COMUNICACIN CELULAR

Los organismos unicelulares tienden a crecer y dividirse tan rpido como pueden con la sola
limitacin de nutrientes y condiciones ambientales.
Una clula de un organismo pluricelular morira en ausencia de estmulos externos (aunque no
vayan dirigidos necesariamente a localizar nutrientes o evitar venenos y depredadores), es
decir, estas clulas necesitan responder a estmulos externos para sobrevivir: ello garantiza
que haya clulas nicamente cuando y donde sean necesarias.
Las clulas de un organismo complejo tienen muy distintas morfologas derivadas de
fenmenos de proliferacin, crecimiento, diferenciacin y organizacin en tejidos para lo cual
deben adaptarse a las clulas vecinas y a su entorno mediante procesos controlados por
seales qumicas.
La decodificacin y respuesta a estas seales extracelulares controla:
el desarrollo de rganos y tejidos (reemplazamiento de clulas daadas, crecimiento
en tamao, migracin al sitio adecuado, arquitectura tisular)
procesos fisiolgicos normales
la regulacin de comportamientos, etc.
Seal
Receptor
Descodicacin
y respuesta
Emisor
Adrenalina
salivacin
Ritmo
cardiaco
TRANSDUCCION DE SEALES
! El comportamiento de cada tipo
celular depender de qu
receptores y qu molculas
sealizadoras exprese.
! Un mismo estmulo podr inducir
diferentes seales en distintos
rganos (dependiendo de las clulas
que lo compongan).
Alberts Essential Cell Biology 2nd Ed-
www.classwire.com/garlandscience
Efectos
citoslicos:
migracin,
metabolismo,
etc
Efectos
nucleares:
expresin
gnica,
inicio de
divisin
celular, etc
Proceso por el que las seales extracelulares se transmiten al
interior celular mediante protenas receptoras en la membrana
plasmtica que convierten la seal a una forma fsica o
qumica adecuada para producir el efecto celular deseado (ej:
un fotn en un impulso nervioso).
RECEPTORES INTRACELULARES (I):
Rc DE HORMONAS LIPOSOLUBLES o
RECEPTORES NUCLEARES
(tamoxifen)
(RU486)
(Dexametasona)
ALGUNOS LIGANDOS SON LIPOSOLUBLES
(ej: hormonas) Y ATRAVIESAN LA
MEMBRANA PLASMATICA POR DIFUSION
SIMPLE PARA UNIRSE A PROTENAS
RECEPTORAS INTRACELULARES
!El complejo hormona-
receptor se unen a
secuencias especficas en el
DNA llamadas Elementos de
Respuesta (RE).
!Se asocian en forma de
dmeros a secuencias
simtricas (palindrmicas).
!Todos los Rc de esta
familia tienen al menos 3
dominios:
1.- Unin a ligando,
2.- Unin al DNA
3.- Regulador transcripcional
Dominios y unin al DNA de los
receptores de hormonas
Dedos de
Zn:
estructura
de unin
al DNA
REPRIMEN LA
TRANSCRIPCION POR
RECLUTAMIENTO DE CO-
REPRESORES (COMO
PROTENAS HISTONA
DEACETILASAS), Y LA
ACTIVAN AL RECLUTAR CO-
ACTIVADORES ( PROTENAS
ACETILADORAS DE
HISTONAS Y OTROS).
Dominio de interaccin
con otras protenas que
controlan la
transcripcin
Dominio de
interaccin
con la
hormona o el
ligando
Dmeros
de Rc-
hormona
unidos al
DNA
!Existen protenas que, en
ausencia de ligando, secuestran
a los receptores homodimricos
(GR - receptores de
glucocorticoides-, AR -de
andrgenos- y ER - de
estrgenos-) en el citosol.
!Los homodmeros pasan al
ncleo tras unir esas hormonas.
GTA: general transcription apparatus
MODOS DE ACCIN DE RECEPTORES INTRACELULARES:
RECEPTORES HOMO- Y HETERO-DIMRICOS
! Los receptores HETERO-
dimricos (receptores para la
vitamina D
3
, para el cido
retinoico y para las hormonas
tiroideas) son nucleares en
ausencia de hormona. En esa
situacin funcionan como
represores de la transcripcin.
! Tras la unin del ligando se
convierten en activadores
transcripcionales.
Dex= Dexametasona=
anlogo de
glucocorticoides.
Ejemplo experimental de cmo
los receptores de
glucocorticoides estn
atrapados en el citosol por
protenas que los secuestran
en ausencia de ligando (-Dex)
y se translocan al ncleo tras la
unin a sus ligandos en el citosol
(+ Dex).
INMUNOFLUORESCENCIA EN CELULAS EN CULTIVO
GFP
- Dex
+ Dex
Algunas bases fisiolgicas para entender FUNCIONAMIENTO DEL
OXIDO NTRICO: anatoma de los vasos arteriales y proceso de la
aterosclerosis (relacionado con hipertensin, infarto de miocardio,).
Capa de clulas musculares: su contraccin regula el dimetro del
vaso y la presin arterial (por vasoconstriccin o vasodilatacin)
Formacin de la
placa de ateroma
(aterosclerosis)
RECEPTORES INTRACELULARES (II): El receptor del xido ntrico (NO)
tiene actividad guanilato ciclasa y produce cGMP como 2 mensajero para
inducir la relajacin del msculo liso de las arterias (vasodilatacin).
VASODILATADOR: Aumenta el
dimetro de los vasos y el riego
sanguneo.
!El NO es un GAS
DIFUSIBLE que acta como
mensajero inter-celular!!
! Debe difundir desde las
clulas endoteliales (donde
se produce) hasta alcanzar
las musculares (donde ejerce
su efecto).
!Su VIDA MEDIA es muy
CORTA (2-30sg) por lo que
slo difunde localmente.
Esquema de los principales TIPOS de receptores de membrana.
Los RTK median seales de crecimiento y proliferacin celular
Estructura general y familias de los receptores
con actividad tirosina quinasa (RTK)
SON PROTENAS DE UN SOLO
DOMINIO TRANSMEMBRANA,
+ DOMINIOS
EXTRACELULARES (UNION A
LIGANDO) E INTRACELULARES
(CATALTICO)
! Los RTKs estn
presentes en organismos
pluricelulares pero no en
levaduras: los dominios Rc
y TK se fusionaron
durante la evolucin.
! Hay unos 60 RTKs en el
genoma humano.
1.- la unin del ligando
promueve la
dimerizacin de RTKs;
2.- Se reorientan y
acercan sus colas
citoplsmicas;
3.- se favorece la
trans-fosforilacin EN
TIROSINAS de los
dos dominios quinasa;
4.- ello provoca un
aumento de su
actividad cataltica
tirosina quinasa
(activacin);
5.- se fosforilan otras
protenas (efectoras,
adaptadoras), y se
crean sitios de anclaje
para complejos
proteicos de
sealizacin.
3.-Trans-phosphorylation
of Receptor chains
4.- provokes
ACTIVATION
1.-Dimerized
kinase domains
2.- reorient and get
closer to each other.
5.- Phosphorylation
and /or docking of
effector proteins
Mecanismo molecular de activacin de
receptores con actividad tirosina quinasa.
Vdeo resumen de la activacin por dimerizacin
Representacin de la estructura de la
hormoma de crecimiento (GH) unida a su
receptor dimrico (GHR) que ilustra cmo la
unin del ligando induce la dimerizacin de 2
molculas de Rc.
Para activar receptores por dimerizacin, los ligandos (hormonas, transmisores) pueden:
- ser dimricos (unen 2 molculas de Rc). Ej: PDGF
- ser multmeros. Ej: el FGF se une a heparn sulfatos complejos en la matriz
extracelular que presentan mltiples molculas de FGF a sus receptores
- ser monmeros pero capaces de unir 2 molculas de Rc. Ej: EGF, GH,
- agruparse en la membrana de la clula sealizadora. Ej: Eph
La fosforilacin en tirosinas del receptor :
1.- aumenta su actividad cataltica para fosforilar protenas sustrato
2.- crea puntos de anclaje (las propias fosfo-tirosinas) para
molculas sealizadoras efectoras y /o adaptadoras.
sustrato
ATP
sustrato
Protenas
sealizadoras o
adaptadoras
Pi
Estructura de los dominios SH2 y PTB unidos a varios
pptidos fosforilados en tirosinas
La estructura molecular de los dominios de unin a fosfo-tirosinas
es un haz de lminas beta con aminocidos cargados positivamente.
2.- Estructura tipo PTB
(Phospho tyrosine
binding)
1.- Estructura tipo
SH2 (Src-
Homology 2)
Bolsillo
bsico
!Ras es una
protena G
monomrica clave
en proliferacin
celular (mutada en
un 30% de tumores
slidos).
! Ras se activa
mediante el
reclutamiento por
RTKs de protenas
sealizadoras:
1.- protena
adaptadora (Grb2)
2.- protena
efectora (Sos,
carga Ras con GTP
y lo activa)
Grb2
Sos
La cascada intracelular de RTKs controla el inicio de la divisin
celular (proliferacin) mediante la activacin de la protena Ras.
DIVISION CELULAR
Ras se inactiva con el tiempo mediante
la hidrlisis del GTP por su actividad
GTPasa intrnseca.
--> Aquellas mutaciones que impiden la
actividad GTPasa de Ras producen
protena Ras constitutivamente activada,
y las clulas que la expresan proliferan
sin control dando lugar a un cncer.
La protena Sos
activa Ras (es su
GEF) abriendo
el bolsillo de unin
a GDP lo cual
favorece la salida
del GDP y la
entrada de GTP
(dado que la
[GTP] intracelular
= 10 x [GDP]).
Boriack-Sjodin et al., (1998) Nature 394: 337
Wittinghofer (1998) Nature 394: 317
Incidence of RAS mutations in human cancer
Lung (30% ki- ras )
Breast
Brain
Colon (50% Ki- ras )
Ovary
Prostate
Pancreas (90% Ki- ras )
Bladder (10% Ha- ras )
Thyroid (50% ras )
Liver (30% N- ras )
Skin (14% N- ras )
Head & Neck
Leukemia (30% N- ras )
Kidney (10% Ha- ras )
Estructura cristalina de Sos (blanco y azul)
unida a Ras (gris slido y rojo/naranja).
La protena Ras puede estar en dos diferentes conformaciones :
ON (unida a GTP) y OFF (unida a GDP).
Ras.mov Essential Cell Biology. Garland Science. Alberts et al. 2ed.
Vdeo resumen de la activacin de Ras por introduccin de GTP y los
cambios conformacionales que sufre.
Cmo la seal de RTKs llega al ncleo: cascada de
las quinasas activadas por mitgenos (MAPK)
Alberts Essential Cell Biology 2nd Ed- CHAPTER 16: HOW
WE KNOWwww.classwire.com/garlandscience
Ras-GTP activa una
cascada de 3 pasos de
Serina/Treonina
quinasas activadas por
mitgenos (MAPKKK-->
MAPKK-->MAPK)
citoslicas.
Las MAPK activadas
entran en el ncleo
donde fosforilan y
activan ciertos
factores de
transcripcin
implicados en
proliferacin.
Estos se unen a
promotores concretos
donde activan la
transcripcin de
mRNAs de protenas
encargadas de iniciar la
divisin celular
(ciclinas, etc):
reprogramacin
gnica.
Las cascadas (varios pasos) citoslicas de transduccin de seales
permiten:
la TRANSFORMACIN de una seal extracelular en la forma molecular adecuada para
ejercer sus acciones intracelulares,
su DISTRIBUCIN por toda la clula o a lugares concretos dentro de ella,
la SELECCIN de efectores concretos en funcin de su tipo de actividad / localizacin,
el CONTROL de unas seales por otras en puntos comunes de ! cascadas
la AMPLIFICACIN de las seales
codificar diferentes destinos celulares modulando la forma y duracin (PERFIL) de la seal.
Clulas de neuroblastoma
PROLIFERACION o DIFERENCIACION
RESUMEN DE LA CLASE Y CONCEPTOS ESENCIALES:
Las clulas de organismos pluricelulares necesitan de estmulos externos para sobrevivir y multiplicarse. Las
seales del exterior se transmiten al interior celular mediante protenas receptoras en la membrana que convierten
la seal de una forma fsica (mediadores qumicos extracelulares) a otra (segundos mensajeros, activacin de
cascadas intracelulares) : transduccin de seales. Esto se consigue ensamblando complejos multi-moleculares de
sealizacin en el citoplasma que envan la seal a lugares concretos dentro de la clula como el ncleo.
Algunos mediadores qumicos extracelulares pueden atravesar la membrana plasmtica para unirse a receptores
intracelulares: los receptores de hormonas y vitaminas, se activan por este tipo de ligandos y se translocan al ncleo
donde regulan la transcripcin de genes relacionados con el ciclo sexual y respuestas inflamatorias entre otros.
Funcionan como dmeros y se unen, en los promotores de ciertos genes, a elementos de respuesta (RE) con
secuencias simtricas (palindrmicas) mediante dominios de unin al DNA basados en estructuras de dedos de Zn.
El receptor del NO (un gas difusible que acta como mensajero inter-celular local) tiene actividad guanilato ciclasa
y promueve la relajacin del msculo liso que recubre las arterias para aumentar su dimetro (y el flujo sanguneo).
Se utiliza para evitar los efectos dainos de los infartos cardiacos.
Los receptores con actividad tirosina quinasa (RTKs) tienen un solo dominio transmembrana y un dominio con
actividad tirosina quinasa citoslico. Se activan tras la dimerizacin en presencia de ligando y la trans-fosforilacin
de sus dominios quinasa intracelulares que a su vez fosforilan otras protenas (sustratos) en tirosinas creando as
sitios de unin para otras molculas que transmiten la seal al siguiente paso: membrana--> citosol (--> ncleo).
Protenas efectoras (con actividad cataltica) y adaptadoras (con dominios de asociacin a diferentes molculas)
forman complejos asociados a estos receptores y para activar Ras, un potente oncogn (protena que acelera la
proliferacin celular si est activada por RTKs o por mutacin)
La cascada de RTK-Ras-MAPK controla el inicio de la proliferacin (divisin) celular mediante la activacin de una
cascada citoslica secuencial de quinasas que finalmente se translocan al ncleo donde fosforilan y activan ciertos
factores de transcripcin. Estos se unen a promotores de genes que transcriben protenas encargadas de iniciar el
programa de divisin celular.
Los RTK tambin activan la ruta de fosforilacin de lpidos de membrana por PI3K que regula la supervivencia y
migracin celular, y la entrada de glucosa en las clulas.
Las cascadas intracelulares de varios pasos permiten: la TRANSFORMACION de esta seal, su DISTRIBUCION
por toda la clula o a lugares concretos dentro de ella, CONTROL de unas seales por otras en puntos comunes de !
cascadas, codificar informacin en el PERFIL de activacin y la AMPLIFICACION de las seales.