MECANISMOS GENERALES DE COMUNICACIN CELULAR

Durante el desarrollo de los organismos multicelulares complejos como los eucariotas

superiores, grupos de clulas adquirieron funciones diferenciadas y establecieron relaciones entre
ellos que permitieron el funcionamiento armnico y coordinado del organismo como un todo. Para
que esto ocurriese, debi establecerse un dilogo fluido entre los diferentes grupos celulares, en el
que cada grupo tena la capacidad de comunicarse con otro, lo que permiti coordinar sus funciones.
Como en todo proceso de comunicacin, en este dilogo existe un emisor, es decir una clula que
elabora un mensaje (como la denominada molcula seal), y un receptor, una clula sobre la que
esta molcula ejerce un efecto, generando una respuesta biolgica.


Cules son las etapas del proceso de comunicacin celular?

La comunicacin celular involucra las siguientes etapas:
1) Ante un estmulo, una determinada clula (clula emisora) sintetiza y/o libera una molcula
seal o mensajero qumico;
2) El mensajero qumico difunde o se transporta por la sangre u otro fluido extracelular a la
clula blanco (clula receptora);
3) En la clula blanco o clula receptora, el mensajero qumico se une a un receptor (de
membrana o intracelular);
4) La unin del mensajero qumico a su receptor desencadena una respuesta que puede ser el
cambio en alguna funcin, en el metabolismo o en el desarrollo en la clula receptora;
5) La seal cesa y la respuesta termina

Qu tipos de comunicacin entre clulas existen?
La comunicacin puede establecerse entre clulas a travs diversas modalidades. Se
denomina comunicacin autcrina cuando la clula receptora es del mismo tipo que la emisora;
comunicacin parcrina si son clulas diferentes o juxtcrina si la molcula seal no se separa de la
clula emisora


Las clulas tambin pueden comunicarse an cuando se encuentren a distancias considerables,
lo que se denomina comunicacin endcrina y est mediada por hormonas. La comunicacin
nerviosa es un tipo especial de comunicacin entre clulas, dado que en este caso la clula emisora
extiende prolongaciones hacia las clulas receptoras y libera una molcula seal (neurotransmisor)
en la vecindad de la clula receptora (sinapsis). Se trata de un tipo particular de comunicacin
parcrina.
La velocidad de transmisin del mensaje depender del tipo de comunicacin utilizada y
obviamente, la comunicacin entre clulas vecinas es ms rpida que entre clulas alejadas. La
endcrina autcrina parcrina juxtcrina
transmisin de la seal desde el cuerpo de la neurona al terminal nervioso es muchsimo ms rpida
que la comunicacin hormonal.



Qu tipo de molculas participan en esa comunicacin?
La comunicacin intercelular se realiza mediante una gran variedad de molculas seal. Entre
ellas, se incluyen protenas, pptidos pequeos, aminocidos, esteroides, retinoides, derivados de
cidos grasos y gases disueltos (como el monxido de carbono y el xido ntrico).

Cmo se produce la liberacin de la molcula seal en la clula emisora?
Dependiendo de su naturaleza qumica, las molculas seal pueden abandonar la clula
emisora difundiendo a travs de la membrana plasmtica o por exocitosis, o quedar expuestas en la
membrana plasmtica permitiendo la interaccin con las clulas receptoras (como en algunos tipos
de respuesta inmune).

En todos los casos, la seal es informacin detectada por receptores especficos y convertida en una
respuesta celular, que siempre involucra un cambio biolgico. Esta transformacin de informacin
en un cambio biolgico, es decir la transduccin de la seal, es una propiedad universal de las
clulas vivas.

Hay tres sistemas principales de sealizacin en el organismo que utilizan mensajeros
qumicos: el sistema nervioso, el sistema endcrino y el sistema inmune.
El sistema nervioso secreta dos tipos de mensajeros: pequeas molculas neurotransmisoras,
y neuropptidos. En el primer grupo se encuentran molculas nitrogenadas que pueden ser
aminocidos o derivados de aminocidos (por ej. acetilcolina y -aminoburitato (GABA)). Los
neuropptidos son pptidos pequeos secretados por las neuronas en las sinapsis o transportados en
la sangre como neurohormonas.
Los mensajeros del sistema endcrino se denominan hormonas y son aquellos compuestos
secretados por clulas endcrinas que se transportan por sangre hacia clulas blanco. Clsicamente se
divide a las hormonas de acuerdo a su estructura en las siguientes categoras: hormonas
polipeptdicas (como la insulina), catecolaminas (como la adrenalina), hormonas esteroideas (que
derivan del colesterol) y hormonas tiroideas (que derivan de la tirosina). Muchas de estas hormonas
tambin pueden actuar en forma autcrina o parcrina. Compuestos como los retinoides (derivados
de la vitamina A) y la vitamina D (derivada del colesterol) actan como hormonas pero no son
sintetizados en clulas endcrinas.
En el sistema inmune, los mensajeros qumicos se denominan citoquinas y son protenas
pequeas que regulan un conjunto de respuestas destinadas a eliminar patgenos invasores. Los
diferentes tipos de citoquinas (interleuquinas, factores de necrosis tumoral, interferones y factores
estimulantes de colonias) son sintetizados en clulas del sistema inmune y generalmente actan sobre
otras clulas del sistema inmune induciendo la expresin de protenas involucradas en la respuesta
inmune.
Neurona presinptica
neurotransmisor receptor
neurona postsinptica
Los eicosanoides que derivan del cido araquidnico (como prostaglandinas, tromboxanos y
leucotrienos) controlan diversas funciones, como la respuesta a la injuria. Estos compuestos son
producidos por casi todas las clulas del organismo y actan en forma autcrina o parcrina. Por ej.
las clulas del endotelio vascular secretan prostaciclina que acta sobre las clulas del msculo liso
vascular, produciendo vasodilatacin.
Los factores de crecimiento son polipptidos que estimulan la proliferacin celular. Por ej.
las plaquetas que se encuentran en el sitio de injuria en un vaso producen PDGF (factor de
crecimiento derivado de plaquetas) que estimula la proliferacin de las clulas del msculo liso que
eventualmente forman una placa que cubre el sitio daado.


EL RECONOCIMIENTO DE LA SEAL EXTRACELULAR POR LA CLULA
RECEPTORA

Por qu una molcula seal interacta con un tipo de clulas en particular y no con otro? Pueden
diferentes molculas seal transmitir su mensaje a la misma clula receptora? Qu ocurre con la
molcula seal luego de la recepcin del mensaje? Estas son algunas de las preguntas que vamos a ir
respondiendo a continuacin...

Interaccin de la molcula seal con la clula receptora

Las clulas blanco detectan a la molcula seal a travs de receptores que son
macromolculas de naturaleza proteica localizadas en la membrana plasmtica (para aquellas seales
que no pueden atravesarla) o en el interior celular (para las que s lo hacen). La unin del receptor a
la molcula seal (que tambin se denomina ligando) se produce mediante uniones qumicas dbiles
(no covalentes) y es transitoria. Esta interaccin inicia un camino de sealizacin intracelular que
lleva a la ejecucin de una respuesta biolgica. La respuesta de una clula a la molcula seal
est supeditada a la presencia de un receptor especfico para ese ligando y provoca cambios en
la clula receptora que pueden ser rpidos (como variaciones en la concentracin de iones) o ms
lentos (como cambios en los niveles de expresin de genes).
En trminos generales, la afinidad de los receptores por sus ligandos especficos es mayor
para las hormonas (que llegan a la clula blanco diluidas en la sangre) que para los
neurotransmisores (que se liberan en altas concentraciones en la sinapsis).

Dnde estn ubicados los receptores en la clula blanco?

1. Receptores intracelulares
Cuando un ligando es hidrofbico, puede difundir a travs de la membrana plasmtica e
interactuar con un receptor intracelular produciendo su activacin. El complejo ligando-receptor se
une al ADN y acta como factor de transcripcin que regula la expresin de genes especficos. ste
es el caso de los receptores de hormonas esteroideas, como los glucocorticoides (que regulan la
respuesta al estrs), los mineralocorticoides (que controlan el equilibrio hidrosalino) y las hormonas
sexuales (como la progesterona, los estrgenos y los andrgenos), del receptor de vitamina D y de
los receptores de hormonas tiroideas y cido retinoico. Dado que estos compuestos son insolubles en
agua, se transportan por la sangre unidos a albmina o a protenas transportadoras especficas.
Los receptores para estas hormonas tienen una estructura similar y pertenecen a la
superfamilia de receptores para hormonas esteroideas y tiroideas. Todos presentan un dominio (una
unidad modular de una protena que lleva a cabo una determinada funcin) a travs del cual se unen
al ADN, otro dominio que reconoce al ligando y otro/s dominio/s mediante los que interactan con
otras protenas (por ej. coactivadores).
Algunos receptores intracelulares se encuentran en el citoplasma unidos a protenas
denominadas chaperonas, que los mantienen en una conformacin inactiva pero con la capacidad de
interactuar con el ligando. ste es el caso de los receptores de glucocorticoides y
mineralocorticoides. Luego de la unin de la hormona, el receptor sufre un cambio conformacional,
el complejo se desprende de las chaperonas, se transloca al ncleo, y se asocia con otro complejo
similar formando un dmero. Estos dmeros son los que interactan con las secuencias especficas del
ADN (elementos de respuesta a hormonas).
La mayora de los receptores intracelulares se encuentra principalmente en el ncleo y
algunos, como los receptores de hormonas tiroideas o de retinoides se encuentran unidos al ADN,
an en ausencia del ligando. Sin embargo, no presentan actividad tanscripcional y estn unidos a
protenas inhibitorias. Los cambios conformacionales producidos como consecuencia de la unin de
la hormona, modifican su actividad y su capacidad de asociarse y disociarse del ADN.
Una vez que los complejos dimricos se unen a secuencias especficas del ADN, reclutan a
otras protenas llamadas coactivadores, que facilitan el acceso de la ARN polimerasa II, responsable
de la transcripcin del gen. A pesar de que muchas clulas tienen los mismos receptores
intracelulares, la combinacin adecuada de protenas coactivadoras y complejos ligando-receptor es
la que determina que en cada clula se activen determinados genes y no otros.


2. Receptores de membrana
Los mensajeros qumicos hidrosolubles se unen a receptores localizados en la membrana
plasmtica. Todos estos receptores tienen caractersticas comunes: un dominio extracelular al que se
une el ligando, uno o ms dominios que atraviesan la membrana plasmtica y un dominio intracelular
que inicia la transduccin de la seal. La activacin de estos receptores puede producir dos tipos de
efectos:

1) rpidos (cambios en la permeabilidad a iones y activacion/inhibicin de enzimas);
2) lentos (cambios en la velocidad de expresin gnica).
Una misma va puede producir ambos tipos de efectos.

2.a. Receptores de membrana asociados a canales inicos
Un tipo particular de receptores de membrana son los receptores ionotrpicos que forman
parte de canales inicos y estn involucrados en la sealizacin entre clulas elctricamente
excitables. La unin de ligandos a estas protenas con mltiples dominios transmembrana, produce la
apertura o cierre de un canal, permitiendo el pasaje de iones a travs de la membrana en forma
transitoria. En ausencia de estmulo, los canales inicos se abren y cierran con baja frecuencia,
permitiendo el pasaje de determinados iones. La unin del ligando a su receptor produce cambios en
la estructura del canal que cambian su frecuencia de apertura, alterando transitoriamente el potencial
elctrico de la membrana. Esta variacin del potencial elctrico desencadena la respuesta biolgica.
En la membrana plasmtica existen canales selectivos para iones, como Cl
-
, Na
+
, K
+
y Ca
2+
.
Los receptores asociados a canales inicos estn involucrados en el control de la contraccin
muscular y en la transferencia de informacin nerviosa.
Un ejemplo de receptor con funcin de canal inico (particularmente de Na
+
) es el receptor
de acetilcolina denominado receptor nicotnico por su gran afinidad para la nicotina. Las subunidades
de este receptor atraviesan completamente la membrana plasmtica y se asocian formando una flor
cuyo interior hidroflico constituye el canal propiamente dicho. La unin de acetilcolina aumenta la
frecuencia de apertura del canal, permitiendo una mayor entrada de iones Na
+
al interior celular. La
entrada de especies cargadas positivamente produce la despolarizacin de la membrana de la clula
receptora.



2.b. Receptores de membrana asociados a enzimas

Otro tipo de receptores de membrana son aquellos asociados a enzimas, que existen en distintas
modalidades:

Receptores con actividad enzimtica intrnseca: Son aquellos que al activarse por la unin
del ligando funcionan directamente como enzimas.

Receptores que activan enzimas citoplasmticas: Son los que luego de la unin del ligando,
interactan con enzimas a las que activan del lado interno de la membrana plasmtica.


Protenas intracelulares
con actividad enzimtica

Todos estos receptores son protenas que atraviesan una sola vez la membrana plasmtica.
Presentan un sitio extracelular para la unin del ligando y un dominio con actividad cataltica o el
sitio de unin para enzimas del lado citoplasmtico. La actividad enzimtica asociada a la gran
mayora de estos receptores es de protena quinasa (es decir, catalizan la fosforilacin de un
determinado sustrato), aunque tambin existen receptores que presentan otras actividades
enzimticas, como la de guanilato ciclasa, por ejemplo.

Las protenas quinasas catalizan la transferencia de grupos fosfato del ATP a grupos hidroxilo de
las cadenas laterales de tirosina, serina o treonina de protenas (formando enlaces fosfoster). La
fosforilacin de protenas provoca cambios en su conformacin que influyen directamente sobre su
actividad.

Cmo es la transmisin de la seal en los receptores asociados a protenas quinasas?
La caracterstica comn de estos receptores es que su dominio intracelular (o una protena
asociada a l) es una protena quinasa que se activa cuando el ligando se une al dominio extracelular
del receptor. Luego de la unin del ligando se produce la asociacin de varios complejos ligando-
receptor en la membrana. Esta oligomerizacin acerca los dominios catalticos de los receptores y
permite la fosforilacin recproca en residuos de tirosina (para los receptores con actividad de
tirosina quinasa) o de serina/treonina (para los receptores con actividad de serina/treonina quinasa)
del propio receptor o de protenas asociadas. El mecanismo de autofosforilacin de los receptores,
por un lado incrementa su actividad de quinasa y por otro, permite la unin de molculas de
sealizacin citoslicas. Es decir, recluta molculas que se unen especficamente a los dominios
intracelulares de los receptores slo cuando estn fosforilados, y que transmiten el mensaje al interior
celular. El mensaje se propaga a travs de protenas transductoras de la seal que se unen al complejo
ligando-receptor activado (fosforilado).
En la actualidad se conocen ms de 50 miembros de la familia de receptores con actividad de
tirosina quinasa, entre los que se encuentran los receptores de factores de crecimiento (epidrmico:
EGF-R, de fibroblastos: FGF-R y derivado de plaquetas: PDGF-R), que estn vinculados con el
control de la proliferacin celular.
Veamos un ejemplo:
La unin del EGF a su receptor produce su dimerizacin y su autofosforilacin. Los sitios
fosfotirosina del receptor son sitios de unin para protenas transductoras de la seal. Estas protenas
presentan un dominio con una estructura tridimensional especfica (conocido como dominio SH2)
que reconocen a esos sitios fosfotirosina del receptor. La protena Grb2 mediante un dominio SH2,
se une a las fosfotirosinas del receptor de EGF. La unin al receptor produce un cambio
conformacional en Grb2 que desencadenar una serie de eventos que provoca la activacin de una
protena G pequea (denominada Ras) y de la va de MAP quinasas, como veremos ms adelante.
Receptores con
actividad enzimtica
intrnseca
Receptores asociados
a protenas con
actividad enzimtica



El receptor de insulina tambin pertenece a esta familia, pero a diferencia de otros miembros
de la familia, este receptor existe en la membrana como un dmero preformado. Luego de la unin de
la hormona, los dominios con actividad de tirosina quinasa del receptor se autofosforilan y tambin
fosforilan a la protena IRS (sustrato del receptor de insulina) en mltiples sitios. La protena IRS
fosforilada presenta sitios de unin para protenas con dominios SH2 (como Grb2) produciendo
tambin la activacin de Ras y de la va de MAP quinasas. En otros sitios fosfotirosina de IRS se
unen y se activan enzimas como la fosfatidilinositol 3 quinasa (PI3 quinasa) y la fosfolipasa C
(PLC). Otras protenas se anclan directamente en fosfotirosinas del receptor de insulina. Cada una
de estas protenas es intermediaria en la transmisin del mensaje al interior celular. Por ejemplo, la
activacin de la PI3 quinasa provoca la activacin de la protena quinasa B, una serina-treonina
quinasa que media muchos de los efectos de la insulina por un mecanismo que veremos en detalle
cuando analicemos la regulacin del metabolismo.


Entre los receptores con actividad de serina/treonina quinasa se encuentra el receptor del
factor de crecimiento tumoral (TGF-) que tambin activa factores de transcripcin.
Otros receptores presentan actividad de guanilato ciclasa (cataliza la sntesis de GMPc) que
se activa luego de la unin del ligando. El pptido natriurtico atrial (ANP) se une a un receptor de
este tipo en el msculo cardaco, estimula la secrecin renal de Na
+
y agua, induce la relajacin del
msculo vascular liso y disminuye la presin sangunea.


Receptores que activan enzimas citoplasmticas
En el grupo de receptores asociados a protenas con actividad enzimtica se encuentran los
receptores de citoquinas (mensajeros del sistema inmune). Por ejemplo, el receptor de interfern est
asociado con protenas quinasas de tirosina como la quinasa JAK (por Janus activated kinase) an
en ausencia de ligando. La unin del interfern a su receptor y la oligomerizacin de los complejos
producen la activacin de las protenas quinasas asociadas. Entre otros sustratos, estas quinasas
activas catalizan la fosforilacin de los factores de transcripcin llamados STAT (signal transducers
and activators of transcription). Las protenas STAT fosforiladas forman dmeros y se translocan al
ncleo donde se unen a secuencias especficas del ADN, modulando la transcripcin de
determinados genes.



















Receptores asociados a protenas G heterotrimricas
Estos receptores pertenecen a la familia de los denominados receptores de siete dominios
transmembrana (7TMS) que estn constituidos por un nico polipptido que atraviesa siete veces la
membrana plasmtica. Luego de la unin del ligando, este grupo de receptores activa
indirectamente (a travs de protenas adaptadoras) a otras protenas de la membrana, que pueden
ser enzimas (que sintetizan mediadores intracelulares), o canales inicos. Las protenas adaptadoras
que participan de este mecanismo son las protenas heterotrimricas de unin a GTP llamadas
protenas G. El ligando interacta con el extremo amino de la protena receptora mientras que el
extremo carboxilo que es intracelular, interacta con una protena G.














Una gran cantidad de molculas interacta con este tipo de receptores. Entre ellas se cuentan
protenas, pptidos pequeos y derivados de aminocidos y de cidos grasos. Pertenecen a este
grupo, el receptor -adrenrgico (cuyo ligando es la adrenalina) y el receptor de glucagon, as como
los de las hormonas hipofisarias adrenocorticotrofina (ACTH, que estimula la liberacin de
glucocorticoides), hormona luteinizante (LH, que estimula la liberacin de progesterona y la
consecuente formacin del cuerpo lteo), hormona folculo estimulante (FSH, que estimula la
maduracin del folculo ovrico al inducir la sntesis de estradiol) y el de la angiotensina II (que
estimula la sntesis y liberacin de aldosterona).

Desensibilizacin de los receptores
La exposicin prolongada de un receptor a su ligando puede promover una disminucin de la
respuesta de la clula al estmulo. La unin del ligando al receptor puede inducir su endocitosis y
posterior degradacin lisosomal, con la consecuente disminucin del nmero de receptores en la
membrana (down regulation). En otros casos, los receptores pueden desensibilizarse por un
mecanismo de fosforilacin posterior a la activacin del receptor.

Cmo se transmite la informacin de los receptores de membrana al interior celular?
La informacin que llega a los receptores acoplados a protenas G o a enzimas se transfiere al
interior de la clula mediante molculas de sealizacin pequeas (segundos mensajeros) y/o grandes
(protenas de sealizacin).
Un grupo de estas protenas de sealizacin son las protenas G, que unen GTP y cambian de
un estado inactivo (con GDP unido) a un estado activo (con GTP unido). Estas protenas poseen
actividad de GTPasa, por lo que se inactivan rpidamente luego de transmitida la seal. Existen dos
grupos de protenas de unin al GTP: las heterotrimricas (que transmiten la seal de los receptores
asociados a protenas G) y las monomricas (protenas G pequeas).

Cmo actan las protenas G heterotrimricas?
Las protenas G heterotrimricas (tres subunidades: , y ) interactan con el dominio
citoplasmtico de los receptores de membrana. En condiciones basales, la subunidad de la protena
G lleva GDP unido y es inactiva. La interaccin con el complejo ligando-receptor produce el
intercambio de GDP por GTP. El cambio conformacional ocasionado induce la disociacin del
trmero en dos componentes, la subunidad y el complejo . La subunidad puede interactuar con
otras protenas. El complejo no cambia su conformacin pero la zona que antes estaba
enmascarada por la subunidad queda libre lo que le permite interactuar con otras protenas. La
separacin del heterotrmero es transitoria porque la subunidad posee actividad de GTPasa
intrnseca y una vez que esto ocurre, se reasocian las subunidades y se reconstituye la protena G
inactiva.






Las protenas G se clasifican de acuerdo al grupo de protenas con las que interactan y al
efecto que producen. Podemos encontrar protenas G estimulatorias (G
s
) que activan a la enzima
adenilato ciclasa (cataliza la sntesis de AMPc a partir de ATP); protenas G inhibitorias (G
i
), que
inhiben la actividad de adenilato ciclasa; protenas G
q,
que activan fosfolipasas (catalizan la hidrlisis
de fosfolpidos de membrana) y protena G
t
o transducina (que activan una fosfodiesterasa).
Cualquier compuesto que bloquee la funcin de la subunidad puede afectar la
transduccin de la seal. Por ejemplo, la toxina producida por la bacteria Vibrio cholerae inhibe la
actividad GTPasa de la subunidad
s.
De esa forma, an en ausencia de seal, la adenilato ciclasa se
encuentra activada y produce AMPc en forma continua.
En las clulas del intestino, esto produce prdida de agua y cloruro que es caracterstica de
esta infeccin bacteriana (Enfermedad del Clera). Otro ejemplo es la toxina producida por la
bacteria Bordetella pertussis que causa la tos convulsa.
Esta toxina modifica estructuralmente a la subunidad
i
impidiendo la asociacin de la
protena G al complejo ligando-receptor y bloqueando la transduccin de esa seal. Dado que la
subunidad i permanece en su estado inactivo, unida a GDP, la adenilato ciclasa permanece activa,
manteniendo as elevados niveles de AMPc.
Ligando
Estmulo Tipos de subunidades
G
2 mensajeros Efecto
Glucagon-adrenalina-
LH-PTH-ACTH
Gs AMPc
Estimula la adenilato
ciclasa
Vasopresina,
TSH,
angiotensina
Gq IP3, DAG Activa la fosfolipasa C
Adrenalina, acetilcolina,
dopamina, serotonina
G
i

AMPc
(disminucin)
Inhibe a la adenilato
ciclasa
Luz
G
t


GMPc
(disminucin)
Activa la fosfodiesterasa
.

Qu son los segundos mensajeros?
Se denomina segundos mensajeros (cul es el primer mensajero?) a las molculas pequeas
de sealizacin intracelular. Los segundos mensajeros se generan rpidamente en respuesta a la
activacin de un receptor de membrana y transmiten la seal al interior celular donde interactan con
protenas. La activacin de una enzima que cataliza la sntesis de un segundo mensajero, generar
grandes cantidades de este mensajero, lo que permite amplificar notablemente la respuesta.

Qu tipos de segundos mensajeros existen?
Nucletidos cclicos
El primer segundo mensajero identificado como tal, fue el nucletido adenosina monofosfato
cclico (AMPc), una molcula soluble y resistente al calor, cuya sntesis es catalizada por la
adenilato ciclasa y su degradacin por una fosfodiesterasa.


Los niveles del nucletido disminuyen al ser transformado en un metabolito inactivo, el 5-
AMP por una fosfodiesterasa, cerrando as el ciclo de sealizacin. La estimulacin de determinados
receptores produce un incremento transitorio de ms de 20 veces en los niveles de AMPc, en unos
pocos segundos.
La adenilato ciclasa es una protena integral de la membrana plasmtica que se activa por la
subunidad
s
de la protena Gs y se inhibe por la subunidad
i
de la protena Gi.
La mayor parte de las vas de sealizacin en las que participa el AMPc involucran tambin a la
protena quinasa A (PKA), que es una quinasa de serina/treonina. La holoenzima consta de dos
subunidades regulatorias y dos subunidades catalticas. En el estado basal, las subunidades
regulatorias bloquean el sitio cataltico y la enzima es inactiva. La unin de dos molculas de AMPc
a cada una de las subunidades regulatorias produce un cambio conformacional que provoca la
liberacin de las subunidades catalticas, que pueden fosforilar a sus sustratos.



R
2
C
2
+ 4 AMPc 2 C + R
2
(AMPc)
4


Los sustratos de la PKA incluyen enzimas clave de vas metablicas como la glucgeno
sintetasa y la piruvato quinasa, as como canales inicos. La fosforilacin de enzimas es un ejemplo
de regulacin rpida del metabolismo, ya que esta modificacin covalente produce un cambio
conformacional en las protenas que afecta su actividad.
La activacin de la PKA tambin tiene efectos a largo plazo, dado que induce la transcripcin
de genes especficos. En este caso, la PKA cataliza la fosforilacin del factor de transcripcin CREB
(cAMP response element binding protein) que se dimeriza e interacta con el ADN en una
secuencia especfica llamada CRE (cAMP response element) que est presente en los promotores de
ciertos genes. Sin embargo, la fosforilacin de CREB no es suficiente para que se produzca la
activacin de la transcripcin. Para ello, otras protenas (coactivadoras) que remodelan la estructura
de la cromatina deben unirse a CREB, permitiendo la unin de la ARN polimerasa II al promotor.


Otro nucletido cclico con funcin de segundo mensajero es el GMPc que es sintetizado por
la enzima guanilato ciclasa a partir de GTP. Los niveles de GMPc tambin son regulados por
fosfodiesterasas que catalizan su transformacin en un metabolito inactivo, el 5-GMP. Existen
fosfodiesterasas especficas para AMPc, para GMPc y otras que hidrolizan ambos nucletidos.



El GMPc activa una protena quinasa denominada protena quinasa G (PKG), que es muy
similar a la PKA salvo que sus regiones regulatorias y catalticas forman parte del mismo
polipptido.


El aumento de los niveles de protenas fosforiladas (enzimas o canales) es un evento transitorio, dado
que existen protenas fosfatasas que catalizan la remocin de los grupos fosfato y permiten retornar a
la situacin original (estado no fosforilado) una vez transmitida la seal. Muchas de estas fosfatasas
se regulan por mecanismos similares a los descriptos.

Ion calcio
El in calcio (Ca
2+
) participa como segundo mensajero en diversos procesos biolgicos,
como la contraccin muscular, la liberacin de neurotransmisores, la endocitosis y exocitosis y la
regulacin del metabolismo. Un estmulo puede inducir un incremento transitorio en los niveles
citoplasmticos de Ca
2+
desde aproximadamente 10
-8
M a concentraciones mayores a 10
-6
M, (es
decir un aumento de 100 veces en la concentracin de Ca
2+
). Este aumento puede deberse a la
apertura de canales de la membrana plasmtica, lo que permite la entrada del in desde el medio
extracelular o bien a la liberacin de Ca
2+
desde depsitos intracelulares como los del retculo
endoplsmico. El calcio llega al citoplasma celular a travs de canales, cuya apertura puede depender
de la unin de un ligando (como es el caso de los receptores acoplados a canales inicos) o de
cambios en el potencial de membrana (canales operados por voltaje). Los canales de Ca
2+
del retculo
endoplsmico son activados por inositol trifosfato (IP
3
), producto de la reaccin catalizada por la
fosfolipasa C, como veremos ms adelante.



Cmo puede un aumento de la concentracin de calcio en el citosol activar vas de
sealizacin?
Para poder transmitir el mensaje, el calcio debe unirse y modificar protenas
especficas. Sin embargo, no todas las protenas que pueden unir calcio participan de la transduccin
de seales. Las protenas involucradas en la transduccin deben poder sensar los cambios
localizados y temporarios producidos en la concentracin del in. Entre las protenas que cumplen
esta funcin se encuentra la calmodulina. Si bien la calmodulina no tiene actividad enzimtica, el
complejo Ca
2+
-calmodulina es capaz de regular la actividad de ms de 100 enzimas diferentes.
La calmodulina funciona como un receptor intracelular de calcio que une cuatro iones calcio
por molcula. La unin del Ca
2+
modifica la conformacin de la calmodulina y le permite la
interaccin con otras protenas. La calmodulina puede interactuar con la adenilato ciclasa, la xido
ntrico sintasa, protenas del citoesqueleto, y protenas quinasas como la fosforilasa quinasa
(metabolismo de glucgeno), la quinasa de la cadena liviana de miosina (contraccin muscular) y
quinasas multifuncionales llamadas quinasas dependientes de Ca
2+
-calmodulina (CAMK).
Cuando los niveles de calcio citoslicos son bajos, la CAMK no tiene actividad enzimtica porque
una zona autoinhibitoria de la enzima bloquea el acceso del sustrato al sitio cataltico. Cuando los
niveles de calcio aumentan, el complejo Ca
2+
-calmodulina se une a la enzima desbloqueando el sitio
cataltico. La unin de Ca
2+
-calmodulina a la enzima permite su autofosforilacin, lo que incrementa
an ms su actividad de quinasa. Entre las protenas que son sustrato de CAMK II se encuentra el
factor de transcripcin CREB descripto anteriormente.





Lpidos
Otro grupo de segundos mensajeros son producidos a partir de fosfolpidos de la membrana
plasmtica. En particular, la ruptura del fosfatidil inositol difosfato permite la liberacin de inositol
trifosfato (IP3) y de diacilglicerol (DAG). La enzima que cataliza la escisin del fosfolpido se
denomina fosfolipasa C.



Algunas isoformas de la fosfolipasa C pueden activarse por protenas Gq y otras por
receptores con actividad de tirosina quinasa.
La liberacin de IP3 y DAG provoca la activacin del siguiente eslabn de la cadena de
sealizacin: la protena quinasa C (PKC), una quinasa de serina/treonina que participa en la
proliferacin celular. Esta enzima consta de un nico polipptido con dos regiones, la cataltica y la
regulatoria, que une DAG, lpidos de membrana y Ca
2+
. En estado inactivo, la regin cataltica se
encuentra bloqueada por una regin llamada pseudo-sustrato. Como ya vimos, el IP3 permite la
liberacin de Ca
2+
desde los depsitos intracelulares al citosol. El Ca
2+
se une directamente a la PKC,
que a su vez se ancla a la membrana plasmtica al unirse al DAG. Esta interaccin aumenta la
afinidad de la PKC por el fosfolpido fosfatidilserina. La PKC unida a la membrana plasmtica,
cambia su conformacin y se desbloquea la regin cataltica al separarse de la regin de
pseudosustrato.


Todas las protenas G son heterotrimricas?
Existe un grupo de protenas G que unen nucletidos de guanina, presentan actividad de
GTPasa, pero son monomricas y pequeas (aprox 21 kDa). En este grupo de protenas G pequeas
se encuentran: Ras, que est involucrada en el control de procesos de proliferacin y diferenciacin
celular, y otras como Rho, Rab y Ran. La desregulacin de estas protenas G est involucrada en una
gran variedad de enfermedades humanas como el cncer o la infeccin por patgenos.

Al igual que las protenas G heterotrimricas, las protenas G pequeas se activan al
intercambiar GDP por GTP, lo que slo ocurre mediante la interaccin con factores
intercambiadores de nucletidos de guanina (GEFs) que se unen por un lado al complejo ligando-
receptor y por el otro a la protena G pequea. Para que ocurra la hidrlisis del GTP a una velocidad
apreciable se requiere la participacin de activadores de GTPasa. De esta forma se retorna a la
situacin inicial.
La protena Ras transmite la seal al interior celular a travs de la activacin de una cascada
de protenas quinasas (MAPKs).







GEF
Protenas nucleares y citoplasmticas
Membrana plasmtica
Factor de crecimiento
Otros tipos de transmisin del mensaje

Activacin de cascadas de quinasas
Como vimos desde el inicio de esta clase, muchas vas de sealizacin involucran la
fosforilacin y desfosforilacin como forma de regulacin de la actividad de protenas (enzimas o
no). O sea, la mayora de los mensajes que se transmiten al interior celular producen cambios en la
actividad de protenas quinasas. Estas quinasas son activadas por segundos mensajeros (como vimos
en el caso de PKA, PKG, PKC y CAMK II) o bien por fosforilacin mediante una cascada de
activacin de quinasas. Un ejemplo de este ltimo mecanismo son las quinasas activadas por
mitgenos (MAPKs), que pueden ser activadas por fosforilacin dual en residuos de serina/treonina
y de tirosina. Se han descripto hasta el momento tres familias de MAPKs: la familia ERK
(extracelullar signal regulated protein kinase) que media efectos mitognicos y seales de
diferenciacin y las familias de JNK (Jun kinase) y de p38 quinasa, que estn asociadas con las
respuestas celulares al estrs y a citoquinas inflamatorias. En estado de reposo, las MAPKs se
encuentran en el citoplasma, pero ante un estmulo adecuado se fosforilan y se translocan al ncleo.
Los sustratos efectores de las MAPKs son generalmente factores de transcripcin, como el factor
AP-1.



Activacin de quinasas de lpidos
La enzima fosfatidil inositol 3-quinasa (PI-3 quinasa) es activada por receptores con actividad
de tirosina quinasa y por otros receptores de membrana incluyendo algunos asociados a protenas G.
A diferencia de las protenas quinasas, esta enzima fosforila al fosfolpido de membrana fosfatidil
inositol. Este fosfolpido sirve de punto de anclaje para la protena quinasa B (PKB) que es a su vez
fosforilada y en esa forma es activada y liberada de la membrana plasmtica. La PKB, entre otros
efectos, promueve la supervivencia celular a travs de la fosforilacin e inactivacin de protenas
involucradas en la muerte celular programada o apoptosis.


Interaccin entre las distintas vas de sealizacin

Puede una determinada molcula seal regular la respuesta biolgica de una clula a
travs de ms de un camino de transduccin de la seal?
Si bien a lo largo de esta clase hemos analizado las principales vas de transduccin de seales
como si fueran cadenas lineales a travs de las cuales fluye la informacin desde el exterior al
interior celular, existen puntos potenciales de interseccin entre los distintos eslabones de la cadena,
que permiten que se establezca un dilogo cruzado entre dos o ms vas de transduccin de seales.
Cada clula tiene distintos tipos de receptores y est constantemente recibiendo seales en
forma simultnea, de esta manera, la respuesta celular est conformada por la sumatoria de la
activacin de ms de un camino de sealizacin. Adems, la activacin de un mismo receptor puede
activar diferentes vas de sealizacin. Un ejemplo de ello es el factor de crecimiento de fibroblastos,
que al interactuar con su receptor activa la va de tirosina quinasas, la va de STAT y una tercera va
que involucra el metabolismo de lpidos y aumenta los niveles de calcio intracelular.
Si bien an no es claro como una clula individual produce una respuesta especfica a tantas
seales extracelulares diferentes, una estrategia posible es el uso de protenas de armazn alrededor
de las que se organizan los grupos de protenas que participan en la transmisin de la seal. Esta
organizacin incrementa la precisin, velocidad y eficiencia de la comunicacin. En algunos casos,
estos complejos son transitorios y se desarman luego de cumplir una funcin.

Cmo se termina la transmisin de la seal?
Algunas seales como las que modifican las respuestas metablicas o las que tansmiten
impulsos nerviosos, necesitan apagarse rpidamente cuando no se produce ms hormona. Otras
seales, como las que estimulan la proliferacin se apagan ms lentamente. De hecho, las seales que
regulan la diferenciacin pueden persistir indefinidamente. Muchas enfermedades crnicas son
causadas por una falla en la terminacin de una respuesta en el momento adecuado.
El primer nivel de terminacin es el mensajero qumico. Cuando la clula que lo produce ya
no es estimulada, el mensajero no se produce y el que existe se degrada. Por ejemplo, hormonas
polipeptdicas como la insulina, son captadas por el hgado y degradadas. Otro ejemplo es la
degradacin de acetilcolina por la acetilcolinesterasa.
Dentro de cada va de transduccin de seales, la seal puede apagarse en sitios
determinados. El receptor se puede desensibilizar, y las protenas G, monomricas o heterotrimricas
terminan su funcin cuando hidrolizan el GTP. La terminacin tambin se logra por la degradacin
de los segundos mensajeros. Otra forma de interrumpir el mensaje es mediante la activacin de
fosfatasas de protenas, que puede ser especficas para tirosina o serina/treonina.

Patologas asociadas a defectos en vas de sealizacin
Como hemos visto, las respuestas biolgicas tienen un alto grado de complejidad y es por ello
que alteraciones en distintas etapas de la misma pueden producir la muerte de la clula, su
proliferacin o su transformacin de un fenotipo normal a uno canceroso.
Se han identificado mutaciones en una gran cantidad de protenas involucradas en distintos
caminos de sealizacin. En muchos tumores mamarios se han encontrado mutaciones en la protena
Ras, relacionadas con un dficit en su actividad GTPasa. En ese caso, la protena Ras permance en
forma activa y contina estimulando el crecimiento celular.