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Tecnologa del ADN

recombinante: Herramientas
y aplicaciones. Diagnstico
molecular. Genoma Humano:
Composicin y complejidad.

TECNOLOGA DEL DNA


RECOMBINANTE O
INGENIERA GENTICA

Reaccin de cadena de la
polimerasa (PCR)
Permite
amplificar
millones de veces
Emplea
nucletidos y
cebadores
Catalizada por
una polimerasa
termoestables

Primer ciclo

Despus de sucesivos ciclos

Electroforesis de ADN

Tincin con bromuro de etidio

PCR

Manipulacin in vitro del DNA

Es
posible
realizar
cortes
en
sitios
especficos
en
una molcula de
DNA

Enzimas de restriccin
Son endonucleasas
(cortan enlaces internos).
Reconocen secuencias
especficas de distinta
longitud.
Cortan el DNA si hubo
reconocimiento

Enzimas de restriccin y sus


secuencias de reconocimiento EcoRI

Enzimas de restriccin y sus


secuencias de reconocimiento

Clonacin de DNA

Formacin del ADN Recombinante

Clonacin de DNA

Clonacin de DNA

Clonacin de DNA

Clonacin de DNA

Clonacin de DNA

Aplicacin

1. Transgnicos de primera
generacin.
Resistencia a herbicidas
Resistencia a insectos-plagas.
2. Transgnicos de segunda
generacin.
Tolerancia al estrs ambiental.
Mejora de la calidad nutritiva.

EL GENOMA HUMANO

El primer genoma humano


secuenciado en el mundo
fue publicado en 2003
tras una dcada de
trabajo y cost unos 2.000
millones de euros.
Pocos aos ms tarde, en
2008, secuenciar el
genoma humano, con
algo ms de 3.200
millones de letras, ya era
posible en unas
seis semanas y su coste
total caa hasta los 60 mil
dlares.

EL GENOMA HUMANO
Por aquel tiempo los
proyectos especulaban
con alcanzar el genoma
humano a unos mil
dlares en los siguientes
tres aos. En efecto, en
octubre de 2009 varias
compaas apuntaron al
genoma de los mil dlares
con un nuevo avance
tecnolgico, la
secuenciacin con
nanoporos, y ya en marzo
de 2011, el coste haba
cado a menos de medio
dlar por
Mbp.

Figure.
(A)
Singlemolecule
real-time
sequencing. (B) Direct
inspection with electron
microscopy. (C) Oxford
nanopore technology. (D)
IBMs DNA transistor.

The biotech company Life Technologies outfitted a 70s bus


with a compact mobile laboratory that can sequence a
genome in just four hours using their new Ion
semiconductor-based
decoding
equipment.

GRACIAS

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