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Ministerio de EDUACIN, CIENCIA Y

TECNOLOGA
UNIVERSIDAD TECNOLGICA NACIONAL
FACULTAD REGIONAL MENDOZA


Licenciatura y
Tecnicatura en
Enologa
Ctedra: Qumica Orgnica Orientada
Docente: Ing. Mariana A. Garca.
Tema: Prctico de Laboratorio N 1. Destilacin y Cromatografa

PRCTICO DE LABORATORIO N 1:
Destilacin Simple y Fraccionada en el Vino
Cromatografa. Metodologa aplicada en Anlisis de Vinos
La Qumica Orgnica tiene como objetivos fundamentales la determinacin de estructuras y la
obtencin de nuevos compuestos naturales o de sntesis. Esto se puede realizar por algunos
de los siguientes mtodos:
I-DESTILACIN
Destilacin simple: De utilidad cuando los componentes de la solucin poseen puntos de
ebullicin bastante diferentes.
Destilacin fraccionada: Este procedimiento es til cuando se deben fraccionar soluciones
cuyos componentes presentan puntos de ebullicin prximos entre s.
PROPSITOS DE LA PRCTICA
1- Producir la separacin de los componentes de un sistema homogneo.
2- Destilar todo el etanol contenido en la muestra, con la intencin de determinar el contenido
de alcohol de ese vino.
3- Elaborar los datos obtenidos a travs de grficos.
4- Sealar las ventajas e inconvenientes de cada mtodo.
FUNDAMENTO TERICO
Se denomina presin de vapor (p
v
) de un lquido a la presin del vapor en equilibrio con la fase
lquida.
La presin de vapor depende, para cada sustancia, de la temperatura y, en general, aumenta
con sta. La grfica, aproximada para el agua de p
v
=f (t) sera:
GRAFICO 1







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El punto de ebullicin de un lquido es la temperatura a la cual la presin del vapor del mismo
iguala a la presin atmosfrica. Las representaciones de la presin de vapor en funcin de la
temperatura son entonces, adems de curvas de presin de vapor, curvas de puntos de
ebullicin.
Cuanto mayor es la presin de vapor de un lquido, para una dada temperatura, tanto ms
voltil es y, en general, tanto menor resulta su punto de ebullicin normal.
En una mezcla de lquidos, la presin de vapor total es igual a la suma de las presiones
parciales de los componentes. Estas a su vez pueden obtenerse multiplicando la presin total
por la fraccin molar x
i
que es una medida qumica de la cantidad relativa de cada
componente.
El mecanismo complejo de separacin en la destilacin fraccionada es efectuado
automticamente por las llamadas columnas de rectificacin, a travs de las cuales circulan
verticalmente los vapores en contracorriente con el lquido que se condensa en el trayecto
superior. Hay un intercambio de calor entre ambos fluidos y el vapor condensa sus
componentes menos voltiles. Se logra as un enriquecimiento de los vapores en sustancias de
menor punto de ebullicin que destilan hasta agotarse.
Con el objeto de asegurar el contacto entre el vapor y el lquido, se colocan rellenos de vidrio o
cermica (anillos Raschig) o bien se da al interior una conformacin geomtrica adecuada,
como en las columnas de platos o en las de Vigreux.



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DESTILACIN DEL VINO
Un vino es una mezcla muy compleja; contiene agua, etanol, azcares, cidos orgnicos,
pigmentos (que le dan color) y otros ingredientes. Los componentes voltiles que se
encuentran en cantidad considerable son precisamente el agua y el etanol, cuyos puntos de
ebullicin son, respectivamente, 100,0 C y 78,3 C. Ambos pueden formar un azetropo que
hierve a 78,2 C y cuya composicin es 96 % de masa de etanol (97 % en volumen). En el vino,
el contenido en alcohol se expresa en porcentaje de volumen y es algo mayor del 10 %. En la
destilacin de vino no se puede obtener ninguna fraccin que contenga alcohol al 100 %,
debido a que el componente ms voltil es precisamente el azetropo.
En esta prctica no se van a obtener fracciones; lo que se har es destilar todo el etanol
contenido en la muestra, con la intencin de determinar el contenido de alcohol de ese vino.
En realidad lo que se determinar directamente es el contenido de alcohol en una mezcla de
etanol y agua proveniente del vino que ha sido destilado. Para ello, se destilar hasta obtener
todo el alcohol del vino y se le aadir agua destilada hasta completar el volumen de la
muestra de vino que se ha empleado. Luego se sumergir un alcohmetro en la disolucin
etanol-agua y en su escala se leer directamente el grado alcohlico aproximado.
Este mtodo de medida est basado en que la densidad de la mezcla depende de su
composicin y un alcohmetro no es ms que un densmetro cuya escala tiene traducidos los
valores de densidad a valores de porcentaje de alcohol.
Materiales
1 matraz de 200 mL
1 baln de destilacin de 500 ml
1 refrigerante de Liebig
Mangueras
Piedras porosas
1 termmetro (0-100 C)
1 probeta de 250 mL
1 soporte universal
pinzas de matraz, nueces u otras fijaciones
1 trpode, mechero y manta de amianto
Material comn: alcohmetro (10-20)
Procedimiento
Destilacin Simple del Vino


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Deber armar el equipo para destilar el vino, pero antes de emprender ese trabajo, atienda a
las indicaciones que se le harn para ello. La figura muestra cmo van a quedar ensamblados
el matraz y las dems piezas. Cercirese de que lo ha entendido completamente y despus
proceda al montaje. En particular, tenga en cuenta estas observaciones.
1. Ponga en el matraz 200 mL del vino a destilar y unas pocas piedras de ebullicin (plato
poroso) que servirn para crear burbujas de aire en el seno del lquido a destilar y as se
producir una ebullicin sin sobresaltos; esto es, no habr sobrecalentamiento del lquido
(temperatura del lquido por encima de su punto de ebullicin).
2. El termmetro debe situarse de tal manera que el bulbo quede ligeramente por debajo de la
salida hacia el refrigerante; as los vapores que abandonan la cabeza de destilacin, envuelven
al bulbo del termmetro y se puede medir bien su temperatura.
3. Por la camisa del refrigerante debe circular agua del grifo, que ha de entrar por la tubuladura
inferior y salir por la superior (as el agua fra y el condensado circularn en contracorriente);
hay, pues, que conectar el refrigerante al grifo y al sumidero, mediante sendos tubos de goma.
Tras efectuar ambas conexiones, abra el grifo suavemente; bastar con un pequeo caudal de
agua.

NO USE EL APARATO ANTES DE OBTENER EL VISTO BUENO DEL PROFESOR.
4. Ponga en la probeta 2 mL de agua destilada y sitela bajo la alargadera. La finalidad de
poner agua es evitar que el primer destilado, que ser rico en etanol, se evapore en la probeta.
5. Ajuste el mechero al matraz y empiece la calefaccin. Apenas empiece la ebullicin, reduzca
inmediatamente el aporte de calor.


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6. La destilacin debe ocurrir lentamente y sin interrupciones y, una vez que ha empezado,
siempre debe pender una gota de condensado del bulbo del termmetro. A partir de la primera
gota de destilado anote la temperatura cada dos minutos durante la destilacin. Cuando la
temperatura ascienda a 80 C, detenga la calefaccin.

Tiempo (min.)
Temp. ( C)

Tiempo (min.)
Temp. ( C)

7. Enrasar el matraz y luego colocar la mezcla hidroalcohlica en probeta de 250 mL para
medir el grado alcohlico.
8. Introduzca suavemente el alcohmetro en la probeta y, antes de soltarlo, imprmale (con
cuidado) un movimiento de rotacin para que no se adhiera a las paredes. Lea el grado
alcohlico y antelo en el cuaderno.
9. Realice los siguientes informes:
Cual es la misin del refrigerante
Para qu se aaden las piedras porosas al matraz de destilacin
Observe como vari la T
eb
durante la destilacin. Indique a que se debe dicha variacin.
Realice un grfico que represente esta variacin.
10. Una vez finalizada la prctica descartar el contenido de la probeta en el contenedor
dispuesto para ello.
11. Desmontar el aparato de destilacin, empezando por separar el termmetro.
12. Del contenido que queda en el matraz de destilacin, quitar las piedras de ebullicin. El
residuo del vino verterlo al sumidero.
13. Lavar las piezas utilizadas. Limpiar y ordenar el lugar. Guardar cada instrumento de trabajo
en el lugar que corresponda.
Destilacin Fraccionada del Vino
1. Montar el aparato segn el esquema que se muestra a continuacin.





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2. Poner en el matraz 200 mL del vino a destilar y unas pocas piedras de ebullicin
3. Por la camisa del refrigerante hacer circular agua del grifo.
4. Poner en la probeta 2 mL de agua destilada y sitela bajo la alargadera.
5. Ajuste el mechero al matraz y empiece la calefaccin. Apenas empiece la ebullicin, reduzca
inmediatamente el aporte de calor.
6. A partir de la primera gota de destilado anote la temperatura cada dos minutos durante la
destilacin. Cuando la temperatura ascienda a 80 C, detenga la calefaccin.

Tiempo (min.)
Temp. ( C)

Tiempo (min.)
Temp. ( C)

7. Enrasar el matraz y luego colocar la mezcla hidroalcohlica en probeta de 250 mL para
medir el grado alcohlico.


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8. Repetir luego los mismos pasos que para Destilacin simple.
Conclusiones
Seale las ventajas y desventajas de ambos mtodos en cuanto a la rapidez, tamao de
aparatos, comodidad de trabajo, costo, eficiencia de separacin. Realizarlo en un cuadro
comparativo.
II-CROMATOGRAFA
PROPSITOS DE LA PRCTICA
1- Separar los componentes de un sistema homogneo.
2- Extraer conclusiones sobre los fenmenos de adsorcin y de solubilizacin.
3- Realizar un seguimiento del nivel de cido mlico durante la fermentacin malolctica
posterior a la fermentacin alcohlica. Prctica muy utilizada en bodegas.
FUNDAMENTO TERICO
Las molculas de una sustancia pueden tener, de acuerdo con el tipo de unin qumica que
posean, una distribucin no homognea de cargas elctricas, lo que genera un fenmeno
llamado POLARIDAD.
Esta polaridad regula dos mecanismos que, a veces, estn en competencia: la adsorcin de
unas sustancias por otras, que las retienen en su superficie y la solubilizacin por parte de un
solvente que trata de llevar a esas sustancias retenidas al seno de la solucin que tiende a
formar.
De esta manera, si un componente A se deposita sobre un adsorbente B y tras ello se genera
una corriente de solvente C a travs del sistema, el componente A ser arrastrado tanto ms
velozmente cuanto ms soluble sea y menos adsorbido est. De todos modos su velocidad es
menor que la del solvente y se define para un tiempo t.
Si en vez de tratarse de una sustancia se realiza este procedimiento con una solucin, las
distancias recorridas por los componentes sern distintas, debido a su diferente constitucin
qumica y se lograr la separacin de los mismos.
En la cromatografa sobre papel, el lquido (eluyente) corre por el papel en base a la capilaridad
y su velocidad es pequea, mxima en un ambiente saturado del mismo solvente y el recorrido
de las sustancias eluidas a veces no se percibe a simple vista (sustancias incoloras), por lo que
hace falta revelarlas con un reactivo adecuado.
DETERMINACIN DE LA PRESENCIA DE CIDO MLICO, TARTRICO, SUCCNICO Y
LCTICO POR CROMATOGRAFA SOBRE PAPEL.
Los cidos mlico y tartrico son cidos especficos de la uva y del vino y disminuyen durante
la fermentacin. Ambos pueden ser atacados por las bacterias lcticas.


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En el caso del cido tartrico, el vino se vuelve inspido adquiriendo al mismo tiempo un color
apagado, fenmeno que se conoce con el nombre de "enfermedad de la vuelta".
En el caso del cido mlico, el ataque por bacterias lcticas da lugar a lo que se conoce por
"fermentacin malolctica", producindose como productos cido lctico y dixido de carbono.
El vino entonces adquiere ms suavidad al paladar y menor acidez.
El cido succnico acompaa siempre a la fermentacin del azcar del vino, y la cantidad
producida no evoluciona a lo largo del proceso de conservacin del vino.
El cido lctico tambin tiene su origen en la fermentacin alcohlica, aunque tambin se
produce en la fermentacin lctica de los azcares, del glicerol y de otros componentes.
PRCTICA N 1
Materiales
Papel Whatman N 1 cortado en tiras.
Recipiente cromatogrfico.
Reactivos
Solvente: Butanol o mezcla de 200 ml. de propanol, 200 ml de agua y 21,7 ml de cido
frmico al 90%.
Solucin reveladora: Disolucin acuosa de verde de bromotimol al 15%.
Tcnica
- Se coloca una gota de vino a analizar a 1 cm. del borde inferior del papel, de forma que la
mancha producida no sobrepase los 0,5 cm. de dimetro.
- Se introduce la tira de papel en el recipiente cromatogrfico previamente saturado de
solvente, de manera que el borde inferior del papel apenas lo toque.
- Se deja que el solvente ascienda por el papel (aproximadamente dos horas), hasta que el
frente alcance una altura de 15 cm. Se saca la tira de papel y se deja secar en un lugar
aireado y que tenga una total ausencia de vapores cidos. Una vez seca, se pulveriza sobre
el papel la solucin reveladora, apareciendo entonces unas manchas amarillas sobre un
fondo verde-azulado. Aparecern tres manchas: la inferior correspondiente al cido tartrico;
en medio el cido mlico y en la parte superior del papel una mancha debida a los cidos
lctico y succnico.
- El mtodo se puede considerar semicuantitativo, ya que la intensidad y el tamao de cada
mancha son aproximadamente proporcionales al contenido de cada cido en el vino.
- En el caso de vinos que contengan muy pequea cantidad de cido mlico, es conveniente
(con fines pedaggicos), aadir 1 g/l de este cido para detectar su presencia.


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PRCTICA N 2
Materiales
Papel Whatman N 1
Un recipiente para realizar la cromatografa
Micropipeta o jeringuilla
cido mlico
cido actico
cido lctico
cido tartrico
n-butanol
Azul de bromofenol
Tcnica
- En un papel Whatman N 1, de aproximadamente 20 x 20 cm, se traza una lnea con lpiz
de grafito a 3 cm del borde inferior, sobre la cual se siembran cada 3 cm las gotas de vino a
estudiar con la ayuda de una micropipeta o jeringuilla.
- Con la micropipeta o jeringuilla, que ha sido lavada previamente en alcohol al 50%, se
proceden a colocar unas 6 gotas de cada solucin testigo y de los vinos a analizar. Se
deber esperar que seque cada una de la las gotas.
- Una vez seco el papel, se coloca en un recipiente que contiene el solvente, mojando tan
slo el borde inferior de la hoja, y se cierra con cierre hermtico.
- Para el solvente se mezclan 50 ml de n-butanol con 1 g/l de azul de bromofenol con 25 ml
de cido actico al 50% y se coloca en el recipiente, el cual debe quedar tapado siempre
para evitar la prdida de los gases.
- Una vez que el frente del solvente ha llegado a 2 3 cm del borde superior de la hoja, se
saca el cromatograma y se procede a secarlo en corriente de aire y a la sombra para su
revelacin.
- El revelado se muestra de fondo azul y con manchas amarillas.
- Los cidos del vino se separan en el siguiente orden: en la parte ms baja se fija el cido
tartrico, al centro el cido mlico y en la parte superior el cido lctico.





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FRMULAS QUMICAS DE LOS CIDOS PRESENTES EN EL VINO





















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