DETERMINACION DE ANTOCIANINA

OBJETIVO.-

Determinar la concentración del pigmento antocianina en una fruta de

color rojo (ciruela o manzana), mediante el espectrofotómetro.

MATERIALES.-

Probeta de 100ml
Matraz Erlenmeyer de 250ml
Vaso de 250ml
Tubos de ensayo Spectronic – 20
Papel filtro
Embudo
Mortero
Matraz aforado de 100 ml

REACTIVOS.-

Solución extractora de antocianinas.- 5 partes de metanol por una de

HCL 3 N
Na2SO4 anhidro
HCL 3 N
CHOH al 80-85%
HCL 0.5 N
H2O2 al 30%

PROCEDIMIENTO.-

1.- Pesar 5grs. de manzana finamente picada en un vasote 250ml,

agregarle 25ml de solución extractora de antocianinas y dejar reposar
por 24 horas en la oscuridad.
2.- Separar la solución y depositarla en un matraz Erlenmeyer de 250ml
y la pulpa en un mortero y lavar 2 o 3 veces con más solución
extractora, hasta que la muestra quede sin pigmento.
3.- Filtrar la solución con antocianina, usando sulfato de sodio en papel
filtro, para eliminar humedad y aforar a 100ml con la solución
extractora.
4.- Tomar 2 tubos de ensayo. Al primero agregarle 6ml de solución
extractora, 6ml de HCL en metanol (una parte de HCL 0.5N y una parte
de metanol al 80-85%) y 3ml de agua oxigenada al 30%.
5.- Leer a 525nm en un espectrofotómetro, usando como blanco el
segundo tubo de ensayo el cual contiene 6ml de solución extractora,
6ml de HCL en metanol y 3ml de H2O2.
CALCULOS.-

MGS DE ANTOCIANINAS = 50 x lectura absorbancia a 535 nm

0.45 x muestra en grs

= 50 x ---------
0.45 x 5

= ¿---?----
2.25

= ??????
CUESTIONARIO.- (antocianinas)

1.- Explica que son las antocianinas

2.- Escribe las formulas químicas de los compuestos que

integran las antocianinas

3.- ¿Qué clase de frutas presentan mayor concentración de

antocianinas?
CUESTIONARIO.- (clorofila)

1.- Explica los tipos de clorofila que existen

2.- Desarrolla la formula de la clorofila

3.- ¿Qué clase de vegetales tienen mas clorofila?

CUESTIONARIO.- (taninos)

1.- ¿Qué son los taninos?

2.- Escribe algunas características del ácido tánico

3.- ¿Qué otras funciones contiene el ácido tánico

 DETERMINACION DE CLOROFILA

OBJETIVO.-

Determinar la concentración de clorofila total, clorofila”a” y “b” de

muestras vegetales verdes (espinacas, acelgas, etc.), mediante lecturas
de absorbancia en el espectrofotómetro.

MATERIALES.-

Probeta de 100ml
Papel filtro
Vaso de 250ml
Mortero
Pipeta de 10ml
Matraz aforado de 100ml
Embudo
Espectrofotómetro
*Hojas de tamarindo*

REACTIVOS.-

Acetona al 85%
Na2SO4 anhidro

PROCEDIMIENTO.-

1.- Pesar 5grs de muestra de hojas verdes, pasar a un mortero y agregar

acetona al 85% hasta cubrir las hojas.

2.- Triturar las hojas con cuidado y reposar por 24 horas.

3.- Filtrar el líquido a través de papel filtro con una capa de sulfato de
sodio anhidro, recogiendo el filtrado en un matraz aforado de 100ml.

4.- Lavar la muestra con más acetona, hasta que quede sin color verde.
Al final aforar a 100 con acetona y tomar la lectura en el
espectrofotómetro a una longitud de onda de 660 y 642.5 nm usando
como blanco acetona.
CALCULOS.-

CLOROFILA TOTAL EN MG GR = 7.12 x Lec. Abs. a 660 + 16.8 x Lec a

642.5
10 x muestra en grs.

= 7.12 x 1.751 + 16.8 x .531 (lectura1)

10 x 5grs

= 12.46712 + 8.9208
50

= 21.38792
50

= 0.4277584

CLOROFILA TOTAL EN MG GR = 7.12 x 1.877 + 16.8 x .207

(lectura 2)
10 x 5grs

= 13.36424 + 3.4776
50

= 16.84184
50

= 0.3368368
CLOROFILA “a” = 9.93 x Lec abs a 660 – 0.777 x Lec abs 642.5
10 x muestra en grs.

= 9.93 x 1.751 – 0.777 x .531 (lectura 1)

10 x 5

= 17.38743 – 0.412587
50

= 16.974843
50

= 0.33949686

CLOROFILA “a” = 9.93 x 1.877 – 0.777 x .207 (lectura 2)

10 x 5

= 18.63861 – 0.160839
50

= 18.477771
50

= 0.36955542
 DETERMINACION DE GLUTEN

OBJETIVO.-

Determinar el porcentaje total de gluten en la harina eliminando las

impurezas.

MATERIALES.-

Vaso de precipitados de 250

Bascula

PROCEDIMIENTO.-

1.- Pesar 20grs de harina y añadirle agua hasta formar una “bola”.

2.- Dejar reposar en un vaso de precipitados durante media hora y

cubrirla con H2O.

3.- Retirarla y lavar en la llave hasta eliminar impurezas.

4.- Comprimir lo más posible hasta eliminar el H2O presente.

5.- Calcular el porcentaje de gluten.

CALCULOS.-

PESO INICIAL: 20 GRS.

PESO FINAL: 6GRS.