ESCUELA TCNICA SUPERIOR DE INGENIEROS AGRNOMOS

DEPARTAMENTO DE PRODUCCIN VEGETAL: FITOTECNIA

UNIVERSIDAD POLITCNICA DE MADRID


TRABAJO FIN DE CARRERA

CAPTURA DE CO
2
MEDIANTE ALGAS
UNICELULARES





AUTOR:

M Jos Garca Vicente

TUTOR:

Jos M. Durn Altisent


Madrid, 2 de Junio de 2.010

- ii -
DEDICATORIA


En primer lugar quiero dedicar este Trabajo Fin de Carrera a mis padres y a mi
hermana porque gracias a su cario, su esfuerzo, su apoyo y su constancia han conseguido
que todo lo que hoy soy, tanto a nivel personal como a nivel profesional, se lo deba a ellos y
porque les quiero por encima de todo.

Tambin quiero dedicrselo a Sergio, por ser una de las personas ms maravillosas
que he conocido en mi vida y por ayudarme en los buenos y en los malos momentos que he
pasado a lo largo de todos estos meses de trabajo.

Y por ltimo quiero dedicrselo a Csar, a Andrea y a mis amigas por formar parte
de mi vida.



- iii -
ABREVIATURAS
Micra.
Euro.
C Grados centgrados.
G Energa libre de Gibbs (potencial qumico).
A Absorbancia
ABS Acrilonitrilo Butadieno Estireno.
ADABE Asociacin para la Difusin de la Biomasa en Espaa.
ADP Adenosin difosfato.
ATP Adenosin trifosfato.
BBVA Banco Bilbao Vizcaya Argentaria.
BIOPLAT Plataforma Tecnolgica Espaola de la Biomasa.
CDV Coeficiente de variacin
CE Cenizas.
CE
25
Conductividad elctrica (mScm
-1
).
CENIT Consorcio Estratgico Nacional de Investigacin Tcnica.
CFC Clorofluorocarbonos.
CH
4
Metano.
Chl a Clorofila a.
CI Encendido por compresin.
CLO Concentracin de clorofila.
cm Centmetro.
CMNUCC Convencin Marco de las Naciones Unidas sobre el Cambio Climtico.
CO Monxido de carbono.
CO
2
Dixido de carbono.
CTR Centro Tecnolgico REPSOL.
EEA Agencia Europea del Medio Ambiente.
EEM Error estndar de la media ( n
n
/
1
).
EE UU Estados Unidos.
ETSIA Escuela Tcnica Superior de Ingenieros Agrnomos.
Fig. Figura.
g Gramo.
GEI Gases de Efecto Invernadero.
H
2
Hidrgeno.
H
2
O Agua.
HC Hidrocarburos.
HCT Hidrocarburos no metanos.
HTU Mejora hidrotermal.
Hz Hercios.
IDEAM Instituto de Hidrologa, Meteorologa y Estudios Ambientales.
L Litro.
LCD Liquid Crystal Display (Pantalla de Cristal Lquido).
LON Longitud de onda.
m
2
Metro cuadrado.
m
3
Metro cbico.
m Metro.
MARM Ministerio de Medio Ambiente y Medio Rural y Marino.
MED Valor medio ( /n x
n
i
i
).
) / 100 (
1
x
n

- iv -
MEP Motores de explosin provocada.
min Minutos.
MITYC Ministerio de Industria, Comercio y Turismo.
MP Masa de partculas.
MS Materia Seca (g).
NADP Nicotinamina adenina dinucletido fosfato.
NADPH Nicotin-dinucletido-fosfato reducido.
NO
x
xidos de nitrgeno.
OD Oxgeno Disuelto (mgL
-1
).
ORP Potencial redox (mV).
P Presin (mbar).
PAR Radiacin Fotosintticamente activa.
PAH Hidrocarburos aromticos policclicos.
PETG Copoliester de Polietilenterftalato Glicol.
PI Encendido por chispa.
ppm Partes por milln.
PVC Policloruro de vinilo.
RAE Real Academia Espaola.
RS Residuo Seco (g100 g
-1
).
RSU Residuos slidos urbanos.
SO
x
xidos de azufre.
SVO Straight Vegetable Oil.
T Temperatura (C).
TDS Slidos disueltos totales (mgL
-1
)
TIS Sistema de Identificacin de Tags.
tep Toneladas equivalentes de petrleo.
TFC Trabajo Fin de Carrera
UPM Universidad Politcnica de Madrid.
USB Universal Serial Bus (Bus Universal en Serie).
UV Ultravioleta.
Ve Volumen del extracto (mL).
Vf Volumen del filtrado (mL).
VGA Video Graphics Array.
v:v Volumen : volumen.



- v -
AGRADECIMIENTOS

A la Escuela Tcnica Superior de Ingenieros Agrnomos (ETSIA), donde me he
formado, tanto personal como profesionalmente.

Al Departamento de Produccin Vegetal: Fitotecnia de la ETSIA, por facilitarme
todo lo necesario para llevar a cabo este trabajo.

A la empresa REPSOL, por proporcionarme el producto objeto de los ensayos
realizados.

Al Dr. Jos Mara Durn Altisent, por todo lo que en estos meses he aprendido de l,
por su plena dedicacin y por darme la oportunidad de realizar este trabajo.

A Csar por ayuda incondicional, ya que si en l no hubiera podido realizar este
trabajo.

A scar por todo el trabajo de laboratorio que me ha enseado y por su apoyo.




- vi -

NDICE
Pgina

1. INTRODUCCIN ............................................................................................................ - 2 -

1.1. Antecedentes .................................................................................................................. - 2 -
1.2. Revisin bibliogrfica .................................................................................................... - 3 -
1.2.1. Contaminacin ............................................................................................................ - 3 -
1.2.1.1. Fuentes de contaminacin ........................................................................................ - 3 -
1.2.1.2. Contaminacin atmosfrica ...................................................................................... - 3 -
1.2.1.3. Cambio climtico ..................................................................................................... - 5 -
1.2.1.4. Causas del calentamiento global .............................................................................. - 5 -
1.2.1.5. Gases de efecto invernadero ..................................................................................... - 6 -
1.2.1.6. Consecuencias del cambio climtico ........................................................................ - 7 -
1.2.2. Biomasa: una energa renovable ................................................................................. - 8 -
1.2.2.1. Introduccin ............................................................................................................. - 8 -
1.2.2.2. Definicin de biomasa .............................................................................................. - 8 -
1.2.2.3. La biomasa como energa renovable del tipo solar fotovoltaico .......................... - 9 -
1.2.2.4. Eficiencia energtica de la fotosntesis .................................................................. - 11 -
1.2.2.5. Importancia de la biomasa como fuente de energa a nivel mundial ..................... - 12 -
1.2.2.6. Situacin del uso de la biomasa en Espaa ............................................................ - 13 -
1.2.2.7. Fuentes de biomasa ................................................................................................ - 14 -
1.2.3. Biocombustibles ........................................................................................................ - 16 -
1.2.3.1. Biocombustibles slidos ......................................................................................... - 16 -
1.2.3.2. Biocombustibles lquidos ....................................................................................... - 17 -
1.2.3.3. Biocombustibles gaseosos ...................................................................................... - 17 -
1.2.3.4. Biocombustibles a partir de microalgas ................................................................. - 19 -
1.2.3.5. Efectos de los biocombustibles sobre el medio ambiente ...................................... - 20 -
1.2.4. Algas .......................................................................................................................... - 20 -
1.2.5. Productos derivados de las algas ............................................................................... - 21 -
1.2.5.1. Biomasa .................................................................................................................. - 21 -
1.2.5.2. Productos nicos .................................................................................................... - 22 -
1.2.5.3. Lpidos y biodiesel ................................................................................................. - 22 -
1.2.5.4. Carbohidratos y etanol ........................................................................................... - 24 -
1.2.5.5. Hidrocarburos ......................................................................................................... - 24 -
1.2.5.6. Hidrgeno ............................................................................................................... - 25 -
1.2.6. Insumos del cultivo de algas ..................................................................................... - 26 -
1.2.6.1. Captura de CO
2
....................................................................................................... - 26 -
1.2.6.2. Luz .......................................................................................................................... - 28 -
1.2.6.3. Nutrientes ............................................................................................................... - 31 -
1.2.6.4. Temperatura ........................................................................................................... - 32 -
1.2.6.5. Cosechado de la biomasa de las algas ................................................................... - 32 -
1.2.7. Sistemas de cultivo de algas ...................................................................................... - 34 -
1.2.7.1. Sistemas de cultivo abiertos ................................................................................... - 35 -
1.2.7.2. Sistemas de cultivo cerrados .................................................................................. - 37 -
1.2.7.3. Sistemas de cultivo en alta mar .............................................................................. - 39 -
1.2.7.4. Sistemas de cultivo adecuados para la produccin de energa mediante algas ...... - 40 -
1.3. Objetivos ...................................................................................................................... - 42 -


- vii -
2. MATERIAL Y MTODOS ............................................................................................ - 44 -

2.1. Sistema de cultivo ........................................................................................................ - 44 -
2.1.1. Biorreactor de medio poroso (geotextil) ................................................................... - 44 -
2.1.2. Medio poroso (geotextil) ........................................................................................... - 48 -
2.1.3. Bomba ....................................................................................................................... - 48 -
2.1.4. Baln ......................................................................................................................... - 49 -
2.1.5. Biorreactor tubular vertical ....................................................................................... - 50 -
2.2. Especie Cultivada ......................................................................................................... - 52 -
2.2.1. Clasificacin taxonmica .......................................................................................... - 52 -
2.2.2. Morfologa y ultraestructura ...................................................................................... - 52 -
2.2.3. Composicin de pigmentos ....................................................................................... - 54 -
2.2.4. Caractersticas fisiolgicas ........................................................................................ - 54 -
2.3. Medio de cultivo ........................................................................................................... - 55 -
2.3.1. Autoclave .................................................................................................................. - 58 -
2.4. CO
2
............................................................................................................................... - 59 -
2.4.1. Gases de combustin ................................................................................................. - 59 -
2.4.2. Principales productos contaminantes de los gases de escape .................................... - 59 -
2.4.3. Generador elctrico ................................................................................................... - 62 -
2.4.4. Emisiones de automocin, generador elctrico y refinera ....................................... - 63 -
2.4.5. Analizadores de CO
2
................................................................................................. - 67 -
2.5. Seguimiento del cultivo ................................................................................................ - 69 -
2.5.1. Anlisis de clorofila planctnica ............................................................................... - 69 -
2.6. Control del cultivo ........................................................................................................ - 73 -
2.6.1. HANNA Instruments (mod. 9828) ............................................................................ - 73 -
2.7. Biomasa ........................................................................................................................ - 75 -
2.7.1. Centrifugacin ........................................................................................................... - 76 -
2.7.2. Equipo centrifugador-clarificador ............................................................................. - 76 -
2.7.3. Bomba autoaspirante ................................................................................................. - 77 -
2.8. Residuo seco y cenizas..- 77 -

3. RESULTADOS Y DISCUSIN ..................................................................................... - 80 -

3.1. CULTIVO 1 ................................................................................................................. - 80 -
3.2. CULTIVO 2 ................................................................................................................. - 90 -
3.3. CULTIVO 3 ................................................................................................................. - 96 -
3.4. SENSOR MULTIPARAMTRICO (mod. HI-9828) ................................................ - 104 -
3.5. CENTRO TECNOLGICO DE REPSOL (CTR) ..................................................... - 108 -

4. CONCLUSIONES ........................................................................................................ - 114 -

5. BIBLIOGRAFA ........................................................................................................... - 116 -

ANEXO 1 "BASES PARA LA SELECCIN DE MICROALGAS FITOPLANCTNICAS
EXPLOTABLES COMO PRODUCTORAS DE RECURSOS ENERGTICOS..- I.1 -

ANEXO 2 "CONCENTRACIONES DE CLOROFILA DE DIFERENTES CULTIVOS DE
NANNOCHLOROPSIS GADITANA.....-II.1-



- viii -

RESUMEN

M Jos Garca Vicente (2010). Captura de CO
2
mediante algas unicelulares. Escuela Tcnica
Superior de Ingenieros Agrnomos, Madrid, 118 p.

Este Trabajo Fin de Carrera se basa en el cultivo de algas unicelulares, en concreto
de la especie Nannochloropsis gaditana en un biorreactor de medio poroso (geotextil) con
altas concentraciones de dixido de carbono (CO
2
), similares a las que se producen en un
motor de combustin (10-15 % de CO
2
)

y

sin CO
2
. El trabajo experimental se ha desarrollado
en el Departamento de Produccin Vegetal: Fitotecnia de la Escuela Tcnica Superior de
Ingenieros Agrnomos (ETSIA) de la Universidad Politcnica de Madrid (UPM), durante los
meses comprendidos entre Marzo y Mayo de 2010. Entre las principales finalidades destacan,
conseguir la puesta en marcha de un cultivo de Nannochloropsis gaditana en un biorreactor
de medio poroso, cuantificar la cantidad de CO
2
que dicha especie es capaz de capturar por
medio de la biomasa producida y conseguir la curva de cultivo mediante la estimacin de la
concentracin de clorofila por espectrofotometra.

SUMMARY


This Final Degree Project is in single-cell algae culture, specifically
Nannochloropsis gaditana specie, in a medium porous biorreactor with high CO
2

concentrations, similar to engine combustion (10-15 % of CO
2
) and without CO
2
. The
experimental performance was developed at Departamento de Produccin Vegetal: Fitotecnia
at School of Agronomist Engineering, Polytechnic University of Madrid, from March to May
2010. The main aims are start up a Nannochloropsis gaditana culture in a medium porous
biorreactor, quantify the CO
2
quantity that this specie may catch using the production of this
biomass and achieve the culture curve through the chlorophyll concentration estimation by
spectrophotometry.

















INTRODUCCIN


- 2 -
1. INTRODUCCIN

El presente trabajo ha sido realizado como trabajo de investigacin necesario para la
finalizacin de la carrera en la Escuela Tcnica Superior de Ingenieros Agrnomos (ETSIA) de
la Universidad Politcnica de Madrid (UPM).

La etapa de investigacin se ha realizado en los Campos de Prcticas de la ETSIA en
colaboracin con el Departamento de Produccin Vegetal: Fitotecnia, tutorado por D. Jos M.
Durn Altisent, Catedrtico de Horticultura de la UPM y con la empresa REPSOL, la cual ha
facilitado el cultivo de algas.

1.1. Antecedentes

Una de las mayores amenazas que pesa sobre nuestro planeta es el Cambio Climtico
cuya causa principal es el calentamiento global de la tierra por la emisin de gases de efecto
invernadero, los cuales proceden principalmente de los combustibles - petrleo, gas y carbn
destinados entre otros fines a producir electricidad y utilizados principalmente en calefaccin,
refrigeracin y transporte.

Actualmente debido a este problema y a otros similares, se est llevando a cabo el
estudio y desarrollo de diferentes fuentes de energas renovables como posibles soluciones.

Dentro de las posibles fuentes de energas renovables destaca la biomasa, clave en el
cumplimiento de los objetivos energticos que se han planteado tanto en Europa como en
Espaa. Dichos objetivos se centran en la diversificacin energtica, disminucin de la
dependencia de la energa externa y en la reduccin de las emisiones de gases de efecto
invernadero (GEI).

Desde hace unos aos, la posibilidad de utilizar el cultivo de microalgas como una
posible solucin a la reduccin de las emisiones de GEI est en incremento. En primer lugar
utilizando la biomasa producida en su cultivo en la obtencin de biocombustibles que puedan
sustituir a los combustibles fsiles y en segundo lugar situando estos cultivos cerca de
centrales elctricas, refinaras, entre otras, para la captura de estos GEI y as reducir su
emisin a la atmsfera.

Para ello se han desarrollado mltiples sistemas de cultivo, diferencindose
principalmente en dos grupos, los sistemas abiertos y los sistemas cerrados. En la actualidad
estn tomando una mayor importancia los sistemas de cultivo cerrados debido a las diversas
ventajas que tienen respecto con los sistemas de cultivo abiertos.

Motivados por esta tema, la empresa REPSOL se embarc en el proyecto CENIT
SOST-CO
2
que tiene como objetivo abordar el ciclo de vida completo del CO
2
, desde su
captura en las fuentes de emisin pasando por su transporte, su almacenamiento y su
valorizacin a gran escala. Este proyecto CENIT (Consorcio Estratgico Nacional de
Investigacin Tcnica) es una iniciativa del Gobierno Espaol. El consorcio SOST-CO
2
est
formado por quince empresas entre las que destaca REPSOL. Dentro de las actividades de
este proyecto destaca, el cultivo de microalgas con fines energticos, desarrollando diferentes
sistemas de cultivo y evaluando la viabilidad tcnica y econmica para cada uno de ellos,
adems de la fijacin de CO
2
que permita reducir sus efectos en el medio, mediante el estudio


- 3 -
del coste integrado de captura y fijacin de CO
2
con microalgas y cultivos terrestres,
relacionndolo con la obtencin del ptimo en las corrientes de refinera.

En este punto es desde donde parte este TFC, ya que en l se intentar conseguir la
puesta en marcha de diferentes cultivos de Nannochloropsis gaditana en un biorreactor de
medio poroso (geotextil) bajo diferentes condiciones: sin CO
2
y con altas concentracin de
CO
2
proveniente de los gases de combustin de un generador elctrico de gasolina, para
estudiar su comportamiento en ambas situaciones mediante la biomasa producida.


1.2. Revisin bibliogrfica

En este epgrafe se desarrollan diferentes aspectos, relacionados en mayor o menor
medida con los objetivos planteados para este TFC.

1.2.1. Contaminacin

La Real Academia Espaola (RAE) define contaminar como alterar nocivamente la
pureza o las condiciones normales de una cosa o un medio por agentes qumicos o fsicos.
Cuando alteramos las condiciones normales de nuestro medio ambiente se producen cambios,
casi siempre impredecibles, y en muchos casos, irreversibles.

Adems define a un contaminante como toda sustancia orgnica o inorgnica, natural
o sinttica, que en su proceso de produccin, manejo, transporte, almacenaje o uso puede
incorporarse al medio. Los efectos que puede tener la introduccin de contaminantes en el
medio ambiente son diversos.

1.2.1.1. Fuentes de contaminacin

Las principales fuentes de contaminacin qumica son las emisiones y vertidos
industriales, la gestin de los residuos y los hidrocarburos.

Segn la Agencia Europea del Medio Ambiente (EEA) (2010), la produccin
industrial y el comercio contribuye en un 41.4 % a la contaminacin del suelo, el vertido y
tratamiento de los residuos urbanos en un 15.2 % y la industria del petrleo en un 14.1 %.
Existen otras fuentes contaminantes entre las que se encuentra la minera y la agricultura. La
contaminacin afecta a distintos medios. Los principales contaminantes atmosfricos son
los Gases de Efecto Invernadero (GEI) que potencian el cambio climtico (CO
2
, CH
4
,
NO
x
y SO
x
,

entre otros) los Hidrocarburos Aromticos Policclicos (PAH) y las partculas
(PM10 y PM2.5), segn su dimetro en micras. Los contaminantes ms relevantes en agua y
suelos son el nitrgeno y el fsforo, los metales pesados, las sustancia organocloradas y los
hidrocarburos (BAREA, 2008).

1.2.1.2. Contaminacin atmosfrica
Segn la Directiva 84/360/CEE, del Consejo de 28 de Junio de 1984 la
contaminacin atmosfrica se define, relativa a la lucha contra la contaminacin atmosfrica
procedente de las instalaciones industriales como: La introduccin en la atmsfera, por el
hombre, directa o indirectamente, de sustancias o energa que tengan una accin nociva de tal
naturaleza que ponga en peligro la salud del hombre, que cause daos a los recursos


- 4 -
biolgicos y a los ecosistemas, que deteriore los bienes materiales y que dae o perjudique las
actividades recreativas y otras utilizaciones legtimas del medio ambiente.
Segn FRERS (2009), la contaminacin de la atmsfera se ha incrementado
notablemente en los ltimos aos y constituye uno de los problemas ms serios que enfrenta
el ser humano. Ya no es una cuestin circunscripta a algunos lugares, el viento se ha
encargado de convertirlo en un problema global. El problema de la contaminacin atmosfrica
comenz hace aproximadamente 200 aos con la Revolucin Industrial. Hoy, el humo
expulsado de los automviles, colectivos y camiones, los procesos industriales, los sistemas
de calefaccin y hasta el humo de los cigarrillos se juntan para contaminar el aire que
respiramos provocando una gran parte de las enfermedades respiratorias.
La polucin del aire se compone de muchos tipos de gases, gotitas y partculas que
reducen la calidad el aire. Una combinacin diferente de vapores y contaminantes gaseosos
del aire se encuentra en ambientes exteriores e interiores. Los contaminantes gaseosos ms
comunes son el monxido de carbono, el dixido de carbono, los hidrocarburos, los xidos de
nitrgeno, los xidos de azufre y el ozono. Diferentes fuentes producen estos compuestos
qumicos pero la principal fuente artificial es la quema de combustible fsil.


Fig. 1. Visin de los efectos de la contaminacin atmosfrica.



- 5 -
1.2.1.3. Cambio climtico

La Convencin Marco de las Naciones Unidas sobre el Cambio Climtico
(CMNUCC), en su Artculo 1, define al cambio climtico: como un cambio de clima
atribuido directa o indirectamente a la actividad humana que altera la composicin de la
atmsfera mundial y que se suma a la variabilidad natural del clima observada durante
perodos de tiempo comparables..
A su vez define los efectos adversos del cambio climtico como los cambios en el
medio ambiente fsico o en la biota resultantes del cambio climtico que tienen efectos
nocivos significativos en la composicin, la capacidad de recuperacin o la productividad de
los ecosistemas naturales o sujetos a ordenacin, o en el funcionamiento de los sistemas
socioeconmicos, o en la salud y el bienestar humanos (IDEAM, 2007).
El cambio climtico constituye una de las mayores amenazas que penden sobre el
planeta. Si el aumento de la temperatura terrestre supera en ms de 2 C los niveles
preindustriales, probablemente el cambio climtico sea irreversible y posiblemente las
consecuencias a largo plazo sean enormes. Las zonas bajas de la tierra, que incluyen grandes
porciones de numerosos pases europeos, podran acabar desapareciendo bajo los crecientes
niveles del mar. Adems en muchas zonas del mundo no habra agua dulce suficiente para
seguir viviendo. Aumentara la frecuencia de los fenmenos meteorolgicos extremos que
causan daos fsicos y econmicos. Las economas podran entrar en declive debido al coste
que supondra afrontar climas diferentes. A lo largo de 10,000 aos, hasta la Revolucin
Industrial, la temperatura media de la Tierra se mantuvo sumamente estable. Desde 1850,
fecha a partir de la cual empez a medirse la temperatura con precisin sistemtica, el
aumento ha sido de 0.76 C. Si no se toman medidas es probable que durante este siglo la
temperatura aumente entre 1.8 y 4 C ms, incluso 6.4 C ms, segn un panel internacional
de cientficos convocado por las Naciones Unidas. Ya est en marcha la carrera para evitar
que el mundo alcance lo que se considera el punto sin retorno: un aumento de 2 C. Si en
torno a 2020, como muy tarde, no se han estabilizado las emisiones mundiales y antes de
2050 no se han reducido aproximadamente a la mitad de los niveles de 1990, lo ms probable
es que no se logre el objetivo. (CE, 2008).

1.2.1.4. Causas del calentamiento global

Se ha observado que una de las causas principales del problema del calentamiento y
del cambio climtico se debe a la constante emisin de GEI principalmente los gases de la
gran industria de los pases desarrollados del norte. Sin embargo, a pesar de que el efecto
invernadero se produce de forma natural, en los ltimos siglos la irracional accin antrpica
con la mayor emisin de gases contaminantes a la atmsfera- contribuye negativamente en la
ocurrencia acelerada de este fenmeno (CHAMOCHUMBI, 2009).




- 6 -
1.2.1.5. Gases de efecto invernadero

Dentro de los GEI podemos encontrarnos con gases de origen natural (se encuentran
en la atmsfera de manera natural) y cuyas concentraciones pueden aumentar debido a la
actividad humana, y los gases artificiales, producto de la industria. Destacamos el vapor de
agua (H
2
O), dixido de carbono (CO
2
), metano (CH
4
), xido de nitrgeno (NO
x
), ozono (O
3
)
y clorofluorocarbonos (CFC).

Se sabe que los GEI son muy eficientes en atrapar la onda calrica (radiacin de
onda larga) emitida por la tierra, cuyo incremento de la temperatura es atrapada en la
troposfera, generando el efecto invernadero. Pero, cuando se incrementa de forma anormal su
rango promedio de la temperatura terrestre se produce el calentamiento global. Algunas
teoras sostienen que la contaminacin es la causa del calentamiento actual. Este
calentamiento -a su vez- deriva en cambios climticos a diferentes escalas y en la ocurrencia
de diversos fenmenos naturales (lluvias, inundaciones, sequas, huracanes, tsunamis,
deshielo glacial, etc.) alterando los ciclos y funciones regulares naturales de los ecosistemas e
impactando en los recursos locales y medios de vida de las comunidades locales y de las
poblaciones indgenas ms vulnerables de las diferentes regiones.
De todos los GEI estudiados el ms importante es el CO
2
que proviene de las
emisiones de la gran industria y de la deforestacin de bosques tropicales y subtropicales por
la expansin irracional de actividades agropecuarias, agroindustriales y forestales. (MADRID,
2009).
Con el estudio Global Carbon Project Study, dirigido por la doctora Corinne Le
Qur, de la Universidad de East Anglia y del British Antarctic Survey, llegaron a la
conclusin de que entre el ao 2000 y el 2008 ha habido un incremento del 29% en las
emisiones de CO
2
procedentes de combustibles fsiles.
Los investigadores han encontrado que hubo, de media, un incremento anual en las
emisiones de ms del 3 % durante ese perodo, en comparacin con el incremento anual del 1
% entre 1990 y el 2000. La mayor parte del incremento de esta dcada ocurri despus del
2000 y tiene su origen en el boom de la economa china. Los investigadores prevn un ligero
descenso en el 2009 debido a la recesin, pero incrementos an mayores en el 2010.
En total, las emisiones de CO
2
procedentes del uso de combustibles fsiles se han
incrementado en un 41% entre 1990 y 2008, aunque las emisiones globales de 1990 son el
nivel de referencia establecido por el Protocolo de Kyoto, con el cual los pases estn
intentando reducir sus propias emisiones de carbono (CONNOR and McCARTHY, 2009).
En Espaa, las emisiones de gases de efecto invernadero crecieron en 2007 un 2.1%
respecto al ao anterior (Fig. 2) por lo que Espaa superaba ya en un 52.6 % las emisiones de
1990, ao de referencia en el Protocolo de Kioto.
Las emisiones espaolas de CO
2
bajan en el 2008 y 2009 gracias a la crisis
econmica. El recorte de produccin en el sector elctrico, la reduccin del consumo de
petrleo y el aumento de energa elica y la presencia mayor del gas en centrales de ciclo
combinado, explican la baja de entre el 5% y el 6% de emisiones en el 2008. La produccin
industrial cay en diciembre de 2008 un 19,6% respecto al mismo mes del ao anterior. Se
prev que la produccin de cemento baje en Espaa de 50 a 30 millones de toneladas al ao
(MARTNEZ, 2009).



- 7 -


98.4
100.6
103.1
99.2
104.6
108.7
106.2
113.3
116.9
126.8
131.4
131.3
137.1
139.6
145.1
150.2
147.5
151.4
139.8
90
100
110
120
130
140
150
160
1988 1990 1992 1994 1996 1998 2000 2002 2004 2006 2008 2010
C
O
2
e
q
u
i
v
a
l
e
n
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k
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a
s
)


Fig. 2. Inventario de Gases de Efecto Invernadero de Espaa. Emisiones. Sntesis de
resultados de la serie 1990-2008: Sumario Edicin 2010 (MARM, 2010).

1.2.1.6. Consecuencias del cambio climtico

Para hacernos una idea de las consecuencias que el cambio climtico puede provocar
en la sociedad, se han recogido algunos artculos de diferentes personalidades, en los cuales,
plasman su visin:
En Estados Unidos, un informe elaborado por Union of Concerned Scientists dice
que en slo un par de dcadas los veranos en Illinois, el granero del pas, podran ser ms
calientes que la ola de calor de 1988 que acab con cultivos por un valor de 40,000 millones
de dlares.
En los prximos doce aos, hay una probabilidad del 50 % de que una combinacin
de cambio climtico y sobreexplotacin sequen los lagos Mead y Powell, dicen los cientficos
de Scripps Institution of Oceanography. Estos lagos suministran el 90 % del agua de Las
Vegas, junto con el riego y el agua potable para ms de veinte millones de personas en Los
ngeles y a lo largo de Nevada y Arizona.
La gran mayora de los cientficos coinciden en que si evitamos que la temperatura
de la Tierra aumente 2 C por encima de los niveles preindustriales, tenemos una posibilidad
de evitar los impactos del cambio climtico que ms sacudiran a la civilizacin. (PIBEL et
al., 2010).


- 8 -
1.2.2. Biomasa: una energa renovable

En este apartado se desarrollan diferentes aspectos sobre la energa renovable:
biomasa.

1.2.2.1. Introduccin

La biomasa ha sido la principal fuente de abastecimiento energtico de la humanidad
hasta el comienzo de la poca Industrial en que se empezaron a utilizar de forma intensa los
combustibles fsiles y an hoy, hay varios miles de millones de personas de pueblos en vas
de desarrollo que dependen de la biomasa como principal fuente de energa. Las estadsticas
actuales cifran el consumo de biomasa en todo el mundo en torno a los 1,112 millones de
toneladas equivalentes de petrleo (Mtep), que representa ms del 10 % del consumo mundial
de energa. A pesar de la enorme dependencia de los combustibles fsiles en los pases
desarrollados, el consumo de biomasa en stos va en aumento en los ltimos aos,
representando en la actualidad cerca de los 400 Mtep, de los que una quinta parte
aproximadamente, es consumida en la Unin Europea.

Las cifras anteriores sorprenden a expertos en materia energtica y mucho ms
cuando se comprueba que la participacin de la biomasa en el balance energtico global es
muy superior a la que tienen otras energas renovables, mucho ms difundidas en los medios
de comunicacin y conocidas por el gran pblico.

Tambin hay que destacar que a pesar de la asociacin intuitiva de la biomasa con
los pueblos en vas de desarrollo, los pases desarrollados han experimentado en los ltimos
aos un incremento espectacular en el uso y consideracin de la biomasa como fuente
energtica estratgica. A ello ha contribuido la necesidad de diversificar las fuentes de
abastecimiento de combustibles, la necesidad de luchar contra el incremento de efecto
invernadero en la atmsfera y la caresta creciente de los combustibles fsiles. Hoy en da la
calefaccin con biomasa resulta bastante ms econmica que la convencional, si se tiene en
cuenta solamente el precio del combustible (FERNNDEZ-GONZLEZ, 2009)

1.2.2.2. Definicin de biomasa

Segn MADRID (2009), en la denominacin genrica de biomasa, se incluye todo
un conjunto muy heterogneo de materias orgnicas, tanto por su origen como por su
naturaleza, comprendiendo productos de origen vegetal, animal o microbiano. En el contexto
energtico, se ha aceptado el trmino biomasa para denominar a una fuente de energa de
tipo renovable, basada en la utilizacin energtica de la materia orgnica formada por va
biolgica en un pasado inmediato o de los productos derivados de sta. Quedan fuera de este
concepto los combustibles fsiles y las materias orgnicas derivados de stos (los plsticos y
la mayora de los productos sintticos) ya que, aunque aquellos tuvieron un origen biolgico,
su formacin tuvo lugar en tiempos remotos. Desde un punto de vista estricto, la fraccin
orgnica de los residuos slidos urbanos (RSU), una vez separados los plsticos y productos
sintticos, tiene tambin naturaleza de biomasa, aunque dadas las caractersticas de los RSU,
se suelen considerar como un grupo aparte, dentro de las energas renovables. Tambin tiene
consideracin de biomasa la materia orgnica de las aguas residuales y los lodos de
depuracin.



- 9 -
La biomasa tiene carcter de energa renovable ya que su contenido energtico
procede en ltima instancia de la energa solar fijada por los vegetales en el proceso
fotosinttico y acumulada en los enlaces de las molculas orgnicas que forman su biomasa.
Esta energa se libera al romper los enlaces de los compuestos orgnicos en el proceso de
combustin, dando como productos finales anhdrido carbnico y agua. Por este motivo, los
productos procedentes de la biomasa que se utilizan para fines energticos se denominan
biocombustibles, pudiendo ser, segn su estado fsico, biocombustibles slidos, en referencia
a los que son utilizados bsicamente para fines trmicos y biocombustibles lquidos como
sinnimo de los biocarburantes para automocin.

1.2.2.3. La biomasa como energa renovable del tipo solar fotovoltaico

La biomasa se encuadra dentro de las energas renovables como un tipo de energa
solar de aprovechamiento directo, y dentro de los dos tipos trmico y fotnico- est
claramente encuadrado en el de aprovechamiento fotnico de la energa solar. Precisamente,
la biomasa tiene la base de su obtencin de energa en la clorofila, que acta como un
semiconductor y puede considerarse la molcula ms importante de toda la biosfera, ya que
logra que la energa solar se transforme en energa qumica (primer paso), actuando de la
misma forma que acta en las clulas fotovoltaicas.

En la molcula de clorofila se distinguen dos partes: una cabeza y una cola, con
una forma semejante a una cometa. La cabeza est compuesta por cuatro anillos pirrlicos
unidos entre s, formando en conjunto un macroanillo con una serie de dobles enlaces
conjugados, que son los que actan realmente como fuentes receptoras de la radiacin solar.
Precisamente, uno de los electrones de uno de estos dobles enlaces es el que absorbe la
energa, pasando de su banda de valencia a una banda de conduccin, y de ah puede volver a
su estado fundamental si no encuentra aceptor adecuado, o bien puede transferir a un
compuesto aceptor, que se reduce y que sirve para reducir al CO
2
, tras una serie de complejas
reacciones qumicas. La diferencia con una clula fotovoltaica estriba en que en sta, el
electrn activado, se devuelve a su capa fundamental por medio de un conductor, y en el caso
de la clorofila la reposicin del electrn cedido para reducir el CO
2
se realiza a partir de las
molculas de agua, las cuales se rompen y liberan oxgeno molecular. El proceso primario por
el cual se capta esa energa, que es un proceso muy complicado y grandioso, como todo lo de
la Naturaleza, est perfectamente diseado para aprovechar la energa solar de una forma muy
eficiente.

Este proceso tiene lugar en las partes verdes de los vegetales, donde las clulas
vegetales tienen en su interior unos orgnulos llamados cloroplastos, visibles con microscopa
ptica. Con microscopa electrnica se puede observar en su interior una ultraestructura
compuesta por una serie de dobles membranas lipoproteicas, que pueden estar de forma
aislada o formando pilas (granum). Estas lminas reciben el nombre de tilacoides y en ellas
reside la capacidad fotosinttica. Visto con ms detalle (Fig. 3), un tilacoide es como una
especie de bolsita, con una doble membrana, en la cual se separa interna de la parte externa.
En la superficie de exterior de estos tilacoides estn las unidades fotosintticas, responsables
de unas 500 molculas y pigmentos (clorofila y xantofila, entre otros) que actuando de forma
coordinada, participan en la fase inicial de la fotosntesis con la captacin de la energa de las
radiaciones visibles del espectro solar. No todas las molculas de clorofila ceden su electrn a
un aceptor final, ya que el conjunto que recibe la radiacin y absorbe la excitacin, sta se va
pasando de una a otra molcula por resonancia, y al final hay una, el que representara al


- 10 -
pivot fotosinttico, que en el lenguaje biolgico se denomina centro de reaccin,
transfiere ese electrn a la molcula que va a ser reducida (NADPH o nicotin-dinucletido-
fosfato reducido), que al final va a ser suficiente capacidad para reducir el CO
2
.






















Fig. 3. Esquema de funcionamiento de un tilacoide. FERNNDEZ-GONZLEZ (2009)

Bsicamente, cuando la radiacin luminosa excita un fotosistema se produce la salida
de un electrn de la clorofila, quedando sta reducida. En la parte interior del tilacoide hay
unos sistemas moleculares fuertemente oxidantes, que rompen la molcula de agua, liberando
oxgeno, electrones y protones. Estos electrones son los que van a regenerar la clorofila
oxidada para que pueda volver a funcionar indefinidamente. Con los electrones activados se
crea un poder reductor asociado a una serie de compuestos, que actuando en cadena van a
producir finalmente la reduccin del CO
2
. Los protones formados en la ruptura de la molcula
de agua se mueven del interior al exterior de la membrana tilacoide a favor del gradiente del
campo elctrico formado por la salida de electrones. La energa de estos protones en
movimiento se acopla a una reaccin qumica endergnica de fosforilacin del ADP
(adenosin difosfato) para producir ATP (adenosin trifosfato), que acumula energa en el
enlace del nuevo fosfato incorporado. La ruptura del enlace fosfato en el ATP produce 7.6
kcalmol
-1
. Esta energa junto con el NADPH es utilizada para la reduccin del CO
2
y la
sntesis de los azcares que se producen como consecuencia y que representan la acumulacin
de la energa solar en forma de energa qumica.

Comparndolo con una clula fotovoltaica, en lo que consiste el proceso fotosinttico
es en un salto de electrones desde el nivel potencial que tienen en el agua (+ 0.8 V), hasta el
nivel potencial que tienen en la materia orgnica (- 0.43 V). Es decir, es conseguir que los
electrones del agua se activen a 1.23 V, y esto se consigue a partir de dos motores
fotoelctricos o biofotoelctricos (fotosistemas), que salvan esta diferencia de potencial entre
el agua y la materia orgnica, y acumulan los electrones en sta ltima. Esto es algo parecido
a lo que ocurre en la clula fotovoltaica, aunque en este caso pasan de la capa P a la capa N, y
FOTOSISTEMAS
RADIACIN LUMINOSA
2 e
-

2 H
+
+ ATP CO
2

HCOH
CO
2
+ H
2
O + 8 fotones (HCOH) + O
2
G = 114 kcal/mol
Interior del tilacoide
2e
-
+ NADP
+



2H
+

H
2
O
O
2



- 11 -
luego se recolectan por medio de unas armaduras conductoras y vuelven a su estado
fundamental. Gracias a esa diferencia potencial de unos 0.6 V aprovechamos la energa.

La diferencia fundamental que tienen los sistemas biolgicos fotosintticos respecto
a los sistemas de energa solar fotovoltaica es que los sistemas biolgicos producen sus
propios paneles con capacidad fotovoltaica (hojas), y adems llevan incorporada la batera,
actuando como tal la propia biomasa de la planta. En resumen, por medio de la fotosntesis, se
consigue que electrones del agua se activen aun nivel energtico superior de 1.23 V y tengan
capacidad suficiente para reducir al CO
2
y con ello formar biomasa que puede utilizarse como
biocombustible y al combinarse con oxgeno (combustin) devuelve la energa solar fijada en
el proceso fotosinttico.

A partir de la energa solar, la planta produce inicialmente azcares. Despus, a partir
de toda su cadena metablica y utilizando parte de la energa que ha generado para sus
propios procesos metablicos, va elaborando el resto de componentes que forman la biomasa:
glcidos, protenas, lpidos y todos los dems compuestos, varios miles, que forman el
metabolismo vegetal. Precisamente, todos estos compuestos son los que le dan a la biomasa
un gran inters como fuente de materias primas y hacen de sta una esperanza como
sucedneo del petrleo (FERNNDEZ-GONZLEZ, 2009).

1.2.2.4. Eficiencia energtica de la fotosntesis

En lo que respecta a la eficiencia, siempre se ha dicho que la biomasa es muy
abundante, pero poco eficiente. Esto es casi un postulado dentro de las energas renovables.
No obstante, depende del nivel que consideremos. A nivel de reaccin primaria que est
ocurriendo en los tilacoides, se necesitan ocho fotones (cuatro fotones para cada fotosistema)
para transferir cuatro electrones desde el agua hasta la materia orgnica formada por la
reduccin de una molcula de CO
2
a travs de los dos fotosistemas. Por tanto, si son fotones
de radiacin solar visible (de 400 a 700 nm) con una energa media de unas 49.74 kcalmol
-1

de fotones (aplicando la frmula de Plank) y teniendo en cuenta que la molcula de CO
2

reducida (CHOH) tiene una energa potencial de 114 kcal/mol, la eficiencia media sera de
28.64 %. Esto representara la eficiencia terica, ya que en la prctica sera bastante menor.

De todos modos, a pesar de tener esta eficiencia tan baja, si comparamos la energa
que se fija anualmente en la biomasa por los ecosistemas biolgicos (2.85 10
21
J) con el
consumo energtico de toda la humanidad, estimado en 0.37 10
21
J, se obtiene un ndice de
autosuficiencia de 7.5, lo que quiere decir que en la biosfera se produce anualmente el
equivalente a 7.5 veces de energa convencional que consume la Humanidad (FERNNDEZ-
GONZLEZ, 2009).



- 12 -
1.2.2.5. Importancia de la biomasa como fuente de energa a nivel mundial

La biomasa, dentro del grupo de las renovables es la fuente energtica que ms se
est utilizando en el mundo: 1,214 millones de toneladas equivalentes de petrleo (Mtep), que
es algo ms de un 10 % del consumo mundial de energa (datos del 2007). Evidentemente,
los pases en vas de desarrollo son los que ms biomasa consumen (65 %), pero en los pases
industrializados tambin se est consumiendo una parte importante que representa un 35 %
del total de la biomasa consumida en el mundo.

Petrleo 33.9%
Carbn 27.6%
Gas Natural 20.6%
Biomasa 10.1%
Nuclear 5.9%
Hidrulica 2.2%
Otros 0.7%


Fig. 4. Consumo mundial de energa en 2007. Ministerio de Industria, Turismo y Comercio
(2010).


Desde el punto de vista energtico, una de las ventajas que presenta la biomasa es la
posibilidad de satisfacer todas las necesidades energticas de la humanidad, desde el
transporte hasta la produccin de electricidad, calor o materias primas para la industria. En
efecto, mientras que la mayora de las energas renovables slo proporcionan calor o
electricidad, a travs de la biomasa se pueden obtener una gran variedad de combustibles
slidos, lquidos o gaseosos, desde los ms sencillos y cercanos como la lea sin procesar o
las astillas, hasta los ms elaborados, como podra ser el hidrgeno, que tambin se puede
obtener por va fotosinttica. Pelets, briquetas, alcoholes y biodiesel son ya combustibles que
resultan familiares por su implantacin gradual en la sociedad moderna.




- 13 -
1.2.2.6. Situacin del uso de la biomasa en Espaa

En la Fig. 5 se indica el consumo de energa primaria que se utiliza en Espaa,
referida a 2008, con indicacin especial de la participacin de las diferentes energas
renovables en la Fig. 6. Segn puede observarse, la biomasa en conjunto, incluyendo todas las
formas de bio-energa (biocarburantes, RSU y biocombustibles slidos) constituye el 53% del
total de la energa primaria aportada por las renovables.

Petrleo 47,9%
Gas Natural 24,5%
Nuclear 10,8%
Renovables 7,6%
Carbn 9,8%

Fig. 5. Consumo de energa primaria 2008. Contribucin por fuentes energticas (Ministerio
de Industria, Turismo y Comercio. Datos provisionales/IDEA, 2010


Hidrulica
Elica
RSU
Biomasa
Biogs
Biocarburantes
Geotermia
Fotovoltaica
Solar Termoelctrica
Solar Trmica
0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0
Consumo (%)


Fig. 6. Consumo de energas renovables. RSU, Residuos Slidos Urbanos. Ministerio de
Industria, Turismo y Comercio. Datos provisionales (2010).


- 14 -


1.2.2.7. Fuentes de biomasa

Segn FERNNDEZ-GONZLEZ (2009), hasta ahora, la fuente principal de
biomasa para su uso energtico han sido los residuos, principalmente para su empleo como
biocombustibles slidos. Aparentemente tienen muchas ventajas, porque estn acumulados,
parece que son gratis y con su utilizacin se reducen los problemas medioambientales,
principalmente los riesgos de incendios. Otro caso es el de las industrias que usan sus propios
residuos con fines energticos tal como ocurre con las industrias de pasta de papel o con las
derivadas de la madera. Estas industrias que requieren calor y energa elctrica han utilizado
tradicionalmente sus propios residuos para fines energticos, y ello les ha supuesto un
considerable ahorro, no slo en la factura energtica, sino en la eliminacin de los residuos.

Entre las biomasas residuales que se han venido utilizando para fines energticos
cabe destacar los residuos agrcolas, tanto de cultivos herbceos (paja) como de cultivos
leosos (podas), los residuos forestales procedentes de las operaciones de mantenimiento de
las masas forestales y de la corta y aprovechamiento de la madera en el monte, la fraccin
orgnica biodegradable de los residuos slidos urbanos, los restos de las industrias de la
madera y el mueble y los residuos de algunas agroindustrias, tales como las orejeras, y las de
frutos secos. El principal uso que se ha dado a estos residuos ha consistido en aplicaciones
para la calefaccin domstica, produccin de calor en industrias o para la produccin de
electricidad.

La alternativa a los residuos es la biomasa producida expresamente para fines
energticos, es decir, los cultivos energticos. Hasta ahora este tipo de planteamiento es el que
se ha venido utilizando para la produccin de biocarburantes (bioetanol y biodisel,
principalmente), pero con cultivos tradicionales dedicados a esta finalidad. As por ejemplo,
para la produccin de bioetanol se utiliza caa de azcar en Brasil, maz en los EEUU de
Amrica y remolacha y grano de trigo y cebada en Europa. Para la produccin de biodiesel se
est recurriendo a aceites vegetales baratos, principalmente aceites de colza, soja y palma.
Estos cultivos han tenido tradicionalmente otros usos, pero, ante la necesidad y la falta de
otras alternativas, se estn utilizando para fines energticos. En principio es la alternativa que
hay, pero son cultivos que han sido seleccionados para otra finalidad, y por tanto, adems de
tener aplicaciones alternativas, lo que puede provocar serios problemas de abastecimiento, no
estn optimizados para la finalidad energtica. Adems, la utilizacin de productos que se
emplean como alimentos para la produccin de carburantes puede utilizarse de forma
demaggica para impedir el desarrollo de biocarburantes por parte de los sectores no
interesados en el crecimiento de estos productos.

El empleo de cultivos tradicionales para usos energticos representa una etapa inicial
que no puede tomarse como definitiva en cuanto a las materias primas que se deben utilizar de
forma sostenible para usos energticos. Es indudable que, de entre las cerca de 250,000
especies de vegetales superiores que hay en la Naturaleza, pueden seleccionarse algunas que
estn mucho mejor adaptadas para producir biomasa utilizable con fines energticos que los
cultivos tradicionales que se estn utilizando en la actualidad, que fueron seleccionados para
la produccin de alimentos.



- 15 -
Precisamente uno de los objetivos principales de la actividad agroenergtica es el
desarrollo de nuevos cultivos seleccionados y con criterios especficos para la finalidad
energtica. Estos criterios pueden resumirse en los siguientes:

Adaptacin para desarrollarse en las tierras agrcolas no utilizadas en la actualidad
para los cultivos alimentarios.
Altos niveles de produccin con bajos requerimientos en inputs (principalmente en
agua).
Tener un balance energtico positivo, incluyendo en ste toda la cadena de
produccin del biocombustible.
Ser econmicamente viable.
Ser medioambiental y socialmente aceptables.
En definitiva deben ser cultivos que garanticen una actividad sostenible.

Como ejemplo de cultivos alternativos a la produccin de bioetanol por va
fermentativa directa se han realizado experiencias con el sorgo sacarino (Sorghum Bicolor) y
la pataca (Helianthus tuberosum) para zonas de regado, y con chumberas (Opuntia ficus-
indica) y tabaco arbreo (Nicotiana glauca) para zonas ridas. Para produccin de biodiesel
se estn considerando nuevas especies productoras de aceite, tales como la jatrofa (Jatropha
curcas), ricino (Ricinus communis), carinata (Brassica carinata) y diversas especies de algas
seleccionadas para esta finalidad.

Como cultivos seleccionados para produccin de biomasa lignocelulsica utilizable
como biocombustible slido para la produccin final de calor o de electricidad se consideran
cultivos de tipo leoso o herbceo. Adems de para produccin de biocombustibles slidos la
biomasa lignocelulsica es la materia prima para los biocarburantes de segunda generacin,
ya sean alcoholes obtenidos a partir de hidrolizados de celulosa o productos obtenidos por va
termoqumica.

Las plantaciones de especies leosas dedicadas a la produccin de biomasa tienen
una forma de cultivo especial, con densidades ms altas y turnos de corta ms cortos que
cuando se utilizan las mismas especies para la produccin de madera. Para esta finalidad se
utilizan las especies que tengan facilidad de rebrote despus del corte, que tengan un
crecimiento juvenil rpido y que aguanten fcilmente los cortes sucesivos. Se utilizan
densidades de plantacin variables entre 1 y 0.3 plantas por m
2
, y los turnos estn entre 2 y 6
aos. Especies que se consideran para esta finalidad son los chopos, sauces, eucaliptos, olmos,
acacias, etc.

Entre los cultivos herbceos que ms se han estudiado para el rea mediterrnea
destacan la caa (Arundo donax) y el cardo (Cynara cardunculus). Son cultivos capaces de
desarrollarse en tierras marginales y que tienen una muy alta eficiencia en el uso del agua,
debido principalmente a un gran desarrollo de su sistema radicular, que utiliza el agua de
lluvia en toda la profundidad del perfil del suelo. El cardo, adems de producir biomasa
lignocelulsica (de 10 a 20 t de materia seca por ha, segn la pluviometra de la zona),
produce semillas ricas en aceite anlogo al de girasol, que puede ser utilizado como materia
prima barata para la produccin de biodiesel.


- 16 -
1.2.3. Biocombustibles

Los biocombustibles son alcoholes, teres, steres y otros compuestos qumicos,
producidos a partir de biomasa, como las plantas herbceas y leosas, residuos de la
agricultura y actividad forestal, y una gran cantidad de desechos industriales, como los
desperdicios de la industria alimenticia.

La sustitucin de los combustibles denominados fsiles o tradicionales, derivados del
petrleo, por otros, de origen vegetal, cobra una gran importancia en nuestros das por varias
razones fundamentales, como el hecho de provenir de una fuente renovable, ser un
instrumento de lucha contra el deterioro medioambiental, adems de un factor de desarrollo
de la agricultura e industrias derivadas, y otros beneficios que sern desarrollados con
posterioridad (CAMPS et al., 2008).

Existen tres tipos de biocombustibles: slidos, lquidos y gaseosos.

1.2.3.1. Biocombustibles slidos

Dentro del grupo de los biocombustibles slidos, los ms importantes son los de tipo
primario, constituidos por materias lignocelulsicas, procedentes del sector agrcola o forestal
y de las industrias de transformacin que producen residuos de dicha naturaleza. La paja y los
restos de poda de vid, olivo y frutales, la lea, las cortezas y los restos de podas y aclareos de
las masas forestales son materia tpica para la elaboracin de biocombustibles slidos de
origen agrario.

Tambin las cscaras de frutos secos y huesos de aceituna y otros frutos, los orujillos
procedentes de la extraccin del aceite de orujo en las almazaras y los restos de las industrias
del corcho, la madera y el mueble, constituyen una buena materia prima para la fabricacin de
biocombustibles slidos.

Otro grupo de biocombustibles slidos lo constituye el carbn vegetal, que resulta de
un tratamiento trmico con bajo contenido en oxgeno de la biomasa leosa, pero al ser el
resultado de una alteracin termoqumica de la biomasa primaria, debe ser considerado de
naturaleza secundaria.

Aunque una parte importante de la biomasa se utiliza directamente, como por
ejemplo la lea en hogares y chimeneas, la utilizacin energtica moderna de los
biocombustibles slidos requiere un acondicionamiento especial. Las formas ms
generalizadas de utilizacin de este tipo de combustibles son astillas, serrn, pelets y briquetas
(CAMPS et al., 2008)













- 17 -
1.2.3.2. Biocombustibles lquidos

La denominacin de biocombustibles lquidos se aplica a una serie de productos de
origen biolgico utilizables como combustibles de sustitucin de los derivados del petrleo o
como aditivos de los derivados del petrleo o como aditivos de stos para su uso en motores.

Los biocarburantes son combustibles lquidos de origen biolgico, que pueden
sustituir a la gasolina o el gasleo, bien de manera total o bien de manera parcial, mediante
mezclas o como aditivos. En el caso de la gasolina, su sustitutivo es el bioetanol, compuesto
procedente de la fermentacin de los azcares y/o el almidn contenidos, principalmente, en
los cereales y la caa de azcar. En el caso del gasleo, el biodiesel se obtiene a partir del
procesamiento de aceites vegetales, tales como los procedentes de semillas de plantas
oleaginosas (colza, girasol, palma y soja, principalmente).

Ambos productos; es decir, el bioetanol procedente de cereales o azcar y el
biodiesel procedente de oleaginosas, son conocidos como biocarburantes de primera
generacin. Por su parte, los denominados biocarburantes de segunda generacin se obtienen
de una forma ms compleja a partir de biomasa lignocelulsicas. Esta biomasa puede
proceder de residuos de cultivos, subproductos de la industria alimentaria, subproductos
forestales, cultivos especficamente destinados a su obtencin (tales como Jatropha o Jojoba),
o incluso algas.

Los biocarburantes lquidos, al proceder de plantas cuyo crecimiento se basa en la
fijacin de CO
2
a travs de la fotosntesis, representan una alternativa al consumo del
petrleo, con capacidad potencial para mejorar la eficiencia energtica en el transporte y
reducir las emisiones de GEI. Adicionalmente, los biocarburantes pueden contribuir a reducir
la dependencia energtica del petrleo en pases altamente dependientes, como Espaa, al
tiempo que representa una alternativa de actividad productiva para el medio rural (GARRIDO
et al., 2009).

1.2.3.3. Biocombustibles gaseosos

Entre los biocombustibles gaseosos que se pueden obtener a partir de la biomasa
estn el gasgeno, el biogs y el hidrgeno.

Gasgeno

Al someter la biomasa (o el cisco y la brea resultantes de la pirolisis) a altas
temperaturas (entre 800 y 1,500 C) en ausencia de oxgeno, se originan productos gaseosos,
con un poder calorfico bajo (de 1,000 a 1,200 kcalm
-3
) consistentes, principalmente en N
2
,
CO, H
2
, CH
4
y CO
2
en proporciones variables. Este proceso se realiza en los llamados
gasgenos, que se utilizan con fines trmicos o, en combinacin con motores, para producir
energa mecnica o elctrica. En principio, el destino del gas de gasgeno suele ser la
produccin de calor por combustin directa en un quemador o la generacin de electricidad
por medio de un motor o turbina.

En la actualidad, los procesos de gasificacin avanzada, basados en sistemas de lecho
fluidizado, son los ms prometedores para la generacin de electricidad, con una alta
eficiencia en base a ciclos combinados de turbina de gas y ciclo de vapor. Para esta finalidad
es muy importante la obtencin de gases limpios.


- 18 -
Biogs

La digestin de la biomasa en condiciones anaerobias da origen al llamado biogs,
a razn de unos 300 Lkg
-1
de materia seca, con un valor calrico de unos 5,500 kcalm
-3
. La
composicin de biogs es variables, pero est formado principalmente por metano (55-65 %)
y CO
2
(35-45 %); y, en menor proporcin, por nitrgeno, (0-3 %), hidrgeno (0-1 %),
oxgeno (0-1 %) y sulfuro de hidrgeno (trazas).

El poder calorfico del biogs est determinado por la concentracin de metano
(9.500 kcalm
-3
), pudindose aumentar sta, eliminando todo o parte del CO
2
que le
acompaa.

Este tipo de transformacin se produce de manera espontnea en pantanos o fondos
de lagunas y lagos en los que haya depsitos de materia orgnica. Por este motivo al metano
se le ha llamado el gas de los pantanos. Tambin se producen en los vertederos de RSU,
pudindose obtener el gas mediante perforaciones.

El biogs se suele utilizar para generar electricidad. En el caso de los vertederos, su
uso para este fin tiene como ventajas aadidas la quema del metano y su transformacin en
CO
2
y agua. De esta forma se reduce el efecto perjudicial del metano como GEI (su potencial
de absorcin de la radiacin infrarroja es muy superior al del CO
2
). La digestin anaerobia es
un proceso tpico de depuracin, por lo que tambin se emplea para el tratamiento de aguas
residuales y efluentes orgnicos de industrias agrarias o de explotaciones ganaderas.

Hidrgeno

El hidrgeno se considera actualmente como un vector energtico de enorme
potencial. Su combustin produce agua y una gran cantidad de energa (27 kcalg
-1
), por lo
que resulta idneo para mltiples aplicaciones en la industria, el transporte y el hogar.

La obtencin del hidrgeno a partir de compuestos orgnicos hidrogenados, tales
como hidrocarburos o alcoholes, se realiza mediante un proceso denominado reformado.
Consiste en romper las molculas orgnicas en sus componentes elementales (carbono e
hidrgeno y eventualmente oxgeno) mediante reacciones con vapor de agua en presencia de
un catalizador. Entre las molculas orgnicas con posibilidad de ser la va limpia de obtencin
de hidrgeno destaca el bioetanol, que se puede obtener a gran escala a partir de biomasas
alcoholgenas (CAMPS et al., 2008)



- 19 -
1.2.3.4. Biocombustibles a partir de microalgas

Segn BIOPLAT (2010) existen diferentes biocombustibles a partir de algas:

Combustible directo para la produccin de calor y/o electricidad: su aplicacin es
difcilmente viable, ya que la pasta de algas obtenida tras el cosechado contiene un 80-90 %
de agua y un contenido en sales muy alto, que dificultan la combustin.

Hidrgeno: requiere la produccin de algas ricas en carbohidratos, las cuales bajo
determinadas condiciones de limitacin de oxgeno constituyen la fuente de energa para
procesos celulares de hidrlisis del agua y liberacin de hidrgeno. Es un proceso complejo
an en estudio a nivel de laboratorio.

Fermentacin alcohlica: la biomasa de las algas contiene carbohidratos que son
susceptibles de ser hidrolizados y fermentados a etanol mediante levaduras adecuadas. La
composicin de monosacridos de los carbohidratos presentes en las algas no es sencilla por
lo que estos procesos fermentativos deben ser an desarrollados para poder realizarse a nivel
industrial. Una alternativa a esta va es la produccin directa de etanol por algunas
cianobacterias, pudindose recuperar este etanol del medio.

SunCHem (metano y opcionalmente hidrgeno):

Procesado hidrotermal y reciclado del CO
2
a los fotobiorreactores con alta eficiencia
trmica (>70 %) en comparacin a la eficiencia trmica de los procesos
metanognicos por digestin anaerobia (25-35 %).
El proceso comienza a ser rentable a partir de un 15 % de peso seco de biomasa en el
concentrado, posibilitando el cosechado por filtracin (cianobacterias filamentosas
autofloculantes).
No precisa de la deshidratacin de la biomasa necesaria en los procesos termales
convencionales (90 % del peso seco) de gasificacin y metanizacin.
Tiempos de resistencia muy cortos (minutos), por lo que bastan reactores de pequeo
tamao y un footprint (rea neta ocupada) muy reducido, en comparacin con la
fermentacin anaerbica.
Posibilita un reciclado total de agua, nitrgeno, fsforo y CO
2
.

Diesel + Jet fuel: a priori parece poco rentable la estrategia de pretender generar lpidos
(diesel o jet fuel) directamente de microalgas. Lo ms adecuado sera que se plantease a travs
de procesos tipo Fischer-Tropsch a partir de una biomasa de algas rica en polisacridos. El
problema no es tanto producir lpidos, sino cmo extraerlos y procesarlos adecuadamente. La
gasificacin no genera combustibles lquidos sino gaseosos en forma de gas pobre o de
sntesis. Los combustibles lquidos son ms valiosos.










- 20 -
1.2.3.5. Efectos de los biocombustibles sobre el medio ambiente

Segn CAMPS (2005), afortunadamente, se tiende ya a dar al medio ambiente la
importancia debida. Una mayor produccin puede llevar a una sobreexplotacin y a la
degradacin de los recursos naturales. Los biocombustibles pueden ayudar a mejorar esta
situacin.

El inmejorable efecto de estos combustibles es la reduccin, en buena parte, de los
gases nocivos emitidos por los motores de combustin: monxido de carbono, hidrocarburos
no quemados, xidos de nitrgeno, dixido de azufre, compuestos voltiles, plomo, etc.

Se limitara, de este modo, el calentamiento global de la atmsfera debido al efecto
invernadero por culpa del dixido de carbono desprendido en la combustin de los derivados
del crudo.

1.2.4. Algas

Las algas constituyen un grupo de organismos fotosintticos muy diverso que han
colonizado una amplia variedad de ecosistemas acuticos y terrestres gracias a su alta
plasticidad y diversidad metablica. Las algas se pueden clasificar de acuerdo a su tamao en:

Microalgas: todo tipo de microorganismos fotosintticos, procariotas o eucariotas,
unicelulares o filamentosos, de tamao inferior a 0.02 cm.
Mesoalgas: microorganismos fotosintticos, procariotas o eucariotas, unicelulares o
filamentosos o coloniales, unialgal o plurialgal, con un rango entre 0.02 y 3 cm. Las
grandes diferencias en cuanto a tecnologas y costes de cosechado hacen conveniente
introducir este nuevo trmino.
Macrolagas: algas pluricelulares de diversas formas y tamaos que van de pocos
centmetros a varios metros de largo.

Se estima que hay de 30,000 a 100,000 especies de microalgas que incluyen
representantes tanto eucariticos como procariticos (cianobacterias o algas verde-azuladas).
Por otro lado, se considera que hay unas 15,800 especies de macroalgas repartidas entre
macroalgas rojas (6,000 especies), pardas (1,800 especies) y verdes (8,000 especies, de las
cuales 1,000 son especies marinas y el resto de agua dulce).

Las algas han sido empleadas como alimento humano en Oriente desde hace miles de
aos, y slo en el ltimo siglo se ha producido una intensa actividad investigadora
diversificando el uso de la biomasa de las algas, como pueden ser:


- 21 -


Ficocoloides: agar (agarosas), carragenatos, alginatos, ulvanos.
Alimento animal.
Biofertilizantes.
Biorremediacin.
Metabolitos secundarios (biomedicina).
Molculas de elevado contenido energtico: amoniaco, metano, hidrgeno y
alcoholes.
cidos grasos esenciales.
Exopolisacridos.
Antioxidantes.
Pigmentos.

Todos estos avances se han producido en el mbito de la ficotecnologa, considerada
como una rama de la biotecnologa que tiene a los vegetales marinos como principal objeto de
inters y que integra a la ficologa junto a la tecnologa (que incluye los desarrollos ms
recientes en biologa celular y molecular, ingeniera qumica, maricultura y otras disciplinas
relacionadas) con fines comerciales especficos. Dentro del concepto de ficotecnologa se
incluyen gran cantidad de bioprocesos a gran escala entre los que se encuentra el cultivo
intensivo de algas, utilizando desde sistemas abiertos con irradiacin natural hasta cultivos
heterotrficos en fermentadores cerrados (BIOPLAT, 2010).

1.2.5. Productos derivados de las algas

Debido a la existencia de una gran diversidad de especies de algas, stas pueden
producir una amplia variedad de productos. En este apartado se describen algunos de ellos, en
especial, aquellos que son relevantes desde el punto de vista de las energas renovables.

1.2.5.1. Biomasa

Hoy en da es posible secar la biomasa de las algas y quemarla directamente para
obtener calor y electricidad, o realizar procesos de alta temperatura y alta presin, como la
pirolisis, la gasificacin y la mejora hidrotermal (HTU) para producir combustible en forma
de gas o combustible lquido, respectivamente. Estos procesos requieren de biomasa seca. El
proceso de secado requiere una gran cantidad de energa, lo cual tiene un efecto negativo
sobre el balance energtico de dicho proceso y sobre los costes de los equipos necesarios.
(WIJFFELS, 2007).

Una forma bioqumica de procesar la biomasa es la digestin anaerbica. sta
produce biogs de la corriente hmeda y requiere un menor gasto de energa que los procesos
termoqumicos. El biogs contiene entre un 55 y un 75 % de metano, el cual, se puede quemar
para obtener calor y/o electricidad, y se puede mejorar para reemplazar al gas natural.

Algunos experimentos han mostrado que las microalgas al tener una pared celular
intacta resisten muy bien procesos como la fermentacin y consiguen que la energa
permanezca dentro de ellas. En muchos casos ser necesario un pretratamiento para romper
las paredes celulares. La digestin anaerbica es una tecnologa robusta y bastante


- 22 -
desarrollada. Esta tecnologa se aplica a residuos que contienen compuestos orgnicos, siendo
el precio de las materias primas muy bajo.

Teniendo en cuenta las limitaciones que tienen otros procesos de tratamiento celular,
la digestin anaerbica parece la ms factible (FAO, 2009).

1.2.5.2. Productos nicos

Existen muchas iniciativas para la produccin de energa a partir de algas. Algunas
de estas ideas han existido durante dcadas y otras estn actualmente en la fase piloto.
Sin embargo, el cultivo de algas se lleva a cabo en todo el mundo para producir productos de
gran valor econmico, superiores a la energa. En ocasiones se comercializa el alga entera,
pero a menudo se extraen compuestos que son muy difciles o imposibles de producir de otras
maneras. Algunos ejemplos de estos productos son: aditivos de alimentos, piensos para peces,
colorantes, cidos grasos omega-3, camarones y marisco, entre otros. Los precios de estos
productos pueden variar considerablemente (MOLINA et al., 2003).

1.2.5.3. Lpidos y biodiesel

Los lpidos son uno de los principales componentes de las microalgas; dependiendo
de la especie y de las condiciones de crecimiento, los lpidos pueden constituir entre un 2 60
% de la materia seca total como componentes de la membrana, productos de almacenamiento,
metabolitos y conservacin de la energa.

Los lpidos se pueden utilizar como combustible lquido adaptado a motores como
Straight Vegetable Oil (SVO). Los triglicridos y los cidos grasos libres (una parte del
contenido total de lpidos) se pueden convertir a biodiesel. En comparacin con los motores
SVO, el aceite de algas es insaturada en su mayor medida por lo que es menos apropiado para
la combustin directa en motores sensibles.

Con el fin de producir eficientemente biodiesel a partir de algas, se recomienda la
eleccin de cepas con alto nivel de crecimiento y alto contenido en aceite (FAO, 2009).


- 23 -


Tabla 1. Contenido en aceite de algunas especies de microalgas referido como porcentaje de
materia seca (MS).

ESPECIE ACEITE (% MS)
Botrycoccus braunii 25 75
Chlorella sp. 28 32
Crypthecodinium cohnii 20
Cylindrotheca sp. 16 37
Dunaliella primolecta 23
Isochrysis sp. 25 33
Monallanthus salina > 20
Nannochloris sp. 20 35
Nannochloropsis sp. 31 68
Neochloris oleoabundans 35 54
Nitzschua sp. 45 47
Phaeodactylum tricornutum 20 30
Schizochytrium sp. 50 77
Tetraselmis suecica 15 23

La acumulacin de lpidos en las algas ocurre generalmente durante los periodos de
estrs ambiental, o a lo que frecuentemente se hace referencia es al cultivo bajo deficientes
condiciones nutricionales. Esto implica renunciar a algo; un rpido crecimiento conlleva un
bajo contenido en lpidos en unas condiciones nutricionales ptimas, o por el contrario, una
disminucin del crecimiento o un crecimiento nulo conlleva un aumento de los lpidos bajo
condiciones nutricionales deficientes (FAO, 2009).

Por el contrario, un resultado bastante peculiar aportado por RODOLFI et al., 2009,
mostr una productividad casi constante y casi el doble del contenido en lpidos, hasta un
60%, despus de cambiar las condiciones nutricionales deficientes en un biorreactor piloto al
exterior bajo la luz natural.



- 24 -


Fig. 7. Proceso de obtencin de aceite a partir de microalgas (BIOPLAT, 2010).

1.2.5.4. Carbohidratos y etanol

El bioetanol se puede usar como un biocombustible que reemplace parte de los
combustibles fsiles derivados del petrleo. Actualmente el bioetanol se produce por la
fermentacin de azcares que en caso del maz se deriva de la hidrlisis del almidn. Con las
nuevas tecnologas, la celulosa y la hemicelulosa pueden ser hidrolizadas a azcares creando
la posibilidad de convertir una parte an mayor de materia seca de las algas en etanol
(HAMELINCK et al., 2005).

Las algas tienen algunas caractersticas beneficiosas en comparacin con la biomasa
leosa, el objetivo tradicional de esta tecnologa. Lo ms notable en la composicin de las
algas es la ausencia de lignina, haciendo que sea necesaria su retirada del material leoso
excedente. Adems la composicin de las algas es generalmente ms uniforme y consistente
que la biomasa de las plantas terrestres, debido a la falta de partes funcionales como las races
y hojas. Las paredes celulares de las algas estn mayoritariamente compuestas por
polisacridos que pueden ser hidrolizados a azcares. Otra tecnologa especfica para la
produccin de etanol est siendo desarrollada, en la cual las algas verdes estn genticamente
modificadas para producir etanol a partir de luz solar y CO
2
(DENG y COLEMAN, 1999).

1.2.5.5. Hidrocarburos

Botrycoccus braunii es conocida por su capacidad para producir hidrocarburos, los
cuales, de forma algo imprecisa, fueron descritos como el equivalente a la fraccin del crudo
que corresponde al gasoil (HILLEN et al., 1982).

Al igual que ocurre con el petrleo, estos hidrocarburos se pueden convertir en
gasolina, queroseno y gasleo. Mientras que otras especies suelen contener menos de 1 % de


- 25 -
hidrocarburos, B. braunii contiene entre un 20 y un 60 %, con mximos controlados de ms
del 80 %.

Dependiendo de la cepa, estos hidrocarburos son alquenos del C
30
al C
37
o alquenos
impares del C
23
al C
33
(RANGA y RAVISHANKAR, 2007).

Estos hidrocarburos se acumulan principalmente en el exterior de la clula lo que
hace ms sencilla su extraccin, en comparacin con la extraccin cuando se ha de atravesar
las paredes celulares para llegar a la materia orgnica del interior celular (WIJFFELS, 2007).

1.2.5.6. Hidrgeno

Como fuente de energa, el hidrgeno se considera una gran promesa como un
combustible lquido para el futuro, desde que puede ser utilizado en aplicaciones mviles con
el agua como nico producto de escape y sin emisiones de NO
x
cuando se usa en pilas de
combustible. Un gran inconveniente para la implantacin total de una tecnologa basada en el
hidrgeno es la ausencia de un mtodo sostenible a gran escala para la produccin del mismo.
Actualmente, el hidrgeno se produce por el proceso de transformacin del vapor de los
combustibles fsiles. La electrolisis del agua a gran escala tambin es factible, pero este
mtodo de produccin gasta ms electricidad que la que genera a partir del hidrgeno que
produce. La produccin biolgica de hidrgeno es posible; varias bacterias pueden extraerlo
en la oscuridad a partir de hidratos de carbono, un grupo denominado bacterias purpureas no
sulfurosas pueden utilizar la energa de la luz solar para extraer ms hidrgeno gas (H
2
) a
partir de una amplia gama de sustratos, mientras que las bacterias verdes sulfurosas pueden
producir H
2
a partir de H
2
O o partir de S
2
O
3
2-
. Estas opciones son nicamente interesantes si
se dispone de aguas residuales con estos componentes (RUPPRECHT et al., 2006).

Otras algas pueden producir hidrgeno directamente de la luz solar y del agua,
aunque slo en ausencia total de oxgeno. En la prctica, esto significa que la formacin de
hidrgeno solo es posible bajo condiciones en las que o hay una gran gasto de energa o se
evita el almacenamiento de energa solar y se requieren sistemas de cultivo cerrados
(KAPDAN y KARGY, 2006).

Por el momento solo es posible producir una parte del mximo terico que es 20 g
H
2
m
-2
/da
-1
, haciendo que la produccin de hidrgeno mediante algas a gran escala an no
sea viable. Para que esto cambie en el futuro, es necesario un mayor conocimiento de los
organismos que pueden producir hidrgeno y de las condiciones requeridas para ello, as
como la optimizacin de la ruta biolgica de energa solar a hidrgeno, a travs de la
modificacin gentica. Si estas mejoras se llevan a cabo, la produccin de hidrgeno
renovable ser rentable (MELIS y HAPPE, 2001).











- 26 -
1.2.6. Insumos del cultivo de algas

Adems de adquirir el producto de inters (algas), el cultivo de algas necesita de
ciertos inputs y outputs.

Para la produccin de energa es necesario el anlisis de estos productos para elegir
las opciones ms ecolgicas y econmicas.


1.2.6.1. Captura de CO
2


Como todos los organismos fotosintticos, las algas utilizan el CO
2
como fuente de
carbono. En ausencia de este compuesto el crecimiento se considera nulo, al igual que un
suministro insuficiente a menudo es el factor limitante de la productividad. Segn la
composicin qumica media de la biomasa de las algas, se necesitan 1.8 toneladas de CO
2

para producir una tonelada de biomasa. La disolucin natural de CO
2
del aire en el agua no es
suficiente. Se podra mejorar insuflando burbujas de aire en el agua, pero teniendo en cuenta
que el aire contiene un 0.0383 % de CO
2
, se necesitara todo el CO
2
disponible en 37,000 m
3

de aire para conseguir una tonelada de algas secas.

Otras opciones son: el uso de CO
2
puro, que es bastante caro o una fuente de residuos
de CO
2
, como pueden ser los gases de combustin de una caldera. Los gases de combustin
contienen entre un 4 y un 15% de CO
2
y son gratuitos o incluso beneficiosos si se dispone de
un esquema financiero para la prevencin de los GEI. El nico gasto es el suministro de la
fuente al sistema de cultivo que puede ser importante segn la distancia o la profundidad del
agua. El CO
2
solo es necesario durante el da, ya que las algas por la noche como cualquier
organismo aerbico producen CO
2
mediante la respiracin. (Una posible alternativa es la
disolucin en agua del CO
2
de los gases de combustin hasta su mxima concentracin por la
noche y aadir esta agua al sistema de cultivo durante el da). En el caso de los sistemas
abiertos, no todo el CO
2
suministrado ser absorbido, por lo que se suelen aadir los gases de
combustin en exceso. En principio todos los gases de combustin disponibles se pueden
aadir a los tanques de algas. Parte del CO
2
, NO
x
y SO
x
se disolvern, el resto se disiparn a
la atmsfera como sucede convencionalmente (FAO, 2009).

Despus de estudiar el cultivo de algas con gases de combustin, NEGORO et al.
public que el SO
2
y el NO
x
de los gases de combustin inhiban el crecimiento, pero unos
aos ms tarde se public que no haba apenas diferencias con el crecimiento con CO
2
puro
(NEGORO et al., 1991; NEGORO et al., 1993).

Adems el NO
x
disuelto puede ser utilizado por las algas como fuente de nitrgeno.
Los gases de combustin necesarios por hectrea diferirn segn la especie de alga utilizada y
tambin variarn a lo largo del da con la intensidad lumnica y con la temperatura, por lo que
ha de optimizarse para esta aplicacin. Hay que destacar que altas concentraciones de CO
2

disuelto (e incluso SO
2
) afectaran al pH por lo que deben ser controladas o tamponadas. La
solubilidad del CO
2
en sistemas de agua salada (pH ms alto) es mayor que cuando se utilizan
sistemas de agua dulce (FAO, 2009).



- 27 -
Tabla 2. Tolerancia al CO
2
de varias especies. Fuente: OILGAE (2008).

ESPECIE
CONCENTRACIN
MXIMA DE CO
2
(%)
Cyanidium celdanum 100
Scenedesmus sp. 80
Chlorococcum littorale 60
Synechococcus elongates 60
Euglena gracilis 45
Chlorella sp. 40
Eudorine sp. 20
Dunaliella tertiolecta 15
Nannochloris sp. 15
Chlamydomonas sp. 15
Tetroselmis sp. 14


- 28 -
Aunque el efecto estimulante sobre el crecimiento de algas por la adicin de los
gases de combustin al cultivo ya est demostrado, tiene los siguientes inconvenientes
(BIOPLAT, 2010):

La ausencia de grandes focos de emisin de CO
2
en las zonas geogrficas donde sera
posible implantar a gran escala la produccin de microalgas. Las industrias
generalmente no estn situadas en los lugares donde las condiciones climticas son
ideales para la ubicacin de plantas de produccin de algas. Los costes de transporte y
distribucin de los gases industriales hasta el sistema de cultivo seran demasiado
elevados, aunque actualmente se estn empezando a desarrollar sistemas de
canalizacin de CO
2
que podran reducir estos costes considerablemente.

La baja eficiencia en la captacin del CO
2
procedente de gases de combustin.

Necesidad de acondicionamiento previo de los gases.

Posibilidad de exceso de acidificacin, segn la composicin de gases.

1.2.6.2. Luz

Las algas requieren de la luz (solar) para realizar la fotosntesis y para su
crecimiento. Las algas absorben la luz; por lo tanto, cuanto mayor sea la concentracin de
algas, menos luz penetrar en el cultivo. Por lo tanto, todos los sistemas de cultivo de algas
son poco profundos y se optimizan para capturar tanta luz como le sea posible. La luz est
disponible en diferentes cantidades dependiendo del lugar geogrfico (Fig. 8 - Fig. 9). Solo
una parte (aproximadamente un 45 %) del espectro total es radiacin fotosintticamente activa
(PAR: 400 700 nm), por lo tanto, las algas pueden usarlo para la captura de CO
2
, durante la
fotosntesis, un proceso con una eficiencia mxima del 27 %, multiplicando estos dos factores
se obtendr el mximo terico de conversin de la energa lumnica a la qumica a travs de la
fotosntesis: aproximadamente un 11 % (GAO et al., 2007).

Por la noche o en condiciones de oscuridad, la fotosntesis no puede realizarse, por lo
que las algas consumen la energa almacenada para la respiracin. Dependiendo de la
temperatura y de otras condiciones, por la noche se puede llegar a perder hasta un 25% de la
biomasa producida durante el da (CHISTI, 2007).





- 29 -


Fig. 8. Niveles anuales medios de PAR (W/m
2
). Fuente: FAO (2009).





Fig. 9. Mapa de radiacin solar. Fuente: BIOPLAT (2010).

La Fig. 9 indica las regiones que presentan una mayor aptitud para el cultivo de
algas. Las zonas marcadas en rojo y amarillo son las localizaciones idneas para la
produccin de algas. El rea marcada en rojo recibe una radiacin directa de 2.500 3.000
kWhm
-2
al ao, y las regiones en amarillo reciben una radiacin directa de 2.000 2.500
kWhm
-2
al ao.





- 30 -
En la Fig. 10 se indican los lmites tericos de produccin mxima de microalgas en
fotobiorreactores, asumiendo las ms optimistas de las variables.




Fig. 10. Mapa mundial de produccin de biomasa de algas. Datos en tha
-1
ao
-1

(considerando una eficiencia fotosinttica del 5 % y 20 MJkg
-1
de biomasa seca).
Fuente: BIOPLAT (2010).


















- 31 -
1.2.6.3. Nutrientes

Adems de CO
2
y luz, las algas necesitan ciertos nutrientes para crecer, entre los ms
importantes destacan el nitrgeno y el fsforo. stos pueden ser suministrados en forma de
fertilizantes agrcolas (simples), que suelen estar disponibles, pero tambin pueden suponer
un factor de coste significativo (CHISTI, 2008).

Existen otras fuentes de nutrientes ms baratas. ARESTA et al., 2005 mencionan los
efluentes de aguas residuales; por ejemplo, de una pescadera, OLGUN et al., 2003 describen
un sistema donde el 84 96 % del nitrgeno y el 72 87 % de fsforo para el cultivo de algas
se aportaron por los efluentes anaerbicos de las aguas residuales de una pocilga, lo que
conllevo una disminucin de la eutrofizacin del medio ambiente. Otra opcin es el reciclaje
de nutrientes durante el proceso, dependiendo del tratamiento tecnolgico elegido. Por
ejemplo, el reciclaje de nutrientes despus de la digestin anaerbica o despus de la
gasificacin (MINOWA y SAWAYAMA, 1999).

La combinacin de nutrientes y luz, har posible que los organismos capaces de
realizar la fotosntesis produzcan clorofila en cualquier parte del mundo. Debido al reflejo de
la luz verde, las concentraciones de clorofila se pueden medir va satlite, lo cual es un buen
indicador de una mejor localizacin geogrfica para el cultivo de algas (sin fertilizar).

En la Fig. 11 se muestra un mapa mundo con la distribucin de clorofila. Con la
ayuda de GIS, Ecofys ha marcado en blanco las zonas costeras comprendidas entre 0 y 25 km
de la costa, en ubicaciones con al menos 5 mgm
-3
de clorofila. Esta franja estrecha representa
370 Mha mundiales de nutrientes naturales. La Unin Europea (UE) tiene 432 Mha.




Fig. 11. Niveles de concentracin de clorofila. Fuente: FAO (2009).


- 32 -
1.2.6.4. Temperatura

En las regiones templadas y subtropicales, las algas tienen una temporada de
crecimiento determinada; por ejemplo en los Pases Bajos va de Abril a Noviembre. En
invierno la temperatura exterior es muy baja y las algas solo crecen una pequea parte de la
tasa de crecimiento de verano. En muchos procesos industriales se produce calor. En
ocasiones este calor se usa en alguna otra etapa del proceso, para calentar viviendas u otros
edificios o en ocasiones se vende a industrias vecinas o cercanas. A menudo este supervit de
calor no tiene ningn uso.

Por otra parte, los sistemas cerrados pueden calentarse demasiado y requieren de
sistemas de refrigeracin, que se pueden hacer con intercambiadores de calor o con
pulverizaciones de agua en el exterior (FAO, 2009).

1.2.6.5. Cosechado de la biomasa de las algas

El problema de la produccin de algas para obtener biomasa no es tanto la
produccin, sino como cosecharla. En el caso de las microalgas, el cosechado de organismos
que miden entre 10 y 200 g, y que adems normalmente se cultivan a unas densidades de
cosechado bajas, es muy costoso tanto en equipos como en energa especialmente si la
tecnologa de cosechado se basa en la centrifugacin, como es el caso que actualmente se
sigue.






Fig. 12. Separador de algas ALFA LAVAL, modelo CH-36B GOF. Fuente: FAO (2009).






- 33 -
Segn BIOPLAT (2010), entre las tecnologas de cosechado disponibles que
actualmente se estn investigando, se encuentran:

Filtracin: aplicable a Mesoalgas, permite un ptimo reciclado del efluente.
Floculacin decantacin.
Nanopartculas.

A continuacin se muestra una imagen de un posible modelo de una granja de algas.





Fig. 13. Modelo a escala de una granja de algas. A, Tanques tipo raceways; B, lagunas de
sedimentacin; C, centrifugacin y estacin de bombeo y D, depsito de algas.
(Cotas en m).


- 34 -
1.2.7. Sistemas de cultivo de algas

Los sistemas de cultivo son muy diferentes entre macroalga y microalga. Debido a su
pequeo tamao (m) las microalgas han de ser cultivadas en sistemas diseados para tal fin
(colocadas en tierra o flotando en el agua), mientras que las macroalgas pueden ser cultivadas
en mar abierto.

La primera mencin sobre el cultivo de algas marinas se remonta a 1690, en Japn.
Japn y China siguen siendo los principales productores en el cultivo de algas marinas. stas
se utilizan principalmente como productores alimenticios, incluso consumo en fresco, o en
alimentos procesados como estabilizantes o emulsionantes. Adems del cultivo de algas
propiamente dicho, parte de la actual produccin de algas proviene de la recoleccin de
poblaciones naturales o de la recogida de algas que llegan a la playa. Estas prcticas, adems
de alterar el ecosistema, son claramente insostenibles para su aplicacin a gran escala. Por lo
tanto merece la pena considerar el cultivo de macroalgas bajo sistemas controlados.

En el caso de las microalgas, el desarrollo de sus sistemas de cultivo comenz en la
dcada de los cincuenta cuando se investigaron como una fuente de protenas alternativa
debido al incremento de la poblacin mundial. En aos posteriores se investigaron por los
compuestos de inters que producen, para convertir CO
2
en O
2
durante los viajes espaciales y
para la depuracin de aguas residuales. Con la crisis energtica de la dcada de los setenta, se
iniciaron las investigaciones de algas como fuentes de energa renovable.

Para el cultivo de algas existen unas pocas condiciones, relativamente simples, que
hay que conocer: luz, fuente de carbono, agua, nutrientes y un control adecuado de la
temperatura. A lo largo de los aos se han ido desarrollando una gran variedad de sistemas de
cultivo que satisfacen dichos requisitos, sin embargo, en sistemas a escala, el cumplimiento de
las condiciones se hace difcil. Un prerrequisito importante a la hora de cultivar algas para la
produccin energtica a nivel comercial es la necesidad de sistemas a gran escala que pueden
ir desde un simple sistema al aire libre en o a mar adentro, (lo cual expone al cultivo a las
condiciones medio-ambientales), hasta sistemas cerrados altamente controlados y tecnificados
(mucho ms caro). La tecnologa necesaria para desarrollar de forma rentable combustibles a
base de algas se encuentra todava en varios estados de desarrollo y la configuracin final an
no se ha determinado ni demostrado a nivel industrial (BUCK y BUCHHOLZ, 2004).

















- 35 -
1.2.7.1. Sistemas de cultivo abiertos

Los sistemas de cultivo al aire libre ms sencillos son los estanques superficiales. El
tamao vara desde unos poco metros cuadrados hasta 250 ha (Fig. 14 a y b). Se considera al
CO
2
la fuente de carbono para las algas. Su disolucin del aire al agua limita la tasa de
crecimiento, haciendo que el rendimiento por hectrea sea relativamente bajo. Otros
inconvenientes que presenta son la lenta difusin de los nutrientes y la flotacin y
sedimentacin de las algas, tanto vivas como muertas, lo que limita la disponibilidad en el
cultivo de la luz solar. Esto se puede evitar mediante ciertas formas de agitacin, las cuales,
en la prctica se llevan a cabo en estanques circulares con la ayuda de brazos mecnicos que
ejecutan movimientos circulares (Fig. 14 c), o ms comnmente en los llamados raceways
(Fig. 14 d), en los cuales, una rueda con paletas (Fig. 14 e) fuerza la circulacin del agua a lo
largo del estanque. Insuflar burbujas de gas a travs del medio proporciona tanto agitacin
(parte de la necesaria) como CO
2
. Se pueden aplicar al aire, CO
2
comprimido o CO
2-
que
contienen los gases de combustin. El mayor obstculo de estos sistemas abiertos es que casi
no hay ninguna posibilidad de controlar la temperatura (al menos que se disponga de un
sobrante barato como fuente de calor) y que son muy susceptibles a la invasin por parte de
depredadores de algas, parsitos o de otras cepas de algas que crecen mejor en las condiciones
aplicadas y por lo tanto son una fuente de competencia para la especie que se desea cultivar.
Solamente una limitada cantidad de especies es lo suficientemente dominante para mantenerse
en los sistemas abiertos (CHISTI, 2007).



- 36 -



Fig. 14. Ejemplos de cultivos de algas en diferentes sistemas abiertos: a, Estanque pequeo
de Spirulina; b, estanque de Dunaliella salina, Australia; c, estanque circular para el
cultivo de Chlorella en Taiwan; d, Raceways en California y e, estanque con rueda
de paletas. Fuente: FAO (2009).



- 37 -
1.2.7.2. Sistemas de cultivo cerrados

La temperatura, el intercambio de gases y los problemas de competencia pueden ser
corregidos con el cierre del sistema abierto mediante una cubierta transparente o un
invernadero, aunque de esta forma resulta un sistema caro cuando la superficie es grande.

Otro sistema, ms barato, sera el uso de bolsas o fundas de polietileno para el cultivo
en lotes o grupos (Fig. 15 a). Para tamaos que van hasta los 1000 L, aunque su sensibilidad a
las condiciones medioambientales y la corta esperanza de vida lo convierten a este sistema en
poco apropiado para su uso en exteriores (al aire libre). Tambin se han desarrollado sistemas
ms avanzados que utilizan materiales transparentes ms duraderos, como son: cristal,
polietileno y policarbonato. Estos reactores ofrecen un funcionamiento continuo, un alto nivel
de control y una elevada concentracin de biomasa, que se traduce en unas menores
necesidades de espacio y en menores costes de recoleccin por tonelada de alga. Un ejemplo
es la columna de burbujas, un reactor tubular vertical (Fig. 15 b). La extensin de estos
sistemas es limitada, ya que al poner varios sistemas, cerca unos de otros, se sobrearan entre
ellos (Fig. 15 c). Con la utilizacin de un reactor con tubos horizontales se elimina este
problema (Fig. 15 d-f). Sin embargo, este sistema tambin tiene sus propios problemas de
extensin: las algas consumen CO
2
y nutrientes y producen O
2
(que a concentraciones
elevadas puede inhibir el crecimiento de las algas) por lo que el crecimiento se puede
deteriorar a lo largo del tubo. Un incremento de la extensin se puede alcanzar mediante la
utilizacin de mdulos individuales con la optimizacin de la relacin tamao-longitud del
tubo. Para la optimizacin de la superficie receptora de la radiacin solar, se pueden usar
fotobiorreactores planos (Fig. 15 g). Potencialmente este sistema puede producir una gran
concentracin de biomasa, pero todava se est desarrollando. Las mayores dificultades son
conseguir un flujo continuo dentro del reactor y la extensin, aunque esta ltima ha sido
mejorada en gran medida con un diseo llamado panel de pared verde (green wall panel).

La Fig. 15 h muestra un fotobiorreactor plano en un panel solar (RODOLFI et al.,
2009).






Fig. 15. Ejemplos de cultivo de algas en diferentes sistemas: a, Cultivo de microalgas Big Bag; b, Reactor tubular vertical; c, Sombreado; d-
f, Sistema tubular de reactores; g, Fotobiorreactor plano experimental; h, Fotobiorreactor experimental con panel alveolar (FAO,
2009).


- 39 -
1.2.7.3. Sistemas de cultivo en alta mar

Histricamente, el desarrollo de las tcnicas de cultivo de algas marinas se ha basado
en zonas costeras poco profundas, protegidas, seguras, accesibles y que permiten una
inmovilizacin fcil del sistema de cultivo en el lecho marino. En general, las tcnicas
utilizadas son laboriosas por lo que las restringen a las regiones con bajos ingresos. Una
prctica corriente en determinadas zonas es la recoleccin de macroalgas (algas marinas) de
poblaciones naturales. Para la produccin de energa renovable, la produccin de macroalgas
no se basa en la recoleccin de dichas poblaciones naturales y por lo tanto se centra en el
cultivo de especies de algas que puedan sujetarse a cables submarinos o a estructuras
similares de soporte.

Ejemplos importantes de sistemas de cultivo adaptados a estas condiciones son
aquellos basados en cables verticales, que permiten a las algas cultivadas capturar toda la luz
disponible hasta la mxima profundidad a la que penetra la luz.; los basados en lneas
horizontales, los cuales, minimizan la cantidad de material necesario por unidad de superficie,
o sistemas hbridos, que combinan las lneas verticales y horizontales. En todos los casos, los
sistemas pueden ser flotantes, anclados en el mar o ambos. Existen informes que demuestran
que estos sistemas tienen varios problemas como los daos producidos en las estructuras de
los cables o problemas a la hora de recoger la biomasa producida, por lo que se ha de disear
sistemas que eviten estos problemas. En experimentos en el mar con el uso de anillos (de 5 m
de dimetro, 19.6 m
2
de superficie y unos 80-100 m de cuerda) con cuerdas como base de
sujecin de las algas, se obtuvieron los mejores resultados, sobre todo en situaciones de marea
alta o condiciones climticas desfavorables. Estos anillos pueden estar unidos entre s y/o al
fondo marino y pueden incluir fertilizantes de liberacin lenta. El mayor problema de este
sistema es que los anillos deben ser recogidos individualmente, lo que dificulta la reduccin
de costes. Para el cultivo de algas marinas a gran escala (miles de ha), un sistema de cultivo
que sea sencillo, de bajo coste, de bajo mantenimiento, que posea una gran captura de luz,
productividad, adaptacin a las condiciones climatolgicas, durabilidad y esperanza de vida y
que a la vez permita una sencilla recoleccin y replantacin es un gran reto y requiere de
mucha investigacin y desarrollo (BUCK y BUCHHOLZ, 2004).

A la hora de elegir una ubicacin para el cultivo de algas marinas, hay que tener en
cuenta varias consideraciones. Adems de la temperatura, los nutrientes, la luz y la
anteriormente citada competencia con otras fuentes del mar, la distancia a la costa (o distancia
hasta el puerto apropiado) son criterios muy importantes a tener en cuenta dado que implican
un gasto de energa y transporte. Las algas marinas vivas contienen alrededor de un 90 % de
agua por lo que su contenido en energa es relativamente bajo. El contenido de agua se puede
reducir donde se almacena la cosecha, realizando en sta una filtracin a presin, ya que de
esta manera se puede eliminar un 20 % de agua. Adems, es necesario investigar la necesidad
de tratar las aguas almacenadas que son liberadas. Otro criterio es la disponibilidad de
infraestructuras existentes mar adentro. Las plataformas petrolferas o de gas proporcionan un
punto de anclaje, puertos y helipuertos, alojamiento para el personal y en algunos casos
conducciones de tuberas hasta tierra firme que se podran convertir en sistemas para el
bombeo de algas o biogs hacia tierra firme o incluso CO
2
o aguas residuales ricas en
nutrientes hacia los emplazamientos del cultivo. Incluso los parques o plataformas en mar
adentro de aerogeneradores poseen una cantidad de espacio sin usar considerante entre las
turbinas (la distancia entre las turbinas es siete veces la longitud de las aspas del rotor) que se
limitan o los buques de mantenimiento. Las turbinas proporcionan anclaje y posee un


- 40 -
embarcadero individual y en el caso particular de las algas se podra convertir in situ en
electricidad (parcialmente), o si se necesitase electricidad para las primeras etapas del proceso
estara disponible una conexin a la red elctrica (FAO, 2009).

1.2.7.4. Sistemas de cultivo adecuados para la produccin de energa mediante algas

La energa es un producto de bajo valor. Los elevados precios del petrleo son del
orden de decenas de cntimos de L
-1
, la biomasa de las algas que se destina a alimentos
saludables y a cosmticos puede llegar a costar miles de kg
-1
. Esto significa que el cultivo
de algas debe ser tan barato como sea posible con el fin de que su conversin o portadores de
energa sean econmicamente factibles.

Los actuales sistemas de cultivo de micro y macroalgas facilitan los conocimientos y
experiencias sobre el cultivo pero no suplen los precios de produccin de la biomasa para
poder competir con otras fuentes de energa (renovables o no renovables). Se han de optimizar
los sistemas para minimizar las aportaciones financieras y energticas, para reducir los precios
de produccin se debe emplear una economa a escala, adems se deben obtener ingresos
extra o adicionales de otras fuentes que no sean estrictamente las provenientes de la energa
de las algas, a travs de la co-produccin o tratamiento de los flujos residuales (FAO, 2009).
































- 41 -





Tabla 3. Comparacin entre sistemas de algas abiertos y cerrados. Fuente: FAO (2009).

Parmetros Estanques abiertos y canales Fotobiorreactores
Espacio requerido Alto Bajo
Prdida de CO
2

Muy alto, puede causar la
precipitacin de sales
Bajo
Concentracin de O
2

Baja debido a la
desgasificacin espontnea
continua
La acumulacin en un sistema
cerrado requiere dispositivos de
intercambio de gases
Temperatura Altamente variable A menudo requiere refrigeracin
Limpieza
No existen problemas de
limpieza
Requiere
Riesto de contaminacin Alto Medio-Bajo
Calidad de la biomasa Variable Reproducible
Concentracin de biomasa Baja, entre 0.1-0.5 g/l Alta, entre 0.5-0.8 g/l
Flexibilidad de produccin Solo unas pocas especies Alta, posible cambio
Control de proceso y
reproducibilidad
Limitado
Posible dentro de ciertos limites
de tolerancia
Tiempo de dependencia Limitado
Media (necesaria intensidad de
luz y refrigeracin)
Puesta en marcha 6 - 8 semanas 2 - 4 semanas
Capital Alto, 100.000 $ por ha
Muy alto, 250.000 - 1.000.000 $
por ha
Costes de operacin Bajo
Alto (en especial el
mantenimiento)
Costes de recoleccin Alto, depende de las especies Inferior debido a un mejor control




- 42 -
1.3. Objetivos

Este trabajo se ha realizado sobre un cultivo de la microalga Nannochloropsis
gaditana realizado en un biorreactor de medio poroso (geotextil). La eleccin de esta especie
de alga se ha debido fundamentalmente a su ptimo contenido en aceite y a su buena
adaptacin al medio de cultivo utilizado.

Los objetivos perseguidos son:

1. Implantar el cultivo de la microalga Nannochloropsis gaditana en dos tipos de
cultivo. Un cultivo sin CO
2
y otro cultivo con concentraciones altas de CO
2
,
similares a las que se producen en un motor de combustin, para poder realizar
una comparativa de ambos cultivos.

2. Comprobar la viabilidad del cultivo de Nannochloropsis gaditana con
concentraciones de CO
2
.

3. Obtener biomasa de los cultivos de Nannochloropsis gaditana realizados
mediante centrifugacin de los mismos.

4. Obtener la curva de cultivo de la especie elegida con el clculo del contenido en
clorofila por espectrofotometra.

5. Realizar un seguimiento de diferentes parmetros, como la temperatura, pH,
potencial redox, conductividad elctrica, oxgeno disuelto, presin y slidos
disueltos totales mediante un sensor multiparamtrico, HANNA Instruments
(mod. 9828).

6. Iniciar el camino a la produccin de biocombustible a partir de la biomasa
obtenida en el cultivo de algas.




















MATERIAL Y MTODOS


- 44 -
2. MATERIAL Y MTODOS

En este apartado vamos a describir con precisin cada material utilizado en el TFC al
igual que todos los mtodos que hemos ido realizando para el desarrollo de dicho TFC.

2.1. Sistema de cultivo

Existen diferentes sistemas de cultivo empleados en el crecimiento de microalgas que
ya han sido descritos anteriormente.

2.1.1. Biorreactor de medio poroso (geotextil)

En este TFC el sistema de cultivo utilizado es un biorreactor de medio poroso
(geotextil) ubicado en el laboratorio del Departamento de Produccin Vegetal: Fitotecnia.

El biorreactor (Fig. 16) est compuesto por diferentes elementos elaborados cada uno
con diferentes materiales que detallaremos a continuacin:

1. Recipiente con forma rectangular, elaborado con copolister de polietileno-
tereftalato glicol (PETG).

2. En el lateral izquierdo consta de seis prensaestopas para la introduccin de
sensores y tres llaves para intercambio de gases / lquidos.

3. Consta tambin de una tapa elaborada con PETG que va unida al biorreactor por
catorce tornillos. En el centro de la misma se encuentra un tapn para introducir
el sensor multiparamtrico. Adems cuenta con otras cuatro llaves.

4. A su vez estas llaves estn elaboradas con un material de plstico denominado
acrilonitrilo butadieno estireno (ABS).

5. La base del biorreactor est hecha de policloruro de vinilo (PVC).

6. Dentro del biorreactor est colocado el medio poroso.

A continuacin se muestran varias fotografas (Fig. 16 - Fig. 17) en las que se
plasman cada uno de los elementos que componen este biorreactor de medio poroso. Adems
tambin se incluye un plano de dicho biorreactor con lo ms relevante enumerado
correspondientemente.







- 45 -






Fig. 16. Biorreactor de medio poroso (geotextil) con cultivo de Nannochloropsis gaditana.





- 46 -









































Fig. 17. Biorreactor de medio poroso: A, Vista del biorreactor desde un lateral y B, lateral
izquierdo del biorreactor.
A
B


- 47 -


798
5
3
5
885
2
4
0
160
1
2
4
3
5
6
7
7
7
7
8
9
8
8



Fig. 18. Plano del biorreactor al detalle. 1, Inyeccin de CO
2
; 2, Tapn para sensor
multiparamtrico; 3, Tubera de exudacin; 4, Flujo de inculo / medio de cultivo;
5, Lmina de geotextil; 6, Biomasa; 7, Prensaestopas para introduccin de sensores;
8; Llaves para intercambio de gases / lquidos y 9, Bomba de circulacin sumergida.
Cotas en mm.


- 48 -

2.1.2. Medio poroso (geotextil)

El medio poroso (geotextil) utilizado para los diferentes cultivos es lo que
comnmente denominamos entretela, tejido usado en el sector textil y de confeccin. La
superficie utilizada de tejido geotextil fue de 75 cm x 84 cm.

2.1.3. Bomba

La bomba utilizada en este TFC es una bomba de circulacin, silenciosa, potente,
fiable y econmica que tiene las siguientes caractersticas:

- Caudal: 600 Lh
-1

- Altura mxima (H-max): 1 m
- Consumo: 8 W
- Voltaje: 230 V
- Frecuencia: 50 Hz



















Fig. 19. Bomba de circulacin: A, Imagen detallada de la bomba y B, imagen completa de la
bomba funcionando dentro del biorreactor.


El periodo de funcionamiento de la bomba es cada 15 minutos (min), es decir,
funciona 15 min y descansa los siguientes 15 min. Estos periodos estn regulados por un
temporizador que hace de puente entre la bomba y la corriente de luz.



B
A


- 49 -
2.1.4. Baln

Para introducir tanto los gases de escape provenientes del generador como el CO
2

puro se ha utilizado un baln de plstico de un volumen de 15 litros (L) aproximadamente. En
los cultivos realizados con aportacin de CO
2
, cada da se repona un baln.

El baln va incorporado al biorreactor por la parte de arriba, conectado a una vlvula,
(Fig. 20).






Fig. 20. Baln conectado al biorreactor por la parte superior del mismo: A, Imagen detallada
y B, imagen completa del biorreactor y el baln.


A B


- 50 -
2.1.5. Biorreactor tubular vertical

En el Centro Tecnolgico REPSOL (CTR) ubicado en la localidad madrilea de
Mstoles se llevaron a cabo cultivos de Nannochloropsis gaditana en un biorreactor tubular
vertical para la produccin de biomasa. Los resultados de estos cultivos se detallarn en el
captulo de Resultados y Discusin para realizar una comparativa con los resultados obtenidos
con el biorreactor de medio poroso (geotextil).

Dicho biorreactor se encuentra en el invernadero del Centro Tecnolgico REPSOL.



Fig. 21. Biorreactor tubular vertical vaco del Centro Tecnolgico REPSOL (CTR).


- 51 -



Fig. 22. Biorreactor tubular vertical del Centro Tecnolgico REPSOL con cultivo de
Nannochloropsis gaditana.


- 52 -
2.2. Especie Cultivada

Nannochloropsis gaditana sp, es el nombre de la microalga utilizada en este TFC.
Segn LUBIAN (1982), su clasificacin taxonmica es:

2.2.1. Clasificacin taxonmica

Phylum: Eustigmatophyta
Clase: Eustigmatophyceae
Familia: Monodopsidiaceae
Gnero: Nannochloropsis
Especie: N. gaditana

2.2.2. Morfologa y ultraestructura

Las clulas de Nannochloropsis gaditana, cuando la poblacin algal est en fase de
crecimiento activo, presentan una forma elipsoidal de 3,5-4 x 2,5-3 . Son inmviles,
desprovistas de flagelos y poseen un cromatforo sencillo parietal de color verde plido que
ocupa gran parte de la clula. El citoplasma es fuertemente basfilo y el tratamiento con
Negro Sudn B pone en evidencia una gran acumulacin de lpidos. Adems se observa un
glbulo extraplastidial, de color rojo, sobre todo en cultivos envejecidos. La pared celular es
lisa y formada por una sola pieza. En ninguna caso se han detectado zoosporas ni formas de
resistencia y la reproduccin se realiza exclusivamente mediante fisin binaria de las clulas.

La ultraestructura an no se ha podido analizar con detalle debido principalmente a
que es difcil conseguir una fijacin ptima del material celular. El cloroplasto, que ocupa la
mayor parte de la clula, contiene una serie de laminillas paralelas formadas por tres
tilacoides cada una y carece de laminilla envolvente. Asimismo su envoltura est formada por
cuatro membranas, de las cuales las dos exteriores corresponden al retculo endoplasmtico.
Aunque no se ha podido confirmar definitivamente, ste parece conectar con la membrana
nuclear.



- 53 -




















Fig. 23. Esquema representativo de las principales caractersticas ultraestructurales de
Nannochloropsis gaditana: C: cloroplasto; MP: membrana plasmtica; N: ncleo; M:
mitocondria; RED: retculo endoplasmtico asociado al cloroplasto; T: tilacoides;
PC: pared celular; V: vacuolas; L: lpidos y P: glbulos plastidiales. Fuente:
LUBIAN (1982).





Fig. 24. Imagen al microscopio de Nannochloropsis gaditana.



- 54 -

2.2.3. Composicin de pigmentos

Al igual que el resto de Eustigmatophyceae, N. gaditana presenta clorofila a, -
caroteno, violaxantina como carotenoide mayoritario y vaucheriaxantina. Los cultivos de este
organismo tienen color verde durante la fase exponencial de crecimiento, pero conforme
envejece se vuelve amarillento y llega a ser de color naranja-rojo. Este cambio ocurre ms
rpidamente en ausencia de nitrgeno o frente a una alta radiacin lumnica y es entonces
cuando se hace especialmente patente en las clulas el glbulo coloreado indicado
anteriormente. Dicha inclusin parece ser una acumulacin de cetocarotenoides.

2.2.4. Caractersticas fisiolgicas

N. gaditana es auttrofa y no requiere vitaminas para su crecimiento. Si se le
suministra nitrato, nitrito, amonio o urea como fuentes de nitrgeno, a una concentracin en el
medio de cultivo de 0,5 mg-tomo de NL
-1
, se obtiene un crecimiento ptimo con los tres
primeros compuestos, mientras que ste es sensiblemente menor con urea. Adems de fosfato
inorgnico, N. gaditana puede utilizar glicerofosfato como fuente alternativa de fsforo, y de
hecho poseen actividad fosfatsica alcalina.

Frente a factores como la salinidad, temperatura e intensidad lumnica tolera un
amplio rango de salinidades, y la intensidad saturante de luz es bastante baja. Esto es debido
probablemente a la presencia de una sola clorofila, lo que confiere una menor estabilidad al
aparato fotoqumico en presencia de altas intensidades de luz.



- 55 -
2.3. Medio de cultivo

El medio de cultivo elegido es el medio Guillard F/2 (GUILLARD y RYTHER,
1963). El motivo de esta eleccin es porque dicho medio es el utilizado por el autor del
aislamiento de Nannochloropsis gaditana (LUBIAN, 1982), que es la especie con la que
trabajamos. La frmula de preparacin del medio de cultivo Guillard F/2 es la siguiente:

Es necesaria la elaboracin de cuatro tipos de disoluciones:

Solucin de nitrato sdico (NaNO
3
)
Solucin de NaH
2
PO
4

Solucin de metales traza
Solucin de vitaminas

A su vez, la disolucin de Metales Traza est compuesta por tres disoluciones:

Na
2
EDTA
FeCl
3
6 H
2
O
Metales primarios

La disolucin de metales traza primarios est formada por cinco reactivos diferentes:

CuSO
4
5 H
2
O
ZnSO
4
7 H
2
O
CoCl
2
6 H
2
O
MnCl
2
4 H
2
O
NaMoO
4
2 H
2
O

Y la disolucin de vitaminas est constituida por tres soluciones:

Biotina
Vitamina B
12

Tiamina HCl




- 56 -
Las cantidades necesarias de cada disolucin para 1 L de medio cultivo son las
siguientes:

Tabla 4. Cantidades de las disoluciones expresadas en gL
-1
del medio Guillard F/2
(GUILLARD y RYTHER, 1963).





- 57 -
Para realizar todas las disoluciones se han utilizado cuatro frascos Pyrex de 1 L de
capacidad y cinco de 100 mL.























Fig. 25. Imagen de las diferentes soluciones del medio de cultivo Guillard F/2 (GUILLARD
y RYTHER, 1963).

En todas las disoluciones es obligatorio utilizar agua esterilizada y desionizada. Para
esterilizar el agua, se ha utilizado un autoclave RAYPA.



- 58 -
2.3.1. Autoclave

En esencia, el autoclave (Fig. 26) es un recipiente en el que se consigue exponer el
material a esterilizar a temperaturas superiores a la de ebullicin del agua, gracias al aumento
de la presin. El proceso completo de esterilizacin se compone de diferentes fases:

Fase de purgado. A medida que la resistencia calienta el agua del fondo del caldern, se va
produciendo vapor que desplaza el aire, hacindolo salir por la vlvula de purgado que est
abierta. Esta fase termina cuando se alcanza la temperatura de esterilizacin.

Fase de esterilizacin. Una vez cerrada la vlvula de purgado y alcanzada la temperatura de
esterilizacin previamente seleccionada se inicia el proceso de esterilizacin.

Fase de descarga. Terminado el proceso de esterilizacin, deja de funcionar la resistencia
calefactora, con lo que deja de producirse vapor y la presin y temperatura del caldern
empiezan a bajar poco a poco.




Fig. 26. Autoclave RAYPA utilizada para la esterilizacin del agua utilizada para preparar las
disoluciones del medio Guillard F/2 (GUILLARD y RYTHER, 1963).


- 59 -
2.4. CO
2


En el cultivo en el cual ha habido aportacin de CO
2
, su origen proviene de los gases
de combustin de un generador (Fig. 27) de gasolina HONDA (mod. EX 7).

2.4.1. Gases de combustin

Los gases procedentes de la combustin aportan prcticamente el 100 % de
productos contaminantes tales como el monxido de carbono, xido de nitrgeno, etc. y el 55
% de los hidrocarburos sin quemar (HC).

2.4.2. Principales productos contaminantes de los gases de escape

En el caso de la combustin de un combustible formado nicamente por
hidrocarburos y oxgeno se producen solamente dos productos no contaminantes CO
2
y H
2
O.
En los gases de escape de los motores existen adicionalmente como consecuencia de una
combustin incompleta H
2
(no contaminante) y CO, as como hidrocarburos sin quemar o
parcialmente quemados, entre los que cabe destacar:

Hidrocarburos no quemados:
C
n
H
m
(parafinas, olefinas, materias aromticas)
Hidrocarburos parcialmente quemados:
C
n
H
m
CHO (aldehdos)
C
n
H
m
CO (cetonas)
C
n
H
m
COOH (cidos carbnicos)
A esto se ha de aadir los productos de la oxidacin del nitrgeno del aire
atmosfrico, NO y NO
2
. Los motores Diesel producen adems humos.
Teniendo en cuenta por otro lado los contaminantes procedentes del azufre que posee los
combustibles, as como los aditivos antidetonantes aadidos, los cuatro contaminantes ms
importantes son el monxido de carbono (CO), los xidos de nitrgeno (NO
x
), los
hidrocarburos sin quemar (HC) y los humos.

Analizaremos a continuacin los distintos productos contaminantes:

Monxido de carbono (CO): El monxido de carbono es un producto intermedio
de la combustin de un hidrocarburo. Para dosados relativos prximos a la unidad,
la formacin de CO en la combustin se debe fundamentalmente a la disociacin
del CO
2
. Cuando la presin y la temperatura dentro de la cmara de combustin
son elevadas, el equilibrio de la ecuacin:
CO
2
CO + O
2

est desplazado hacia la derecha. Al disminuir la presin y la temperatura en el
proceso de expansin y posteriormente en el proceso de escape, el equilibrio se
desplaza hacia la izquierda. Sin embargo, si el dosado relativo es mayor que la
unidad, hay escasez de oxgeno, por lo que no puede llevarse a cabo la
recombinacin total. Para mezclas pobres siempre hay una pequea cantidad de
CO puesto que el proceso de recombinacin tiene una cierta inercia, y no da


- 60 -
tiempo a que la totalidad del CO se oxide a CO
2
, dado los procesos de expansin
y escape son relativamente rpidos.

xidos de nitrgeno (NO
x
): Las altas temperaturas tienen una gran influencia en
la formacin de xido de nitrgeno; pero en un motor de encendido provocado
(MEP) el valor mximo de la concentracin de NO
x
no se encuentra para dosados
con mxima temperatura de combustin (F
R
= 1.05), sino que se halla en la zona
de mezclas pobres (F
R
= 0.91) ya que en la formacin de NO
x
se requiere tanto de
una temperatura elevada como de una concentracin suficiente de oxgeno. Las
reacciones de formacin del CO y NO
x
se diferencian notablemente por su
velocidad (cintica). El mecanismo ms aceptado actualmente para la formacin
de NO es el conocido generalizado de Zeldovich, que postula las siguientes
reacciones:
O
2
2 O
N
2
+ O NO + N
O
2
+ N NO + O
OH + N NO + H

Las reacciones discurren tan lentamente, que incluso con temperaturas elevadas
de los gases reaccionantes no se llega a un estado de equilibrio.

Hidrocarburos sin quemar (HC): Los hidrocarburos sin quemar pueden
formarse por las siguientes razones:

Combustin incompleta (flame quenching)
Efecto pared (wall quenching)
Cortocircuito de la carga fresca
Para mezclas ricas y mezclas pobres, aumenta la cantidad de hidrocarburos sin
quemar, debido a que el proceso de combustin no se desarrolla en buenas
condiciones, y se puede dar el apagado de la llama (combustin incompleta). Para
mezclas ligeramente pobres, donde existe exceso de oxgeno y la temperatura
todava es elevada, la aparicin de HC en el escape es mnima, puesto que stos se
oxidan, aunque slo sea parcialmente (formacin de CO), en el colector y tubo de
escape.

El efecto pared tiene una gran importancia en la generacin de hidrocarburos sin
quemar. La mezcla de aire y combustible que est en las proximidades de la
superficie de la culata, pistn y cilindro, tiene una gran facilidad para ceder calor,
por lo que no alcanza una temperatura suficiente, y la llama no progresa,
detenindose a una cierta distancia de la superficie. El huelgo entre la pared y el
frente de llama es una funcin de la presin y temperatura en la cmara de
combustin y de la capacidad de evacuar calor de la mezcla en contacto con la
pared.

Tambin en el huelgo radial existente entre el pistn y el cilindro ocurre un
fenmeno anlogo al anterior, ya que debido al pequeo espesor de la pelcula de
aire y combustible, no se alcanzan las condiciones necesarias para que se efecte
la combustin.


- 61 -
La mezcla sin quemar es arrastrada durante el proceso de escape, pudiendo
reaccionar y quemarse parte de los HC.

El cortocircuito de la carga fresca es apreciable en los MEP de cuatro tiempos con
un gran cruce de vlvulas. Pero es en los MEP de dos tiempos donde adquiere una
gran importancia, debido a la fuga de carga fresca que hay en el proceso de
barrido con diagramas de distribucin simtricos. Aunque se han propuesto
soluciones, esta circunstancia hace que el futuro del motor dos tiempos sea
bastante incierto.

Las emisiones de HC en un MEP se componen fundamentalmente de:

Alcanos (parafinas): Metano, etano
Alquenos (olefinas): Eteno, propeno
Aromticos: Benzol, toluol, etil-benzol, aldehdos aromticos
polinucleares.

De todos ellos, estn considerados como mayores contaminantes el benzol y los
aromticos polinucleares, al ser cancergenos.

Emisiones de plomo: El plomo tetraetilo (PbC
8
H
20
) empez a utilizarse como
aditivo para la gasolina en 1920 en los Estados Unidos, y desde entonces
prcticamente todas las gasolinas lo contienen en mayor o menor proporcin para
aumentar su nmero de octano.
Durante el proceso de combustin el plomo tetraetilo reacciona dando, entre otros
compuestos, xidos de plomo que se depositan en vlvulas, bujas y paredes de la
cmara de combustin, afectando al buen funcionamiento del motor debido
fundamentalmente a la aparicin de puntos calientes. Con el fin de evitar la
formacin de estos depsitos, junto con el plomo tetraetilo se aaden compuestos,
entre los que cabe destacar el dibromuro de etilo (Br
2
C
2
H
4
) que se combinan
durante el proceso de combustin dando productos voltiles (bromuro de plomo),
que son los que aparecen en los gases de escape del motor.

xidos de azufre (SO
2
): Provienen de la oxidacin del azufre que contiene el
combustible. La cantidad emitida es, evidentemente, funcin de la cantidad de
azufre que posea el combustible. Mientras que el contenido de azufre de las
gasolinas es muy bajo (generalmente menor que 0.1 %) y por tanto las emisiones
de SO
2
en los MEP tienen poca importancia, en los gasleos (en automocin hasta
0.5 %) estas emisiones si son importantes.

Aldehdos (R-COH): Son productos formados como consecuencia de la
oxidacin parcial de los HC.


- 62 -
2.4.3. Generador elctrico

Mediante un generador Honda (800 W) producimos los gases de combustin que se
almacenan en un baln (15 L) para enriquecer el aire en CO
2
(10 15 %) con el que se
cultivan las algas unicelulares (Nannochloropsis gaditana). El combustible utilizado es
gasolina; por lo tanto, los gases de escape, adems de CO
2
contienen otros gases. (Tabla 7).



























Fig. 27. Generador elctrico Honda (mod. EX 7)
utilizado para proporcionar los gases de
combustin.











Modelo:

Motor: GXH 50
Cilindrada: 50 c.c.
Potencia (kw/cv): 1/2
Arranque: Manual
Depsito de carburante: 1,2 L
Autonoma: 4.5 h

Generador

Salida constante monofsica: 600 VA
Salida mxima monofsica: 700 VA
Corriente continua: 12,0/6,0 V/A
Regulacin de voltaje: Cyclo-
converter
Nivel sonoro (Lwa): 83

Dimensiones

Altura: 38 cm
Anchura: 24 cm
Longitud: 45 cm
Peso (en seco): 12 Kg


- 63 -
2.4.4. Emisiones de automocin, generador elctrico y refinera

A continuacin se exponen las emisiones de automocin, las emisiones de un
generador elctrico y las emisiones de la planta de refinera de REPSOL:

Tabla 5. Lmites de emisiones segn la normativa Euro 5, expresados en gL
-1
. PI, encendido
por chispa; CI, encendido por compresin, CO, monxido de carbono; HCT,
hidrocarburos no metanos, NO
x
, xido de nitrgeno y MP, masa de partculas.





Categora Clase
Masa de
referencia
(kg)
Valores lmite
Consumo (L100 km
-1
)
5.0 6.0 7.0
M

T
o
d
o
s

CO
PI 20.0 16.7 14.3
CI 10.0 8.3 7.1
HCT
PI 2.0 1.7 1.4
CI
HCNM
PI 1.4 1.1 1.0
CI
NO
x

PI 1.2 1.0 0.9
CI 3.6 3.0 2.6
MP
PI
(1)
0.1 0.1 0.1
CI 0.1 0.1 0.1
N
1

I
M
R
<
1
3
0
5

CO
PI 20.0 16.7 14.3
CI 10.0 8.3 7.1
HCT
PI 2.0 1.7 1.4
CI
HCNM
PI 1.4 1.1 1.0
CI
NO
x

PI 1.2 1.0 0.9
CI 3.6 3.0 2.6
MP
PI
(1)
0.1 0.1 0.1
CI 0.1 0.1 0.1
II
1
3
0
5
<
M
R
<
1
7
6
0

CO
PI 36.2 30.2 25.9
CI 12.6 10.5 9.0
HCT
PI 2.6 2.2 1.9
CI
HCNM
PI 1.8 1.5 1.3
CI
NO
x

PI 1.5 1.3 1.1
CI 4.7 3.9 3.4
MP
PI
(1)
0.1 0.1 0.1
CI 0.1 0.1 0.1
III
1
7
6
0
<
M
R

CO
PI 45.4 37.8 32.4
CI 14.8 12.3 10.6
HCT
PI 3.2 2.7 2.3
CI
HCNM
PI 2.2 1.8 1.5
CI
NO
x

PI 1.6 1.4 1.2
CI 5.6 4.7 4.0
MP
PI
(1)
0.1 0.1 0.1
CI 0.1 0.1 0.1


- 64 -
Tabla 6. Continuacin. Lmites de emisiones segn la normativa Euro 5, expresados en gL
-1
.
PI, encendido por chispa; CI, encendido por compresin, CO, monxido de carbono;
HCT, hidrocarburos no metanos, NO
x
, xido de nitrgeno y MP, masa de partculas.


N
2


CO
PI 45.4 37.8 32.4
CI 14.8 12.3 10.6
HCT
PI 3.2 2.7 2.3
CI
HCNM
PI 2.2 1.8 1.5
CI
NO
x

PI 1.6 1.4 1.2
CI 5.6 4.7 4.0
MP
PI
(1)

0.1 0.1 0.1
CI 0.1 0.1 0.1


(1)
Las normas sobre masa de partculas de los vehculos de encendido por chispa se aplican
nicamente a los vehculos con motores de inyeccin directa.



- 65 -
Tabla 7. Emisiones de un generador elctrico en fro (T=0) y a rgimen (T=10 min).

COMPONENTE EQUIPO
TIEMPO (min)
0 10
Monxido de carbono (CO, %)
HORIBA MEXA
554-GE
5.60 5.50
Dixido de carbono (CO
2
, %)
HORIBA MEXA
554-GE
12.74 13,00
Dixido de carbono (CO
2
, %) VAISALA MI70 11.50 13.50
Monxido de nitrgeno(NO, ppm)
LANA SARRATE
KHANE 900 Plus
80 105
Dixido de nitrgeno (NO
2
, ppm)
LANA SARRATE
KHANE 900 Plus
0 5
xidos de nitrgeno (NO
x
, ppm)
CLCULO:
NOx = NO+ NO
2

80 110
Oxgeno (O
2
, %)
HORIBA MEXA
554-GE
4.52 3.60
Hidrocarburos no quemados (ppm)
HORIBA MEXA
554-GE
250 245
Factor lambda ()
HORIBA MEXA
554-GE
0.76 0.77

Composicin de los gases de escape que suministramos a los cultivos de algas
unicelulares (Nannochloropsis gaditana) para produccin de biomasa. La columna
EQUIPO indica la marca y el modelo de los equipos utilizados para la medida de cada uno
de los componentes. Las columnas TIEMPO (min) indican el tiempo que ha transcurrido
desde el arranque del generador elctrico Honda: Fro (0 min) y a rgimen (10 min).


- 66 -
Tabla 8. Emisiones procedentes de la refinera de la empresa REPSOL

COMPONENTE EMISIONES
Dixido de carbono
(CO
2
, % v:v)
7
Humedad
(% v:v)
10
xidos de nitrgeno
(NO
x
, ppm)
300
Oxgeno
(O
2
, % v:v)
11
Dixido de azufre
(SO
2,
ppm)
700
Nitrgeno
(N
2
, % v:v)
Resto


- 67 -
2.4.5. Analizadores de CO
2


Se han utilizado dos equipos diferentes para la medicin de los gases de combustin
del generador elctrico descrito anteriormente.

A. VAISALA (mod. MI70)





Fig. 28. Analizador de CO
2
: VAISALA (mod. MI70) utilizado para medir las
concentraciones de CO
2
puntualmente. 1, Bomba; 2, indicador y 3, sonda.














Fabricante: Vaisala (Finlandia)

Modelo: GM70

Rango: 0 20 % CO
2

Medida: Difusin / aspiracin

Precisin: 1.5 %

T (C): 20 / +60; 10 / +40

HR (%): 0 100 %

P (hPa): 700 1300

F (m s
1
): 0 10

Sondas: Dos

Datos: Display / Memoria

Com: On line USB

1
2
3


- 68 -
B. LANA SARRATE (mod. Khane 900 Plus)

































Fig. 29. Analizador de CO
2
: A, LANA SARRATE (mod. Khane 900 Plus) y B, impresora,
utilizado para medir los gases del generador elctrico.














Fabricante: Lana Sarrate

Modelo: Khane 900 Plus

Medida: Instantnea de O
2
, CO,
CO
2
, T de los humos, T ambiente,
tiro, rendimiento, exceso de aire,
relacin CO/CO
2
, CO ambiente

Memoria: 100 mediciones

Impresora por infrarrojos

Sonda de humos con varilla de 30
cm

Clula O
2


Mdulos opcionales para la
medicin de SO
2
, NO, NO
2
y NO
x


Software opcional para volcado de
datos a ordenador

Alimentacin con batera
recargable o cargador a red

A
B


- 69 -
2.5. Seguimiento del cultivo

Para el seguimiento de cada cultivo realizado se ha llevado a cabo un anlisis diario
de clorofila mediante espectrofotometra visible (400-700 nm) con el fin de obtener la curva
de cultivo.

2.5.1. Anlisis de clorofila planctnica

Para la realizacin de cada anlisis diario se utiliz la tcnica de obtencin de
pigmentos fotosintticos por espectrofotometra de los autores GMEZ et al., 2009 publicada
en el libro Conceptos y Tcnicas en Ecologa Fluvial (Fig. 30 - Fig. 31).

A. Recoleccin de muestras

A primera hora de la maana se tomaban 2 muestras de 60 mL cada una del
biorreactor. Hay que destacar que antes de tomar las muestras se agitaba el
biorreactor manualmente para intentar homogeneizar al mximo el cultivo y as
obtener unos resultados lo ms fiables posibles. Una vez agitado el biorreactor se
filtraban las muestras con una jeringuilla de 60 mL, un portafiltros MILLIPORE
(Swinnex-47) y filtros WHATMAN GF/F. A continuacin se guardaban los filtros en
viales, en fro (4 C) y en la oscuridad hasta su anlisis.
























Fig. 30. Material necesario para la recoleccin de las muestras: A, Jeringuilla de 60 mL y
portafiltros MILLIPORE (Swinnex-47) durante el proceso de filtracin. B,
Jeringuilla y portafolios MILLIPORE al detalle.

A
B


- 70 -











Fig. 31. Material utilizado en la filtracin de las muestras. Filtros WHATMAN GF/F.

B. Extraccin y anlisis de las muestras en el laboratorio

a. Poner 10 mL de acetona al 90% en los viales hasta cubrir bien el filtro.

b. Guardar las muestras en la nevera de 8 a 12 h. El disolvente orgnico extraer la
clorofila de las muestras.

c. Someter las muestras a ultrasonidos durante 2 min.

d. Aadir 10 mL de acetona al 90 %, y disponer el filtro en un homogeneizador hasta
su total desintegracin.

e. Filtrar las muestras (Whatman GF/F) para disminuir la turbidez de la misma.

f. Leer las absorbancias a 630, 645, 665 y 750 nm, mediante un espectrofotmetro.
La cubeta del espectrofotmetro suele ser de 1 5 cm de anchura; este dato es
relevante y debe incorporarse a la ecuacin. (En este caso la anchura de la cubeta
es de 1 cm)

g. Estimar las concentraciones de clorofila mediante la siguiente ecuacin:

Chl a (g/L) = (11,6 (A
665
A
750
) 1,31 (A
645
A
750
) 0,14 (A
630
A
750
)) Ve / VfL)

donde:

Chl a Clorofila a (gL
-1
).
A
x
Absorbancia a x nm.
Ve Volumen del extracto (2010
-1
L)
Vf Volumen del filtrado (6010
-1
L)
L Longitud de la cubeta (1 cm)


- 71 -
C. Espectrofotmetro UV y VIS (mod. Aquamate).

El aparato/instrumento utilizado para el clculo del contenido de clorofila de los
distintos cultivos es un espectrofotmetro de haz simple de alta energa (Fig. 32), con ptica
recubierta en cuarzo y longitud de onda en los rangos del visible o UV, diseado para anlisis
de aguas. El Aquamate muestra los resultados en una pantalla LCD de calidad VGA y tiene
una unidad interna para disquetes para el almacenamiento ilimitado de mtodos de calibracin
y resultados.

Las aplicaciones de software incluyen barridos a nica, mltiple, series de y
cuantificacin usando hasta 20 estndares. Otras funciones del software incluyen
temporizacin de procesos, registro electrnico de mantenimiento, registro de usuario con
perfiles individualizados, identificacin alfanumrica de muestras, men de seleccin de
impresora interna opcional, Deskjet, LaserJet o de matriz de puntos.

Especificaciones:

Fuente de luz Tungsteno
Sistema ptico Haz simple
Rango 325-1100 nm
Ancho de banda espectral 2 nm
Precisin de longitud de onda 1,0 nm
Precisin de absorbancia 0.005 A a 1 A
Rango fotomtrico 0.1 a 3.0 A; Absorbancia
Estabilidad < 0,002 A/h tras calentamiento
Pantalla LCD VGA
Soporte de celda estndar incluido
Cubetas de paso de luz de 1 a 50 mm, tubos
de hasta 125 mm de altura, celdas cuadradas
de 2.5 cm y viales Accuvac.
Teclado Teclado de membrane
Almacenamiento de pruebas Ilimitado mediante la unidad de disquetes














- 72 -




Fig. 32. Espectrofotmetro UV y VIS (mod. Aquamate) utilizado para el anlisis de clorofila.










- 73 -
2.6. Control del cultivo

Para el control del cultivo se opt por disponer de un sensor multiparamtrico
(HANNA Instruments, mod. 9828), el cual, tomaba datos de diferentes parmetros cada
minuto durante 12 horas en das alternos. Los parmetros que meda son los siguientes:

- Temperatura ( C).
- pH.
- Potencial Redox (ORP, mV).
- Oxgeno Disuelto (OD, mgL
-1
).
- Conductividad elctrica (CE
25
, mScm
-1
).
- Presin (P, mbar).

A partir de estos parmetros, se realizaron diferentes grficos para el estudio de los
mismos. Los grficos y sus correspondientes estudios y conclusiones se podrn observar en el
captulo de Resultados de este TFC.

2.6.1. HANNA Instruments (mod. 9828)

El medidor HANNA Instruments (mod. 9828) (Fig. 33) es un instrumento
multiparamtrico porttil que controla hasta trece parmetros diferentes de la calidad del agua
(8 medidos, 5 calculados). El medidor tiene un LCD matricial de puntos de 128 x 64 pixels
retro-iluminado que adapta el tamao de los dgitos automticamente y permite la
configuracin completa de cada parmetro medido, unidades y seleccin del idioma, y
grficos en pantalla.

Para controlar y registrar datos, el HI 9828 est equipado con el Sistema exclusivo de
Identificacin de Tags (TIS) con nmeros de identificacin nicos que pueden ser instalados
en diversos lugares de muestreo y ser utilizados para registrar datos de cada emplazamiento
concreto. El medidor dispone de funcin GLP completa y la transferencia de datos se realiza
va conector USB. Diseado para ser utilizado al aire libre, el medidor es resistente a los
impactos e impermeable (30 min a 1 m de profundidad). La sonda multisensor puede ser
dejada bajo el agua.

La sonda multiparamtrica HANNA Instruments (mod. 769828) (Fig. 34) incorpora
un micro-procesador integrado y amplificadores que convierten las seales de impedancia alta
de los sensores de la sonda eliminando los problemas comunes asociados con las seales de
impedancia alta como la limitacin del cable y ruido. Esto permite que la sonda tenga una
comunicacin fiable con el medidor y el usuario es alertado inmediatamente de problemas
tales como un cable roto. Las longitudes estndar del cable de la sonda 4, 10 y 20 m y
tambin son posibles longitudes personalizadas. La sonda alberga siete parmetros: pH, pH
mV, ORP, CE, CE Absoluto, % de saturacin y mgL
-1
(ppm) de oxgeno, y temperatura.
Todos los sensores pueden ser sustituidos independientemente y son fciles de mantener
limpios y en perfecto orden de funcionamiento, y estn protegidos por un capuchn de acero
inoxidable. El cuerpo est impermeabilizado. El sistema de conductividad de cuatro anillos
garantiza lecturas de conductividad estables que son inmunes al recubrimiento superficial.
Con las mediciones de este sensor es posible determinar la conductividad absoluta,
conductividad con compensacin de temperatura, salinidad, gravedad especfica y TDS. El
Sensor Galvnico de OD, tiene un termistor integrado para facilitar lecturas con


- 74 -
compensacin de temperatura de forma rpida. El sensor galvnico no requiere tiempo de
polarizacin por lo que est listo para la medicin en un momento. El medidor reconoce
automticamente la presencia del sensor de pH o pH/ORP. Ambos sensores tienen una unin
de fibra que permite una mayor sensibilidad, y tienen un interior de gel para una mejor
resistencia a la contaminacin. El medidor muestra asimismo lecturas de pH mV ideal para
deteccin y reparacin de averas.


Fig. 33. Sensor multiparamtrico: H. Instruments (mod. 9828) con su sonda.



























Fig. 34. Sonda multiparamtrica HANNA Instruments (mod. 769828) con el sensor galvnico
OD, el sensor de pH o sensor de pH/ORP y el sistema de conductividad de cuatro
anillos.

Sensor galvnico OD
Sistema de conductividad
de cuatro anillos
Sensor de pH o pH/ORP


- 75 -
2.7. Biomasa

Cada cultivo realizado (un total de tres) ha tenido una duracin de 15 das
aproximadamente. Finalizado este periodo se proceda al cosechado del mismo para obtener
su correspondiente pasta de algas (biomasa), como se puede observar en las siguientes
imgenes. El cosechado se llev a cabo mediante centrifugacin.















Fig. 35. Aspecto que toma el medio de cultivo (A) a medida que se va aumentando el nmero
de clulas por unidad de volumen, inmediatamente antes de separar el medio lquido
de la pasta de algas (B) con un equipo separador-centrifugador.


A
B


- 76 -
2.7.1. Centrifugacin

Como se ha comentado anteriormente la centrifugacin se llev a cabo el da 15 o el
da 16 de cada cultivo. Esta actividad se realiz en el Departamento de Produccin Vegetal:
Botnica y Proteccin Vegetal, ya que era el lugar en el que se encontraba la centrfuga.

Obtenida la pasta de algas se llevan a cabo diferentes procesos para obtener el
contenido en residuo seco y en cenizas.


2.7.2. Equipo centrifugador-clarificador







Fig. 36. Esquema y caractersticas del equipo centrifugador-clarificador utilizado para
obtener la pasta de algas.
Westfala Separator

Mineraloil System GmBH

Tipo: OTC 2-02-137

Nmero: 9013-073

Fecha: 2003

Modalidad: Clarificador

Recinto slido: 750 mL

Velocidad (rpm): 10.000

Potencia: 1.1 kW

Arranque: 10-15 s



- 77 -
2.7.3. Bomba autoaspirante

Bomba autoaspirante (Fig. 37) utilizada para la carga automtica del sistema
centrifugador-clarificador utilizado para generar la pasta de algas. El equipo debe ser regulado
de tal forma que el caudal que llegue a la centrfuga sea de 1 Lmin
-1
; para ello se utiliza la
llave de bola situada a la salida de la bomba.



Fig. 37. Bomba autoaspirante utilizada en la centrifugacin del cultivo de algas.


( ) Bidn ( ) Centrfuga


- 78 -
2.8. Residuo seco y cenizas

Para la obtencin del residuo seco se someten tres muestras de la pasta de algas
cosechada (aproximadamente de 1 g cada una de ellas) a 105 C durante 30 min en estufa.

A su vez para obtener el contenido en cenizas se introducen otras tres muestras de la
pasta de algas (de un gramo aproximadamente) en crisoles en un horno Mufla a una
temperatura de 540 C durante 24 h.

Realizado estos procesos tenemos como resultado el contenido en residuo seco y el
contenido en cenizas, los cuales se pueden observar en el captulo de Resultados.







Fig. 38. A, Horno tipo mufla utilizado para obtener la cantidad de cenizas que contienen las
muestras de pasta de algas y B, estufa utilizada para obtener el contenido en residuo
seco de la pasta de algas.
A B

















RESULTADOS Y DISCURSIN


- 80 -
3. RESULTADOS Y DISCUSIN


Los resultados de todas las pruebas realizadas en cada cultivo en los dos escenarios
sealados: Departamento de Produccin Vegetal y Centro Tecnolgico REPSOL, durante este
TFC son la base para interpretar la evolucin y el resultado final del experimento. Los
resultados se presentan segn cada cultivo.

3.1. CULTIVO 1

Este cultivo de Nannochloropsis gaditana se inici el da 25 de Marzo de 2010 y
finaliz el da 9 de Abril del mismo ao. Para su puesta en marcha se necesitaron 300 cm
3
de
inculo de algas y 8 L de medio de cultivo Guillard F/2, por lo que en total se tena 8,3 L de
cultivo.

Este primer cultivo se realiz con aportacin de CO
2
. El CO
2
aplicado se obtuvo de
los gases de escape del generador elctrico y se aplic al biorreactor mediante el baln de
plstico. Cada da, a primera hora de la maana se repona un baln.

Puesto en marcha el cultivo, se realizaron diariamente pruebas para calcular el
contenido en clorofila. Se tomaban dos muestras diarias. Para la recogida de dichas muestras,
primeramente se agitaba el biorreactor para conseguir la mxima homogeneidad en los
resultados.

Para el clculo del contenido en clorofila se utiliz la tcnica de obtencin de
pigmentos fotosintticos por espectrofotometra publicada en el libro Conceptos y Tcnicas
en Ecologa Fluvial (GMEZ et al., 2009). Dentro de esta tcnica se realiz el anlisis de
clorofila planctnica.

El anlisis de clorofila permite estimar la cantidad de pigmentos fotosintticos, parte
mayoritaria de clorofila a. A la vez, este clculo es representativo de la biomasa de los
productores primarios, en este caso, de las algas (GMEZ et al., 2009).

Para la representacin y el posterior estudio de los resultados obtenidos en el anlisis
de clorofila se desarroll una aplicacin en Excel (Fig. 39).



- 81 -
0.0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
550 600 650 700 750 800 850
A
B
S
O
R
B
A
N
C
I
A
LONGITUD DE ONDA (nm)


LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.43 0.517 0.792 0.262 1.00 0.020 0.060 1.93


LON Longitud de onda (nm)
L Longitud de paso de luz de la cubeta (cm)
Ve Volumen del extracto (L)
Vf Volumen del filtrado (L)
CLO Concentracin de clorofila (gL
-1
)

COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 006.
2. Fecha de recogida de muestra: 30/03/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.


Fig. 39. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis gaditana.

Como se puede observar, se realiz un grfico, en el cual se representaba la
absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm). El rango de valores de la longitud de
onda es de 600 a 800 nm, ya que para estimar las concentraciones de clorofila se necesita
conocer la absorbancia en diferentes puntos de este intervalo. Elaborado el grfico, se
desarroll una pequea tabla en la que se representaban los datos utilizados para el clculo de
clorofila, el cual se obtena mediante la siguiente ecuacin:


- 82 -

Chl a (gL
-1
) = (11,6 (A
665
A
750
) 1,31 (A
645
A
750
) 0,14 (A
630
A
750
)) Ve / VfL)

donde:

Chl a Clorofila a (gL
-1
).
A
x
Absorbancia a x nm.
Ve Volumen del extracto (2010
-1
L)
Vf Volumen del filtrado (6010
-1
L)
L Longitud de la cubeta (1 cm)

Finalmente, en cada grfico se realizaron diferentes comentarios para llevar un
control adecuado de las muestras. En estos comentarios se reflej, el nmero de muestra, la
fecha de recogida de la muestra, as como el volumen utilizado de extracto y de filtrado.

Como ya se ha dicho anteriormente, cada da se realizaban dos muestras, por lo que
se obtenan dos grficas de este tipo, (Anexo 2).

Explicada la aplicacin de Excel utilizada para el clculo de la clorofila, se procede a
comentar los resultados obtenidos en este primer cultivo:

Los primeros resultados obtenidos en este cultivo como era de esperar dieron valores
de clorofila bajos (0.12 0.13 gL
-1
, respectivamente) dado que el cultivo estaba
comenzando a crecer. Transcurridos los primeros das, estos valores comenzaron a aumentar
progresivamente, producindose un incremento de 0,93 gL
-1
de clorofila en los primeros
cuatro das de cultivo. Este incremento tambin era visible en el cambio de color que se poda
observar en el cultivo, pasando de un tono verde plido a un tono ms verdoso (ms adelante
se muestras unas fotografas en las que se puede observar este cambio de color, Fig. 42).

Al igual que el contenido en clorofila aumentaba, lo haca tambin la absorbancia,
pasando de tener unos valores entre 0.040 y 0.070 el primer da a valores entre 0.119 y 0.400
el cuarto da.

El pico mximo se obtuvo entre los das cinco y ocho, en los cuales, se consiguieron
valores entre 1.79 y 1.93 gL
-1
de clorofila y absorbancias entre 0.260 y 0.800.

A partir de este momento el cultivo se estabiliz unos das y llegado el da once de
cultivo aproximadamente, el contenido en clorofila empez a decaer progresivamente,
obteniendo el ltimo da de cultivo, valores de 0.87 gL
-1
de clorofila.

A la vez que el contenido en clorofila disminua, lo hacan tambin los valores de
absorbancia. Y en referencia al color del cultivo, ste paso de un tono verdoso a un tono entre
verde y marrn.

Finalizado el primer cultivo, se realiz la curva de cultivo con todos los datos
obtenidos sobre la estimacin del contenido en clorofila.



y = -0.024x
2
+ 1985.x - 4E+07
R = 0.695
0.0
0.4
0.8
1.2
1.6
2.0
25/03/10 27/03/10 29/03/10 31/03/10 02/04/10 04/04/10 06/04/10 08/04/10 10/04/10
C
L
O
R
O
F
I
L
A

(

g

L
-
1
)



Fig. 40. Concentracin de clorofila a (media error estndar de la media) a partir de un cultivo de Nannochloropsis gaditana desde el 25 de
Marzo hasta el 9 de Abril de 2010.


- 84 -
Para la obtencin de la curva de cultivo se han representado los valores de clorofila
(gL
-1
) frente a la duracin del cultivo (15 das).

Observando la curva se pueden diferenciar perfectamente tres periodos en el
transcurso del cultivo. El primero de ellos, sera un periodo de crecimiento por parte del
cultivo reflejado en el incremento del contenido en clorofila. El siguiente periodo se podra
llamar de establecimiento, en el cual, el cultivo conserva prcticamente los mismos valores de
clorofila y finalmente estara el tercer periodo que se correspondera con la fase de decadencia
del cultivo, en la cual, los valores de clorofila disminuyen y el color del cultivo envejece.

En la Fig. 41 se puede observar perfectamente los tres periodos que transcurren
durante el cultivo. El periodo de crecimiento tiene una duracin aproximada de cinco o seis
das (25 31 de Marzo), el periodo de establecimiento tiene una duracin de cinco das (31
5 Abril) y el ltimo periodo, el de decadencia, tiene una duracin de unos cuatro das (5 9
de Abril).




0.0
0.4
0.8
1.2
1.6
2.0
26/03/10 28/03/10 30/03/10 01/04/10 03/04/10 05/04/10 07/04/10 09/04/10
C
L
O
R
O
F
I
L
A

(

g

L
-
1
)
Establecimiento


Fig. 41. Periodos de crecimiento, establecimiento y decadencia de un cultivo de Nannochloropsis gaditana (Cultivo 1) entre el 25 de Marzo y
el 9 de Abril del 2010.


- 86 -
El cambio de color es un factor determinante en el progreso del cultivo, a mayor
coloracin verde, significa que el cultivo se est desarrollando en mejores condiciones.

A continuacin se muestran diferentes imgenes del Cultivo 1 en las que se puede
observar dicho cambio de coloracin.





Fig. 42. Cultivo 1 en diferentes das. Se puede observar perfectamente el cambio de
coloracin de un tono verde plido a un tono verde ms vivo en la ltima fase del
cultivo.
30/03/10
05/04/10


- 87 -
Llegado al da 15 del Cultivo 1 y finalizadas las pruebas de contenido en clorofila, se
paso al cosechado de dicho cultivo. Para ello se vaci el biorreactor y el cultivo se llev al
Departamento de Produccin Vegetal: Botnica y Proteccin Vegetal para su centrifugacin y
posterior obtencin de pasta de algas (biomasa).

La pasta de algas obtenida (Fig. 35) se introduca en una placa petri y se llevaba
directamente al laboratorio para realizar las determinaciones de residuo seco y cenizas.

Para llevar un control estricto de la centrifugacin se realiz una tabla (Tabla 9) en la
que se recogieron los datos ms relevantes obtenidos de ella, es decir, fecha de inicio y final
del cultivo, fecha y duracin de la centrifugacin, duracin del cultivo, volumen de cultivo
centrifugado y cantidad de biomasa (g) obtenida. Con estos datos se registraba adems la
biomasa obtenida en gL
-1
y mgL
-1
da
-1
.

Tabla 9. Datos relativos al Cultivo 1 con CO
2
, tomados durante la centrifugacin el da 9 de
Abril.

VARIABLE VALOR
Fecha inicio del cultivo 25/03/10
Fecha final del cultivo 09/04/10
Fecha centrifugacin 09/04/10
Duracin centrifugacin (h) 0.17
Contador inicial (L) 1904
Contador final (L) 1910
Volumen cultivo (L) 6
Cultivo (das) 15
Biomasa (g) 3.04
Biomasa (gL
-1
) 0.51
Biomasa (mgL
-1
da
-1
) 33.8
Residuo seco (%) 16.66
Residuo mineral (%) 1.22
Residuo orgnico (%) 15.44



- 88 -
Como se puede observar en la Tabla 9, la centrifugacin se llev a cabo el mismo da
que finaliz el cultivo. sta tuvo una duracin de 0.17 h y el volumen de cultivo centrifugado
fue de 6 L. El resto de cultivo (8.3 6) se conserv para posteriores cultivos.

Finalizada la centrifugacin del cultivo, se recolect 3.04 g de biomasa del cultivo, lo
que significa que dicho cultivo en sus 15 das de duracin gener 0.51 gL
-1
de biomasa o lo
que es lo mismo tiene una productividad volumtrica de 33.8 mgL
-1
:da
-1
.

Observando estos datos se puede decir que el rendimiento en cuanto a cantidad de
biomasa obtenida fue bajo.

Seguidamente de la centrifugacin se realizaron los anlisis pertinentes con la pasta
de algas para obtener el contenido en Residuo seco y Cenizas. Los resultados obtenidos se
plasmaron en las siguientes tablas:

Tabla 10. Residuo seco (RS) obtenidos al someter la pasta de algas a 105 C durante 30 min
en una estufa. T, tara; M, muestra; MED, Media; EEM, Error estndar de la
media; CDV, Coeficiente de variacin e IDC, Intervalo de confianza (p=0.05).


MUESTRA T (g) T + M (g) M (g) T + RS (g) RS (g) RS (%) MED EEM CDV IDC
ALGAS A-
001
34.9301 35.4171 0.487 35.0096 0.0795 16.3
16.66 0.20 2.06 0.85 34.6511 35.1398 0.4887 34.7325 0.0814 16.7
35.3094 35.6727 0.3633 35.3712 0.0618 17.0

Tabla 11. Cenizas (CE) obtenidos al someter la pasta de algas a 540 C durante 24 h en un
horno. T, tara; M, muestra; MED, Media; EEM, Error estndar de la media; CDV,
Coeficiente de variacin e IDC, Intervalo de confianza (p=0.05).

T (g) T + M (g) M (g) T + CE (g) CE (g) CE (%) MED EEM CDV IDC
13.7818 14.0328 0.251 13.7849 0.0031 1.24
1.22 0.01 1.76 0.05 14.5331 14.8533 0.3202 14.5370 0.0039 1.22
14.1176 14.3943 0.2767 14.1209 0.0033 1.19

La Tabla 10 hace referencia al contenido en residuo seco (RS). En ella se expone el
peso de las tres muestras utilizadas antes de introducirlas en la estufa y el peso de las tres
muestras una vez transcurridos 30 min a 105 C. De esta manera se obtuvo el contenido en RS
expresado en g y porcentaje (%). Adems tambin se calcul la media de las muestras, el
error estndar de la media, el coeficiente de variacin (%) y el intervalo de confianza (p =
0.05).

Sobre los resultados se puede decir que el contenido medio de RS es de un 17 %
aproximadamente, siendo el margen de error de un 20 %, lo que significa que existe una alta
variabilidad entre las muestras tomadas. El intervalo de confianza es de 0.85, lo que significa
que el valor medio se encuentra entre 15.81 y 17.51 con una confianza del 95 %.

La Tabla 11 hace referencia al contenido en cenizas (CE). Al igual que sucede con la
Tabla 10, se expone el peso de las tres muestras antes de introducirlas en el horno y el peso
despus de 24 h a 540 C. As se estim el contenido en CE expresado en g y porcentaje (%).


- 89 -
Igualmente se calcul la media, el error estndar de la media, el coeficiente de
variacin (%) y el intervalo de confianza (p = 0.05).

Sobre los resultados se puede decir que el contenido medio de CE es de un 1.22 %,
siendo el margen de error de 1 %, lo que significa que existe muy poca variabilidad entre las
muestras utilizadas para su clculo. El intervalo de confianza es de 0.05, lo que significa que
el valor medio se encuentra entre 1.17 y 1.27 con una confianza del 95 %.



Fig. 43. Residuo Seco (RS) y Cenizas (CE) obtenidos de la pasta de algas del Cultivo 1.


En la Fig. 43 se ha representado el contenido en residuo seco (RS) y el contenido en
cenizas (CE). Se puede decir que la muestra de pasta de algas obtenida del Cultivo 1 tena un
17 % de RS y un 2 % de CE, aproximadamente. Esto significa que la muestra tena un alto
porcentaje de humedad (aproximadamente un 83 %) y que prcticamente en su totalidad era
materia orgnica (un 98 %) ya que el contenido en CE fue mnimo.


- 90 -
3.2. CULTIVO 2

Este cultivo se inici el da 12 de Abril y finaliz el da 27 del mismo mes, ambos de
2010. Para su puesta en marcha se necesitaron 300 cm
3
de inculo de algas y 8 L de medio de
cultivo Guillard F/2, por lo que en total se tena 8,3 L de cultivo, aproximadamente. Hay que
decir que el inculo de algas utilizado se obtuvo del anterior cultivo.

Este segundo cultivo se realiz sin aportacin de CO
2
para poder comparar los
resultados con el anterior cultivo. Por lo tanto en este cultivo no fue necesaria la aplicacin
del baln.

Puesto en marcha el cultivo, se realizaron diariamente pruebas para calcular el
contenido en clorofila. Se recogan dos muestras cada da. De estas pruebas se obtuvieron dos
grficas diarias, una por cada muestra realizada, en las cuales se representaba la absorbancia
(A) frente a la longitud de onda (, nm). A partir de los datos obtenidos en estas pruebas se
calculaba el contenido en clorofila en gL
-1
con el mismo procedimiento que en el Cultivo 1.
De igual manera se representaban los resultados en la aplicacin de Excel explicada
anteriormente.

A continuacin se procede a comentar los resultados obtenidos en este segundo
cultivo:

Los primeros resultados obtenidos en este cultivo dieron lugar a concentraciones de
clorofila bajos (0.24 gL
-1
). Con el transcurso de los das, estas concentraciones fueron
aumentando pero muy dbilmente en comparacin con el primer cultivo, ya que en los
primeros cuatro das solo hubo un incremento de 0.43 gL
-1
en comparacin con los 0.93
gL
-1
del anterior cultivo. El valor mximo de concentracin en clorofila se produjo a la
mitad del cultivo con un valor de 0.67 gL
-1
, valor muy diferente a la obtenida en el Cultivo
1 (1.93 gL
-1
). A partir de este da, los valores de clorofila se mantuvieron unos das para
finalmente comenzar a decaer y llegar a valores de 0.29 0.43 gL
-1
, el ltimo da de cultivo.

De la misma manera que los valores de clorofila conseguidos fueron bajos, lo eran
tambin los valores de absorbancia alcanzndose como mximo valores en torno a 0.300
(Anexo 2).

En este cultivo el color tambin fue cambiando pero al igual que pasar con las
concentraciones de clorofila, el cambio de tonalidad no fue tan destacado, pasando de un
color verde plido a un tono ms verdoso pero con poca intensidad, como se podr observar
ms adelante (Fig. 46). Finalmente cuando los valores de clorofila empezaron a disminuir
tambin lo hizo el color del cultivo pasando a una tonalidad mucho ms plida, como la que
haba tenido inicialmente.

Todos estos sntomas transmitan que el cultivo no se estaba desarrollando
adecuadamente pero se contino hasta su final para ver si los resultados de la cosecha
certificaban estos sntomas. Finalizado el segundo cultivo, se realiz la curva de cultivo con
todos los datos obtenidos sobre la estimacin del contenido en clorofila.




y = -0.007x
2
+ 568.3x - 1E+07
R = 0.929
0
0.2
0.4
0.6
0.8
12/04/10 14/04/10 16/04/10 18/04/10 20/04/10 22/04/10 24/04/10 26/04/10 28/04/10
C
L
O
R
O
F
I
L
A

(

g

L
-
1
)


Fig. 44. Concentracin de clorofila a (media error estndar de la media) a partir de un cultivo de Nannochloropsis gaditana desde el 12 de
Abril hasta el 27 de Abril de 2010.


- 92 -
Para la obtencin de la curva de cultivo se han representado los valores de clorofila
(gL
-1
) frente a la duracin del cultivo (15 das).

En este cultivo como se puede observar, existe un claro periodo de crecimiento los
primeros das, aunque en cuanto a valores no sea muy alto. Despus pasa a un periodo de
establecimiento que prcticamente dura un par de das, para pasar finalmente a un claro
periodo de decadencia, llegando a tener valores de clorofila muy parecidos a los del inicio del
cultivo.

En la Fig. 45 se pueden observar los tres periodos que transcurren durante este
segundo cultivo. El periodo de crecimiento tiene una duracin aproximada de ocho das (12
20 de Abril), el periodo de establecimiento tiene una duracin de dos das (20 22 Abril) y el
ltimo periodo, el de decadencia, tiene una duracin de unos cinco das (22 27 de Abril).



0
0.2
0.4
0.6
0.8
13/04/10 15/04/10 17/04/10 19/04/10 21/04/10 23/04/10 25/04/10 27/04/10
C
L
O
R
O
F
I
L
A

(

g

L
-
1
)
Establecimiento



Fig. 45. Periodos de crecimiento, establecimiento y decadencia de un cultivo de Nannochloropsis gaditana (Cultivo 2) entre el 12 27 de
Abril de 2010.


- 94 -
Como ya se indicar en el Cultivo 1, el cambio de color es un factor determinante en el
progreso del cultivo.

A continuacin se muestran diferentes imgenes del Cultivo 2:







Fig. 46 Cultivo 2 en diferentes das. Se puede observar que realmente si hubo cambio de
coloracin pero que sta no fue tan intensa como en el primer cultivo. En estas
imgenes tambin se puede observar el sensor multiparamtrico introducido dentro
del biorreactor.
13/04/10
24/04/10


- 95 -
Llegado el da 15 del Cultivo 2, finalizadas las pruebas de contenido en clorofila, se
procedi al cosechado del cultivo, de la misma manera que con el Cultivo 1. Se volvi a
vaciar el biorreactor y el Cultivo 2 se traslad al Departamento de Produccin Vegetal:
Botnica y Proteccin Vegetal. El procedimiento seguido fue el mismo que la anterior vez
pero en este caso el resultado del cosechado fue inviable ya que apenas se obtuvo 1 g de pasta
de algas aproximadamente. Cantidad insuficiente para poder calcular el contenido en residuo
seco y en cenizas.

Este suceso, unido a los bajos valores de clorofila obtenidos y la baja coloracin
conseguida durante los 15 das de duracin del cultivo, llev a la conclusin de que
efectivamente el Cultivo 2 haba fracasado y por lo tanto no haba sido posible la obtencin de
pasta de algas (biomasa).

Debido al fracaso del Cultivo 2, se tom la decisin de poner en marcha el Cultivo 3,
nuevamente sin CO
2
para intentar conseguir un desarrollo del cultivo favorable y unos
resultados de biomasa aceptables.

Dadas estas circunstancias es imprescindible comentar la importancia que tiene la
inoculacin para el ptimo desarrollo de un cultivo, ya que si el inculo no est en buenas
condiciones o contiene algn organismo que perjudique su crecimiento provocar el fracaso
de ese cultivo.

Hay que comentar que en el Cultivo 2 se coloc desde el principio el sensor
multiparamtrico por lo que ms adelante se presentarn los resultados obtenidos con l.


- 96 -
3.3. CULTIVO 3

Este cultivo se inici el da 30 de Abril y finaliz el da 17 de Mayo. Para su puesta
en marcha se necesitaron 250 cm
3
de inculo de algas y 8 L de medio de cultivo Guillard F/2,
por lo que en total se tena 8,25 L de cultivo.

Como ya se ha comentado anteriormente, el tercer cultivo se realiz sin aportacin
de CO
2
al igual que el Cultivo 2. El inculo de este cultivo fue proporcionado a partir de un
cultivo del biorreactor tubular del Centro Tecnolgico REPSOL (CTR).

Puesto en marcha el cultivo, se realizaron diariamente pruebas para calcular el
contenido en clorofila. Se recogan dos muestras cada da. De estas pruebas se obtuvieron dos
grficas diarias, en las cuales se representaba la absorbancia (A) frente a la longitud de onda
(, nm). A partir de los datos obtenidos en estas pruebas se calculaba el contenido en clorofila
en gL
-1
con el mismo procedimiento que en los dos cultivos anteriores y se representaban
los valores en la aplicacin de Excel explicada anteriormente.

A continuacin se comentan los resultados obtenidos en este tercer y ltimo cultivo:

Los primeros resultados obtenidos en este cultivo en cuanto a concentracin de
clorofila fueron bajos (0.29 gL
-1
) pero con el transcurso de los das, estas concentraciones
fueron aumentando, teniendo un incremento de 0.61 gL
-1
en los primeros cuatro das. Como
se puede observar este incremento es mayor que el producido en el Cultivo 2 (0.43 gL
-1
)
pero menor que el del Cultivo 1 (0.93 gL
-1
). Las concentraciones de clorofila siguieron
aumentando hasta el da siete, fecha en la cual se alcanz el valor mximo con un contenido
en clorofila de 1.06 gL
-1
, casi el doble que el alcanzado en el Cultivo 2. A partir de este da,
el contenido en clorofila se estabiliz, lo que indica que el cultivo haba parado de crecer. Este
establecimiento del cultivo tuvo una duracin de cuatro das aproximadamente, a partir de la
cual, el cultivo comenz a decaer. El periodo de decadencia fue lento los primeros das pero
hay que decir que el da que se cosech el cultivo, el contenido en clorofila tena unos valores
de 0.37 0.40 gL
-1
.

Sobre los valores de absorbancia conseguidos en este tercer cultivo podemos decir
que los mximos alcanzados fueron de 0.550 en la mitad del cultivo y los mnimos alcanzados
de 0.060 el primer da de cultivo. Al igual que con el contenido en clorofila, los valores
absorbancia fueron mayores que en el Cultivo 2 pero menores que en el Cultivo 1.

Con respecto al cambio de color, hay que decir que en los primeros das de cultivo,
este cambio fue notable, pasando de una tonalidad verde plida a un tono bastante verde como
se puede observar en la Fig. 49. Se supone que este cambio de color coincide con el periodo
de crecimiento del cultivo. Pero hay que decir que esta tonalidad verdosa no se mantuvo todo
el cultivo, sino que a la mitad de ste aproximadamente, dej de aumentar para comenzar a
tomar una tonalidad ms plida en los ltimos das.

Acerca de este cultivo hay que comentar que el da once se produjo un fallo en el
funcionamiento de la bomba, hecho que justifica que ese da los valores de clorofila fueron
ms bajos que los del da siguiente cuando lo lgico es que fuera al revs. Finalizado el tercer
cultivo, se realiz la curva de cultivo con todos los datos obtenidos sobre la estimacin del
contenido en clorofila.




y = -0.008x
2
+ 706.5x - 1E+07
R = 0.798
0.0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
1.2
29/04/10 01/05/10 03/05/10 05/05/10 07/05/10 09/05/10 11/05/10 13/05/10 15/05/10 17/05/10
C
L
O
R
O
F
I
L
A

(

g

L
-
1
)


Fig. 47. Concentracin de clorofila a (media error estndar de la media) a partir de un cultivo de Nannochloropsis gaditana desde el 30 de
Abril hasta el 17 de Mayo.


- 98 -
Para la obtencin de la curva de cultivo se han representado los valores de clorofila
(gL
-1
) frente a la duracin del cultivo (18 das).

En este tercer cultivo como se puede observar, existe un periodo de crecimiento los
primeros das que dura prcticamente hasta la mitad del cultivo. Despus empieza un periodo
de establecimiento que dura unos cuatro das, en el cual, el cultivo mantiene sus valores de
clorofila y su color verde para finalizar en un periodo de decadencia.

En la Fig. 48 se pueden observar los tres periodos que transcurren durante este
segundo cultivo. El periodo de crecimiento tiene una duracin aproximada de siete das (29
Abril 6 de Mayo), el periodo de establecimiento tiene una duracin de cinco das (7 11
Mayo) y el ltimo periodo, el de decadencia, tiene una duracin de unos seis das (12 17 de
Mayo).



0.0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
1.2
30/04/10 02/05/10 04/05/10 06/05/10 08/05/10 10/05/10 12/05/10 14/05/10 16/05/10
C
L
O
R
O
F
I
L
A

(

g

L
-
1
)
Establecimiento



Fig. 48. Periodos de crecimiento, establecimiento y decadencia de un cultivo de Nannochloropsis gaditana (Cultivo 3) entre el 29 de Abril y
el 17 de Mayo de 2010.


- 100 -
A continuacin se muestran diferentes imgenes del cultivo:







Fig. 49. Cultivo 3 en diferentes das. Se puede observar perfectamente el cambio de
coloracin.
04/05/10
30/04/10


- 101 -
Llegado al final del Cultivo 3 y finalizadas los clculos para determinar la
concentracin de clorofila, se paso al cosechado de dicho cultivo. Para ello se vaci el
biorreactor y el cultivo se llev al Departamento de Produccin Vegetal: Botnica y
Proteccin Vegetal para su centrifugacin y posterior obtencin de pasta de algas (biomasa),
al igual que se hizo con los anteriores cultivos.

La pasta de algas obtenida se introduca en una placa petri y se llevaba directamente
al laboratorio para realizar las pruebas de obtencin del contenido en residuo seco y cenizas.

Como en el caso del Cultivo 1 se realiz una tabla en la que se recogieron los datos
ms relevantes obtenidos de la centrifugacin, es decir, fecha de inicio y final del cultivo,
fecha y duracin de la centrifugacin, duracin del cultivo, volumen de cultivo centrifugado y
cantidad de biomasa (g) obtenida. Con estos datos se obtenan adems la biomasa obtenida
expresada en gL
-1
y en mgL
-1
da
-1
. Adems, en la Tabla 12 tambin se recogieron los
valores de residuo seco y de cenizas.

Tabla 12. Datos relativos al Cultivo 3 tomados durante la centrifugacin el da 17 de Mayo.

VARIALBE VALOR
Fecha inicio del cultivo 30/04/10
Fecha final del cultivo 17/05/10
Fecha centrifugacin 17/05/10
Duracin centrifugacin (h) 0.12
Contador inicial (L) 2117
Contador final (L) 2124
Volumen cultivo (L) 7
Cultivo (das) 17
Biomasa (g) 2.30
Biomasa (gL
-1
) 0.33
Biomasa (mgL
-1
da
-1
) 19.3


- 102 -
Como se puede observar en la Tabla 12, la centrifugacin se llev a cabo el mismo
da que finaliz el cultivo. sta tuvo una duracin de 0.12 h y el volumen de cultivo
centrifugado fue de 7 L.

Finalizada la centrifugacin del cultivo, se recolect 2.30 g de biomasa del cultivo, lo
que significa que dicho cultivo en sus 18 das de duracin gener 0.33 gL
-1
de biomasa o lo
que es lo mismo tiene una productividad volumtrica de 19.3 mgL
-1
da
-1
.

Observando estos datos se puede decir que el rendimiento en cuanto a cantidad de
biomasa obtenida fue bajo.

Finalizada la centrifugacin, la pasta de algas obtenida se llev al laboratorio para
realizar los anlisis de obtencin del contenido en Residuo Seco y Cenizas pero debido a la
poca cantidad de pasta de algas que se consigui slo fue posible llevar a cabo los anlisis
referentes al contenido en Cenizas. Los resultados obtenidos se plasmaron en la Tabla 13:

Tabla 13. Cenizas (CE) obtenidos al someter la pasta de algas a 540 C durante 24 h en un
horno. T, tara; M, muestra; MED, Media; EEM, Error estndar de la media; CDV,
Coeficiente de variacin e IDC, Intervalo de confianza (p=0.05).

T (g) T + M (g) M (g) T + CE (g) CE (g) CE (%) MED EEM CDV IDC
13.7828 14.4398 0.6570 13.7926 0.0098 1.49
1.44 0.02 2.93 0.10 14.1182 14.6484 0.5302 14.1257 0.0075 1.41
14.5328 15.0809 0.5481 14.5406 0.0078 1.42

La Tabla 13 hace referencia al contenido en CE, al igual que en el Cultivo 1, se
expone el peso de las tres muestras antes de introducirlas en el horno y el peso despus de 24
h a 540 C. As se estim el contenido en CE en g y porcentaje (%). Igualmente se calcul la
media, el error estndar de la media, el coeficiente de variacin (%) y el intervalo de
confianza (p = 0.05).

Sobre los resultados se puede decir que el contenido medio de CE es de 1.44 %,
mayor que los resultados obtenidos en el Cultivo 1. Con un margen de error del 2 %, lo que
significa que existe muy poca variabilidad entre las muestras utilizadas para su clculo. El
intervalo de confianza es de 0.10, lo que significa que el valor medio se encuentra entre 1.34 y
1.54 con una confianza del 95 %.

Finalizado el estudio de todos los resultados de cada cultivo, se realiz una
comparativa de las 3 curvas de cultivo conjuntamente. Para realizar esta comparativa se
realiz una aplicacin en Excel, en la cual, se representaron los valores de clorofila de cada
cultivo frente a la duracin del cultivo.



0.0
0.4
0.8
1.2
1.6
2.0
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20
C
L
O
R
O
F
I
L
A

(

g

L
-
1
)
DURACIN (DAS)
CULTIVO 1
CULTIVO 2
CULTIVO 3


Fig. 50. Comparativa del contenido en clorofila de tres cultivos de Nannochloropsis gaditana frente a la duracin del cultivo.


- 104 -

Como se puede observar en la Fig. 50, se verifica todo lo dicho anteriormente en los
respectivos cultivos. El Cultivo 1, con aportacin de CO
2
es el que mayor valores de clorofila
tiene (superiores casi todos a 1 gL
-1
), seguido del Cultivo 3, sin aportacin de CO
2
, con
valores que oscilan 1 gL
-1
y por ltimo el Cultivo 2 tambin sin aportacin de CO
2
cuyos
valores no superan un contenido en clorofila de 0.80 gL
-1
.

3.4. SENSOR MULTIPARAMTRICO (mod. HI-9828)

Como ya se ha comentando en el captulo de Material y Mtodos, se instal un
sensor multiparamtrico desde el inicio de los Cultivos 2 y 3 durante das intercalados hasta la
finalizacin de dichos cultivos. Los periodos de medicin eran de 12 h (12:01 12:00 a.m)

Los parmetros medidos por el sensor multiparamtrico fueron los siguientes:
Temperatura ( C), pH, potencial redox (ORP, mV), conductividad elctrica (CE
25
, mScm
-1
),
oxgeno disuelto (O
2
, mgL
-1
) y presin (P, mbar).

Para la representacin y posterior interpretacin de estos datos se realiz una
aplicacin en Excel, en la que adems de representar los parmetros anteriormente citados,
tambin se calcularon mediante diferentes frmulas, el oxgeno expresado en porcentaje (%) y
el contenido en slidos totales disueltos (TDS) expresado en mgL
-1
.

Incorporados todos los parmetros en la Tabla 14 se generaron automticamente seis
grficos: T, ORP, pH-CE
25
, O
2
, Presin y TDS (Fig. 51).





























Tabla 14. Fragmento de una medicin del sensor multiparamtrico HANNA Instruments (mod. 9828) del da 15 de Abril de 2010: ORP,
potencial redox; O
2
, oxgeno disuelto; CE
25
, conductividad elctrica; P, presin y TDS, slidos disueltos totales.
FECHA HORA TEMPERATURA (C) pH (0-14) ORP (mV) O
2
(mgL
-1
) CE
25
(mScm
-1
) P (mbar) O
2
(%) TDS (mgL
-1
)
15/04/10 12:01 23.5 9.83 33.5 3.53 226 941 42.0 113
15/04/10 12:02 23.4 9.84 33.4 4.54 227 941 53.9 113.5
15/04/10 12:03 23.5 9.86 32.8 4.79 227 941 56.9 113.5
15/04/10 12:04 23.5 9.86 32.6 5.05 227 941 60.0 113.5
15/04/10 12:05 23.5 9.87 32.3 5.46 227 941 64.9 113.5
15/04/10 12:06 23.5 9.87 32.3 4.80 227 941 57.1 113.5
15/04/10 12:07 23.5 9.89 32.4 4.63 227 941 55.1 113.5
15/04/10 12:08 23.5 9.90 32.3 4.89 227 941 58.2 113.5
15/04/10 12:09 23.5 9.90 32.5 4.25 227 941 50.6 113.5
15/04/10 12:10 23.5 9.90 32.8 3.93 227 941 46.8 113.5
15/04/10 12:11 23.5 9.89 33.0 3.76 227 941 44.8 113.5
15/04/10 12:12 23.5 9.89 33.2 3.68 227 941 43.8 113.5
15/04/10 12:13 23.5 9.89 33.3 3.63 227 941 43.2 113.5
15/04/10 12:14 23.6 9.89 33.4 3.57 227 941 42.5 113.5
15/04/10 12:15 23.6 9.89 33.5 3.53 227 941 42.0 113.5
15/04/10 12:16 23.6 9.89 33.7 3.61 227 941 43.0 113.5
15/04/10 12:17 23.6 9.89 33.9 3.80 227 941 45.3 113.5
15/04/10 12:18 23.6 9.89 34.0 4.00 227 941 47.6 113.5
15/04/10 12:19 23.6 9.89 34.1 4.15 227 941 49.4 113.5
15/04/10 12:20 23.6 9.89 34.2 4.21 227 941 50.1 113.5
15/04/10 12:21 23.6 9.89 34.3 4.34 227 941 51.7 113.5
15/04/10 12:22 23.6 9.89 34.5 4.52 227 941 53.8 113.5
15/04/10 12:23 23.6 9.89 34.6 4.62 227 941 55.1 113.5
15/04/10 12:24 23.6 9.89 34.7 4.65 227 941 55.4 113.5
15/04/10 12:25 23.6 9.89 34.8 4.60 227 941 54.8 113.5
15/04/10 12:26 23.6 9.89 34.9 4.50 227 941 53.6 113.5
15/04/10 12:27 23.6 9.90 34.7 4.79 229 941 57.1 114.5
15/04/10 12:28 23.6 9.91 34.6 4.79 229 941 57.1 114.5
15/04/10 12:29 23.6 9.92 34.5 4.84 229 941 57.7 114.5
15/04/10 12:30 23.6 9.92 34.5 4.37 229 941 52.1 114.5


- 106 -





Fig. 51. Grficos generados automticamente a partir de la Tabla 14. A, Temperatura; B,
potencial redox; C, pH conductividad elctrica; D, oxgeno disuelto; E, presin y F,
slidos disueltos totales.
0
20
40
60
80
9:36 14:24 19:12 0:00 4:48 9:36 14:24
P
O
T
E
N
C
I
A
L

R
E
D
O
X

(
m
V
)



.
20
22
24
26
28
30
32
34
9:36 14:24 19:12 0:00 4:48 9:36 14:24
T
E
M
P
E
R
A
T
U
R
A

(

C
)
.
150
200
250
300
350
7
8
9
10
11
12
13
14
9:36 14:24 19:12 0:00 4:48 9:36 14:24
C
E
2
5
(
m
S

c
m
-
1
)
p
H
pH CE25
2
4
6
8
9:36 14:24 19:12 0:00 4:48 9:36 14:24
O
2
(
m
g

L
-
1
)
930
940
950
960
970
9:36 14:24 19:12 0:00 4:48 9:36 14:24
P
R
E
S
I

N

(
m
b
a
r
)
110
120
130
140
150
160
170
180
190
200
9:36 14:24 19:12 0:00 4:48 9:36 14:24
T
D
S


(
m
g

L
-
1
)
A
E F
C D
B


- 107 -
Adems de la representacin de los grficos, se elaboraron unas tablas (una para cada
parmetro) en las cuales se exponan los valores mximos, mnimos y medios de cada
parmetro y el rango, es decir, la diferencia entre el valor mximo y el mnimo. Un ejemplo se
puede observar en la
Tabla 15:

Tabla 15. Representacin de los valores mximo, mnimo y medio y del rango de los
parmetros potencial redox (mV) y presin (mbar).















Finalmente, sealar que la aplicacin permite analizar de forma comparativa por
parejas, diferentes curvas (Fig. 52).



Fig. 52. Representacin comparativa entre los parmetros potencial redox (ORP, mV) y
slidos totales disueltos (TDS, mgL
-1
) realizada mediante la funcin elegir.
VALOR ORP (mV) P (mbar)
MEDIA 44.56 940.51
MNIMO 31.00 938.40
MXIMO 57.10 943.40
RANGO 26.10 5.00


- 108 -

Finalizada la explicacin del desarrollo de la aplicacin de Excel, como ms claro
queda es observando una de ellas. Para ello se ha incrustado la aplicacin correspondiente al
da 15 de Abril:










3.5. CENTRO TECNOLGICO DE REPSOL (CTR)

En este apartado se presentan los resultados obtenidos en los diferentes cultivos de
Nannochloropsis gaditana llevados a cabo en el biorreactor tubular vertical del Centro
Tecnolgico REPSOL (CTR). Los resultados hacen referencia a la produccin de biomasa y
al contenido en residuo seco (RS) y cenizas (CE).

Como se puede observar en la Tabla 16, la produccin de biomasa de los cultivos de
Nannochloropsis gaditana con y sin aportacin de CO
2
en el biorreactor tubular vertical del
CTR es muy superior a la produccin de biomasa alcanzada por el biorreactor de medio
poroso (geotextil), ya que con este sistema de cultivo se puede llegar a conseguir una biomasa
de 176. 4 mgL
-1
da
-1
, una cantidad ms que aceptable.

Adems tambin se puede observar que al igual que en el caso de los cultivos
llevados a cabo en el biorreactor de medio poroso, la produccin de biomasa no difiere
significativamente entre los cultivos con aportacin de CO
2
y sin aportacin de CO
2
.

En las Tabla 17- Tabla 18 se observa el contenido en residuo seco (RS) oscila entre
el 15 y el 30 % mientras que el contenido en cenizas (CE) se encuentra entre un 2 y un 30 %.
Hay que decir que esta variabilidad es debido a la diferencia de duracin del cultivo, ya que a
mayor duracin, mayores valores de RS y CE. Con respecto a los cultivos de
Nannochloropsis gaditana en el biorreactor de medio poroso (geotextil) hay que decir que los
valores son muy parecidos, tanto en RS como en CE.

Finalmente en la Fig. 53 se ha representado el contenido en RS y CE de los cultivos
de Nannochloropsis gaditana. Cada grfico representa un cultivo.

MEDIO POROSO
20100415



Tabla 16. Datos relativos a la centrifugacin y produccin de biomasa de diferentes cultivos de Nannochloropsis gaditana con y sin
aportacin de CO
2
llevados a cabo en el biorreactor tubular vertical del Centro Tecnolgico REPSOL (CTR).

VARIABLE
SIN CO
2
CON CO
2

1 2 3 4 5 6 7 1 2
Fecha inicio del cultivo 17/11/09 02/12/09 30/12/09 21/01/10 02/03/10 31/03/10 30/04/10 17/03/10 14/04/10
Fecha final del cultivo 27/11/09 22/12/09 18/01/10 24/02/10 17/03/10 14/04/10 13/05/10 31/03/10 30/04/10
Temperatura mxima (C) 27.40 28.50 27.80 30.60 27.50 31.40 27.10 31.5 40.40
Temperatura mnima (C) 4.90 3.30 2.80 7.40 8.70 10.60 10.40 10.60 10.70
Temperatura media (C) 16.15 15.90 15.30 19.00 18.10 21.00 18.75 21.05 25.55
Fecha centrifugacin 30/11/09 23/12/09 22/01/10 25/02/10 18/03/10 19/04/10 18/05/10 06/04/10 04/05/10
Duracin centrifugacin (h) 0.83 3.8 2.6 1.13 0.83 0.83 0.8 0.92 0.75
Contador inicial (L) 342 1030 1373 1655 1704 1910 2124 1862 2065
Contador final (L) 501 1345 1655 1704 1746 1962 2171 1904 2112
Volumen cultivo (L) 159 315 282 49 42 52 47 42 47
Cultivo (das) 10 20 20 34 15 14 14 14 15
Biomasa (g) 112 641 319 49 92.58 128.45 88.87 129.12 116.2
Biomasa (gL
-1
) 0.70 2.03 1.13 1.00 2.20 2.47 1.89 3.07 2.47
Biomasa (mgL
-1
da
-1
) 70.4 101.7 56.6 29.4 147.0 176.4 135.1 219.6 164.8
Residuo seco (%) 19.50 31.42 21.47 16.42 18.79 19.51 21.36 19.12 21.58
Residuo mineral (%) 7.30 26.80 4.03 4.51 2.80 2.19 2.01 2.21 2.20
Residuo orgnico (%) 12.20 4.62 17.44 11.91 15.99 17.32 19.35 16.91 19.38



Tabla 17. Residuo seco (RS) expresado en g y porcentaje (%) de los diferentes cultivos de Nannochloropsis gaditana obtenidos al someter
la pasta de algas a 105 C durante 15 min en una estufa. Los cultivos del 1 7 son sin aportacin de CO
2
y los cultivos 8 y 9 con
aportacin de CO
2
. TUB, Tubular; T, Tara; M, Muestra; MED, Media; EEM, Error estndar de la media; CDV, Coeficiente de
variacin e IDC, Intervalo de confianza (p=0.05).
ANLISIS T (g) T + M (g) M (g) T + RS (g) RS (g) RS (%) MED EEM CDV IDC
1 TUB
34.9302 36.0101 1.0799 35.1407 0.2105 19.5
19.47 0.15 1.29 0.63 34.6546 35.3919 0.7373 34.7962 0.1416 19.2
35.3131 36.0521 0.739 35.4589 0.1458 19.7
2 TUB
34.9294 37.6833 2.7539 35.8379 0.9085 33.0
31.42 0.82 4.50 3.51 34.6552 37.2153 2.5601 35.4489 0.7937 31.0
35.3118 37.617 2.3052 36.0092 0.6974 30.3
3 TUB
34.9301 36.9685 2.0384 35.3684 0.4383 21.5
21.47 0.18 1.44 0.77 34.6538 36.6889 2.0351 35.0842 0.4304 21.1
35.3107 37.3164 2.0057 35.7472 0.4365 21.8
4 TUB
34.9333 35.9555 1.0222 35.0998 0.1665 16.3
16.42 0.18 1.88 0.77 34.6668 35.7346 1.0678 34.8398 0.173 16.2
35.3133 36.4961 1.1828 35.5117 0.1984 16.8
5 TUB
34.9273 36.2639 1.3366 35.1775 0.2502 18.7
18.79 0.06 0.53 0.25 34.6506 35.8441 1.1935 34.8762 0.2256 18.9
35.3103 36.5819 1.2716 35.5486 0.2383 18.7
6 TUB
34.9287 36.9507 2.0220 35.3316 0.4029 19.9
19.51 0.26 2.27 1.10 34.6526 36.7309 2.0783 35.0484 0.3958 19.0
35.3106 37.2731 1.9625 35.6946 0.384 19.6
7 TUB
34.9273 36.4545 1.5272 35.2589 0.3316 21.7
21.36 0.18 1.43 0.76 34.6512 36.1102 1.459 34.9608 0.3096 21.2
35.3101 36.8747 1.5646 35.6411 0.3310 21.2
8 TUB
34.9275 36.2384 1.3109 35.1812 0.2537 19.4
19.12 0.18 1.63 0.77 34.6512 36.0313 1.3801 34.9102 0.2590 18.8
35.3094 36.6055 1.2961 35.5588 0.2494 19.2
9 TUB
34.9267 36.0955 1.1688 35.1820 0.2553 21.8
21.58 0.13 1.05 0.56 34.6512 35.6536 1.0024 34.8659 0.2147 21.4
35.3106 36.2724 0.9618 35.5173 0.2067 21.5



Tabla 18. Cenizas (CE) expresado en g y porcentaje (%) de los diferentes cultivos de Nannochloropsis gaditana obtenidos al someter la
pasta de algas a 105 C durante 15 min en una estufa. Los cultivos del 1 7 son sin aportacin de CO
2
y los cultivos 8 y 9 con
aportacin de CO
2
. TUB, Tubular; T, Tara; M, Muestra; MED, Media; EEM, Error estndar de la media; CDV, Coeficiente de
variacin e IDC, Intervalo de confianza (p=0.05).
ANLISIS T (g) T + M (g) M (g) T + CE (g) CE (g) CE (%) MED EEM CDV IDC
1 TUB
13.7826 14.5678 0.7852 13.8451 0.0625 7.96
7.35 0.90 21.28 3.88 14.5320 15.511 0.979 14.5865 0.0545 5.57
14.1178 15.1359 1.0181 14.2044 0.0866 8.51
2 TUB
13.7788 15.9027 2.1239 14.333 0.5542 26.09
26.90 0.41 2.62 1.75 14.5304 18.3003 3.7699 15.5549 1.0245 27.18
14.1144 16.4405 2.3261 14.7522 0.6378 27.42
3 TUB
13.5703 15.0077 1.4374 13.6332 0.0629 4.38
4.03 0.19 8.38 0.84 13.6739 15.1287 1.4548 13.7321 0.0582 4.00
13.2073 14.6954 1.4881 13.2624 0.0551 3.70
4 TUB
13.5692 14.6151 1.0459 13.6152 0.0460 4.40
4.51 0.06 2.22 0.25 13.6735 14.6894 1.0159 13.7201 0.0466 4.59
13.2076 14.2295 1.0219 13.2541 0.0465 4.55
5 TUB
13.5664 14.3723 0.8059 13.5882 0.0218 2.71
2.80 0.05 2.98 0.21 13.9266 14.8042 0.8776 13.9516 0.0250 2.85
14.5261 15.3787 0.8526 14.5504 0.0243 2.85
6 TUB
13.7823 15.2296 1.4473 13.8135 0.0312 2.16
2.19 0.02 1.77 0.10 14.5325 15.9259 1.3934 14.5636 0.0311 2.23
14.1179 15.5934 1.4755 14.1501 0.0322 2.18
7 TUB
14.5268 15.4944 0.9676 14.5462 0.0194 2.00
2.01 0.01 1.00 0.05 12.6529 13.4375 0.7846 12.6688 0.0159 2.03
15.1384 16.2157 1.0773 15.1598 0.0214 1.99
8 TUB
13.7825 14.6624 0.8799 13.8014 0.0189 2.15
2.21 0.03 2.70 0.15 14.5323 15.4505 0.9182 14.5531 0.0208 2.27
14.1182 15.0794 0.9612 14.1396 0.0214 2.23
9 TUB
13.7831 14.3505 0.5674 13.7957 0.0126 2.22
2.20 0.02 1.88 0.10 14.1191 14.9348 0.8157 14.1367 0.0176 2.16
14.5342 15.1246 0.5904 14.5474 0.0132 2.24




0
10
20
30
40
1
TUB
2
TUB
3
TUB
4
TUB
5
TUB
6
TUB
7
TUB
8
TUB
9
TUB
R
E
S
I
D
U
O

S
E
C
O

C
E
N
I
Z
A
S

(
%
)
ANLISIS
RESIDUO SECO
CENIZAS

Fig. 53. Residuo Seco (RS) y Cenizas (CE) de los diferentes cultivos de Nannochloropsis gaditana. Los cultivos del 1 7 son sin
aportacin de CO
2
y los cultivos 8 y 9 con aportacin de CO
2
.

















CONCLUSIONES


- 114 -
4. CONCLUSIONES

Tras la discusin de los resultados anteriormente realizados, se ha llegado a las
siguientes conclusiones:

Se puede cultivar la microalga Nannochloropsis gaditana en un biorreactor de medio
poroso (geotextil) utilizando para la recirculacin del cultivo una bomba sumergible
de pecera.

Para el correcto funcionamiento del biorreactor de medio poroso (geotextil), es
esencial un buen funcionamiento de la bomba de circulacin ya que se ha podido
comprobar que en los momentos en los que se han producido fallos, el cultivo
empeora.

La concentracin de clorofila (gL
-1
) medida por el mtodo espectrofotomtrico
(GMEZ et al., 2009) de un cultivo de Nannochloropsis gaditana a partir de un
biorreactor de medio poroso, es un buen estimador de la biomasa producida.

En cultivos con una duracin de 15 das se observa que a partir del octavo da el
cultivo comienza a disminuir su crecimiento, lo que se traduce en una disminucin
en los valores de clorofila obtenidos y en la tonalidad del cultivo que pasa de verde
vivo a verde plido.

Se puede aplicar gases de combustin procedentes de un generador elctrico de
gasolina a cultivos de Nannochloropsis gaditana, mediante la adaptacin de un baln
de plstico conectado al biorreactor mediante una vlvula. La presencia de NO
x
y CO
no parece comprometer el desarrollo del alga, al menos, durante los primeros das de
crecimiento.

Los resultados obtenidos de biomasa expresados en gL
-1
en un cultivo de
Nannochloropsis gaditana en un biorreactor de medio poroso son significativamente
inferiores (p=0.05) en comparacin con otros sistemas de cultivo, como es el caso de
un biorreactor tubular, puesto en funcionamiento en el Centro Tecnolgico REPSOL.

La cantidad de biomasa en el cultivo con aportacin de CO
2
no difiere
significativamente (p=0.05) de la cantidad de biomasa obtenida en cultivos sin
aportacin de CO
2
, esto refleja que este tipo de microalga no consume ms carbono
del estrictamente necesario para su crecimiento y que la disolucin del CO
2
en el
medio de cultivo, en equilibrio con la atmsfera, es suficiente para cubrir la demanda
metablica de CO
2
que tiene el alga Nannochloropsis gaditana en el biorreactor que
se ha utilizado.


















BIBLIOGRAFA


- 116 -
5. BIBLIOGRAFA

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ANEXO 1

BASES PARA LA SELECCIN DE MICROALGAS
FITOPLANCTNICAS EXPLOTABLES COMO
PRODUCTORAS DE RECURSOS ENERGTICOS


- I.1 -
Dunaliella salina

Phylum: Chlorophyta
Clase: Chlorophyceae
Orden: Volvocales
Familia: Dunaliellaceae
Gnero: Dunaliella
Especie: D. salina






Fig. 54. Imgenes al microscopio de Dunaliella salina.


- I.2 -
Phaeodactylum tricornutum

Phylum: Bacillariophyta
Clase: Bacillariophyceae
Orden: Naviculales
Familia: Phaeodactylaceae
Gnero: Phaeodactylum
Especie: P. tricornutum







Fig. 55. Imgenes al microscopio de Phaeodactylum tricornutum.


- I.3 -

Isochrysis galbana (clon T-ISO)

Phylum: Haptophytas
Clase: Haptofceas (Primnesiofceas)
Gnero: Isochrysis
Especie: I. galbana






Fig. 56. Imgenes al microscopio de Isochrysis galbana.


- I.4 -
Thalassiosira weissflogii

Phylum: Bacillariophyta
Clase: Coscinodiscophyceae
Orden: Thalassiosirales
Familia: Thalassiosiraceae
Gnero: Thalassiosira
Especie: T. weissflogii






Fig. 57. Imgenes al microscopio de Thalassiosira weissflogii.


- I.5 -
Rhodomonas salina

Phylum: Chromophyta
Clase: Cryptophyceae
Orden: Cryptomonadales
Familia: Cryptomonadaceae
Gnero: Rhodomonas
Especie: R. salina






Fig. 58. Imgenes al microscopio de Rhodomonas salina.



- I.6 -
Pavlova lutheri (divisio)

Phylum: Haptophyta
Clase: Prymnesiophyceae
Orden: Pavlovales
Familia: Pavlovaceae
Gnero: Pavlova
Especie: P. lutheri





Fig. 59. Imgenes al microscopio de Pavlova lutheri.


- I.7 -
Chaetoceros gracilis

Phylum: Bacillariophyta
Clase: Coscinodiscophyceae
Orden: Chaetocerotales
Familia: Chaetocerotaceae
Gnero: Chaetoceros
Especie: C. gracilis






Fig. 60. Imgenes al microscopio de Chaetoceros gracilis.


- I.8 -
Tetraselmis chuii

Phylum: Chlorophyta
Clase: Prasinophyceae
Orden: Chlorodendrales
Familia: Chlorodendraceae
Gnero: Tetraselmis
Especie: T. chuii






Fig. 61. Imgenes al microscopio de Tetraselimis chuii.


- I.9 -
Porphyridium cruentum

Phylum: Rhodophyta
Clase: Rhodophyceae
Orden: Porphyridiales
Familia: Porphyridiaceae
Gnero: Porphyridium
Especie: P. cruentum







Fig. 62. Imagen al microscopio de Porphyridium cruentum.


- I.10 -
Skeletonema costatum

Phylum: Bacillariophyta
Clase: Coscinodiscophyceae
Orden: Thalassiosirales
Familia: Skeletonemataceae
Gnero: Skeletonema
Especie: S. costatum







Fig. 63. Imgenes al microscopio de Skeletonema costatum.












ANEXO 2

"CONCENTRACIONES DE CLOROFILA DE
DIFERENTES CULTIVOS DE NANNOCHLOROPSIS
GADITANA


- II.1 -
CULTIVO 1



LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.067 0.071 0.078 0.041 1.00 0.020 0.060 0.13


LON Longitud de onda (nm)
L Longitud de paso de luz de la cubeta (cm)
Ve Volumen del extracto (L)
Vf Volumen del filtrado (L)
CLO Concentracin de clorofila ( gL
-1
)

COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 001.
2. Fecha de recogida de muestra: 26/03/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.


Fig. 64. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis gaditana.


- II.2 -
0.0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
550 600 650 700 750 800 850
A
B
S
O
R
B
A
N
C
I
A
LONGITUD DE ONDA (nm)


LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.09 0.092 0.096 0.06 1.00 0.020 0.060 0.12


COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 002.
2. Fecha de recogida de muestra: 26/03/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 65. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis gaditana.


- II.3 -


LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.249 0.294 0.441 0.149 1.00 0.020 0.060 1.06


COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 003.
2. Fecha de recogida de muestra: 29/03/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 66. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis gaditana.


- II.4 -


LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.213 0.254 0.403 0.119 1.00 0.020 0.060 1.03


COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 004.
2. Fecha de recogida de muestra: 29/03/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 67. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis gaditana.


- II.5 -


LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.435 0.513 0.759 0.266 1.00 0.020 0.060 1.79


COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 005.
2. Fecha de recogida de muestra: 30/03/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 68. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis gaditana.


- II.6 -
0.0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
550 600 650 700 750 800 850
A
B
S
O
R
B
A
N
C
I
A
LONGITUD DE ONDA (nm)


LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.43 0.517 0.792 0.262 1.00 0.020 0.060 1.93


COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 006.
2. Fecha de recogida de muestra: 30/03/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 69. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis gaditana.


- II.7 -


LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.343 0.377 0.477 0.243 1.00 0.020 0.060 0.84

COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 007.
2. Fecha de recogida de muestra: 06/04/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 70. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis gaditana.


- II.8 -

LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.543 0.599 0.767 0.385 1.00 0.020 0.060 1.38

COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 008.
2. Fecha de recogida de muestra: 06/04/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 71. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis gaditana.


- II.9 -


LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.709 0.775 0.984 0.528 1.00 0.020 0.060 1.65

COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 009.
2. Fecha de recogida de muestra: 07/04/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 72. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis gaditana.


- II.10 -


LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.683 0.782 0.986 0.514 1.00 0.020 0.060 1.70


COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 010.
2. Fecha de recogida de muestra: 07/04/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 73. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis gaditana.


- II.11 -


LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.664 0.719 0.898 0.497 1.00 0.020 0.060 1.45


COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 011.
2. Fecha de recogida de muestra: 08/04/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 74. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis gaditana.


- II.12 -


LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.559 0.625 0.815 0.391 1.00 0.020 0.060 1.53


COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 012.
2. Fecha de recogida de muestra: 08/04/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 75. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis gaditana.


- II.13 -


LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.536 0.582 0.722 0.388 1.00 0.020 0.060 1.20


COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 013.
2. Fecha de recogida de muestra: 09/04/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 76. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis gaditana.


- II.14 -


LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.413 0.443 0.539 0.297 1.00 0.020 0.060 0.87


COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 014.
2. Fecha de recogida de muestra: 09/04/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 77. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis gaditana.


- II.15 -
CULTIVO 2


LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.09 0.09 0.102 0.034 1.00 0.020 0.060 0.24

COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 001.
2. Fecha de recogida de muestra: 13/04/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 78. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis gaditana.


- II.16 -


LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.105 0.109 0.137 0.057 1.00 0.020 0.060 0.28


COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 003.
2. Fecha de recogida de muestra: 14/04/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 79. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis gaditana.


- II.17 -


LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.081 0.089 0.117 0.038 1.00 0.020 0.060 0.28


COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 004.
2. Fecha de recogida de muestra: 14/04/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 80. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis gaditana.


- II.18 -


LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.115 0.128 0.172 0.063 1.00 0.020 0.060 0.39


COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 005.
2. Fecha de recogida de muestra: 15/04/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 81. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis gaditana.


- II.19 -


LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.091 0.103 0.139 0.041 1.00 0.020 0.060 0.35


COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 006.
2. Fecha de recogida de muestra: 15/04/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 82. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis gaditana.


- II.20 -
0.0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
550 600 650 700 750 800 850
A
B
S
O
R
B
A
N
C
I
A
LONGITUD DE ONDA (nm)


LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.153 0.175 0.257 0.078 1.00 0.020 0.060 0.65


COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 007.
2. Fecha de recogida de muestra: 19/04/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 83. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis gaditana.


- II.21 -
0.0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
550 600 650 700 750 800 850
A
B
S
O
R
B
A
N
C
I
A
LONGITUD DE ONDA (nm)


LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.179 0.198 0.287 0.101 1.00 0.020 0.060 0.67


COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 008.
2. Fecha de recogida de muestra: 19/04/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 84. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis gaditana.


- II.22 -


LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.158 0.179 0.265 0.091 1.00 0.020 0.060 0.63


COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 009.
2. Fecha de recogida de muestra: 20/04/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 85. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis gaditana.


- II.23 -


LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.149 0.168 0.253 0.081 1.00 0.020 0.060 0.62


COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 010.
2. Fecha de recogida de muestra: 20/04/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 86. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis gaditana.


- II.24 -


LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.161 0.177 0.252 0.091 1.00 0.020 0.060 0.58


COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 011.
2. Fecha de recogida de muestra: 21/04/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 87. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis gaditana.


- II.25 -


LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.175 0.188 0.265 0.105 1.00 0.020 0.060 0.58


COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 012.
2. Fecha de recogida de muestra: 21/04/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 88. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis gaditana.


- II.26 -
0.0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
550 600 650 700 750 800 850
A
B
S
O
R
B
A
N
C
I
A
LONGITUD DE ONDA (nm)


LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.1 0.124 0.215 0.059 1.00 0.020 0.060 0.57


COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 013.
2. Fecha de recogida de muestra: 22/04/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 89. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis gaditana.


- II.27 -


LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.099 0.121 0.218 0.054 1.00 0.020 0.060 0.60


COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 014.
2. Fecha de recogida de muestra: 22/04/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 90. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis gaditana.


- II.28 -
0.0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
550 600 650 700 750 800 850
A
B
S
O
R
B
A
N
C
I
A
LONGITUD DE ONDA (nm)


LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.117 0.133 0.207 0.079 1.00 0.020 0.060 0.47


COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 015.
2. Fecha de recogida de muestra: 26/04/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 91. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis gaditana.


- II.29 -


LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.111 0.13 0.211 0.073 1.00 0.020 0.060 0.51


COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 016.
2. Fecha de recogida de muestra: 26/04/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 92. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis gaditana.


- II.30 -
0.0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
550 600 650 700 750 800 850
A
B
S
O
R
B
A
N
C
I
A
LONGITUD DE ONDA (nm)


LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.11 0.125 0.199 0.084 1.00 0.020 0.060 0.43


COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 017.
2. Fecha de recogida de muestra: 27/04/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 93. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis gaditana.


- II.31 -
0.0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
550 600 650 700 750 800 850
A
B
S
O
R
B
A
N
C
I
A
LONGITUD DE ONDA (nm)


LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.057 0.066 0.115 0.037 1.00 0.020 0.060 0.29


COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 018.
2. Fecha de recogida de muestra: 27/04/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 94. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis gaditana.


- II.32 -
CULTIVO 3



LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.093 0.101 0.142 0.061 1.00 0.020 0.060 0.29


COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 001.
2. Fecha de recogida de muestra: 30/04/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 95. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis gaditana.


- II.33 -



LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.1 0.129 0.233 0.057 1.00 0.020 0.060 0.65

COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 002.
2. Fecha de recogida de muestra: 03/05/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 96. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis gaditana.


- II.34 -

LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.092 0.121 0.226 0.043 1.00 0.020 0.060 0.67

COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 003.
2. Fecha de recogida de muestra: 03/05/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 97. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis gaditana.


- II.36 -


LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.125 0.163 0.309 0.063 1.00 0.020 0.060 0.90

COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 004.
2. Fecha de recogida de muestra: 04/05/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 98. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis gaditana.


- II.36 -

LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.141 0.182 0.336 0.072 1.00 0.020 0.060 0.97

COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 005.
2. Fecha de recogida de muestra: 04/05/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 99. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis gaditana.


- II.37 -

LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.147 0.187 0.355 0.075 1.00 0.020 0.060 1.03

COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 006.
2. Fecha de recogida de muestra: 05/05/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 100. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis
gaditana.


- II.38 -

LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.183 0.222 0.387 0.107 1.00 0.020 0.060 1.03

COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 007.
2. Fecha de recogida de muestra: 05/05/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 101. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis
gaditana.


- II.39 -

LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.124 0.168 0.338 0.056 1.00 0.020 0.060 1.04

COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 008.
2. Fecha de recogida de muestra: 06/05/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 102. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis
gaditana.


- II.40 -


LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.119 0.163 0.333 0.045 1.00 0.020 0.060 1.06

COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 009.
2. Fecha de recogida de muestra: 06/05/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 103. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis
gaditana.


- II.41 -

LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.148 0.188 0.352 0.076 1.00 0.020 0.060 1.01

COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 010.
2. Fecha de recogida de muestra: 07/05/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 104. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis
gaditana.















- II.42 -

LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.16 0.201 0.363 0.095 1.00 0.020 0.060 0.99

COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 011.
2. Fecha de recogida de muestra: 07/05/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 105. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis
gaditana.










- II.43 -

LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.188 0.215 0.335 0.131 1.00 0.020 0.060 0.75

COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 012.
2. Fecha de recogida de muestra: 10/05/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 106. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis
gaditana.







- II.44 -
0.0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
550 600 650 700 750 800 850
A
B
S
O
R
B
A
N
C
I
A
LONGITUD DE ONDA (nm)

LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.18 0.203 0.312 0.126 1.00 0.020 0.060 0.68

COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 013.
2. Fecha de recogida de muestra: 10/05/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 107. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis
gaditana.







- II.45 -

LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.34 0.36 0.484 0.268 1.00 0.020 0.060 0.79

COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 014.
2. Fecha de recogida de muestra: 11/05/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 108. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis
gaditana.


- II.46 -

LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.35 0.373 0.523 0.274 1.00 0.020 0.060 0.92

COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 015.
2. Fecha de recogida de muestra: 11/05/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 109. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis
gaditana.











- II.47 -
0.0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
550 600 650 700 750 800 850
A
B
S
O
R
B
A
N
C
I
A
LONGITUD DE ONDA (nm)

LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.29 0.314 0.45 0.216 1.00 0.020 0.060 0.86

COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 016.
2. Fecha de recogida de muestra: 12/05/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 110. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis
gaditana.


- II.48 -


LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.182 0.191 0.248 0.146 1.00 0.020 0.060 0.37

COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 017.
2. Fecha de recogida de muestra: 17/05/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.

Fig. 111. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis
gaditana.


- II.49 -
0.0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
550 600 650 700 750 800 850
A
B
S
O
R
B
A
N
C
I
A
LONGITUD DE ONDA (nm)

LON LON LON LON L Ve Vf CLO
630 645 665 750 cm L L gL
-1

0.201 0.207 0.271 0.163 1.00 0.020 0.060 0.40

COMENTARIOS:
1. Anlisis de clorofila en muestra de algas 018.
2. Fecha de recogida de muestra: 17/05/2010
3. Volumen del extracto: 20 mL de acetona.
4. Volumen filtrado: 60 mL de cultivo de algas.


Fig. 112. Representacin de la absorbancia (A) frente a la longitud de onda (, nm) para
estimar las concentraciones de clorofila de un cultivo de Nannochloropsis
gaditana.