Manual Bacteriologia

Toma de muestra, conservacin
y transporte para
estudios microbiolgicos
Departamento de Microbiologa
LABORATORIO MEGA S.A. - DPTO DE MICROBIOLOGA
Maip 535 - 2300 Rafaela (Santa Fe) / Tel - Fax: (03492) 505011 - Int. 106 - E-mail: microbiologia@laboratoriomega.com.ar
Indice
I- INTRODUCCION I 01
II- ORINA
A- Urocultivo
Instructivo para laboratorio derivante: II 01
Toma de muestra
Pacientes que controlan esfnteres
Pacientes que no controlan esfnteres
Paciente con sonda
Conservacin y transporte
Modelo de instructivo para pacientes: II 02
Mujer
Hombre
Nio o paciente que no controla esfnteres
III - EXUDADO FARNGEO
A- Cultivo III 01
Toma de muestra
Transporte y conservacin
B- III 02
Toma de muestra

IV- MATERIA FECAL
A- Coprocultivo IV 01
Modelo de instructivo para paciente
Instructivo para laboratorio derivante:
Toma de muestra
B- Investigacin virolgica directa: Rotavirus IV 02
Toma de muestra
C- Investigacin de parsitos: Parasitolgico directo IV 03
Toma de muestra
Test rpido (Test inmunocromatogrfico)
Indice
V- PIEL Y PARTES BLANDAS
Cultivo
A- Biopsia - Aspirado V 01
Toma de muestra
B- Hisopado V 02
Toma de muestra
VI- ANEXO
A- Urocultivo VI 01
Modelo de instructivo para pacientes:
Mujer
Hombre
Nio o paciente que no controla esfnteres VI 02
B- Materia Fecal: Coprocultivo VI 03
Modelo de instructivo para pacientes
C- Material Fecal: Investigacin virolgica en materia fecal VI 03
D- Materia Fecal: Investigacin parsitos en materia fecal VI 03
Toma de muestra, conservacin y
transporte para estudios microbiolgicos
Los estudios microbiolgicos representan la nica alternativa para realizar el diagnstico
etiolgico de las enfermedades infecciosas y controlar la teraputica.
La utilidad de los mismos est en relacin directa con la racionalidad de la solicitud y; a diferencia
de otros estudios de laboratorio, del estrecho contacto y la mxima informacin entre la clnica y el
laboratorio de microbiologa.
Por otra parte debe tenerse en cuenta que si el estudio no est justificado, la muestra est
incorrectamente obtenida falla la comunicacin entre la clnica y el laboratorio, la informacin
obtenida desde ste puede confundir ms que ayudar al diagnstico del proceso.
La toma de la muestra, junto con una peticin clara y concreta acompaada de informacin
escueta, pero clarificadora; son fundamentales para obtener el mximo rendimiento de los
estudios microbiolgicos ya que la puesta en marcha de determinadas tcnicas diagnsticas
depende de la sospecha clnica. Cada muestra se considera, procesa e informa en funcin del
cuadro clnico.
La identificacin precisa de los microorganismos involucrados en las infecciones depende en
gran medida de una buena, apropiada y representativa toma de muestra. Adems se debe tener
en cuenta que la misma debe tener un tamao tal que contenga un nmero representativo del o
los agentes etiolgicos y, escasos o nulos microorganismos contaminantes. Cuando la muestra
no es buena, poco se puede hacer desde el laboratorio para llegar a un buen resultado que
contribuya al correcto tratamiento del paciente.
Tambin es de suma importancia el procesamiento inmediato del material obtenido, para lo cual
se sugiere transportar sin demoras al laboratorio.
Caso contrario consultar cul es el mtodo ms adecuado de conservacin hasta su
procesamiento, dado que la demora en el envo o procesamiento puede alterar sustancialmente
los resultados.
Ante la ms mnima duda sobre la obtencin, transporte o conservacin de una muestra
determinada; pngase en contacto con el laboratorio.
Obtencin de la muestra
Introduccin
I 01
Versin 01
Instructivo para laboratorio derivante
Toma de muestra
En lo posible, la muestra se debe obtener previamente al inicio del tratamiento con antibiticos, en
caso contrario, especificar en la solicitud del estudio.
- Pacientes que controlan esfnteres: Chorro medio
Se debe recolectar la primera orina de la maana o con una retencin mnima de 3 horas
cumplimentando las indicaciones segn corresponda. (ver instructivo para paciente )
- Pacientes que no controlan esfnteres: Muestra al acecho
No utilizar bolsita colectora.
Es conveniente la recoleccin de dos muestras, debido a lo dificultoso de la toma de muestra en
estos pacientes. (ver instructivo para paciente )
- Pacientes con sonda: (Evaluar el tiempo de colocacin de la sonda)
En lo posible realizar la toma de muestra con:
Sonda recin colocada
Se recoge directamente la orina que fluye por el extremo distal de la sonda recin colocada en un
frasco estril.
Si no es posible reemplazar la sonda y el tiempo de colocacin es menor a los 7 das; realizar por:
Puncin Aspiracin
Se desinfecta la zona proximal al meato urinario de la sonda con alcohol iodado y se punza con
aguja y jeringa estril.
Se vuelca el contenido en forma asptica en un frasco estril.
Si el tiempo de colocacin es mayor a los 7 das, se sugiere el reemplazo de la sonda y/o realizar
una Puncin Suprapbica (PSP)
La muestra para urocultivo debe refrigerarse en heladera ( a 4 C ) inmediatamente despus de
recolectada.
Procesar en el da.
Observaciones:
Especificar en la solicitud del estudio la tcnica de recoleccin de orina
( chorro medio, al acecho , sonda, etc )
Orina
II 01
Versin 01
Urocultivo
Toma de muestra
Mujer
Indicaciones generales
* No ingerir aspirina, vitamina C, ni antibiticos previo a la recoleccin de la muestra. En caso
contrario notificar al bioqumico.
* Si la muestra de orina no es enviada al laboratorio de inmediato (dentro de los 30 minutos de
recolectada) conservar en heladera.
* Realizar la higiene con agua corriente, o agua previamente hervida.
Recolectar la primera orina de la maana o con una retencin mnima de 3 horas cumpliendo las
siguientes indicaciones:
* Efectuar una prolija higiene de genitales externos con agua y jabn nuevo de adelante hacia
atrs, separando los labios vaginales.
* Enjuagar con abundante agua. No secar.
* Colocar tapn vaginal (torunda de gasa o algodn).
* Separar los labios vaginales y orinar con el tapn colocado, descartar el primer chorro miccional,
y recolectar la fraccin siguiente (10 a 20 ml) directamente en recipiente estril.
* Descartar la ltima porcin de la miccin.
* Tapar correctamente el recipiente y enviar de inmediato al laboratorio.
Hombre
recolectada) conservar en heladera. Realizar la higiene con agua corriente, o agua previamente
hervida.
* Efectuar una prolija higiene genital con agua y jabn nuevo, retrayendo el prepucio. Enjuagar
con abundante agua. No secar.
* Orinar con el prepucio retrado, descartar el primer chorro miccional y recolectar la fraccin
siguiente (10 a 20 ml ) directamente en recipiente estril.
* Descartar la ltima parte de la miccin. Tapar correctamente el recipiente y enviar de inmediato al
laboratorio.
Se recolecta una muestra al acecho, cumpliendo la siguientes indicaciones:
* No utilizar bolsita colectora.
* Higienizar con agua y jabn nuevo (si es nio, retrayendo el prepucio) y enjuagar con abundante
agua.
* Descartando las primeras gotas de orina (primer chorro), recolectar en recipiente estril la
segunda porcin de orina
Nio o paciente que no controla esfnteres
Orina
II 02
Versin 01
Urocultivo
Toma de muestra
Con hisopo estril se frotan enrgicamente ambas amgdalas y pilares evitando por medio de
bajalengua tocar las paredes de la boca o la lengua.
Si existiera exudado visible tratar de tocarlo con la punta del hisopo.
Cuando el diagnstico presuntivo sea distinto a Faringitis Estreptocccica: Angina de Vincent y/o
candidiasis orofarngea, realizar con otro hisopo dos extendidos y especificar en la solicitud.
En el caso de no realizar inmediatamente el ensayo, colocar el hisopo en un tubo plstico seco y
conservar refrigerado a 2 - 8 C hasta 3 das.
Exudado farngeo
III 01
Versin 01
Cultivo
Toma de muestra
Los hisopos deben colocarse en un tubo estril seco y enviar en el da; si se demora colocar en
medio de transporte.
Conservar a temperatura ambiente.
Efectuar la toma de muestra de la misma manera que para el cultivo.
Utilizar hisopo de dacrn con manguito plstico. ( solicitar en el laboratorio)
Exudado farngeo
III 02
Versin 01
Test rpido (Test inmunocromatogrfico)
Coprocultivo
Toma de muestra y conservacin
Recoger materia fecal de una deposicin espontnea recientemente emitida en frasco estril de
boca ancha. En pacientes en edad peditrica que usan paales las muestras deben ser tomadas
preferentemente de las nalgas y no del paal seleccionando las partes mucosas, purulentas y/o
sanguinolentas y colocarlas en frasco estril.
Enviar inmediatamente (antes de la hora al laboratorio) caso contrario solicitar medio de
transporte.
Instructivo para laboratorio derivante
Toma de muestra
La materia fecal sin preservante debe procesarse dentro de un mximo de 2 horas desde su
recoleccin, caso contrario con hisopo estril recjase una pequea cantidad de materia fecal
seleccionando las partes mucosas, purulentas y/o sanguinolentas y colocarlo dentro del tubo con
medio de transporte hasta el fondo cortando luego la parte del hisopo que sobresale. Cerrar el
tubo ajustando bien la tapa, la cual se aconseja cubrir con una banda adhesiva.
Colocar la materia fecal en heladera a 4 C y el medio de transporte conservar a temperatura
ambiente ; enviar dentro de las 24 horas de su recoleccin.
Materia fecal
IV 01
Versin 01
Observaciones:
Especificar en la solicitud del estudio si se est tomando alguna medicacin y el
agente etiolgico sospechado para efectuar su investigacin (si no se especifica se
buscan los patgenos ms comunes - ante cualquier duda consultar )
Investigacin virlogica directa: Rotavirus
boca ancha. En pacientes en edad peditrica que usan paales las muestras deben tomarse
preferentemente de las nalgas y no del paal. Enviar inmediatamente al laboratorio, de lo
contrario conservar en heladera.
Instructivo para el laboratorio derivante
Una vez recibida la muestra conservar refrigerada en heladera (a 4C) y enviar en el da.
Materia fecal
IV 02
Versin 01
Observaciones:
Especificar en la solicitud del estudio si se est tomando alguna medicacin.
Investigacin de parsitos
Parasitolgico directo
Enviar inmediatamente (antes de la hora al laboratorio), caso contrario solicitar medio de
conservacin.
Instructivo para el laboratorio derivante
Toma de muestra
Recoger una pequea cantidad de materia fecal seleccionando las partes mucosas, purulentas
y/o sanguinolentas y colocar en un frasco. Enviar inmediatamente, si no es posible, agregar
conservante en una proporcin de dos partes de conservante y una de materia fecal. Cerrar el
frasco ajustando bien la tapa, la cual se aconseja cubrir con una banda adhesiva.
Conservacin y transporte:
Refrigerar y conservar en heladera (a 4C) hasta el envo.
Enviar en el da; caso contrario solicitar conservante.
Materia fecal
IV 03
Versin 01
Observaciones:
Especificar en la solicitud del estudio si se est tomando alguna medicacin.
Solicitar conservante en el laboratorio.
Infecciones de piel y partes blandas
La recoleccin y el transporte en forma adecuada de estas muestras son los factores ms
importantes en el diagnstico de laboratorio de estas infecciones. La recoleccin de la muestra es
en particular difcil, porque muchas de estas lesiones son abiertas y por consiguiente pueden
colonizarse con facilidad por microorganismos que pueden no estar involucrados en la infeccin.
La muestras ms confiables para determinar el agente etiolgico son las obtenidas de la base de
la herida luego de remover los detritos que la recubren, o por biopsia quirrgica de los tejidos
profundos sin contacto con las capas superficiales de la lesin.
Siendo el hisopado una muestra menos representativa que debe utilizarse como ltimo recurso.
Biopsias - aspirados
Las biopsias son muestras de indudable valor diagnstico y que en ocasiones son insustituibles;
por ello, se cuidar hasta el extremo las normas de extraccin y transporte.
Toma de muestra
Se obtendr aspticamente una pieza quirrgica o un aspirado cuando se trate de colecciones
lquidas; prctica que debe realizar el profesional mdico.
Las muestras slidas se enviarn en un recipiente cerrado estril. Cuando la muestra es
pequea, agregar aproximadamente 1 ml de solucin fisiolgica estril para evitar la desecacin.
(si no se encuentra disponible o es de origen dudoso no agregar)
La muestras lquidas se depositarn en un tubo seco estril con tapn hermtico.
Las muestras deben enviarse inmediatamente al laboratorio durante el horario de trabajo. Caso
contrario, dada la importancia de este tipo de muestras, es aconsejable un contacto previo para
que el laboratorio est pendiente de la recepcin de la muestra.
En el caso no deseable de que la muestra llegara fuera del horario de trabajo las muestras slidas
se mantendrn en heladera a 4C (con la posible prdida de ciertos microorganismos lbiles),
mientras que muestras lquidas sern inoculadas en frasco de hemocultivo que se incubar a
37C separando una parte de la muestra en tubo estril cerrado hermticamente que se
conservar en heladera a 4C.
V 01
Versin 01
Piel y partes blandas
Importante:
Cuando la secrecin es escasa, se sugiere inyectar solucin fisiolgica estril y
aspirarla nuevamente, ingresando por piel sana previamente desinfectada a la
zona ms profunda de la herida (es conveniente que este tipo de muestra sea
extrada por el profesional mdico)
Cuando no sea posible obtener otra muestra ms que el hisopado, se deber efectuar la
higiene de la superficie para eliminar los detritos desvitalizados y se tomar con dos
hisopos: con uno se realizan extendidos para coloracin de Gram ( en lo posible dos) y el
otro se colocar en medio de transporte conservndolo a temperatura ambiente.
Se recomienda muestrear el tejido celular subcutneo de los bordes de la lcera en la zona
donde los signos de infeccin sean evidentes. Se recomienda no frotar con fuerza para
evitar el sangrado. En el caso de heridas muy secas, se recomienda impregnar el hisopo en
suero salino estril antes de la toma.
Se debe tener en cuenta que estas muestras se deben descartar si pueden obtenerse (sin
riesgo, ni morbilidad del paciente) muestras de mejor calidad; debido a que es
generalmente una muestra poco representativa del proceso infeccioso.
Hisopados
V 02
Versin 01
Piel y partes blandas
Observaciones:
Es importante en este tipo de muestras conocer adems de los datos solicitados en
la ficha, si es: herida posquirrgica, mordedura, quemadura, lcera por presin,
(de cbito, absceso, fstula, etc; y el lugar donde se encuentra la herida junto al
diagnstico presuntivo.
Anexo
Orina: Urocultivo
Orina: Urocultivo
Mujer
* Efectuar una prolija higiene de genitales externos con agua y jabn nuevo de adelante hacia
atrs, separando los labios vaginales.
* Enjuagar con abundante agua. No secar.
* Colocar tapn vaginal (torunda de gasa o algodn).
* Separar los labios vaginales y orinar con el tapn colocado, descartar el primer chorro miccional, y
recolectar la fraccin siguiente (10 a 20 ml) directamente en recipiente estril.
* Descartar la ltima porcin de la miccin.
Hombre
recolectada) conservar en heladera. Realizar la higiene con agua corriente, o agua previamente
hervida.
* Efectuar una prolija higiene genital con agua y jabn nuevo, retrayendo el prepucio. Enjuagar con
abundante agua. No secar.
* Orinar con el prepucio retrado, descartar el primer chorro miccional y recolectar la fraccin
siguiente (10 a 20 ml ) directamente en recipiente estril.
* Descartar la ltima parte de la miccin. Tapar correctamente el recipiente y enviar de inmediato al
laboratorio.
VI 01
Versin 01
Nio paciente que no controla esfnteres
Se recolecta una muestra al acecho, cumpliendo la siguientes indicaciones:
* No utilizar bolsita colectora.
* Higienizar con agua y jabn nuevo (si es nio, retrayendo el prepucio) y enjuagar con abundante
agua.
* Descartando las primeras gotas de orina (primer chorro), recolectar en recipiente estril la
segunda porcin de orina
VI 02
Versin 01
Orina: Urocultivo
Anexo
VI 03
Versin 01
boca ancha. En pacientes en edad peditrica que usan paales las muestras deben ser tomadas
Enviar inmediatamente (antes de la hora al laboratorio) caso contrario solicitar medio de
transporte.
Materia Fecal: Coprocultivo
preferentemente de las nalgas y no del paal. Enviar inmediatamente al laboratorio, de lo contrario
conservar en heladera.
Materia Fecal: Investigacin virlogica directa-
Rotavirus
Enviar inmediatamente (antes de la hora al laboratorio), caso contrario solicitar medio de
conservacin.
Materia Fecal:
Investigacin de parsitos- Parasitolgico directo
Anexo

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