMPERATURA; ESTOS DOS FACTORES ESTN RELATIVAMENTE POCO
ESTUDIADOS, Y LA INFORMACIN EXISTENTE SOBRE ELLOS SUELEN SER
FRAGMENTARIA Y A MENUDO CONTRADICTORIA.

CULES SON LOS CULTIVOS IN VITRO DE PLANTAS SUPERIORES?


R: CULTIVO DE SEMILLAS, CULTIVO DE MERISTEMOS, CULTIVO DE VSTAGOS Y
RACES, CULTIVO DE ANTENAS, CULTIVO DE PROTOPLASTOS, CULTIVO IN VITRO
DE SUSPENSIONES CELULARES.

CULTIVOS DE MERISTEMAS:

CUL ES LA INFLUENCIA DEL MATERIAL DE PARTIDA?


R: GENOTIPO -EDAD-ESTADO DEL RGANO O TEJIDO-ESTADO FISIOLGICOESTADO SANITARIO-AO-CONDICIONES DE CRECIMIENTO-POSICIN DEL
EXPLANTE-TAMAO DEL EXPLANTE-CONDICIONES FISIOLGICAS.
CULES SON LAS CONDICIONES DE CRECIMIENTO EN INVERNADERO
R:RECOMENDABLE QUE CREZCA EN INVERNADERO O CMARA DE
CRECIMIENTO -USAR MATERIAL HOMOGNEO-ELEGIR PLANTAS VIGOROSASPROMOVER NUEVOS BROTES: PODAS EN MACETA CON SUSTRATO ESTRILPROGRAMA SANITARIO-CONTROLES Y MANIPULACIN DE INTENSIDAD DE LUZ,
FOTOPERIODO Y TEMPERATURA- APLICACIN DE FITORREGULADORES.
CULES SON LAS CONDICIONES DE PREPARACAION DE LA LANTA MADRE?

R: PREVENIR INSECTOS DE CUALQUIER TIPO, PREVENIR HONGOS Y BACTERIAS,


REGAR SOLO EN LA MACETA (EVITAR RIEGOS POR ENCIMA), MANTENER BAJA LA
HUMEDAD.
CULES SON LAS CONDICIONES
DESINFECCIN EN INVERNADERO?
R: ELEMENTOS LIMPIOS EN LA
IDENTIFICADAS-EN CONSERVADORAS.
CULES SON LAS CONDICIONES
DESINFECCIN EN LABORATORIO?

DE

OBTENCIN

DE

COLECCIN-UBICARLOS
DE

OBTENCIN

DE

EXPLANTE
EN

BOLSAS

EXPLANTE

R: -AGUA CORRIENTE-SE RETIRAN HOJAS-SOLUCIONES DESINFECTANTES


(ETANOL-HIPOCLORITO DE SODIO) ENJUAGUES CON AGUA ESTERIL EN CABINA
DE FLUJO LAMINAR-ANTIBITICOS Y/O FUNGICIDAS.

CUAES SON LAS ETAPAS DE MICROPROPAGACION?


R:

QU ES TOTIPOTENCIA?
R: HABILIDAD DE UNA SIMPLE CLULA DE DIVIDIRSE Y PRODUCIR TODAS LAS
CLULAS DIFERENCIADAS DE UN ORGANISMO, INCLUYENDO TEJIDOS EXTRA
EMBRIONARIOS.
QU ES EL CIDO ABSCSICO (ABA).?
R: HORMONA VEGETAL QUE PROVOCA EL LETARGO O DORMANCIA DE LAS
YEMAS, MANTIENE EL LETARGO DE LAS SEMILLAS, EST IMPLICADA EN EL
GRAVITROPISMO DE LAS RACES Y PROVOCA EL CIERRE DE LOS ESTOMAS,
INHIBE EL CRECIMIENTO Y PARTICIPA EN LAS RESPUESTAS DE LA PLANTA
FRENTE AL ESTRS AMBIENTAL, ENTRE OTROS EFECTOS.
QU ES EL CIDO INDOLACTICO (AIA).?
R: AUXINA DE ORIGEN NATURAL, ES UNA FITOHORMONA RESPONSABLE DE LA
DOMINANCIA APICAL Y FENMENOS DE TROPISMOS, ENTRE OTROS.
QU PERMITEN LOS LOS HETERODMEROS AUX/AIA-ARF?
R: PERMITEN LA EXPRESIN O LA REPRESIN DE LOS GENES REGULADOS POR
LOS AUXRE.

QU ES LA AUXINA?
R. FITOHORMONA QUE CONTROLA LA ELONGACIN CELULAR, ENTRE OTROS
PROCESOS. LA PRINCIPAL AUXINA ES EL AIA.
QU SON AUXRE?
R: ELEMENTOS CIS DE RESPUESTA A LA AUXINA (DEL INGLS "AUXINRESPONSIVE ELEMENT") IDENTIFICADOS DENTRO DE LOS PROMOTORES DE
LOS
GENES
REGULADOS
POR
LA
AUXINA.
POSEEN
SECUENCIAS
CARACTERSTICAS TGTCTC.
QU ES CALLO?
R: MASA NO ORGANIZADA DE CLULAS DIFERENCIADAS Y NO DIFERENCIADAS
QUE SE DIVIDEN ACTIVAMENTE A CONSECUENCIA DE UNA HERIDA, O BIEN EN
UN CULTIVO MANTENIDO EN UN MEDIO PROVISTO DE FITOHORMONAS.
QU ES LA CITOQUIMERA?
R: COMBINACIN, EN UN NICO RGANO, DE CLULAS CON DIFERENTE
NMERO CROMOSMICO.
QU ES LA CITOQUININA O CITOCININA?

R: HORMONAS DE LAS PLANTAS QUE EJERCEN MLTIPLES EFECTOS SOBRE SU


DESARROLLO; UNO DE LOS MS CARACTERSTICOS ES LA ESTIMULACIN DE LA
DIVISIN CELULAR EN PRESENCIA DE AUXINAS.
QU ES CKX, (ENZIMA)?
R: CITOQUININA OXIDASA/DESHIDROGENADA QUE
CITOQUININAS ELIMINANDO SU MITAD ISOPRENIDICA.

INACTIVA

LAS

QU ES DESDIFERENCIACIN?
R: PROCESO QUE SE DESENCADENA EN LOS TEJIDOS VEGETALES COMO
RESPUESTA A LAS HERIDAS, Y TAMBIN EN CULTIVO, Y QUE DETERMINA QUE
LAS CLULAS PIERDAN SU CARCTER DE DIFERENCIADAS Y COMIENCEN A
PROLIFERAR POR DIVISIN CELULAR.
QU ES EL EFECTO PLEIOTRPICO?
R: FENMENO POR EL CUAL UN SOLO GEN ES RESPONSABLE DE EFECTOS
FENOTPICOS O CARACTERES DISTINTOS Y NO RELACIONADOS.
QU SON LOS EFECTOS PLEIOTRPICOS DE LAS GIBERELINAS?
R: EFECTOS MLTIPLES PRODUCIDOS POR LAS GAS EN LOS VEGETALES, Y EN
LOS QUE ESTN IMPLICADOS PROCESOS FISIOLGICOS MUY DIVERSOS, TANTO
REPRODUCTIVOS COMO VEGETATIVOS.

QU SON GIBERELINAS (GAS)?


R: GRUPO DE HORMONAS DE CRECIMIENTO, CUYO EFECTO MEJOR CONOCIDO
CORRESPONDE A LA ELONGACIN DE LOS TALLOS DE LAS PLANTAS, TAMBIN
INDUCEN EL DESARROLLO DEL FRUTO Y LA GERMINACIN DE LAS SEMILLAS.
QU ES IP?
R: ABREVIATURA DE LA CITOQUININA ISOPRENOIDE ISOPENTENILADENINA.
QU PROVOCAN LOS RECEPTORES DEL ETILENO?
R: RESISTENCIA A LA ACCIN DEL ETILENO Y QUE CONTIENEN EL DOMINIO
SENSOR Y EL DE RESPUESTA Y LOS RECEPTORES ERS QUE SOLO TIENEN EL
DOMINIO DE RESPUESTA.
LOS RECEPTORES DEL ETILENO PARECEN ACTUAR COMO REGULADORES
NEGATIVOS DE LA RUTA DE TRANSDUCCIN DE LA SEAL HORMONAL.
QU SON LOS REGULADOR DEL CRECIMIENTO?
R. SUSTANCIA, QUE SIN SER PRODUCIDA POR LA PLANTA, PRESENTA EFECTOS
FISIOLGICOS SOBRE EL CRECIMIENTO Y EL DESARROLLO DEL VEGETAL.

CUL ES EL CICLO HORMONAL DE LA PLANTA?

R:

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