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Examen Qumico de la Orina, Primer paso

para un diagnstico confiable

Mariana Surez
Product Support-MK
Roche-Diagnstica

Octubre 1, 2007

Aspectos Pre-analticos

Agenda
1. Importancia mdica
2. Aspectos pre-analticos
3. Performance del test y fuentes de error
4. Valor diagnstico y limitaciones de las tiras de orina

1. Importancia mdica

Saba Ud. que ...


El examen de orina es el de
mayor valor para determinar la
integridad anatmica de los
riones que esta disponible a
los mdicos clnicos
Schreiner From J. Szwed, The Importance of Microscopic Examination
of the Urinary Sediment, American Journal of Medical Technology,
48:2, Feb. 1982

Importancia clnica
Urianlisis con tiras de orina
Screening y monitoreo de:

Por deteccin de:


Leucocitos (WBC)
Nitrito
Valor pH
Protenas
Sangre (RBC, hemoglobina)
Gravedad especfica

Enfermedad Renal y del


tracto urinario

Metabolismo de
carbohidratos (Diabetes mellitus)

Glucosa
Cetonas

Enfermedad del hgado y


desrdenes hemolticos

Urobilingeno
Bilirubina

Importancia Mdica

Causas de dilisis y transplantes de rin

2. Aspectos pre-analticos

Tcnica adecuada y procedimiento


Precauciones en la recoleccin de muestras
1. Es preferible el uso de envase descartable limpio y con tapa
cerrada hermticamente.
2. Detergentes o desinfectantes deben ser completamente
removidos por lavado con agua.
3. Minimizar contaminacin durante coleccin.
4. Use muestras de orina dentro de las dos horas de haber sido
colectada.

Tcnica adecuada y procedimiento


Recoleccin de muestras

Se debe distinguir:
1.

Orina de chorro medio Para


prevenir contaminacin, ejm de
los genitales externos, especial-

2.

mente la vagina.
Orina obtenida mediante catter

3.

Aspiracin Supra-pbica
9

Aspectos pre-analticos
Influencias de una adecuada colecta de la muestra
Muestra colectada
SIN precauciones

Muestra colectada
CON precauciones

positivo

negativo

positivo

negativo

7 (14 %)

44

1 (2 %)

50

51

Mujer

31 (48 %)

34

4 (6 %)

61

65

38 (33 %)

78

5 (4 %)

111

116

Sexo
Hombre

D. Kutter, D. Ann. Biol. Clin. 38 (1980) 179

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Aspectos Pre-analticos
Tiempo de coleccin de la muestra
Primera orina a.m

Anlisis con tiras

Prolongado tiempo de retencion de la orina


durante toda la noche en la vejiga permite
una alta concentracin de la muestra lo cual
es conveniente para exmenes de screening.

Examen
Microscpico

Alta osmolaridad probablemente mantiene


las estructuras celulares y previene el
deterioro de los cilindros.
Tiempo de incubacin que necesitan las
bacterias para multiplicarse y metabolizar
nitritos

Exmen
Bacteriolgico

Segunda orina a.m

Anlisis con tiras;


Monitoreo de GLU;

anlisis de proteinas

Random u
orina espontnea

Colectada en el transcurso de la maana.


Obtenida 2 horas despus de comida rica en
carbohidratos
Conveniente para deteccin de glucosuria.

Anlisis con tiras

Sencillo de obtener en cualquier momento


conveniente para el paciente, pero pobre
definicin del status del paciente (ingesta de
liquidos, diuresis, tiempo de retencin
en la vejiga

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Tcnica adecuada y procedimiento


Almacenaje
1. Refrigerar la muestra a 4C en oscuridad, si no se va a procesar dentro de la
hora/dos horas.
2. No use preservantes.

3. Mezclar la muestra (suave por inversin) si no se analiza inmediatamente


luego de la colecta.
4. Muestras refrigeradas deben alcanzar la temperatura ambiente antes de ser
procesadas (30 min).
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Aspectos Pre-analticos
Preservantes
Boric acid:

Conveniente para orinas de 24-horas.


Interfiere con test de leucocitos!

Chloroform:

Interfiere con centrifugacin (sedimento)!

Formaldehyde: Interfiere con leucocitos y test de urobilingeno!


Azida de sodio: Recomendado para varios constituyentes de la orina
Carbonato de: Conveniente para estabilizar las porfirinas.
sodio

Importante:
Importante En medio alcalino, clulas y cilindros se
descomponen mucho ms rpido.

Thymol :

Previene crecimiento de bacterias y hongos.


(Cristal o 1% en solucin)
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Aspectos pre-analticos

Influencia del almacenaje de muestras


Destruccin Cilindros
Lisis de WBC
y RBC

Degradacin de
Glucose

Otras reacciones
qumicas

Cambios en pH
Oxidacin de
bilirubina y urobilingeno
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3. Performance del test y


fuentes de error

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Tcnica adecuada y Procedimiento


Realizando el test
Sumergir la tira
Mezclar primero (para resuspender erirocitos &
leucocites y prevenir falsos positivos)
No pipetear
Rpidamente - No ms de 1 segundo
Cubra completamente con muestra

Retirarla
Retirar la tira por el borde del contenedor de
muestra.
Remover toda la muestra de orina en exceso
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Tcnica adecuada y procedimiento


Realizando el test
Limpieza elimina
residuos

Lectura Manual

Lectura Automtica

Luego de un minuto
compare las reacciones
del color de la tira con las
indicadas en el tubo.
Realizar el match y
encontrar la
concentracin o
resultado.

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4. Valor diagnstico y
limitaciones de las tiras
de orina

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Valor Diagnstico y Limitaciones


Gravedad especfica
Depende principalmente de
la cantidad de lquido
ingerido por el paciente.
Valores pueden variar de
1,000 a 1,040 g/ml.

El test no indica la
contribucin de constituyentes
urinarios no inicos, tal como
urea, creatinina o glucosa,

Interpretacin de las
diferencias entre microscopa
y la tira pueden deberse a la
lisis de los eritrocitos y
leucocitos en muestras con
concentracin muy
baja(1,010g/mL).

En caso de orinas con pH


mayor de 7.0 la GE de la tira
puede ser muy baja.

Medicina deportiva:
Importante cuando se busca
presencia de narcticos o
frmacos prohibidos en
atletas (manipulacin de la
muestra)

En presencia de Protenas
entre 100 a 500 mg/dL o
cetoacidosis, lecturas de GE
tienden a ser elevadas.
19

Valor Diagnstico y Limitaciones


pH
Valores marcados bajos o altos
podran indicar un disturbio en
el balance cido-base.

Los valores de PH alcalino no


tienen valor diagnstico cuando
la muestra ha esperado
demasiado para el anlisis.

Valores altos en algunas


infecciones bacterianas del
tracto urinario.

Residuos de desinfectantes con


componentes Amonio
cuaternario pueden causar
valores falsamente elevados

Deteccin de descomposicin
bacteriana de urea si la muestra
espera demasiado

Una dieta vegetariana:


alcaliniza fuertemente la orina.

Las diferencias en la
interpretacin entre microscopa
y la tira puede deberse a la lisis
acelerada de eritrocitos y
leucocitos en muestras con pH
altos.

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Valor Diagnstico y Limitaciones


Leucocitos
Leucocituria es el ms
importante signo de
inflamacin del rin y del
tracto urinario bajo causado
por bacterias..

El test no detecta linfocitos..


Resultados bajos o falso
negativos cuando:
proteinuria > 500 mg/dL
glucosuria > 2000 mg/dL
cephalexin, gentamycin
acido brico, azida de sodio,
sales de mercurio, cido
hidroclrico.

Los lecucocitos excretados


en orina son mayormente
granulocitos cuya actividad
esterasa es detectada en la
tira de orina.
Deteccin de clulas
intactas as como lisadas
(pH > 7 o GE baja), las
cuales no pueden ser
detectadas por microscopa.

Resultados falso-positivos
formaldehido, imipenem,
meropenem,
ac. clauulnico (antibioticos)
fuerte color intrnseco de orina
contaminacin por secrecin
vaginal o saliva.
21

Valor Diagnstico y Limitaciones


Nitritos
La presencia de nitritos en
la orina es indicativo de
infeccin del tracto urinario
por bacterias (ITU)

No detecta bacterias no
formadoras de nitrito.
Resultados Falso-negativos
insuficiente ingesta de nitritos
La muestra debe estar como
mnimo 4 horas en la vejiga.
Sustancias antimicrobianas.
Tto con antibiticos o
quimioterpicos.

Un promedio de 50% de ITU


por bacterias son detectadas
con el test de nitritos.
Bajo condiciones favorables
(primera orina de la
maana, alta cuenta de
bacterias) ms del 90% de
las ITU por bacterias son
detectadas.

Resultados falso-positivos
Color rojo de la orina
drogas ejm. fenazopiridina
Contaminacin bacteriana
en la coleccin.

Screening antes de
confirmacin por examen
bacteriolgico.
Leucocituria es un
importante hallazgo
complementario.

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Valor Diagnstico y Limitaciones


Protenas
Resultados Bajo o falso
negativo si la proteinuria es
debida principalmente a otras
protenas diferentes de
albmina.

Proteinuria es frecuente e
inespecfico en enfermedad
renal.

El test es
predominantemente
sensitivo para albmina.

No detecta Microalbuminuria :
primeros resultados positivos se
dan desde 15 30 mg/dL.

Buena correlacin con


determinacin de albmina
por inmunodifusin (mtodo
de referencia).
Su deteccin requiere de
diagnstico diferencial

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Resultados Falso-positivos
Durante o despus de infusin de
polivinil-pirrolidona ( substituto
de la sangre)
pH fuerte alcalino (pH > 9)
durante la terapia con
Fenazopiridina por residuos de
desinfectantes basados en
amonio cuaternario o
clorhexidina.

Valor Diagnstico y Limitaciones

Protenas
Reaccin del test de protenas con vdiferentes protenas
0

10

20

30

100

Albumin
Transferrin
-Globulin
-Globulin
Glycoprotein
-Globulin
Bence-Jones protein, -chain
Bence-Jones protein, -chain
Gutensohn et al., Das med. Laboratorium; 8, 181-194
(1978)

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Valor Diagnstico y Limitaciones


Glucosa
Tamizaje y temprana
deteccin de Diabetes
mellitus

Glucosuria representa la
excresin de glucosa durante el
periodo en el que estuvo en orina
en la vejiga y no correlaciona
necesariamente con el valor
actual de glucosa.

Monitoreo y autocontrol del


paciente diabtico.
Deteccin de glucosuria
renal, ejm, durante
embarazo

Resultados bajo o falso-negativo


si cido ascrbico u otros
agentes reductores estn
presentes en altas cantidades y
la concentracin de glucosa es
muy baja (< 100 mg/dL).

Deteccin de glucosuria
alimentaria (Luego de
ingesta extrema de
carboidratos)
Buena correlacin con el
mtodo de referencia
cuantitativo hexokinasa.
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Resultados falso-positivos
Color rojo de la orina
drogas ejm. fenazopiridina
Contaminacin bacteriana
en la coleccin.

Valor Diagnstico y Limitaciones


Cetonas
Deteccin en
descompensacin
metablica debida a diabetes
mellitus.

Falso-positivo resulta
por captopril, MESNA
(2-mercapto-etanocido sulfonico-sales
cidas de sodio) y otras
sustancias que
contienen grupos
sulfhidrilos .

Estados precomatosos o
coma diabtico
Deteccin de estados de
desnutricin.
Monitoreo de programas
dietticos con restriccin
severa de ingesta de
carbohidratos (dieta de
Atkins y dieta cero)

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Valor Diagnstico y Limitaciones


Urobilingeno
Resultados Falso
Negativos
oxidacin por exposicin
de la muestra a la luz

Detecta enfermedad
aguda o crnica del
hgado
Hepatitis viral, cirrosis
heptica
dao txico del hgado

formaldehyde > 200 mg/dL


usado como preservante.

Deteccin de
enfermedad hemoltica
anemia hemoltica, anemia
perniciosa
hemolisis intravascular

Falso-positivo por drogas o


metabolitos (rojo en medio
cido ejm. fenazopiridina)

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Reaccin de color amarilla o


verde en presencia de
concentraciones altas de
bilirrubina.

Valor Diagnstico y Limitaciones


Bilirrubina
Resultados Falso
Negativos
oxidacin por prolongada
exposicin de la muestra a
la luz, formaldehyde > 200
mg/dL usado como
preservante.

Detecta enfermedad
aguda y crnica del
hgado
-hepatitis viral
cirrosis heptica severa
intoxicacin severa
obstruccin del conducto
biliar

Falso-positivo por drogas o


metabolitos los cuales se
tornan de color rojo en
medio cido (ejm.
fenazopiridina)

Lesin del parnquima


heptico (Viral, txica)

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Alta concentracin de Ac.


Ascrbico..

Valor Diagnstico y Limitaciones


Eritrocitos/Hemoglobina
Deteccin de hematuria como
sntoma concomitante de:
enfermedad renal
desrdenes del tracto urinario
afecciones extra- renales

Resultados bajos o falsonegativos


cido ascrbico
formalina usada como
preservante
nitrito superior a 10 mg/dL

Deteccin de Hemoglobinuria
y mioglobinuria como
sntoma de enfermedad
hemoltica
intoxicacin severa
quemaduras extensas
injuria muscular severa
sobreentrenamiento

Resultados falso positivos


contaminacin (menstruacin)
residuos de agentes
fuertemente oxidantes o
desinfectantes en el recipiente
de orina, jabones.

Deteccin de clulas
intactas as como lisadas las
cuales no pueden ser
observadas al microscopio.
29

Valor Diagnstico
Eritrocitos/Hemoglobina

30

Valor Diagnstico y Limitaciones


Interferencia por Acido Ascrbico

El cido ascrbico oculto, est presente en


varias clases de alimentos y bebidas.

Por consiguiente, la interferencia causada


por el cido ascrbico en los anlisis de
orina de rutina realizados en pacientes
externos puede ocurrir con mayor
frecuencia de la prevista.

Especialmente pueden ser omitidas


hematurias con < 50 eritrocitos / por
campo

Pueden ser reportados resultados Falsosnegativos para hemoglobina y glucosa y


esto representar un Peligro Potencial.

Es recomendable uso de tiras de prueba


de orina ampliamente resistentes a la
interferencia del cido ascrbico.

Investigations of Ascorbic Acid Interference in Urine Test Strips


D. Nagel et al., Clin. Lab. 52, 149-153 (2006)

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Harina

Interferencia por Acido Ascrbico


Concentracin de cido Ascrbico urinario
Resultado del consumo de jugo de frutas
Consumo de jugo de frutas

M edia

M xima
63

3 vasos

16
73

2 vasos

14
40

1 vaso

10
0

20

40

60

c. Ascrbico en orina ( mg/ dL)


High Incidence of Significant Urinary Ascorbic Acid Concentrations in a West Coast
Population - Implications for routine Urinalysis
Malcolm L. Brigden, David Edgell, Malcolm McPherson, Ann Leadbeater and Gordon Hoag
Clin.Chem.38/3, 426-431 (1991)

32

80

Interferencia por cido Ascrbico


Prueba de Hemoglobina
Prueba Hem oglobina 0.03m g/dL= 10Eri/L
cido Ascrbico (mg/dL)
0
10
20
40
100
10
10
10
10
0
UX
10
10
0
0
0
MX
10
0
0
0
0
MN
0
0
0
0
0
AA
0
0
0
0
0
YD

Test

UX
MX
MN
AA
YD

Prueba de Glucosa
Prue ba

UX
MX
MN
AA
YD

Hem oglobina 0.075m g/dL=25Eri/L


cido Ascrbico (mg/dL)
0
10
20
40
100
25
25
25
25
10
25
10
10
0
0
10
10
0
0
0
20
20
20
0
0
10
0
0
0
0

Glucos a 50 m g/dL
cido Ascrbico (mg/dL)
0
10
20
40
100
50
50
50
0
0
0
0
50
50
0
0
0
0
0
0
100
0
0
0

100
0
0
0
0
0

Investigations of Ascorbic Acid Interference in Urine


Test Strips
D. Nagel, D. Seiler, E. F. Hohenberger, M. Ziegler
Clin. Lab. 52, 149-153 (2006)

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Manejo con calidad en Urianlisis


Responsabilidades
Tanto el usuario, paciente y el proveedor de tiras tienen responsabilidades
individuales en la calidad del resultado en urianlisis.
El Aseguramiento de la calidad en urianlisis requiere adherirse a las reglas
dadas por la performance del test, el tratamiento pre-analtico que incluye la
colecta de la muestra, preservacin, preparacin y transporte.
ste proceso requiere una educacin al paciente para que se asegure una
adecuada toma de muestra y sin contaminacin durante la coleccin.
Debemos asegurarnos que la colecta de la muestra sea correcta junto con el
almacenaje y anlisis con las tiras e instrumentos.
Los proveedores deben de producir tiras de orina e instrumentos de alta
calidad y proveer un servicio constante y soporte.

34

Muchas gracias por su


atencin!!!

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