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Labo 8

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Informe 7 BQ
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Las técnicas más utilizadas para teñir geles de
poliacrilamida son la tinción con nitrato de plata y con
azul de Coomassie. Las dos técnicas tienen ventajas y
desventajas, la ventaja de la tinción con nitrato de plata
es su gran sensibilidad, y la del azul de Coomassie es su limpieza al trabajar
con él.

El azul de Coomassie tiñe todo el gel de
poliacrilamida, es por esto que se debe realizar
un lavado para reconocer las bandas. Esta
tinción se une más fuerte a las proteínas que al
gel, lo que hace posible que luego del lavado
solo queden visualizadas las bandas.

El azul de Coomassie se debe disolver en metanol, acido acético glacial y
agua, y luego filtrar. El gel ya fijado se tiñe con azul de Coomassie por 30 a
45 minutos aproximadamente (dejándolo en el agitador). Luego de esto, se
debe retirar el colorante utilizando la solución decolorante (metanol/acido
acético glacial/agua), esperar unos 20 minutos hasta que se visualicen las
bandas proteicas.

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