Absorcin, distribucin, biotransformacin y excrecin de txicos La piel es la principal barrera que separa al hombre de las sustancias txicas. Sin embargo, el organismo no esta completamente aislado de su medio ambiente y los txicos pueden entrar a l produciendo algn dao. Para la mayora de los agentes txicos el efecto guarda una relacin directa con la concentracin alcanzada dentro del sitio de accin. A su vez, esa concentracin es una funcin de la cantidad total de txico a la que el individuo estuvo expuesto, aunque tambin depende de la velocidad con que fue absorbido, de la distribucin interna que ha seguido, de la velocidad de metabolizacin (biotransformacin) y de la efectividad en la excrecin del txico y/o de sus metabolitos. Figura 1: Principales vas y compartimentos del organismo vinculados con la absorcin, distribucin, biotransformacin y excrecin de sustancias txicas Un txico usualmente se absorbe y entra a la sangre antes de producir un efecto indeseable, a menos que pueda actuar tpicamente (como es el caso de un cido o un producto custico). Las principales rutas de exposicin a los txicos son los pulmones, el tracto gastrointestinal y la piel. Cuando la sustancia ya ha ingresado a la corriente sangunea, est disponible para alcanzar cualquier sitio en el organismo, donde eventualmente podr producir un dao. Tambin puede ejercer su accin directamente en la sangre, como en el caso del gas arsina (AsH 3 ), que produce hemlisis. El sistema circulatorio transporta el txico a otros rganos donde puede ejercer su accin: mercurio y plomo daan el sistema nervioso central (SNC), los riones y el sistema hematopoytico, el benceno acta sobre este ltimo tambin, el tetracloruro de carbono lo hace en hgado y rin, etc. Para que un compuesto produzca un efecto txico en un determinado rgano, primero debe alcanzar una concentracin adecuada en ese lugar. Por otra parte, no siempre el sitio de mxima concentracin se corresponde con el de mxima toxicidad; Fase Toxicocintica -2
Dra. Alejandra Camargo [Escriba texto] [Escriba texto] por ejemplo tenemos el caso de los insecticidas organoclorados, que se acumulan preferentemente en los depsitos de grasa del cuerpo pero no tienen ninguna toxicidad all. El txico puede eliminarse del torrente sanguneo por biotransformacin, excrecin y acumulacin en distintos sitios de almacenamiento. La importancia relativa de estos procesos depende de las propiedades fsico-qumicas de la sustancia en cuestin. El rin juega un rol principal en la eliminacin de txicos pero otros rganos tambin tienen gran importancia en la eliminacin: los txicos voltiles (ejemplo: CO, alcanos) se excretan fundamentalmente por los pulmones. Si bien el hgado es el rgano ms activo en la biotransformacin de sustancias extraas al organismo, hay enzimas en otros tejidos (esterasas plasmticas, enzimas en rin, pulmn y tracto gastrointestinal) que contribuyen significativamente al metabolismo. La biotransformacin a menudo es un requisito para la excrecin renal de txicos muy liposolubles y que de otro modo se reabsorberan en los tbulos renales luego de su filtracin. Luego de su metabolizacin, los productos pueden ser desechados a la bilis o a la orina. Membranas celulares Existe un nmero de barreras a travs de las cuales un txico debe pasar antes de lograr la concentracin suficiente en el rgano donde producir una lesin caracterstica. Estas incluyen las membranas de clulas como las de las capas gruesas de la piel, las ms delgadas de los epitelios pulmonar o del tracto gastrointestinal, los capilares y las clulas de los rganos donde el txico se excreta. Las membranas plasmticas que rodean todas esas clulas son muy similares. El espesor es del orden de los 70 . El conocimiento cientfico actual permite visualizar a las membranas celulares como estructuras de dos capas lipdicas cubiertas de cada lado con una capa de protenas discontinua. Las molculas proteicas a veces penetran parcialmente en el espesor de la membrana, otras veces la atraviesan de lado a lado. Los cidos grasos que la conforman no tienen una estructura cristalina rgida sino que a temperatura ambiente le dan un carcter semifluido. Esta propiedad es determinante para la penetracin y transporte de sustancias de un lado a otro de la clula, depende de la proporcin y tipo de cidos grasos insaturados en la bicapa (Fig 2). Los mecanismos por los cuales un txico puede atravesar una membrana pueden ser clasificados en dos tipos generales: 1) difusin o transferencia pasiva, en la cual la clula no participa activamente. 2) transporte especializado, en el cual la clula lleva una parte activa en la transferencia del txico a travs de las membranas. Transporte pasivo Difusin simple. Muchos txicos cruzan las membranas celulares por simple difusin y la penetracin es determinada principalmente por el coeficiente de particin lpido/agua del compuesto en cuestin. Una sustancia liposoluble como el etanol fcilmente atravesar las membranas celulares por difusin: se absorbe en el estmago y en el intestino y luego pasa al SNC tambin por simple difusin. La velocidad de ese pasaje estar determinada por el gradiente de concentracin a travs de las membranas. Muchos compuestos qumicos de inters en toxicologa existen en solucin en formas ionizada y no ionizada. La forma cargada es incapaz de pasar por el ambiente no polar de la bicapa Fase Toxicocintica -3
Dra. Alejandra Camargo [Escriba texto] [Escriba texto] lipdica, mientras que lo contrario ocurre con la forma neutra. La difusin entonces estar controlada por la liposolubilidad de la forma no ionizada del compuesto.
Figura 2: Representacin esquemtica de una membrana biolgica Filtracin. Cuando el agua fluye masivamente a travs de una membrana porosa, todo soluto de tamao comparable al dimetro de los poros tambin pasar. Este pasaje se llama filtracin, ya que supone el flujo masivo de agua promovido por fuerza osmtica o hidrosttica. Una de las diferencias entre los distintos tipos de membranas es justamente el tamao de estos canales. En el glomrulo renal y los capilares estos poros son relativamente grandes (40 ), permitiendo el paso de molculas con un peso inferior al de la albmina (79.000 dalton), mientras que los canales en la mayora de las otras clulas son mucho ms chicos (4 ): slo pasarn por aqu molculas pequeas (100-200). Transporte especializado Muchas veces, el movimiento de una sustancia a travs de una membrana no puede explicarse por simple difusin o filtracin, porque el compuesto es muy poco liposoluble como para disolverse en la bicapa lipdica o muy grande como para atravesar un poro. En estos casos se postula la existencia de mecanismos especiales de transporte. As viajan de un lado a otro de la clula azcares, aminocidos y pirimidinas y tambin muchos txicos. Transporte activo. Un sistema de transporte activo se caracteriza por lo siguiente: 1) La sustancia se mueve contra un gradiente de concentracin (o electroqumico). 2) El sistema tiene una capacidad mxima (puede saturarse). 3) Es selectivo, o sea que el compuesto transportado debe tener algunas caractersticas estructurales qumicas para ese sistema de transporte. 4) Puede presentarse el caso de inhibicin competitiva entre sustratos de un mismo sistema. 5) El transporte requiere de un gasto de energa. Por lo tanto los inhibidores metablicos bloquean el proceso. Se supone que la sustancia a ser transportada forma un complejo con una molcula transportadora de un lado de la membrana. Luego difunde por la misma manteniendo la Fase Toxicocintica -4
Dra. Alejandra Camargo [Escriba texto] [Escriba texto] estructura compleja y debe ser capaz de liberarse una vez dentro de la clula. El transportador podra luego volver a su sitio original y repetir el proceso. El transporte activo es de mucha relevancia en toxicologa, en la eliminacin de sustancias extraas al organismo. Por ejemplo, el SNC tiene dos sistemas de transporte, uno para compuestos cidos orgnicos y otro para bases, localizados en el plexo coroideo y sirven para expulsar sustancias indeseables del fluido cerebroespinal. El rin tambin tiene dos sistemas de transporte activo y el hgado tiene al menos tres, segn sea la caracterstica cido-base del compuesto. Difusin facilitada. Se aplica este trmino para aquel transporte activo que cumple con las caractersticas mencionadas excepto que el sustrato no se mueve contra un gradiente de concentracin. As ocurre el transporte de glucosa, desde el intestino a la sangre, del plasma a los glbulos rojos y desde la sangre al SNC. Otros procesos. El organismo posee algunos mecanismos especiales de transporte para la remocin de materia particulada o molculas muy grandes. La fagocitosis y la pinocitosis son procesos en los cuales la membrana celular fluye alrededor de un blanco (una partcula o una macromolcula) y lo engloba junto con algo del medio externo. Este tipo de transferencia a travs de las membranas es importante en la remocin de partculas de los alvolos por los fagocitos y en el caso de algunos txicos en sangre, por el sistema retculoendotelial del hgado y el bazo. 1-ABSORCION Se denomina as al proceso por el cual el txico puede atravesar las distintas membranas y entrar al torrente sanguneo (Fig 3.) Los txicos aprovechan mecanismos de transporte que tienen un fin fisiolgico de absorcin (de oxgeno, de alimentos y de otros nutrientes). Las principales rutas de absorcin para los txicos son la piel, los pulmones y el tracto gastrointestinal. En los estudios toxicolgicos experimentales a menudo se eligen otras vas como la intraperitoneal o la subcutnea. Para el estudio de este proceso, en toxicologa de alimentos, nos limitaremos a considerar las caractersticas de la absorcin a travs del tracto gastrointestinal.
Figura 3: Pasos de la absorcin
Absorcin de txicos por el tracto gastrointestinal El tracto gastrointestinal (TGI) es tambin una ruta importante para la absorcin de txicos. Muchos contaminantes ambientales que estn presentes en la cadena alimenticia entran al organismo de esta forma. Los intentos de suicidio generalmente involucran una intoxicacin por va oral. Por ltimo, suele ser la ruta de intoxicacin ms frecuente en nios. Fase Toxicocintica -5
Dra. Alejandra Camargo [Escriba texto] [Escriba texto] El sistema digestivo puede visualizarse como un tubo que recorre todo el cuerpo. Su contenido debe ser considerado como exterior al organismo: los txicos no produciran dao hasta que no sean absorbidos por las paredes de algn tramo del TGI. La mayora necesitar pasar a la sangre para ejercer su efecto. La absorcin puede producirse en cualquier sitio a lo largo del TGI, desde la boca hasta el recto. Si bien la estructura bsica del TGI es la misma desde la boca hasta el ano, hay diferencias locales muy importantes. En el estmago hay poca absorcin, excepto de unas pocas sustancias liposolubles (ej.: alcohol). El lugar de mayor absorcin de nutrientes es el intestino (vitaminas, minerales, monosacridos, aminocidos y agua). La absorcin de sodio es fundamental para la absorcin de otras sustancias como glucosa, aminocidos e iones. El sodio y el cloruro son absorbidos, en tanto que el bicarbonato y el potasio son excretados. Las sales biliares se reabsorben principalmente en el leon. Finalmente, la funcin del colon es la de absorber grandes cantidades de agua y de electrolitos. Existen varios mecanismos importantes que modulan en la prctica la absorcin de nutrientes y de xenobiticos: Si el txico es un cido o una base dbil, se absorber por difusin en aquella zona del tracto donde el pH asegure la mxima concentracin de la forma no ionizada, la ms liposoluble. Si tenemos en cuenta que el jugo gstrico es muy cido y que el contenido intestinal es prcticamente neutro, veremos que la absorcin de un txico puede ser marcadamente distinta segn que zona del TGI estemos considerando. La concentracin relativa de las formas ionizadas y no-ionizadas de una sustancia en solucin est descripta por las ecuaciones de Henderson Hasselbach: Para un cido dbil:
ionizado ionizado no log pH pKa
Para una base dbil:
ionizado ionizado no log pKa pH
Por ejemplo, la proporcin de cido benzoico que existe en forma ionizada en el estmago y en el intestino se puede calcular as: Las conclusiones son claras: un cido dbil alcanza su mxima proporcin de forma neutra en el estmago (menor pH) y por lo tanto ser principalmente absorbido all. Contrariamente, una base dbil se absorber preferentemente en el intestino (mayor pH). Este anlisis es demasiado simple porque no est contemplando la capacidad del intestino delgado para absorber cidos orgnicos dbiles: debido a su gran rea absortiva respecto a la del estmago, la cantidad Fase Toxicocintica -6
Dra. Alejandra Camargo [Escriba texto] [Escriba texto] absoluta que finalmente pasa de la sustancia es grande, an cuando la forma no ionizada es proporcionalmente menor. El TGI de los mamferos posee sistemas especializados de transporte para la absorcin de nutrientes y electrolitos: ya habamos visto que los azcares tenan un mecanismo particular; los aminocidos son absorbidos de tres maneras diferentes; hay un transporte activo para las pirimidinas y los iones calcio, sodio y hierro tienen sistemas de transporte independientes. Los txicos aprovechan estos mecanismos fisiolgicos para absorberse. As es que 5-fluoruracilo (una droga anticncer) entrar como una pirimidina normal, talio engaa al transportador de hierro y el plomo hace lo propio con el de calcio. La absorcin de algunos metales es un proceso en dos etapas: el hierro difunde en las clulas intestinales y luego es transportado activamente a la sangre. Cobalto y manganeso compiten con Fe en este sistema. Hay unos pocos txicos que se absorben de modo activo en el TGI, la mayora pasa por difusin simple. Es importante tener en claro que los principios generales que regulan la absorcin deben ser entendidos como eso: generales. Si un compuesto tiene baja liposolubilidad, no debe pensase por ello que no ser absorbido y que por ende no tendr efecto daino; an la entrada de una pequea fraccin de la dosis total puede resultar txica. Los mecanismos que regulan la absorcin de compuestos no liposolubles no estn an bien entendidos. El epitelio del TGI tiene capacidad para absorber tambin materia particulada. Ejemplos de esto son ciertos colorantes azoicos o polmeros que pasan a las clulas intestinales como vesculas (por pinocitosis), siguen a la capa conjuntiva, y pasan finalmente al sistema linftico. La estabilidad qumica de las sustancias frente al pH cido del estmago, a las enzimas digestivas de ste y del intestino y a la flora intestinal es de importancia crucial en la toxicidad resultante. Por ejemplo, un veneno de vbora no es demasiado txico si es administrado oralmente, por la degradacin enzimtica que sufre en el TGI. En el estmago pueden formarse nitrosaminas carcinognicas cuando debido al bajo pH, los nitritos utilizados como conservantes en chacinados reaccionan con aminas secundarias presentes naturalmente en frutas y pescado. La ingestin de nitratos en el agua de consumo es mucho ms peligrosa en chicos que en adultos, ya que ambos difieren en la calidad y ubicacin de la flora intestinal que puede metabolizar nitrato a nitrito, un agente metahemoglobinizante. La flora intestinal es capaz tambin de realizar reducciones de grupos nitro orgnicos, resultando en un factor carcinognico para el hombre. Varios factores son capaces de alterar la absorcin gastrointestinal de txicos. El EDTA labiliza las membranas celulares al secuestrar calcio, aumentando la permeabilidad hacia todo tipo de compuestos. La alteracin de la motilidad intestinal es otro factor importante pues a mayor tiempo de residencia mayor ser la proporcin absorbida y ms interacciones adversas con la flora bacteriana pueden producirse. Las caractersticas fsico-qumicas de las sustancias influyen: la solubilidad en agua determinar que proporcin est efectivamente en solucin y en contacto con el epitelio intestinal. A su vez el tamao de partcula influye sobre la cintica de la disolucin. Debido a esto el mercurio metlico tiene baja toxicidad oral y el xido de As (III) vara su toxicidad de acuerdo con el tamao del grano. Otros factores que modulan la absorcin: Superficie: La velocidad de absorcin es proporcional a la superficie de absorcin, por lo tanto, el intestino delgado tiene la mayor capacidad de absorcin. Las condiciones patolgicas que atrofien las vellosidades resultarn en una gran reduccin de la superficie de absorcin. Fase Toxicocintica -7
Dra. Alejandra Camargo [Escriba texto] [Escriba texto] Motilidad gastrointestinal: Los materiales que se absorben lentamente (colesterol) sern menos absorbidos si la motilidad es alta. Comida: El ingreso de alimentos cambia la fisiologa gastrointestinal. Retarda el vaciado gstrico, libera secreciones gstricas, incrementa la motilidad intestinal, incrementa la perfusin intestinal, los alimentos a veces absorben los xenobiticos. Tambin estimula la liberacin de bilis en los intestinos, permitiendo el incremento de una absorcin posterior. Pasaje por hgado: Las sustancias absorbidas por la sangre en el intestino pasan primero por el hgado antes de alcanzar la circulacin sistmica. En el hgado muchos xenobiticos pueden ser metabolizados extensivamente, reduciendo la dosis de modo siginicativo. A este efecto se lo denomina de "primera pasada" o presistmico. Los xenobiticos absorbidos por los capilares linfticos no pasan primero por el hgado. Persorcin: Se refiere a la entrada de macromolculas a travs del hueco dejado por un enterocito que muri. Dao a la membrana epitelial: Si la membrana est daada se puede producir la entrada de macromolculas por ese lugar.
Exposicin previa a otras sustancias: Surfactantes catinicos pueden desorganizar la membrana mucosa y as facilitar la absorcin de macromolculas. Absorcin de txicos por el sistema respiratorio Las vas respiratorias, con sus entradas y salidas, estn perfectamente diseadas para interceptar las partculas transportadas por el aire antes de que lleguen a las partes ms profundas de los pulmones, donde podran causar mayor dao. En primer lugar, cuando el aire entra por la nariz pasa a travs de un extenso filtro de revestimientos cubiertos de mucosidad, pelos nasales e intrincados conductos. El moco es un lubricante espeso secretado por las clulas en los revestimientos de muchas cavidades y circuitos corporales. La forma de las cavidades nasales hace que el aire que ingresa se agite y entre en contacto mximo con los revestimientos cubiertos de mucosidad de las vas respiratorias. Las partculas inhaladas que no quedan obstruidas en la regin nasal tienen mayor probabilidad de ser interceptadas cuando el aire hace una curva de 90 grados al pasar por la faringe (la parte posterior de la garganta) antes de entrar en la trquea. La efectividad de esta regin para detectar grmenes inhalados se pone de manifiesto en la alta incidencia de dolores de garganta. Bajo el nivel de la trquea, las vas respiratorias presentan numerosas bifurcaciones de dimetro cada vez ms pequeo y cada bifurcacin genera una nueva oportunidad para la introduccin de partculas en las paredes de las vas respiratorias. El cuerpo incluso posee un mecanismo que contrae las vas respiratorias, denominado broncoconstriccin, que ayuda a incrementar las probabilidades de que las partculas inhaladas entren en contacto con el revestimiento de las vas respiratorias. Ciertos agentes irritantes transportados por el aire pueden provocar una accin refleja por la cual los msculos lisos que rodean parte de las vas respiratorias se contraen y de ese modo reducen el dimetro de los conductos.
Eliminacin de elementos invasores de las vas respiratorias por medios mecnicos
No basta solo con interceptar las partculas inhaladas; estas tambin deben removerse de las vas respiratorias para mantener el funcionamiento efectivo del sistema de intercambio de Fase Toxicocintica -8
Dra. Alejandra Camargo [Escriba texto] [Escriba texto] gases. Los tres mecanismos que se especializan en la remocin de elementos irritantes de las vas respiratorias son los siguientes: el estornudo o la tos; el movimiento mucociliar, y los macrfagos alveolares
El estornudo, tiene como propsito expulsar el material agresivo fuera del cuerpo. La tos es un mecanismo reflejo que ayuda a la faringe, a la trquea y a los bronquios superiores. Una tos efectiva expulsa el agente irritante del cuerpo o lo coloca en un lugar donde puede ser removido de las vas respiratorias al expectorar o deglutir. La tos tambin puede ser provocada voluntariamente, pero no ser tan enrgica como la tos refleja. El movimiento mucociliar: implica, como su nombre lo dice, el movimiento del moco ayudado por la mocin ciliar. Los cilios son pequeas proyecciones de las superficies de algunas clulas, a manera de pelos. Los revestimientos del tracto respiratorio estn ciliados desde la nariz hasta los bronquiolos ms pequeos. Todos los cilios respiratorios ejercen fuerza hacia la faringe e impulsan la capa de moco en esa direccin, por medio de ondas. Cualquier partcula atrapada por el moco alcanza un punto en el que puede expectorarse o deglutirse. Tanto la cantidad de moco como la rapidez de evacuacin pueden incrementarse durante los periodos de ingreso mximo de partculas en las vas respiratorias. A pesar de los mecanismos de defensa fsicos y mecnicos mencionados, algunas partculas pequeas regularmente logran alcanzar los alvolos y penetrar en los pulmones. En este nivel, las partculas irritantes enfrentan la ltima lnea de defensa mecnica, los macrfagos alveolares. Los macrfagos alveolares envuelven las partculas y las expulsan de los pulmones, y bien las transportan para que sean evacuadas mediante el movimiento mucociliar, bien las llevan hasta los espacios existentes entre las clulas pulmonares. Desde ese punto, las sustancias pueden despejarse a travs del sistema linftico. El ltimo frente de defensa: la guerra qumica Las sustancias que vencen las barreras fsicas y mecnicas del cuerpo quedan libradas a los mecanismos qumicos de defensa (se da en el ambiente cido del aparato digestivo, interencin del sistema inmunolgico, o procesos de biotransformacin).
Absorcin de gases y vapores: Los gases y vapores en general son absorbidos en todo el sistema respiratorio. El lugar depende de la solubilidad y/o reactividad del gas. La absorcin de gases en el mucus, tejido y sangre es por difusin, no existen mecanismos de transporte. Los vapores y gases con poca reactividad no se acumularn en el organismo, ya que se establece un equilibrio con el aire. La absorcin depende de: - concentracin en el aire inhalado - duracin de la exposicin - solubilidad - nivel de actividad fsica del individuo expuesto (aumento de la frecuencia respiratoria y del flujo sanguneo con el ejercicio). - Solubilidad: Dependen de la solubilidad en agua. Vapores muy solubles en agua: Los vapores muy solubles en agua se disuelven a medida que pasan por la nariz y el tracto respiratorio superior, de manera que virtualmente no llega nada a Fase Toxicocintica -9
Dra. Alejandra Camargo [Escriba texto] [Escriba texto] los alvolos. Si se respira por la boca, los gases penetran ms profundamente. En la exhalacin, al salir el aire sin la sustancia, parte de la misma puede ser nuevamente excretada en el aire. El que llegue o no a la sangre depender de la reactividad del gas. Slo llega a la sangre si el gas tiene baja reactividad. Si la reactividad es alta, habr reaccionado con el mucus o la capa epitelial, y la eliminacin de los productos formados depender de las propiedades fisicoqumicas de los mismos. Si son inhaladas, estas sustancias ejercern su accin txica en el tracto respiratorio superior. Gases y vapores de solubilidad intermedia: La absorcin en las vas areas superiores es limitada, pueden llegar a los alvolos y tener un buen intercambio con la sangre si la reactividad qumica es baja. Si el gas se disuelve bien, la concentracin en el aire que llegue a los alvolos ser baja, por lo que solo llegar a sangre una pequea fraccin. En cambio, si no se disuelve bien, la mayora llegar a los alvolos, donde podr ser absorbida en sangre. Ej.: anestsicos, su accin es sistmica. En el caso del ciclopropano (menos soluble en agua), el efecto es rpido, en cambio, en el caso del ter dietlico (ms soluble en agua), la anestesia es lenta. Gases y vapores poco solubles en agua: Este tipo de vapores son poco absorbidos en las vas areas, su accin local depender de su reactividad qumica. Si no es muy reactivo, podr alcanzar los alvolos, donde se absorber en sangre, pudiendo ser distribuido en el organismo, pudiendo causar toxicidad sistmica. Si el gas es muy reactivo, el dao se limitar a los pulmones. Ej.: El formaldehdo se disuelve muy bien en el mucus nasal, por lo que no llega a las vas areas inferiores, en cambio, el ozono se disuelve mucho menos, por lo que puede alcanzar los alvolos, causando dao a nivel del epitelio pulmonar.
Factores que afectan la absorcin percutnea El sudor puede disolver partculas slidas, las cuales pueden causar dao posteriormente (ej.: nquel). El grosor de la epidermis es el que principal factor en la regulacin de la absorcin de los xenobiticos. El grosor de la piel vara mucho de acuerdo a su ubicacin en el organismo. En la mayora del cuerpo es de 0,06 mm, en tanto que en las palmas de las manos y plantas de los pies puede ser de varios milmetros. Se debe tener en cuenta adems la porosidad de la piel. La epidermis de la palma de la mano es gruesa, pero al mismo tiempo es porosa, por lo que no es una barrera tan buena como se podra suponer en funcin de su grosor. Los xenobiticos pueden penetrar la piel a travs de los folculos pilosos y de las glndulas sebceas, aunque es probable que estas rutas no sean importantes, dado que su nmero es pequeo (0,1% de la superficie de la piel). La naturaleza qumica de los xenobiticos o sus solventes (vehculos) son fundamentales para su distribucin, por ejemplo, algunos pueden causar vasoconstriccin o vasodilatacin, alterando de esa manera su pasaje a la sangre. Las sustancias polares entraran por las zonas hidratadas del estrato crneo en tanto que las no polares lo haran por la matriz lipdica. La mayor temperatura ambiental favorece la absorcin porque aumenta la irrigacin. Los surfactantes aninicos y catinicos (jabones, detergentes) aumentan la absorcin de sustancias hidroflicas y polares porque causan un dao en la estructura del estrato crneo. Los surfactantes no inicos no son tan efectivos. Los lquidos orgnicos se pueden dividir entre los que no daan la membrana (alcoholes mayores que C2) y los que la daan (acetona, hexano, etc.). Los solventes que daan la piel la delipidizan, produciendo intersticios que sirven como caminos fciles para la difusin.
2. DISTRIBUCION Luego que el txico entr en el torrente sanguneo, est disponible para su distribucin en todo el organismo. La distribucin depender fundamentalmente de su capacidad para atravesar membranas y de su afinidad por distintas molculas endgenas. Algunos no pueden pasar las membranas fcilmente, limitando as su distribucin. Otros se acumulan en diferentes partes del cuerpo como resultado de una fuerte afinidad fsico-qumica, transporte activo o alta liposolubilidad. Estos sitios pueden o no ser los lugares donde finalmente se ejerza la accin txica, generalmente no es as. En este ltimo caso el lugar de acumulacin acta como depsito que est en equilibrio con los sitios de accin txica y de excrecin, liberndose al medio en forma continua. Volumen de distribucin En el hombre adulto sus aproximadamente 38 litros de agua corporal estn repartidos en tres lquidos: intestinal (11 litros), plasmtico (3 litros) e intracelular (24 litros). Determinando el volumen real en el que est disuelta la sustancia, que se conoce como volumen verdadero de distribucin (Vd), se tienen una idea de la distribucin de un compuesto por los lquidos orgnicos. El Vd es la relacin entre la cantidad de toxina en el organismo/concentracin de toxina en el plasma. Si el Vd es pequeo (por ejemplo, menor de 5 litros) se puede sugerir razonablemente que la sustancia se limita al plasma. Concentraciones plasmticas mucho menores, a continuacin de la administracin de una sustancia y consecuentemente Vds mucho mayores, indicaran que la sustancia se distribuye posiblemente por todo el lquido corporal y no se limita al plasma. Debido a ciertos factores, como la unin a determinados tejidos despus de su administracin, las concentraciones de algunas sustancias pueden ser muy bajas en el lquido plasmtico. El Vd de este tipo de sustancias ser muy grande. Almacenamiento de txicos en los tejidos Los txicos a menudo se concentran en algn tejido determinado. Algunos lo hacen en el lugar donde luego ejercen su accin, como es el caso del monxido de carbono en sangre, o del herbicida paraquat, que se acumula en el pulmn. Muchas veces no ocurre as, como en el caso del plomo, que se almacena en los huesos pero que produce el mayor dao en tejidos blandos. Los lugares de depsito del txico pueden pensarse como rganos protectores, ya que el txico almacenado no acta. Sin embargo los compuestos siempre estn en equilibrio con el Fase Toxicocintica -11
Dra. Alejandra Camargo [Escriba texto] [Escriba texto] txico libre en plasma, reponindolo a medida que es metabolizado y excretado. Como resultado, la vida media de estas sustancias es muy larga. Almacenamiento en las protenas plasmticas Las distintas protenas plasmticas se unen normalmente a componentes fisiolgicos, para facilitar su transporte por la sangre o para evitar su contacto indiscriminado con los tejidos y clulas. Muchas sustancias extraas al organismo son afines a estas protenas, en especial a la albmina. La unin es reversible y consiste principalmente en puentes de H, uniones de Van Der Waals y inicas. El txico unido est constantemente en equilibrio con la forma libre; y slo esta es capaz de penetrar en los tejidos o de filtrar por los riones (en el rin y en el hgado hay procesos de transporte activo que no se limitan al txico libre). La unin a protenas puede llegar a dar cuenta del total de la dosis administrada y no tiene preferencia por el carcter cido-base de la sustancia. Es un factor determinante en la farmacocintica de un agente teraputico. El inters toxicolgico deriva de la modulacin que ejerce este fenmeno sobre la toxicidad. La droga unida es incapaz de interactuar con tejidos, como ya dijimos. Sin embargo, se presentan a menudo casos de competencia entre sustancias por los sitios de unin, desplazando una a la primera que se haba unido; generando un efecto txico debido a esta. Los txicos pueden daar tambin al desplazar componentes fisiolgicos (vitaminas, hormonas, productos de desecho metablico, metales) que normalmente viajan unidos. Acumulacin de txicos en el hgado y el rin Tanto el hgado como el rin tienen una gran capacidad para acumular sustancias extraas. Esto estara relacionado al hecho que son rganos con un papel clave en la detoxificacin: ambos cumplen funciones de excrecin y el hgado adems es el principal sitio de metabolizacin (biotransformacin) del organismo. Los mecanismos por los cuales los txicos son retirados de la sangre no estn completamente entendidos pero es probable que participen sistemas de transporte activo. En efecto, se ha sugerido que existen protenas intracelulares que unen txicos y que jugaran un rol importante en la acumulacin dentro de estos rganos. Se ha demostrado que hay una protena citoplasmtica con alta afinidad por cidos orgnicos, cuya funcin sera la de transferir aniones desde el plasma. Esta protena tambin liga colorantes azoicos (muchos de ellos carcinognicos) y corticosteroides. Otras protenas unen iones metlicos, como cadmio o plomo.
Acumulacin de txicos en grasas
Como ya hemos visto, la liposolubilidad es un factor determinante para la absorcin de un txico. As es tambin que los txicos liposolubles tienden a acumularse en depsitos de grasa del cuerpo. La mayor concentracin de DDT en el organismo se alcanza en grasa. Aparentemente la deposicin sera consecuencia simplemente de la disolucin en las grasas neutras. Estas constituyen alrededor del 50% del peso corporal de un individuo obeso y como un 20% de uno atltico. Podramos pensar entonces que los txicos muy liposolubles afectaran relativamente menos a personas obesas que a delgadas, al actuar la grasa como compartimento de depsito que no interacta fluidamente con el resto del organismo. Pero que pasara ante una brusca disminucin de peso? Acumulacin de txicos en huesos Fase Toxicocintica -12
Aunque uno podra imaginar a los huesos como un tejido relativamente inerte, estos pueden almacenar ciertos compuestos como metales (plomo) y antibiticos (tetraciclinas). Alrededor del 90% del plomo acumulado en un organismo reside en los huesos. Muy poco se sabe acerca de como sucede esto. Probablemente el plomo sustituya al calcio en las redes cristalinas. El txico depositado en un hueso no tiene efecto como tal, aunque pude ser liberado al torrente sanguneo. Por ejemplo la accin osteoltica de la paratohormona produce movilizacin de plomo.
Barrera hemato-enceflica
La barrera hemato-enceflica puede ser considerada como un rgano que protege al cerebro y mantiene su homeostasis. No es una barrera en el sentido absoluto de la palabra, sino que constituye una frontera semipermeable que permite una absorcin diferente a la del resto del organismo. Muchos txicos no pueden atravesarla. Se encuentra localizada entre el plasma y el espacio extracelular del tejido nervioso. Esta constituida del tejido conectivo glial, la membrana basal y el fluido intersticial. La eficiencia de esta barrera es variable con la zona del cerebro que se trate. La razn podra estar en una irrigacin diferencial o en una permeabilidad distinta. El ingreso de sustancias al cerebro sigue en general los mismos principios que para otros tejidos del cuerpo. Los txicos liposolubles entran muy fcilmente, pues se trata de un tejido con alto contenido lipdico. La barrera hemato-enceflica no esta completamente desarrollada al momento de nacer, y a esto se debe la susceptibilidad de los nios a muchos neurotxicos (ej.: morfina es hasta 10 veces ms txica). El plomo produce encefalopata en ratas recin nacidas pero no en adultas, tambin debido a estas diferencias La placenta como barrera al pasaje de txicos La placenta cumple diversas funciones importantsimas para el normal desarrollo del feto: intercambio de nutrientes y productos de desecho, oxgeno y dixido de carbono, etc. La mayora de estos materiales vitales son transportados por mecanismos que consumen energa, los llamados sistemas de transporte activo. Vitaminas, azcares esenciales, aminocidos, calcio y hierro son pasados de la madre al feto contra un gradiente de concentracin. Incluso el oxgeno atravesara la membrana por un mecanismo que no es difusin simple. Muchos txicos si la atraviesan por difusin, otros engaan sistemas de transporte activo. Tambin pueden pasar molculas grandes, virus, y an eritrocitos. Desde el punto de vista anatmico, la barrera transplacentaria consiste en un nmero de clulas ubicadas entre las circulaciones fetal y materna. Este nmero vara con la especie y con el desarrollo fetal, y esto probablemente afecte su permeabilidad. As como en el caso del pasaje a travs de cualquier membrana, la difusin parece ser el mecanismo ms comn para los txicos. Por lo tanto el concepto de liposolubilidad vuelve a ser determinante en la absorcin de una molcula. No es tan seguro que la barrera transplacentaria juegue un rol importante en la proteccin el feto frente a los txicos que llegan por la circulacin materna, sin embargo debe notarse que la placenta tiene capacidad de biotransformacin, eventualmente detoxificante y protegiendo al feto. Fase Toxicocintica -13
Dra. Alejandra Camargo [Escriba texto] [Escriba texto] En condiciones estacionarias la concentracin de un txico en plasma materno y fetal ser la misma. No es lo mismo para la concentracin en diferentes tejidos fetales, ello ser determinado por la capacidad de acumulacin de cada rgano en desarrollo (por ejemplo la barrera hemato-enceflica de fetos es inmadura y mucho ms permeable que en adultos). Redistribucin de txicos La distribucin de un txico en el organismo puede cambiar con el tiempo. Originalmente el sitio de localizacin depende de el flujo de sangre en ese lugar, de la permeabilidad del tejido hacia ese txico y de las molculas que puedan ligarlo. Luego, el txico se puede relocalizar en otras reas de menor irrigacin y a tejidos con mayor afinidad por l. Un ejemplo lo presenta el plomo: inmediatamente luego de la absorcin se localizar en los eritrocitos, hgado y rin. A las dos horas el 50% est en el hgado. Ms tarde se lo encontrar en huesos. Un mes despus, el 90% se habr ubicado en los huesos, sustituyendo al calcio en las redes cristalinas. 3. EXCRECION Los txicos pueden ser eliminados por diferentes rutas. Se considera al rin como el rgano de excrecin ms importante; sin embargo para compuestos particulares otras rutas sern las principales. Por citar algunos ejemplos, el plaguicida DDT y el plomo se eliminan fundamentalmente por el sistema hgado-bilis y el monxido de carbono es excretado por los pulmones. Todas las secreciones parecen tener la capacidad de excretar sustancias extraas, es as que se han encontrado txicos en el sudor, las lgrimas y la leche. Excrecin urinaria. Los compuestos txicos se excretan en la orina por los mismos mecanismos que el rin utiliza para remover productos de desecho metablico. Estos procesos incluyen la filtracin glomerular (pasiva), difusin tubular (pasiva) y secrecin tubular (activa). El rin recibe aproximadamente un 25% del flujo cardaco y de ello un 20% es filtrado en el glomrulo. Los capilares glomerulares poseen poros de gran dimetro (40 ), lo que implica un umbral superior para un peso molecular de 70000. Si bien la mayora de las sustancias txicas son molculas mucho ms pequeas, debe tenerse en cuenta que slo se filtrar la porcin que no est unida a protenas.
Figura 4: Esquema de un nefrn y del proceso de formacin de la orina Fase Toxicocintica -14
Una vez filtrado, el txico puede quedar en la luz tubular y seguir su camino a la orina o bien reabsorberse pasivamente a lo largo de las clulas tubulares, volviendo a la sangre. Los principios que gobiernan este paso de reabsorcin tubular son los involucrados en cualquier transferencia pasiva por membranas. Los compuestos lipoflicos sern reabsorbidos, aquellos polares o inicos no, y seguirn camino a la orina. En general los txicos bsicos se excretan ms fcilmente siempre que el pH sea cido y lo inverso suceder en una orina alcalina. Los txicos tambin pueden ser eliminados del plasma por difusin pasiva a travs del tbulo. Este mecanismo probablemente es de poca significancia. La orina es cida en condiciones normales, y as es que algunas bases orgnicas pueden excretarse, ya que estarn ionizadas a ese pH. Para los cidos orgnicos la difusin tubular no tiene ningn rol porque al pH normal sern excretados por el glomrulo y luego podrn ser reabsorbidos pasivamente en algn grado a nivel tubular. Podra pensarse que la excrecin renal de cidos orgnicos dbiles es un proceso muy lento por los sucesivos ciclos de eliminacin glomerular-reabsorcin tubular, y as es; pero afortunadamente este tipo de compuestos usualmente es biotransformado a molculas mucho ms cidas (al pH de la orina una mayor proporcin estar ionizada) que no sern fcilmente reabsorbidas (pasivamente) a nivel tubular. Los txicos se pueden eliminar tambin de modo activo. Hay dos procesos secretores tubulares, uno para aniones orgnicos y otro para cationes orgnicos. Estos sistemas estaran localizados en los tbulos contorneados proximales. Al contrario que con la filtracin, la fraccin del txico unida a protena tambin estara disponible para la eliminacin. Como es caracterstico de muchos sistemas de transporte activo, varios sustratos pueden competir por la secrecin. Este fenmeno fue aprovechado en la clnica con la penicilina, una droga de escasa disponibilidad durante la Segunda Guerra Mundial. Puesto que este antibitico (un cido orgnico dbil) se excreta activamente, se lo administraba conjuntamente con otro cido, el Probenecid, para que por competencia retardara su excrecin y por ende prolongara su vida media en el organismo. Tenemos otro ejemplo en la excrecin del cido rico, por el mismo sistema de transporte activo. La presencia de sustancias txicas puede alterar la excrecin normal y producir un aumento de los niveles plasmticos de este producto de desecho. Muchas funciones renales no estn completamente desarrolladas al momento de nacer. Debido a esto la eliminacin de txicos es diferente al caso de un adulto. Se pudo demostrar que el desarrollo del sistema de transporte activo en infantes puede inducirse administrando compuestos que son sustrato del mismo. Excrecin biliar. Como ya vimos antes, el hgado se encuentra en una posicin estratgica para la remocin de materiales txicos absorbidos por el tracto gastrointestinal. Muchos de los productos de biotransformacin de sustancias extraas al organismo pueden ser excretados directamente en la bilis, sin necesidad de ingresar a la corriente sangunea y llegar al rin. Luego de llegar a la bilis, el txico o sus metabolitos pasan al intestino delgado y permanecen all. Si sus caractersticas qumicas lo permiten, estos compuestos pueden reabsorberse, cumplindose as un ciclo enteroheptico (Fig 5). Los txicos llegan a la bilis principalmente por secrecin activa desde las clulas hepticas. Aqu, la difusin simple no es un mecanismo comn porque si el txico tiene suficiente liposolubilidad para pasar, tambin la tendr para ser reabsorbido en el intestino, resultando al Fase Toxicocintica -15
Dra. Alejandra Camargo [Escriba texto] [Escriba texto] final un proceso ftil. El hgado tiene al menos tres sistemas de transporte activo para la excrecin de compuestos orgnicos a la bilis. Uno que se encarga de la excrecin de cidos orgnicos es responsable de la remocin de la bilirrubina plasmtica. Obviamente una disfuncin heptica severa afectar la funcionalidad de este mecanismo y de hecho se utiliza la medicin de la capacidad excretora biliar de ciertas sustancias como parmetro de la malfuncin heptica. La disminucin de la funcin heptica resulta en una mayor vida media para aquellas sustancias que se remueven fundamentalmente por va biliar y puede incrementar su toxicidad. Otro sistema se ocupa de la excrecin de sustancias bsicas. Un tercer sistema de transporte es para la excrecin de sustancias neutras. Adems existira al menos un sistema para la excrecin de metales (ej.: plomo). As como en el caso de la secrecin activa en los tbulos renales, el txico unido a protenas tambin est disponible para ser excretado.
La importancia relativa de la ruta de excrecin biliar depende del txico en cuestin. Por ltimo algunas drogas provocan un aumento en la excrecin biliar de otros compuestos, resultando en una accin detoxificadora. La funcin secretora biliar tampoco est completamente desarrollada en infantes y debe ser un factor a tener en cuenta al evaluar la potencial toxicidad de un compuesto, si este se excreta principalmente por esta va.
Otras rutas de excrecin.
Pulmonar. Muchos txicos que entran por el tracto respiratorio son excretados por la misma va. El proceso se puede entender simplemente como un equilibrio de fases entre el medio lquido donde el txico est disuelto (clulas) y la fase gaseosa (aire alveolar). Son ejemplos gases como el monxido de carbono, algunos alcoholes y muchos solventes. No se ha descrito ningn sistema especializado de secrecin, toda ella se realizara por difusin simple. La eliminacin de los gases transcurre aproximadamente en proporcin inversa a la velocidad de absorcin. Aquellos gases con una baja solubilidad en sangre se excretan rpidamente (xido nitroso). En cambio el etanol, muy soluble en agua, es excretado lentamente por los pulmones. Tracto gastrointestinal. Algunos compuestos txicos aparecen en las heces. Esto puede deberse a un nmero de factores: 1) Mala absorcin luego de su ingestin oral. 2) Fue excretado por la bilis y/o 3) fue excretado por el tracto gastrointestinal (TGI). Esta ltima posibilidad no parecera tener un rol muy importante. En el TGI no existen sistemas especializados para la excrecin de txicos; cualquier secrecin sera por difusin pasiva. Los txicos tambin pueden ser removidos por el reflejo del vmito. Los agentes emticos actan localmente o sobre el centro del vmito. Fase Toxicocintica -16
Dra. Alejandra Camargo [Escriba texto] [Escriba texto] Figura 5: Esquema de la circulacin enteroheptica
Leche. Esta no es una ruta excretoria de importancia, salvo por lo siguiente: 1) puede producir intoxicacin en la descendencia; 2) el hombre puede recibir txicos acumulados en la vaca. Los txicos pasan a la leche por difusin simple y ya que esta es ms cida que el plasma (pH 6.5), los compuestos bsicos se concentrarn en leche respecto del plasma y lo inverso suceder con los cidos. Los agentes quelantes (complejantes de iones) tambin suelen concentrarse en leche. Adems debe tenerse en cuenta el contenido lipdico de alrededor del 3-4% (mayor en el calostro): los compuestos lipoflicos pasarn asociados con lpidos desde el plasma a la glndula mamaria y se excretarn con la leche. De hecho, esta es la mayor ruta de excrecin para el DDT y los bifenilos polihalogenados. Debe esperarse una diferencia interespecie significativa debido a la marcada diferencia en el contenido de grasa, sintetizada en parte de novo en la glndula mamaria. Los metales con analogas qumicas con el calcio (como el plomo o el estroncio) tambin se excretan por esta ruta. Sudor y saliva. La excrecin de txicos por estas dos rutas es de menor importancia cuantitativa. Tambin es dependiente de la difusin pasiva y por ende de todos los factores que la modulan. Los compuestos excretados pueden producir dermatitis. La presencia en saliva de sales metlicas (de plomo, mercurio, etc.) que forman sulfuros muy estables con cido sulfhdrico (formado en la putrefaccin de restos alimenticios) origina en personas poco higinicas, depsitos oscuros en los dientes, conocidos como ribete de Burton, etc. La deglucin de saliva con sustancias disueltas origina una nueva absorcin, que establece el llamado ciclo salivar, de menor trascendencia cuantitativa que el enteroheptico.
Bibliografa
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