AVMA Guidelines On Eutthanasia

AVMA Guidelines on
Euthanasia
(Formerly Report of the AVMA Panel on Euthanasia)
_________________________________
June 2007
Caution - The AVMA Guidelines on Euthanasia (formerly the 2000 Report of the AVMA Panel on Euthanasia)
have been widely misinterpreted. Please note the following:
The guidelines are in no way intended to be used for human lethal injection.
The application of a barbiturate, paralyzing agent, and potassium chloride delivered in separate syringes or
stages (the common method used for human lethal injection) is not cited in the report.
The report never mentions pancuronium bromide or Pavulon, the paralyzing agent used in human lethal
injection.
AVMA Guidelines on Euthanasia
Table of Contents
PREFACE ....................................................................................................................................................................1
INTRODUCTION .......................................................................................................................................................1
GENERAL CONSIDERATIONS ..............................................................................................................................3
ANIMAL BEHAVIORAL CONSIDERATIONS .....................................................................................................4
HUMAN BEHAVIORAL CONSIDERATIONS ......................................................................................................4
MODES OF ACTION OF EUTHANATIZING AGENTS ......................................................................................5
INHALANT AGENTS ................................................................................................................................................6
INHALANT ANESTHETICS ............................................................................................................................................6
CARBON DIOXIDE .......................................................................................................................................................7
NITROGEN, ARGON .....................................................................................................................................................9
CARBON MONOXIDE ...................................................................................................................................................9
NONINHALANT PHARMACEUTICAL AGENTS..............................................................................................11
BARBITURIC ACID DERIVATIVES ...............................................................................................................................11
PENTOBARBITAL COMBINATIONS .............................................................................................................................11
CHLORAL HYDRATE..................................................................................................................................................11
T-61 .........................................................................................................................................................................12
TRICAINE METHANE SULFONATE (MS 222, TMS) ....................................................................................................12
POTASSIUM CHLORIDE IN CONJUNCTION WITH PRIOR GENERAL ANESTHESIA ...........................................................12
UNACCEPTABLE INJECTABLE AGENTS ......................................................................................................................12
PHYSICAL METHODS ...........................................................................................................................................12
PENETRATING CAPTIVE BOLT ...................................................................................................................................13
EUTHANASIA BY A BLOW TO THE HEAD ....................................................................................................................13
GUNSHOT .................................................................................................................................................................13
CERVICAL DISLOCATION ..........................................................................................................................................14
DECAPITATION .........................................................................................................................................................14
ELECTROCUTION ......................................................................................................................................................15
MICROWAVE IRRADIATION.......................................................................................................................................15
THORACIC (CARDIOPULMONARY, CARDIAC) COMPRESSION .....................................................................................16
KILL TRAPS...............................................................................................................................................................16
MACERATION ...........................................................................................................................................................17
ADJUNCTIVE METHODS.............................................................................................................................................17
Exsanguination ....................................................................................................................................................17
Stunning...............................................................................................................................................................17
Pithing .................................................................................................................................................................17
SPECIAL CONSIDERATIONS...............................................................................................................................18
EQUINE EUTHANASIA ...............................................................................................................................................18
ANIMALS INTENDED FOR HUMAN OR ANIMAL FOOD .................................................................................................18
EUTHANASIA OF NONCONVENTIONAL SPECIES: ZOO, WILD, AQUATIC, AND ECTOTHERMIC ANIMALS ..............18
Zoo Animals ........................................................................................................................................................18
Wildlife................................................................................................................................................................19
Diseased, Injured, or Live-Captured Wildlife or Feral Species ...........................................................................19
Birds ....................................................................................................................................................................20
Amphibians, Fish, and Reptiles ...........................................................................................................................20
Marine Mammals.................................................................................................................................................21
EUTHANASIA OF ANIMALS RAISED FOR FUR PRODUCTION .......................................................................................21
PRENATAL AND NEONATAL EUTHANASIA .................................................................................................................22
MASS EUTHANASIA ..................................................................................................................................................22
Table of Contents
POSTFACE................................................................................................................................................................22
REFERENCES ..........................................................................................................................................................23
APPENDIX 1AGENTS AND METHODS OF EUTHANASIA BY SPECIES ................................................28
APPENDIX 2ACCEPTABLE AGENTS AND METHODS OF EUTHANASIA ............................................30
APPENDIX 3CONDITIONALLY ACCEPTABLE AGENTS AND METHODS OF EUTHANASIA.........32
APPENDIX 4SOME UNACCEPTABLE AGENTS AND METHODS OF EUTHANASIA..........................35
PREFACE
At the request of the American Veterinary Medical
Associations (AVMA) Council on Research, the
Executive Board of the AVMA convened a Panel on
Euthanasia in 1999 to review and make necessary revi-
sions to the fifth Panel Report, published in 1993.
1
The Report of the 2000 AVMA Panel on Euthanasia
was published in the Journal of the American
Veterinary Medical Association.
216
In that version of
the report, the panel updated information on
euthanasia of animals in research and animal care and
control facilities; expanded information on ectothermic,
aquatic, and fur-bearing animals; added information
on horses and wildlife; and deleted methods or agents
considered unacceptable. Because the panels
deliberations were based on currently available scientific
information, some euthanasia methods and agents are
not discussed.
In 2006, the AVMA Executive Board approved a
recommendation that the AVMA convene a panel of
scientists at least once every 10 years to review all
literature that scientifically evaluates methods and
potential methods of euthanasia for the purpose of
producing AVMA Guidelines on Euthanasia. During
interim years, requests for inclusion of new or altered
euthanasia procedures or agents in the AVMA
Guidelines on Euthanasia are directed to the AVMA
Animal Welfare Committee (AWC). Revisions are
based on a thorough evaluation of the available science
and require Executive Board approval. The first interim
revision, approved in 2006, is the addition of a physical
method (maceration) for euthanasia of chicks, poults,
and pipped eggs. Substantive interim additions in the
Guidelines are indicated by text that is underlined.
Welfare issues are increasingly being identified in
the management of free-ranging wildlife, and the need
for humane euthanasia guidelines in this context is
great. Collection of animals for scientific investiga-
tions, euthanasia of injured or diseased wildlife
species, removal of animals causing damage to property
or threatening human safety, and euthanasia of animals
in excess population are drawing more public
attention. These issues are acknowledged in these
guidelines and special considerations are described for
handling animals under free-ranging conditions,
where their needs are far different from those of their
domestic counterparts.
These guidelines are intended for use by members
of the veterinary profession who carry out or oversee
the euthanasia of animals. Although the guidelines may
be interpreted and understood by a broad segment of the
general population, a veterinarian should be consulted
in the application of these recommendations. The practice
of veterinary medicine is complex and involves diverse
animal species. Whenever possible, a veterinarian
experienced with the species in question should be
consulted when selecting the method of euthanasia,
particularly when little species-specific euthanasia
research has been done. Although interpretation and use
of these guidelines cannot be limited, the AVMAs
overriding commitment is to give veterinarians guidance
in relieving pain and suffering of animals that are to be
euthanatized. The recommendations in these guidelines are
intended to serve as guidance for veterinarians who must
then use professional judgment in applying them to the
various settings where animals are to be euthanatized.
INTRODUCTION
The term euthanasia is derived from the Greek
terms eu meaning good and thanatos meaning death.
2
A
good death would be one that occurs with minimal
pain and distress. In the context of these guidelines,
euthanasia is the act of inducing humane death in an
animal. It is our responsibility as veterinarians and
human beings to ensure that if an animals life is to be
taken, it is done with the highest degree of respect, and
with an emphasis on making the death as painless and
distress free as possible. Euthanasia techniques should
result in rapid loss of consciousness followed by
cardiac or respiratory arrest and the ultimate loss of
brain function. In addition, the technique should
minimize distress and anxiety experienced by the
animal prior to loss of consciousness. The panel
recognized that the absence of pain and distress cannot
always be achieved. These guidelines attempt to balance
the ideal of minimal pain and distress with the reality of
the many environments in which euthanasia is
performed. A veterinarian with appropriate training and
expertise for the species involved should be consulted to
ensure that proper procedures are used.
Criteria for painless death can be established only
after the mechanisms of pain are understood. Pain is that
sensation (perception) that results from nerve impulses
reaching the cerebral cortex via ascending neural
pathways. Under normal circumstances, these pathways
are relatively specific, but the nervous system is
sufficiently plastic that activation of nociceptive
pathways does not always result in pain and stimulation
AVMA Guidelines on Euthanasia 1
(Formerly the Report of the AVMA Panel on Euthanasia)
of other (non-nociceptive) peripheral and central
neurons can give rise to pain. The term nociceptive is
derived from the word noci meaning to injure and cep-
tive meaning to receive, and is used to describe neuronal
input caused by noxious stimuli, which threaten to, or
actually do, destroy tissue. These noxious stimuli
initiate nerve impulses by acting at primary nociceptors
and other sensory nerve endings that respond to noxious
and non-noxious stimuli from mechanical, thermal, or
chemical activity. Endogenous chemical substances such
as hydrogen ions, potassium ions, ATP, serotonin,
histamine, bradykinin, and prostaglandins, as well as
electrical currents, are capable of generating nerve
impulses in nociceptor nerve fibers. Activity in
nociceptive pathways can also be triggered in normal-
ly silent receptors that become sensitized by chronic
pain conditions.
3,4
Nerve impulse activity generated by nociceptors is
conducted via nociceptor primary afferent fibers to the
spinal cord or the brainstem where it is transmitted to
two general sets of neural networks. One set is
related to nociceptive reflexes (eg, withdrawal and
flexion reflexes) that are mediated at the spinal level, and
the second set consists of ascending pathways to the
reticular formation, hypothalamus, thalamus, and
cerebral cortex (somatosensory cortex and limbic system)
for sensory processing. It is important to understand that
ascending nociceptive pathways are numerous, often
redundant, and are capable of considerable plasticity
under chronic conditions (pathology or injury).
Moreover, even the transmission of nociceptive neural
activity in a given pathway is highly variable. Under
certain conditions, both the nociceptive reflexes and
the ascending pathways may be suppressed, as, for
example, in epidural anesthesia. Under another set of
conditions, nociceptive reflex actions may occur, but
activity in the ascending pathways is suppressed; thus,
noxious stimuli are not perceived as pain. It is incor-
rect to use the term pain for stimuli, receptors, reflex-
es, or pathways because the term implies perception,
whereas all the above may be active without conse-
quential pain perception.
5,6
Pain is divided into two broad categories: (1) sen-
sory-discriminative, which indicates the site of origin
and the stimulus giving rise to the pain; and (2) moti-
vational-affective in which the severity of the stimulus
is perceived and the animals response is determined.
Sensory-discriminative processing of nociceptive
impulses is most likely to be accomplished by subcor-
tical and cortical mechanisms similar to those used for
processing other sensory-discriminative input that pro-
vides the individual with information about the inten-
sity, duration, location, and quality of the stimulus.
Motivational-affective processing involves the ascend-
ing reticular formation for behavioral and cortical
arousal. It also involves thalamic input to the forebrain
and the limbic system for perceptions such as discom-
fort, fear, anxiety, and depression. The motivational-
affective neural networks also have strong inputs to the
limbic system, hypothalamus and the autonomic ner-
vous system for reflex activation of the cardiovascular,
pulmonary, and pituitary-adrenal systems. Responses
activated by these systems feed back to the forebrain
and enhance perceptions derived via motivational-
affective inputs. On the basis of neurosurgical experi-
ence in humans, it is possible to separate the sensory-
discriminative components from the motivational-
affective components of pain.
7
For pain to be experienced, the cerebral cortex and
subcortical structures must be functional. If the cerebral
cortex is nonfunctional because of hypoxia, depression
by drugs, electric shock, or concussion, pain is not
experienced. Therefore, the choice of the euthanasia
agent or method is less critical if it is to be used on an
animal that is anesthetized or unconscious, provided that
the animal does not regain consciousness prior to death.
An understanding of the continuum that repre-
sents stress and distress is essential for evaluating tech-
niques that minimize any distress experienced by an
animal being euthanatized. Stress has been defined as
the effect of physical, physiologic, or emotional factors
(stressors) that induce an alteration in an animals
homeostasis or adaptive state.
8
The response of an ani-
mal to stress represents the adaptive process that is
necessary to restore the baseline mental and physiolog-
ic state. These responses may involve changes in an
animals neuroendocrinologic system, autonomic ner-
vous system, and mental status that may result in overt
behavioral changes. An animals response varies
according to its experience, age, species, breed, and
current physiologic and psychologic state.
9
Stress and the resulting responses have been divid-
ed into three phases.
10
Eustress results when harmless
stimuli initiate adaptive responses that are beneficial to
the animal. Neutral stress results when the animals
response to stimuli causes neither harmful nor benefi-
cial effects to the animal. Distress results when an ani-
mals response to stimuli interferes with its well-being
and comfort.
11
As with many other procedures involving animals,
some methods of euthanasia require physical handling
of the animal. The amount of control and kind of
restraint required will be determined by the animals
species, breed, size, state of domestication, degree of
taming, presence of painful injury or disease, degree of
excitement, and method of euthanasia. Proper handling
is vital to minimize pain and distress in animals, to
ensure safety of the person performing euthanasia, and,
often, to protect other people and animals.
An in-depth discussion of euthanasia procedures is
beyond the scope of these guidelines; however,
personnel who perform euthanasia must have
appropriate certification and training, experience with
the techniques to be used, and experience in the
humane restraint of the species of animal to be
euthanatized, to ensure that animal pain and distress
are minimized during euthanasia. Training and
experience should include familiarity with the normal
behavior of the species being euthanatized, an
appreciation of how handling and restraint affects that
behavior, and an understanding of the mechanism by
which the selected technique induces loss of
consciousness and death. Prior to being assigned full
responsibility for performing euthanasia, all personnel
must have demonstrated proficiency in the use of the
technique in a closely supervised environment.
References provided at the end of this document may be
useful for training personnel.
12-21
Selection of the most appropriate method of
euthanasia in any given situation depends on the
species of animal involved, available means of animal
restraint, skill of personnel, number of animals, and
other considerations. Available information focuses
primarily on domestic animals, but the same general
considerations should be applied to all species.
These guidelines include four appendices that
summarize information from the text. Appendix 1 lists
acceptable and conditionally acceptable methods of
euthanasia, categorized by species. Appendices 2 and 3
provide summaries of characteristics for acceptable and
conditionally acceptable methods of euthanasia.
Appendix 4 provides a summary of some unacceptable
euthanasia agents and methods. Criteria used for
acceptable, conditionally acceptable, and unacceptable
methods are as follows: acceptable methods are those
that consistently produce a humane death when used
as the sole means of euthanasia; conditionally
acceptable methods are those techniques that by the
nature of the technique or because of greater potential
for operator error or safety hazards might not
consistently produce humane death or are methods not
well documented in the scientific literature; and
unacceptable techniques are those methods deemed
inhumane under any conditions or that the panel
found posed a substantial risk to the human
applying the technique. The guidelines also
include discussion of several adjunctive methods,
which are those methods that cannot be used as the
sole method of euthanasia, but that can be used in con-
junction with other methods to produce a humane
death.
GENERAL CONSIDERATIONS
In evaluating methods of euthanasia, the panel
used the following criteria: (1) ability to induce loss of
consciousness and death without causing pain, dis-
tress, anxiety, or apprehension; (2) time required to
induce loss of consciousness; (3) reliability; (4) safety
of personnel; (5) irreversibility; (6) compatibility with
requirement and purpose; (7) emotional effect on
observers or operators; (8) compatibility with subse-
quent evaluation, examination, or use of tissue; (9)
drug availability and human abuse potential; (10) com-
patibility with species, age, and health status; (11) abil-
ity to maintain equipment in proper working order;
and (12) safety for predators/scavengers should the
carcass be consumed.
The panel discussed the definition of euthanasia
used in these guidelines as it applies to circumstances
when the degree of control over the animal makes it
difficult to ensure death without pain and distress.
Slaughter of animals for food, fur, or fiber may represent
such situations. However, the same standards for
euthanasia should be applied to the killing of animals
for food, fur, or fiber, and wildlife or feral animals.
Animals intended for food should be slaughtered
humanely, taking into account any special
requirements of the US Department of Agriculture.
22
Painless death can be achieved by properly stunning
the animal, followed immediately by exsanguination.
Handling of animals prior to slaughter should be as
stress free as possible. Electric prods or other devices
should not be used to encourage movement of animals
and are not needed if chutes and ramps are properly
designed to enable animals to be moved and
restrained without undue stress.
23-27
Animals must not
be restrained in a painful position before slaughter.
Ethical considerations that must be addressed
when euthanatizing healthy and unwanted animals
reflect professional and societal concerns.28,29 These
issues are complex and warrant thorough
consideration by the profession and all those concerned
with the welfare of animals. Whereas the panel
recognized the need for those responsible for the
euthanasia of animals to be cognizant of these issues, it
did not believe that its report was the appropriate
forum for an in-depth discussion of this topic.
It is the intent of AVMA that euthanasia be per-
formed in accordance with applicable federal, state, and
local laws governing drug acquisition and storage, occu-
pational safety, and methods used for euthanasia and
disposal of animals. However, space does not permit a
review of current federal, state, and local regulations.
The panel was aware that circumstances may arise
that are not clearly covered by its report. Whenever such
situations arise, a veterinarian experienced with the
species should use professional judgment and
knowledge of clinically acceptable techniques in select-
ing an appropriate euthanasia technique. Professional
judgment in these circumstances will take into consid-
eration the animals size and its species-specific physi-
ologic and behavioral characteristics. In all circum-
stances, the euthanasia method should be selected and
used with the highest ethical standards and social con-
science.
It is imperative that death be verified after
euthanasia and before disposal of the animal. An ani-
mal in deep narcosis following administration of an
injectable or inhalant agent may appear dead, but
might eventually recover. Death must be confirmed by
examining the animal for cessation of vital signs, and
consideration given to the animal species and
method of euthanasia when determining the criteria for
confirming death.
ANIMAL BEHAVIORAL CONSIDERATIONS
The need to minimize animal distress, including
fear, anxiety, and apprehension, must be considered in
determining the method of euthanasia. Gentle restraint
(preferably in a familiar and safe environment), careful
handling, and talking during euthanasia often have a
calming effect on animals that are used to being han-
dled. Sedation and/or anesthesia may assist in achiev-
ing the best conditions for euthanasia. It must be rec-
ognized that any sedatives or anesthetics given at this
stage that change circulation may delay the onset of the
euthanasia agent. Preparation of observers should also
be taken into consideration.
Animals that are wild, feral, injured, or already dis-
tressed from disease pose another challenge. Methods
of pre-euthanasia handling suitable for domestic ani-
mals may not be effective for them. Because handling
may stress animals unaccustomed to human contact
(eg, wildlife, zoo, and feral species), the degree of
restraint required to perform any euthanasia procedure
should be considered when evaluating various meth-
ods. When handling these animals, calming may be
accomplished by minimizing visual, auditory, and tac-
tile stimulation. When struggling during capture or
restraint may cause pain, injury, or anxiety to the ani-
mal or danger to the operator, the use of tranquilizers,
analgesics, and/or anesthetics may be necessary. A
route of injection should be chosen that causes the
least distress in the animal for which euthanasia must
be performed. Various techniques for oral delivery of
sedatives to dogs and cats have been described that
may be useful under these circumstances.
30,31
Facial expressions and body postures that indicate
various emotional states of animals have been
described for some species.
32-37
Behavioral and physio-
logic responses to noxious stimuli include distress
vocalization, struggling, attempts to escape, defensive
or redirected aggression, salivation, urination, defeca-
tion, evacuation of anal sacs, pupillary dilatation,
tachycardia, sweating, and reflex skeletal muscle con-
tractions causing shivering, tremors, or other muscular
spasms. Unconscious as well as conscious animals are
capable of some of these responses. Fear can cause
immobility or playing dead in certain species, partic-
ularly rabbits and chickens. This immobility response
should not be interpreted as loss of consciousness
when the animal is, in fact, conscious. Distress vocal-
izations, fearful behavior, and release of certain odors
or pheromones by a frightened animal may cause anx-
iety and apprehension in other animals. Therefore, for
sensitive species, it is desirable that other animals not
be present when individual animal euthanasia is per-
formed.
HUMAN BEHAVIORAL CONSIDERATIONS
When animals must be euthanatized, either as
individuals or in larger groups, moral and ethical con-
cerns dictate that humane practices be observed.
Human psychologic responses to euthanasia of animals
need to be considered, with grief at the loss of a life as
the most common reaction.
38
There are six circum-
stances under which the panel was most aware of the
effects of animal euthanasia on people.
The first of these is the veterinary clinical setting
where owners have to make decisions about whether
and when to euthanatize. Although many owners rely
heavily on their veterinarians judgment, others may
have misgivings about making their own decision. This
is particularly likely if an owner feels responsible for
allowing an animals medical or behavioral problem to
go unattended so that euthanasia becomes necessary.
When owners choose to be present during euthanasia,
they should be prepared for what will happen. What
drugs are being used and how the animal could
respond should be discussed. Behaviors such as vocal-
ization, muscle twitches, failure of the eyelids to close,
urination, or defecation can be distressing. Counseling
services for grieving owners are now available in some
communities
39
and telephone counseling is available
through some veterinary schools.
40,41
Owners are not the
only people affected by euthanasia of animals.
Veterinarians and their staffs may also become attached
to patients they have known and treated for many years
and may continue to struggle with the ethical implica-
tions of ending an animals life.
The second is animal care and control facilities
where unwanted, homeless, diseased, and injured ani-
mals must be euthanatized in large numbers. Distress
may develop among personnel directly involved in per-
forming euthanasia repeatedly. Emotional uneasiness,
discomfort, or distress experienced by people involved
with euthanasia of animals may be minimized. The
person performing euthanasia must be technically pro-
ficient, use humane handling methods, understand the
reasons for euthanasia, and be familiar with the method
of euthanasia being employed (ie, what is going to
happen to the animal). When the person is not
knowledgeable about what to expect, he or she may
mistakenly interpret any movement of animals as
consciousness and a lack of movement as loss of con-
sciousness. Methods that preclude movement of animals
are more aesthetically acceptable to most technical staff
even though lack of movement is not an adequate
criterion for evaluating euthanasia techniques. Constant
exposure to, or participation in, euthanasia procedures
can cause a psychologic state characterized by a strong
sense of work dissatisfaction or alienation, which may
be expressed by absenteeism, belligerence, or careless
and callous handling of animals.
42
This is one of the
principal reasons for turnover of employees directly
involved with repeated animal euthanasia. Management
should be aware of potential personnel problems related
to animal euthanasia and determine whether it is
necessary to institute a program to prevent, decrease,
or eliminate this problem. Specific coping strategies can
make the task more tolerable. Some strategies include
adequate training programs so that euthanasia is
performed competently, peer support in the workplace,
professional support as necessary, focusing on animals
that are successfully adopted or returned to owners,
devoting some work time to educational activities, and
providing time off when workers feel stressed.
The third setting is the laboratory. Researchers,
technicians, and students may become attached to ani-
mals that must be euthanatized.
43
The same considera-
tions afforded pet owners or shelter employees
should be provided to those working in laboratories.
The fourth situation is wildlife control. Wildlife
biologists, wildlife managers, and wildlife health pro-
fessionals are often responsible for euthanatizing ani-
mals that are injured, diseased, in excessive number, or
that threaten property or human safety. Although relo-
cation of some animals is appropriate and attempted,
relocation is often only a temporary solution to a larger
problem. People who must deal with these animals,
especially under public pressure to save the animals
rather than destroy them, can experience extreme dis-
tress and anxiety.
The fifth setting is livestock and poultry slaughter
facilities. The large number of animals processed daily
can take a heavy toll on employees physically and emo-
tionally. Federal and state agricultural employees may
also be involved in mass euthanasia of poultry and
livestock in the face of disease outbreaks, bioterrorism,
and natural disasters.
The last situation is public exposure. Because
euthanasia of zoo animals, animals involved in roadside
or racetrack accidents, stranded marine animals,
nuisance or injured wildlife, and others can draw
public attention, human attitudes and responses
should be considered whenever animals are euthana-
tized. Natural disasters and foreign animal disease
programs also present public challenges. These con-
siderations, however, should not outweigh the primary
responsibility of using the most rapid and painless
euthanasia method possible under the circumstances.
MODES OF ACTION OF EUTHANATIZING
AGENTS
Euthanatizing agents cause death by three basic
mechanisms: (1) hypoxia, direct or indirect; (2) direct
depression of neurons necessary for life function; and
(3) physical disruption of brain activity and destruc-
tion of neurons necessary for life.
Agents that induce death by direct or indirect
hypoxia can act at various sites and can cause loss of
consciousness at different rates. For death to be pain-
less and distress-free, loss of consciousness should pre-
cede loss of motor activity (muscle movement). Loss of
motor activity, however, cannot be equated with loss of
consciousness and absence of distress. Thus, agents
that induce muscle paralysis without loss of con-
sciousness are not acceptable as sole agents for
euthanasia (eg, depolarizing and nondepolarizing mus-
cle relaxants, strychnine, nicotine, and magnesium
salts). With other techniques that induce hypoxia,
some animals may have motor activity following loss of
consciousness, but this is reflex activity and is not per-
ceived by the animal.
A second group of euthanatizing agents depress
nerve cells of the brain, inducing loss of consciousness
followed by death. Some of these agents release inhibi-
tion of motor activity during the first stage of anesthe-
sia, resulting in a so-called excitement or delirium
phase, during which there may be vocalization and
some muscle contraction. These responses do not appear
to be purposeful. Death follows loss of consciousness,
and is attributable to cardiac arrest and/or hypoxemia
following direct depression of respiratory centers.
Physical disruption of brain activity, caused by
concussion, direct destruction of the brain, or electri-
cal depolarization of neurons, induces rapid loss of
consciousness. Death occurs because of destruction of
midbrain centers controlling cardiac and respiratory
activity or as a result of adjunctive methods (eg, exsan-
guination) used to kill the animal. Exaggerated muscular
activity can follow loss of consciousness and, although
this may disturb some observers, the animal is not
experiencing pain or distress.
INHALANT AGENTS
Any gas that is inhaled must reach a certain con-
centration in the alveoli before it can be effective;
therefore, euthanasia with any of these agents takes
some time. The suitability of a particular agent
depends on whether an animal experiences distress
between the time it begins to inhale the agent and the
time it loses consciousness. Some agents may induce
convulsions, but these generally follow loss of con-
sciousness. Agents inducing convulsions prior to loss
of consciousness are unacceptable for euthanasia.
Certain considerations are common to all inhalant
agents. (1) In most cases, onset of loss of conscious-
ness is more rapid, and euthanasia more humane, if the
animal is rapidly exposed to a high concentration of
the agent. (2) The equipment used to deliver and
maintain this high concentration must be in good
working order and in compliance with state and feder-
al regulations. Leaky or faulty equipment may lead to
slow, distressful death and be hazardous to other ani-
mals and to personnel. (3) Most of these agents are
hazardous to personnel because of the risk of explosions
(eg, ether), narcosis (eg, halothane), hypoxemia (eg,
nitrogen and carbon monoxide), addiction (eg, nitrous
oxide), or health effects resulting from chronic exposure
(eg, nitrous oxide and carbon monoxide). (4) Alveolar
concentrations rise slowly in an animal with decreased
ventilation, making agitation more likely during
induction. Other noninhalant methods of euthanasia
should be considered for such animals. (5) Neonatal
animals appear to be resistant to hypoxia, and
because all inhalant agents ultimately cause hypoxia,
neonatal animals take longer to die than adults.
Glass et al,
44
reported that newborn dogs, rabbits, and
guinea pigs survived a nitrogen atmosphere much longer
than did adults. Dogs, at 1 week old, survived for 14
minutes compared with a 3-minute survival time after a
few weeks of age. Guinea pigs survived for 4.5 minutes
at 1 day old, compared with 3 minutes at 8 days or
older. Rabbits survived for 13 minutes at 6 days old, 4
minutes at 14 days, and 1.5 minutes at 19 days and
older. The panel recommended that inhalant agents not
be used alone in animals less than 16 weeks old except
to induce loss of consciousness, followed by the use
of some other method to kill the animal. (6) Rapid gas
flows can produce a noise that frightens animals. If high
flows are required, the equipment should be designed to
minimize noise. (7) Animals placed together in
chambers should be of the same species, and, if
needed, should be restrained so that they will not hurt
themselves or others. Chambers should not be
overloaded and need to be kept clean to minimize odors
that might distress animals subsequently euthanatized.
(8) Reptiles, amphibians, and diving birds and mammals
have a great capacity for holding their breath and
anaerobic metabolism. Therefore, induction of
anesthesia and time to loss of consciousness when using
inhalants may be greatly prolonged. Other techniques
may be more appropriate for these species.
INHALANT ANESTHETICS
Inhalant anesthetics (eg, ether, halothane,
methoxyflurane, isoflurane, sevoflurane, desflurane, and
enflurane) have been used to euthanatize many
species.
45
Halothane induces anesthesia rapidly and is
the most effective inhalant anesthetic for euthanasia.
Enflurane is less soluble in blood than halothane, but,
because of its lower vapor pressure and lower potency,
induction rates may be similar to those for halothane.
At deep anesthetic planes, animals may seizure. It is an
effective agent for euthanasia, but the associated seizure
activity may be disturbing to personnel. Isoflurane is
less soluble than halothane, and it should induce
anesthesia more rapidly. However, it has a slightly
pungent odor and animals often hold their breath,
delaying onset of loss of consciousness. Isoflurane
also may require more drug to kill an animal, compared
with halothane. Although isoflurane is acceptable as a
euthanasia agent, halothane is preferred. Sevoflurane is
less soluble than halothane and does not have an
objectionable odor. It is less potent than isoflurane or
halothane and has a lower vapor pressure. Anesthetic
concentrations can be achieved and maintained rapidly.
Desflurane is currently the least soluble potent inhalant
anesthetic, but the vapor is quite pungent, which may
slow induction. This drug is so volatile that it could
displace oxygen (O2) and induce hypoxemia during
induction if supplemental O2 is not provided.
Methoxyflurane is highly soluble, and slow anesthetic
induction with its use may be accompanied by agitation.
It is a conditionally acceptable agent for euthanasia in
rodents.
46
Ether has high solubility in blood and induces
anesthesia slowly. It is irritating to the eyes and nose,
poses serious risks associated with its flammability and
explosiveness, and has been used to create a model for
stress.
47-50
With inhalant anesthetics, the animal can be
placed in a closed receptacle containing cotton or gauze
soaked with an appropriate amount of the anesthetic,
51
or the anesthetic can be introduced from a vaporizer.
The latter method may be associated with a longer
induction time. Vapors are inhaled until respiration
ceases and death ensues. Because the liquid state of
most inhalant anesthetics is irritating, animals
should be exposed only to vapors. Also, sufficient air or
O2 must be provided during the induction period to
prevent hypoxemia.
51
In the case of small rodents
placed in a large container, there will be sufficient O2
in the chamber to prevent hypoxemia. Larger species
placed in small containers may need supplemental air
or O2.
51
Nitrous oxide (N2O) may be used with other
inhalants to speed the onset of anesthesia, but alone it
does not induce anesthesia in animals, even at 100%
concentration. When used by itself, N2O produces
hypoxemia before respiratory or cardiac arrest. As a
result, animals may become distressed prior to loss of
consciousness.
Occupational exposure to inhalant anesthetics
constitutes a human health hazard. Spontaneous abor-
tion and congenital abnormalities have been associated
with exposure of women to trace amounts of inhalation
anesthetic agents during early stages of pregnancy.
52
Regarding human exposure to inhalant anesthetics, the
concentrations of halothane, enflurane, and isoflurane
should be less than 2 ppm, and less than 25 ppm for
nitrous oxide.
52
There are no controlled studies proving
that such concentrations of anesthetics are safe, but these
concentrations were established because they were
found to be attainable under hospital conditions.
Effective procedures must be used to protect personnel
from anesthetic vapors.
Advantages(1) Inhalant anesthetics are particu-
larly valuable for euthanasia of smaller animals (< 7
kg) or for animals in which venipuncture may be diffi-
cult. (2) Halothane, enflurane, isoflurane, sevoflurane,
desflurane, methoxyflurane, and N2O are nonflammable
and nonexplosive under ordinary environmental
conditions.
Disadvantages(1) Animals may struggle and
become anxious during induction of anesthesia
because anesthetic vapors may be irritating and can
induce excitement. (2) Ether is flammable and
explosive. Explosions have occurred when animals,
euthanatized with ether, were placed in an ordinary (not
explosion proof) refrigerator or freezer and when
bagged animals were placed in an incinerator. (3)
Induction with methoxyflurane is unacceptably slow in
some species. (4) Nitrous oxide will support combustion.
(5) Personnel and animals can be injured by exposure to
these agents. (6) There is a potential for human abuse of
some of these drugs, especially N2O.
RecommendationsIn order of preference,
halothane, enflurane, isoflurane, sevoflurane,
methoxyflurane, and desflurane, with or without
nitrous oxide, are acceptable for euthanasia of small
animals (< 7 kg). Ether should only be used in carefully
controlled situations in compliance with state and federal
occupational health and safety regulations. It is
conditionally acceptable. Nitrous oxide should not be
used alone, pending further scientific studies on its
suitability for animal euthanasia. Although acceptable,
these agents are generally not used in larger animals
because of their cost and difficulty of administration.
CARBON DIOXIDE
Room air contains 0.04% carbon dioxide (CO2),
which is heavier than air and nearly odorless.
Inhalation of CO2 at a concentration of 7.5% increases
the pain threshold, and higher concentrations of CO
2
have a rapid anesthetic effect.
53-58
Leake and Waters
56
reported the experimental use of
CO2 as an anesthetic agent for dogs. At concentrations
of 30% to 40% CO2 in O2, anesthesia was induced within
1 to 2 minutes, usually without struggling, retching, or
vomiting. For cats, inhalation of 60% CO2 results in loss
of consciousness within 45 seconds, and respiratory
arrest within 5 minutes.
59
Signs of effective CO2
anesthesia are those associated with deep surgical
anesthesia, such as loss of withdrawal and palpebral
reflexes.
60
Time to loss of consciousness is decreased by
use of higher concentrations of CO2 with an 80 to
100% concentration providing anesthesia in 12 to 33
seconds in rats and 70% CO2 in O2 inducing anesthesia
in 40 to 50 seconds.
61,62
Time to loss of consciousness
will be longer if the concentration is increased slowly
rather than immersing the animal in the full
concentration immediately.
Several investigators have suggested that inhalation
of high concentrations of CO2 may be distressing to
animals,
63-66
because the gas dissolves in moisture on the
nasal mucosa. The resulting product, carbonic acid, may
stimulate nociceptors in the nasal mucosa. Some
humans exposed to concentrations of around 50% CO2
report that inhaling the gas is unpleasant and that higher
concentrations are noxious.
67,68
A brief study of swine
examined the aversive nature of CO2 exposure69 and
found that 90% CO2 was aversive to pigs while 30%
was not. For rats, exposure to increasing concentrations
of CO2 (33% achieved after 1 minute) in their home cage
produced no evident stress as measured by behavior and
ACTH, glucose, and corticosterone concentrations in
70
serum.
Carbon dioxide has been used to euthanatize
groups of small laboratory animals, including mice, rats,
guinea pigs, chickens, and rabbits,
5,71-76
and to render
swine unconscious before humane slaughter.
22,63,64
The combination of 40% CO2 and approximately 3%
carbon monoxide (CO) has been used experimentally
for euthanasia of dogs.
65
Carbon dioxide has been used
in specially designed chambers to euthanatize individual
cats
77,78
and other small laboratory animals.
51,72,79
Studies of 1-day-old chickens have revealed that
CO2 is an effective euthanatizing agent. Inhalation of
CO2 caused little distress to the birds, suppressed ner-
vous activity, and induced death within 5 minutes.
73
Because respiration begins during embryonic develop-
ment, the unhatched chickens environment may nor-
mally have a CO2 concentration as high as 14%. Thus,
CO2 concentrations for euthanasia of newly hatched
chickens and neonates of other species should be espe-
cially high. A CO2 concentration of 60% to 70% with a
5-minute exposure time appears to be optimal.
73
In studies of mink, high concentrations of CO2
would kill them quickly, but a 70% CO2 concentration
induced loss of consciousness without killing them.
80
Some burrowing animals, such as rabbits of the species
Oryctolagus, also have prolonged survival times when
exposed to CO2.
81
Some burrowing and diving animals
have physiologic mechanisms for coping with hyper-
capnia. Therefore, it is necessary to have a sufficient
concentration of CO2 to kill the animal by hypoxemia
following induction of anesthesia with CO2.
Advantages(1) The rapid depressant, analgesic,
and anesthetic effects of CO
2
are well established. (2)
Carbon dioxide is readily available and can be pur-
chased in compressed gas cylinders. (3) Carbon dioxide
is inexpensive, nonflammable, nonexplosive, and poses
minimal hazard to personnel when used with properly
designed equipment. (4) Carbon dioxide does not result
in accumulation of tissue residues in food-producing
animals. (5) Carbon dioxide euthanasia does not
distort murine cholinergic markers
82
or corticosterone
concentrations.83
Disadvantages(1) Because CO2 is heavier than air,
incomplete filling of a chamber may permit animals to
climb or raise their heads above the higher
concentrations and avoid exposure. (2) Some
species, such as fish and burrowing and diving
mammals, may have extraordinary tolerance for
CO2. (3) Reptiles and amphibians may breathe too
slowly for the use of CO2. (4) Euthanasia by expo-
sure to CO2 may take longer than euthanasia by
other means.
61
(5) Induction of loss of consciousness
at lower concentrations (< 80%) may produce pul-
monary and upper respiratory tract lesions.
67, 84
(6)
High concentrations of CO2 may be distressful to
some animals.
RecommendationsCarbon dioxide is acceptable
for euthanasia in appropriate species (Appendices 1 and
2). Compressed CO2 gas in cylinders is the only recom-
mended source of carbon dioxide because the inflow to
the chamber can be regulated precisely. Carbon dioxide
generated by other methods such as from dry ice, fire
extinguishers, or chemical means (eg, antacids) is
unacceptable. Species should be separated and chambers
should not be overcrowded. With an animal in the
chamber, an optimal flow rate should displace at least
20% of the chamber volume per minute.
85
Loss of con-
sciousness may be induced more rapidly by exposing
animals to a CO2 concentration of 70% or more by pre-
filling the chamber for species in which this has not
been shown to cause distress. Gas flow should be
maintained for at least 1 minute after apparent clinical
death.
86
It is important to verify that an animal is dead
before removing it from the chamber. If an animal is
not dead, CO2 narcosis must be followed with another
method of euthanasia. Adding O2 to the CO2 may or
may not preclude signs of distress.67,87 Additional O2
will, however, prolong time to death and may compli-
cate determination of consciousness. There appears to
be no advantage to combining O2 with carbon dioxide
for euthanasia.
87
NITROGEN, ARGON
Nitrogen (N2) and argon (Ar) are colorless, odor-
less gases that are inert, nonflammable, and nonexplo-
sive. Nitrogen comprises 78% of atmospheric air,
whereas Ar comprises less than 1%.
Euthanasia is induced by placing the animal in a
closed container that has been prefilled with N
2
or Ar or
into which the gas is then rapidly introduced.
Nitrogen/Ar displaces O2, thus inducing death by
hypoxemia.
In studies by Herin et al,
88
dogs became unconscious
within 76 seconds when a N2 concentration of 98.5%
was achieved in 45 to 60 seconds. The elec-
troencephalogram (EEG) became isoelectric (flat) in a
mean time of 80 seconds, and arterial blood pressure
was undetectable at 204 seconds. Although all dogs
hyperventilated prior to loss of consciousness, the
investigators concluded that this method induced
death without pain. Following loss of consciousness,
vocalization, gasping, convulsions, and muscular
tremors developed in some dogs. At the end of a 5-
minute exposure period, all dogs were dead.
88
These
findings were similar to those for rabbits
89
and mink.
80,90
With N2 flowing at a rate of 39% of chamber vol-
ume per minute, rats collapsed in approximately 3
minutes and stopped breathing in 5 to 6 minutes.
Regardless of flow rate, signs of panic and distress were
evident before the rats collapsed and died.
85
Insensitivity to pain under such circumstances is ques-
tionable.
91
Tranquilization with acepromazine, in conjunc-
tion with N2 euthanasia of dogs, was investigated by
Quine et al.
92
Using ECG and EEG recordings, they
found these dogs had much longer survival times than
dogs not given acepromazine before administration of
N2. In one dog, ECG activity continued for 51 minutes.
Quine also addressed distress associated with exposure
to N2 by removing cats and dogs from the chamber fol-
lowing loss of consciousness and allowing them to
recover. When these animals were put back into the
chamber, they did not appear afraid or apprehensive.
Investigations into the aversiveness of Ar to swine
and poultry have revealed that these animals will toler-
ate breathing 90% Ar with 2% O
2
.
69,71
Swine
voluntarily entered a chamber containing this mixture,
for a food reward, and only withdrew from the chamber
as they became ataxic. They reentered the chamber
immediately to continue eating. Poultry also entered a
chamber containing this mixture for a food reward and
continued eating until they collapsed.
71
When Ar was
used to euthanatize chickens, exposure to a chamber
prefilled with Ar, with an O2 concentration of < 2%,
led to EEG changes and collapse in 9 to 12 seconds. Birds
removed from the chamber at 15 to 17 seconds failed
to respond to comb pinching. Continued exposure
led to convulsions at 20 to 24 seconds. Somatosensory-
evoked potentials were lost at 24 to 34 seconds, and the
EEG became isoelectric at 57 to 66 seconds. Convulsion
onset was after loss of consciousness (collapse and loss
of response to comb pinch), so this would appear to be a
humane method of euthanasia for chickens.
93
Despite
the availability of some information, there is still much
about the use of N2/Ar that needs to be investigated.
Advantages(1) Nitrogen and Ar are readily avail-
able as compressed gases. (2) Hazards to personnel are
minimal.
Disadvantages(1) Loss of consciousness is pre-
ceded by hypoxemia and ventilatory stimulation,
whi ch may be di st r essi ng t o t he ani mal . ( 2)
Reestablishing a low concentration of O2 (ie, 6% or
greater) in the chamber before death will allow imme-
diate recovery.
69
RecommendationsNitrogen and Ar can be dis-
tressful to some species (eg, rats).
85
Therefore, this
technique is conditionally acceptable only if O2 con-
centrations <2% are achieved rapidly, and animals are
heavily sedated or anesthetized. With heavy sedation
or anesthesia, it should be recognized that death may
be delayed. Although N2 and Ar are effective, other
methods of euthanasia are preferable.
CARBON MONOXIDE
Carbon monoxide (CO) is a colorless, odorless gas
that is nonflammable and nonexplosive unless concen-
trations exceed 10%. It combines with hemoglobin to
form carboxyhemoglobin and blocks uptake of O2 by
erythrocytes, leading to fatal hypoxemia.
In the past, mass euthanasia has been accom-
plished by use of 3 methods for generating CO: (1)
chemical interaction of sodium formate and sulfuric
acid, (2) exhaust fumes from idling gasoline internal
combustion engines, and (3) commercially compressed
CO in cylinders. The first 2 techniques are associated
with problems such as production of other gases,
achieving inadequate concentrations of carbon monox-
ide, inadequate cooling of the gas, and maintenance of
equipment. Therefore, the only acceptable source is
compressed CO in cylinders.
In a study by Ramsey and Eilmann,
94
8% CO
caused guinea pigs to collapse in 40 seconds to 2 min-
utes, and death occurred within 6 minutes. Carbon
monoxide has been used to euthanatize mink
80,90
and
chinchillas. These animals collapsed in 1 minute,
breathing ceased in 2 minutes, and the heart stopped
beating in 5 to 7 minutes.
In a study evaluating the physiologic and behavioral
characteristics of dogs exposed to 6% CO in air,
Chalifoux and Dallaire
95
could not determine the precise
time of loss of consciousness. Electroencephalographic
recordings revealed 20 to 25 seconds of abnormal
cortical function prior to loss of consciousness. It was
during this period that the dogs became agitated and
vocalized. It is not known whether animals experience
distress; however, humans in this phase reportedly are
not distressed.
96
Subsequent studies have revealed that
tranquilization with acepromazine significantly
decreases behavioral and physiologic responses of dogs
euthanatized with CO.
97
In a comparative study, CO from gasoline engine
exhaust and 70% CO2 plus 30% O2 were used to eutha-
natize cats. Euthanasia was divided into 3 phases.
Phase I was the time from initial contact to onset of
clinical signs (eg, yawning, staggering, or trembling).
Phase II extended from the end of phase I until recum-
bency, and phase III from the end of phase II until
death.
54
The study revealed that signs of agitation
before loss of consciousness were greatest with CO2
plus O2. Convulsions occurred during phases II and III
with both methods. However, when the euthanasia
chamber was prefilled with CO (ie, exhaust fumes),
convulsions did not occur in phase III. Time to com-
plete immobilization was greater with CO2 plus O2
(approximately 90 seconds) than with CO alone
(approximately 56 seconds).
54
In neonatal pigs, excita-
tion was more likely to precede loss of consciousness if
the pigs were exposed to a rapid rise in CO concentra-
tion. This agitation was reduced at lower flow rates, or
when CO was combined with nitrogen.
98
In people, the most common symptoms of early
CO toxicosis are headache, dizziness, and weakness. As
concentrations of carboxyhemoglobin increase, these
signs may be followed by decreased visual acuity, tinnitus,
nausea, progressive depression, confusion, and
collapse.99 Because CO stimulates motor centers in the
brain, loss of consciousness may be accompanied by
convulsions and muscular spasms.
Carbon monoxide is a cumulative poison.
96
Distinct signs of CO toxicosis are not evident until the
CO concentration is 0.05% in air, and acute signs do
not develop until the CO concentration is approxi-
mately 0.2% in air. In humans, exposure to 0.32% CO
and 0.45% CO for one hour will induce loss of con-
sciousness and death, respectively.
100
Carbon monoxide
is extremely hazardous for personnel because it is
highly toxic and difficult to detect. Chronic exposure
to low concentrations of carbon monoxide may be a
health hazard, especially with regard to cardiovascular
disease and teratogenic effects.
101-103
An efficient
exhaust or ventilatory system is essential to prevent
accidental exposure of humans.
Advantages(1) Carbon monoxide induces loss of
consciousness without pain and with minimal discernible
discomfort. (2) Hypoxemia induced by CO is insidious,
so that the animal appears to be unaware. (3) Death
occurs rapidly if concentrations of 4 to 6% are used.
Disadvantages(1) Safeguards must be taken to
prevent exposure of personnel. (2) Any electrical
equipment exposed to CO (eg, lights and fans) must be
explosion proof.
RecommendationsCarbon monoxide used for
individual animal or mass euthanasia is acceptable for
dogs, cats, and other small mammals, provided that
commercially compressed CO is used and the
following precautions are taken: (1) personnel using
CO must be instructed thoroughly in its use and
must understand its hazards and limitations; (2) the
CO chamber must be of the highest quality con-
struction and should allow for separation of individ-
ual animals; (3) the CO source and chamber must be
located in a well-ventilated environment, preferably
out of doors; (4) the chamber must be well lit and
have view ports that allow personnel direct observa-
tion of animals; (5) the CO flow rate should be ade-
quate to rapidly achieve a uniform CO concentra-
tion of at least 6% after animals are placed in the
chamber, although some species (eg, neonatal pigs)
are less likely to become agitated with a gradual rise
in CO concentration;
98
and (6) if the chamber is
inside a room, CO monitors must be placed in the
room to warn personnel of hazardous concentrations. It
is essential that CO use be in compliance with state
and federal occupational health and safety
regulations.
NONINHALANT PHARMACEUTICAL
AGENTS
The use of injectable euthanasia agents is the most
rapid and reliable method of performing euthanasia. It
is the most desirable method when it can be performed
without causing fear or distress in the animal. When
the restraint necessary for giving an animal an intra-
venous injection would impart added distress to the
animal or pose undue risk to the operator, sedation,
anesthesia, or an acceptable alternate route of adminis-
tration should be employed. Aggressive, fearful, wild, or
feral animals should be sedated or given a nonparalytic
immobilizing agent prior to intravenous administration
of the euthanasia agent.
When intravenous administration is considered
impractical or impossible, intraperitoneal administration
of a nonirritating euthanasia agent is acceptable, provided
the drug does not contain neuromuscular blocking
agents. Intracardiac injection is acceptable only when
performed on heavily sedated, anesthetized, or comatose
animals. It is not considered acceptable in awake
animals, owing to the difficulty and unpredictability of
performing the injection accurately. Intramuscular,
subcutaneous, intrathoracic, intrapulmonary,
intrahepatic, intrarenal, intrasplenic, intrathecal, and
other nonvascular injections are not acceptable methods
of administering injectable euthanasia agents.
When injectable euthanasia agents are adminis-
tered into the peritoneal cavity, animals may be slow to
pass through stages I and II of anesthesia. Accordingly,
they should be placed in small cages in a quiet area to
minimize excitement and trauma.
BARBITURIC ACID DERIVATIVES
Barbiturates depress the central nervous system in
descending order, beginning with the cerebral cortex,
with loss of consciousness progressing to anesthesia.
With an overdose, deep anesthesia progresses to apnea,
owing to depression of the respiratory center, which is
followed by cardiac arrest.
All barbituric acid derivatives used for anesthesia
are acceptable for euthanasia when administered intra-
venously. There is a rapid onset of action, and loss of
consciousness induced by barbiturates results in mini-
mal or transient pain associated with venipuncture.
Desirable barbiturates are those that are potent, long-
acting, stable in solution, and inexpensive. Sodium
pentobarbital best fits these criteria and is most widely
used, although others such as secobarbital are also
acceptable.
Advantages(1) A primary advantage of barbitu-
rates is speed of action. This effect depends on the dose,
concentration, route, and rate of the injection. (2)
Barbiturates induce euthanasia smoothly, with minimal
discomfort to the animal. (3) Barbiturates are less
expensive than many other euthanasia agents.
Disadvantages(1) Intravenous injection is neces-
sary for best results and requires trained personnel. (2)
Each animal must be restrained. (3) Current federal drug
regulations require strict accounting for barbiturates and
these must be used under the supervision of personnel
registered with the US Drug Enforcement
Administration (DEA). (4) An aesthetically objection-
able terminal gasp may occur in unconscious animals.
(5) These drugs tend to persist in the carcass and may
cause sedation or even death of animals that consume
the body.
RecommendationsThe advantages of using barbi-
turates for euthanasia in small animals far outweigh the
disadvantages. Intravenous injection of a barbituric acid
derivative is the preferred method for euthanasia of
dogs, cats, other small animals, and horses.
Intraperitoneal injection may be used in situations when
an intravenous injection would be distressful or even
dangerous. Intracardiac injection must only be used if
the animal is heavily sedated, unconscious, or
anesthetized.
PENTOBARBITAL COMBINATIONS
Several euthanasia products are formulated to
include a barbituric acid derivative (usually sodium
pentobarbital), with added local anesthetic agents or
agents that metabolize to pentobarbital. Although
some of these additives are slowly cardiotoxic, this
pharmacologic effect is inconsequential. These combi-
nation products are listed by the DEA as Schedule III
drugs, making them somewhat simpler to obtain, store,
and administer than Schedule II drugs such as sodium
pentobarbital. The pharmacologic properties and rec-
ommended use of combination products that combine
sodium pentobarbital with lidocaine or phenytoin are
interchangeable with those of pure barbituric acid
derivatives.
A combination of pentobarbital with a neuro-
muscular blocking agent is not an acceptable euthanasia
agent.
CHLORAL HYDRATE
Chloral hydrate depresses the cerebrum slowly;
therefore, restraint may be a problem for some animals.
Death is caused by hypoxemia resulting from progres-
sive depression of the respiratory center, and may be
preceded by gasping, muscle spasms, and vocalization.
RecommendationsChloral hydrate is conditional-
ly acceptable for euthanasia of large animals only when
administered intravenously, and only after sedation to
decrease the aforementioned undesirable side effects.
Chloral hydrate is not acceptable for dogs, cats, and
other small animals because the side effects may be
severe, reactions can be aesthetically objectionable,
and other products are better choices.
T-61
T-61 is an injectable, nonbarbiturate, non-narcotic
mixture of 3 drugs used for euthanasia. These drugs
provide a combination of general anesthetic, curari-
form, and local anesthetic actions. T-61 has been with-
drawn from the market and is no longer manufactured
or commercially available in the United States. It is
available in Canada and other countries. T-61 should
be used only intravenously and at carefully monitored
rates of injection, because there is some question as to
the differential absorption and onset of action of the
active ingredients when administered by other routes.
1
TRICAINE METHANE SULFONATE (MS 222, TMS)
MS 222 is commercially available as tricaine
methane sulfonate (TMS), which can be used for the
euthanasia of amphibians and fish. Tricaine is a
benzoic acid derivative and, in water of low alkalinity
(< 50 mg/L as CaCO3); the solution should be
buffered with sodium bicarbonate.104 A 10 g/L stock
solution can be made, and sodium bicarbonate added
to saturation, resulting in a pH between 7.0 and 7.5
for the solution. The stock solution should be stored
in a dark brown bottle, and refrigerated or frozen if
possible. The solution should be replaced monthly
and any time a brown color is observed.105 For
euthanasia, a concentration 250 mg/L is
recommended and fish should be left in this solution
for at least 10 minutes following cessation of
opercular movement.104 In the United States, there is
a 21-day withdrawal time for MS 222; therefore, it is
not appropriate for euthanasia of animals intended for
food.
POTASSIUM CHLORIDE IN CONJUNCTION WITH PRIOR
GENERAL ANESTHESIA
Although unacceptable and condemned when
used in unanaesthetized animals, the use of a supersat-
urated solution of potassium chloride injected intra-
venously or intracardially in an animal under general
anesthesia is an acceptable method to produce cardiac
arrest and death. The potassium ion is cardiotoxic, and
rapid intravenous or intracardiac administration of 1 to 2
mmol/kg of body weight will cause cardiac arrest.
This is a preferred injectable technique for euthanasia
of livestock or wildlife species to reduce the risk of tox-
icosis for predators or scavengers in situations where
carcasses of euthanatized animals may be
consumed.
106,107
Advantages(1) Potassium chloride is not a con-
trolled substance. It is easily acquired, transported, and
mixed in the field. (2) Potassium chloride, when used
with appropriate methods to render an animal uncon-
scious, results in a carcass that is potentially less toxic
for scavengers and predators in cases where carcass
disposal is impossible or impractical.
DisadvantageRippling of muscle tissue and
clonic spasms may occur on or shortly after injection.
RecommendationsIt is of utmost importance that
personnel performing this technique are trained and
knowledgeable in anesthetic techniques, and are com-
petent in assessing anesthetic depth appropriate for
administration of potassium chloride intravenously.
Administration of potassium chloride intravenously
requires animals to be in a surgical plane of anesthesia
characterized by loss of consciousness, loss of reflex
muscle response, and loss of response to noxious stim-
uli. Saturated potassium chloride solutions are effec-
tive in causing cardiac arrest following rapid intracar-
diac or intravenous injection. Residual tissue concen-
trations of general anesthetics after anesthetic induc-
tion have not been documented. Whereas no scavenger
toxicoses have been reported with potassium chloride
in combination with a general anesthetic, proper carcass
disposal should always be attempted to prevent
possible toxicosis by consumption of a carcass conta-
minated with general anesthetics.
UNACCEPTABLE INJECTABLE AGENTS
When used alone, the injectable agents listed in
Appendix 4 (strychnine, nicotine, caffeine, magnesium
sulfate, potassium chloride, cleaning agents, solvents,
disinfectants and other toxins or salts, and all
neuromuscular blocking agents) are unacceptable and
are absolutely condemned for use as euthanasia agents.
PHYSICAL METHODS
Physical methods of euthanasia include captive
bolt, gunshot, cervical dislocation, decapitation, elec-
trocution, microwave irradiation, kill traps, thoracic
compression, exsanguination, maceration, stunning,
and pithing. When properly used by skilled personnel
with well-maintained equipment, physical methods of
euthanasia may result in less fear and anxiety and be
more rapid, painless, humane, and practical than
other forms of euthanasia. Exsanguination, stunning,
and pithing are not recommended as a sole means of
euthanasia, but should be considered adjuncts to other
agents or methods.
Some consider physical methods of euthanasia
aesthetically displeasing. There are occasions, however,
when what is perceived as aesthetic and what is most
humane are in conflict. Physical methods may be the
most appropriate method for euthanasia and rapid
relief of pain and suffering in certain situations.
Personnel performing physical methods of euthanasia
must be well trained and monitored for each type of
physical technique performed. That person must also
be sensitive to the aesthetic implications of the method
and inform onlookers about what they should expect
when possible.
Since most physical methods involve trauma,
there is inherent risk for animals and humans. Extreme
care and caution should be used. Skill and experience of
personnel is essential. If the method is not performed
correctly, animals and personnel may be injured.
Inexperienced persons should be trained by experienced
persons and should practice on carcasses or anesthetized
animals to be euthanatized until they are proficient in
performing the method properly and humanely. When
done appropriately, the panel considered most physical
methods conditionally acceptable for euthanasia.
PENETRATING CAPTIVE BOLT
A penetrating captive bolt is used for euthanasia of
ruminants, horses, swine, laboratory rabbits, and
dogs.
108
Its mode of action is concussion and trauma
to the cerebral hemisphere and brainstem.
109,110
Captive bolt guns are powered by gunpowder or
compressed air and must provide sufficient energy to
penetrate the skull of the species on which they are
being used.
109
Adequate restraint is important to ensure
proper placement of the captive bolt. A cerebral
hemisphere and the brainstem must be sufficiently
disrupted by the projectile to induce sudden loss of
consciousness and subsequent death. Accurate
placement of captive bolts for various species has been
described.
109-112
A multiple projectile has been
suggested as a more effective technique, especially for
large cattle.
109
A nonpenetrating captive bolt only stuns animals
and should not be used as a sole means of euthanasia
(see Stunning under Adjunctive Methods).
AdvantageThe penetrating captive bolt is an
effective method of euthanasia for use in slaughter-
houses, in research facilities, and on the farm when use
of drugs is inappropriate.
Disadvantages(1) It is aesthetically displeasing.
(2) Death may not occur if equipment is not main-
tained and used properly.
RecommendationsUse of the penetrating captive
bolt is an acceptable and practical method of euthanasia
for horses, ruminants, and swine. It is conditionally
acceptable in other appropriate species. The non-
penetrating captive bolt must not be used as a sole
method of euthanasia.
EUTHANASIA BY A BLOW TO THE HEAD
Euthanasia by a blow to the head must be evaluated
in terms of the anatomic features of the species on
which it is to be performed. A blow to the head can be
a humane method of euthanasia for neonatal animals
with thin craniums, such as young pigs, if a single sharp
blow delivered to the central skull bones with sufficient
force can produce immediate depression of the central
nervous system and destruction of brain tissue. When
properly performed, loss of consciousness is rapid.
The anatomic features of neonatal calves, however,
make a blow to the head in this species unacceptable.
Personnel performing euthanasia by use of a blow to the
head must be properly trained and monitored for
proficiency with this method of euthanasia, and they
must be aware of its aesthetic implications.
GUNSHOT
A properly placed gunshot can cause immediate
insensibility and humane death. In some circum-
stances, a gunshot may be the only practical method of
euthanasia. Shooting should only be performed by
highly skilled personnel trained in the use of firearms
and only in jurisdictions that allow for legal firearm
use. Personnel, public, and nearby animal safety
should be considered. The procedure should be per-
formed outdoors and away from public access.
For use of a gunshot to the head as a method of
euthanasia in captive animals, the firearm should be
aimed so that the projectile enters the brain, causing
instant loss of consciousness.
51,112-114
This must take into
account differences in brain position and skull confor-
mation between species, as well as the energy require-
ment for skull bone and sinus penetration.
109, 115
Accurate targeting for a gunshot to the head in various
species has been described.
114,116-119
For wildlife and
other freely roaming animals, the preferred target area
should be the head. The appropriate firearm should be
selected for the situation, with the goal being penetra-
tion and destruction of brain tissue without emergence
from the contralateral side of the head.
120
A gunshot
to the heart or neck does not immediately render
animals unconscious and thus is not considered to meet
the panels definition of euthanasia.
121
Advantages(1) Loss of consciousness is instanta-
neous if the projectile destroys most of the brain. (2)
Given the need to minimize stress induced by handling
and human contact, gunshot may at times be the most
practical and logical method of euthanasia of wild or
free-ranging species.
Disadvantages(1) Gunshot may be dangerous to
personnel. (2) It is aesthetically unpleasant. (3) Under
field conditions, it may be difficult to hit the vital tar-
get area. (4) Brain tissue may not be able to be exam-
ined for evidence of rabies infection or chronic wasting
disease when the head is targeted.
RecommendationsWhen other methods cannot
be used, an accurately delivered gunshot is a condi-
tionally acceptable method of euthanasia.114,122-125
When an animal can be appropriately restrained, the
penetrating captive bolt is preferred to a gunshot. Prior
to shooting, animals accustomed to the presence of
humans should be treated in a calm and reassuring
manner to minimize anxiety. In the case of wild ani-
mals, gunshots should be delivered with the least
amount of prior human contact necessary. Gunshot
should not be used for routine euthanasia of animals in
animal control situations, such as municipal pounds or
shelters.
CERVICAL DISLOCATION
Cervical dislocation is a technique that has been
used for many years and, when performed by well-
trained individuals, appears to be humane. However,
there are few scientific studies to confirm this observa-
tion. This technique is used to euthanatize poultry, other
small birds, mice, and immature rats and rabbits. For
mice and rats, the thumb and index finger are placed on
either side of the neck at the base of the skull or,
alternatively, a rod is pressed at the base of the skull.
With the other hand, the base of the tail or the hind
limbs are quickly pulled, causing separation of the cer-
vical vertebrae from the skull. For immature rabbits,
the head is held in one hand and the hind limbs in the
other. The animal is stretched and the neck is hyperex-
tended and dorsally twisted to separate the first cervical
vertebra from the skull.
72, 111
For poultry, cervical dis-
location by stretching is a common method for mass
euthanasia, but loss of consciousness may not be
instantaneous.
134
Data suggest that electrical activity in the brain
persists for 13 seconds following cervical dislocation,
127
and unlike decapitation, rapid exsanguination does not
contribute to loss of consciousness.
128, 129
Advantages(1) Cervical dislocation is a tech-
nique that may induce rapid loss of consciousness.
84, 127
(2) It does not chemically contaminate tissue. (3) It is
rapidly accomplished.
Disadvantages(1) Cervical dislocation may be
aesthetically displeasing to personnel. (2) Cervical dis-
location requires mastering technical skills to ensure
loss of consciousness is rapidly induced. (3) Its use is
limited to poultry, other small birds, mice, and imma-
ture rats and rabbits.
RecommendationsManual cervical dislocation is
a humane technique for euthanasia of poultry, other
small birds, mice, rats weighing < 200 g, and rabbits
weighing < 1 kg when performed by individuals with a
demonstrated high degree of technical proficiency. In
lieu of demonstrated technical competency, animals
must be sedated or anesthetized prior to cervical dislo-
cation. The need for technical competency is greater in
heavy rats and rabbits, in which the large muscle mass
in the cervical region makes manual cervical disloca-
tion physically more difficult.
130
In research settings,
this technique should be used only when scientifically
justified by the user and approved by the Institutional
Animal Care and Use Committee.
Those responsible for the use of this technique
must ensure that personnel performing cervical dislo-
cation techniques have been properly trained and con-
sistently apply it humanely and effectively.
DECAPITATION
Decapitation can be used to euthanatize rodents
and small rabbits in research settings. It provides a
means to recover tissues and body fluids that are chem-
ically uncontaminated. It also provides a means of
obtaining anatomically undamaged brain tissue for
study.
131
Although it has been demonstrated that electrical
activity in the brain persists for 13 to 14 seconds fol-
lowing decapitation,
132
more recent studies and reports
indicate that this activity does not infer the ability to
perceive pain, and in fact conclude that loss of con-
sciousness develops rapidly.
127-129
Guillotines that are designed to accomplish decap-
itation in adult rodents and small rabbits in a uniformly
instantaneous manner are commercially available.
Guillotines are not commercially available for
neonatal rodents, but sharp blades can be used for this
purpose.
Advantages(1) Decapitation is a technique that
appears to induce rapid loss of consciousness.
127-129
(2)
It does not chemically contaminate tissues. (3) It is
rapidly accomplished.
Disadvantages(1) Handling and restraint
required to perform this technique may be distressful to
animals.
83
(2) The interpretation of the presence of
electrical activity in the brain following decapitation has
created controversy and its importance may still be open
to debate.
127-129,132
(3) Personnel performing this
technique should recognize the inherent danger of the
guillotine and take adequate precautions to prevent
personal injury. (4) Decapitation may be aesthetically
displeasing to personnel performing or observing the
technique.
RecommendationsThis technique is conditionally
acceptable if performed correctly, and it should be used
in research settings when its use is required by the
experimental design and approved by the Institutional
Animal Care and Use Committee. The equipment used
to perform decapitation should be maintained in good
working order and serviced on a regular basis to ensure
sharpness of blades. The use of plastic cones to restrain
animals appears to reduce distress from handling, min-
imizes the chance of injury to personnel, and improves
posi t i oni ng of t he ani mal i n t he gui l l ot i ne.
Decapitation of amphibians, fish, and reptiles is
addressed elsewhere in these guidelines.
Those responsible for the use of this technique
must ensure that personnel who perform decapitation
techniques have been properly trained to do so.
ELECTROCUTION
Electrocution, using alternating current, has been
used as a method of euthanasia for species such as dogs,
cattle, sheep, swine, foxes, and mink.
113,133-138
Electrocution induces death by cardiac fibrillation,
which causes cerebral hypoxia.
135,137,139
However, ani-
mals do not lose consciousness for 10 to 30 seconds or
more after onset of cardiac fibrillation. It is imperative
that animals be unconscious before being electrocuted.
This can be accomplished by any acceptable means,
including electrical stunning.
25
Although an effective, 1-
step stunning and electrocution method has been
described for use in sheep and hogs, euthanasia by
electrocution in most species remains a 2-step
procedure.
25, 63,140
Advantages(1) Electrocution is humane if the
animal is first rendered unconscious. (2) It does not
chemically contaminate tissues. (3) It is economical.
Disadvantages(1) Electrocution may be hazardous
to personnel. (2) When conventional single-animal
probes are used, it may not be a useful method for mass
euthanasia because so much time is required per animal.
(3) It is not a useful method for dangerous, intractable
animals. (4) It is aesthetically objectionable because of
violent extension and stiffening of the limbs, head,
and neck. (5) It may not result in death in small animals
(< 5 kg) because ventricular fibrillation and circulatory
collapse do not always persist after cessation of current
flow.
RecommendationsEuthanasia by electrocution
requires special skills and equipment that will ensure
passage of sufficient current through the brain to
induce loss of consciousness and cardiac fibrillation in
the 1-step method for sheep and hogs, or cardiac fib-
rillation in the unconscious animal when the 2-step
procedure is used. Although the method is conditionally
acceptable if the aforementioned requirements are met,
its disadvantages far outweigh its advantages in most
applications. Techniques that apply electric current from
head to tail, head to foot, or head to moistened metal
plates on which the animal is standing are unacceptable.
MICROWAVE IRRADIATION
Heating by microwave irradiation is used primarily
by neurobiologists to fix brain metabolites in vivo while
maintaining the anatomic integrity of the brain.
141
Microwave instruments have been specifically
designed for use in euthanasia of laboratory mice
and rats. The instruments differ in design from kitchen
units and may vary in maximal power output from
1. 3 to 10 kw. All units direct their microwave
energy to the head of the animal. The power
required to rapidly halt brain enzyme activity depends
on the efficiency of the unit, the ability to tune the
resonant cavity and the size of the rodent head.
142
There is considerable variation among instruments
in the time required for loss of consciousness and
euthanasia. A 10 kw, 2,450 MHz instrument operated at
a power of 9 kw will increase the brain temperature of
18 to 28 g mice to 79 C in 330 ms, and the brain
temperature of 250 to 420 g rats to 94 C in 800
143
ms.
Advantages(1) Loss of consciousness is
achieved in less than 100 ms, and death in less than 1
second. (2) This is the most effective method to fix
brain tissue in vivo for subsequent assay of enzymatically
labile chemicals.
Disadvantages(1) Instruments are expensive. (2)
Only animals the size of mice and rats can be euthana-
tized with commercial instruments that are currently
available.
RecommendationsMicrowave irradiation is a
humane method for euthanatizing small laboratory
rodents if instruments that induce rapid loss of con-
sciousness are used. Only instruments that are
designed for this use and have appropriate power and
microwave distribution can be used. Microwave ovens
designed for domestic and institutional kitchens are
absolutely unacceptable for euthanasia.
THORACIC (CARDIOPULMONARY, CARDIAC)
COMPRESSION
Thoracic (cardiopulmonary, cardiac) compression
is used to euthanatize small- to medium-sized free-
ranging birds when alternate techniques described in
these guidelines are not practical.
144
Advantages(1) This technique is rapid. (2) It is
apparently painless. (3) It maximizes carcass use for
analytical/contaminant studies.
Disadvantages(1) It may be considered aestheti-
cally unpleasant by onlookers. (2) The degree of distress
is unknown.
RecommendationsThoracic (cardiopulmonary,
cardiac) compression is a physical technique for avian
euthanasia that has applicability in the field when
other methods cannot be used. It is accomplished by
bringing the thumb and forefinger of one hand under the
birds wing from the posterior and placing them against
the ribs.
144
The forefinger of the other hand is placed
against the ventral edge of the sternum, just below the
furculum. All fingers are brought together forcefully and
held under pressure to stop the heart and lungs. Loss
of consciousness and death develop quickly. Proper
training is needed in the use of this t echni que t o
avoi d t r auma t o t he bi r d. Cardiopulmonary
compression is not appropriate for laboratory settings,
for large or diving birds,
144
or for other species.
KILL TRAPS
Mechanical kill traps are used for the collection and
killing of small, free-ranging mammals for commercial
purposes (fur, skin, or meat), scientific purposes, to
stop property damage, and to protect human safety.
Their use remains controversial, and the panel
recognized that kill traps do not always render a rapid
or stress-free death consistent with criteria for
euthanasia found elsewhere in this document. For this
reason, use of live traps followed by other methods of
euthanasia is preferred. There are a few situations when
that is not possible or when it may actually be more
stressful to the animals or dangerous to humans to use
live traps. Although newer technologies are improving
kill trap performance in achieving loss of consciousness
quickly, individual testing is recommended to be
sure the trap is working properly.
145
If kill traps must
be used, the most humane available must be
chosen,
146-148
as evaluated by use of International
Organization for Standardization (ISO) testing
procedures,
149
or by the methods of Gilbert,
150
Proulx et
al,
151,152
or Hiltz and Roy.
153
To reach the required level of efficiency, traps may
need to be modified from manufacturers production
standards. In addition, as specified in scientific studies,
trap placement (ground versus tree sets), bait type, set
location, selectivity apparatus, body placement modi-
fying devices (eg, sidewings, cones), trigger sensitivity,
and trigger type, size, and conformation are essential
considerations that could affect a kill traps ability to
reach these standards.
Several kill traps, modifications, and set specifics
have been scientifically evaluated and found to meet the
afore referenced standards for various species.
151, 152,154-
167
AdvantageFree-ranging small mammals may be
killed with minimal distress associated with handling
and human contact.
Disadvantages(1) Traps may not afford death
within acceptable time periods. (2) Selectivity and effi-
ciency is dependent on the skill and proficiency of the
operator.
RecommendationsKill traps do not always meet
the panels criteria for euthanasia. At the same time, it is
recognized that they can be practical and effective for
scientific animal collection when used in a manner that
ensures selectivity, a swift kill, no damage to body parts
needed for field research, and minimal potential for
injury of nontarget species.
168,169
Traps need to be
checked at least once daily. In those instances when an
animal is wounded or captured but not dead, the animal
must be killed quickly and humanely. Kill traps should
be used only when other acceptable techniques are
impossible or have failed. Traps for nocturnal species
should not be activated during the day to avoid capture
of diurnal species.
168
Trap manufacturers should
strive to meet their responsibility of minimizing pain
and suffering in target species.
MACERATION
Maceration, via use of a specially designed
mechanical apparatus having rotating blades or
projections, causes immediate fragmentation and death
of day-old poultry and embryonated eggs. A review
217
of the use of commercially available macerators for
euthanasia of chicks, poults, and pipped eggs indicates
that death by maceration in day-old poultry occurs
immediately with minimal pain and distress. Maceration
is an alternative to the use of carbon dioxide for
euthanasia of day-old poultry. Maceration is believed to
be equivalent to cervical dislocation and cranial
compression as to time element, and is considered to be
an acceptable means of euthanasia for newly hatched
poultry by the Federation of Animal Science
Societies,
220
Agriculture Canada,
221
World Organization
for Animal Health (OIE),
222
and European Union.
223
Advantages(1) Death is almost instantaneous. (2)
The method is safe for workers. (3) Large numbers of
animals can be killed quickly.
Disadvantages(1) Special equipment is required.
(2) Macerated tissues may present biosecurity risks.
RecommendationsMaceration requires special
equipment that must be kept in excellent working order.
Chicks must be delivered to the macerator in a way and
at a rate that prevents a backlog of chicks at the point of
entry into the macerator and without causing injury,
suffocation, or avoidable distress to the chicks before
maceration.
ADJUNCTIVE METHODS
Stunning and pithing, when properly done, induce
loss of consciousness but do not ensure death.
Therefore, these methods must be used only in con-
junction with other procedures,
123
such as pharmaco-
logic agents, exsanguination, or decapitation to eutha-
natize the animal.
Exsanguination
Exsanguination can be used to ensure death sub-
sequent to stunning, or in otherwise unconscious ani-
mals. Because anxiety is associated with extreme hypo-
volemia, exsanguination must not be used as a sole
means of euthanasia.
170
Animals may be exsanguinated
to obtain blood products, but only when they are
sedated, stunned, or anesthetized.
171
Stunning
Animals may be stunned by a blow to the head, by
use of a nonpenetrating captive bolt, or by use of elec-
tric current. Stunning must be followed immediately
by a method that ensures death. With stunning, evalu-
ating loss of consciousness is difficult, but it is usually
associated with a loss of the menace or blink response,
pupillary dilatation, and a loss of coordinated move-
ments. Specific changes in the electroencephalogram
and a loss of visually evoked responses are also thought
to indicate loss of consciousness.
60, 172
Blow to the headStunning by a blow to the head
is used primarily in small laboratory animals with thin
craniums.
9, 173-175
A single sharp blow must be delivered to
the central skull bones with sufficient force to produce
immediate depression of the central nervous system.
When properly done, consciousness is lost rapidly.
Nonpenetrating captive boltA nonpenetrating
captive bolt may be used to induce loss of conscious-
ness in ruminants, horses, and swine. Signs of effective
stunning by captive bolt are immediate collapse and a
several second period of tetanic spasm, followed by
slow hind limb movements of increasing frequency.
60,176
Other aspects regarding use of the nonpenetrating
captive bolt are similar to the use of a penetrating
captive bolt, as previously described.
Electrical stunningAlternating electrical current
has been used for stunning species such as dogs, cattle,
sheep, goats, hogs, fish and chickens.
133,134,140,177,178
Experiments with dogs have identified a need to
direct the electrical current through the brain to induce
rapid loss of consciousness. In dogs, when electricity
passes only between fore- and hind limbs or neck and
feet, it causes the heart to fibrillate but does not
induce sudden loss of consciousness.
139
For electrical
stunning of any animal, an apparatus that applies
electrodes to opposite sides of the head, or in another
way directs electrical current immediately through the
brain, is necessary to induce rapid loss of
consciousness. Attachment of electrodes and animal
restraint can pose problems with this form of stunning.
Signs of effective electrical stunning are extension of
the limbs, opisthotonos, downward rotation of the
eyeballs, and tonic spasm changing to clonic spasm,
with eventual muscle flaccidity.
Electrical stunning should be followed promptly
by electrically induced cardiac fibrillation, exsanguina-
tion, or other appropriate methods to ensure death.
Refer to the section on electrocution for additional
information.
Pithing
In general, pithing is used as an adjunctive proce-
dure to ensure death in an animal that has been rendered
unconscious by other means. For some species, such
as frogs, with anatomic features that facilitate easy access
to the central nervous system, pithing may be used as a
sole means of euthanasia, but an anesthetic overdose is a
more suitable method.
SPECIAL CONSIDERATIONS
EQUINE EUTHANASIA
Pentobarbital or a pentobarbital combination is
the best choice for equine euthanasia. Because a large
volume of solution must be injected, use of an intra-
venous catheter placed in the jugular vein will facilitate
the procedure. To facilitate catheterization of an
excitable or fractious animal, a tranquilizer such as
acepromazine, or an alpha-2 adrenergic agonist can be
administered, but these drugs may prolong time to
loss of consciousness because of their effect on
circulation and may result in varying degrees of
muscular activity and agonal gasping. Opioid agonists
or agonist/antagonists in conjunction with alpha-2
adrenergic agonists may further facilitate restraint.
In certain emergency circumstances, such as
euthanasia of a horse with a serious injury at a race-
track, it may be difficult to restrain a dangerous horse
or other large animal for intravenous injection. The
animal might cause injury to itself or to bystanders
before a sedative could take effect. In such cases, the
animal can be given a neuromuscular blocking agent
such as succinylcholine, but the animal must be eutha-
natized with an appropriate technique as soon as the
animal can be controlled. Succinylcholine alone or
without sufficient anesthetic must not be used for
euthanasia.
Physical methods, including gunshot, are consid-
ered conditionally acceptable techniques for equine
euthanasia. The penetrating captive bolt is acceptable
with appropriate restraint.
ANIMALS INTENDED FOR HUMAN OR ANIMAL FOOD
In euthanasia of animals intended for human or ani-
mal food, chemical agents that result in tissue residues
cannot be used, unless they are approved by the US Food
and Drug Administration.
179
Carbon dioxide is the only
chemical currently used for euthanasia of food animals
(primarily swine) that does not result in tissue residues.
Physical techniques are commonly used for this reason.
Carcasses of animals euthanatized by barbituric acid
derivatives or other chemical agents may contain poten-
tially harmful residues. These carcasses should be dis-
posed of in a manner that will prevent them from being
consumed by human beings or animals.
Selection of a proper euthanasia technique for free-
ranging wildlife must take into account the possibility of
consumption of the carcass of the euthanatized animal
by nontarget predatory or scavenger species. Numerous
cases of toxicosis and death attributable to ingestion of
pharmaceutically contaminated carcasses in predators
and scavengers have been reported.
107
Proper carcass
disposal must be a part of any euthanasia procedure
under free-range conditions where there is potential for
consumption toxicity. When carcasses are to be left in
the field, a gunshot to the head, penetrating captive bolt,
or injectable agents that are nontoxic (potassium
chloride in combination with a nontoxic general
anesthetic) should be used so that the potential for
scavenger or predator toxicity is lessened.
EUTHANASIA OF NONCONVENTIONAL SPECIES:
ZOO, WILD, AQUATIC, AND ECTOTHERMIC ANIMALS
Compared with objective information on compan-
ion, farm, and laboratory animals, euthanasia of
species such as zoo, wild, aquatic, and ectothermic ani-
mals has been studied less, and guidelines are more
limited. Irrespective of the unique or unusual features of
some species, whenever it becomes necessary to
euthanatize an animal, death must be induced as pain-
lessly and quickly as possible.
When selecting a means of euthanasia for these
species, factors and criteria in addition to those
previously discussed must be considered. The means
selected will depend on the species, size, safety aspects,
location of the animals to be euthanatized, and
experience of personnel. Whether the animal to be
euthanatized is in the wild, in captivity, or free-roaming
are major considerations. Anatomic differences must be
considered. For example, amphibians, fish, reptiles, and
marine mammals differ anatomically from domestic
species. Veins may be difficult to locate. Some species
have a carapace or other defensive anatomic adaptations
(eg, quills, scales, spines). For physical methods, access
to the central nervous system may be difficult because
the brain may be small and difficult to locate by
inexperienced persons.
Zoo Animals
For captive zoo mammals and birds with related
domestic counterparts, many of the means described
previously are appropriate. However, to minimize
injury to persons or animals, additional precautions
such as handling and physical or chemical restraint are
important considerations.16
Wildlife
For wild and feral animals, many recommended
means of euthanasia for captive animals are not feasi-
ble. The panel recognized there are situations involving
free-ranging wildlife when euthanasia is not possible
from the animal or human safety standpoint, and
killing may be necessary. Conditions found in the field,
although more challenging than those that are con-
trolled, do not in any way reduce or minimize the eth-
ical obligation of the responsible individual to reduce
pain and distress to the greatest extent possible during
the taking of an animals life. Because euthanasia of
wildlife is often performed by lay personnel in remote
settings, guidelines are needed to assist veterinarians,
wildlife biologists, and wildlife health professionals in
developing humane protocols for euthanasia of
wildlife.
In the case of free-ranging wildlife, personnel may
not be trained in the proper use of remote anesthesia,
proper delivery equipment may not be available, per-
sonnel may be working alone in remote areas where
accidental exposure to potent anesthetic medications
used in wildlife capture would present a risk to human
safety, or approaching the animal within a practical
darting distance may not be possible. In these cases, the
only practical means of animal collection may be
gunshot and kill trapping.
13,180-184
Under these condi-
tions, specific methods chosen must be as age-,
species-, or taxonomic/class-specific as possible. The
firearm and ammunition should be appropriate for the
species and purpose. Personnel should be sufficiently
skilled to be accurate, and they should be experienced in
the proper and safe use of firearms, complying with
laws and regulations governing their possession and
use.
Behavioral responses of wildlife or captive nontra-
ditional species (zoo) in close human contact are very
different from those of domestic animals. These animals
are usually frightened and distressed. Thus, minimizing
the amount, degree, and/or cognition of human
contact during procedures that require handling is of
utmost importance. Handling these animals often
requires general anesthesia, which provides loss of
consciousness and which relieves distress, anxiety,
apprehension, and perception of pain. Even though the
animal is under general anesthesia, minimizing audito-
ry, visual, and tactile stimulation will help ensure the
most stress-free euthanasia possible. With use of gen-
eral anesthesia, there are more methods for euthanasia
available.
A 2-stage euthanasia process involving general
anesthesia, tranquilization, or use of analgesics, fol-
lowed by intravenous injectable pharmaceuticals,
although preferred, is often not practical. Injectable
anesthetics are not always legally or readily available to
those working in nuisance animal control, and the dis-
tress to the animal induced by live capture, transport
to a veterinary facility, and confinement in a veterinary
hospital prior to euthanasia must be considered in
choosing the most humane technique for the
situation at hand. Veterinarians providing support to
those working with injured or live-trapped, free-ranging
animals should take capture, transport, handling dis-
tress, and possible carcass consumption into consider-
at i on when asked t o assi st wi t h eut hanasi a.
Alternatives to 2-stage euthanasia using anesthesia
include a squeeze cage with intraperitoneal injection of
sodium pentobarbital, inhalant agents (CO2 chamber,
CO chamber), and gunshot. In cases where
preeuthanasia anesthetics are not available, intraperi-
toneal injections of sodium pentobarbital, although
slower in producing loss of consciousness, should be
considered preferable over intravenous injection, if
restraint will cause increased distress to the animal or
danger to the operator.
Wildlife species may be encountered under a
variety of situations. Euthanasia of the same species
under different conditions may require different tech-
niques. Even in a controlled setting, an extremely
fractious large animal may threaten the safety of the
practitioner, bystanders, and itself. When safety is in
question and the fractious large animal, whether wild,
feral, or domestic, is in close confinement, neuro-
muscular blocking agents may be used immediately
prior to the use of an acceptable form of euthanasia.
For this technique to be humane, the operator must
ensure they will gain control over the animal and per-
for m eut hanasi a befor e di st r ess devel ops.
Succinylcholine is not acceptable as a method of
restraint for use in free-ranging wildlife because animals
may not be retrieved rapidly enough to prevent
neuromuscular blocking agent-induced respiratory
distress or arrest.
185
Diseased, I njured, or Live-Captured Wildlife
or Feral Species
Euthanasia of diseased, injured, or live-trapped
wildlife should be performed by qualified professionals.
Certain cases of wildlife injury (eg, acute, severe trauma
from automobiles) may require immediate action,
and pain and suffering in the animal may be best
relieved most rapidly by physical methods including
gunshot or penetrating captive bolt followed by
exsanguination.
Birds
Many techniques discussed previously in these
guidelines are suitable for euthanasia of captive birds
accustomed to human contact. Free-ranging birds may
be collected by a number of methods, including nets
and live traps, with subsequent euthanasia. For collec-
tion by firearm, shotguns are recommended. The bird
should be killed outright by use of ammunition loads
appropriate for the species to be collected. Wounded
birds should be killed quickly by appropriate techniques
previously described. Large birds should be anesthetized
prior to euthanasia, using general anesthetics.
Amphibians, Fish, and Reptiles
Euthanasia of ectothermic animals must take into
account differences in their metabolism, respiration, and
tolerance to cerebral hypoxia. In addition, it is often
more difficult to ascertain when an animal is dead.
Some unique aspects of euthanasia of amphibians,
fishes, and reptiles have been described.
13,51,186,187
Injectable agentsSodium pentobarbital (60 to
100 mg/kg of body weight) can be administered intra-
venously, intraabdominally, or intrapleuroperitoneally
in most ectothermic animals, depending on anatomic
features. Subcutaneous lymph spaces may also be
used in frogs and toads. Time to effect may be variable,
with death occurring in up to 30 minutes.
1,187,188
Barbiturates other than pentobarbital can cause pain on
injection.
189
Clove oilBecause adequate and appropriate clin-
ical trials have not been performed on fish to evaluate
its effects, use of clove oil is not acceptable.
External or topical agentsTricaine methane sul-
fonate (TMS, MS-222) may be administered by various
routes to euthanatize. For fish and amphibians, this
chemical may be placed in water.
190-193
Large fish may
be removed from the water, a gill cover lifted, and a con-
centrated solution from a syringe flushed over the gills.
MS 222 is acidic and in concentrations 500 mg/L
should be buffered with sodium bicarbonate to satura-
tion resulting in a solution pH of 7.0 to 7.5.105 MS 222
may also be injected into lymph spaces and pleu-
roperitoneal cavities.
194
These are effective but expen-
sive means of euthanasia.
Benzocaine hydrochloride, a compound similar to
TMS, may be used as a bath or in a recirculation system
for euthanasia of fish
184
or amphibians.
13
Benzocaine is
not water soluble and therefore is prepared as a stock
solution (100 g/L), using acetone or ethanol, which may
be irritating to fish tissues. In contrast, benzocaine
hydrochloride is water soluble and can be used direct-
ly for anesthesia or euthanasia.
105
A
concentration 250 mg/L can be used for euthanasia.
Fish should be left in the solution for at least 10 minutes
following cessation of opercular movement.
104
The anesthetic agent 2-phenoxyethanol is used at
concentrations of 0.5 to 0.6 ml/L or 0.3 to 0.4 mg/L for
euthanasia of fish. Death is caused by respiratory col-
lapse. As with other agents, fish should be left in solu-
tion for 10 minutes following cessation of opercular
movement.
195,196
Inhalant agentsMany reptiles and amphibians,
including chelonians, are capable of holding their breath
and converting to anaerobic metabolism, and can
survive long periods of anoxia (up to 27 hours for some
species).
197-202
Because of this ability to tolerate anoxia,
induction of anesthesia and time to loss of con-
sciousness may be greatly prolonged when inhalants
are used. Death in these species may not occur even
after prolonged inhalant exposure.
203
Lizards, snakes,
and fish do not hold their breath to the same extent
and can be euthanatized by use of inhalant agents.
Carbon dioxideAmphibians,
1
reptiles,
1
and
fish
203-205
may be euthanatized with CO
2
. Loss of con-
sciousness develops rapidly, but exposure times
required for euthanasia are prolonged. This technique is
more effective in active species and those with less
tendency to hold their breath.
Physical methodsLine drawings of the head of
various amphibians and reptiles, with recommended
locations for captive bolt or firearm penetration, are
available.
13
Crocodilians and other large reptiles can
also be shot through the brain.
51
Decapitation with heavy shears or a guillotine is
effective for some species that have appropriate
anatomic features. It has been assumed that stopping
blood supply to the brain by decapitation causes rapid
loss of consciousness. Because the central nervous sys-
tem of reptiles, fish, and amphibians is tolerant to
hypoxic and hypotensive conditions,
13
decapitation must
be followed by pithing.
188
Two-stage euthanasia proceduresPropofol and
ultrashort-acting barbiturates may be used for these
species to produce rapid general anesthesia prior to final
administration of euthanasia.
In zoos and clinical settings, neuromuscular
blocking agents are considered acceptable for restraint
of reptiles if given immediately prior to administration
of a euthanatizing agent.
Most amphibians, fishes, and reptiles can be
euthanatized by cranial concussion (stunning) followed
by decapitation, pithing, or some other physical method.
Severing the spinal cord behind the head by
pithing is an effective method of killing some
ectotherms. Death may not be immediate unless both
the brain and spinal cord are pithed. For these animals,
pithing of the spinal cord should be followed by decap-
itation and pithing of the brain or by another appropriate
procedure. Pithing requires dexterity and skill and
should only be done by trained personnel. The pithing
site in frogs is the foramen magnum, and it is identified
by a slight midline skin depression posterior to the eyes
with the neck flexed.
187
CoolingIt has been suggested that, when using
physical methods of euthanasia in ectothermic species,
cooling to 4 C will decrease metabolism and facilitate
handling, but there is no evidence that whole body
cooling reduces pain or is clinically efficacious.
206
Local
cooling in frogs does reduce nociception, and this may
be partly opioid mediated.
207
Immobilization of reptiles
by cooling is considered inappropriate and inhumane
even if combined with other physical or chemical
methods of euthanasia. Snakes and turtles, immobi-
lized by cooling, have been killed by subsequent freez-
ing. This method is not recommended.
13
Formation of
ice crystals on the skin and in tissues of an animal may
cause pain or distress. Quick freezing of deeply anes-
thetized animals is acceptable.
208
Marine Mammals
Barbiturates or potent opioids (eg, etorphine
hydrochloride [M 99] and carfentanil) are the agents of
choice for euthanasia of marine mammals,
209
although it is recognized their use is not always
possible and can be potentially dangerous to
personnel. An accurately placed gunshot may also be a
conditionally acceptable method of euthanasia for
some species and sizes of stranded marine
mammals.
51,209,210
For stranded whales or other large cetaceans or
pinnipeds, succinylcholine chloride in conjunction
with potassium chloride, administered intravenously
or intraperitoneally, has been used.
211
This method,
which is not an acceptable method of euthanasia as
defined in these guidelines, leads to complete paralysis
of the respiratory musculature and eventual death
attributable to hypoxemia.
209
This method may be
more humane than allowing the stranded animal to
suffocate over a period of hours or days if no other
options are available.
EUTHANASIA OF ANIMALS RAISED FOR FUR
PRODUCTION
Animals raised for fur are usually euthanatized
individually at the location where they are raised.
Although any handling of these species constitutes a
stress, it is possible to minimize this by euthanatizing
animals in or near their cages. For the procedures
described below, please refer to previous sections for
more detailed discussion.
Carbon monoxideFor smaller species, CO
appears to be an adequate method for euthanasia.
Compressed CO is delivered from a tank into an
enclosed cage that can be moved adjacent to holding
cages. Using the apparatus outside reduces the risk to
humans; however, people using this method should
still be made aware of the dangers of CO. Animals
introduced into a chamber containing 4% CO lost con-
sciousness in 64 14 seconds and were dead within 215
45 seconds.
80
In a study involving electroen-
cephalography of mink being euthanatized with 3.5%
CO, the mink were comatose in 21 7 seconds.212
Only 1 animal should be introduced into the chamber
at a time, and death should be confirmed in each case.
Carbon dioxideAdministration of CO2 is also a
good euthanasia method for smaller species and is less
dangerous than CO for personnel operating the sys-
tem. When exposed to 100% CO2, mink lost con-
sciousness in 19 4 seconds and were dead within 153
10 seconds. When 70% CO2 was used with 30% O2,
mink were unconscious in 28 seconds, but they were
not dead after a 15-minute exposure.
80
Therefore, if
animals are first stunned by 70% CO2, they should be
killed by exposure to 100% CO2 or by some other
means. As with carbon monoxide, only one animal
should be introduced into the chamber at a time.
BarbituratesBarbiturate overdose is an accept-
able procedure for euthanasia of many species of ani-
mals raised for fur. The drug is injected intraperi-
toneally and the animal slowly loses consciousness. It
is important that the death of each animal be con-
firmed following barbiturate injection. Barbiturates will
contaminate the carcass; therefore the skinned carcass
cannot be used for animal food.
ElectrocutionElectrocution has been used for
killing foxes and mink.
135
The electric current must
pass through the brain to induce loss of consciousness
before electricity is passed through the rest of the body.
Electrical stunning should be followed by euthanasia,
using some other technique. Cervical dislocation has
been used in mink and other small animals and should
be done within 20 seconds of electrical stunning.213
Use of a nose-to-tail or nose-to-foot method
135
alone
may kill the animal by inducing cardiac fibrillation, but
the animal may be conscious for a period of time before
death. Therefore, these techniques are unacceptable.
PRENATAL AND NEONATAL EUTHANASIA
When ovarian hysterectomies are performed,
euthanasia of feti should be accomplished as soon as
possible after removal from the dam. Neonatal animals
are relatively resistant to hypoxia.
44,214
MASS EUTHANASIA
Under unusual conditions, such as disease eradi-
cation and natural disasters, euthanasia options may be
limited. In these situations, the most appropriate tech-
nique that minimizes human and animal health con-
cerns must be used. These options include, but are not
limited to, CO2 and physical methods such as gunshot,
penetrating captive bolt, and cervical dislocation.
POSTFACE
These guidelines summarize contemporary scientific
knowledge on euthanasia in animals and call attention to
the lack of scientific reports assessing pain, discomfort,
and distress in animals being euthanatized. Many
reports on various methods of euthanasia are either
anecdotal, testimonial narratives, or unsubstantiated
opinions and are, therefore, not cited in these guidelines.
The panel strongly endorsed the need for well-designed
experiments to more fully determine the extent to
which each procedure meets the criteria used for
judging methods of euthanasia.
Each means of euthanasia has advantages and disad-
vantages. It is unlikely that, for each situation, any
means will meet all desirable criteria. It is also
impractical for these guidelines to address every
potential circumstance in which animals are to be
euthanatized. Therefore, the use of professional
judgment is imperative.
Failure to list or recommend a means of euthanasia
in these guidelines does not categorically condemn its
use. There may occasionally be special circumstances
or situations in which other means may be acceptable.
For research animals, these exceptions should be care-
fully considered by the attending veterinarian and the
Institutional Animal Care and Use Committee. In other
settings, professional judgment should be used.
The panel discouraged the use of unapproved
products for euthanasia, unless the product has a
clearly understood mechanism of action and
pharmacokinetics, and studies published in the literature
that scientifically verify and justify its use. Those
responsible for euthanasia decisions have a critically
important responsibility to carefully assess any new
technique, method, or device, using the panels criteria.
In the absence of definitive proof or reasonable
expectation, the best interest of the animal should guide
the decision process.
References cited in these guidelines do not represent
a comprehensive bibliography on all methods of
euthanasia. Persons interested in additional informa-
tion on a particular aspect of animal euthanasia are
encouraged to contact the Animal Welfare Information
Center, National Agricultural Library, 10301 Baltimore
Blvd, Beltsville, MD 20705.
The AVMA is fully committed to the concept that,
whenever it becomes necessary to kill any animal for
any reason whatsoever, death should be induced as
painlessly and quickly as possible. It was the Panels
charge to develop workable guidelines for veterinarians
needing to address this problem, and it is the AVMAs
sincere desire that these guidelines be used consci-
entiously by all animal care providers. We consider
these guidelines to be a work in progress with new
editions warranted as results of more scientific studies
are published.
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_______________________________________________________________________________________________________________________________________________
Appendix 1Agents and methods of euthanasia by species
Agents and methods of euthanasia by species (refer to Appendix 4 for unacceptable agents and methods.)
Species Acceptable*
(refer to Appendix 2 and text for details)
Conditionally acceptable
Amphibians Barbiturates, inhalant anesthetics (in appropriate species), CO
2
, CO, tricaine
methane sulfonate (TMS, MS 222), benzocaine hydrochloride, double pithing
Penetrating captive bolt, gunshot, stunning and
decapitation, decapitation and pithing
Birds Barbiturates, inhalant anesthetics, CO
2
, CO, gunshot (free-ranging only) N
2
, Ar, cervical dislocation, decapitation, thoracic
compression (small, free-ranging only), maceration
(chicks, poults, and pipped eggs only)
Cats Barbiturates, inhalant anesthetics, CO
2
, CO, potassium chloride in conjunction
with general anesthesia
N
2
, Ar
Dogs Barbiturates, inhalant anesthetics, CO
2
N
2
, Ar, penetrating captive bolt, electrocution
Fish Barbiturates, inhalant anesthetics, CO
2
, tricaine methane sulfonate (TMS, MS
222), benzocaine hydrochloride, 2-phenoxyethanol
Decapitation and pithing, stunning and
decapitation/pithing
Horses Barbiturates, potassium chloride in conjunction with general anesthesia,
penetrating captive bolt
Chloral hydrate (IV, after sedation), gunshot,
electrocution
Marine mammals Barbiturates, etorphine hydrochloride Gunshot (cetaceans < 4 meters long)
Mink, fox, and other mammals
produced for fur
Barbiturates, inhalant anesthetics, CO
2
(mink require high concentrations for
euthanasia without supplemental agents), CO, potassium chloride in
conjunction with general anesthesia
N
2
, Ar, electrocution followed by cervical dislocation
Nonhuman primates Barbiturates Inhalant anesthetics, CO
2
, CO, N
2
, Ar
Rabbits Barbiturates, inhalant anesthetics, CO
2
N
2
, Ar, cervical dislocation (< 1 kg), decapitation,
Reptiles Barbiturates, inhalant anesthetics (in appropriate species), CO
2
(in appropriate
species)
Penetrating captive bolt, gunshot, decapitation and
pithing, stunning and decapitation
Continued on next page
28
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________
Species Acceptable*
Conditionally acceptable
Rodents and other small mammals Barbiturates, inhalant anesthetics, CO
2
with general anesthesia, microwave irradiation
Methoxyflurane, ether, N
2
, Ar, cervical dislocation (rats <
200 g), decapitation
Ruminants Barbiturates, potassium chloride in conjunction with general anesthesia,
Chloral hydrate (IV, after sedation), gunshot,
electrocution
Swine Barbiturates, CO
2
, potassium chloride in conjunction with general anesthesia,
Inhalant anesthetics, CO, chloral hydrate (IV, after
sedation), gunshot, electrocution, blow to the head (< 3
weeks of age)
Zoo animals Barbiturates, inhalant anesthetics, CO
2
N
2
, Ar, penetrating captive bolt, gunshot
Free-ranging wildlife Barbiturates IV or IP, inhalant anesthetics, potassium chloride in conjunction
CO
2
, CO, N
2
, Ar, penetrating captive bolt, gunshot, kill
traps (scientifically tested)
* Acceptable methods are those that consistently produce a humane death when used as the sole means of euthanasia.
Conditionally acceptable methods are those that by the nature of the technique or because of greater potential for operator error or safety hazards might not consistently produce
humane death or are methods not well documented in the scientific literature.
29
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________
Appendix 2Acceptable agents and methods of euthanasia
Acceptable agents and methods of euthanasiacharacteristics and modes of action (refer to text for details)
Agent Classification Mode of action Rapidity Ease of
performance
Safety for
personnel
Species suitability Efficacy and
comments
Barbiturates Hypoxia
attributable to
depression of vital
centers
Direct depression
of cerebral cortex,
subcortical
structures, and vital
centers; direct
depression of heart
muscle
Rapid onset of
anesthesia
Animal must be
restrained;
personnel must be
skilled to perform
IV injection
Safe except human
abuse potential;
DEA-controlled
substance
Most species Highly effective
when appropriately
administered;
acceptable IP in
small animals and
IV
Benzocaine
hydrochloride
Hypoxia
attributable to
depression of vital
centers
Depression of CNS Very rapid,
depending on dose
Easily used Safe Fish, amphibians Effective but
expensive
Carbon dioxide
(bottled gas only)
Hypoxia
attributable to
depression of vital
centers
Direct depression
of cerebral cortex,
subcortical
centers; direct
depression of heart
muscle
Moderately rapid Used in closed
container
Minimal hazard Small laboratory
animals, birds, cats,
small dogs, rabbits,
mink (high
concentrations
required), zoo
animals,
amphibians, fish,
some reptiles,
swine
Effective, but time
required may be
prolonged in
immature and
neonatal animals
Carbon monoxide
(bottled gas only)
Hypoxia Combines with
hemoglobin,
preventing its
combination with
oxygen
Moderate onset
time, but insidious
so animal is
unaware of onset
Requires
appropriately
maintained
equipment
Extremely
hazardous, toxic,
and difficult to
detect
Most small species
including dogs,
cats, rodents, mink,
chinchillas, birds,
reptiles,
amphibians, zoo
animals, rabbits
Effective;
acceptable only
when equipment is
properly designed
and operated
30
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________
performance
Safety for
personnel
comments
Inhalant anesthetics Hypoxia
attributable to
depression of vital
centers
Direct depression
of cerebral cortex,
subcortical
centers
Moderately rapid
onset of anesthesia,
excitation may
develop during
induction
Easily performed
with closed
container; can be
administered to
large animals by
means of a mask
Must be properly
scavenged or
vented to minimize
exposure to
personnel
Some amphibians,
birds, cats, dogs,
furbearing animals,
rabbits, some
reptiles, rodents
and other small
mammals, zoo
animals, fish, free-
ranging wildlife
Highly effective
provided that
subject is
sufficiently
exposed; either is
conditionally
acceptable
Microwave
irradiation
Brain enzyme
inactivation
Direct inactivation
of brain enzymes
by rapid heating of
brain
Very rapid Requires training
and highly
specialized
equipment
Safe Mice, rats Highly effective for
special needs
Penetrating captive
bolt
Physical damage to
brain
Direct concussion
of brain tissue
Rapid Requires skill,
adequate restraint,
and proper
placement of
captive bolt
Safe Horses, ruminants,
swine
Instant loss of
consciousness, but
motor activity may
continue
2-Phenoxyethanol Hypoxia
attributable to
depression of vital
centers
depending on dose
Easily used Safe Fish Effective but
expensive
Potassium chloride
(intracardially or
intravenously in
conjunction with
general anesthesia
only)
Hypoxia Direct depression
of cerebral cortex,
subcortical
centers secondary
to cardiac arrest.
Rapid Requires training
and specialized
equipment for
remote injection
anesthesia, and
ability to give IV
injection of
potassium chloride
Anesthetics may be
hazardous with
accidental human
exposure
Most species Highly effective,
some clonic muscle
spasms may be
observed
Tricaine methane
sulfonate (TMS,
MS 222)
Hypoxia
attributable to
depression of vital
centers
depending on dose
Easily used Safe Fish, amphibians Effective but
expensive
31
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________
Appendix 3Conditionally acceptable agents and methods of euthanasia
Conditionally acceptable agents and methods of euthanasiacharacteristics and modes of action (refer to text for details)
performance
Safety for
personnel
comments
Blow to the head Physical damage to
brain
Direct concussion
of brain tissue
adequate restraint,
and appropriate
force
Safe Young pigs <3
weeks old
Must be properly
applied to be
humane and
effective
Carbon dioxide
(bottled gas only)
Hypoxia due to
depression of vital
centers
Direct depression
of cerebral cortex,
subcortical
structures and vital
centers; direct
depression of heart
muscle
Moderately rapid Used in closed
container
Minimal hazard Nonhuman
primates, free-
ranging wildlife
Effective, but time
required may be
prolonged in
immature and
neonatal animals
Carbon monoxide
(bottled gas only)
Hypoxia Combines with
hemoglobin,
preventing its
combination with
oxygen
Moderate onset
time, but insidious
so animal is
unaware of onset
Requires
appropriately
maintained
equipment
Extremely
hazardous, toxic,
and difficult to
detect
Nonhuman
primates, free-
ranging wildlife
Effective;
acceptable only
when equipment is
properly designed
and operated
Cervical dislocation Hypoxia due to
disruption of vital
centers
Direct depression
of brain
Moderately rapid Requires training
and skill
Safe Poultry, birds,
laboratory mice,
rats (< 200 g),
rabbits (< 1 kg)
Irreversible; violent
muscle contractions
can occur after
cervical dislocation
Chloral hydrate Hypoxia from
depression of
respiratory center
Direct depression
of brain
Rapid Personnel must be
skilled to perform
IV injection
Safe Horses, ruminants,
swine
Animals should be
sedated prior to
administration
32
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________
performance
Safety for
personnel
comments
Decapitation Hypoxia due to
disruption of vital
centers
Direct depression
of brain
Rapid Requires training
and skill
Guillotine poses
potential employee
injury hazard
Laboratory rodents;
small rabbits; birds;
some fish,
amphibians, and
reptiles (latter 3
with pithing)
Irreversible; violent
muscle contraction
can occur after
decapitation
Electrocution Hypoxia Direct depression
of brain and cardiac
fibrillation
Can be rapid Not easily
performed in all
instances
Hazardous to
personnel
Used primarily in
sheep, swine, foxes,
mink (with cervical
dislocation),
ruminants, animals
> 5 kg
Violent muscle
contractions occur
at same time as loss
of consciousness
Gunshot Hypoxia due to
disruption of vital
centers
Direct concussion
of brain tissue
Rapid Requires skill and
appropriate firearm
May be dangerous Large domestic and
zoo animals,
reptiles,
amphibians,
wildlife, cetaceans
(< 4 meters long)
Instant loss of
consciousness, but
motor activity may
continue
Inhalant anesthetics Hypoxia due to
disruption of vital
centers
Direct depression
of cerebral cortex,
subcortical
centers
Moderately rapid
onset of anesthesia;
excitation may
develop during
induction
Easily performed
with closed
container; can be
administered to
large animals by
means of a mask
Must be properly
scavenged or
vented to minimize
exposure to
personnel; ether has
explosive potential
and exposure to
ether may be
stressful
Nonhuman
primates, swine;
ether is
conditionally
acceptable for
rodents and small
mammals;
methoxyflurane is
conditionally
acceptable for
rodents and small
mammals
Highly effective
provided that
subject is
sufficiently
exposed
33
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________
performance
Safety for
personnel
comments
Nitrogen, argon Hypoxia Reduces partial
pressure of oxygen
available to blood
Rapid Used in closed
chamber with rapid
filling
Safe if used with
ventilation
Cats, small dogs,
birds, rodents,
rabbits, other small
species, mink, zoo
animals, nonhuman
primates, free-
ranging wildlife
Effective except in
young and
neonates; an
effective agent, but
other methods are
preferable
Penetrating captive
bolt
Physical damage to
brain
Direct concussion
of brain tissue
adequate restraint
and proper
placement of
captive bolt
Safe Dogs, rabbits, zoo
animals, reptiles,
amphibians, free-
ranging wildlife
Instant loss of
consciousness but
motor activity may
continue
Pithing Hypoxia due to
disruption of vital
centers, physical
damage to brain
Trauma of brain
and spinal cord
tissue
Rapid Easily performed
but requires skill
Safe Some ectotherms Effective, but death
not immediate
unless brain and
spinal cord are
pithed
Thoracic
compression
Hypoxia and
cardiac arrest
Physical
interference with
cardiac and
respiratory function
Moderately rapid Requires training Safe Small- to medium-
sized free-ranging
birds
Apparently
effective
Maceration Physical damage to
brain
Direct concussion
of brain tissue
Rapid Easily performed
with properly
designed,
commercially
available
equipment
Safe Newly hatched
chicks and poults,
and pipped eggs
only
Effective when
equipment is
properly designed
and operated
34
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________
Appendix 4Some unacceptable agents and methods of euthanasia
Some unacceptable agents and methods of euthanasia (refer to text for details)
Agent or method Comments
Air embolism Air embolism may be accompanied by convulsions, opisthotonos, and vocalization. If used, it should be done only
in anesthetized animals.
Blow to the head Unacceptable for most species.
Burning Chemical or thermal burning of an animal is not an acceptable method of euthanasia.
Chloral hydrate Unacceptable in dogs, cats, and small mammals.
Chloroform Chloroform is a known hepatotoxin and suspected carcinogen and, therefore, is extremely hazardous to personnel.
Cyanide Cyanide poses an extreme danger to personnel and the manner of death is aesthetically objectionable.
Decompression Decompression is unacceptable for euthanasia because of numerous disadvantages.
(1) Many chambers are designed to produce decompression at a rate 15 to 60 times faster than that recommended
as optimum for animals, resulting in pain and distress attributable to expanding gases trapped in body cavities.
(2) Immature animals are tolerant of hypoxia, and longer periods of decompression are required before respiration
ceases.
(3) Accidental recompression, with recovery of injured animals, can occur.
(4) Bleeding, vomiting, convulsions, urination, and defecation, which are aesthetically unpleasant, may develop in
unconscious animals.
Drowning Drowning is not a means of euthanasia and is inhumane.
Exsanguination Because of the anxiety associated with extreme hypovolemia, exsanguination should be done only in sedated,
stunned, or anesthetized animals.
Formalin Direct immersion of an animal into formalin, as a means of euthanasia, is inhumane.
Household products and solvents Acetone, quaternary compounds (including CCl
4
), laxatives, clove oil, dimethylketone, quaternary ammonium
products*, antacids, and other commercial and household products or solvents are not acceptable agents for
euthanasia.
35
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________
Agent or method Comments
Hypothermia Hypothermia is not an appropriate method of euthanasia.
Neuromuscular blocking agents (nicotine, magnesium
sulfate, potassiumchloride, all curariform agents)
When used alone, these drugs all cause respiratory arrest before loss of consciousness, so the animal may perceive
pain and distress after it is immobilized.
Rapid freezing Rapid freezing as a sole means of euthanasia is not considered to be humane. If used, animals should be
anesthetized prior to freezing.
Smothering Smothering of chicks or poults in bags or containers is not acceptable.
Strychnine Strychnine causes violent convulsions and painful muscle contractions.
Stunning Stunning may render an animal unconscious, but it is not a method of euthanasia (except for neonatal animals with
thin craniums). If used, it must be immediately followed by a method that ensures death.
Tricaine methane sulfonate (TMS, MS 222) Should not be used for euthanasia of animals intended as food.
*Roccal D Plus, Pharmacia & Upjohn, Kalamazoo, Michigan
36
Recomendaciones para la Eutanasia de los Animales de
Experimentacin: Parte 1

Grupo de Trabajo: Mrs Bryony Close (Presidencia), Dr. Keith
Banister, Dr. Vera Baumans, Dr. Eva-Maria Bernoth, Dr. Niall
Bromage, Dr. John Bunyan, Profesor Dr. Wolff Erhardt, Profesor Paul
Flecknell, Dr. Neville Gregory, Profesor Dr. Hansjoachim Hackbarth,
Profesor David Morton y Mr Clifford Warwick
Envo de correspondencia a: Mrs B Close, Battleborough Croft, Battleborough Lane,
Brent Knoll, Highbridge, Somerset TA9 4DS, UK

Este documento fue elaborado para la DGXI de la Comisin Europea, para ser utilizado con la Directiva
86/609/EEC del 24 de Noviembre de 1986, relativa a la aproximacin de las disposiciones legales,
reglamentarias y administrativas de los Estados miembros respecto a la proteccin de los animales
utilizados para experimentacin y otros fines cientficos (N L358, ISSN 0378-6978). Se refiere
especialmente al Artculo 2(1) publicado por la Comisin Europea en Octubre de 1995, que define el
mtodo de sacrificio humanitario como el sacrificio de un animal con el mnimo sufrimiento fsico y
mental , dependiendo de las especies .

Este informe esta publicado en dos partes.
Esta primera parte comprende las
Secciones 1 y 2 del informe, junto con una
revisin bibliogrfica. La Seccin 3 del
informe fue publicada en el ejemplar de
Enero de 1997 de Laboratory Animals,
junto con la lista de todas las referencias
citadas en ambas partes y los detalles de
los materiales para entrenamiento. Se
podr disponer de reimpresiones del
informe, combinando ambas partes,
cursando la solicitud a Mrs S. E.
Wolfensohn, Supervisor of Veterinary
Services, University of Oxford, Veterinary
Services, c/o University Laboratory of
Physiology, Parks Road, Oxford OX1 3PT,
UK. (Tel:+44(0)1865-272545,
Fax:+44(0)1865-272118,
Email: sarah.wolfensohn@vet.ox.ac.uk).

Contenido de la Parte 1

Agradecimientos 2
Prefacio 2
Introduccin 3

1.1 Objetivos de la eutanasia 3
1.2 Definicin de trminos 3
1.3 Signos de dolor y angustia 4
1.4 Reconocimiento y confirmacin
de la muerte 4
1.5 Personal y entrenamiento 5
1.6 Manejo y inmovilizacin 5
1.7 Equipamiento 5
1.8 Eliminacin de cadveres y
residuos 6

2 Comentarios generales acerca de
los mtodos de eutanasia 6

2.1 Mtodos aceptables de eutanasia 6
2.2 Mtodos aceptables con
animales inconscientes 13
2.3 Mtodos de eutanasia que
no son aceptables 14

Lecturas adicionales 14
Agradecimientos

Quisiramos agradecer a la Comisin Europea
DGXI por su provisin de fondos para la
realizacin de este informe y tambin a
Laboratory Animals Ltd por publicarlo y
mantener disponibles reimpresiones con el fin
de conseguir una amplia distribucin.
Quisiramos agradecer a las siguientes
personas y organizaciones su colaboracin
aportando su valiosa ayuda y comentarios al
borrador: Dr. J Anderson (Inspeccin de
Animales [Procedimientos Cientficos]
Ministerio del Interior, UK), Dr. N Baudrihaye
(Federacin Europea de Asociaciones de
Industrias Farmacuticas), Profesor J Bourne
(Instituto para la Salud Animal, UK),
Dr. D Forbes (Asociacin para las Ciencias del
Animal de Laboratorio, LASA, UK), Profesor
K Grtner (Escuela Superior de Medicina de
Hannover, Alemania), Mr J A Gregory
(Instituto de Tecnologa Animal, UK), Profesor
O Hnninen (Secretario General, ICLAS),
Mrs R Harrison (UK), Dr. F R Homberger
(Universidad de Zurich, Suiza), Mr T D Hornett
(Glaxo Investigacin y Desarrollo, UK), Dr. K
Iwarsson (Instituto Karolinska, Suecia), Dr. T
Jeneskog (Junta Nacional para los Animales de
Laboratorio (CNF), Suecia), Dr. M Jennings
(Real Sociedad para la Prevencin de la
Crueldad con los Animales, UK), Dr. G
Mahouy (Instituto de Hematologa, Universidad
de Pars, Francia), Profesor R Murison
(Universidad de Bergen, Noruega), Mr P
Nowlan (Universidad de Dubln, Irlanda),
Profesor C Rehbinder (Junta Nacional para los
Animales de Laboratorio (CNF), Suecia), Mr A
Sainsbury (Instituto de Zoologa, Londres),
Profesor P Schambye (Junta de la Inspeccin de
Experimentos con Animales, Dinamarca) , Dr.
W Scharmann (Instituto Nacional de Salud de
Alemania), Profesor U Schatzmann
(Universidad de Berna, Suiza), Dr. Straughan
(UK), Dr. P Terpstra (CRC Centro de
Investigacin por Contrato, Blgica), Profesor J
E van Dijk (Universidad de Utrecht, Holanda),
Mrs D Wilkins (Eurogrup para el Bienestar
Animal), Dr. J Wong (Consejo Canadiense para
Cuidados Animales CCAC).

Prefacio

Se ha realizado este informe con el fin de
ayudar al personal relacionado con los animales
utilizados en experimentos y para otros fines
cientficos, a valorar qu mtodo de eutanasia es
el ms humanitario y apropiado para las
especies animales que se estn utilizando. Con
cada mtodo se da una breve descripcin, con
los argumentos para su aceptacin o rechazo.
No se dan detalles de como llevar a cabo los
diferentes mtodos, stos pueden encontrarse en
las referencias citadas y en la lista de lecturas
recomendadas.
Los mtodos clasificados como "aceptables",
son aquellos que se consideran humanitarios
para ser utilizados con animales conscientes, o
ligeramente sedados. Otros mtodos solo
pueden ser aceptables si se utilizan con
animales fuertemente sedados o inconscientes.
En principio, todos los mtodos pueden
emplearse con animales inconscientes, a menos
que sean inaceptablemente peligrosos para el
Personal o que exista el riesgo de que el animal
recupere la consciencia antes de que muera. Los
mtodos incluidos en el grupo de aceptables
para animales inconscientes son los que se
utilizan en la prctica con mayor frecuencia. La
ltima categora de mtodos no aceptables, no
se deben utilizar por las razones que se indican
en cada caso.
Hay tres secciones principales en este informe.
La Seccin 1, trata de las caractersticas
generales de los requerimientos legales de la
Directiva del Consejo de la CEE de 1986, de los
requerimientos generales para eutanasia y de las
definiciones de trminos y otros factores que
deban considerarse cuando se sacrifican
animales de experimentacin. La Seccin 2
contiene informacin sobre los mtodos de
eutanasia utilizados en vertebrados y se divide,
amplindose, en mtodos aceptables fsicos y
qumicos, mtodos aceptados para animales
inconscientes y aquellos mtodos que no se
consideran aceptables. La Seccin 3, se cubre
con informacin general y especifica de cada
grupo de especies, desde peces hasta primates,
incluyendo recomendaciones para las formas
embrionarias y larvarias. Se da una lista de los
mtodos de eutanasia con una breve discusin.
Al final de cada seccin de especies, hay una
tabla que resume las recomendaciones para cada
especie.
Hay adems, amplias listas con las referencias
citadas y la literatura recomendada para lecturas
adicionales (dividida en grupos generales y por
especies ), junto con informacin sobre el
material de entrenamiento audiovisual, que
puede ser utilizado en los programas de
entrenamiento, para fomentar las practicas de
eutanasia humanitaria.

Se recomienda que todo el Personal se lea la
Seccin 1. Si se necesita informacin sobre un
mtodo en particular, sta se obtendr de la
Seccin 2 y si se necesita informacin sobre una
especie en particular, sta se puede encontrar en
la Seccin 3.

1 Introduccin

Los animales se sacrifican en los laboratorios o
establecimientos de cra por varios motivos:
al final de un experimento o cuando pudieran
proseguir con efectos adversos;
para obtener sangre y otros tejidos con un fin
cientfico;
cuando los niveles de dolor, angustia y
sufrimiento es probable que sobrepasen el nivel
previsto;
cuando el campo de estudio sea la salud o el
bienestar de los animales;
cuando ya no sean aptos para la cra;
animales no utilizados, o aquellos con sus
caractersticas no adecuadas, por ejemplo el tipo
de animal o el sexo y que por ello no son
necesarios.

La Directiva del Consejo del 24 de Noviembre
de 1986 (Comisin de las Comunidades
Europeas de 1986 ) relativa a la aproximacin
de las disposiciones legales, reglamentarias y
administrativas de los Estados miembros
respecto a la proteccin de los animales
utilizados para experimentacin y otros fines
cientficos (86/609/CEE), excluye el sacrificio
de un animal a partir de la definicin legal de
experimento, (Artculo 2(d)) si ste es llevado a
cabo utilizando el mtodo menos doloroso,
aceptado en la prctica moderna y de acuerdo
con el fin cientfico de recoger sangre y otros
tejidos de los animales sacrificados, dejando por
ello estos procedimientos fuera de la proteccin
de la Directiva. Este documento esta diseado
para ayudar, a todos aquellos relacionados con
animales de experimentacin, a decidir que
mtodo es el mas humanitario y apropiado (en
el contexto del experimento ) para sacrificar a
los animales con los que estn trabajando. Dado
que esta Directiva protege a los vertebrados,
este documento slo tratar de la eutanasia de
los mismos. El Artculo 2 (1) define el mtodo
humanitario de sacrificio, como el sacrificio
de un animal con el mnimo sufrimiento fsico y
mental, dependiendo de las especies.
Aunque este documento incluye
recomendaciones para la eutanasia de los
animales de experimentacin, se recomienda
encarecidamente que se tomen en consideracin
los controles y lneas directrices, editados en
otras directivas y regulaciones de la CE para la
eutanasia de los animales (por ejemplo, la
Directiva del Consejo 93/119/CE (Comisin de
las Comunidades Europeas de 1993)).

1.1 Objetivos de la eutanasia

Los criterios primordiales para la eutanasia en
trminos de bienestar animal, son que el mtodo
sea indoloro, consiga una rpida inconsciencia y
muerte, requiera una mnima inmovilizacin ,
evite la excitacin, sea apropiado para la edad,
especie y salud del animal, debe de minimizar el
miedo y el estrs en el animal, ser fiable,
reproducible, irreversible, sencillo de
administrar (en dosis pequeas si es posible) y
seguro para el operador. Y en la medida de lo
posible, debe ser estticamente aceptable para el
operador.

1.2 Definicin de trminos

La palabra Eutanasia significa muerte buena y
debera considerarse como un acto de sacrificio
humanitario con el mnimo dolor, temor y
angustia.
La Consciencia es el estado de conocimiento de
un animal normal, en el cul puede recibir
estmulos de su ambiente externo y puede
responder con la conducta normal de un
individuo despierto. La Inconsciencia se
utilizar para indicar insensibilidad a los
estmulos externos, como se esperara en el
coma y durante la anestesia general. Las dos
maneras principales de medir la insensibilidad
son fijarse en las respuestas fsicas y en las del
sistema nervioso central (SNC)a nivel cortical.
El Dolor se puede definir como una
experiencia sensorial aversiva que produce
acciones motoras protectoras, dando como
resultado el aprendizaje para evitarlo y que
puede modificar rasgos de conducta especficos
de especie, incluyendo la conducta social
(Zimmermann 1986). La utilizacin de la
palabra dolor implica un conocimiento
consciente de los estmulos y no una respuesta
refleja inconsciente.
Un Embrin se puede definir como un animal
que se esta desarrollando a partir de un vulo
fertilizado sexualmente, o partenogenticamente
activado y que est contenido dentro de las
membranas de un huevo o dentro del cuerpo
materno. El estado embrionario culmina con la
eclosin o el nacimiento de la cra del animal
(Allaby 1991).

Un Feto es el embrin de un mamfero, desde
el estado de desarrollo en que se pueden
reconocer los rasgos principales del adulto,
hasta su nacimiento (Allaby 1991).
Se considera Larva la fase durante la cul es
mvil y capaz de alimentarse por si misma, lo
que ocurre tras la eclosin del huevo y previo a
las reorganizaciones que suceden al llegar a
hacerse adulto (Allaby 1991).

1.3 Signos de dolor y angustia

Para asegurar la eutanasia, esto es, una buena
muerte, es importante reconocer los signos de
dolor, temor y angustia en las especies ms
relevantes. Todo el personal debe entrenarse en
el reconocimiento de estos signos de
sufrimiento en las especies con las que estn
trabajando. La valoracin de estos factores debe
basarse fundamentalmente en las observaciones
de conducta anormal y en respuestas
fisiolgicas que demuestren ansiedad y temor.
Dependiendo de las especies pueden incluir:

vocalizaciones de angustia (no siempre en el
rango audible para humanos),
lucha,
intentos de huda,
agresiones defensivas o redirigidas,
respuesta de paralizacin/inmovilizacin,
jadeo,
salivacin,
miccin, defecacin y evacuacin de los sacos
anales,
dilatacin de pupilas,
taquicardia,
sudoracin,
contracciones reflejas de la musculatura
esqueltica, que originan temblor, tremor y
otros espasmos musculares.

Algunas de estas respuestas pueden suceder
tanto en animales conscientes como
inconscientes. El temor puede causar
inmovilidad o paralizacin en ciertas especies,
particularmente en conejos y pollos. Esta
respuesta de inmovilidad no se debe considerar
como inconsciencia, cuando el animal en
realidad est consciente. Los embriones en su
ltimo tercio de desarrollo y los animales muy
jvenes tienen bien desarrollados los
componentes del sistema del dolor, tanto a nivel
perifrico como a niveles cortical y subcortical;
los sistemas neuroqumicos estn intactos y las
respuestas funcionales al dolor y al estrs, estn
bien documentadas (Anand & Hickey 1987). El
dolor se puede asociar tambin con la carencia
y/o el sufrimiento psicolgico, asociados con un
trato pobre o un entorno inadecuado.
Cuando se valora el mtodo ms humanitario
de eutanasia para cualquier animal, la sedacin
previa puede ser considerada como un mtodo
para reducir la posible ansiedad y angustia. Sin
embargo, un factor que se debe considerar es
que esto implicar ms manipulacin, lo que
aadir ms ansiedad al animal, anulando la
finalidad del sedante.
Al determinar el mtodo de eutanasia, se debe
considerar la necesidad de minimizar el temor y
el recelo. Las vocalizaciones por angustia, la
conducta con miedo y la liberacin de ciertos
olores o feromonas por un animal atemorizado,
pueden causar ansiedad y recelo en otros. Hay
que tener presente que muchas de las
vocalizaciones son a altas frecuencias y estn
fuera del rango auditivo humano. Por ello,
cuando sea posible, los animales no deben estar
presentes durante la eutanasia de otros,
especialmente de su misma especie. Esto es
particularmente importante cuando las
vocalizaciones o la liberacin de feromonas
pueden producirse durante la induccin de la
inconsciencia. Es tambin conocido que el
ltimo animal extrado de un grupo puede
alterarse y por ello los dos ltimos animales
tendran que extraerse juntos.

1.4 Reconocimiento y confirmacin de la
muerte

Es esencial que todo el personal est entrenado
para ser capaz de reconocer y confirmar la
muerte en todas las especies con las que estn
trabajando. Los aspectos mas importantes en el
reconocimiento de la muerte incluyen el cese
del latido cardiaco y la respiracin, ausencia de
reflejos y en los animales de laboratorio
pequeos, la bajada de la temperatura corporal
por debajo de 25C. El mtodo elegido
depender de las especies que se estn
manejando. Si existiese alguna duda en la
confirmacin de la muerte, se debera utilizar un
segundo mtodo para sacrificar al animal.

1.5 Personal y entrenamiento

Todos los mtodos de eutanasia son
susceptibles de ejecutarse incorrectamente, y
por ello, el personal que lleve a cabo la
eutanasia de los animales, debe estar
adecuadamente entrenado para realizarla del
modo mas efectivo y humanitario. Se debe
buscar asesoramiento profesional.
Los programas de entrenamiento deben incluir
cursos sobre la biologa de las especies que se
utilicen, mtodos de eutanasia adecuados para
cada especie y regulaciones nacionales y
Europeas sobre bienestar animal.
El entrenamiento debe incluir aspectos tales
como el reconocimiento del dolor, temor,
angustia, ansiedad, insensibilidad y muerte para
todas las especies que se utilicen. Se deben
aadir cursos detallados sobre mtodos de
eutanasia para cada especie, incluyendo la
valoracin sobre los mtodos mas humanitarios
y adecuados dependiendo de la especie y de los
requerimientos experimentales. El personal
debe ser fsicamente capaz de llevar a cabo
varias tcnicas de eutanasia, y tambin debe
tener la suficiente experiencia en el manejo e
inmovilizacin de las especies ms relevantes,
para minimizar la angustia, temor y ansiedad.
Los cursos deben incluir mtodos para ser
usados en la confirmacin de la muerte. Los
cursos de entrenamiento deben cubrir tambin el
funcionamiento y el mantenimiento de los
equipos que se utilicen .
Al finalizar cada curso es necesario realizar una
valoracin de aptitud del personal.
El personal experimentado que haya
desarrollado una relacin de confianza en
particular con los animales a los que ha de
realizar la eutanasia, debera ser el que lleve a
cabo la eutanasia de estos animales, ya que esto
minimizar en stos el estrs y la ansiedad.
Cualquier persona que lleve a cabo la eutanasia,
debera demostrar profesionalidad y
sensibilidad hacia el valor de la vida animal. El
grado de angustia experimentado por aquellas
personas que observan o llevan a cabo la
eutanasia en cualquiera de sus formas, es
dependiente de sus conocimientos, de su
filosofa personal y de sus principios ticos
acerca del uso de animales de investigacin. El
estrs producido al realizar la eutanasia
aumenta cuando hay fuertes lazos emocionales
entre el personal y animales en particular, o
cuando se sacrifican peridicamente gran
nmero de animales. El estrs experimentado
por las personas que habitualmente llevan a
cabo eutanasia puede producir una fuerte
sensacin de insatisfaccin con el trabajo o
alienacin, que se puede manifestar como
absentismo, belicosidad o un manejo de los
animales descuidado o insensible, junto con una
alta tasa de rotacin del personal. A travs de
programas de entrenamiento se deben
desarrollar aptitudes en los empleados para
poder hacer frente a estos problemas. Los
efectos de los diversos agentes y mtodos
pueden ser subjetivos, y estn basados en
juicios profesionales, experiencia e intuicin.
En ciertas prcticas, algunas de las desventajas
y controversias pueden estar basadas en
consideraciones sentimentales y estticas, ms
que en datos cientficos fidedignos. Algunos
mtodos fsicos pueden ser estticamente
desagradables pero muy humanitarios. La
eleccin del mtodo de eutanasia debe de estar
basada primordialmente en principios
humanitarios hacia el animal, ms que en las
sensibilidades del tcnico que lleve a cabo la
tarea, o de las personas que llevan a cabo la
eutanasia. Sin embargo, al personal se le debe
dar la oportunidad de rechazar el llevar a cabo
mtodos de eutanasia que ellos personalmente
encuentran horribles.

1.6 Manejo e inmovilizacin

Al igual que otros procedimientos aplicados a
animales, la eutanasia requiere un cierto control
fsico sobre el animal. El grado de control y el
tipo de inmovilizacin necesitado vendr
determinado por la especie animal, raza,
tamao, grado de domesticacin, presencia de
una herida dolorosa o enfermedad, grado de
excitacin y mtodo de eutanasia. Es vital un
control adecuado para minimizar el dolor y la
angustia en los animales, para asegurar que no
haya peligro para la persona que lleva acabo la
eutanasia y frecuentemente para proteger a otros
animales y personas. Una inmovilizacin suave
pero firme por un cuidador conocido, un manejo
cuidadoso, acariciar y hablar durante la
eutanasia, tienen a menudo un efecto calmante
sobre muchos animales. Puede ser necesaria la
utilizacin previa de frmacos, tranquilizantes e
inmovilizantes cuando la captura o
inmovilizacin puedan producir dolor, lesiones,
ansiedad en el animal, o peligro al operador.

1.7 Equipamiento

Los instrumentos, el equipamiento y las
instalaciones utilizadas para aturdir o sacrificar
animales deberan estar diseadas, construidas y
mantenidas de modo que se consiga
rpidamente el aturdimiento y la muerte. Deben
ser peridicamente inspeccionadas y limpiadas
para asegurar que estn en buen estado y que
funcionarn correctamente en todas las
ocasiones. Se debe limpiar la sangre, orina y
heces ya que podran causar ansiedad a los
animales que vayan a continuacin.

1.8 Eliminacin de cadveres y residuos

Se deben evaluar los posibles riesgos hacia los
humanos cuando se conozca que los animales
son portadores de agentes zoonsicos, cuando
estn tratados con radioistopos o con
productos qumicos txicos y el personal que
maneje estos cadveres deber tomar las
precauciones necesarias para su proteccin y la
de los dems. Se debe tener cuidado al
deshacerse de los cadveres y otros residuos,
(por ejemplo agua que lleve sustancias
disueltas) que no supongan peligro para otras
personas o para el medio ambiente. Los
mtodos qumicos ( excepto el anhdrido
carbnico) no se deben utilizar en animales
destinados a consumo humano o cuando el
cadver pueda entrar en la cadena alimentaria.
Los tcnicos deben asegurarse que cumplen la
legislacin nacional e internacional.

2 Comentarios generales sobre los
mtodos de eutanasia

En esta seccin hay una lista con la mayora de
los mtodos que han sido utilizados para
sacrificar animales de experimentacin. Para
aquellos mtodos menos claros que no se
mencionan debera asumirse, en general, que no
son considerados aceptables hasta que hayan
sido cuidadosamente valorados bajo los criterios
dados en la Seccin 1 y hayan sido
considerados humanitarios por una persona
cualificada, como un veterinario o la autoridad
competente. Junto con esta seccin se debe
consultar la Seccin 1.
Los agentes pueden causar la muerte por tres
mecanismos bsicos: (1) hipoxia, directa o
indirecta; (2) depresin directa de las neuronas
esenciales para las funciones vitales; y (3)
interrupcin fsica de la actividad del cerebro y
destruccin de neuronas esenciales para la vida
(Andrews et al. 1993, Lumb & Jones 1984 ).
Se pueden obtener detalles adicionales para
cada grupo de especies en la Seccin 3.

2.1 Mtodos aceptables de eutanasia

Mtodos fsicos
Estos mtodos deben producir la inmediata
prdida de consciencia a travs del trauma fsico
del cerebro. Son los mas tiles cuando los
mtodos farmacolgicos puedan interferir en el
propsito del experimento. Aunque los mtodos
fsicos pueden ser estticamente menos
agradables para los observadores y los que
sacrifican a los animales, en manos expertas son
rpidos, seguros y posiblemente los que
producen menos angustia en el animal. Para
todos estos mtodos es esencial la formacin de
especialistas. Estos mtodos necesitan
inmovilizacin, lo cual puede causar estrs
adicional para algunos animales. Si es posible,
el animal no debera ser sacrificado de modo
que pueda ser visto u olido por otros animales.

2.1.1 Disparo

El disparo en la cabeza, para asegurar la
destruccin inmediata del cerebro, es un mtodo
de sacrificio efectivo y humanitario para
grandes reptiles y mamferos ( Australian
Veterinary Association 1987, Longair et al.
1991). Se puede dividir en dos tipos: bala libre
o bala cautiva (con penetracin o percusin). El
tipo de arma utilizada se debe seleccionar de
acuerdo con la especie que se ha de sacrificar y
el entorno.

(a) Bala libre: Se debe tener especial cuidado
para evitar el peligro para el operador. Todo el
personal debe estar entrenado en estas tcnicas
para asegurar la posicin correcta del arma y as
alcanzar directamente el cerebro (Longair et al.
1991). No se debe realizar dentro de un edificio
el disparo de una bala libre, ya que las balas
rebotadas pueden causar dao a las personas,
pero se puede usar de modo eficaz en el campo
por tiradores expertos. Cuando el animal se
pueda sujetar convenientemente es preferible el
mtodo de la bala cautiva, ya que es menos
peligroso para el personal.
En caballos se prefiere un sacrificio
humanitario con bala libre (Blackmore 1985,
Dodd 1985, Oliver 1979).

(b) Bala cautiva: La bala cautiva penetrante es
una herramienta eficaz para conseguir dejar
inconscientes a muchos de los animales grandes
(Blackmore & Delaney 1988, Daly &
Whittington 1989, Green 1987, Longair et al.
1991). Los conejos grandes y los perros se
pueden sacrificar tambin de este modo (Dennis
et al. 1988, Holtzman 1991). Sin embargo, no
es siempre efectivo en cerdos grandes ni en
toros adultos debido al grosor y densidad del
crneo. El proposito de este aturdimiento por
golpe es conseguir que el animal quede
inmediatamente insensible al dolor por
producirle concusin (Ministry of Agriculture,
Food and Fisheries 1993 ).El animal debe
permanecer insensible hasta que se lleve a cabo
la exanguinacin ( Blackmore 1993). Se puede
reconocer un golpe eficaz, porque tras el
disparo el animal se colapsa inmediatamente
quedando su cuerpo y msculos rgidos y no
debera presentar el reflejo de la estacin. La
respiracin acompasada normal debera cesar,
debera haber perdida del reflejo palpebral y el
ojo debera apuntar hacia fuera y no rotar hacia
la zona posterior del crneo. La efectividad del
golpe aturdidor depende de la precisin al
colocar la pistola, del uso del cartucho adecuado
en relacin a la especie y tamao del

animal, el tamao y la velocidad de la bala
cautiva y el mantenimiento en condiciones de la
pistola. El lugar de penetracin difiere con cada
especie y por ello este mtodo debera llevarlo a
cabo solamente personal adecuadamente
entrenado. Se debe utilizar la inmovilizacin
adecuada que prevenga el posicionamiento
incorrecto de la pistola. La pistola recomendada
es aquella que tenga la bala cautiva retirada en
el can antes de disparar, mejor que aquella en
la que la bala cautiva se extienda mas all del
can, ya que, la que la tiene retirada es ms
probable que genere una mayor velocidad de la
bala cautiva, en el momento del impacto. El
operador debera asegurarse que la bala cautiva
se retrae completamente tras cada disparo, de no
ser as, no debera volver a utilizar la pistola
hasta haber sido reparada. La bala cautiva debe
limpiarse siempre adecuadamente tras cada uso.

2.1.2 Concusin ( aturdimiento por golpe o
stunning)

Se puede llevar a cabo de varias maneras
dependiendo del tamao del animal. En
animales pequeos como conejos pequeos,
gatitos y perritos recin nacidos, ratas, ratones,
cobayas jvenes, hmsters, aves, pequeos
reptiles, anfibios y peces (Clifford 1984 ) un
golpe en la cabeza puede ser suficiente para
dejar al animal insensible (Green 1987). Para la
correcta eleccin del mtodo a utilizar son
esenciales experiencia y entrenamiento.
Con animales mayores se debe utilizar
equipamiento especializado del tipo de la bala
cautiva no penetrante. No est indicada la
utilizacin del martillo o del hacha de matadero
como mtodo para aturdir por golpe. Estos
mtodos deben ir siempre seguidos de la
inmediata exanguinacin, extraccin del
corazn o destruccin del cerebro para asegurar
la muerte. Para todos los operarios es esencial el
entrenamiento. Si no se realiza correctamente
puede dar lugar a varios grados de consciencia
con dolor concomitante. Es difcil asegurar la
estabilidad en la actuacin de los operarios, y
por ello, slo se deberan sacrificar, cada vez,
unos pocos animales. Se debe confirmar la
muerte de cada animal antes de aturdir al
siguiente.
Se ha utilizado con xito un chorro de agua a
alta presin para el aturdimiento de cerdos. Es
un mtodo aceptado en Suiza ( Schatzmann et
al. 1991, 1994).

2.1.3 Aturdimiento elctrico

Ha sido utilizado con peces, anfibios, aves,
perros y otros carnvoros, aves de corral, cerdos
(Lambooy & van Voorst 1986, Laursen 1983)
ovejas, terneros, cabras y conejos ( Warrington
1974). Los animales con cuernos no se deben
aturdir utilizando este mtodo, si stos
dificultan la aplicacin de los electrodos con
precisin. No se debera utilizar en gatos debido
a la alta conductividad de su pelaje (Green 1987
). No es aceptable para utilizar con peces, ya
que la corriente alterna estimula la contraccin
de la musculatura esqueltica, cardiaca y lisa,
induciendo tetania, no anestesia.
Para este mtodo de eutanasia debera usarse
solamente un equipo especfico. Se puede
utilizar la corriente alterna para aturdir a los
animales, (Breazile & Kitchell 1969) pero debe
estar seguido por otro mtodo para completar la
muerte. De modo alternativo, se puede
conseguir inconsciencia inmediata con parada
cardiaca si los electrodos se aplican
simultneamente sobre la cabeza y el lomo del
animal, pero se deben colocar los electrodos de
tal modo que aseguren que la corriente se dirige
a travs del cerebro, para producir inconsciencia
antes de la fibrilacin cardiaca (Andrews et al.
1993).
Normalmente se aplica la corriente en la cabeza
del animal por medio de un par de tenazas
semejantes a tijeras, con un electrodo al extremo
de cada brazo. Los aturdidores de alto voltaje
son mas efectivos. Los animales deben estar
adecuadamente sujetos, de modo que las tenazas
se puedan aplicar con precisin. Los electrodos
deben ir de lado a lado del cerebro y ser
aplicados firmemente de modo que mantengan
su posicin cuando el animal caiga al suelo
(Ministry of Agriculture, Food and Fisheries
1993 ).
No es aceptable el aturdimiento de cabeza a
cola ni de cabeza a pezua, ya que no causa la
inconsciencia inmediata (Breazile & Kitchell
1969). Los electrodos no se deben aplicar detrs
de las orejas o a ambos lados del cuello, porque
paralizara al animal sin llegar a la
inconsciencia, dando como resultado dolor
intenso y sufrimiento. Se debe tener cuidado
para asegurar que el animal no recibe una
descarga elctrica antes de la aplicacin correcta
de los electrodos, situacin que puede darse por
contacto con otros animales que estn siendo
aturdidos o por tener la piel hmeda.
El aparato debe tener un mecanismo que
prevenga su funcionamiento si no le llega la
cantidad mnima de corriente requerida, as
mismo, debe tener mecanismos para medir el
tiempo de aplicacin, indicadores de voltaje e
intensidad de corriente.
Los signos de un aturdimiento elctrico eficaz
son la extensin de los miembros, opistotonos,
(arqueamiento del cuerpo y espasmos de las
extremidades) rotacin hacia abajo de los
globos oculares y espasmos tnicos que
cambian a clnicos con periodos de flacidez
muscular. Tras quince o veinte segundos pueden
reaparecer los reflejos y el animal puede volver
a respirar, por ello, debe llevarse a cabo
inmediatamente otro mtodo para asegurar la
muerte, como la exanguinacin (Anil &
McKinistry 1991). Si el animal no se aturde
correctamente, puede quedar paralizado
mientras mantiene plena consciencia y es capaz
de sentir dolor .

2.1.4 Dislocacin cervical

Este mtodo se utiliza para la eutanasia de
peces, aves de corral, ratones, cobayas jvenes,
ratas jvenes, conejos neonatos y gatos y perros
recin nacidos (Clifford 1984, Green 1987,
Reilly 1993). Se puede utilizar en ratas de ms
edad y en conejos de hasta un kilogramo si
estn sedados o aturdidos antes de la
dislocacin . Gregory y Wotton (1990)
mostraron que utilizando este mtodo no
siempre hay inconsciencia inmediata en aves de
corral.
Se debe tener cuidado para asegurar la
separacin completa. Si se lleva a cabo
correctamente debe causar graves daos al tallo
cerebral y una inconsciencia instantnea
(Iwarsson & Rehbinder 1993). Se debe
confirmar la muerte por exanguinacin o
destruccin del cerebro (Blackmore 1993).
Llevarlo a cabo puede resultar estticamente
desagradable para el operador y se recomienda,
si el operador no esta totalmente seguro de
llevar a cabo esta tcnica rpida y eficazmente,
que utilice otro mtodo. Cuando sea posible, los
animales deberan estar sedados o anestesiados
antes de la dislocacin.

2.1.5 Decapitacin

Este procedimiento se ha utilizado para
sacrificar peces, anfibios, aves, roedores y
conejos pequeos. La decapitacin implica la
separacin del cuello del animal muy cerca de la
cabeza utilizando un instrumento afilado. No se
recomienda la utilizacin de tijeras, a menos
que sean adecuadas para la especie animal (esto
es, que tengan unas cuchillas lo suficientemente
largas ) y que la presin sea lo suficientemente
fuerte para separar el cuello con facilidad al
primer intento. La decapitacin debera ser
realizada utilizando guillotinas especialmente
diseadas con ese fin, para asegurar una
separacin rpida en la posicin correcta
(Clifford 1984).
Se ha debatido ampliamente acerca del tiempo
que tarda la cabeza decapitada en perder la
consciencia, tanto en vertebrados homeotermos
(de sangre caliente) como en poiquilotermos
(de sangre fra) (Allred & Berntsen 1986,
Andrews et al. 1993, Blackmore 1993, Holson
1992, Lorden & Klemm 1987, Mikeska &
Klemm 1975, Reilly 1993, Tidswell et al. 1987,
Vanderwolf et al. 1988) y se ha sugerido
anestesiar o sedar antes al animal (Smith et al.
1986). Sin embargo, la inyeccin de sedantes o
anestsicos antes de la decapitacin podra
incrementar el estrs previo a la eutanasia, por
lo que no se considera positivo para el bienestar
del animal.
En vertebrados poiquilotermos (de sangre
fra) los animales deben ser aturdidos o
insensibilizados antes de la decapitacin, ya que
son muy tolerantes a la anoxia (Warwick 1986).
La investigacin en aves ha evidenciado que se
pueden evocar respuestas a estmulos visuales
hasta 30 segundos despus de la decapitacin,
(Gregory & Wotton 1990) lo que hace que sea
inaceptable. En otros animales homeotermos, se
considera que la falta inmediata de riego
sanguneo al cerebro y la anoxia subsiguiente
deja la cabeza rpidamente insensible, (Derr
1991) haciendo innecesario el aturdimiento o la
sedacin previa. No se acepta el uso de la
puntilla (Comisin de la Comunidades Europeas
1993).
Se prefiere el uso de otros mtodos cuando sea
posible, hasta que investigaciones ms
avanzadas puedan hacer evidente una prdida
rpida de consciencia.

2.1.6 Maceracin

Est aceptado este mtodo para la destruccin
de pollitos de hasta 72 horas de vida que, a
menudo, tienen que ser sacrificados en gran
nmero (Bandow 1987, Comisin de la
Comunidades Europeas 1993). Slo se deben
utilizar maceradores especficamente diseados
con este fin, y bajo ninguna circunstancia
deberan utilizarse aparatos elctricos caseros.
Los peces muy pequeos (<2 cm de largo) se
pueden sacrificar introducindolos en una
unidad de eliminacin de residuos (Bannister,
comunicacin 1995).

2.1.7 Irradiacin con microondas

Este mtodo lo usan los neurobilogos como
medio para fijar los metabolitos del cerebro, sin
que pierda su integridad anatmica (Morojiet al.
1977). Slo se pueden utilizar aparatos
especiales diseados con este propsito (lo que
no incluye los hornos microondas del hogar).
Esto implica enfocar con precisin el rayo de
microondas a una parte especfica del cerebro.
Slo se debe realizar en animales pequeos
como anfibios, aves, ratones, ratas y conejos
pequeos (menores de 300 gramos) (Zeller et
al. 1989). Este mtodo requiere la pericia de un
especialista, pero cuando se lleva a cabo
correctamente es humanitario, ya que la muerte
sucede en cuestin de milisegundos (Andrews
et al. 1993, Bermann et al. 1985, Olfert et al.
1993). Hay que tener mucho cuidado para
asegurar la posicin correcta del rayo de
microondas, pero el tiempo que lleve la
inmovilizacin del animal debe ser el mnimo
posible para reducir el estrs previo a la
eutanasia. Se ha utilizado con xito la
irradiacin de todo el cuerpo en ratones a 47-
49C, muriendo los animales en menos de un
segundo, ( Von Cranach et al. 1991a, b ) y es
aceptable (Schatzmann, comunicacin 1995 ).
Este no es un procedimiento rutinario para
eutanasia. Se deben tomar precauciones, ya que
puede ser peligroso para el operador (Bermann
et al. 1985 ).

Mtodos qumicos

Muchos anestsicos se utilizan en sobredosis
como agentes eutansicos. Un anestsico es un
agente que produce, de un modo controlado, la
ausencia de percepcin de cualquier sensacin.
Produce inconsciencia, analgesia y relajacin
muscular suficiente para realizar los
procedimientos sin dolor. Las manifestaciones
por sobredosis de anestsico incluyen: aparicin
de arritmias cardiacas; el tiempo de llenado
capilar aumenta progresivamente hasta 3 o ms
segundos; la respiracin se hace mas lenta,
superficial e irregular, se vuelve diafragmtica o
puede cesar; el color de la piel y de las
membranas mucosas puede ser de plido a
ciantico; los reflejos cardiovasculares, del
sistema nervioso central, musculoesquelticos,
gastrointestinales y oculares estn enormemente
disminuidos o abolidos; la presin sangunea
cae rpidamente hasta producir una profunda
hipotensin (valor medio <20-30 mmHg).

Agentes inhalatorios

Los agentes inhalatorios son, o bien
vaporizados, o bien conducidos como gas hasta
cmaras o circuitos anestsicos. Las cmaras
que se utilicen para la distribucin de estos
agentes, deben estar diseadas adecuadamente,
de modo que aseguren la distribucin uniforme
del gas y la rpida exposicin de los animales a
una concentracin alta del agente. Su utilizacin
es de gran inters en muchos animales
pequeos, por ejemplo aves, roedores, gatos y
perros pequeos ( Smith et al. 1986 ). En
conejos es preferible usar otros mtodos ya que
reaccionan adversamente a los gases y muestran
signos de excitacin (Green 1979 ). Los reptiles
y los anfibios pueden aguantar la respiracin, lo
que conduce a un alargamiento del tiempo de
induccin. Los animales recin nacidos son ms
resistentes a la hipoxia y tardan ms tiempo en
morir: por ello hay que utilizar otros mtodos.
Es importante seleccionar agentes que no sean
desagradables al ser inhalados, porque algunos
pueden ser irritantes y por ello estresantes. Los
agentes que produzcan convulsiones antes de la
inconsciencia son inaceptables para la eutanasia.
Cuando se administren agentes inhalatorios hay
que tomar precauciones de seguridad, utilizando
un equipo adecuado de recogida de gases. Se
debe confirmar la muerte.

2.1.8 Dixido de carbono

A concentraciones superiores al 60% el dixido
de carbono (anhdrido carbnico) acta como
un agente anestsico y produce rpidamente la
perdida de consciencia (Green 1987). Es muy
eficaz y humanitario para la eutanasia de la
mayora de los animales pequeos utilizndolo
por encima del 70% de concentracin. El
dixido de carbono estimula el centro
respiratorio, lo que puede causar al animal
ansiedad y estrs y al mismo tiempo resultar
para el observador estticamente desagradable.
El dixido de carbono puede formar cido
carbonico al contactar con las membranas
mucosas nasales, lo cual puede producir un
efecto de hormigueo o picazn, que puede
resultar moderadamente irritante para algunas
especies cuando se utiliza en concentraciones
menores (Lucke 1979).
Para la mayora de los animales, se recomienda
situarlos inmediatamente en atmosfera de CO
2
>70% , ya que pierden la consciencia muy
rpidamente debido al efecto narctico del alto
aporte de CO
2
al cerebro, sin producir hipoxia
(Blackshaw et al. 1988, Forslid et al. 1986).
En animales conscientes el 100 % de CO
2
puede
causar grave disnea y angustia (van Zutphen et
al. 1993).
Se recomienda el 100 % de CO
2
para pollitos
de hasta 72 horas de vida, porque son ms
tolerantes al CO
2
. Raj y Gregory (1993, 1994 )
y Raj et al. (1990,1992) mostraron que el uso de
un 60% de argn junto con CO
2
induca la
rpida prdida de las funciones cerebrales en
pavos. Las aves de ms edad pueden extender
sus alas al ser sacrificadas con CO
2
incluso en
estado de coma, lo que lo hace estticamente
menos aceptable. Para pollos y pavos se
consideran aceptables concentraciones bajas de
CO
2
(30% ) utilizndolo junto con otro gas
inerte. A esta concentracin no es
excesivamente picante y acta como un
anticonvulsivante. En peces produce una
actividad intensa antes de la prdida de
consciencia y acta despacio por lo que no esta
recomendado. No se debe utilizar para gatos y
especies mayores, porque a veces produce
excitacin (Glen & Scott 1973, Klemm 1964) y
algunos animales tienen aversin a su olor
picante. Los cerdos vocalizan antes de perder la
consciencia, indicando un cierto nivel de
angustia (Gregory et al. 1987 ) y otras personas
tambin han indicado que no es humanitario
para cerdos, (Clifford 1984, Hoenderken 1983,
Hoenderken et al. 1980, Reilly 1993) en contra
de las recomendaciones de la CE y las
nacionales para sacrificio (Comission of the
European Communities 1993 , Ministry of
Agriculture , Food and Fisheries 1993). Otras
investigaciones indican que las reacciones
violentas pueden producirse despus de la
inconsciencia (Andrews et al. 1993, Erhardt et
al. 1989, Forslid et al. 1986, Mullenax &
Dougherty 1963). Es preferible utilizar otros
mtodos en cerdos hasta que nuevas
investigaciones puedan mostrar cualquier
reaccin adversa, o utilizarlo cuando estn
totalmente anestesiados. No es aceptable para
los vertebrados poiquilotermos, ya que la
induccin es demasiado larga. Los neonatos son
particularmente tolerantes al CO
2
, (de 30-60
minutos hasta quedar inconscientes ( van
Zutphen et al. 1993) dependiendo de la madurez
en el momento del nacimiento (aquellos que
nacen ms maduros son menos tolerantes al
CO
2
). Por ello, este mtodo no deber utilizarse
en animales de menos de dos semanas de edad.
No se debe usar el dixido de carbono con
animales que bucean, como el visn, debido a
su capacidad para aguantar la respiracin.
Se han llevado a cabo investigaciones
examinando las posibles ventajas de aadir
oxgeno para asegurar que los animales mueren
por narcosis de CO
2
, ms que por hipoxia
(Iwarsson & Rehbinder 1993 ). En algunas
especies parece reducirse el estrs y la ansiedad,
pero est acompaado de un tiempo de
induccin mas largo (Blackmore 1993). Hewett
et al. (1993 ) manifest que no haba ventajas
para el bienestar al utilizar mezclas de CO
2
/O
2
.
Puede resultar difcil mezclar gases con
precisin para uso rutinario.
El dixido de carbono es mas pesado que el
aire, por ello un llenado incompleto de la
cmara eutansica puede permitir evitar la
exposicin al gas a los animales altos o que
trepen. Por ello la cmara debe ser llenada
previamente con CO
2
hasta el 70% antes de
introducir los animales en ella. Sin embargo,
otros opinan que puede ser mejor llenar la
cmara una vez que los animales han sido
colocados en ella. Las cmaras deben estar
diseadas para evitar que se hagan dao los
animales y, si es posible, disponer de
mecanismos por los que la concentracin de
CO
2
se pueda medir rpidamente y con
exactitud. Hay que tener la precaucin de
limitar el nmero de animales que se pongan
cada vez en la cmara, para mantener constante
la concentracin de CO
2
.

El dixido de carbono no es inflamable ni
explosivo, por lo que presenta poco riesgo para
el operador. Los extintores contra incendios y la
nieve carbnica no son aceptables por la baja
temperatura de ambos y el ruido que produce el
extintor.

2.1.9 Monxido de carbono

Produce una muerte rpida, ya que se mezcla
con los eritrocitos en competencia por el
oxgeno, produciendo de este modo hipoxia
(Chalifoux & Dallaire 1983 ). Como no tiene
olor la angustia es mnima o no existe,
(Blackmore 1993, Breazile & Kitchell 1969,
Green 1987, Smith et al. 1986). En reptiles no
es aceptable debido a su bajo metabolismo y a
su tolerancia a la hipoxia. Esta aceptado para
pequeos animales, pero en perros y gatos
despus de la inconsciencia pueden aparecer
vocalizaciones y convulsiones, hacindolo
estticamente desagradable. La muerte debe
confirmarse por mtodos fsicos. El monxido
de carbono se puede conseguir de tres maneras:
por interaccin qumica de formiato sdico con
cido sulfrico; de colectores de motores de
combustin interna; y gas CO comprimido
comercial. El monxido de carbono del escape
de un motor de gasolina es muy irritante para
las vas respiratorias. Para llegar a utilizarse en
eutanasia, debe ser enfriado a travs de una
cmara de agua y filtrado, utilizando una unidad
depuradora de gases para retirar los diversos
xidos de nitrgeno, restos de hidrocarburos,
xidos de hidrocarburos y partculas de
carbono. Bajo ninguna circunstancia se
utilizarn los gases de salida de motores diesel.
Solamente est recomendado el CO comercial.
Los animales se introducirn en la cmara
solamente despus de haberla llenado con un
6% en volumen de CO proveniente de una
fuente de CO puro. Ya que es extremadamente
nocivo y peligroso para el operador, al no ser
detectable, slo debe utilizarse en un aparato de
recogida de gases apropiado, tomando
precauciones extremas. Deben instalarse en la
habitacin monitores de monxido de carbono.

2.1.10 Anestsicos inhalatorios voltiles

Cuando se utilice cualquier anestsico lquido,
se debe de tener mucho cuidado en no permitir
al animal entrar en contacto con l. Se debe
asegurar suficiente aporte de aire u oxgeno,
durante el periodo de induccin para prevenir la
hipoxia (Andrews et al. 1993). La exposicin a
gases anestsicos en concentraciones traza, est
reconocida como un riesgo para la salud de los
humanos y requiere el empleo de aparatos de
recogida de gases, para ser utilizados en el
ambiente de trabajo. Los anestsicos
inhalatorios voltiles no son inflamables ni
explosivos.

Halotano El halotano es un agente anestsico
usado comnmente para pequeos animales de
laboratorio y es de actuacin rpida y libre de
estrs cuando se utiliza en sobredosis para
eutanasia. Posee un efecto depresor sobre los
sistemas cardiovascular y respiratorio (Green
1987).

Enflurano El enflurano es un agente anestsico
usado comnmente para pequeos animales de
laboratorio y es de actuacin rpida y libre de
estrs cuando se utiliza en sobredosis para
eutanasia (Green 1987). Posee un efecto
depresor sobre los sistemas cardiovascular y
respiratorio. Se le preferir respecto del
halotano cuando se realicen trabajos de
metabolismo de frmacos o toxicologa, ya que
en el hgado se metaboliza una cantidad muy
pequea de esta sustancia.

Isoflurano El isoflurano es un agente
anestsico utilizado comnmente, es de
actuacin rpida y libre de estrs para eutanasia
usado en sobredosis. El isoflurano produce
depresin respiratoria y cardiovascular, sin
embargo, tiene un olor picante por lo que no
debe usarse con animales que sean capaces de
aguantar la respiracin. Es particularmente til
cuando se vayan a usar tejidos como el
heptico, para estudios toxicolgicos o
microsomales, ya que no experimenta
metabolismo heptico.

Agentes para animales acuticos, para su
absorcin a travs de la piel y las agallas

2.1.11 Benzocaina (etil aminobenzoato)

Este agente, disuelto en acetona antes de
aadirlo al agua del tanque, es un mtodo
efectivo y humanitario para sacrificar peces y
anfibios. Acta deprimiendo el sistema nervioso
central. Posee eficacia pH-independiente, pero
reduce el pH del agua del tanque, por lo que
deber tamponarse a pH 7.5 para reducir la
irritacin ( Brown 1988, Summerfelt & Smith
1990). El tiempo de descomposicin en agua es
de unas 4 horas lo que hace que sea
medioambientalmente seguro y adems lo es
para el personal. Se ha de confirmar la muerte
por medios fsicos.

2.1.12 Tricana metano sulfonato (MS-222
tamponado)

El MS-222 es un mtodo de eutanasia
humanitario y seguro para peces y anfibios. Se
ha utilizado en serpientes y caimanes
inyectndolo intramuscularmente, pero tiene un
periodo de induccin largo por lo que crea
angustia. Acta deprimiendo el sistema nervioso
central. Es soluble tanto en agua salada como
dulce, pero necesita ser neutralizado con
bicarbonato, imidazol, fosfato cido de sodio, o
hidrxido sdico para reducir la irritacin y el
dao tisular ( Brown 1988). La efectividad del
MS-222 varia con la especie, tamao,
temperatura y dureza del agua. El MS-222 no es
estable a la luz solar y las soluciones
almacenadas se debern guardar en botellas de
vidrio mbar u opacas. Se puede utilizar junto
con quinaldina o sulfato de quinaldina lo que lo
hace mas eficaz, necesitndose menores
cantidades que si se utilizasen cualquiera de los
agentes por separado.

2.1.13 Etomidato y metomidato

Ambos son agentes hipnticos no-barbituricos
que actan deprimiendo el sistema nervioso
central. Son de actuacin relativamente rpida y
estn considerados como agentes humanitarios
para el sacrificio de peces. Son altamente
solubles en agua (Brown 1988, Summerfelt &
Smith 1990).

2.1.14 Quinaldina (2-metilquinolina)

Esta sustancia se utiliza en los Estados Unidos
de Amrica (USA) para el sacrificio
humanitario de peces. Sin embargo, es
raramente utilizado y difcil de conseguir en
Europa. Se debe disolver previamente en
acetona, pero no tiene efectos adversos en los
animales. Tiene un periodo de induccin
relativamente largo en comparacin con otros
agentes. La quinaldina se acumula en tejidos
ricos en lpidos como el cerebro. Deprime los
centros sensoriales del sistema nervioso central
(Summerfelt & Smith 1990 ). Tambin se puede
utilizar el sulfato de quinaldina para la eutanasia
de peces.

Agentes inyectables

Muchas mezclas patentadas, especficamente
preparadas para la eutanasia de los animales,
son sencillamente agentes anestsicos de
potencia triple, como el pentobarbital sdico,
pero otros pueden llevar incorporados agentes
bloqueantes neuromusculares. Es esencial que
el animal est totalmente anestesiado antes de
hacer efecto los agentes bloqueantes
neuromusculares, para prevenir la angustia en el
animal. Antes de utilizar cualquier agente para
eutanasia el tcnico consultar el prospecto con
referencia a la dosis y va de inyeccin. En
general, cuando se utilizan agentes anestsicos,
el doble de la dosis anestsica produce parada
respiratoria, mientras que cuatro veces esa dosis
produce parada cardiaca cuando se utiliza
ventilacin asistida. Tres veces la dosis,
normalmente, produce la muerte rpida y
uniformemente en animales no ventilados.
Se puede administrar la inyeccin por varias
vas. Se prefiere la administracin intravenosa
porque el efecto es mas rpido y fiable. Es mas
fcil de administrar la inyeccin intraperitoneal,
especialmente en especies en las que las venas
son pequeas y difciles de acceder, pero lleva
ms tiempo para que acte pudiendo causar
irritacin y durante ese tiempo dolor y angustia.
Debe evitarse la inyeccin intrapulmonar
debido a las molestias que puede causar. No son
aconsejables las rutas oral y rectal debido al
prolongado comienzo de la accin, amplio
rango de la dosis letal y la irritacin potencial
de los tejidos. Las vas intramuscular y
subcutnea no se deben utilizar ya que tardan
mucho tiempo en actuar. La va intracardiaca es
muy dolorosa y no siempre se tiene xito al
primer intento de penetrar el corazn; por ello
estas tcnicas no se recomiendan excepto en
animales insensibilizados.
A los animales excitables y bravos se les tratar
previamente con una combinacin
neuroleptoanalgsica, un tranquilizante u otro
depresor del SNC. Es esencial para la
utilizacin de estos mtodos que el personal est
entrenado.
Debido a los residuos en la carne, hay que tener
cuidado con la eliminacin de los cadveres.
Tambin se deben tomar precauciones para
asegurar la seguridad del personal.

2.1.15 Barbitricos

Son los agentes eutansicos mas ampliamente
utilizados y aceptados para la mayora de los
animales (Hatch 1982 ). Incluye los derivados
del cido barbitrico, oxibarbitricos
(Pentobarbital sdico, secobarbital),
tiobarbitricos (tiopental) y varias mezclas de
barbitricos. El pentobarbital sdico esta
considerado comnmente como el agente mas
adecuado. Todos ellos actan deprimiendo el
sistema nervioso central (SNC) y producen
parada cardiaca y respiratoria. Producen una
rpida eutanasia con un mnimo de molestia,
dependiendo de la dosis del agente y la ruta de
inyeccin (se prefiere la ruta intravenosa ya que
es la ms rpida). En algunos pases solo se
pueden obtener los barbitricos con licencia.

Pentobarbital sdico Se utiliza generalmente
tanto en inyeccin intravenosa como
intraperitoneal en la concentracin del 18%,
(200 mg/ml) a una dosis de 200 mg/kg para
eutanasia. La inyeccin intravenosa produce
una muerte mas rpida, pero la ruta
intraperitoneal puede ser mas fcil de realizar en
muchas especies, reduciendo de ese modo el
estrs causado por la manipulacin. Sin
embargo, el pentobarbital sdico puede producir
irritacin del peritoneo lo que se puede evitar
diluyndolo. La inyeccin intracardiaca slo
puede utilizarse si el animal esta totalmente
anestesiado, ya que es muy doloroso y por ello
no se considera aceptable. La inyeccin
intraceflica (foramen magnum) es eficaz en
aves grandes como las de corrral, pero requiere
la pericia de un experto.

2.1.16 T-61

Este agente combina un anestsico local,
(clorhidrato de tetracana) un hipntico y una
sustancia curariforme (N-2-(m-metoxifenil)-2-
etilbutil-1-gamma-hidroxibutiramida (20%,
4,4-metilen bis-ciclohexiltrimetil ioduro
amnico (0,5%) e clorhidrato de tetracana (0,5
% ) en solucin acuosa con formamida). Slo se
puede inyectar de modo intravenoso muy lento,
ya que de otro modo es doloroso. En aves
pequeas se puede inyectar en el msculo
pectoral, pero no es adecuado para aves de
corral. Se debe sedar al animal antes de la
administracin de T-61.
Se suscit inters acerca de si el frmaco
curariforme poda causar el cese de la actividad
respiratoria antes de quedar inconsciente,
(Barocio 1983, Baumans et al. 1988, Eikmeier
1961, Quin 1963, Lumb et al. 1978, Rowan
1986) causando por ello angustia al animal,
pero Hellebrekers et al. (1990) mostr que la
prdida de consciencia y la prdida de actividad
muscular en conejos y perros, aparecan
simultneamente, haciendo por esto que este
agente sea aceptable para la eutanasia. El
relajante muscular previene el bloqueo terminal
descrito en los barbitricos, hacindolo ms
aceptable para el observador. En algunos perros
hay vocalizacin y actividad muscular. No es
una respuesta consciente, pero puede ser
estticamente desagradable. En muchos pases
no es una sustancia controlada y por ello puede
ser mas fcil de obtener que los barbitricos. En
otros pases, como en Suecia, no esta
disponible.

2.2 Mtodos aceptables con animales
inconscientes

2.2.1 Insercin de aguja

Es un mtodo eficaz para el sacrificio de
algunos peces, anfibios y reptiles. Se lleva a
cabo insertando una aguja afilada a travs del
foramen magnum hasta la base del cerebro, para
asegurar la rpida destruccin del mismo. Si no
se lleva a cabo correcta y rpidamente el animal
permanecer consciente con los consiguientes
dolor y angustia. Se debe dejar primero
inconsciente al animal por aturdimiento o con
anestesia. Este mtodo debe ser realizado por
personal competente.

2.2.2 Congelacin rpida

La congelacin rpida se ha utilizado para
minimizar la actividad enzimtica, para
posteriores estimaciones bioqumicas de tejidos.
Las tcnicas implican: (a) inmersin del animal
intacto en nitrgeno lquido; (b) decapitacin e
inmersin inmediata de la cabeza en nitrgeno
lquido; (c) congelacin forzada; congelacin in
situ y tnel congelador. Antes de cualquier
mtodo de congelacin hay que dejar a los
animales totalmente anestesiados,
insensibilizados o decapitados, ya que se ha
visto que se puede tardar de 10 a 90 segundos
en congelar las estructuras profundas por la baja
conductividad trmica de los tejidos que rodean
al cerebro. Slo es aceptable bajo determinadas
circunstancias cuando el diseo experimental
necesita este tratamiento en animales muy
pequeos, como embriones, roedores y conejos
neonatos (Green 1987, Van Zutphen et al.
1993). El personal que realice estas tcnicas
debe estar bien entrenado y necesita
equipamiento especial.

2.2.3 Exanguinacin

Slo se llevar a cabo la exanguinacin total
despus de dejar insensible al animal por otro
mtodo, debido al estrs asociado con la
hipovolemia extrema, y el dolor producido al
incidir vasos sanguneos profundos. No se debe
exanguinar a un animal de modo que otros
animales puedan verlo u olerlo, utilizando otra
habitacin cuando sea posible. No es un mtodo
aceptable para el sacrificio de aves, debido a la
tendencia de su sangre a formar cogulos, lo
que resulta una exanguinacin incompleta y por
ello una eutanasia inadecuada. Tampoco es
aceptable para reptiles y otros vertebrados
poiquilotermos por su bajo metabolismo y su
tolerancia a la hipoxia.

2.2.4 Nitrgeno/argn

El nitrgeno o el argn desplazan el O
2
y
producen la muerte por hipoxia. Al 39% de
concentracin, las ratas quedan inconscientes
pero no hasta los 3 minutos, mostrando signos
de pnico y angustia (Andrews et al. 1993). En
animales jvenes produce inconsciencia pero no
la muerte. En perros y gatos la aparicin de la
inconsciencia tarda 1-2 minutos, con hiperpnea
unos diez segundos antes del colapso (Herin et
al. 1978, Quine 1980, Quine et al. 1988,
Rowsell 1981, 1990). Por ello, no es un mtodo
aceptable a menos que el animal este
anestesiado.

2.2.5 Etanol

Este mtodo, descrito por Lord, (1989, 1991)
consiste en la inyeccin intraperitoneal en
ratones de 500 l de etanol al 70%. El etanol
produce depresin del sistema nervioso central.
Los ratones manifiestan una gran prdida de
control muscular, antes de entrar en coma,
seguido de una parada respiratoria. Puede haber
irritacin del peritoneo. Wallgren y Barry III
(1970) establecieron que es irritante a
concentraciones superiores al 10%
peso/volumen y que la mortalidad se debe a
trauma inespecfico. No es aceptable para la
eutanasia en vertebrados, a menos que estn
anestesiados.

2.2.6 Hidrato de cloral

Acta por depresin lenta del sistema nervioso
central. No es aceptable su uso por si solo, ya
que carece de efectos analgsicos, tarda mucho
en hacer efecto, produce movimientos en el
animal estticamente cuestionables, se necesitan
grandes volmenes y causa irritacin en el
peritoneo (Breazile & Kitchell 1969, Hatch
1982). Se puede utilizar para grandes animales
por va intravenosa bajo anestesia, (Lumb 1974)
o en combinacin con sulfato magnsico o
pentobarbital sdico (Olfert et al. 1993).

2.2.7 Cloruro potsico

El in potasio es cardiotxico. El cloruro
potsico produce jadeo, vocalizaciones,
espasmos musculares y episodios convulsivos
(Lumb 1974). Adems no es agradable para el
observador. No es aceptable para eutanasia a
menos que el animal este totalmente
anestesiado.

2.2.8 Embolia gaseosa

Consiste en la inyeccin intravenosa de 5 a 50
ml/kg de aire. Se ha usado ocasionalmente en
conejos (Weisbrod et al. 1984). Se puede
acompaar de convulsiones, opistotonos y
vocalizaciones (Hatch 1982). Es un mtodo
muy doloroso y poco fiable y no es aceptable a
menos que el animal este totalmente
anestesiado.

2.3 Mtodos que no son aceptables para
eutanasia

2.3.1 Descompresin/vaco

Este mtodo acta por induccin de hipoxia
cerebral. Puede haber efectos fsicos adversos
debidos a los gases atrapados en las cavidades
corporales (por ejemplo senos, trompas de
eustaquio) al expandirse, lo que puede causar
dolor intenso y molestias antes de quedar
inconsciente el animal (Von Cranach et al.
1991a). Existe adems la posibilidad de fallo
del equipo, resultando una rpida recompresin
con dolor intenso y angustia en los animales. El
animal inconsciente puede hincharse, sangrar,
vomitar, convulsionarse, orinar y defecar y es
estticamente desagradable para el observador
(Booth 1978, Hatch 1982 ). Tambin puede
tardar algn tiempo hasta quedar inconsciente
(Barber 1972). Por estas razones no es
aceptable como mtodo de eutanasia.

2.3.2 Hipotermia

La hipotermia consiste en sacrificar a los
animales exponindolos a muy bajas
temperaturas, como por ejemplo en los
ultracongeladores. Se sabe que la hipotermia
acta como un agente anestsico hasta cierto
punto (Phifer & Terry 1986). Sin embargo, no
es un mtodo de eutanasia aceptable para
ningn animal. Slo se pueden utilizar los
ultracongeladores para asegurar la muerte una
vez que el animal este totalmente inconsciente y
sea improbable que se recupere (Summerfelt &
Smith 1990).

2.3.3 Hipertermia

Se ha sugerido para algunos vertebrados
poiquilotermos la elevacin de la temperatura
con el fin de sacrificarlos, ya que morirn por
encima de su temperatura critica, la cul puede
ser de solamente unos grados por encima de su
rango de actividad normal, pero esto no es
aceptable. Los animales nunca sern
introducidos en agua hirviendo ya que causa un
dolor intenso y una muerte lenta.

2.3.4 Ahogamiento/extraccin del agua

El ahogamiento no es un mtodo humanitario de
eutanasia para ningn vertebrado ya que es
lento, produce estrs intenso y ansiedad por la
hipoxia. No es aceptable el sacar del agua a los
vertebrados con agallas (incluyendo los
renacuajos) ( Kestin et al. 1991).

2.3.5 Rotura de cuello

Se ha utilizado algunas veces este mtodo para
sacrificar aves. Se presiona el cuello del ave de
pequeo tamao contra una barra, tambin
pueden usarse alicates especiales o calibres para
hueso. Sin embargo, esto slo produce parlisis
por la destruccin de la mdula espinal y no
daa al cerebro con la posibilidad consiguiente
de mantener la consciencia con dolor, temor y
angustia. Este mtodo no es aceptable para la
eutanasia de aves ni de ningn animal.

2.3.6 Estrangulamiento

Este no es un mtodo aceptable para sacrificar
ningn animal, debido al tiempo que tarda en
quedar inconsciente, el dolor, la excesiva
ansiedad y el estrs que producira.

2.3.7 Protxido de nitrgeno
Son necesarias concentraciones hipxicas de
casi el 100% para conseguir la eutanasia y es de
actuacin lenta causando por ello estrs
innecesario. El animal se convulsionar despus
de perder la consciencia, lo que reduce la
aceptabilidad para el observador. No es un
agente eutansico aceptable. Sin embargo, se
puede utilizar con otros agentes para acelerar el
comienzo de la anestesia.

2.3.8 Ciclopropano

El ciclopropano es un mtodo humanitario de
eutanasia para la mayora de los animales de
laboratorio, ya que produce una anestesia rpida
y profunda. Sin embargo, es inflamable con aire
y explosivo con oxgeno, lo que lo hace
peligroso para el tcnico. Esto reduce su
aceptabilidad como agente para eutanasia.

2.3.9 ter (ter dietlico)

El ter es irritante para las membranas mucosas
y a concentraciones altas, habitualmente
encontradas en el interior de los contenedores y
campanas, puede ser estresante para los
animales, ya que eleva las catecolaminas
(Blackshaw et al. 1968, Breazile & Kitchell
1969, Green 1987 ). Si se utiliza con un
vaporizador resulta menos irritante (Baumans,
comunicacin 1995). A altas concentraciones
eleva significativamente algunos parmetros
bioqumicos sanguneos (por ejemplo glucosa ).
Es peligroso para el tcnico por sus propiedades
explosivas. No es un mtodo aceptable de
eutanasia.

2.3.10 Cloroformo

Acta deprimiendo el sistema nervioso central y
produce fallo cardiaco y respiratorio. No es
aceptable como agente eutansico ya que es
hepatotxico, nefrotxico y carcinognico para
el tcnico y para otros animales. Antes de la
prdida de consciencia produce excitacin
(Breazile & Kitchell 1969). Concentraciones
traza introducidas en centros de cra han
mostrado interferir seriamente con los
programas de cra en roedores (Green 1987).

2.3.11 Metoxiflurano

El metoxiflurano se utiliza habitualmente como
agente anestsico, pero es de actuacin muy
lenta y existe una gran probabilidad de
recuperacin total incluso despus de veinte
minutos de sobredosis. Es difcil de obtener en
Europa.

2.3.12 Tricloroetileno

Debido a que el tricloroetileno es
principalmente un agente analgsico y produce
solamente anestesia ligera no es aceptable como
agente para eutanasia. Es carcinognico,
produce hipercapnia y es peligroso para el
tcnico.

2.3.13 Gas Cianhdrico

El gas cianhdrico bloquea la captacin de
oxigeno, causando dificultades respiratorias y
convulsiones violentas antes de comenzar la
inconsciencia y la muerte (Hatch 1982). Es
adems muy peligroso para el tcnico. No es
aceptable para la eutanasia de ningn animal.

2.3.14 2-fenoxietanol

Este agente esta diseado como antibitico para
peces, pero administrado en cantidades
suficientemente grandes puede matar. Las dosis
deben ser altas y la muerte puede ser lenta,
incrementando de ese modo el angustia en el
pez. En algunos peces produce hiperactividad
antes de la anestesia (Summerfelt & Smith
1990). Su descomposicin qumica en el agua
es muy lenta, lo que hace muy difcil su
eliminacin ya que sera peligroso para el
medioambiente si se vertiese por el
alcantarillado, porque puede matar a las
bacterias de los sistemas de depuracin de aguas
residuales. No es aceptable para la eutanasia de
peces.

2.3.15 Uretano

Se pueden colocar los animales en una solucin
de uretano al 1-2%. Se utiliza habitualmente
como anestsico. Sin embargo, es muy
carcinognico y debido al potencial peligro para
el tcnico y los problemas de su eliminacin
segura no es aceptable (Summerfelt & Smith
1990).

2.3.16 Agentes bloqueantes
neuromusculares

Bajo ninguna circunstancia se utilizaran para
eutanasia agentes bloqueantes
neuromusculares y otros agentes que no
induzcan prdida de consciencia previa a la
muerte.

2.3.17 Ketamina

La ketamina no se considera aceptable como
agente nico para eutanasia, ya que serian
necesarios grandes volmenes. En conejos se
producen potentes convulsiones y
vocalizaciones que lo hacen estticamente
inaceptable ( Baneux et al. 1986, Reilly 1993).
Puede ser aceptable usado junto con xilacina.

2.3.18 Sedantes

Los sedantes no son aceptables como agentes
eutansicos debido a los enormes volmenes
que seran necesarios para producir la muerte.

2.3.19 Sulfato magnsico

Se ha utilizado slo o junto con pentobarbital
sdico a 80 mg/kg. Es un agente bloqueante
neuromuscular y un depresor del miocardio, no
un depresor del sistema nervioso central (Hatch
1982, Olfert et al. 1993). Se requieren grandes
volmenes y los animales pueden mostrar
espasmos musculares, episodios convulsivos,
vocalizaciones, respiracin jadeante y
defecacin antes de morir (Breazile & Kitchell
1969). El animal permanece consciente hasta
que el cerebro sucumbe a la anoxia anoxmica.
Carece de efectos analgsicos o anestsicos y
por ello no es aceptable como agente nico.

2.3.20 Otros anestsicos inyectables

Se puede inducir la eutanasia con muchos otros
agentes, (ejemplo: alfaxolona/alfadolona ,
propofol) pero debido a que estos agentes
poseen un margen de seguridad relativamente
amplio, se necesitaran dosis muy altas
reduciendo su aceptabilidad.

2.3.21 Otros agentes

Otros agentes que tampoco deben usarse
incluyen nicotina (que produce serios efectos
colaterales antes de la muerte) y estricnina (que
excita el sistema nervioso central y el animal
permanece consciente y con un dolor muy
intenso hasta que muere por asfixia) (Hatch
1982, Lumb 1974 ).

2.4.22 Agentes administrados por va oral

En algunos establecimientos de cra a gran
escala se han aadido agentes al agua de bebida
para la eutanasia masiva de algunos animales.
Existe siempre el riesgo de que algunos
animales no reciban la dosis adecuada y el
tiempo de actuacin es generalmente lento.
Estas sustancias son peligrosas para el tcnico y
no son aceptables para ser utilizadas como
agentes eutansicos.

2.3.23 Analgsicos narcticos

Los derivados opiceos como la morfina y la
etorfina, son depresores del sistema nervioso
central al igual que los analgsicos. Su
sobredosis produce la muerte por depresin de
los centros respiratorios en la mdula. Hay una
gran variabilidad de reacciones en las distintas
especies: algunas enloquecen con dosis grandes
de estas sustancias. Debido a que no hay mucha
informacin acerca de cun humanitarias son
estos frmacos, no son aceptables como agentes
eutansicos.

Lecturas adicionales

Generales

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Recomendaciones para la Eutanasia de los Animales de
Experimentacin: Parte 2

Grupo de Trabajo: Mrs. Bryony Close (Presidencia), Dr. Keith
Banister, Dr. Vera Baumans, Dr. Eva-Maria Bernoth, Dr. Niall
Bromage, Dr. John Bunyan, Profesor Dr. Wolff Erhardt, Profesor
Paul Flecknell, Dr. Neville Gregory, Profesor Dr. Hansjoachim
Hackbarth, Profesor David Morton & Mr. Clifford Warwick

Envo de correspondencia a: Mrs. B Close, Battleborough Croft, Battleborough Lane,
Brent Knoll, Highbridge, Somerset TA9 4DS, UK

Este documento fue elaborado para la DGXI de la Comisin Europea, para ser utilizado con la Directiva
86/609/EEC del 24 de Noviembre de 1986, relativa a la aproximacin de las disposiciones legales,
reglamentarias y administrativas de los Estados Miembros respecto a la proteccin de los animales
utilizados para experimentacin y otros fines cientficos (N L358, ISSN 0378-6978). Se refiere
especialmente al Artculo 2(1) publicado por la Comisin Europea en Octubre de 1995, que define el
mtodo de sacrificio humanitario como el sacrificio de un animal con el mnimo sufrimiento fsico y
mental , dependiendo de las especies .

Esta es la segunda parte del informe del
grupo de trabajo y engloba la Seccin 3
del informe, la lista de todas las
referencias citadas en ambas partes y los
detalles de los materiales para formacin
La primera parte, que comprende las
Secciones 1 y 2 del informe, junto con
una revisin bibliogrfica, se public en el
ejemplar de Laboratory Animals de
Octubre de 1996 (30: 293-316).

Se puede disponer de las reimpresiones del
informe en ingls, que combinan ambas
partes, cursando la solicitud a:

Mrs. S E Wolfensohn, Supervisor of
Veterinary Services, University of Oxford,
Veterinary Services, c/o University
Laboratory of Physiology, Parks Road,
Oxford OX1 3PT, UK.

(Tel: +44(0)1865-272545,
Fax: +44(0)1865-272118)

Email: sarah.wolfensohn@vet.ox.ac.uk

Contenido de la Parte 2

3 Mtodos de eutanasia para cada grupo de
especies 2

3.1 Peces 2

3.2 Anfibios 6

3.3 Reptiles 8

3.4 Aves 11

3.5 Roedores 15

3.6 Conejos 18

3.7 Carnvoros: perros, gatos
y hurones 21

3.8 Grandes mamferos: cerdos,
ovejas, cabras, ganado vacuno,
caballos 24

3.9 Primates no humanos 27

3.10 Otros animales no utilizados
habitualmente para experimentos 27

Referencias 28

Materiales de entrenamiento para eutanasia 31
2

3 Mtodos de eutanasia para cada
grupo de especies

Antes de tener en cuenta esta seccin, se debe
consultar la Seccin 1.

3.1. Peces

Hay ms de 20.000 especies de peces con formas de
vida enormemente variables, lo que hace muy
difcil generalizar sobre mtodos de eutanasia. Los
mtodos que se indican a continuacin pretenden
ser una gua y el tcnico debe valorar cual es el
mejor mtodo para las especies que se deban
sacrificar o solicitar informacin a los expertos. Se
presenta un resumen en la Tabla 2. Aunque los
peces no tengan las mismas vas espinotalmicas
que los mamferos para la percepcin del dolor,
existen pruebas de que efectivamente sienten el
dolor y por este motivo deben ser sacrificados con
el mismo cuidado y consideracin.
Todos los peces son sensibles a los cambios en los
parmetros fsicos y qumicos del agua en la que
viven (especialmente la temperatura, los niveles de
gases disueltos, la salinidad, el pH, etc.) pero unas
especies son mucho ms tolerantes que otras a los
cambios en alguno de estos parmetros. Por ello, a
menos que se conozca la respuesta de las especies,
es recomendable realizar la eutanasia en el mismo
tipo de agua que sea habitual para la especie. Si hay
que utilizar sustancias, se reducir el nivel de agua
para asegurar una sedacin rpida, pero no
demasiado para no producir angustia antes de
aadir el agente. La dosificacin es siempre
preferible a la inyeccin ya que esta ltima implica
manipulacin del pez y esto le producira estrs.
Puede ser necesario que los peces ayunen entre 24-
48 h antes de la eutanasia qumica, ya que esto
permitir una absorcin ms rpida por el intestino
y minimizar el riesgo de regurgitacin que podra
reducir el efecto de las sustancias qumicas sobre
las lminas de las agallas (Brown 1988). Los
tanques que se utilicen deben permitir al tcnico
observar los peces y reaccionar rpidamente si hay
signos de sufrimiento. En general el enfriamiento
del agua reduce los procesos metablicos y
locomotores, facilitando as su manipulacin, pero
resulta esencial tener en cuenta la temperatura
habitual del pez y su grado de tolerancia. Es
importante sealar tambin que en los peces de
agua salada se forman cristales de hielo dentro de
las clulas antes de que se congele el agua marina,
lo que producira un dolor muy intenso en el pez.
En los peces de agua dulce, se producir antes la
congelacin del agua que la formacin de cristales
internos. Sin embargo, hay que tener presente que
el enfriamiento no reduce la capacidad de sentir
dolor.
La sobreexposicin a un anestsico se manifiesta
primeramente por el cese de los movimientos
respiratorios, seguido de la sobreeextensin
espasmdica o ensanchamiento de los oprculos. Al
principio, estos procesos se producen cada 15-30
segundos y despus a intervalos ms largos.
Cuando los intervalos entre espasmos son
aproximadamente de 1 minuto, en pocos minutos se
producir la parada cardiaca y la muerte (Tabla 1).

Reconocimiento y confirmacin de la muerte

Se puede reconocer la muerte por el cese de la
respiracin (movimiento opercular) y el cese del
latido cardiaco (palpacin). Cuando sea posible, se
debe confirmar la muerte por destruccin del
cerebro.

Larvas

Los peces se pueden clasificar en ovparos,
ovovivparos o vivparos, dependiendo de si
producen huevos que eclosionan fuera del cuerpo,
si los huevos eclosionan dentro del cuerpo o si
expulsan individuos jvenes e independientes
(larvas).

Tabla 1 Fases de la prdida de consciencia,
conducentes a la muerte en peces (segn
McFarland y Klontz, 1969)

(VER PG. 33)

3
Para simplificar, se considera que se debe proteger
a todos los peces desde que eclosionan y los
mtodos de eutanasia recomendados para adultos se
consideran aceptables para las larvas. Los peces
vivparos hay que tratarlos por inmersin o
inyectando al progenitor.

Adultos

Los detalles adicionales sobre estos mtodos se
pueden encontrar en la seccin 2.

Mtodos fsicos

Concusin Esta tcnica implica un golpe en la
parte trasera de la cabeza y, si lo realiza personal
experimentado, es un mtodo humanitario de
eutanasia. Se debe confirmar la muerte destruyendo
el cerebro.

Dislocacin cervical Consiste en romper la
espina dorsal cerca de la cabeza. Los peces
pequeos y medianos se pueden sacrificar
insertando un palo o el pulgar en la boca,
inmovilizando el pez con la otra mano y
desplazndolo dorsalmente (Clifford 1984). Es
factible y eficaz en peces pequeos, pero se debe
confirmar la muerte por exanguinacin o
destruccin del cerebro. El estrs producido por la
manipulacin reduce la aceptabilidad de este
mtodo. No es posible ni humanitario en peces
grandes.

Maceracin Los peces pequeos, de menos de 2
cm de longitud, se pueden sacrificar
humanitariamente introducindolos en una unidad
de eliminacin de residuos.

Mtodos qumicos

Se pueden administrar los agentes disolviendo los
productos qumicos en el agua del tanque. A
menudo la temperatura del agua altera la eficacia
del frmaco y la induccin es generalmente ms
rpida a temperaturas ms altas. Sin embargo, no se
debe elevar la temperatura hasta niveles que puedan
provocar estrs a los peces. Tambin se pueden
administrar las sustancias por va intramuscular o
intraperitoneal. Generalmente se utilizan para la
eutanasia agentes anestsicos al doble o al triple de
la dosis anestsica recomendada. En todos los casos
debe confirmarse la muerte destruyendo el cerebro.

Tricana metano sulfonato (MS-222
tamponado) Acta deprimiendo el Sistema
Nervioso Central. Es un frmaco del tipo
benzocana y es el mtodo ms eficaz para
sacrificar a la mayora de los peces. Es soluble tanto
en agua dulce como salada. Sin embargo, es caro y
eso puede limitar su empleo, especialmente si hay
que sacrificar un gran nmero de peces. Hay que
aadir bicarbonato, imidazol, fosfato cido de sodio
o hidrxido sdico para neutralizar el agua (a pH
7.5) para reducir la irritacin y el dao tisular. Para
incrementar su efectividad puede utilizarse junto
con quinaldina o sulfato de quinaldina.

Benzocana (etil aminobenzoato) Acta de un
modo similar al MS-222, pero su eficacia es pH-
independiente. Sin embargo, debido a que baja el
pH del agua, debe tamponarse a pH 7.5. El tiempo
de descomposicin en agua es de unas cuatro horas,
haciendo que esta sustancia sea aceptable en cuanto
a la contaminacin medioambiental se refiere.
Antes de aadirla al agua hay que disolverla en
acetona ya que no es hidrosoluble.

Etomidato Es un potente agente de base
imidazlica sin propiedades analgsicas. Es muy
soluble en agua. Las mediciones de las hormonas
del estrs en peces han indicado que con el
etomidato se pueden dar menos problemas que con
el MS-222 (Zwart et al. 1989) y por ello se le
considera aceptable para la eutanasia de peces.

Metomidato Es un agente hipntico no
barbitrico, de estructura imidazlica, que no tiene
propiedades analgsicas. Utilizado en sobredosis,
est considerado como aceptable para el sacrificio
de la mayora de las especies de peces.

Quinaldina (2-metilquinolina) Es difcil de
obtener en Europa pero se utiliza frecuentemente en
USA para eutanasia humanitaria. Las dosis
recomendadas para eutanasia varan dependiendo
de las especies, temperatura y dureza del agua. Se
acumula en los tejidos lipdicos como el cerebro y
deprime los centros sensoriales del sistema nervioso
central. El sulfato de quinaldina tambin se
considera aceptable como un agente eutansico
eficaz para peces.

Halotano Puede ser burbujeado en el tanque y
produce anestesia. Se debe confirmar la muerte por
destruccin del cerebro.

Agentes inyectables Se pueden usar los
barbitricos, pero como la extraccin del agua y
manipulacin implican estrs, son preferibles otros
mtodos. Se recomienda la va intraperitoneal.
4
Mtodos aceptables para peces
inconscientes

Insercin de aguja (Pithing) En peces
pequeos se puede usar este mtodo, consistente en
introducir una pa metlica en la parte superior de
la cabeza entre los ojos, movindola hacia delante y
hacia atrs para destruir el cerebro y el extremo
proximal de la mdula espinal. Este mtodo
solamente se debe utilizar en animales
inconscientes. Se considera aceptable este mtodo
cuando los mtodos qumicos no son adecuados
para el estudio.

Decapitacin sta es posible en peces pequeos,
pero resulta problemtica en peces de mayor
tamao. Slo debe llevarse a cabo la decapitacin
de los peces previamente anestesiados o aturdidos,
ya que existen algunas dudas acerca de la
inmediata prdida de consciencia. Investigaciones
con anguilas, han puesto de manifiesto, que el
cerebro todava estaba en funcionamiento 35
minutos despus de la decapitacin (Verheijen &
Flight 1995) y por ello el cerebro debe ser destruido
inmediatamente. Este mtodo es aceptable
solamente si no se consideran adecuados otros
mtodos y bajo las limitaciones antes mencionadas.
La seccin transversal espinal (corte en el cuello)
tampoco es aceptable, excepto con peces
insensibles (Flight & Verheijen 1993).

Exanguinacin No est considerada como un
mtodo aceptable de eutanasia, ya que es muy lenta
y resulta muy difcil localizar las venas, a menos
que el animal est insensible.

Mtodos no aceptables para la eutanasia
de peces

Extraccin del agua Esto produce angustia y
sufrimiento debido al largo periodo de tiempo que
tardan en quedar inconscientes. Este periodo se
prolonga considerablemente si se baja la
temperatura. No es un mtodo aceptable para la
eutanasia de peces (Kestin 1993, Kestin et al.
1991).

Aplastamiento de todo el cuerpo No se
considera un mtodo humanitario de eutanasia.

Aturdimiento elctrico (electrical stunning)
Si no se utiliza un circuito aislado, podra ser
peligroso para el tcnico. El aturdimiento elctrico
no funciona con todos los peces (por ejemplo:
anguilas) y utilizado por s solo no es
necesariamente letal (puede que slo aturda a los
peces de mayor tamao). La corriente alterna
estimula la contraccin de la musculatura
esqueltica, cardiaca y lisa, e induce tetania, no
anestesia (Summerfelt & Smith 1990). Aunque es
utilizado por expertos en las piscifactoras, a
menudo para atrapar peces, no se considera
aceptable para eutanasia, en condiciones de
laboratorio.

Hipotermia La introduccin de los peces en un
congelador o en hielo picado, prolonga el periodo
de consciencia, y no reduce la capacidad de sentir el
dolor. Por este motivo, no se debe utilizar como
mtodo de eutanasia.

Hipertermia Cuando se colocan peces en agua
caliente cerrarn fuertemente los oprculos,
disponiendo de ese modo de una reserva de oxgeno
que prolonga su periodo de consciencia. El agua
hirviendo producir un dolor extremo. Por este
motivo este mtodo no debe utilizarse para el
sacrificio de peces de ningn tipo.

2-Fenoxietanol Se usa principalmente como
antibitico pero tambin se utiliza como agente
anestsico. Se necesitan dosis enormes para
conseguir la muerte y, adems, tiene un largo
periodo de induccin. Algunas especies manifiestan
hiperactividad previa a la prdida de consciencia.
No se considera aceptable para ser utilizado en la
eutanasia de peces.

Dixido de carbono No es aceptable para la
eutanasia de peces ya que causa actividad intensa
previa a la prdida de consciencia y es de actuacin
lenta.

ter dietlico No se debe utilizar debido que
provoca la irritacin de las membranas mucosas, as
como al peligro que comporta para el tcnico.

Secobarbital y amobarbital Ambos tienen la
desventaja de un periodo de induccin demasiado
largo.

Uretano Es carcinognico y por ello
extremadamente peligroso para el tcnico.

Hidrato de cloral Posee un largo periodo de
induccin y slo acta como sedante.

Alcohol amlico terciario Produce irritacin
durante la induccin.
5
Tribromoetanol Es irritante y posee un periodo
de induccin largo.

Clorbutanol Tiene la desventaja de requerir un
amplio rango de dosis para las distintas especies.

Metil pentinol Produce estrs por parada
respiratoria.

Piridinas Son peligrosas para el tcnico.

3.2. Anfibios

Hay muchas especies de anfibios, lo que dificulta
generalizar sobre mtodos de eutanasia. Se presenta
un resumen en la tabla 3. Su piel es fina y est
protegida por una cutcula que contiene numerosas
glndulas mucosas. La consecuencia de esto es que
son generalmente ms sensibles a las agresiones
fsicas y qumicas que otros vertebrados. Debido a
que los anfibios son poiquilotermos (de sangre fra)
y por ello acostumbrados a las fluctuaciones de su
temperatura corporal, su sistema nervioso central
(SNC) es menos sensible a la hipoxia y a la anoxia.
Incluso cuando se interrumpe el riego sanguneo a
los nervios craneales y al cerebro, estos animales
son capaces de responder a estmulos durante algn
tiempo. Aunque la decapitacin, por s sola, no
produce inconsciencia rpida en las cabezas
separadas de los anfibios, la rpida destruccin del
cerebro elimina realmente las respuestas que
habitualmente se entiende que indican consciencia.
Sin embargo, hay un conjunto de respuestas
somticas a los estmulos que se mantienen intactas
movimientos corporales mantenidos mucho
tiempo, retirada de las extremidades como respuesta
a estmulos de presin aplicados en los dedos, etc.,
as como un latido cardiaco que sigue en muchos
casos durante horas despus de la destruccin del
cerebro. Esta continuacin de la actividad somtica
se atribuye a:

(1) tolerancia prolongada a la hipoxia y a las
condiciones de hipotensin de la mdula espinal,
nervios perifricos y musculatura (lisa, cardiaca y
esqueltica) y
(2) un grado de integracin mucho mayor de las
respuestas somticas a nivel de la mdula espinal
en lugar de en el cerebro. (UFAW/WSPA 1989)

Tabla 2 Caractersticas de los mtodos de eutanasia en peces

Agente

Rapidez

Eficacia

Facilidad
de uso

Seguridad
del tcnico

Valoracin
esttica

Valoracin
general
(1-5)

Observaciones
MS-222
++ ++ ++ ++ ++ 5
Aceptable
Benzocana
++ ++ ++ ++ ++ 5
Aceptable
Etomidato
++ ++ ++ ++ ++ 5
Aceptable
Metomidato
++ ++ ++ ++ ++ 5
Aceptable
Concusin
++ + + ++ - 4
Se debe confirmar la muerte
Maceracin
++ ++ ++ ++ + 4
Slo para peces de menos de 2 cm
de longitud
Quinaldina
++ ++ ++ + ++ 4
Difcil de obtener en Europa
Pentobarbital
sdico
++ ++ - + ++ 3
Puede ser til para peces grandes,
inyeccin intraperitoneal
Dislocacin
cervical
++ ++ + ++ - 3
No en peces grandes. Debe ser
seguida de destruccin del cerebro
Halotano

+ + ++ ++ ++ 2
Son preferibles otros mtodos. Se
debe confirmar la muerte

Los siguientes mtodos slo pueden utilizarse con peces inconscientes: insercin de aguja, decapitacin y exanguinacin

Los siguientes mtodos no hay que usarlos para sacrificio de peces: extraccin del agua, aplastamiento de todo el cuerpo,
aturdimiento elctrico, hipotermia, hipertermia, 2-fenoxietanol, dixido de carbono, ter dietlico, secobarbital, amobarbital,
uretano, hidrato de cloral, alcohol amlico terciario, tribromoetanol, clorbutanol, metil pentinol, piridinas.

Rapidez: ++ muy rpido, + rpido, - lento. Eficacia: ++ muy eficaz, + eficaz, - no es efectivo. Facilidad de uso: ++ fcil de utilizar, + requiere
prctica, - requiere entrenamiento de especializacin. Seguridad para el tcnico: ++ sin riesgo, + riesgo pequeo, - peligroso. Valoracin esttica: ++
estticamente bueno, + aceptable para la mayora, - inaceptable para muchos. Valoracin general: de 1 a 5, siendo el 5 el ms recomendable

6

Se puede reconocer la muerte por el cese del latido
cardiaco y de la respiracin y, cuando esto no sea
obvio, se puede confirmar por destruccin del
cerebro.

Larvas

Los renacuajos y los tritones se pueden sacrificar
eficazmente colocndolos en un plato de agua con
MS-222 o benzocana (disuelta en acetona). Estos
producen anestesia rpida, y a continuacin la
muerte.

Adultos

Se pueden encontrar detalles adicionales sobre los
mtodos en la Seccin 2.
Cuando se manipulen estas especies, es importante
conseguir una sujecin firme, por ejemplo llevando
guantes de textura rugosa pero no abrasivos o
sujetndolos en un pao spero. Bajar la
temperatura hasta 3-4 C reducir los procesos
metablicos y locomotores, facilitando de ese modo
la manipulacin previa a la eutanasia. Sin embargo,
hay que tener presente que el enfriar no reduce la
capacidad de sentir dolor (UFAW/WSPA, 1989).

Mtodos fsicos

Concusin Este mtodo, si es llevado a cabo por
una persona que est bien entrenada en esta tcnica,
es un modo eficaz y humanitario de aturdir a todos
los anfibios. Hay que sujetar las patas traseras y
golpear la superficie dorsal de la cabeza contra un
objeto duro, macizo. A modo de alternativa, se
puede golpear la superficie dorsal de la cabeza con
un instrumento adecuado. Es esencial la precisin
para asegurar una inconsciencia y muerte
inmediatas. Despus de la concusin hay que
asegurar la muerte destruyendo el cerebro.

Microondas Es un mtodo de eutanasia
extremadamente rpido pero slo debe llevarse a
cabo por personal experimentado que conozca
exactamente donde deben dirigir el haz de calor.
Slo se pueden utilizar aparatos especiales,
diseados con este propsito. Bajo ninguna
circunstancia se utilizarn aparatos microondas
para el hogar. No se considera un mtodo rutinario
de eutanasia.

Aturdimiento elctrico Las ranas insensibilizadas
por medios elctricos pueden recuperarse despus
de 10 minutos, pero si a continuacin se destruye
inmediatamente el cerebro, se puede considerar
como un mtodo aceptable de eutanasia.

Mtodos qumicos

Las sustancias se administran mejor disolvindolas
en el agua donde estn los anfibios. Esto reduce el
estrs que producen la manipulacin y la inyeccin.

Tricana metano sulfonato (MS-222
tamponado) ste es un mtodo rpido, no
irritante y humanitario para el sacrificio de anfibios,
cuando se disuelve en el agua en la que estn. Se
recomienda neutralizar la solucin con bicarbonato
para reducir el efecto irritante sobre la piel sensible
de los anfibios.

Benzocana Disuelta en el agua en la que estn
los anfibios la benzocana es una sustancia eficaz,
actuando rpida y humanitariamente sobre el SNC.
Como la benzocana no es soluble en agua, hay que
disolverla primero en acetona. Hay que neutralizar
la solucin para evitar la irritacin, dado que la
benzocana reduce el pH.

Pentobarbital sdico Cuando se inyecta esta
sustancia por vas intravenosa o intraperitoneal
acta rpidamente sobre el SNC, dejando al animal
inconsciente sin apenas producirle angustia. Sin
embargo, slo debe llevarlo a cabo personal
experimentado que asegure la inyeccin en el lugar
correcto y una mnima manipulacin.

T-61 Inyectado por va intravenosa, o en el saco
linftico dorsal en el caso de las ranas, esta
sustancia es eficaz y humanitaria para la eutanasia
de anfibios.

Mtodos aceptables para anfibios
inconscientes

Insercin de aguja (Pithing) Asegura la rpida
destruccin del cerebro, lo que produce una
inconsciencia inmediata. Este es un mtodo rpido
y humanitario para el sacrificio de anfibios si es
llevado a cabo por tcnicos bien entrenados y con
experiencia. Este mtodo debe realizarse solamente
con animales inconscientes. En algunas especies es
difcil curvar la cabeza hacia delante para exponer
el espacio atlanto-occipital por lo que en estos casos
son preferibles otros mtodos.
7
Decapitacin Es aceptable solamente en
anfibios insensibles ya que no se conoce el tiempo
que tardan en quedar inconscientes debido a que su
sistema nervioso es muy tolerante a la anoxia.

de anfibios

Hipotermia sta dejara al animal aletargado pero
no reduce el dolor. La congelacin no es aceptable,
debido a que la formacin de cristales dentro de los
tejidos corporales es probable que sea
extremadamente dolorosa. La congelacin puede
utilizarse solamente como mtodo para confirmar la
muerte despus de haber utilizado otro mtodo de
eutanasia.

Hipertermia Como mtodo de eutanasia no se
debe arrojar a los anfibios en agua caliente o
hirviendo ya que es extremadamente doloroso e
inhumano.
Exanguinacin Junto con el shock hipovolmico
y la anoxia consiguientes, puede no dejar a los
anfibios inconscientes inmediatamente, lo que hace
que no sea un mtodo aceptable de eutanasia.

Estrangulamiento Se considera inhumana y no
es aceptable para el sacrificio de anfibios.

Dixido de carbono Puede causar irritacin en la
piel, y la induccin requiere demasiado tiempo, por
lo que no se considera un mtodo aceptable de
eutanasia.

ter Es irritante para las membranas mucosas y
debido a que es peligroso para el tcnico, no debe
ser utilizado para el sacrificio de anfibios.

Cloroformo Es hepatotxico y carcinognico y
dado el riesgo que comporta para el personal no
debe utilizarse para eutanasia.

Anestsicos inhalatorios voltiles No se
consideran aceptables ya que actan lentamente y
pueden irritar la piel.

Tabla 3 Caractersticas de los mtodos de eutanasia en anfibios

Agente

Rapidez

Eficacia

Facilidad
de uso

Seguridad
del tcnico

Valoracin
esttica

Valoracin
general
(1-5)

Observaciones
MS-222
++ ++ ++ ++ ++ 5
Aceptable
Benzocana
++ ++ ++ ++ ++ 5
Aceptable
Pentobarbital
sdico
+ ++ - + + 4
Implica manipulacin e inyeccin
por va intravenosa o intraperitoneal
Concusin
++ ++ + ++ - 4
Aceptable para ser utilizado por
personal experimentado
T-61
+ ++ - + + 3
Implica manipulacin e inyeccin
intravenosa
Microondas
++ ++ - + ++ 3
Slo para pequeos anfibios. No es
un procedimiento de rutina
Aturdimiento
elctrico

+ + + - - 2
Debe ser inmediatamente seguido de
la destruccin del cerebro

Los siguientes mtodos slo pueden utilizarse con anfibios inconscientes: insercin de aguja y decapitacin

Los siguientes mtodos no hay que usarlos para sacrificio de anfibios: hipotermia, hipertermia, exanguinacin, estrangulacin,
dixido de carbono, ter dietlico, cloroformo, anestsicos inhalatorios voltiles, hidrato de cloral, clorhidrato de ketamina,
clorbutanol, metil pentinol, 2-fenoxietanol, alcohol amlico terciario, tribromoetanol y uretano

8
Otros agentes no considerados aceptables incluyen:
hidrato de cloral, clorhidrato de ketamina,
clorbutanol, metilpentinol, 2-fenoxietanol, alcohol
amlico terciario, tribromoetanol y uretano.

3.3 Reptiles

Debido a que los reptiles son poiquilotermos (de
sangre fra) y por ello acostumbrados a las
fluctuaciones de su temperatura corporal, su sistema
nervioso central (SNC) es menos sensible a un
descenso en la tensin de oxgeno. Incluso cuando
se interrumpe el riego sanguneo a los nervios
craneales y al cerebro despus de la decapitacin,
estos animales son capaces de responder a
estmulos durante algn tiempo. Aunque la
decapitacin, por s sola, no produce inconsciencia
rpida en las cabezas separadas de los reptiles
(Warwick 1990), la rpida destruccin del cerebro
elimina realmente las respuestas que habitualmente
se cree que indican consciencia. Sin embargo, hay
un conjunto de respuestas somticas a los estmulos
que se mantienen intactas movimientos corporales
mantenidos mucho tiempo, retirada de las
extremidades como respuesta a estmulos de
presin aplicados en los dedos, etc., as como un
latido cardiaco que sigue en muchos casos durante
horas despus de la destruccin del cerebro. Esta
continuacin de la actividad somtica se atribuye a:

(1) tolerancia prolongada a la hipoxia y a las
condiciones de hipotensin de la mdula espinal,
nervios perifricos y musculatura (lisa, cardiaca y
esqueltica) y
(2) un grado de integracin mucho mayor de las
respuestas somticas a nivel de la mdula espinal
en lugar de en el cerebro. (UFAW/WSPA 1989).

Antes de llevar a cabo la eutanasia es importante
utilizar buenas tcnicas de inmovilizacin para
asegurar el mnimo estrs.
Deben tomarse precauciones especiales cuando se
manipulen especies venenosas, como muchos tipos
de serpientes, especialmente cuando no estn
habituadas a ser manipuladas. Para asegurar una
inmovilizacin firme pero no traumtica en la
manipulacin de lagartos y serpientes resulta muy
til utilizar instrumentos almohadillados. El
enfriamiento hasta 3-4 C reducir los procesos
metablicos y locomotores en la mayora de los
reptiles (esta temperatura puede matar algunas
especies tropicales), facilitando de este modo la
manipulacin previa a la eutanasia. Sin embargo,
hay que tener presente que el enfriamiento no
reduce la capacidad de sentir dolor.
En tortugas terrestres, de mar y de agua dulce, la
retraccin de la cabeza y la proteccin del
caparazn pueden dificultar la eutanasia. Para
ayudar a exponer la cabeza se pueden colocar las
tortugas de tierra en agua tibia poco profunda; las
especies marinas grandes se pueden colocar sobre
un armazn inclinado 45 con la cabeza arriba,
induciendo la extensin del cuello; las especies de
caparazn blando se pueden poner sobre su espalda
para inducir la extensin del cuello.
Para facilitar la manipulacin de las especies
acuticas se pueden utilizar guantes de textura
rugosa pero no abrasiva.
En la inmovilizacin de cocodrilos el factor clave
para la seguridad del tcnico, es la inmovilizacin
de las mandbulas y la cola, que slo debe ser
realizada por expertos (UFAW/WSPA 1989).
La tabla 4 contiene un resumen de
recomendaciones.


Dado que es difcil determinar en los reptiles
cuando estn inconscientes o muertos, se
recomienda confirmar la muerte por destruccin del
cerebro. Frecuentemente, pero no siempre, la falta
de reflejo palpebral o de respuesta en la membrana
nictitante, excepto en las serpientes que no poseen
prpados mviles, implica la falta de consciencia.
El rigor mortis y la ausencia prolongada de latido
cardiaco y/o circulacin son indicadores fiables de
la muerte.

Embriones

En el caso de los reptiles hay que considerar dos
estadios diferentes: los huevos y los individuos de
eclosin reciente. A efectos prcticos, a los reptiles
recientemente eclosionados se les puede tratar igual
que a los adultos. Como los reptiles nacen como
individuos totalmente desarrollados (con la
excepcin de no ser capaces de reproducirse), el
sacrificio de embriones en estado de huevo se debe
realizar de un modo humanitario teniendo en cuenta
su potencial desarrollo avanzado. En general los
huevos pueden sucumbir a altas y bajas
temperaturas, pero algunos pueden resistir la
congelacin. No se consideran aceptables la
hipotermia ni la hipertermia por que no se puede
garantizar una muerte humanitaria. El ahogamiento
no se considera humanitario ya que produce la
muerte por anoxia de un modo lento. Los huevos
sin embrin se pueden congelar.
9
Los mtodos recomendados incluyen la rotura del
huevo y el sacrificio de los embriones por inyeccin
de pentobarbital sdico, sobredosis anestsica o
utilizando un mtodo fsico apropiado para destruir
el cerebro, el huevo o la forma de vida temprana.

Adultos

Como la clase Reptilia es variada, es mejor
considerar tres grupos principales: las serpientes y
lagartos (Squamata); tortugas de tierra, marinas y
de agua dulce (Testudines); y cocodrilos y caimanes
(Crocodilia). Los reptiles de mayor tamao pueden
necesitar ser sedados antes de ser sacrificados.
En la Seccin 2 se pueden obtener detalles
adicionales sobre los mtodos.

Mtodos fsicos

Bala cautiva Este mtodo puede utilizarse en
condiciones de laboratorio con relativa seguridad.
Se considera un mtodo aceptable para grandes
reptiles pero slo debe ser llevado a cabo por
expertos que conozcan exactamente donde situar la
pistola. Hay que asegurar cuidadosamente el buen
mantenimiento de la pistola, as como que su
calibre y la longitud del cartucho utilizado sean
adecuados para las especies que se deban sacrificar.
Para asegurar el sacrificio humanitario es necesaria
una buena inmovilizacin. Si la bala atraviesa el
cerebro, matar al reptil, de otro modo puede
aturdirlo solamente. Se debe asegurar la muerte por
destruccin del cerebro.

Concusin Los reptiles pequeos y aquellos con
estructuras seas finas, como algunas serpientes y
lagartos, se pueden dejar inconscientes mediante un
golpe aturdidor. Esto implica golpear la parte
trasera de la cabeza del animal con un instrumento
u objeto duro, ya sea para sacrificar al animal
directamente o para dejarlo inconsciente. Lo ideal
es dar un golpe con una fuerza tal que produzca el
cese de la actividad cerebral. Slo deben realizar
esta tcnica las personas entrenadas y
experimentadas en la manipulacin y sacrificio de
reptiles. La concusin debe estar siempre seguida
de la destruccin del cerebro.

Disparo (Shooting) Es un mtodo eficaz para el
sacrificio de la mayora de los reptiles grandes,
produciendo una destruccin del cerebro rpida y
considerable. Se requiere una gran pericia con el fin
de alcanzar el cerebro a travs de la doble envoltura
que poseen muchos reptiles. Este mtodo puede,
adems, resultar peligroso para el tcnico
y por ello slo se realizar en condiciones de
campo. Para animales grandes, como es el caso de
los cocodrilos adultos, se requiere un rifle de gran
calibre o una escopeta de caza de calibre adecuado.
Es necesario asegurar que el animal no mueva su
cabeza antes de disparar. Los animales del grupo
testudines deben tener su cabeza expuesta e
inmovilizada para colocar el arma con precisin.

Mtodos qumicos

Pentobarbital sdico El pentobarbital sdico es
un mtodo efectivo y humanitario para la eutanasia
de los reptiles. La va intravenosa puede ser
utilizada por personal bien entrenado. Cuando la va
intravenosa sea difcil se puede utilizar la va
intraperitoneal, pero acta ms despacio. No se
inyectar por va intracardiaca o intrapulmonar ya
que estn consideradas dolorosas e irritantes.

Mtodos aceptables para reptiles
inconscientes

Insercin de aguja (Pithing) Slo se puede
llevar a cabo con animales inconscientes y por
personal experimentado.

Decapitacin Slo se puede utilizar si el reptil ha
quedado inconsciente por otros mtodos, como la
concusin, ya que se han registrado largos periodos
de consciencia post-decapitacin (Warwick 1990).

de reptiles

Seccin de la mdula espinal Debido a la
capacidad de los reptiles para resistir la anoxia y la
hipoxemia cerebral, la seccin de la mdula espinal
no es un mtodo aceptable de eutanasia. Se ha visto
que los cocodrilos pueden permanecer conscientes
hasta 1 h 50 minutos despus de la seccin de la
mdula espinal y otros reptiles pueden permanecer
conscientes durante periodos de tiempo parecidos.

Hipotermia Esta dejar al animal entumecido pero
no elevar el umbral del dolor. La formacin de
cristales de hielo dentro de los tejidos corporales es
probable que sea extremadamente dolorosa. La
hipotermia no es un mtodo aceptable de eutanasia.

Hipertermia No se considera aceptable ya que no
se conoce el tiempo que se tarda en llegar a la
inconsciencia. No debe utilizarse nunca agua
hirviendo para sacrificar reptiles.
10
Exanguinacin No se considera humanitaria
debido a la tolerancia de los animales a la hipoxia.

Cloroformo Se ha utilizado para el sacrificio de
tortugas inyectndolo en la cavidad peritoneal,
aparentemente sin efectos indeseables. Se
consideran ms aceptables otros mtodos debido al
trauma potencial en el animal inyectado y al peligro
para el tcnico. El cloroformo es hepatotxico y
carcinognico para el tcnico.

Tricana metano sulfonato (MS-222) Se ha
utilizado inyectndolo por va intramuscular en
serpientes y caimanes. Existe poca informacin
sobre lo humanitario de este mtodo y por ello no
se considera aceptable.

Los reptiles son capaces de aguantar la respiracin
durante un periodo de tiempo relativamente largo y
por ello los mtodos inhalatorios como el ter,
halotano, enflurano, isoflurano y metoxiflurano no
pueden ser considerados factibles ni humanitarios
debido a su lenta induccin. Otros agentes que no
se deben utilizar para el sacrificio de reptiles
incluyen el CO
2
, agentes bloqueantes
neuromusculares, clorhidrato de ketamina (la
induccin es demasiado lenta), hidrato de cloral y
procana.

3.4 Aves

Las aves poseen un sistema respiratorio complejo
que consta de pulmones y numerosos sacos areos
con circulacin de aire en un solo sentido. Esto
puede influir en la tasa de absorcin de agentes
inhalatorios y de ese modo incrementar su
eficiencia.
Se presenta un resumen de recomendaciones en la
tabla 5.


Se pude reconocer la muerte por la ausencia de
signos respiratorios, parada cardiaca y ausencia de
reflejos en la cabeza (esto es, los reflejos de los
nervios craneales mas que los reflejos de la mdula
espinal). Los reflejos que se deben comprobar
deben incluir el pellizco de las barbas o el de
parpadeo. Hay que asegurar la muerte por
destruccin del cerebro o asegurando el cese del
latido cardiaco.

Embriones

Los embriones de ave a partir del estado en el que
se ha desarrollado el tubo neural constituyendo un
cerebro funcional (>50% de la gestacin) se deben
destruir humanitariamente ya que pueden ser
capaces de percibir dolor desde esa etapa. El
mtodo ms empleado habitualmente para la
destruccin de huevos es enfriarlos o congelarlos.
La temperatura que se recomienda es <4 C durante
cuatro horas. Se debe confirmar la muerte por
decapitacin o algn otro mtodo adecuado.
Cuando por necesidad de los estudios el embrin ha
quedado expuesto, la decapitacin est considerada
como un mtodo aceptable de eutanasia, as como
una sobredosis de anestsico.

Tabla 4 Caractersticas de los mtodos de eutanasia en Reptiles

Agente

Rapidez

Eficacia

Facilidad
de uso

Seguridad
del tcnico

Valoracin
esttica

Valoracin
general
(1-5)

Observaciones
Pentobarbital
sdico
++ ++ ++ + ++ 5
Aceptable, pero implica
manipulacin
Bala cautiva
++ ++ ++ + + 5
Aceptable para grandes reptiles
Concusin
+ + + ++ + 4
Debe ser seguido de la destruccin
del cerebro
Disparo
++ ++ ++ - + 4
Slo es aceptable en condiciones de
campo

Los siguientes mtodos slo pueden utilizarse con reptiles inconscientes: insercin de aguja y decapitacin

Los siguientes mtodos no hay que usarlos para sacrificio de reptiles: seccin de la mdula espinal, hipotermia, hipertermia,
exanguinacin, cloroformo, MS-222, ter, halotano, metoxiflurano, isoflurano, enflurano, dixido de carbono, agentes bloqueantes
neuromusculares, clorhidrato de ketamina, hidrato de cloral y procana

11
Tambin se consideran mtodos humanitarios para
el sacrificio de embriones de aves la rotura de las
membranas y la maceracin (en un macerador
diseado con este fin) (Bandow 1987).

Adultos

Los detalles adicionales sobre los mtodos se
pueden encontrar en la Seccin 2.

Mtodos fsicos

Dislocacin cervical La dislocacin cervical, si
se lleva a cabo cerca de la cabeza, produce lesiones
en la regin inferior del cerebro, lo que produce una
prdida de consciencia rpida y sin dolor. Esta debe
estar siempre inmediatamente seguida por la
destruccin del cerebro o por la seccin de los
grandes vasos sanguneos del cuello. Sin embargo,
hay investigaciones que han puesto de manifiesto
que los potenciales visuales evocados pueden
permanecer hasta 30 segundos despus de la
dislocacin, lo que puede indicar ausencia de
insensibilidad (Gregory & Wotton 1990). Por ello,
se consideran preferibles otros mtodos. Este
mtodo no es estticamente agradable ya que los
reflejos se mantienen presentes durante algn
tiempo. No debe utilizarse con aves de ms de 3 kg
o por encima de cierta edad, casos en los que el tirar
del cuello rpidamente resulta difcil. Se puede
utilizar este mtodo con pollitos de un da siempre
que su nmero se mantenga bajo para evitar errores
humanos debidos al cansancio (Jaksch 1981). Se
deben inmovilizar las alas de las aves para evitar el
aleteo involuntario (Clifford 1984).

Maceracin Este mtodo se puede utilizar para
pollitos de hasta 72 horas de vida, utilizando un
aparato especial que contiene cuchillas para el
sacrificio y cuyo funcionamiento mecnico produce
una rotacin muy rpida (Comisin de las
Comunidades Europeas 1993). Slo se debe utilizar
equipamiento diseado con este fin y que cumpla
los estndares de la Directiva del Consejo
93/119/EC. Las cuchillas deben girar a ms de
5.000 r.p.m. Los tcnicos deben estar entrenados en
la utilizacin de este equipamiento y tambin en su
mantenimiento para asegurar que funcione
correctamente en todo momento. La capacidad y el
diseo del aparato deben ser suficientes para
asegurar que los animales sean sacrificados
inmediatamente, sin posibilidad de que puedan ser
lanzados hacia fuera por las cuchillas giratorias.
En los aparatos ms pequeos hay que dejar caer a
los pollitos de uno en uno a travs de un conducto
especial que reduzca las posibilidades de que sean
lanzados al exterior por las cuchillas, pero los
aparatos grandes se han diseado para poder
sacrificar un numero mayor de pollitos
simultneamente, sin el riesgo de ser lanzados hacia
fuera. Para algunos tcnicos este mtodo puede ser
estticamente desagradable. En ningn caso se
deben utilizar aparatos domsticos.

Concusin Se lleva a cabo con un fuerte golpe en
la cabeza y en aves pequeas (<250 gramos) se
puede realizar golpeando la cabeza sobre el canto
de una mesa. Aunque no es agradable
estticamente, si se lleva a cabo de modo correcto
por una persona entrenada y con experiencia en la
tcnica, es rpida y humanitaria. Este mtodo puede
ser aceptable para cantidades pequeas de pollitos
de un da. A menos que se produzca suficiente
lesin en el cerebro dando como resultado la muerte
inmediata, debe ser seguida de la destruccin del
cerebro.

Microondas Las aves pequeas se pueden
sacrificar rpida y humanitariamente por las
microondas emitidas por aparatos especializados
(Zeller et al. 1989). En ningn caso deben utilizarse
aparatos de microondas para el hogar. Los
tcnicos deben recibir entrenamiento especializado
en esta tcnica para garantizar la direccin precisa
del haz de microondas y as una muerte
humanitaria. Este mtodo no debe considerarse
como un mtodo de eutanasia de rutina.

Aturdimiento elctrico El aturdimiento elctrico
se usa habitualmente en los mataderos, pero
generalmente no se considera aceptable para ser
utilizado en al laboratorio, a menos que se haga con
equipamiento especializado, seguridad para el
personal y bajo controles legales. El ave debe
quedar aturdida antes de que se produzca la parada
cardiaca (esto es, que se coloquen los electrodos de
tal modo que se afecte primero al cerebro).

Mtodos qumicos


Dixido de carbono Este mtodo se usa a gran
escala con pollitos de hasta 72 horas (Clifford
1984). Estos pollitos son jvenes y relativamente
insensibles al CO
2
por lo que pueden necesitar
dosis mayores que las aves adultas. Hay que
colocar a los pollitos durante al menos diez minutos
en bolsas no porosas o en contenedores con el
100% de CO
2
utilizando un sistema de alimentacin
para gases. Resulta preferible utilizar un sistema
cerrado que proporciona una induccin ms rpida
12
que los sistemas abiertos. Se debe tener cuidado
para evitar el hacinamiento y se deben monitorizar
y mantener los niveles de CO
2
. Para aves de corral
se puede utilizar el dixido de carbono junto con
argn y oxgeno (Raj & Gregory 1994). El CO
2

produce prdida de consciencia y el argn produce
la muerte por hipoxia. Cuando se sacrifiquen aves
grandes con CO
2
, se debe tener la precaucin de
verificar que la cmara est completamente llena
antes de poner las aves dentro, para asegurar un
nivel uniforme de CO
2
en toda la cmara. Las aves
de ms edad pueden aletear tras la prdida de
consciencia, lo que puede no ser aceptable para
algunos tcnicos.

Anestsicos inhalatorios voltiles Se debe
suministrar aire u oxgeno durante el periodo de
induccin. Con todos estos agentes es necesario
utilizar un sistema apropiado de recogida de gases.

Halotano, Enflurano, Isoflurano Estos agentes
se consideran aceptables para la eutanasia de la
mayora de las aves. Son seguros para el personal si
se utilizan con un aparato de recogida de gases y
son eficaces para producir anestesia y eutanasia.

Monxido de Carbono El monxido de carbono
produce la muerte rpidamente ya que se combina
con los eritrocitos con preferencia al oxgeno,
produciendo de este modo hipoxia. Sin embargo, es
extremadamente peligroso para el personal, debido
a que no se detecta fcilmente y debe ser utilizado
solamente por personal entrenado en esta tcnica y
con un aparato de recogida de gases apropiado.
Slo se debe utilizar para eutanasia CO comprimido
comercial. Se debe confirmar la muerte por
mtodos fsicos.

Agentes inyectables

Pentobarbital sdico Es un mtodo aceptable de
eutanasia para aves de todas las edades. El
pentobarbital sdico produce una muerte rpida y
relativamente libre de estrs si lo utiliza personal
con experiencia. Se debe inyectar por va
intraperitoneal. Algunos tcnicos experimentados
pueden inyectarlo en el foramen magnum en la base
del crneo (intraceflico), con lo que se obtienen
efectos muy rpidos.
T-61 El T-61 es muy eficaz inyectado
intramuscularmente en los msculos pectorales de
aves pequeas. No se debe utilizar en aves mayores
o de corral porque tarda algn tiempo en actuar y
produce convulsiones.

Mtodos aceptables con aves inconscientes

Decapitacin sta reduce la presin sangunea
muy rpidamente, lo que puede producir
inconsciencia, as como trauma masivo a travs de
la mdula a nivel del tronco cerebral, con un efecto
ascendente y descendente sobre la actividad
nerviosa. Sin embargo, el trabajo llevado a cabo por
Gregory y Wotton (1986, 1990) en pollos muestra
que hay potenciales visuales evocados hasta 30
segundos despus de la decapitacin. Se considera
preferible utilizar otros mtodos hasta que nuevas
investigaciones puedan mostrar que las aves quedan
insensibles inmediatamente.

Insercin de aguja (Pithing) No es un mtodo
aceptable a menos que el ave est totalmente
anestesiada.

Nitrgeno Las aves mueren por anoxia. No se
deben sacrificar pollitos de un da con nitrgeno
debido a su capacidad para resistir concentraciones
bajas de oxgeno. Las respuestas de las aves
inconscientes pueden resultar desagradables para el
personal. En general no se considera aceptable el
uso de nitrgeno para la eutanasia de aves a menos
que estn inconscientes.

Cloruro potsico Es cardiotxico, produce
espasmos musculares y ataques convulsivos,
hacindolo de este modo desagradable para el
tcnico. Se puede utilizar solamente una vez que las
aves estn totalmente anestesiadas.

de aves

Rotura de cuello Se presiona el cuello del ave de
pequeo tamao contra una barra, o utilizando
alicates especiales, diseados con este fin. No se
sabe si la rotura del cuello produce inconsciencia
inmediata (Gregory & Wotton 1990). Este mtodo
no se considera aceptable para eutanasia ya que hay
otros mtodos ms humanitarios.
13
Exanguinacin No es un mtodo aceptable para
el sacrificio de aves debido a que la sangre se
coagula fcilmente, produciendo posiblemente una
exanguinacin incompleta.

Descompresin (creando vaco) sta induce
disnea. Despus de 20 segundos a 60 mmHg las
aves se colapsan. Debido a que no se conoce el
tiempo que tardan en quedar inconscientes y a que
la descompresin produce la rpida expansin de
los gases en los sacos areos y en los huesos
neumticos, lo que puede producir dolor, este
mtodo no es aceptable en condiciones de
laboratorio.

Protxido de nitrgeno Se necesitan
concentraciones hipxicas de casi el 100% para que
sea eficaz y es de actuacin lenta. El animal
presenta convulsiones despus de perder la
consciencia, lo que puede disuadir a algunos
tcnicos. No es aceptable para la eutanasia de aves.

ter y Cloroformo No se deben utilizar para el
sacrificio de aves debido al peligro extremo para el
tcnico y a la irritacin de las vas areas del ave.

Ciclopropano Es humanitario y produce una
rpida anestesia, pero es inflamable y explosivo con
aire. Debido al peligro para el tcnico, el
ciclopropano no es aceptable para la eutanasia de
aves.

Tabla 5 Caractersticas de los mtodos de eutanasia en aves

Agente

Rapidez

Eficacia

Facilidad
de uso

Seguridad
del tcnico

Valoracin
esttica

Valoracin
general
(1-5)

Observaciones
Pentobarbital
sdico
++ ++ + + ++ 5
Aceptable
T-61
++ ++ + + ++ 4
Requiere prctica: slo aceptable
con aves pequeas (<250 gramos)
Dixido de
carbono
++ ++ ++ ++ + 4
Mtodo aceptable, especialmente
para pollitos
Halotano,
Enflurano,
Isoflurano
++ ++ ++ + ++ 4
Aceptable

Maceracin
++ ++ ++ ++ - 4
Aceptable para pollitos de hasta 72
horas
Dislocacin
cervical
++ ++ - ++ - 4
Aceptable para aves pequeas y
jvenes (<250 gramos) si va seguido
de la destruccin del cerebro
Microondas
++ ++ - ++ + 3
Debe ser utilizado solamente por
personal con experiencia. No es un
procedimiento de rutina
Concusin
++ ++ - ++ - 3
Aceptable para aves por debajo de
250 gramos
Monxido de
carbono
+ + ++ - + 2
Peligroso para el tcnico
Aturdimiento
elctrico
+ + + - - 1
Peligroso para el tcnico. Son
preferibles otros mtodos

Los siguientes mtodos slo pueden utilizarse con aves inconscientes: decapitacin, insercin de aguja, nitrgeno, cloruro potsico

Los siguientes mtodos no hay que usarlos para sacrificio de aves: rotura de cuello, descompresin, exanguinacin, protxido de
nitrgeno, ter dietlico, cloroformo, ciclopropano, gas cianhdrico, tricloroetileno, metoxiflurano, hidrato de cloral, estricnina,
nicotina, sulfato magnsico, ketamina y agentes bloqueantes neuromusculares

14
Gas cianhdrico ste produce muerte rpida e
irreversible por hipoxia citotxica, pero tambin
produce excitabilidad y angustia antes de la muerte,
lo que lo hace totalmente inaceptable.

Otros agentes que no se deben utilizar incluyen
metoxiflurano, tricloroetileno, hidrato de cloral,
estricnina, nicotina, sulfato magnsico, ketamina
como agente nico y agentes bloqueantes
neuromusculares.

3.5 Roedores

Los roedores son los animales ms habitualmente
utilizados con fines experimentales e incluyen
ratones, ratas, hmsters, cobayas, gerbillos,
musaraas y lirones. Se presenta un resumen de
recomendaciones en la tabla 6.

Reconocimiento y confirmacin de la
muerte

El cese de la respiracin y del latido cardiaco y la
ausencia de reflejos son buenos indicadores de la
muerte irreversible en roedores. La muerte se puede
confirmar por exanguinacin o extraccin del
corazn, evisceracin, congelacin rpida o
decapitacin. El personal debe ser entrenado para
reconocer y asegurar la muerte cuando sacrifique
roedores.

Embriones

El momento en que se ha desarrollado el tubo
neural, constituyendo un cerebro funcional (hacia el
60% de la gestacin), debe tomarse como punto a
partir del cual, el feto puede percibir dolor y por
ello, debe ser sacrificado humanitariamente. Hay
una gran variacin en el grado de desarrollo en el
momento del nacimiento de los diversos roedores.
Los ratones y las ratas son totalmente dependientes
al nacer y tienen muy pocas capas de desarrollo
neuronal en la corteza cerebral, mientras que los
cobayos estn totalmente desarrollados y ya son
independientes en el momento del nacimiento.
Si se extrae un feto de una madre anestesiada,
estando tambin insensible, se puede sacrificar por
decapitacin o extraccin del corazn. Sin
embargo, cuando se vaya a extraer un feto, se debe
administrar a la madre una cantidad de anestsico
mayor y se debe mantener durante ms tiempo para
asegurar que el anestsico ha cruzado la placenta.
En muchos casos los anestsicos inhalatorios no
anestesian a los fetos. Los fetos por debajo de 4
gramos que no estn anestesiados antes de
extraerlos de la madre, se pueden sacrificar por
enfriamiento rpido en nitrgeno lquido.

Neonatos

Son roedores recin nacidos de hasta 10 das de
edad. Pueden reaccionar a los estmulos dolorosos
ms como embriones que como adultos. Se pueden
sacrificar por decapitacin o concusin. Se puede
considerar la hipotermia (Phifer & Terry 1986). No
se recomienda el dixido de carbono ya que los
neonatos son ms resistentes, incrementndose el
tiempo que tardan en quedar inconscientes. Son
necesarias nuevas investigaciones para valorar qu
mtodos son los ms humanitarios.

Adultos

Se pueden encontrar detalles adicionales sobre los

Mtodos fsicos

Cuando se lleven a cabo mtodos fsicos para el
sacrificio de roedores, se debe considerar una
cuidadosa manipulacin e inmovilizacin del
animal antes del sacrificio. Es preferible una
mnima manipulacin e inmovilizacin. Se puede
reducir el temor y la ansiedad del animal con
sedacin previa o si son manipulados por personas
conocidas.

Concusin Es un mtodo rpido y humanitario
para el aturdimiento de roedores siempre que lo
realicen tcnicos experimentados y seguros. Slo se
debe utilizar con roedores de menos de 1 kg. Por
encima de este peso se requiere una habilidad
considerable y a veces una gran fuerza para
realizarlo de manera eficaz. Se debe confirmar
siempre la muerte.

Dislocacin cervical Es un mtodo de sacrificio
humanitario y usado habitualmente para la mayora
de los roedores pequeos (por debajo de 150
gramos (Marshall et al. 1994)) ya que causa grandes
lesiones al tronco enceflico produciendo
inconsciencia inmediata y muerte. Es ms difcil
con hmsters y cobayas debido a sus cuellos cortos,
con msculos ms fuertes y a los pliegues de la piel
que cubre cuello y omplatos. En ratones y ratas se
sitan pulgar e ndice a cada lado del cuello junto a
la base del crneo o, de modo alternativo, se
presiona una varilla junto a la base del crneo y en
ese momento con la otra mano, se tira rpidamente
de la base de la cola o de los miembros posteriores,
produciendo la separacin entre las vrtebras
cervicales y el crneo. Los roedores ms grandes y
las ratas de ms edad deben ser sedados o aturdidos
15
antes de la dislocacin. Se debe confirmar la muerte
como se indica en la seccin reconocimiento y
confirmacin de la muerte.

Decapitacin La falta inmediata de riego
sanguneo al cerebro y la anoxia subsiguiente, se
cree que dejan la cabeza rpidamente insensible
(Derr 1991). En general no se recomienda la
anestesia previa ya que implica ms manipulacin
y, por consiguiente, provoca estrs al animal. Son
preferibles otros mtodos hasta que nuevas
investigaciones puedan evidenciar la inconsciencia
inmediata. Siempre se utilizarn aparatos
especiales. Se debe tener cuidado para asegurar que
el aparato se mantenga limpio y las cuchillas estn
afiladas.

Microondas Implica el uso de aparatos especiales
y slo se debe llevar a cabo por personal entrenado
especialmente en esta tcnica para asegurar la
correcta posicin del haz. Cuando se lleva a cabo
correctamente es un mtodo extremadamente rpido
para el sacrificio de roedores y por ello muy
humanitario. Bajo ninguna circunstancia deben
utilizarse aparatos microondas para el hogar con
este fin. No es un mtodo rutinario de eutanasia.

Congelacin rpida Se lleva a cabo poniendo al
animal en nitrgeno lquido. Se puede utilizar
solamente para fetos y neonatos pequeos (< 4
gramos) sin pelo. Los animales mayores o con pelo
no mueren inmediatamente ya que requiere algn
tiempo la congelacin del interior.

Mtodos qumicos

Cuando se utilicen mtodos qumicos para la
eutanasia, se debe confirmar la muerte por alguno
de los mtodos anteriormente citados.


Anestsicos inhalatorios voltiles Con estos
agentes se pone al roedor en una cmara anestsica
o receptculo apropiado con una gasa o algodn
empapado en anestsico. Debido a que estos
anestsicos son irritantes en estado lquido, se debe
tener cuidado para que los roedores no entren en
contacto con el producto qumico. Durante el
periodo de induccin se debe suministrar aire u
oxgeno.
Halotano, enflurano, isoflurano Estos agentes
actan deprimiendo los sistemas cardiovascular y
respiratorio. Inducen anestesia y a continuacin la
muerte. Todos estos son agentes aceptables cuando
se utilizan con aparatos de recogida de gases
apropiados.

Dixido de carbono Se recomienda utilizar un
mnimo del 70% de CO
2
en oxgeno o aire para la
prdida rpida de consciencia sin hipoxia. Esto
produce una anestesia rpida seguida de la muerte,
con menor irritacin de las vas areas. Para
cobayas se recomienda el 100% de CO
2
(Noonan
1994). Para la eutanasia de roedores slo se debe
utilizar CO
2
comercial en botellas. Ver la Seccin 2
para ms detalles.

Monxido de carbono Aunque es un mtodo
relativamente rpido y humanitario para el
sacrificio de roedores, debido al peligro que supone
para el tcnico se debe utilizar con extrema
precaucin. Si se elige, debe ser utilizado con un
aparato apropiado de recogida de gases y slo se
recomienda el gas comercial en botellas. Se deben
poner los roedores en un contenedor previamente
llenado con al menos un 6% en volumen de CO.

Agentes inyectables

Con los roedores grandes, en los que es posible la
venipuncin sin excesivo estrs para el animal, se
recomienda la inyeccin intravenosa ya que
produce una anestesia rpida y la muerte. Si no se
realiza fcilmente la venipuncin, es preferible la
inyeccin intraperitoneal, aunque requiere ms
tiempo para actuar y puede producir irritacin del
peritoneo. Bajo ninguna circunstancia se debe
inyectar por va intrapulmonar o intracardiaca, a
menos que el animal est totalmente anestesiado.

Pentobarbital sdico El pentobarbital sdico
acta rpida y humanitariamente en el sacrificio de
todo tipo de roedores inyectado por va intravenosa
o intraperitoneal. Se debe entrenar a todo el
personal en el mtodo de inyeccin. El
pentobarbital sdico produce irritacin del
peritoneo, lo que puede evitarse diluyndolo. Se
recomienda habitualmente el triple de la dosis
anestsica (Marshall et al. 1994, Noonan 1994).
16
T-61 El T-61 acta rpidamente pero tiene que ser
inyectado por va intravenosa muy lentamente, lo
que no es siempre fcil en roedores. No se debe
inyectar por ninguna otra va en estas especies.
Puede ser necesaria la sedacin previa para ayudar
a la inmovilizacin durante la inyeccin. El
personal debe estar bien entrenado en las tcnicas
de inyeccin intravenosa.

Mtodos aceptables con roedores
inconscientes

Congelacin rpida Slo puede ser utilizada una
vez que el roedor (>4 gramos) est totalmente
inconsciente.

Exanguinacin Puede ser utilizada una vez que el
roedor est inconsciente.
Embolia gaseosa Slo puede ser utilizada con
roedores inconscientes ya que puede ser dolorosa.

Cloruro potsico Es cardiotxico y produce
jadeo, vocalizaciones, espasmos musculares y
ataques convulsivos lo que lo hace inaceptable para
muchos tcnicos. Puede utilizarse una vez que el
animal est totalmente anestesiado.

Etanol Ha sido utilizado inyectado
intraperitonealmente al 70% (Lord 1989). Sin
embargo, Wallgren & Barry III (1970)
establecieron que es irritante por encima del 10%,
lo que hace que sea inaceptable para eutanasia a
menos que el roedor est inconsciente.

Tabla 6 Caractersticas de los mtodos de eutanasia en roedores

Agente

Rapidez

Eficacia

Facilidad
de uso

Seguridad
del tcnico

Valoracin
esttica

Valoracin
general
(1-5)

Observaciones
Halotano,
enflurano,
isoflurano
++ ++ ++ + ++ 5
Aceptable
Pentobarbital
sdico
++ ++ + + ++ 5
Aceptable
Concusin
++ ++ + ++ - 4
Aceptable para roedores por debajo
de 1 kg. Se debe confirmar la muerte
por el cese de la circulacin
Dislocacin
cervical
++ ++ + ++ - 4
Aceptable para roedores por debajo
de 150 gramos. Se debe confirmar la
muerte por el cese de la circulacin
T-61
++ ++ - + ++ 4
Slo debe inyectarse por va
intravenosa
Dixido de
carbono
+ ++ ++ ++ ++ 4
Mtodo aceptable a concentracin
>70%
Microondas
++ ++ - ++ + 3
Debe ser utilizado solamente por
personal con experiencia. No es un
Decapitacin
+ + + ++ - 2
Son preferibles otros mtodos
Monxido de
carbono
+ + + - ++ 2
Congelacin
rpida
- + ++ ++ + 1
Solamente para pequeos neonatos
(<4 gramos)

Los siguientes mtodos slo pueden utilizarse con roedores inconscientes: congelacin rpida, exanguinacin, embolia gaseosa,
cloruro potsico, etanol

Los siguientes mtodos no hay que usarlos para sacrificio de roedores: hipotermia, descompresin, asfixia, ahogamiento, nitrgeno,
protxido de nitrgeno, ciclopropano, ter dietlico, cloroformo, metoxiflurano, gas cianhdrico, tricloroetileno, estricnina, nicotina,
hidrato de cloral, sulfato magnsico y agentes bloqueantes neuromusculares

17
de roedores

Hipotermia Bajo ninguna circunstancia se
sacrificarn roedores ponindolos en un
congelador. La congelacin slo puede utilizarse
como mtodo para asegurar la muerte.

Nitrgeno ste mata los roedores por hipoxia
hacindolo inaceptable ya que tarda ms que otros
agentes para conseguir la inconsciencia. Las ratas
exhiben signos de pnico y angustia antes de la
inconsciencia (Hornett & Haynes 1984).

Protxido de nitrgeno ste mata por anoxia, es
lento y los roedores muestran signos de mayor
actividad antes de la muerte, indicando un grado de
ansiedad que lo hace inaceptable como mtodo de
eutanasia.

Ciclopropano Es un agente humanitario y rpido
para el sacrificio de roedores pero es
extremadamente peligroso para el tcnico y por ello
no se considera aceptable.

ter y cloroformo No se deben utilizar bajo
ninguna circunstancia para el sacrificio de roedores.
Ambos son extremadamente peligrosos para el
tcnico y el ter produce irritacin de las vas areas
al ser inhalado.

Los siguientes mtodos no deben ser usados para
sacrificio de roedores: descompresin, asfixia,
ahogamiento, tricloroetileno, metoxiflurano, gas
cianhdrico, estricnina, nicotina, hidrato de cloral,
sulfato magnsico, frmacos curariformes y
agentes bloqueantes neuromusculares.

3.6. Conejos

Tabla 7.

muerte

El cese de la respiracin, del latido cardiaco y la
ausencia de reflejos son buenos indicadores de la
muerte irreversible en conejos. Se debe confirmar la
muerte por exanguinacin o extraccin del corazn,
evisceracin o decapitacin. Se debe entrenar al
personal para reconocer y asegurar la muerte
cuando sacrifique conejos.
Embriones

El momento en que el tubo neural se ha
desarrollado constituyendo un cerebro funcional
(hacia el 60% de la gestacin) se debe tomar como
punto a partir del cual el feto puede percibir el dolor
y por ello debe ser sacrificado humanitariamente. Si
se extrae un feto insensible de una madre
anestesiada se puede sacrificar por decapitacin o
extraccin del corazn. Sin embargo, cuando hay
que extraer fetos, se debe administrar a la madre
una cantidad mayor de anestsico y mantenerlo por
ms tiempo para asegurar que ste atraviese la
placenta. En muchas ocasiones los anestsicos
inhalatorios no anestesian a los fetos. Cuando se
sacrifica a la madre, aquellos fetos que no se
extraen morirn por anoxia y no es necesario
ningn mtodo adicional para asegurar la muerte de
los fetos.

Neonatos

Son los conejos recin nacidos de hasta diez das de
edad. Pueden reaccionar a los estmulos dolorosos
ms como embriones que como adultos. Pueden ser
sacrificados por decapitacin y concusin. Son
necesarias nuevas investigaciones para valorar qu
mtodos son los ms humanitarios.

Adultos

Se pueden obtener detalles adicionales sobre los

Mtodos fsicos

Cuando se utilicen mtodos fsicos para el sacrificio
de conejos se debe considerar una manipulacin e
inmovilizacin cuidadosas del animal antes del
sacrificio. Es preferible la mnima manipulacin e
inmovilizacin. El temor y la ansiedad del animal
se pueden reducir con sedacin previa o
manipulacin por personas conocidas.

Concusin Es un mtodo rpido y humanitario
para aturdir conejos siempre que sea llevada a cabo
por tcnicos experimentados y seguros. sta
implica golpear la base de la cabeza en la parte
superior del cuello en la regin occipital. Se debe
confirmar siempre la muerte por el cese de la
circulacin.

18
Dislocacin cervical Es un mtodo humanitario
para el sacrificio de conejos de menos de 1 kg ya
que produce importantes daos al tronco enceflico
lo que se traduce en inconsciencia inmediata y
muerte. Slo debe ser llevada a cabo por personal
experimentado. Se debe confirmar siempre la
muerte por el cese de la circulacin. Puede ser
necesaria la sedacin antes de la dislocacin.

Bala cautiva Este mtodo puede ser til para
conejos grandes (por encima de 4 kg) en
determinadas situaciones (Holtzmann 1991). Slo
se pueden utilizar balas cautivas especialmente
diseadas para su uso en conejos. El personal debe
estar bien entrenado con el fin de asegurar la
posicin correcta del arma. La bala debe penetrar
unos 3 centmetros en el cerebro (Holtzmann 1991).
Se debe confirmar la muerte asegurndose del cese
de la circulacin.

Decapitacin La decapitacin se puede
considerar un mtodo humanitario para el sacrificio
de conejos pequeos o jvenes (por debajo de 1 kg)
ya que la falta de aporte sanguneo asegura una
rpida prdida de consciencia. Sin embargo, sta no
es posible en conejos de mayor tamao y de ms
edad en los que el cuello es demasiado grueso y
fuerte para una decapitacin rpida.

Aturdimiento elctrico Slo se pueden utilizar
tenazas elctricas diseadas con este fin. Se debe
tener cuidado para asegurar que pasa un nivel
adecuado de corriente directamente a travs del
cerebro para asegurar la inconsciencia inmediata.
Se debe confirmar la muerte por el cese de la
circulacin.

Microondas Implica el uso de aparatos especiales
y slo debe ser llevado a cabo por personal
especialmente entrenado en esta tcnica para
asegurar la posicin correcta del haz. Es un mtodo
rpido para la eutanasia de conejos por debajo de
300 gramos. Bajo ningn concepto se utilizarn
aparatos microondas para el hogar. ste no es un
mtodo rutinario de eutanasia.

Congelacin rpida Los fetos de menos de 4
gramos se pueden sacrificar ponindolos en
nitrgeno lquido. Los animales mayores o con pelo
no mueren inmediatamente ya que requiere algn
tiempo la congelacin del interior.

Mtodos qumicos

Cuando se utilicen mtodos qumicos de eutanasia,
se debe confirmar la muerte por uno de los mtodos
citados anteriormente

Mtodos inhalatorios

Anestsicos inhalatorios voltiles Los conejos
reaccionan adversamente a todos los gases (Green
1979) y cuando sea posible son preferibles otros
mtodos.
Con estos agentes se pone el conejo en una
cmara anestsica o receptculo adecuado con una
gasa o un algodn empapado en anestsico. Se
inhalan los vapores hasta que cesa la respiracin y
sobreviene la muerte. Debido a que estos
anestsicos en estado lquido son irritantes, se debe
tener cuidado para asegurar que el conejo no entra
en contacto con el agente qumico. Durante el
periodo de induccin se debe suministrar aire u
oxgeno. Con todos estos agentes se necesita
utilizar un equipo de recogida de gases adecuado.

Halotano, isoflurano, enflurano Estos agentes
a altas concentraciones producen anestesia rpida
seguida de la muerte. Son todos agentes aceptables
cuando se utilizan con un aparato de recogida de
gases apropiado.

Dixido de carbono Los conejos grandes pueden
angustiarse inicialmente mientras estn todava
conscientes y por ello, si es posible, se consideran
preferibles otros mtodos. Ha sido recomendado
por Von Cranach et al. (1991a) el 100% de CO
2

pero puede producir angustia.

Monxido de carbono Aunque es un mtodo
relativamente rpido y humanitario para el
sacrificio de conejos, debido al peligro para el
tcnico es menos aceptable para uso rutinario. Si se
utiliza, debe hacerse con un aparato de recogida de
gases adecuado y slo se usar gas comercial en
botellas ya que el humo de los motores de
explosin es probable que sea irritante.

Agentes inyectables

En conejos, en los que resulta posible la
venopuncin en la vena marginal de la oreja (a
menos que est lesionada), se recomienda la
inyeccin intravenosa ya que produce una anestesia
rpida y muerte. Se debe entrenar al personal en las
tcnicas de inyeccin intravenosa e intraperitoneal.
Si la venipuncin no se lleva a cabo fcilmente, es
aceptable la inyeccin intraperitoneal, aunque tarda
ms en actuar. Bajo ninguna circunstancia se debe
inyectar por va intrapulmonar o intracardiaca a
menos que el animal est totalmente anestesiado.
19
Pentobarbital sdico Inyectado por va
intravenosa, el pentobarbital sdico acta rpida y
humanitariamente en el sacrificio de conejos. Es el
agente ms aceptable para eutanasia. El
pentobarbital sdico puede producir irritacin del
peritoneo, lo que puede evitarse diluyndolo.

T-61 El T-61 acta rpida y humanitariamente
pero slo puede ser inyectado lentamente por va
intravenosa. No debe ser nunca inyectado por
ninguna otra va. Se puede considerar la sedacin
previa para ayudar en la inmovilizacin durante la
inyeccin. Se debe entrenar bien al personal en las
tcnicas de inyeccin intravenosa. El personal debe
tener un cuidado extremo cuando utilice este
agente.

Mtodos aceptables con conejos
inconscientes

Exanguinacin Puede ser utilizado para el
sacrificio de conejos una vez estn totalmente
inconscientes.

Nitrgeno Los conejos mueren por hipoxia y por

Tabla 7 Caractersticas de los mtodos de eutanasia en conejos

Agente

Rapidez

Eficacia

Facilidad
de uso

Seguridad
del tcnico

Valoracin
esttica

Valoracin
general
(1-5)

Observaciones
Pentobarbital
sdico
++ ++ + + ++ 5
Aceptable
T-61
++ ++ - + ++ 4
Aceptable. Slo por va intravenosa
Dislocacin
cervical
++ ++ - ++ - 4
Aceptable para conejos de menos de
1 kg. Sedacin previa a la
dislocacin. Se debe confirmar la
muerte por el cese de la circulacin
Bala cautiva
++ ++ - + + 4
Requiere habilidad. Se debe
confirmar la muerte por otro mtodo
Concusin
++ + - ++ - 3
Se requiere experiencia. Se debe
asegurar la muerte por otro mtodo
Aturdimiento
elctrico
++ + ++ - + 3
Se debe confirmar la muerte por otro
mtodo
Microondas
++ ++ - ++ + 3
Se debe utilizar por personal
experimentado solamente con
conejos pequeos. No es un
Decapitacin
+ + + ++ - 2
Aceptable para conejos por debajo
de 1 kg, si no se dispone de otros
mtodos
Halotano,
enflurano,
isoflurano
++ ++ ++ + - 2
Los conejos muestran signos de
angustia
Dixido de
carbono
+ + ++ ++ + 1
Los conejos grandes manifiestan
angustia
Monxido de
carbono
+ + ++ - ++ 1
Congelacin
rpida
+ + ++ ++ + 1
Solamente para fetos por debajo de
4 gramos. Son preferibles otros
mtodos

Los siguientes mtodos slo pueden utilizarse con conejos inconscientes: exanguinacin, nitrgeno, cloruro potsico y embolia
gaseosa

Los siguientes mtodos no hay que usarlos para sacrificio de conejos: hipotermia, descompresin, asfixia, ahogamiento, protxido
de nitrgeno, ciclopropano, ter dietlico, cloroformo, tricloroetileno, gas cianhdrico, metoxiflurano, hidrato de cloral, estricnina,
nicotina, sulfato magnsico, cido cianhdrico, clorhidrato de ketamina y agentes bloqueantes neuromusculares

20
ello no se considera aceptable para la eutanasia de
conejos, a menos que estn inconscientes.

Cloruro potsico Es cardiotxico y produce
jadeo, vocalizaciones, espasmos musculares y
ataques convulsivos que lo hacen inaceptable para
muchos tcnicos. Slo puede ser utilizado una vez
que el animal est totalmente anestesiado.

Embolia gaseosa La inyeccin intravenosa de
aire, a razn de 5-50 ml/kg, produce la muerte
rpidamente, pero como se acompaa de
convulsiones, opistotonos, dilatacin pupilar y
vocalizaciones, no es un mtodo aceptable a menos
que el conejo est totalmente inconsciente.

de conejos

Hipotermia Bajo ninguna circunstancia se deben
sacrificar conejos ponindolos en un congelador.

Protxido de nitrgeno Produce la muerte por
anoxia, acta lentamente, y los conejos muestran
signos de mayor actividad antes de la muerte,
indicando un grado de ansiedad. Por ello no se
considera un mtodo aceptable.

Metoxiflurano Tarda demasiado tiempo en
actuar, con grandes posibilidades de recuperacin.

Ciclopropano Puede ser un mtodo de eutanasia
humanitario y rpido, pero es muy peligroso para el
tcnico y por ello no se considera aceptable para
uso general.

ter y cloroformo No se deben utilizar bajo
ninguna circunstancia para la eutanasia de conejos.
Ambos son peligrosos para el tcnico y el ter
produce irritacin de las vas respiratorias al ser
inhalado.

Clorhidrato de ketamina La inyeccin
intravenosa produce contracciones tnicas,
acompaadas de vocalizaciones, siendo por ello
inaceptable para la eutanasia de conejos.

Otros agentes que no deben ser utilizados para el
sacrificio de conejos incluyen descompresin,
asfixia, ahogamiento, tricloroetileno, gas
cianhdrico, cido cianhdrico, estricnina, nicotina,
hidrato de cloral, sulfato magnsico y

3.7 Carnvoros - perros, gatos, hurones

Tabla 8.

muerte

prdida de reflejos son buenos indicadores de la
muerte en carnvoros. Se debe confirmar la muerte
por exanguinacin. Se debe entrenar al personal
para reconocer y asegurar la muerte cuando
sacrifique perros, gatos, hurones u otros carnvoros.

Embriones

El momento en que el tubo neural se ha
desarrollado constituyendo un cerebro funcional se
debe tomar como el punto a partir del cual el feto
puede percibir dolor (30% de la gestacin) y por
ello deben ser sacrificados humanitariamente. Si se
extrae un feto insensible de una madre anestesiada
puede ser sacrificado por decapitacin o extraccin
del corazn. Sin embargo, cuando se vayan a
extraer fetos se debe administrar a la madre una
cantidad mayor de anestsico y mantenerlo por ms
tiempo para asegurar que el anestsico atraviesa la
placenta. En muchos casos los anestsicos
inhalatorios no anestesian a los fetos.

Neonatos

Los neonatos de carnvoros, en general deben
tratarse como adultos. El mtodo preferible es el
pentobarbital sdico, pero se pueden considerar el
CO
2
, la dislocacin cervical y la concusin (Hall
1972) (ver Seccin 2). Se debe entrenar bien a los
tcnicos en las tcnicas fsicas para asegurar que las
lleven a cabo correcta y humanitariamente.
Inmediatamente despus de la concusin o de la
dislocacin cervical se debe exanguinar a los
animales.

Adultos

Se dan detalles adicionales sobre los mtodos en la
Seccin 2.

Mtodos fsicos

En general no se recomienda el uso de los mtodos
fsicos de eutanasia en carnvoros. Sin embargo,
21
cuando los agentes qumicos puedan interferir con
los objetivos del experimento, se pueden utilizar los
mtodos que se describen a continuacin. La
inmovilizacin de gatos para mtodos fsicos puede
ser difcil y se recomienda que todos los animales
estn sedados antes de la eutanasia.

Bala cautiva Se pueden utilizar balas cautivas
especialmente diseadas con el fin de sacrificar
animales de este tamao. Se debe entrenar al
personal en estas tcnicas para asegurar la correcta
posicin de la pistola y la muerte inmediata. Se
debe confirmar la muerte por el cese de la
circulacin por exanguinacin.

Disparo El disparo en los carnvoros utilizando
una bala libre slo es aceptable en condiciones de
campo, cuando no pueda ser utilizado ningn otro
mtodo. Slo lo realizarn tiradores especializados.

Electrocucin Se fijan pinzas en las orejas para
asegurar que la corriente pasa a travs del cerebro y
se confirma la muerte haciendo pasar la corriente a
travs del corazn. Hay dos fases: aturdimiento con
un shock de 500 V entre las orejas, seguido de un
shock letal a 1kV que pasa entre una oreja y una
pata trasera. Los gatos no deben ser sacrificados por
electrocucin debido a la alta conductividad de su
pelaje. Slo se utilizaran aparatos especialmente
diseados con este fin y el personal debe estar bien
entrenado en esta tcnica. Se debe comprobar y
mantener el equipo regularmente para asegurar el
voltaje correcto. Se debe confirmar la muerte por
uno de los mtodos descritos en la seccin
reconocimiento y confirmacin de la muerte.

Mtodos qumicos

En general, se prefieren los mtodos qumicos de
eutanasia para perros, gatos, hurones y zorros. Para
reducir el estrs y la ansiedad puede ser preferible
sedar a los animales antes de la eutanasia.

Mtodos inhalatorios

Anestsicos inhalatorios voltiles Incluyen
halotano, isoflurano y enflurano. Todos ellos son
aceptables para la eutanasia de carnvoros. Para
prevenir la exposicin del tcnico se deben utilizar
aparatos apropiados de recogida de gases.
Agentes inyectables

Si es posible se debe administrar la inyeccin por
va intravenosa con el propsito de conseguir
anestesia rpida y eutanasia con el mnimo estrs.

intravenosa, este agente proporciona eutanasia
rpida y humanitaria. Las vas de inyeccin
intracardiaca e intrapulmonar no se deben utilizar
ya que son extremadamente dolorosas, a menos que
se haga bajo anestesia profunda. Todo el personal
debe estar entrenado en estas tcnicas.

Secobarbital/dibucana El secobarbital es un
anlogo de accin corta del thiamilol sdico. La
dibucana es un anestsico local altamente txico
que produce rpida prdida de consciencia, parada
respiratoria y cardiaca (Herschler et al. 1981,
Wallach et al. 1981).

T-61 Este agente es muy eficaz pero slo se debe
administrar por va intravenosa muy lentamente.
Hay que sedar a los animales antes de su
administracin. Puede producir convulsiones en el
animal inconsciente, lo que puede ser estticamente
desagradable.

Mtodos aceptables para carnvoros
inconscientes

Exanguinacin Se puede utilizar para sacrificar
carnvoros una vez que estn inconscientes.

Dislocacin del cuello Se puede utilizar con
animales pequeos bajo anestesia. Se debe
confirmar siempre la muerte por uno de los
mtodos mencionados anteriormente.

Cloruro potsico Se puede utilizar para
sacrificar carnvoros inconscientes.

de carnvoros

Golpe en el trax en gatos Ha sido sugerido
como mtodo de eutanasia pero no se considera
humanitario y no debe ser utilizado bajo ninguna
circunstancia.

Descompresin Ha sido utilizada como mtodo
de eutanasia en USA y Japn. Probablemente
22
produce mucha ansiedad y estrs a los animales,
que pueden experimentar dolor debido a la
expansin del aire en los senos y otras cavidades
corporales. No se considera aceptable para la
eutanasia de carnvoros.

Aunque el dixido de carbono hace que los gatos
queden inconscientes en un minuto, stos se
mueven por la jaula, lamiendo, estornudando y
tratando de trepar para salir, indicando que puede
ser estresante. Adems, los animales presentan
convulsiones, lo que hace este mtodo
estticamente desagradable para el tcnico. No est
considerado aceptable como mtodo de eutanasia
para carnvoros excepto para neonatos.

Monxido de carbono A concentraciones
superiores al 6% es un mtodo de eutanasia
relativamente rpido y est recomendado para el
sacrificio de mustlidos (Comisin de las
Comunidades Europeas 1993). Sin embargo,
produce convulsiones y vocalizaciones que pueden
tener lugar todava en la fase consciente (Chalifoux
& Dallaire 1983). Debido a esto y al peligro para
el tcnico no se considera aceptable para animales
de experimentacin.

Nitrgeno En perros y gatos produce
inconsciencia en 1-2 minutos, con hiperpnea
durante unos 10 segundos antes de que se colapsen.
Tras el colapso hay vocalizaciones, opistotonos,
convulsiones y jadeo. Las cras de gatos y perros
son resistentes a la anoxia; caen inconscientes pero
no llegan a morir. No es un mtodo aceptable.

ter y cloroformo No son mtodos de eutanasia
aceptables debido a la irritacin de las vas
respiratorias y al peligro que suponen para el
tcnico.

Los siguientes agentes tampoco se deben utilizar en
el sacrificio de carnvoros: ahogamiento, concusin
(adultos), decapitacin, asfixia, estrangulacin,
protxido de nitrgeno, gas cianhdrico,
ciclopropano, metoxiflurano, tricloroetileno,
embolia gaseosa, cido cianhdrico, hidrato de
cloral, estricnina, nicotina, sulfato magnsico y

Tabla 8 Caractersticas de los mtodos de eutanasia en perros, gatos, hurones y zorros

Agente

Rapidez

Eficacia

Facilidad
de uso

Seguridad
del tcnico

Valoracin
esttica

Valoracin
general
(1-5)

Observaciones
Pentobarbital
sdico
++ ++ - + ++ 5
Aceptable. Inyeccin intravenosa
T-61
++ ++ - + + 4
Aceptable. Pero solamente por
inyeccin intravenosa lenta bajo
sedacin
Secobarbital/
dibucana
++ ++ - + ++ 4
Aceptable. Inyeccin intravenosa
Halotano,
isoflurano,
enflurano
++ ++ + + ++ 4
Aceptable
Bala cautiva
++ ++ - ++ + 3
Debe ser seguido de exanguinacin
Electrocucin
++ ++ - - - 3
Utilizar solamente equipo especial.
Concusin
++ ++ + ++ - 2
Slo debe usarse con neonatos. Debe
ser seguido de exanguinacin
Disparo
++ ++ - - - 1
Aceptable slo en condiciones de
campo por tiradores especializados
cuando no sean posibles otros
mtodos

Los siguientes mtodos slo pueden utilizarse con carnvoros inconscientes: exanguinacin, dislocacin del cuello y cloruro
potsico

Los siguientes mtodos no hay que usarlos para sacrificio de carnvoros: descompresin, decapitacin, ahogamiento,
estrangulacin, asfixia, embolia gaseosa, golpe del trax en gatos, monxido de carbono, dixido de carbono, metoxiflurano,
nitrgeno, protxido de nitrgeno, tricloroetileno, cido cianhdrico, ter dietlico, cloroformo, gas cianhdrico, ciclopropano,
hidrato de cloral, estricnina, nicotina, sulfato magnsico y agentes bloqueantes neuromusculares
23
3.8 Grandes mamferoscerdos, ovejas,
cabras, vacas, caballos

El personal que utilice y tenga que sacrificar
cualquier mamfero grande tiene que recibir
entrenamiento especializado en manipulacin,
inmovilizacin y tcnicas de eutanasia para estos
animales. Es importante evitar actuaciones que
puedan incrementar el que el animal se d cuenta de
la situacin inusual. El mejor modo para sacrificar
al animal es en un entorno que le resulte familiar.
Se recomienda que todos los tcnicos consigan y
lean las normativas de la CE (Directiva del Consejo
93/119/CE) (Comisin de las Comunidades
Europeas 1993) y las regulaciones nacionales sobre
mtodos de sacrificio que abarcan a la mayora de
estos animales. Puede ser necesario llevar a los
animales a mataderos autorizados donde se
encuentra disponible equipamiento especializado
para la eutanasia humanitaria de estos animales. La
eutanasia puede que tenga que ser realizada por una
persona que haya sido entrenada y que posea un
certificado conforme a la legislacin nacional para
el sacrificio o por un veterinario con entrenamiento
apropiado.
Tabla 9.

muerte

prdida de reflejos son buenos indicadores de la
muerte irreversible. Se debe confirmar la muerte
por exanguinacin. El personal debe estar entrenado
para reconocer y asegurar la muerte cuando
sacrifique estos animales.

Embriones

Los fetos de estos grandes mamferos estn bien
desarrollados en el momento del nacimiento y por
ello se debe tener un cuidado considerable para
asegurar que son sacrificados humanitariamente si
se extraen del tero. El punto a partir del cual se
debe considerar la eutanasia debe ser desde el
momento en el que el tubo neural se desarrolla
constituyendo un cerebro funcional y de ese modo
son capaces de sentir dolor (> 30% de la gestacin).
Tambin los fetos pueden ser grandes y en general
cualquier mtodo utilizado en adultos se considera
aceptable.

Neonatos

Debido a que los grandes mamferos nacen en un
estado de desarrollo avanzado, deben ser tratados
como adultos.

Adultos

En la Seccin 2 se pueden encontrar detalles
adicionales sobre los mtodos.

Mtodos fsicos

Los animales deben ser adecuadamente
inmovilizados en aparatos adecuados para asegurar
que permanezcan inmviles y tranquilos de modo
que el mtodo de eutanasia sea preciso y rpido. El
personal debe permanecer tranquilo y manipular a
los animales con cuidado, de modo que reduzca el
estrs y la ansiedad en los animales.

Bala cautiva La utilizacin de la bala cautiva es
el mtodo fsico ms aceptable para grandes
mamferos y es preferible a la bala libre por la
seguridad para el tcnico. Son preferibles las balas
cautivas penetrantes. El personal debe estar bien
entrenado en el uso de las pistolas de bala cautiva
para asegurar el posicionamiento correcto para las
especies que haya que sacrificar (Universities
Federation for Animal Welfare 1989). Se debe tener
cuidado para asegurar que se utilizan balas y
cartuchos de tamaos adecuados, que se conserva el
arma limpia y que se mantiene en buen estado de
funcionamiento. No se recomienda utilizar pistolas
de bala cautiva con cerdos adultos y toros
plenamente desarrollados debido al grosor de sus
crneos. Inmediatamente se debe confirmar la
muerte por exanguinacin o por insercin de aguja
a travs del agujero producido por la bala.

Bala Libre (Free bullet humane killers) Una
bala libre disparada por personal cualificado
constituye un mtodo eficaz para el sacrificio de
caballos, mulas, burros y animales viejos o de
crneo grueso (Blackmore 1985, Dodd 1985, Oliver
1979). Se debe tener un cuidado extraordinario ya
que no es tan seguro como la bala cautiva y por ello
slo se considera aceptable en condiciones de
campo. Se debe entrenar a todo el personal en estos
mtodos para asegurar el posicionamiento correcto
del arma y que se utilice la del calibre adecuado.
Hay que sealar que vara la posicin del arma en
funcin de la especie y de si tiene cuernos o no. Los
animales tienden a desplomarse hacia delante al
dispararles, lo que debe tener presente el tcnico
para evitar daos personales.
24
Los tcnicos deben asegurarse de que el arma est
bien mantenida de modo que se minimice la
posibilidad de fallar. Inmediatamente se debe
confirmar la muerte por exanguinacin o por
insercin de aguja a travs del agujero producido
por la bala.

Disparo El disparo de bala libre slo debe
realizarse en condiciones de campo cuando no
pueda ser utilizado otro mtodo. Slo lo llevarn a
cabo tiradores especializados.

Concusin Se debe realizar utilizando un
instrumento de funcionamiento mecnico que
administra un golpe en el crneo sin fracturarlo.
Hay que sealar que la posicin para aplicar los
aturdidores de percusin difiere respecto de la
empleada con las pistolas de bala cautiva. Se debe
asegurar inmediatamente la muerte por
exanguinacin (en los 20 segundos siguientes al
aturdimiento) (Blackmore 1979).

Aturdimiento elctrico Este mtodo slo debe
llevarse a cabo en mataderos donde est disponible
el equipamiento especial para los animales que se
deban sacrificar. Se utiliza habitualmente para el
aturdimiento de cerdos, ovejas, terneros y cabras.
Se deben aplicar las tenazas a cada lado de la
cabeza, entre el ojo y el odo, para abarcar el
cerebro. Cuando se trabaja con alto voltaje se
consideran indeseables las tenazas que incorporan
almohadillas de goma espuma humedecidas. Para
asegurar un buen contacto elctrico, las ovejas y las
cabras deben ser afeitadas en la zona de situacin
de las tenazas. No se debe utilizar cuando los
cuernos dificulten la correcta colocacin de las
tenazas. Se debe tener cuidado para asegurar que
los animales no reciben descargas elctricas por
contacto con otros animales, por superficies
hmedas o por contacto accidental con las tenazas.
El aturdimiento en la cabeza solamente, o de cabeza
a lomo atravesando la cabeza, son mtodos
aceptables ya que aseguran la inconsciencia
inmediata. Se debe exanguinar a los animales
inmediatamente despus del aturdimiento para
asegurar la muerte. El personal debe asegurarse de
que se utiliza el voltaje e intensidad correctos para
las especies animales que se deban sacrificar.

Mtodos qumicos

Mtodos inhalatorios

Anestsicos inhalatorios voltiles Se pueden
utilizar halotano, isoflurano y enflurano con una
mscara anestsica en corderos y cabritos.

Dixido de carbono Se ha utilizado el dixido
de carbono para el sacrificio de cerdos. Se
introducen los cerdos en grandes cmaras que han
sido previamente llenadas con gas CO
2
por encima
del 70%. Slo debe utilizarse un equipo especial. Se
debe confirmar la muerte por exanguinacin. Se
consideran preferibles otros mtodos debido a que
los cerdos tienden a manifestar signos de estrs. El
dixido de carbono no debe ser utilizado con
ningn otro animal grande.

Mtodos inyectables

Se debe entrenar al personal en las tcnicas de
inyeccin intravenosa y en la manipulacin e
inmovilizacin de los animales. Los animales deben
ser inmovilizados adecuadamente y/o sedados antes
de la eutanasia.

intravenosa, el pentobarbital sdico proporciona
una eutanasia rpida. Los animales ms grandes
pueden requerir grandes volmenes y esto puede
facilitarse insertando un catter en la vena yugular
(Andrews et al. 1993). De modo alternativo se
pueden utilizar volmenes ms bajos de soluciones
de alta concentracin, pero se debe tener en cuenta
que esto comporta un mayor peligro para el tcnico.
Los animales excitables o nerviosos deben ser
sedados antes de la inyeccin con pentobarbital
sdico.

Quinalbarbital/Nupercana Esta mezcla
comercial produce la muerte rpida y
humanitariamente en caballos. Se debe inyectar por
va intravenosa en un periodo de 5-8 segundos. No
est disponible en algunos pases.

T-61 El T-61 tambin es un agente eficaz para la
eutanasia de grandes mamferos, solamente por
inyeccin intravenosa lenta. Puede ser necesario
inicialmente sedar a los animales excitables o
nerviosos.

Mtodos aceptables con grandes
mamferos inconscientes

Exanguinacin Puede ser utilizada para sacrificar
mamferos inconscientes.

Hidrato de cloral Puede ser utilizado por va
intravenosa en mamferos inconscientes o junto con
sulfato magnsico y pentobarbital sdico.
25
Tabla 9 Caractersticas de los mtodos de eutanasia en grandes mamferos

Agente

Rapidez

Eficacia

Facilidad
de uso

Seguridad
del tcnico

Valoracin
esttica

Valoracin
general
(1-5)

Observaciones
Pentobarbital
sdico
++ ++ - + ++ 5
Aceptable por inyeccin intravenosa
Quinalbarbital/
Nupercana
++ ++ - + ++ 5
Eficaz por va intravenosa en
caballos
Bala cautiva
++ ++ + + + 5
Bala Libre
++ ++ + - + 5
Debe ser seguido de exanguinacin.
En condiciones de campo solamente
por Personal cualificado.
T-61
++ ++ - + ++ 4
Aceptable por inyeccin intravenosa
Aturdimiento
elctrico
++ ++ + - - 4
Solamente utilizando equipamiento
especial. Debe ser seguido
inmediatamente de exanguinacin
Disparo
++ ++ - - - 2
Slo en condiciones de campo por
tiradores especializados
Concusin
++ + - + + 2
Debe ser seguido inmediatamente de
exanguinacin
Halotano,
isoflurano,
enflurano
+ + + + + 2
Recomendado para corderos y
cabritos
Dixido de
carbono
+ + ++ ++ + 1
Utilizar solamente con cerdos, >70%

Los siguientes mtodos slo pueden utilizarse con grandes mamferos inconscientes: exanguinacin, hidrato de cloral y cloruro
potsico

Los siguientes mtodos no hay que usarlos para sacrificio de grandes mamferos: monxido de carbono, metoxiflurano,
tricloroetileno, estricnina, nicotina, sulfato magnsico, tiopental sdico, clorhidrato de ketamina, agentes bloqueantes
neuromusculares

Cloruro potsico Puede ser utilizado para el
sacrificio de mamferos inconscientes.

de grandes mamferos

Monxido de carbono Algunos animales,
incluidos los cerdos, muestran signos de excitacin
severa y vocalizaciones, algunas veces antes de
alcanzar la inconsciencia, con niveles altos de
monxido de carbono. No es un agente aceptable
para eutanasia.

Los siguientes agentes tampoco son aceptables para
la eutanasia de grandes mamferos: metoxiflurano,
tricloroetileno, estricnina, nicotina, sulfato
magnsico, tiopental sdico, clorhidrato de
ketamina, productos curariformes y otros agentes
bloqueantes neuromusculares.
3.9 Primates no humanos

El personal que manipule primates debe estar
especialmente entrenado para estos fines. Si hay
que sacrificar primates, es preferible que lo haga
personal que les resulte conocido, con el fin de
reducir el estrs y la ansiedad. Para todos los
grandes primates, se debe administrar sedacin (por
ejemplo ketamina) antes de la eutanasia.
El cese del latido cardiaco, de la respiracin y la
ausencia de reflejos se pueden considerar como
buenos indicadores de la muerte.

Embriones

Todos los fetos en los que el tubo neural se haya
desarrollado constituyendo un cerebro funcional
deben ser sacrificados humanitariamente. Algunas
veces se necesitan fetos con fines experimentales
pero raramente se sacrifica a la madre para
26
proceder a la extraccin de los fetos del tero. Estos
fetos pueden ser sacrificados por sobredosis de
anestsico o por mtodos fsicos despus de
anestesiarlos.

Adultos

El nico mtodo recomendado para el sacrificio de
primates es por sobredosis de anestsico. El
pentobarbital sdico inyectado por va intravenosa
es el agente ms aceptable. La exanguinacin bajo
anestesia inhalatoria tambin se considera
aceptable, pero debe ser seguida por perfusin.
Las cras de algunas especies como los
marmosets pueden ser difciles de inyectar y esto
requiere la pericia de un especialista.

3.10 Otros animales no utilizados
habitualmente para experimentos

Como los animales vertebrados varan tanto en
tamao y fisiologa, el mtodo elegido para el
sacrificio de cualquier animal no contemplado
anteriormente debe ser elegido de entre los mtodos
para los animales que ms se les parezcan
biolgicamente. Se debe obtener consejo de un
veterinario. En general, una sobredosis de
pentobarbital sdico inyectado por va intravenosa
se puede considerar como un mtodo humanitario
para el sacrificio de la mayora de los animales. En
la mayora de los casos es aconsejable sedar al
animal antes de la eutanasia.

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Material para entrenamiento en eutanasia

Inter-act animal care training programmes

Es una serie especial de programas diseados y
producidos por la Association of the British
Pharmaceutical Industry (ABPI) como un medio
para el entrenamiento del personal del laboratorio
implicado en el uso y cuidado de los animales bajo
el Acta de los Animales (Procedimientos
Cientficos) 1986. El Tema 7 trata sobre la
eutanasia. Utiliza tecnologa de imagen interactiva.
La serie completa de 11 programas (en 10 discos
compactos) se puede solicitar a Mr M. Connelly,
Redway Interactive Video, 34 Redway, Kerridge,
Macclesfield, Cheshire SK10 5BA, UK.

Principles of proper laboratory animal use in
research

ste es un programa bsico para investigadores,
tcnicos y personal de apoyo. Este programa
establece la base apropiada para la utilizacin de
animales en investigacin biomdica. Es una
plantilla de software modular, flexible y fcil de
usar. El programa consiste en una plantilla dividida
en una serie de mdulos que contienen informacin
sobre los siguientes temas: regulaciones, tica,
eutanasia, anestesia y analgesia, cuidados pre y post
operatorios, seguridad, enfermedades, nutricin,
alternativas y modelos, informacin sobre las
especies, USDA Animal Welfare Act. El programa
est diseado con muchas aplicaciones en memoria.
Funciona con ordenadores Macintosh e IBM
compatibles y necesita disco duro y memoria RAM
de 640K. MTM Associates Inc., PO Box 1606
Manassas, Virginia 2110, USA. Item no. 4211 WP.
30
Using animals in research: guidelines for
investigators (1986)

Esta pelcula es la grabacin integra del curso
patrocinado por la USDA/ Agricultural Research
Service y presentada a los investigadores el 25 de
marzo de 1986. Los ponentes del Animal and Plant
Health Inspection Service (APHIS), National
Institutes of Health (NIH), Public Health y
Agricultural Research Service presentan
informacin sobre leyes, normas y prcticas que
afectan a la utilizacin de laboratorios de
investigacin; y suministran referencias para
aquellos que quieran aprender ms acerca de
procedimientos especficos. Cinta 1: temas sobre la
regulacin desde la perspectiva de un APHIS. Cinta
2: la pelcula Unnecessary Fuss (alboroto
innecesario), montada por PETA a partir de la
documentacin de investigacin de la University of
Pennsylvania. Cinta 3: Principios y normas para el
uso de los animales en los programas extramuros
del NIH. Cinta 4: Principios y normas para el uso
de los animales en el rea de Beltsville. Cinta 5:
informacin tcnica y oportunidades de
entrenamiento para usuarios de animales. Cinta 6:
Discusin del grupo de expertos sobre las preguntas
de la audiencia. Cinta de vdeo, U-matic, 3/4,
NTSC, en lengua inglesa, 240 min. (6 cintas).
National Agricultural Library, Beltsville, Maryland
20705, USA. Videocassette no. 186.

Euthanasia interactive video programme

Para proporcionar a los alumnos la comprensin de
los requerimientos legales del Programa 1(UK) y
las regulaciones de Alderley Park que se pueden
encontrar en Humane Policy for Euthanasia of
Protected Species. Muestra el procedimiento
correcto de eutanasia cuando se utilizan los
siguientes mtodos: sobredosis de anestsico,
mtodos fsicos y dixido de carbono. Aporta un
sistema por el cual se puede valorar la comprensin
de los alumnos.
Duracin aproximada 1 hora y cuarto. Se puede
obtener una copia impresa de las respuestas de los
alumnos a las preguntas propuestas durante el
programa. Se puede visualizar sin el componente
interactivo -de este modo dura 25 minutos. Slo en
lengua inglesa. Persona de contacto Mr Bob Kemp,
Zeneca Pharmaceuticals, Mereside, Alderley Park,
Macclesfield, Cheshire SK10 4TG, UK. Tel: +44-
1625-512726; Fax +44-1625-583074/586278.
Common procedures and techniques and
survival surgery: tape II (1988)

Manejo de animales de laboratorio para recogida de
sangre, dosificacin oral, inyeccin y eutanasia:
hace nfasis en la minimizacin de las molestias a
los animales. Cinta de vdeo, NTSC/U-matic/VHS,
en lengua inglesa, 21 min. MDA-TV, University of
Texas Cancer Centre, 151 Holcombe Houston,
Texas 77030, USA. Order no. 861188.

Practical methodology: reptiles part III
special laboratory (1988)

Es la segunda parte de una serie de dos. Este
programa abarca tcnicas de laboratorio como
sexado, muestreo de sangre, colocacin de
catteres, puntos de inyeccin, dosificacin oral,
intubacin, inmovilizacin, anestesia y eutanasia en
reptiles. La cinta de vdeo va acompaada de un
manual. Cinta de vdeo, 1/2 VHS, NTSC, en
lengua inglesa, 18 min. National Agricultural
Library, Beltsville, Maryland 20705, USA.
Videocassette no. 414 Part II.

Biomethodology of the mouse

Este vdeo muestra primeros planos detallados
exponiendo las tcnicas adecuadas de manipulacin
e inmovilizacin, identificacin, inyeccin y
muestreo de sangre. Las tcnicas que se presentan
son las ms habituales, reproducibles, seguras y
menos estresantes para los animales. Video, VHS
(1/2) U-matic (3/4) standard tape formats. MTM
Associates Inc., PO Box 1606, Manassas, Virginia
2110, USA. Item no. 3211V.

The mouse: handling restraint, and other
techniques (1975)

Este programa muestra las habilidades tcnicas
bsicas que se necesitan para el adecuado uso y
cuidado de los ratones en investigacin biomdica.
Incluye manipulacin e inmovilizacin,
administracin de medicamentos por inyeccin y
por va oral, recogida de sangre y orina, sexado,
identificacin, anestesia y eutanasia. El juego de
diapositivas va acompaado de un manual. 48
diapositivas, cinta de audio, 12 minutos, en lengua
inglesa. National Agricultural Library, Beltsville,
Maryland 20705, USA. Slide no. 227, Part 2.

31
Biomethododology of the laboratory mouse
(1987)

Una exposicin de las tcnicas bsicas en torno a
los ratones de laboratorio incluyendo identificacin,
inmovilizacin, inyeccin, extraccin de sangre y
eutanasia. Cinta de vdeo 1/2, VHS (NTSC), en
color, en lengua inglesa. National Agricultural
Library, Beltsville, Maryland 20705, USA.
Videocassette no. 200.

The mouse, rat and hamster (1988)

Esta pelcula para entrenamiento suministra
informacin sobre el uso y cuidado humanitarios de
los roedores de laboratorio para cientficos, tcnicos
de laboratorio y estudiantes. Las recomendaciones
estn de acuerdo con la guide for the care and use
of laboratory animals del Public Health Services y
con las regulaciones establecidas por la USDA. Los
temas incluyen alojamiento, nutricin, ambiente,
libros de registro, cuidados sanitarios de los
animales, salud ocupacional, manipulacin e
inmovilizacin, tcnicas experimentales y
eutanasia. La cinta de vdeo se acompaa de un
guin, un test y la clave de respuestas. Cinta de
vdeo 1/2, VHS (NTSC), en lengua inglesa, 34
minutos. National Agricultural Library, Beltsville,
Maryland 20705, USA. Slide no. 338, Vol. 2.

The laboratory rat, biology, husbandry, and
research methodology (1977)

Este juego de diapositivas describe e ilustra la
anatoma y fisiologa bsicas de las ratas de
laboratorio, discute sobre los procedimientos
normales para el alojamiento de ratas en el
laboratorio y familiariza al alumno con la
metodologa bsica empleada en el manejo de las
ratas en investigacin. La metodologa en
investigacin incluye manipulacin,
inmovilizacin, recogida de sangre, anestesia y
eutanasia. Se acompaa de una gua en la que hay
una lista de los valores biolgicos. 59 diapositivas,
cinta de audio, en lengua inglesa. National
Agricultural Library, Beltsville, Maryland 20705,
USA. Slide no. 221.

Biomethodology of the rat (1987)

Exposicin de tcnicas bsicas en torno a los
animales de laboratorio incluyendo identificacin,
eutanasia. Cinta de vdeo 1/2 VHS, en lengua
inglesa, 16 minutos. National Agriculture Library,
Beltsville, Maryland 2075, USA. Videocassette no.
200.

Biomethodology of guineapig (1987)

Exposicin de las tcnicas bsicas en torno a los
inglesa. National Agriculture Library, Beltsville,
Maryland 2075, USA. Videocassette no. 200.

Biomethodology of the rabbit (1987)

Exposicin de las tcnicas bsicas en torno a los
inglesa, 15 minutos. National Agriculture Library,
Beltsville, Maryland 2075, USA. Videocassette no.
200.

Biomethodology of the cat (1987)

Esta pelcula expone a los tcnicos en animales las
tcnicas bsicas para el manejo, inmovilizacin y
control de los gatos en investigacin. Comprende
cmo extraerlos de las jaulas, vas de inyeccin,
recogida de sangre y eutanasia. Cinta de vdeo 1/2,
VHS (NTSC), en color, 15 minutos, en lengua
inglesa. National Agricultural Library, Beltsville,
Maryland 20705, USA. Videocassette no. 337.

The dog and cat (1988)

Este programa suministra informacin sobre el uso
y cuidado humanitarios de los perros y gatos de
laboratorio para cientficos, tcnicos de laboratorio
y estudiantes. Las recomendaciones estn de
acuerdo con la guide of the care and use of
laboratory animals del Public Health Services y
vdeo 1/2, VHS (NTSC), en color, en lengua
inglesa, 35 minutos. National Agricultural Library,
Beltsville, Maryland 20705, USA. Videocassette
no. 338, Vol. 4.
32
Biomethodology of the dog (1987)

Esta pelcula presenta a los tcnicos en animales
tcnicas seguras y humanitarias para el manejo de
los perros en investigacin incluyendo cmo
extraerlos de las jaulas, vas de inyeccin, recogida
de sangre y eutanasia. Cinta de vdeo 1/2 VHS
(NTSC), en color, 15 minutos, En lengua inglesa.

Biomethodology of the primate (1987)

Esta pelcula expone las tcnicas para el manejo de
primates en investigacin. Incluye inmovilizacin
manual y qumica, identificacin, vas de inyeccin,
extraccin de sangre y eutanasia. Cinta de vdeo
1/2 VHS (NTSC), en color, en lengua inglesa.

The non-human primates (1988)

Este programa suministra informacin sobre el uso
y cuidado humanitarios de los primates de
laboratorio para cientficos, tcnicos de laboratorio
y estudiantes. Las recomendaciones estn de
acuerdo con la guide for the care and use of
laboratory animals del Public Health Services y
vdeo 1/2, VHS (NTSC), en lengua inglesa, 29
minutos. National Agricultural Library, Beltsville,
Maryland 20705, USA. Slide no. 338, Vol. 5.

Informacin adicional sobre materiales de
entrenamiento

Se puede obtener informacin sobre los materiales
de entrenamiento de:

(1)Dept of Laboratory Animals Science (Dr Jan
Nab, Ing T.P. Rooymans) Utrecht University,
Postbus 80.166, 3508 TD Utrecht, The
Netherlands.
(2)Base de datos NORINA. Base de datos en
lengua inglesa de los medios audiovisuales para
ser utilizados en ciencias biolgicas. Contactar
con Karina y Adrian Smith, Laboratory Animal
Unit Norwegian College of Veterinary Medicine,
PO Box 8146 Dep., 00033 Oslo 1, Norway. Fax
+47 22 96 45 35, Telephone +47 22 96 45 74,
email: adrian.smith@veths.no.

Tabla 1 Fases de la prdida de consciencia,
conducentes a la muerte en peces (segn McFarland y
Klontz, 1969)

Nivel

Denominacin

Parmetro(s)
0 Normal Reacciona a estmulos externos;
equilibrio y tono muscular
normales
1 Sedacin ligera Ligera prdida de respuesta a
estmulos externos visuales y
tctiles; equilibrio normal
2 Sedacin
profunda
Prdida total de respuesta a
estmulos externos excepto a
presin fuerte; ligera
disminucin del movimiento
opercular; equilibrio normal
3 Prdida parcial
del equilibrio
Perdida parcial del tono muscular;
natacin errtica; incremento
del movimiento opercular;
respuestas slo ante estmulos
tctiles fuertes y vibratorios
4 Prdida total
del equilibrio
Perdida total del tono muscular y
del equilibrio; movimiento
opercular rpido; respuesta slo
ante estmulos de presin
profundos
5 Prdida de
respuestas
reflejas
Perdida total de respuesta;
movimiento opercular muy
superficial; latido cardiaco muy
lento
6 Colapso medular Cese del movimiento opercular
inmediatamente despus de
boquear, seguido por parada
cardiaca

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