Unidad 2.

Mtodos de extraccin, anlisis y control de calidad

Introduccin

En esta unidad del programa de formacin se desarrollarn los temas
relacionados con las metodologas de extraccin de los aceites esenciales, as
como los anlisis y controles de calidad utilizados con mayor frecuencia. Se
expondr el mtodo de extraccin por prensado en fro, adems de tres mtodos
de extraccin a travs del proceso de destilacin por vapor de agua: destilacin
por arrastre de vapor, destilacin directa e hidrodestilacin. En la seccin de
anlisis y control de calidad se conocern los procedimientos para la
determinacin de los parmetros de densidad, viscosidad e ndice de refraccin,
as como el procedimiento de cromatografa de gases. Finalmente se expone
brevemente el tema de normatividad de los aceites esenciales y se relacionan
normas internacionales afines.


Descripcin del material del programa de formacin

Estos textos le van a permitir al aprendiz, comprender todo acerca de la unidad
que va a desarrollar, tambin los puede utilizar de apoyo para realizar las
actividades propuestas.


Tema 1. Mtodos de extraccin de aceites esenciales

Destilacin por vapor de agua

Este mtodo de extraccin de aceites esenciales es uno de los ms sencillos y
econmicos de realizar, es por esta razn que tambin se considera uno de los
ms utilizados a nivel de laboratorios y pequeas empresas que no cuentan con
tecnologa y equipos avanzados. Usualmente este mtodo es utilizado para
extraer el aceite de componentes orgnicos de tipo planta, por ejemplo: el boldo,
el romero, el eucalipto, entre otros.

Para la realizacin de este mtodo de extraccin se utiliza el vapor de agua, por lo
tanto, es necesario tener en cuenta que los aceites esenciales y el agua son
lquidos inmiscibles, lo cual quiere decir que se trata de dos lquidos que no
pueden mezclarse formando una mezcla homognea. Para realizar la operacin
de destilacin se inducen dos cambios de fase en la materia que se pretende


extraer: la vaporizacin y la condensacin, es decir, la transicin de un lquido a un
gas, y luego de un gas a un lquido.
En esta unidad se exponen tres variaciones del mtodo de extraccin por
destilacin, estos son: La destilacin por arrastre de vapor, la destilacin directa y
la hidrodestilacin. Este mtodo, con todas sus variaciones se basa en el principio
fsico establecido por la ley de las presiones parciales, tambin conocida como la
ley de Dalton.

Ley de Dalton

La ley de las presiones parciales fue establecida en el ao de 1803 por el
reconocido cientfico britnico John Dalton. Esta plantea que si dos o ms gases
que no reaccionan qumicamente entre s, estn contenidos en un recipiente
cerrado y a temperatura constante, cada uno de estos gases ejercer la misma
presin que tendra si ocupara todo el volumen del recipiente, es decir, si estuviera
solo. La suma de todas las presiones de los gases equivale a la presin total del
sistema. La expresin matemtica que define esta ley es la siguiente:

El inters de la aplicacin de esta ley a la metodologa de extraccin de aceites
esenciales radica en la siguiente implicacin fsica: en un sistema con dos o ms
lquidos inmiscibles donde se cumple la ley de Dalton, la temperatura de ebullicin
del lquido ms voltil ser igual a la temperatura a la cual la suma de las
presiones es igual a la temperatura atmosfrica.
Lo anterior puede aplicarse al contexto del mtodo de extraccin de aceites
esenciales por destilacin de vapor de agua de la siguiente manera: los aceites
esenciales son lquidos que tienen una temperatura de ebullicin que vara
dependiendo del tipo de aceite, pero usualmente en la mayora de los casos es
mayor a la temperatura de ebullicin del agua, es decir a los 100C a presin
ambiente. Sin embargo, en un sistema cerrado donde se involucran el vapor de
agua y el aceite esencial, bajo la ley de Dalton la temperatura de ebullicin del
aceite se reducir considerablemente por debajo de los 100C, lo que facilita el
proceso de destilacin necesario para efectuar la extraccin.
Destilacin por arrastre de vapor de agua
Esta es la primera forma de extraccin que se va a estudiar, para ello se requiere
de dos recipientes, uno con agua y otro para el componente orgnico del cual
queremos extraer el aceite esencial, si se desea se puede introducir un


termmetro en cada recipiente. Es conveniente que dicho componente orgnico
sea molido o cortado en trozos antes de introducirlo en el recipiente, debido a que
los aceites esenciales estn contenidos en glndulas o conductos dentro del
vegetal, y al cortarlo en trozos se facilita su extraccin.
Adems, es necesario que los dos recipientes estn conectados entre s por un
tubo de vidrio y sus bocas estn selladas, con el propsito de que el proceso se
desarrolle correctamente. Adicionalmente se requiere de un condensador
conectado al recipiente del componente orgnico por un extremo, y por el otro
extremo conectado con un tercer recipiente en donde se recolectar el aceite
mezclado con el agua. A continuacin se muestra una figura en donde se expone
el sistema descrito.

Imagen: (Stamm, 1970)
El procedimiento consiste en inducir el proceso de ebullicin del agua en el primer
recipiente, mediante la adicin de calor con un mechero convencional, con el fin
de que esta se vaporice cambiando de fase lquida a gaseosa. El vapor de agua
generado se movilizar hacia el segundo recipiente en donde por efecto de la ley
de Dalton el aceite esencial alcanza la temperatura de ebullicin y se evapora. A
continuacin el vapor de agua y el aceite evaporado se trasladan hacia el
condensador, en donde por efecto de la circulacin de los gases y el intercambio
de calor con agua circulante, regresan a su estado lquido. Finalmente el agua y el


aceite son vertidos en un ltimo recipiente, en donde forman una mezcla
heterognea.
Al finalizar este proceso de extraccin se debe separar el aceite del agua. Para
esto se puede recurrir al mtodo de separacin que resulte ms conveniente. El
que se utiliza con mayor frecuencia debido a su funcionalidad y economa es el
mtodo de decantacin, que consiste en separar los dos lquidos mediante la
utilizacin de un embudo de decantacin en donde por efecto de la gravedad se
extrae el lquido de menor densidad, en este caso el agua, separndolo del aceite.

Destilacin directa

Este procedimiento de destilacin para extraer aceites esenciales de un vegetal
tiene mucha similitud con el procedimiento de destilacin por arrastre de vapor. En
este caso no se utiliza un recipiente diferente para generar el vapor de agua, se
deben mezclar en un mismo recipiente el agua y el componente vegetal del cual
se obtendr el aceite esencial, este debe ser molido o cortado en trozos para
facilitar la extraccin. Para ello es conveniente utilizar un agitador trmico para
calentar y agitar al mismo tiempo el contenido del recipiente, pero en caso de que
no se disponga de uno se puede utilizar un mechero convencional.

El procedimiento consiste en inducir calor al recipiente con el fin de que tanto el
agua como el aceite alcancen la temperatura de ebullicin y se evaporen.
Posteriormente este vapor se traslade hacia un condensador en donde se
disminuye su temperatura hasta el punto en que se efecta el cambio de fase de
condensacin, en donde ambos gases retornan a su estado lquido. El proceso de
destilacin finaliza en el momento en que el agua y el aceite esencial pasan de
estar en el condensador a un nuevo recipiente, en donde se podr apreciar
visualmente la separacin entre los dos productos, ya que como se ha
mencionado con anterioridad se trata de dos lquidos inmiscibles.

Por ltimo, para obtener el aceite esencial se debe realizar un procedimiento de
separacin. Nuevamente es recomendado utilizar el mtodo de decantacin. En la
siguiente figura muestra un sistema de destilacin directa:




Imagen: (Stamm, 1970)
Hidrodestilacin

Este procedimiento es realizado mediante la utilizacin de un dispositivo de
laboratorio denominado equipo de Clevenger. Este sistema permite integrar todas
las etapas del proceso de destilacin, incluyendo la vaporizacin, la condensacin
y la decantacin. A continuacin se encuentra una ilustracin del equipo de
Clevenger.

Imagen: (Stamm, 1970)
Para efectuar el proceso de extraccin de aceites esenciales con este elemento se
requiere que el material vegetal del cual se extraer el aceite sea cortado en
trozos, luego se debe introducir en el recipiente o matraz de vidrio contenedor. A
continuacin se le aade agua al mismo recipiente, es importante que la cantidad


de agua aadida sea abundante, puesto que en el momento de calentar el
recipiente con fuego, el material vegetal podra llegar a carbonizarse y esto
ocasionara un cambio en las propiedades del aceite esencial, haciendo que este
adquiera un olor desagradable.
El recipiente con el agua y el componente vegetal se calientan usando un
mechero, con el fin de que el aceite en el interior de las glndulas del vegetal
alcance su punto de ebullicin al igual que el agua y ambos se evaporen. Luego
los gases viajarn a travs de los conductos del equipo Clevenger hasta llegar al
condensador, en donde son regresados a su fase lquida. Finalmente se abre la
vlvula de decantacin con el fin de que el agua sea extrada del aparato y quede
nicamente el aceite esencial, que posteriormente ser retirado.

Prensado en fro

El mtodo de prensado en fro para la extraccin de aceites esenciales es
convencionalmente utilizado para los casos de componentes orgnicos ctricos,
como lo son: el limn, la naranja, la mandarina, entre otros. El aceite esencial est
contenido en el pericarpio del ctrico, este es la piel que rodea a la semilla. Por lo
cual, en el momento de realizar el prensado se utilizan nicamente semillas.

Para el procedimiento se requiere de una prensa que permita medir y controlar la
temperatura. Las semillas son ubicadas en la prensa y esta se activa para aplicar
presin sobre el producto. Al aumentar la presin sobre las semillas, se
incrementa tambin la temperatura; para este procedimiento se requiere que esta
no sobrepase los 45C, es por esto que se denomina prensado en fro.
Dependiendo del tipo de semilla que se procese el incremento de temperatura
debido a la presin ser diferente, por esto se debe realizar una supervisin
constante de la temperatura durante el prensado, para que no se sobrepase la
temperatura lmite.
En el momento en que se realiza el prensado, el aceite esencial contenido en el
pericarpio de las semillas es liberado, se requiere entonces aplicar una operacin
para recolectarlo. Recordemos que los aceites esenciales son por lo general
sustancias voltiles, lo que quiere decir que cuando son expuestos al aire libre
tienden a evaporarse con facilidad, por lo cual es necesario recolectarlos a la
menor brevedad posible y almacenarlos en un recipiente hermtico.
Para la extraccin de aceites a pequea escala, o nivel de laboratorio se puede
utilizar un trapo de tela, una esponja o cualquier material absorbente para
recolectar el aceite extrado por la prensa, luego se debe exprimir y verter el aceite


en un recipiente. El inconveniente que presenta este mtodo de extraccin es que
la cantidad de aceite recolectado depende necesariamente de la presin que se
aplique a las semillas. En el caso de aplicar mucha presin la temperatura puede
aumentar a ms de 45C haciendo que el aceite disminuya su calidad.

Tema 2. Anlisis y control de calidad de los aceites esenciales

Para la seccin de anlisis en este programa de formacin, se exponen algunos
de los parmetros fsicos y qumicos de los aceites esenciales y los mtodos
utilizados convencionalmente para su determinacin. Es importante tener en
cuenta que cada aceite esencial tiene parmetros de valor especfico y diferente
de otros aceites, el origen geogrfico y el mtodo de extraccin de los aceites
esenciales puede influir en dichos parmetros, por lo cual, la determinacin de
estos parmetros es de gran importancia para determinar la calidad de un aceite
esencial. La siguiente tabla representa la caracterizacin de los parmetros de
calidad de los aceites esenciales.

Caractersticas
organolpticas
Olor
Apariencia
Color
Determinaciones
fsicas
Densidad
Viscosidad
Poder rotatorio
ndice de refraccin
Miscibilidad en etanol
Punto de congelacin
Punto de inflamacin
Rango de destilacin
ndices qumicos
ndice de acidez
ndice de ster
ndice de saponificacin
ndice de acetilo
ndice de fenoles
Caractersticas
cromatogrficas
Perfil cromatogrfico por cromatografa de gases
Cuantificacin de los principales componentes
Caractersticas
espectroscpicas
Ultravioleta visible
Infrarrojo
Otras
determinaciones
Pesticidas
Metales pesados



Densidad

La densidad es una magnitud fsica que relaciona la cantidad de materia existente
en un espacio, en otras palabras, relaciona la masa de un objeto con el volumen
que ocupa. En el sistema internacional de medidas, la unidad utilizada para
cuantificar la densidad es kg/m
3
. La expresin matemtica que define la densidad
es la siguiente:

donde:


Este parmetro es relativamente fcil de calcular para el caso de los aceites
esenciales y permite diferenciar un aceite esencial natural de uno sinttico. Es
necesario tener en cuenta que la determinacin de la densidad se hace a una
temperatura constante, preferiblemente a temperatura ambiente entre 20 y 25C.
Para obtener la densidad de un aceite esencial se requiere de un elemento de
laboratorio que permita determinar el volumen de un lquido, esto es cualquier
recipiente de vidrio que tenga demarcaciones de volumen, de igual manera se
requiere de un dispositivo que permita determinar la masa de un objeto, es decir
una balanza. Por cuestiones de precisin y exactitud, el elemento ms
recomendado para realizar el clculo del volumen es un picnmetro, se trata de un
recipiente o matraz de vidrio que puede contener una pequea, pero exacta
cantidad de lquido. Existen picnmetros de diferentes volmenes, pero
usualmente son menores a 50 ml. Para el clculo de la masa se recomienda
utilizar una balanza electrnica o de precisin, que permita obtener el valor con
una precisin de por lo menos 0.01g.
El procedimiento para calcular la densidad de un aceite esencial es el siguiente:
En primer lugar se requiere obtener el valor de la masa del picnmetro estando
vaco, para esto se debe pesar con la balanza electrnica. Luego el picnmetro
debe ser llenado en su totalidad con el aceite esencial, la capacidad del
picnmetro nos indicar el volumen del aceite. A continuacin el picnmetro lleno
de aceite debe ser pesado de nuevo en la balanza. Ahora para conocer el valor de
la masa del aceite se deben restar los valores obtenidos en la balanza, es decir la
masa del picnmetro lleno de aceite menos la masa del picnmetro estando vaco.
Una vez se han obtenido los datos de masa y volumen se aplica la frmula
expuesta anteriormente:

Para el caso de los aceites es recomendable expresar la densidad en trminos de
g/cm
3
. Es necesario tener en cuenta que los picnmetros generalmente expresan
p: densidad
m: masa
v: volumen



el volumen en mililitros (ml), y un mililitro es equivalente a un cm
3
por lo cual no se
requiere realizar una conversin.

Viscosidad

La viscosidad se define como la oposicin de un fluido a las deformaciones
tangenciales, puede definirse tambin como la dificultad con la que un lquido fluye
a travs de una tubera. Este es un parmetro que podemos establecer en los
aceites esenciales para diferenciar un producto puro de uno que ha sido mezclado
con diluyentes. La unidad de medida de la viscosidad en el sistema internacional
es el poise (P), que es equivalente a 1g/scm.

El procedimiento para determinar la viscosidad de un lquido, en nuestro caso un
aceite esencial, se realiza mediante la utilizacin de un instrumento de laboratorio
denominado viscosmetro de Ostwald. Este implemento nos permite visualizar el
movimiento de un lquido a travs de una tubera y calcular el tiempo que le toma
realizar esta operacin, con el cual se podr obtener el valor de la viscosidad
absoluta del lquido. Es importante tener en cuenta que la determinacin de la
viscosidad debe hacerse a una temperatura constante, preferiblemente a
temperatura ambiente entre 20C y 25C.
A continuacin se muestra un esquema de un viscosmetro de Ostwald.

Imagen: (Stamm, 1970)


Para establecer el valor de la viscosidad absoluta del aceite esencial se debe
comenzar evaluando en el viscosmetro de Ostwald un lquido con una viscosidad
absoluta conocida, lo ms conveniente es utilizar agua, el valor de su viscosidad
es 1.002 cP (centipoise) a una temperatura de 20C. Se debe comenzar
introduciendo el agua por la tubera de entrada del viscosmetro.
La presencia de la cpsula nmero 1 es necesaria para mantener la presin
hidrosttica constante. A medida que se vaya aadiendo ms agua, esta
continuar su flujo por la tubera delgada hasta llegar al lmite A, que demarca el
inicio de la cpsula 2. Esta es la cpsula de medicin, se requiere medir el tiempo
que el agua tarde en llenar esta cpsula, es decir, desde que llega al lmite A,
hasta que alcanza el lmite B. Este tiempo se denomina tiempo de flujo y vara en
cada fluido dependiendo de la viscosidad. Una vez finalizada la operacin con el
agua, se requiere repetirla utilizando el aceite esencial, pero es necesario secar
por completo el viscosmetro antes de introducir el aceite, para no obtener valores
errados. En el momento en que se tengan ambos tiempos de flujo se procede a
realizar el clculo de la viscosidad absoluta del aceite esencial, mediante la
siguiente frmula matemtica:

Donde:

ndice de refraccin
El ndice de refraccin de un lquido es una magnitud fsica que determina la
proporcin del cambio de direccin de un rayo de luz al cambiar el medio en el que
se mueve, especficamente cuando entra en contacto con un lquido. Este
fenmeno es el que se observa cuando se introduce un lpiz en un vaso de agua,
puede verse como aparentemente el lpiz se parte. Para el caso de los aceites
esenciales, el ndice de refraccin es un parmetro propio de cada aceite esencial,
y por lo tanto, si un aceite es mezclado con diluyentes u otras sustancias, su


ndice de refraccin cambia, por lo cual este es un parmetro que sirve para
determinar la pureza de un aceite esencial.
El clculo del ndice de refraccin est basado en la ley de Snell. Esta es una
expresin matemtica que relaciona el ngulo de incidencia de un rayo de luz
sobre una superficie de separacin lquida, con un ngulo de refraccin. A
continuacin se muestra un esquema que ilustra este concepto.

Imagen: (Stamm, 1970)

La frmula matemtica de la ley de Snell es la siguiente:

)

Donde:

Para el caso de los aceites esenciales se asume el primer medio como el aire, que
tiene un ndice de refraccin de 1.0003 y el segundo medio es el aceite, por lo
tanto n
2
es el ndice a calcular.


El procedimiento de clculo puede realizarse mediante la utilizacin de un
refractmetro, que es un dispositivo electrnico que permite medir la velocidad de
propagacin de la luz en un medio. Tambin es posible simular un escenario en
donde se puedan calcular visualmente los ngulos de incidencia y refraccin de la
luz sobre una superficie de aceite esencial. Una vez se han determinado dichos
ngulos se aplica la frmula de la ley de Snell, despejada para conocer el valor del
ndice de refraccin del aceite, teniendo en cuenta que el primer medio debe ser el
aire, con lo cual n
1
toma el valor de 1.0003.

)
(

)


Cromatografa de gases

La cromatografa es una tcnica cientfica que permite analizar compuestos
qumicos complejos, tales como los aceites esenciales, y analizar el
comportamiento y cantidad de cada uno de los componentes del compuesto.

Existen varios tipos de cromatografas, pero en general todas se basan en los
mismos principios de funcionamiento. En primer lugar, el lquido a analizar
(tambin llamado analito) debe ser un compuesto voltil, como es el caso de los
aceites esenciales; se establece una temperatura constante para el proceso y se
utiliza helio, argn, hidrgeno, o nitrgeno como gas portador. La tcnica ms
comn de anlisis por cromatografa es la cromatografa gas-lquido, su
funcionamiento consiste en movilizar una muestra del compuesto a analizar
mediante la utilizacin de un gas portador a travs de una seccin denominada
columna, en donde se cumple la funcin de separar los componentes qumicos del
compuesto y verificar la afinidad de cada uno con una de dos fases denominadas
fase mvil y fase estacionaria.
Estas fases consisten bsicamente en la exposicin del analito a un elemento
gaseoso (fase mvil) y un elemento lquido (fase estacionaria), durante esta
exposicin las molculas de los componentes del analito sern atradas hacia una
u otra fase, mediante lo cual se consigue realizar la separacin. El siguiente
esquema representa el funcionamiento de un cromatgrafo en su interior.



En la parte izquierda del esquema est ubicado el recipiente contenedor de gas
portador, junto con las vlvulas de regulacin que permiten controlar el flujo con el
que se moviliza el analito. La jeringa y el inyector son los elementos mediante los
cuales se introduce la muestra del compuesto voltil a analizar. En la columna se
encuentran la fase mvil y la estacionaria, donde se realiza la separacin.
Durante la cromatografa se realiza una deteccin del comportamiento de los
componentes. Cada vez que la tendencia de un compuesto se incrementa hacia la
fase mvil o la fase estacionaria se registra este dato, a medida que avanza el
tiempo se presenta una mayor separacin de los compuestos por lo cual se
registran ms datos. A continuacin se expone un diagrama que expone el
comportamiento de un lquido analizado por cromatografa de gases.

Cromatograma tpico en columna capilar DB-1 (60 m) del aceite esencial de la
cscara de mandarina obtenido por arrastre con vapor. En la tabla lateral se
indican los componentes mayoritarios. (Baldoni, 2002)


Tema 3. Normas de calidad para los aceites esenciales

La legislacin que regula la calidad de los aceites esenciales est determinada por
cada pas. Usualmente estas normativas son muy similares entre todos los
aceites, sin embargo en el momento en que se determina el uso de los aceites
esenciales la normativa cambia, debido a las implicaciones que tiene en cada
campo de aplicacin, ya sea farmacutico, cosmtico o alimenticio. La validacin,
el control y la vigilancia de todos los productos de este tipo la hace en Colombia el
INVIMA y la certificacin de calidad depende netamente de ICONTEC.
Para el caso de los usos farmacuticos en Colombia, la normativa de calidad est
regida por las farmacopeas internacionales oficialmente aceptadas, segn lo
establecido en el pargrafo primero del artculo 22 del decreto 677 de 1995, las
cuales son: United States Pharmacopeia (USP), Brittish Pharmacopeia, Codex
Francs, Farmacopea Alemana (DAB), Farmacopea Internacional de la
Organizacin Mundial de la Salud.
En el caso de los productos cosmticos y alimentarios la regulacin est hecha
por las leyes colombianas referentes a estos temas, en donde se establece qu
tipos de aceites esenciales est permitido utilizar y cules son los lmites de
dosificacin para productos terminados.
Las normas internacionales de la ISO, tambin tienen inferencia en el tema de los
aceites esenciales, a continuacin se relaciona un listado de normas involucradas
en la determinacin de parmetros de calidad de los aceites esenciales:
ISO/TR 210:1999 Aceites esenciales - Reglas generales para embalaje,
acondicionamiento y almacenamiento.
ISO 212:2007 Aceites esenciales Muestreo.
ISO 280:1998 Aceites esenciales - Determinacin del ndice de refraccin.
ISO 1279:1996 Aceites esenciales - Determinacin del valor de carbonilo -
mtodos potenciomtricos utilizando cloruro hidroxilamonio.
ISO 1272:2000 Aceites esenciales - Determinacin del contenido de fenoles.
ISO 875:1999 Aceites esenciales - Evaluacin de miscibilidad en etanol.









Referencias

Baldoni, A.L. (2002). Los Recursos Vegetales Aromticos en Latinoamrica.
Buenos Aires, Argentina: CYTED.

Cerpa Chavz, M.G. (2007). Hidrodestilacin de aceites esenciales: modelado y
caracterizacin. Tesis doctoral no publicado, Universidad de Valladolid,
Valladolid, Espaa.

Instituto de Investigacin de Recursos Biolgicos "Alexander von Humboldt".
(2003). Estudio del mercado nacional de aceites esenciales. Bogot:
Universidad Alexander Von Humboldt.

International Organization for Standardization. (2013). Catlogo de Normas.
Consultado el 12 de Marzo de 2013, en
http://www.iso.org/iso/home/store/catalogue_tc/catalogue_tc_browse.htm?com
mid=48956

Orduo Snchez, M.F. (2006). Manual prctico de aceites esenciales, aromas y
perfumes. Alicante: AIYANA.

Stamm, M. D. (1970). Modernos conocimientos sobre la qumica de aceites
esenciales. Madrid: Patronato Alonso de Herrera.



Control del documento
Nombre Cargo Dependencia Fecha
Autor
ngela Viviana
Pez Perilla
Experta tcnica
Centro Agroindustrial
Regional Quindo
Marzo de
2013
Adaptacin
Paola Andrea
Bobadilla
Gutirrez
Guionista -
Lnea de
produccin
Centro Agroindustrial
Regional Quindo
Junio de
2013