Determinacin Cuantitativa de Protenas Totales

1. INTRODUCCIN
Las protenas son compuestos qumicos muy complejos que se encuentran en
todas las clulas vivas: en la sangre, en la leche, en los huevos y en toda clase
de semillas y en algunos frutos; estas molculas proteicas contienen un alto
porcentaje de nitrgeno, as como de oxgeno, hidrgeno y carbono; as
mismo en la mayor parte de ellas existe azufre, y en algunas fsforo y hierro.
Las protenas son sustancias complejas, formadas por la unin de ciertas
sustancias ms simples llamadas aminocidos, que los vegetales sintetizan a
partir de los nitratos y las sales amoniacales del suelo. Los animales
herbvoros reciben sus protenas de las plantas; el hombre puede obtenerlas de
las plantas o delos animales, pero las protenas de origen animal son de mayor
valor nutritivo que las vegetales. Esto se debe a que, de los aminocidos que
se conocen, que son veinticuatro, hay nueve que son imprescindibles para la
vida, y es en las protenas animales donde stas se encuentran en mayor
cantidad.
Los alimentos consumidos como fuente proteica, no contienen en su mayora
aminocidos libres, que son las formas asimilables a nivel del intestino
delgado, para luego ser incorporado en el cuerpo para sintetizar nuevas
protenas u otras molculas que requieren de fuentes nitrogenadas, por tal
razn las protenas y pptidos ingeridos en la dieta, son hidrolizados
primeramente por enzimas proteo lticas en el tracto intestinal, iniciando en el
estmago por accin del pepsingeno el cual es activado a pepsina
inicialmente por el HCl; la pepsina(33 kD) no es muy especfica, hidroliza los
enlaces en los que intervienen aminocidos aromticos, aunque tambin lo
hace donde hay Metionina y Leucina.
A medida que los contenidos cidos del estmago pasan al intestino delgado,
se dispara la sntesis de la hormona secretina a la sangre, la cual estimula al
pncreas para secretar bicarbonato en el intestino delgado para neutralizar el
pH alrededor de 7.0 y la entrada de los aminocidos en la parte superior del
intestino delgado (duodeno) induce la liberacin de la hormona
colecistocinina, que estimula la liberacin de muchas enzimas pancreticas
cuya actividad cataltica se realiza entre un pH 7 y 8. El jugo pancretico
secretado al intestino delgado aporta los zimgenos: tripsingeno,
quimiotripsingeno, procarboxipeptidasa A y B, proelastasa, los cuales se
activan en presencia de molculas proteicas.

2. OBJETIVOS
-Cuantificar protenas totales en muestra de semillas de
quinua
- Afianzar los aspectos tericos respecto al metabolismo de
las protenas.
- Adquirir habilidad y destreza en el manejo de la tcnica.

3. MATERIALES
- Agua Destilada
- Semillas de Quinua
- Clara de Huevo
- Un Vaso de Precipitacin
- Un Mortero
- Centrfuga
- Algodn
- Otros

4. PROCEDIMIENTO
- Pesar 50 gramos de semillas de quinua, agregar en un vaso
de precipitacin y completar con agua destilada a 100 ml.
- Hervir (100 C) por 5 minutos.
- Triturar en un mortero hasta obtener una pasta suave.
- Filtrar con algodn o papel de filtro whatman N1 .
- Con el filtrado realizar la determinacin de las protenas
totales.

B= Reactivo de trabajo
S= Solucin Estndar
P1= Quinua
P2= Clara de Huevo
Componentes
B
S
P1
P2
Suero patrn
--------- 50ul
-------------- ------------Sobrenadante de Quinua
--------- -------2,5 ml
------------Sobrenadante de Clara de Huevo --------- -------- -------------2,5 ml
Reactivo de Trabajo(EDTA/ Cu) 3,5 ml 3,5ml
3,5 ml
3,5ml
- Mezclar y colocar en bao mara a 37C por 15 minutos
- Leer en el espectrofotmetro a una

= 540nm

5. RESULTADOS
Calcular:
Protenas Totales g/dL=
Factor = 5,0 g/dL
1)Lectura en el Espectrofotmetro
- B=0
- S= 0,110
- P1 = 0,668
- P2 = 0,945

Hallando
Protenas Totales g/dL =

P1 =
P2 =

= 30, 36 g/dL
= 42, 95 g/dL

6.CONCLUSIONES
Al trmino de la prctica pudimos observar en los tubos de
ensayo que la clara de huevo tiene mayor gran cantidad de
protenas que la quinua que son de importancia para el
consumo en las personas.
7. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
Hicks
Gmez,
Juan
Jos,
Edicin,MxicoD.F- McGraw-Hill, 2006.

Bioqumica,

2da

- Conn Eric E. Stumpf, Paul Karl, Bioqumica

Fundamental,2da Edicin,Mxico D.F: Limusa-Wiley, 1972.