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Manual de reproduccin canina

Por

Mvz Agustn Isaac Guevara Romero


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Indice
Tema pgina


1.- Introduccin 2

2.- Anatoma del aparato reproductor 5

3.- Ciclo estral de la perra 6

4.- Citologa vaginal exfoliativa 11

5.- Inseminacin artificial 17

6.- Diagnstico de gestacin 19

7.- Evaluacin del macho 20

8.- Coleccin y evaluacin del
eyaculado 23

9.- Manejo de semen refrigerado y
congelado 27

10.- Bibliografa 29


- 3 -

1.- Introduccin a la reproduccin canina.
La reproduccin es un proceso biolgico mediante el cual los seres vivos dan
origen a otro ser, transmitiendo su informacin gentica a fin de perpetuar su
propia especie.
1
En el caso de los caninos se debe tener un especial cuidado, ya que el manejo
reproductivo es individual y no grupal.
Es indispensable conocer la anatoma del aparato reproductor tanto, del macho
como de la hembra, esto es bsico para comprender su funcionamiento.
2, 4

(Fig. 1.1)
En el caso del macho se realiza tanto una evaluacin de la condicin fsica
general, como de genitales externos como testculos, epiddimo, pene,
prepucio, e internos como conductos deferentes, prstata, uretra plvica, as
como la coleccin y evaluacin del eyaculado
2
.








Por otra parte, en la hembra se requiere conocer que el aparato reproductor se
divide en ovarios y rganos tubulares: tero, oviducto, crvix, vagina, cltoris y
vulva.
3, 4
(Fig. 1.2).







Es indispensable llevar a cabo el examen fsico general, tomando en cuenta la
observacin de signos clnicos externos del aparato reproductor, como es la
edematizacin de la vulva, que se puede ver con secrecin serosanguinolenta,
cuando ha entrado en celo y requiere reproducirse
3
.(fig. 1.3)
Fig. 1.1 Genitales externos del macho.
Fig. 1.2.- Anatoma aparato reproductor
de la hembra
- 4 -








El ciclo estral de la perra se divide en cuatro etapas: proestro, estro, diestro y
anestro. Estas etapas se observan mediante la tcnica de la CVE*, la cual
consiste en la observacin y el anlisis de las clulas que se obtienen del
epitelio vaginal exfoliado en la vagina de la perra.
4
(fig. 1.4)





Conocer el ciclo estral en la hembra, permite identificar el momento de servicio
ptimo, por medio de la medicin de las concentraciones de la hormona
progesterona (P4), el examen de clulas vaginales exfoliadas, la endoscopa
vaginal
5
, lo que tambin coadyuva a detectar o diagnosticar alguna enfermedad
en curso. Por otro lado brinda la oportunidad para realizar inseminacin
artificial, cuando las circunstancias son adversas y se carece de la presencia
del macho, ste es muy agresivo o hay falta de libido.
2

Con respecto a la hembra, el diagnstico de gestacin se realiza mediante
tcnicas avanzadas, como estudios radiogrficos y el uso de ultrasonido.
2
(Fig.1.5)








Fig. 1.4.- Citologa vaginal exfoliativa (estro)
Fig. 1.3.- Vulva edematizada con
secrecin sanguinolenta
Fig. 1.5.- Diagnstico de gestacin mediante
ultrasonido.
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2.- Anatoma del aparato reproductor de la especie canina
Para poder comprender el funcionamiento o la fisiologa de la reproduccin en
la especie canina es importante conocer la anatoma tanto del macho como de
la hembra y tener bases para el estudio de la reproduccin.
Aparato reproductor del macho
El aparato reproductor del macho se clasifica segn su localizacin en: rganos
genitales internos y genitales externos.
Los genitales internos comprenden: conductos deferentes, prstata y uretra
plvica.
Los genitales externos comprenden: testculos, epiddimo, prepucio y pene.
Los testculos son considerados como rganos sexuales primarios, mientras
que conductos excretores, glndulas accesorias, pene y prepucio, se les
considera como rganos sexuales secundarios. (Fig. 2.1)








Testculos
Los testculos son los rganos sexuales primarios encargados de la produccin
de espermatozoides y la produccin de hormonas esteroides. Los testculos se
encuentran simtricos en posicin horizontal dentro del escroto, su consistencia
a la palpacin es parecida a la de un huevo duro
Epiddimos
Los epiddimos se encuentran dorsales a los testculos estos se dividen en
cabeza (transporte), cuerpo (maduracin) y cola (almacn) de
espermatozoides. El epiddimo se contina con los conductos deferentes, los
cuales transportan a los espermatozoides a la uretra durante el proceso de
eyaculacin. (Fig. 2.2)


Fig. 2.1.-Aanatoma del aparato reproductor
del macho
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La cabeza del epiddimo se encuentra hacia el polo craneal y la cola del mismo
se puede palpar hacia el polo caudal.
Conductos deferentes
Se encuentran mediales a los testculos, estos se dirigen hacia craneal a travs
del anillo inguinal y terminan dorsal a la prstata.
Prstata
Es la nica glndula sexual accesoria, encargada de producir lquido prosttico
el cual sirve como medio de transporte u sustento a los espermatozoides. La
prstata es bilobulada mide aproximadamente 1.5 a 3 cms. el fluido prosttico
consta de tres fracciones que corresponden al eyaculado, la primera fraccin
es un lquido transparente que proviene de la prstata; la segunda fraccin es
de aspecto lechoso, esto es debido a la presencia de los espermatozoides que
provienen de la cola del epiddimo y la tercera fraccin tambin es transparente
proveniente de la prstata.
Pene
El pene es el rgano copulador del perro y cumple con dos funciones, la de
expulsar la orina y la de expulsar por medio de la eyaculacin el semen hacia la
vagina de la perra. El pene del perro es de tipo vascular, la ereccin del pene
depende de que este se llenen de sangre los cuerpos cavernosos y esponjosos
que rodean a la uretra y que se disponen a todo lo largo del pene, produciendo
una rigidez para poder penetrar a la hembra. El glande del perro abarca desde
la punta del pene hasta el bulbo peneano en su parte posterior, en su interior y
a todo lo largo est dispuesto el hueso peneano, el cual coadyuva a la
penetracin del pene en la vagina de la perra y que una vez introducido, el
glande recibe temperatura y presin lo que esto provoca estimulacin en el
perro para producir la eyaculacin. (Fig. 2.3)





Fig. 2.2.- Anatoma de los epiddimos
Fig. 2.3.-rganos externos del macho,
Pene, Prepucio, Testculos.
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Prepucio
El prepucio es una extensin de piel la cual cubre en su totalidad al pene, aqu
se debe observar que hay un deslizamiento entre la mucosa del pene y la
mucosa interior del prepucio, no debe haber adherencias y a la inspeccin del
pene ste debe desenvainar totalmente. Existen dos alteraciones en esta parte
anatmica que consisten que cuando hay incapacidad de desenvainar el pene
se denomina fimosis y cuando no vuelve a envainar el pene se llama
parafimosis. (Fig. 2.4)






Aparato reproductor de la hembra
Los rganos del aparato reproductor de la hembra, casi todos se encuentran
alojados en el abdomen, producen vulos y ayudan a que estos puedan ser
fertilizados, se desarrollan durante la gestacin o involucionan para dar paso al
nuevo ciclo sexual de la hembra. Tambin estn preparados para recibir al
pene durante la cpula. El aparato reproductor de la hembra se divide en
ovarios y rganos tubulares: tero, oviducto, crvix, vagina, cltoris y vulva.
(Fig. 2.5)







Ovarios
Son dos rganos pares suspendidos de la regin sublumbar por el ligamento
ancho o mesoovario, estn localizados caudalmente a los riones, son de
forma oval cubiertos por la Bursa ovrica dejando una pequea abertura hacia
cavidad abdominal. La funcin de los ovarios es la produccin de vulos,
secrecin de estrgenos y progesterona, por medio de la formacin de folculos
y la formacin del cuerpo lteo respectivamente. Cabe mencionar que los
ovarios al estar cubiertos por la Bursa ovrica, esta no permite la observacin
Fig. 2.4.- Desenvaine del pene
Fig. 2.5.- Anatoma del aparato reproductor de la
hembra
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por laparoscopia el desarrollo y crecimiento folicular, as como la formacin del
cuerpo lteo.
Dada la estrecha unin que hay entre la Bursa ovrica y el ovario, cuando se
realiza la ovariohisterectoma, pueden quedar remanentes tanto de la bursa
ovrica como del ovario, dando como consecuencia la revascularizacin de
estos pequeos residuos de tejido ovrico y con el tiempo, la perra presenta
ciclos estrales, esta condicin se denomina Sndrome del remanente ovrico.
Oviductos
Los oviductos son unos tubos cortos y estrechos los cuales se conectan a cada
uno de los ovarios con los cuernos uterinos, donde se lleva a cabo la
fertilizacin del vulo con el espermatozoide.
El tero se clasifica como bicornual de fusin baja, es decir, tiene un cuerpo
uterino corto y cuernos uterinos extremadamente largos y delgados dispuestos
en forma de V. La vagina es larga y la os externa del crvix se encuentra en el
techo de la porcin craneal de la misma. La vagina termina en su parte ms
profunda en un fondo de saco o fornix. (http://animalosis.com/anatomia-reproductora-de-la-
perra/)
Esta caracterstica, aunada al hecho de que los pliegues longitudinales de la
mucosa vaginal aumentan de tamao durante el estro, ocultan el principio del
crvix, visualizndose nicamente la entrada del fondo de saco y que puede
confundirse con la entrada del crvix, por lo que se le conoce como
pseudocervix
Crvix
Es una estructura que separa al tero de la vagina, protege al tero del exterior
a excepcin de situaciones tales como el parto y el periodo de estro, el lumen
del crvix se llama canal cervical, se encuentra dorsal a la vagina y se halla
limitado por un fondo de saco el cual se llena de semen el cual posteriormente
pasar por el canal cervical al interior de la vagina.
Vagina
La vagina es un rgano tubular fibroso y muscular que se extiende desde al
crvix hasta la vulva de la perra. La vagina est constituida por un epitelio
escamoso estratificado que descansa sobre una capa basal gruesa; este
epitelio es capaz de engrosar de acuerdo a las variaciones que por la
produccin de los estrgenos que se producen en los ovarios cual determina la
etapa del ciclo estral.





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3.- Ciclo estral de la perra
El ciclo estral de la perra (Canis familiaris), a diferencia de otras especies,
presenta caractersticas muy particulares, por ejemplo, tiene un prolongado
ciclo sexual por tener una fase ltea muy larga, ya que hay presencia de
progesterona an en hembras no gestantes, por lo que el diagnstico de
gestacin no requiere de la determinacin de niveles de progesterona est o no
gestante la perra, con pseudogestacin o piometra.
La perra se clasifica como monostrica no estacional, puede tener hasta tres
ovulaciones al ao con intervalos de 4 a 12 meses, el intervalo interestro
promedio es de aproximadamente 7 meses, pudiendo ser muy variables en
perras con ciclos normales de 4.5 a 13 meses o ms.
3, 5
Otra particularidad en
la perra es que al momento de la ovulacin, los ovocitos expulsados, son
inmaduros, no son aptos para ser fertilizados an, ya que requieren pasar por
un proceso de maduracin el cual dura aproximadamente 24 a 48 horas.
La adenohipfisis produce tres hormonas en la reproduccin de la hembra:
FSH (hormona folculo estimulante), LH (hormona luteinizante), y PRL
(prolactina). La funcin principal de FSH es estimular el crecimiento de los
folculos estrales; la LH es necesaria para el proceso ovulatorio y para la
luteinizacin de la granulosa lo que resulta en la formacin del cuerpo lteo. La
PRL es responsable del desarrollo del tejido secretor de la glndula mamaria y
el mantenimiento de la lactacin lo que permite establecer en la hembra el
instinto protector materno, tambin tiene efecto luteotrfico.
La liberacin de FSH y LH est modulada por la GnRH (hormona liberadora de
las gonadotropinas) mediante pulsos de liberacin y existen dos formas de
influenciar su liberacin; una es variar la frecuencia de liberacin de GnRH ya
que es esencial para mantener la liberacin constante de FSH y LH por la
adenohipfisis; la otra forma es modificar la sensibilidad de la adenohipfisis a
GnRH por efecto de los estrgenos y la progesterona. El incremento de las
concentraciones de estrgenos aumenta la sensibilidad a la GnRH y aumenta
la secrecin de gonadotrofinas. La progesterona tiene un efecto opuesto.
La FSH controla la sntesis estrognica de los folculos ovricos y acta sobre
las clulas de la granulosa.
La LH acta sobre la sntesis de estrgenos, ya que controla la produccin de
la molcula esencial precursora (testosterona) por las clulas de la teca interna.
Las acciones de los estrgenos son:
- Estimular el crecimiento de las glndulas endometriales
- Estimular el crecimiento de los conductos de la glndula mamaria
- Causar actividad secretoria en el oviducto, para favorecer la sobrevivencia del
vulo y el espermatozoide.
- Regular la secrecin de gonadotropinas.
- Detener el crecimiento de los huesos largos al iniciar el cierre de la placa
epifisiaria de crecimiento
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- Favorecer el metabolismo proteico.
Las acciones de la progesterona, son:
- Estimular el crecimiento de las glndulas endometriales.
- Estimular el crecimiento lbulo-alveolar de la glndula mamaria.
- Estimular la actividad secretora del oviducto y de las glndulas endometriales.
- Estimular la conducta de estro en la perra, en coordinacin con los estrgenos
- Prevenir la contractibilidad del tero durante la gestacin
La receptividad sexual en la perra, depende del ovario y sus hormonas. En los
ltimos aos, los eventos endcrinos se han delineado en forma parcial en la
perra. En la actualidad se hacen pruebas radioinmunes para determinar los
niveles sricos de LH, FSH, prolactina, estradiol y progesterona.
En la perra, la progesterona se empieza a producir an antes de ovular, y en la
medida que crecen los folculos.
Cabe sealar que es importante conocer cuando se presenta la pubertad en
esta especie; la pubertad ocurre cuando la tasa ovulatoria alcanza su pico
mximo, lo cual ocurre despus del tercer o cuarto ciclo estral, esta se presenta
cuando el animal ha llegado a un 70 % de su peso adulto; hay que considerar
que las razas de talla pequea son ms precoces que los animales de talla
grande o gigantes; por ejemplo, los animales de raza como el chihuahueo
inicia su actividad reproductiva alrededor de los 8 a 10 meses de edad mientras
que razas grandes como el Gran Dans o el San Bernardo, su actividad sexual
inicia tardamente hacia los dos aos de edad. El ciclo estral de la perra se
divide en cuatro etapas: Proestro, Estro, Diestro y Anestro.
Proestro
Por lo general el proestro tiene una duracin de 3 20 das. En este periodo la
hembra puede atraer al macho pero no acepta ser montada, no es receptiva
para la cruza.
2
En esta etapa las estructuras ovricas que caracterizan este estadio, son las
ovogonias que al iniciar la meiosis se comienzan a organizar clulas del
estroma, las cuales darn origen a clulas de tipo escamosos (granulosa) que
rodean al ovocito, formando el folculo primario.
4
(Fig. 3.1)






Fig. 3.1.- Clulas caractersticas de la etapa de proestro (CVE)
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Los signos clnicos que se observan en la perra, la vulva se vuelve turgente,
edematizada, y enrojecida, de ella se descarga una secrecin
serosanguinolenta por los labios vulvares, la secrecin sanguinolenta contiene
numerosos eritrocitos que por diapdesis emigran a travs de los capilares
uterinos por efecto de los niveles de estrgenos, producidos por los folculos en
crecimiento. Por eso es importante determinar el tiempo de ovulacin mediante
la citologa vaginal exfoliativa, monitorearla desde el inicio del sangrado.
4

(Fig.3.2)









Estro
El estro tiene una duracin aproximada de 3 a 20 das, es el periodo de
receptividad sexual o frtil, contina la secrecin serosanguinolenta aunque
ahora un poco ms clara y en forma ocasional puede persistir hasta el diestro.
Con el inicio de la conducta para la monta, aumentan los niveles de
progesterona y declinan los niveles de estrgenos. Las estructuras ovricas
que se desarrollan son folculos de Graff, los cuales ovulan al inicio de esta
etapa ovocitos primarios o inmaduros, mismos que maduran pasados 2 a 3
das y ya pueden ser fertilizados.
Al observar los signos clnicos vemos que la vulva contina edematizada y
turgente, el sangrado contina, los folculos empiezan a luteinizar antes de la
ovulacin y aumentan los niveles de progesterona.
La ovulacin es espontnea ocurre en los primeros dos das de iniciado el
estro. La ovulacin es causada por un pico de las concentraciones de hormona
luetinizante en plasma (LH), en las perras la ovulacin ocurre dos das despus
del pico de LH y los oocistos permanecen viables dentro del tracto reproductivo
despus de cuatro a cinco das para luego degenerar.
Las citologas vaginales durante el estro contienen clulas superficiales y
clulas de descamacin anucleadas, sin la presencia de neutrfilos aun cuando
puede haber gran cantidad de bacterias.
Diestro
Podemos definir al diestro como el periodo entre la ltima aceptacin del
macho para la cruza y el cese de la actividad ltea. El diestro tiene una
duracin de 80 a 100 das en una perra vaca, pero en una perra gestante la el
Fig. 3.2.- Vulva edematizada con
secrecin sanguinolenta.
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diestro es de 63 + 3das. El diestro se caracteriza en la citologa vaginal por la
presencia de clulas epiteliales intermedias, clulas parabasales, neutrfilos y
algo muy caracterstico en esta etapa es la presencia de neutrfilo
intracitoplasmtico.












4.- Citologa Vaginal Exfoliativa
La CVE es una tcnica que sirve para determinar la etapa del ciclo estral de la
perra y cul es el momento ptimo en que una perra es frtil y pueda ser
servida para reproducirse.
Durante el ciclo estral de la perra la mucosa cambia de un epitelio bajo,
cuboidal a un epitelio estratitificado, queratrinizado escamoso.
3
La CVE se fundamenta en el hecho de que por efecto de los estrgenos
producidos por los folculos ovricos existe engrosamiento de las capas del
epitelio vaginal, lo que produce su descamacin.
3







Eventos endocrinolgicos que ocurren durante las etapas del ciclo estral de la perra
Fig. 4.1.- Fundamento de la citologa Vaginal Exfoliativa
- 13 -


Coadyuva a las observaciones detectadas en el comportamiento de la perra
como es la aceptacin del macho; el aumento de tamao o edematizacin de
la vulva, secrecin sanguinolenta a travs de sta. Estos signos actan de
manera sincrnica con la ovulacin, por lo que para determinar el momento
exacto de la ovulacin se requiere del apoyo de pruebas sanguneas para
determinar los niveles de progesterona en suero.
3
Durante el proceso de observacin de la CVE es posible, determinar procesos
infecciosos como piometra y vaginitis, o tumorales como Tumor Venreo
Transmisible (TVT).
Procedimiento
El procedimiento para la realizacin de la CVE permitir la observacin y
evaluacin de los cambios morfolgicos que ocurren en las clulas de
descamacin vaginal como consecuencia del efecto de los estrgenos
producidos por los folculos
3
.
El ciclo estral de la perra se divide en cuatro etapas:
a) Proestro
b) Estro
c) Diestro
d) Anestro
Proestro
Se observan clulas parabasales que son redondas, bien definidas, con ncleo
central y de tamao uniforme; clulas intermedias de bordes irregulares y
ncleo redondo. Ambos tipos celulares se encuentran agrupados y pueden
observarse eritrocitos. (Fig. 4.2)







Estro
En esta etapa se localizan clulas superficiales, su forma es poligonal, de
citoplasma trasparente y ncleo picntico; clulas anucleadas en forma de
escamas separadas entre s, puede o no observarse eritrocitos. (Fig.4.3).

Fig. 4.2.- Etapa de proestro se observan clulas intermedias y
eritrocitos
Clulas intermedias
Eritrocitos
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Diestro
Se encuentran clulas parabasales e intermedias, neutrfilos y estras de
moco; la caracterstica principal es que se pueden observar neutrfilos
intracitoplasmticos. (fig. 4.4)







Anestro
Se encuentran clulas parabasales, intermedias, superficiales, ncleos sueltos
y moco, aunque en menor nmero. (Fig. 4.5)











Fig.4.3.-Etapa de estro clulas superficiales y anucledas.
Fig. 4.4.-Clulas parabasales e intermedias; aqu
se observan neutrfilos as como bacterias.

Fig.4.5.-se observan ncleos sueltos,
moco, algunas clulas parabasales y
ncleos sueltos.
Clulas superficiales
Neutrfilos
Parabasales
Clulas anucleadas
Bacterias
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Fig. 4.6.- Esquema de las diferentes etapas del ciclo estral. (Tomado de Manual de prcticas de manejo
reproductivo en perros.- Dra. Rosa Ma. Pramo Ramrez y MPA Juan A. Balczar Snchez)
3
Material:
- Guantes
- Algodn hmedo
- Hisopos de algodn con mango flexible de plstico de 15 cm.
- Portaobjetos
- Tincin de Diff-Quick






Mtodo:
1.- Sujetar los labios vulvares con el dedo ndice por la parte de atrs de la
vulva, con apoyo de con los dedos pulgar y cordial y se limpian los labios con
algodn humedecido en agua, as como la parte interna del pliegue que se
forma en la parte dorsal, a fin de eliminar la suciedad acumulada. (Fig. 4.8)
Clulas superficiales
Clulas parabasales
Clulas parabasales

Clulas anucleadas
Eritrocitos
Clulas intermedias
Clulas intermedias
PROESTRO
DIESTRO
ESTRO
Fig. 4.7.-Material para realizar
Citologa vaginal exfoliativa
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2.- Verificar que el algodn del hisopo est bien adherido al mango del mismo,
sin contaminarlo. (Figs. 4.10 y 4.11)
3.- Introducir el hisopo deslizndolo sobre el dorso o techo de la vulva para
evitar el meato urinario o la fosa del cltoris y se dirige en direccin vertical o
bien a 90 hasta topar con el cingulum (estructura que provoca que se
abotonen los perros durante el coito), de ah se redirige el hisopo horizontal y
se introduce hasta el interior de la vagina, para realizar tres movimientos
circulares. (Fig. 4.12)







4.- El hisopo se retira con suavidad de la misma forma en que fue introducido,
se realiza la impronta rodando tres veces el hisopo para imprimir las clulas
exfoliadas en la laminilla. (Fig.- 4.13)
Fig. 4.9.- Modo de sujetar la vulva
Fig. 4.10.- Se verifica el hisopo adherido Fig. 4.11.- Hisopo sin contaminar
Fig. 4.13.-Tomando muestra con hisopo
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En seguida, se utilizan tinciones como Diff-Quick.
Tincin de Diff-Quick
1.- Se sumerge la laminilla en fijador, el cual consiste en una solucin a base
de alcohol al 70%, se introduce y se extrae de inmediato y se seca al aire. (Fig.
3.3)





2.- Se sumerge la laminilla en la tincin roja A durante 15 segundos sin
descuidar la superficie de impresin celular en la laminilla.(Fig. 4.15)







3.- Posteriormente se sumerge en tincin azul B durante 15 segundos y se enjuaga en
agua corriente, evitando mojar los guantes. (Fig. 4.16)


Fig. 4.13.- Se realiza la impronta de las
clulas exfoliadas.

Fig. 4.14.- Fijacin de la laminilla con
metanol 70 %.
Fig. 4.15.- Tincin A roja
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4.- Observar al microscopio todo el campo celular de la laminilla.

5.- Inseminacin artificial
La inseminacin artificial es una tcnica de reproduccin asistida en perros,
que consiste en depositar el eyaculado en la regin craneal de la vagina
10
.
La inseminacin artificial es la tcnica que se ha difundido en la reproduccin
canina, permite brindar asistencia a los animales de alto valor y edad
avanzada, as como proporcionar mayor cobertura a hembras dominantes,
incluso, aquellas que se encuentran a largas distantes, lo que impide el
apareamiento de los animales.
11

La inseminacin artificial se puede realizar con semen fresco, refrigerado y
congelado.
10, 11
Una vez obtenido el semen, es introducido y depositado en la vagina de la
perra, previa evaluacin del ciclo estral de la perra por medio de CVE, as como
la evaluacin del semen colectado.
3,11, 12
Tipos de inseminacin artificial
Los diferentes tipos de inseminacin artificial corresponden a los siguientes:
- Intravaginal
- Intrauterina
- Transcervical
La tcnica de inseminacin artificial intravaginal consiste en colocar el
eyaculado en la parte craneal de la vagina, se utiliza semen fresco o
refrigerado.
10

La inseminacin artificial intrauterina se realiza por medio de la tcnica
quirrgica denominada celiotoma y consiste en depositar el eyaculado en el
interior de los cuernos uterinos; en esta tcnica se puede utilizar semen fresco,
refrigerado o congelado.
10
La inseminacin artificial transcervical es aquella en la cual se aplica el semen
dentro del tero mediante vaginoscopa o por medio de un catter escandinavo,
se utiliza semen fresco o refrigerado.
10
Fig. 4.16.- Tincin B azul
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En la inseminacin artificial se utiliza la segunda porcin del eyaculado del
perro, es la que posee la mayor cantidad de espermatozoides, es evaluada o,
en su defecto, se conserva a corto plazo mediante la refrigeracin o se
preserva a largo plazo en congelacin.
10, 12
Material para inseminacin artificial: (Fig. 3.6)
1.- Pipeta para inseminacin
2.- Jeringa de 5 ml sin mbolo
3.- Manguera de hule ltex de 0.5 cm








Mtodo de inseminacin artificial:
Una vez que el semen del perro ha sido extrado y evaluado, la jeringa,
previamente conectada a la pipeta de plstico, se carga con un poco de aire
por medio de la manguera de hule, se toma el volumen total de semen extrado
y se inserta en la parte dorsal de la vulva de la misma forma en que se
introdujo el hisopo para CVE; se introduce el semen en el interior de la vagina y
se levanta a la perra de los miembros plvicos por unos minutos para
garantizar que se llene el fondo de saco vaginal, se da un ligero masaje en el
cltoris para estimular las contracciones vaginales. (Fig. 3.7 y 3.8)
3, 10









Fig. 3.6.- Material para inseminacin artificial
Fig.- 3.8.-Introduccin de pajilla de
inseminacin artificial
Fig. 3.7.- Elevacin de los miembros
plvicos de la perra
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6.- Diagnstico de Gestacin
Una vez proporcionada la monta a la hembra, se requiere conocer si ha
quedado gestante; debido a que las etapas de proestro y estro son
prolongadas, que abarcan hasta cuarenta das hace difcil conocer la fecha
exacta de gestacin.
3
El diagnstico de gestacin en la perra es de vital importancia porque permite
determinar si hay fallas en la concepcin, valorar con exactitud la viabilidad de
los cachorros en el tero, conocer el nmero de cachorros o, en su defecto
presencia de fetos muertos. Asimismo, ayuda en la deteccin de alguna
distocia y programar la cesrea.
El diagnstico de gestacin se puede realizar por medio de diferentes
mtodos:
- Palpacin manual
- Deteccin de relaxina plasmtica
- Ultrasonografa
- Estudio radiogrfico (Rx)
Palpacin abdominal
La palpacin abdominal se puede realizar desde del da 22 al da 28 posterior
a la monta. Se lleva a cabo en abdomen medio y caudal ejerciendo presin
suave en direccin de la regin sublumbar, lo que permite desplazar las
vsceras.
2, 3

Ultrasonido
Esta tcnica se lleva a cabo, desde el da 20 al 35 despus de la ltima monta,
lo que permite revisar la salud del tero y determinar la gestacin normal, o si
existe alguna alteracin como pseudogestacin o piometra.
El ultrasonido permite ver si los fetos son viables, el tamao y nmero de
cachorros aproximado. Para el da 30 es posible ver el latido cardiaco (Fig.
4.1). Cuando se desconoce el tiempo de gestacin, se calcula la edad
gestacional mediante las siguientes frmulas:
*DBP X 15 + 20 = TG
+
3 das
*SG X 6 + 20 = TG
+
3 das







DBP = 1.5 cm

Fig. 3.9.- Diagnstico de gestacin por
ultrasonido, midiendo dimetro biparietal
- 21 -

De acuerdo con las frmulas mencionadas anteriormente tenemos que:
DBP = 1.5 x 15 + 20 = 42.5 + 3 das
El resultado obtenido es la edad gestacional del (os) cachorros
Estudio radiogrfico
A los 55 y 60 das de gestacin es importante verificar el nmero exacto de
cachorros en gestacin mediante estudio radiogrfico (rayos X), que nos
demuestra la viabilidad y medir el dimetro cfalo-plvico.
Deteccin de relaxina
La relaxina estimula la produccin de enzimas colagenolticas, que ablandan el
tejido que rodea a la pelvis y permiten mayor distensin del canal del parto al
nacimiento de los cachorros.
La relaxina es una hormona que es secretada por la placenta de las perras,
aumenta a partir de la implantacin de los fetos en las paredes uterinas los
das 20 a 28 de gestacin.
3,12

7.- Evaluacin del macho
Para lograr xito en la reproduccin, tanto la hembra como el macho deben
tener un estado de salud ptimo (Fig. 4.1). Para el caso del macho, la
evaluacin es rigurosa sobre todo si va a servir como semental. Con
frecuencia son solicitados los servicios del mdico veterinario para realizar la
evaluacin reproductiva de perros, ya sea en criaderos, cuando se va a
realizar la adquisicin de algn semental, o cuando se ha recuperado de
alguna enfermedad y ha pasado por procesos febriles, que afectan la
fertilidad.
14










1
DBP = Dimetro biparietal; SG = Saco gestacional; TG = Tiempo gestacional

Fig.4.1.- Ejemplar en buenas condiciones de salud.
- 22 -

La evaluacin del macho se realiza al menos dos veces al ao, o cuando el
macho ha sufrido alguna enfermedad. La evaluacin del macho es obligatoria
cuando ste se va adquirir y cuando llega a la pubertad (7 a 9 meses)
3
.
Para determinar si un macho es capaz de reproducirse se realizarn los
exmenes siguientes:
- Examen clnico general
- Examen clnico reproductivo
- Evaluacin de comportamiento reproductivo (libido)
- Evaluacin del eyaculado
Examen clnico general
El examen clnico general debe incluir la bsqueda de enfermedades o
condiciones que sean hereditarias como criptorquidismo o displasia de la
cadera
14
. Se debe revisar al perro de manera ordenada de craneal a caudal.
- Cabeza.- Revisar ojos, odos, boca, fosas nasales (Fig. 5.2)
- Cuello.- Verificar vrtebras cervicales
- Trax.- Evaluar campos pulmonares, funcin cardiaca sea correcta
- Columna vertebral.- Vrtebras lumbares y sacro coccgeas (Fig. 5.2)
- Miembros torcicos y pelvianos.- Aplomos (fig. 5.3 y 5.4)
-
















Fig. 5.2.-Revisin de boca y
fosas nasales
Fig. 5.3.- Ejemplar en buen
estado de salud
Fig. 5.4.- Revisin de miembros anteriores
y posteriores (aplomos)
- 23 -

Examen clnico reproductivo
Este examen incluye la evaluacin de los genitales del macho.
- Escroto
- Testculos
- Epiddimo
- Prepucio
- Pene
- Prstata













Examen de comportamiento sexual (libido)
Una de las partes importantes de la evaluacin del macho es conocer el patrn
de comportamiento sexual que conlleva al apareamiento natural.
2, 3, 14
.
El patrn de comportamiento incluye funciones y estmulos que recibe el
animal para responder correctamente ante la hembra en celo, es lo que se
conoce como cortejo y consiste en diferentes funciones del semental.
Funciones del semental
a) Detectar y olfatear
b) Dominar
c) Montar
d) Desenvainar
e) Penetrar
f) Eyacular

Fig. 5.5.-Observacin de
escroto, testculos y epiddimo
Fig.- 5.6.-Prepucio cubre a todo
lo largo al pene
Fig. 5.7.- Desenvaine del pene
Fig. 5.8.- Pene desenvainado
- 24 -












Estas actividades de comportamiento dependen de la libido del semental, es
decir, de su grado de deseo sexual; sin embargo, pueden alterarse por
situaciones como las que a continuacin se mencionan.
- Aburrimiento
- Cansancio
- Estrs
- Dominancia jerrquica
- Maltrato
- Falta de familiarizacin con el manejador
- Inexperiencia
- Preferencia
8.- Coleccin y evaluacin del eyaculado
Se deben tomar en cuenta ciertas consideraciones antes de realizar la
recoleccin de semen para su evaluacin, en el sentido de saber cundo se
realiz la ltima recoleccin de semen, as como posibles apareamientos o
servicios y eyaculaciones, ya que esto podra afectar los resultados de la
evaluacin del eyaculado.
3,14
En animales que se utilicen con frecuencia para
la reproduccin, el semen se recolecta y se evala para la inseminacin
artificial; refrigerar o congelar para almacenarlo por tiempo indeterminado.

El eyaculado o la fraccin rica en espermatozoides se caracteriza en trminos
de volumen, color, motilidad, pH, concentracin espermtica y
anormalidades.
3, 6,14
(Cuadro 1)



Fig. 5.9.-Funciones del semental
- 25 -








Cuadro 1.-Valores normales del eyaculado del perro.
Las caractersticas macroscpicas que se evalan en el eyaculado son
6
:
- Volumen
- Color
- pH
Caractersticas microscpicas
6
:
- Motilidad
- Concentracin
- Anormalidades
- Vivos y muertos
Material y mtodo para coleccin y evaluacin del eyaculado (Fig. 5.1)













1.- Cono de hule ltex
- 2.- Tubo de vidrio
- 3.- Guantes
- 4.- Laminillas portaobjetos y cubreobjetos
- 5.- Pipeta Pasteur

Cantidad
2 30 ml
Color Blanco lechoso
pH 6.3 a 7.1
Concentracin >De 100 mill/ml
Anormalidades > 80% normales
1
2
3
4
5
Fig.6.1.- Material para coleccin de
semen.
- 26 -

Tcnica de coleccin de semen
1.- Estimular al perro mediante la interaccin con una perra en celo, (tambin
se evala vista y olfato).
2.- Se localiza el bulbo peneano y se realiza un masaje rpido y firme sobre el
prepucio, se desliza atrs del bulbo peneano hasta desenvainar
completamente el pene, se inserta dentro del cono de ltex y se continan los
movimientos de masaje hasta que se obtiene una ereccin firme.
3.- Se rota el pene hacia la parte posterior del perro pasando la extremidad
posterior sobre el brazo del manejador, se observa la salida de la primera
fraccin del eyaculado, que es trasparente y corresponde a la secrecin de la
prstata. Luego de seguir estimulando se observa la segunda fraccin del
eyaculado, que corresponde a la fraccin rica en espermatozoides. (fig. 6.2)






4.- Se deja de estimular al perro, se toma una gota de semen para observar al
microscopio, la motilidad en su conjunto y la movilidad individual, que debe ser
uniforme y progresiva.
3
(Fig. 6.3)








Concentracin de semen
6
.
Material y mtodos
- Pipeta de dilucin
- Cmara de conteo
- Solucin Fucsina-formalina 5%
Fig- 6.2.- Obtencin de semen.
Fig. 6.3.- Observacin macro y microscpica del eyaculado
- 27 -

Mtodo:
1. Homogenizar el eyaculado.
2. Se toma el volumen de semen con la pipeta, luego tomar el diluyente
con la misma, de tal forma que se obtenga una dilucin 1:100.
3. Se llenan las dos camaritas de la cmara de Neubauer.
4. En el microscopio contar los espermatozoides que se ubican en los
cuadros de las esquinas y el cuadro que se encuentra al centro, de tal
manera se involucran cinco cuadros en los que se cuentan los
espermatozoides, se suman y se promedian, el resultado es igual a X
10
6
, que se relaciona con la concentracin. Para obtener el nmero
total de espermatozoides del eyaculado se multiplica por el volumen
total obtenido.
6, 14









Anormalidades, vivos y muertos
Para observar espermatozoides vivos, muertos y las anormalidades que
existan en el eyaculado, se tie un frotis con tincin Eosina Nigrosina.
Se coloca una gota de semen en la laminilla, se le agrega una gota de la
tincin Eosina Nigrosina, se mezclan de manera que se homogenicen y, en
otra laminilla, se realiza el frotis. Al microscopio se realiza el conteo de
espermatozoides vivos, muertos y las anormalidades hasta tener un conteo de
100 espermatozoides. Los espermatozoides teidos con Eosina Nigrosina
son espermatozoides muertos y los que no se tien son clulas vivas.
3, 14
Las anormalidades se clasifican en:
a) Primarias
b) Secundarias
Las anormalidades primarias se deben a defectos durante la
espermatognesis y las anormalidades secundarias son relacionadas con el
transporte y el manejo. El total de las anormalidades no debe ser mayor del
15% y el nmero de espermatozoides muertos no debe rebasar el 5%.
3, 14


Anormalidades primarias





Fig.- . 6.4.-Se cuentan los espermatozoides que se
encuentran en los cuadros marcados con rojo.

- 28 -

- Macrocefalia
- Microcefalia
- Cabeza doble
- Colas dobles
- Gota citoplasmtica proximal
Anormalidades secundarias
- Colas dobles
- Colas enrolladas
- Cabezas sueltas
- Colas sueltas y gota citoplasmtica distal
9.- Manejo de semen refrigerado y congelado
La criopreservacin permite la disponibilidad del semen tiempo despus de
haber sido recolectado, manteniendo la viabilidad de los espermatozoides.
Ventajas
- Transportar semen de un lugar a otro
- Se obtiene una mayor cobertura de hembras con un solo eyaculado
- Se conserva semen de animales muertos
- Es posible realizar preservacin gentica de la especie
- Control de enfermedades transmisibles de la hembra al macho
- Prevenir enfermedades como brucelosis y TVT
Desventajas
- El procedimiento es de un alto costo
- Se requiere material especfico
- El personal requiere ser capacitado
Para transporte, lo ms conveniente ser conservarlo bajo condiciones de
refrigeracin (4C), de esta manera el semen puede ser preservado entre dos
a cuatro das.
3
Cuando se quiere conservar por un periodo prolongado, se procede a efectuar
la congelacin a una temperatura de hasta -179C.
6, 7
Para proteger de los daos causados por los cambios de temperatura se
utilizan diluyentes de semen que protegen las membranas espermticas, les
proveen de energa, estabilizan su pH y la presin osmtica.
7
Diluyentes para semen refrigerado
El diluyente debe tener las siguientes caractersticas
- Fuente de nutrientes
- Amortiguador (buffer)
- Agente antimicrobiano
- Que contenga glicerol
6

Tipos de diluyentes
- 29 -

- Lactosa
- Lactosa yema de huevo
- Leche descremada
- TRIS - yema de huevo
Se utiliza principalmente leche ultrapasteurizada, descremada o light, pero
tambin se puede utilizar yema de huevo, sta en particular protege al
espermatozoide del choque de fro debido a que aporta fosfolpidos y protenas
de baja densidad.
3, 7
Diluyentes para semen congelado
Prcticamente los diluyentes para semen lquido o congelado contienen:
- Yema de huevo y leche como componentes bsicos y como nutrientes
- Lactosa que mantiene la presin osmtica, aporta energa, es protector de
membrana.
- Glicerol como protector contra choque hipotrmico, con accin deshidratante
de los espermatozoides
- Vitamina E y cido ctrico como antioxidantes
Mtodo de refrigeracin
1. Colectar el semen y mantenerlo a 37C
2. Evaluar el eyaculado
3. Diluir 1:1 (leche descremada)
4. Se introduce al refrigerador a 4C para bajar la temperatura del semen
5. Se mantiene hasta el momento de su utilizacin (viable 72 hrs), cuando
se vuelve a calentar a 37 C
Frmula para calcular el nmero de pajillas que se pueden obtener de un
eyaculado:
Una vez que el semen ha adquirido las condiciones para ser congelado se
procede a realizar el clculo para determinar el nmero de pajillas que sern
las dosis exactas para inseminar, las cuales se congelarn en nitrgeno lquido
a una temperatura de -179C.

Nmero de pajillas = (% mov.)([ ])(%norm)(%vivos)((Vol. ml.)
* [ ] = concentracin
Volumen total = (#pajillas) (Vol. pajilla)
Volumen diluyente = Vol. total Vol. espermatozoides

Mtodo Congelacin de semen
1. Evaluacin de movilidad (70%) de semen al microscopio ptico
2. Centrifugar y eliminar el sobrenadante
3. Reconstituir 1:1 (diluyente sin glicerol)
[ ] deseada
- 30 -

4. Observar viabilidad al microscopio ptico
5. Refrigerar a 4C por 30 minutos con camisa de agua
6. Continuar realizando 4 pases con intervalos de 30 minutos entre cada
uno, con el uso de glicerol a concentraciones de 0.6, 0.9, 1, 1.5
mililitros.
7. Observar viabilidad en cada pase
8. Congelar en una hielera con una gradilla a - 79C
9. Introducir a congelacin en nitrgeno lquido a -196C

10.- Bibliografa
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