OBTENCION DE BIOPROTEINA A PARTIR DE BAGAZO DE NARANJA (Ci-
trus sinensis) CON Aspergillus niger AUTORES: Zulema Bustamante, Estela Galindo, Miriam Huanca y Ftima Ballesteros. Programa Frmacos, Alimentos y Cosmticos, (PROFAC), Facultad de Bioqu- mica y Farmacia, Universidad Mayor de San Simn. Email: z.bustamante@bio.umss.edu.bo INTRODUCCION En las diferentes industrias frutales y como productos domsticos, se tiene una gran cantidad de residuos de frutas, que no tienen ninguna utilidad y son dese- chos que se encuentran en los basurales, siguiendo un proceso normal de des- composicin. Ante esta situacin la biotecnologa ha desarrollado una serie de procedimien- tos que permiten realizar un tratamiento biolgico a los desechos de frutas, con microorganismos adecuados, con el fin de producir la denominada bioprotena o enriquecer los alimentos, incrementando el nivel de protena con los mismos. Se entiende por bioprotena o protena unicelular a los microorganismos tales como bacterias, levaduras, algas u hongos filamentosos que son utilizados co- mo alimentos de alto valor proteco, como complemento en la alimentacin de aves, cerdos y otros animales (Jagnoww y Dawis, 1991) En base a estos antecedentes, en el presente trabajo se utiliz por su composi- cin qumica y el bajo pH, el bagazo de la naranja (Citrus sinensis) (Caceres, 1996), de la regin del Chapare, como sustrato para el crecimiento de Aspergi- llus niger, hongo filamentoso rico en aminocidos como la Isoleucina, Fenilala- nina, Leucina, Tirosina, Cisteina, Treonina, Valina, Triptfano y Lisina. (Servicio de Normas Alimentarias y Bromatologa,FAO) MATERIALES Y METODOS La materia prima utilizada fue el residuo que qued despues de la expresin del jugo, en la misma se realizaron los anlisis previos, encontrando un por- centaje de 78,1% de humedad, ceniza total 3,485%; fibra total 13,37%; nitr- geno total 0,817, nitrgeno amoniacal 0,104 y nitrgeno orgnico 0,713%, protena total 4,45%, el pH inicial fue de 4,3. La materia seca se determin por desecacin de la muestra a 105 C, la ceni- za por calcinacin, la fibra cruda por digestin cida y alcalina, el pH se midi en una suspencin de 1:1 en agua destilada, el nitrgeno total por el mtodo microkjeldahl (A.O.A.C, 1975) y el nitrgeno mineral por el mtodo del xido de magnesio (A.O.A.C, 1975)
El material vegetal fue desamargado en agua de sal, triturado y tratado previa- mente, agregando nutrientes: 60 gramos de nitrato amnico, 4 gramos de fos- fato potsico y 4 gramos de sulfato de magnesio por kilogramo de materia se- ca (Lequerica, 1980, Hernandez, 1975). El inculo fue preparado utilizando Aspegillus niger desarrollado en un medio lquido de dextrosa sabouraud, incubando a 28C, por 48 horas. Se utiliz pa- ra la inoculacin una cantidad de 20 ml de la suspencin por cada kilogramo de materia seca. La materia prima ms el inculo de Aspergillus niger, fue colocada en bande- jas de plstico, rociando diariamente con aproximadamente 20 ml de agua por bandeja, para mantener una alta humedad y removiendo la mezcla. Los anli- sis de determinacin de nitrgeno total y nitrgeno amoniacal, se realizaron ca- da 7 das durante 28 das, para conocer el incremento o el descenso de los mismos. As mismo se midi el pH cada 2 das. RESULTADOS Los resultados del incremento de nitrgeno orgnico y el descenso del nitrge- no amoniacal se encuentran en el cuadro 1. CUADRO 1. CONCENTRACIN DE NITROGENO Y PROTEINA DEL BAGAZO DE NARANJA CON Aspergillus niger DIA N total % N amoniacal % N orgnico % Protena to- tal % 1 0.817 0,104 0.713 4.450 7 2.740 1.560 1.180 7.375 14 3.560 1.510 2.050 12.810 21 3,740 1.250 2.490 15.560 28 3.940 1.050 2.890 18.060 Cmo se puede observar en el cuadro 1, la concentracin de nitrgeno orgni- co inicial de 0.7130 %, aument a los 7 das a 1.180, a los 14 das a 2.050%, a lo 21 das a 2.490, alcanzando a los 28 das un valor de 2,890 %. En base a estos resultados, se observa que la protena aumenta desde 4,45% hasta un 18,06, existiendo un incremento del 305% en 28 das de crecimiento del Asper- gillus niger sobre el bagazo de naranja.En el trabajo realizado por Lequerica(1980) utilizando tambin Aspergillus nger como fuente de bioprote- na logr un incremento de protena total en la materia prima de 6,7 a 20% que representa un porcentaje de incremento de 298%. As mismo analizando los resultados, el nitrgeno amoniacal disminuye de 1,56 a 1,05% en los 28 das, lo que representa la conversin del nitrgeno mi- neral en nitrgeno orgnico. Los resultados del incremento de protena son muy importantes ya que el ba- gazo de naranja enriquecido por Aspergillus niger se convierte en un alimento altamente nutritivo para el uso como alimento balanceado. Por otra parte respecto al pH, se observ que a medida que el microorganismo aumenta su masa el pH desciende de 4,3 hasta un pH de 3,5, que es el ptimo para el crecimiento del hongo, no permitiendo el crecimiento de bacterias y le- vaduras. El bagazo enriquecido con el microorganismo fue utilizado para la valoracin biolgica; en la misma se trabaj con pollos de granja, 1 grupo de referencia y otro grupo de prueba. El grupo de referencia fue alimentado con una formula- cin adecuada de acuerdo a sus requerimientos nutricionales y el grupo prue- ba fue alimentado con una formulacin que incluye la bioprotena. La mezcla para el grupo de referencia se expresa en el cuadro 2 y la mezcla para el grupo control en el cuadro 3. Cuadro N 2. FORMULACION PARA EL GRUPO DE REFERENCIA ALIMENTO CANTIDAD gramos Maz 560 Soya 300 Afrechillo 118 Hueso 24 Sal 1.0 Vitaminas 1.0 Metionina 1.3 Cuadro N 3. FORMULACION PARA EL GRUPO DE PRUEBA ALIMENTO CANTIDAD gramos Maz 410 Bioprotena 80 Soya 370 Afrechillo 118 Hueso 25 Sal 1.0 Vitaminas 1.0 Metionina 1.3 A partir del primer da los animales fueron pesados diariamente durante treinta das, los pesos del grupo de referencia y del grupo prueba se encuentran en los cuadros 4 y 5. Cuadro 4. INCREMENTO DE PESO DE LOS POLLOS EN 30 DIAS GRUPO DE REFERENCIA NUM. Peso inicial Gramos Peso en 30 das Gramos Incremento total Gramos 1 92.6 478.0 385.4 2 104.8 528.0 423.2 3 86.9 407.0 320.1 4 86.8 462.0 375.2 5 103.1 565.0 461.9
Cuadro 5. INCREMENTO DE PESO DE LOS POLLOS EN 30 DIAS GRUPO PRUEBA CON BIOPROTEINA NUME- RO Peso inicial Gramos Peso en 30 das Gramos Incremento total Gramos 1 88.8 408.0 319.2 2 96.7 419.0 322.3 3 96.4 484.5 388.1 4 95.0 538.0 443.0 5 85.9 518.0 432.1 6 89.0 468.0 379.0 Realizando un anlisis estadstico por comparacin de medias del incremento de peso entre el grupo de referencia y el grupo de prueba alimentado con bio- protena, se determin que no existe diferencia entre ambos grupos, lo cual permite concluir que el bagazo de naranja enriquecido con Aspergillus niger es un alimento que puede reemplazar a la protena del maz o la soya. Una vez concluida la prueba, los animales fueron sacrificados para observar las caractersticas macroscpicas y microscpicas de los rganos animales, no encontrando ningn signo de toxicidad. CONCLUSIONES 1. La protena inicial del bagazo de naranja se increment en 28 das de 4,45% a 18%, que representa un aumento de un 305% 2. El bagazo de naranja enriquecido con Aspergillus niger representa un ali- mento altamente nutritivo porque contiene diversos aminocidos esenciales. 3. Para un buen crecimiento del Aspergillus es necesario mantener un pH entre 4 y 5. 4. El bagzo de naranja enriquecido con Aspergillus niger, puede reemplazar a la protena proveniente de la soya o el maz, en el alimento balanceado para pollos. BIBLIOGRAFIA A.OAC. 1975. Official methods of Analysis. Ed. Wahington D.C: 47021. Pag. 927 CACERES, A. 1996. Plantas de Uso Medicinal en Guatemala. Editorial Univer- sitaria Guatemala HERNANDEZ, F.; EGORBURO, M; LEQUERICA, J.L.; MARTIN, l. Y LA FUEN- TE B. 1975. Aprovechamiento de subproductos ctricos. Enriquecimiento en protenas de pienso de corteza de naranja mediante desarrollo de levaduras. Rev. Agroqumica Tecnologa Alimentaria 1583).415-422. JAGNOW, G. Y DAWID, W. 1991. Biotecnologa. Introduccin con experimen- tos modelo. LEQUERICA, J.L.. Y LA FUENTE, B. 1977. Aprovechamiento de subproductos ctricos. Fermentacin en medio de suspencin de corteza de naranja por Can- dida utilis. Rev. Agroqumica. Tecnologa Alimentaria 17 (1) 71-77. MAGNARELLI, R.L. MARGARITU, A.I. 1975. Agroindustrias, Catlogo de Tec- nologa Intermedia. Ministerio de Economa de la Nacin. Editado por servicio de Publicaciones. Universidad Nacional del Rosario. Argentina.